專利名稱：一種千層塔提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉一種千層塔提取物及其制備方法。
技術(shù)背景千層塔別名蛇足石杉、山芝、蛇足草，為石杉科石杉屬的一種藥用蕨類植物。在我 國(guó)分布廣泛，民間常將全草用于治療跌打損傷、淤血腫痛、精神分裂等疾病。千層塔植 物成分復(fù)雜，目前國(guó)內(nèi)外研究較多的是其生物堿成分，其中的石杉?jí)A甲是一種高效、低 毒、可逆并高選擇性抑制乙酰膽堿酯酶的藥物，可用于治療重癥肌無力、提高學(xué)習(xí)以及 改善老年人的記憶功能等。有關(guān)千層塔植物中黃酮類物質(zhì)的研究還未見報(bào)道，尤其是層塔植物中黃酮類物質(zhì)與 石杉?jí)A甲配伍使用后的增效減毒作用，我們研究發(fā)現(xiàn)從千層塔中提取的總黃酮具有抗氧 化、抗衰老以及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功能，與石杉?jí)A甲配伍使用，具有增效減毒的作用， 其突出優(yōu)勢(shì)是不但大大提高了石杉?jí)A甲的安全性，而且臨床療效顯著，尤其是治療血管 性癡呆效果更為顯著。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的千層塔提取物，該提取物由總生物堿和總黃酮共同組成，其中總生物堿包 含石杉?jí)A甲，總黃酮包括黃酮和黃酮醇，該提取物中總生物堿的含量以重量表示為 10-90%，總黃酮的含量以重量表示為10-90%。本發(fā)明千層塔提取物其制備方法如下取挑選好干燥的千層塔藥材，粉碎成粗粉，先用稀乙醇回流提取，提取液過濾，濾 渣備用，濾液減壓回收乙醇，藥液繼續(xù)減壓濃縮至稠膏狀，得粗總黃酮，粗總黃酮用去 離子水溶解，過濾，用大孔吸附樹脂柱層析，收集稀乙醇洗脫液，減壓濃縮得稠膏狀， 進(jìn)一步結(jié)晶或純化得總黃酮；將乙醇提取藥渣和濾渣合并干燥，加入適量鹽酸浸泡使其 充分膨脹后，酸解，收集酸解液，減壓濃縮至稀膏狀，自然冷卻，用氨水調(diào)PH，靜置 過濾，收集濾液，濾液用氯仿萃取4-6次，每次約20-30分鐘，收集氯仿萃取液，減壓 回收氯仿后藥液繼續(xù)濃縮成膏狀物，減壓干燥得粗總生物堿，粗總生物堿用硅膠柱層析， 再用氯仿和乙醇按一定比例洗脫，收集相同成分洗脫液，減壓濃縮至稠膏狀，有機(jī)溶劑 充分結(jié)晶，總生物堿。其中大孔吸附樹脂柱為市售的各種型號(hào)包括D101、AB-8、NKA、
DM130、 HZ掘、HP20、 sp207、 SP825等所有市售型號(hào)。本發(fā)明千層塔提取物，可以作為活性成分與藥物載體配制成藥劑學(xué)上的各種制劑， 該制劑包括口服、注射和局部給藥。本發(fā)明千層塔提取物，可以用于制備改善記憶，阻止和治療老年癡呆的藥物。本發(fā)明千層塔提取物測(cè)定方法如下總黃酮含量測(cè)定方法采用分光光度法測(cè)定總黃酮含量，即利用黃酮類化合物與鋁鹽反應(yīng)生成紅色絡(luò)合物，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品在500nm處測(cè)定吸光度?？偵飰A含量測(cè)定方法采用分光光度法測(cè)定總黃酮含量，以石杉?jí)A甲為標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定吸光度。實(shí)施例一 (本發(fā)明提取物的制備方法)取挑選好干燥的千層塔藥材，粉碎成粗粉，先用藥材8倍量的60%的乙醇回流提 取3次，每次6小時(shí)，合并3次提取液，過濾，濾渣備用，濾液減壓回收乙醇，藥液繼 續(xù)減壓濃縮至稠膏狀，得粗總黃酮。粗總黃酮用適量的去離子水溶解，靜置，過濾，濾液按h IO上裝有大孔樹脂的層 析柱，先用去離子水洗脫，再用70%的乙醇洗脫，收集70%的乙醇洗脫液，減壓濃縮 得稠膏狀，得粗總黃酮，總黃酮進(jìn)一步純化得本發(fā)明提取物中的總黃酮。將上述乙醇提取藥渣和濾渣合并揮干，按藥渣量加入10倍量的PH為3的鹽酸浸 泡10小時(shí)，讓其充分膨脹后，在50-6(TC酸解3次，每次50分鐘。