專利名稱：：藏茵陳提取物及其制備方法、藥物組合物和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及藏茵陳提取物，具體涉及藏茵陳提取物及其制備方法、藥物組合物和醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)：
：藏茵陳為藏醫(yī)預(yù)防和治療各種肝炎、肝損傷、肝纖維化、脂肪肝等疾病的名貴藥材。植物化學(xué)研究表明，藏茵陳類主要藥材(川西獐牙菜、印度獐牙菜、抱莖獐牙菜和花錨)植物中含有裂環(huán)烯醚辟苦類、黃酮及其香類、口山酮及其苷類、三萜類等多種成分。其中裂環(huán)烯醚辟芬類成分獐牙菜苦香、龍膽苦苷、獐牙菜苷具有保肝降酶、抗炎、促iW損傷恢復(fù)、抗肝纖維化等藥理作用；芒果苷具有保肝利膽、抗腫瘤、利尿作用；異葒草苦具有明顯的保肝作用。目前，藏茵陳類藥材例如川西獐牙菜(5WeW/"mwMO衍.Franch)、印度獐牙菜(5WWac/w'ray/to(Roxb.exFlemi)Karst)、抱莖獐牙菜(5Ww,a々awc/ze"a"a/z.smith)、花4苗(/fa/ew'ae〃z>//caD.Don)等研制、開發(fā)的4元肝炎藥物已有工業(yè)生產(chǎn)。中國專利(92108809.4)公開了一種藏茵陳有效成分的提取工藝、設(shè)備和藏茵陳片劑的生產(chǎn)方法。該工藝以藏茵陳草為原料，乙醇為提取劑，采用了連續(xù)提取、濃縮罐濃縮、敞口鍋濃縮、干燥、粉碎等工序。連續(xù)提取工序中使用的連續(xù)提取設(shè)備的特征是它有兩個提取罐，提取罐通過提取管道連接在一起，提取罐底部設(shè)有加熱室。藏茵陳片劑的生產(chǎn)方法的特征是浸膏粉為45—90%，輔料為10—55%，經(jīng)混合拌勻、混合濕潤、干燥、壓片成型等工序生成產(chǎn)品。該發(fā)明乙醇消耗少，能耗低，可連續(xù)提取。中國專利申請(200310121024.4)公開了一種獐牙菜苦甙注射劑及其制備方法和應(yīng)用。該方法是以龍膽科、玄參科或木犀科植物為原料，采用常規(guī)ii物化學(xué)方法提取、分離、純化，制得獐牙菜苦戒；稱取獐牙菜苦戒和藥用輔料，并加入注射用水，在30°C~60。C下保溫10-20分鐘，冷卻，過濾；濾液在0。C5。C下放置148小時，過濾，灌封或灌封冷凍干燥，滅菌，包裝，即為所需的獐牙菜苦戒注射劑。所述的過濾采用微孔濾膜、超濾膜或者納濾膜。該發(fā)明作為制備治療或預(yù)防病毒性肝炎或化學(xué)藥物損傷性肝炎的藥中的應(yīng)用；作為制備治療或預(yù)防膽嚢炎及胃腸道痙攣引起的疼痛的藥中的應(yīng)用，均具有良好的藥用前景。中國專利(200410022719.1)公開了一種獐牙菜苦苷原料藥制備方法，由以下步驟組成植物藥材粉碎，乙醇冷浸提取，合并提取液，于40。C以下減壓回收乙醇，得浸膏；浸膏溶于IO至15倍水中，調(diào)pH值至4.07.0后上大孔吸附樹脂柱，首先以水為流動相洗脫，然后以低濃度乙醇洗脫，收集有效成分段餾分，于40。C以下減壓回收乙醇，得淡黃色有效成分水溶液；有效成分水溶液用大孔樹脂吸附，用高濃度乙醇洗脫，收集有效成分餾分4殳，于40。C以下減壓回收乙醇至無乙醇止，得小體積有效成分流動狀浸膏；流動狀膏物進(jìn)行反相柱層析，以乙醇或曱醇為流動相，收集40%~80%洗脫部份，于40。C以下減壓回收醇至無醇味，用溶劑替代法得小體積有效成分溶液；冷凍干燥，得白色至淡黃色有效成分4分末。中國專利申請(200410055462〗)公開了一種從獐牙菜屬主要藥用植物中制備抗肝炎活性部位的方法，包括如下步驟(1)4分石爭植物；稱取植物粉末，放入水或親水性有機(jī)溶劑中，植物粉末與溶劑的總量比為1:2-20，在50-100。C下回流提取2-4次，依次遞減溶劑用量，過濾，得合并濃縮液，置室溫或0-4。C冷藏12-48小時，離心或過濾，得澄清提取液；(2)使提取液以0.5-3BV/h的流速緩慢流過大孔吸附樹脂的樹脂柱。(3)用0.5-5倍樹脂體積的水緩慢洗樹脂柱，用10-70%的乙醇或曱醇水溶液以0.5-2BV/h的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，得到抗肝炎活性部位。中國專利申請(200510110396.6)公開了一種川東獐牙菜(5WwtocbW^Franch)中有效成分獐牙菜苦香(Swertiamarin)單體的分離純化方法。