收集3次酸解液， 減壓濃縮至稀膏狀，自然冷卻，.用氨水調(diào)PH為9-10，靜置，過濾，收集濾液。濾液用 等體積的氯仿萃取4-6次，每次約20-30分鐘，收集氯仿萃取液，減壓回收氯仿后藥液 繼續(xù)濃縮成膏狀物，減壓干燥得粗總生物堿。粗生物堿按膏藥量的3-5%加200目的層析硅膠拌樣，自然揮干氯仿，上柱，先用 氯仿和乙醇按一定比例洗脫(TLC跟蹤檢驗(yàn))，再用氯仿和乙醇按適當(dāng)比例洗脫(TLC 檢驗(yàn))，收集相同成分洗脫液，減壓濃縮至稠膏狀，加入約3倍量的丙酮攪拌混合均勻 (可重復(fù)3-4次)，充分結(jié)晶，吸取上清夜，抽濾，結(jié)晶品減壓干燥，得總生物堿。
實(shí)施例二 (本發(fā)明提取物的臨床療效觀察)資料與方法病例選擇VD患者，年齡50 80歲，性別不限，符合美國(guó)精神障礙 診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)第4版(DSM-IV)中的癡呆診斷標(biāo)準(zhǔn)和VD診斷標(biāo)準(zhǔn)患者有照料者或 知情者；既往有中風(fēng)史，或根據(jù)體檢、CT或MRI檢查證實(shí)，Hachinski缺血指數(shù)(HIS) 》7分，簡(jiǎn)明智力檢查量表(MMSE)得分為15 24分。排除標(biāo)準(zhǔn)有意識(shí)障礙，譫妄， 癲癇，精神病，重度失語，明顯感覺運(yùn)動(dòng)損害，有神經(jīng)心理測(cè)驗(yàn)證據(jù)的病例均不能入組。 且排除其他能引起記憶、認(rèn)知功能障礙的腦部疾病和系統(tǒng)性疾病，嚴(yán)重心、腎功能不全 者。治療組中男性19例，女性13例，年齡50 79歲，平均60.8士14.8歲。既往有高 血壓病史22例，有糖尿病史15例，有冠心病史10例；對(duì)照組中男20例，女13例， 年齡50 80歲，平均60.4± 12.9歲。既往有高血壓病史21例，有糖尿病史10例，有 冠心病史14例。兩組患者的年齡、性別、文化程度、梗死病灶數(shù)、癡呆病程、癡呆量 表及HIS缺血評(píng)分等方面無顯著性差異(PX)05)，具有可比性。治療方法兩組均予常 規(guī)治療，包括調(diào)整血壓，控制血糖及防治并發(fā)癥。對(duì)照組給予石杉?jí)A甲0.2mg，每日2次口服治療組本發(fā)明提取物壓制成片0.2g (含石杉?jí)A甲O.lmg)，每日2次口服療程均為2個(gè)月，治療期間均不用影響智能的藥物，治療前后均進(jìn)行必要的血常規(guī)、 尿常規(guī)、肝功能、血糖、血脂、心電圖等檢査。療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)①簡(jiǎn)明精神狀態(tài)檢査表MMSE，檢測(cè)患者治療前后的認(rèn)知功能(定 向力、記憶力、計(jì)算力、語言能力、視空間及運(yùn)用能力等)；②評(píng)定治療前后的日常生 活能力(ADL評(píng)分采用Batherel指數(shù)量表)。結(jié)論本研究結(jié)果顯示本發(fā)明提取物組治療前后MMSE、 ADL評(píng)分及血液流變學(xué) 比較均有明顯改善(PO 05)，與對(duì)照組相比兩組治療后有顯著性差異(PO 05)，治療組 優(yōu)于對(duì)照組。本發(fā)明提取物制劑，主要含有總生物堿和總黃酮等化學(xué)成分，我們研究發(fā)現(xiàn)總黃酮 具有擴(kuò)張血管，改善微循環(huán)及細(xì)胞代謝，減少毛細(xì)血管通透性，降低血管阻力，增加腦 血流量和改善腦缺氧，清除自由基，降低血液黏稠度，減少微血栓形成，改善血流動(dòng)力 學(xué)的作用，因此我們認(rèn)為本發(fā)明提取物對(duì)血管性癡呆患者認(rèn)知能力及血液流變學(xué)的改善 有顯著療效，兩者配伍可明顯改善認(rèn)知功能，擴(kuò)張血管，改善微循環(huán)，增加腦血流量和 改善血流動(dòng)力學(xué)，對(duì)血管性癡呆患者的治療和預(yù)防均有較大的臨床意義。
實(shí)施例三(本發(fā)明提取物制劑制備) 1、巴布齊ij制備處方成分重量(g)本發(fā)明提取物0.2聚丙烯酸酯18月桂氮卓酮0.6月桂酸1.8丙二醇5.4乙酸乙酯15按照通常巴布劑的做作進(jìn)行，將上述攪拌均勻，涂布于聚酯防粘層上，60度干燥2 分鐘后，覆蓋聚氨基甲酯膜背襯層，切片即可。2、 粉針劑制備處方成分 重量(g)本發(fā)明提取物 0.05 鹽酸 適量 甘露醇 50按照常規(guī)凍干粉針的操作進(jìn)行，將本發(fā)明提取物加適量鹽酸溶解，加入甘露醇， 定容至1000ml，調(diào)節(jié)PH值至4.0 — 5.5之間，除菌過濾，冷凍干燥即得。3、 片劑制備處方(200片):成分 重量(g)本發(fā)明提取物 0.2乳糖 4.8糊精 10 微晶纖維素 10 硬脂酸鎂 0.2按照常規(guī)片劑的操作方法，以上混合均勻，濕法制粒，最后加入硬脂酸鎂混合均勻 壓制成每片200mg。4、滴丸劑制備處方成分 重量(g)本發(fā)明提取物 O.lg聚乙二醇6000 10g聚乙二醇4000 20g聚山梨酯80 0.3g乙醇 lml制成 1000丸制法將石杉?jí)A甲溶解于乙醇中充分溶解，成為石杉?jí)A甲分散乙醇液，加入已熔融的聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚山梨酯80組成的基質(zhì)中，充分?jǐn)嚢柚辆鶆颍远?甲基硅油為冷卻劑，15。C下滴制成丸，擦丸，干燥，即得。
權(quán)利要求
1、一種千層塔提取物，其特征在于該提取物由總生物堿和總黃酮共同組成，其中總生物堿包含石杉?jí)A甲，總黃酮包括黃酮和黃酮醇。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的千層塔提取物，其特征在于該提取物中總生物堿的含量以重量表 示為10-90%，總黃酮的含量以重量表示為10-90%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的千層塔提取物，其制備方法如下取挑選好干燥的千層塔藥材，粉碎成粗粉，先用稀乙醇回流提取，提取液過濾，濾渣備 用，濾液減壓回收乙醇，藥液繼續(xù)減壓濃縮至稠膏狀，得粗總黃酮，粗總黃酮用去離子水溶 解，過濾，用大孔吸附樹脂柱層析，收集稀乙醇洗脫液，減壓濃縮得稠膏狀，進(jìn)一步結(jié)晶或 純化得總黃酮；將乙醇提取藥渣和濾渣合并干燥，加入適量鹽酸浸泡使其充分膨脹后，酸解， 收集酸解液，減壓濃縮至稀膏狀，自然冷卻，用氨水調(diào)PH，靜置過濾，收集濾液，濾液用氯 仿萃取4-6次，每次約20-30分鐘，收集氯仿萃取液，減壓回收氯仿后藥液繼續(xù)濃縮成膏狀 物，減壓干燥得粗總生物堿，粗總生物堿用層析硅膠層析，再用氯仿和乙醇按一定比例洗脫， 收集相同成分洗脫液，減壓濃縮至稠膏狀，有機(jī)溶劑充分結(jié)晶得總生物堿。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的千層塔提取物，其特征在于該提取物可以作為活性成分與藥物載 體配制成藥劑學(xué)上的各種制劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1一4所述的千層塔提取物，其特征在于該制劑的給藥途徑可以是口服、注 射和局部給藥。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1一5所述的千層塔提取物，其特征在于該提取物可以用于制備改善記憶， 阻止和治療老年癡呆的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種千層塔提取物，該提取物由總生物堿和總黃酮共同組成，其中總生物堿包含石杉?jí)A甲，在提取物中含量以重量表示為10-90％，總黃酮包括黃酮和黃酮醇，在提取物中含量以重量表示為10-90％。
文檔編號(hào)A61P25/28GK101396380SQ20071015205
公開日2009年4月1日 申請(qǐng)日期2007年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月28日
發(fā)明者張文芳, 趙守明 申請(qǐng)人:趙守明;張文芳