該發(fā)明方法以大孔吸附樹脂S-8為預(yù)分離填料，含水乙醇為洗脫劑；再以石圭膠G柱色i普純化，乙酸乙酯-甲醇為洗脫劑解析，層析產(chǎn)品經(jīng)析晶脫色處理，最終冷凍干燥得到98%獐牙菜苦苷純品。該發(fā)明方法與原有傳統(tǒng)工藝相比，采用常規(guī)廉價填料為分離介質(zhì)，優(yōu)化了產(chǎn)品分離純化、脫色與干燥技術(shù)，方法簡便，制備周期短，成本低，單體提取率及產(chǎn)品純度高，可實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。到目前為止，關(guān)于藏茵陳類藥物(包括獐牙菜屬藥用植物)的中國專利才艮道中，CN1634099、CN1704086、CN1966511針對的是獐牙菜屬植物中單一活性成分獐牙菜苦苦的原料和單體制備和制劑(如注射液)。CN1436474是關(guān)于一種復(fù)方藏茵陳茶々欠料配方的專利。CN1156602涉及的是一種以藏茵陳為主藥的復(fù)方成藥的配方及其制劑的專利。CN1070341是關(guān)于藏茵陳有效成分提取工藝設(shè)備和藏茵陳片劑生產(chǎn)方法的專利，該專利中有效成分指的是藏茵陳藥材經(jīng)乙醇連續(xù)提取，濃縮罐濃縮，干燥，粉碎后得到的固形物，即為藏茵陳藥材成分復(fù)雜的粗4是物。專利CN1704086針對的是獐牙菜屬主要藥用植物川西獐牙菜、印度獐牙菜、抱莖獐牙菜等多種獐牙菜屬藥用植物抗肝炎活性部位的制備方法。其制備中采用水或親水性溶劑對藥材4分末提取，提取液濃縮后進(jìn)行大孑L樹脂柱分離，收集10-70%乙醇或曱醇洗脫液濃縮得到活性部位。該活性部位成分復(fù)雜，含有芒果苷、當(dāng)藥黃素、口山酮苷等及龍膽苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、苦龍膽酯苷等裂環(huán)烯醚碎苷成分。專利CN1634520公開了一種以藏茵陳藥材為原料，經(jīng)親水溶劑提取，高速離心除雜，超濾處理，截留分子量小于10000Da的含藥溶液，制成注射用水針或凍干粉針的工藝。該專利公開的工藝制得的針劑是含有多種成分的復(fù)雜混合物，其中已知成分主要有以芒果苷為主的口山酮、以當(dāng)藥黃素為主的黃酮苷、以龍膽苦苷、獐牙菜苦苦、獐牙菜香、苦龍膽酯苷等為主的裂環(huán)烯醚萜苷等。如上所述，目前關(guān)于藏茵陳類藥物(包括獐牙菜屬藥用植物)的中國專利報道的發(fā)明、方法所獲得的藏茵陳類植物的制品都是成分復(fù)雜、成分多數(shù)未知、各成分含量不確定、成分間比例不確定的^R取物。因此，提供一種具有治療療效的、符合制藥要求、成份可表征的藏茵陳提取物，仍是本領(lǐng)域研究者所期望的。發(fā)明的內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種具有治療療效的、符合制藥要求、成份可表征的藏茵陳提取物。本發(fā)明的另一目的是提供一種制備上述藏茵陳提取物的方法。本發(fā)明的再一目的是提供一種包含上述藏茵陳提取物的藥物組合物。本發(fā)明的進(jìn)一步的目的是提供一種上述藏茵陳提取物在制備用于抗肝纖維化的醫(yī)藥中的用途。本發(fā)明所述的藏茵陳可以是指多種藏茵陳類的藥材，優(yōu)選的可以是川西獐牙菜、印度獐牙菜、抱莖獐牙菜和花錨。更優(yōu)選的，本發(fā)明所述的藏茵陳是川西獐牙菜。一方面，本發(fā)明提供的一種具有藥理活性、符合制藥要求、成份可表征的藏茵陳提取物，包含獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、異葒草苷，所述五種成分的質(zhì)量比為(0.040.71):(2040):(1~15):(1.6~26):(0.010.16)。優(yōu)選的，根據(jù)本發(fā)明的上述藏茵陳提取物，其中龍膽苦苷的含量為40-70wt%。更優(yōu)選的，根據(jù)本發(fā)明的上述藏茵陳提取物，其中龍膽苦苦的含量為50-70wt%。進(jìn)一步優(yōu)選的，根據(jù)本發(fā)明的上述藏茵陳提取物，其中龍膽苦苷的含量為50-70wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草香的質(zhì)量比為(0.040.71):(2040):(1~15):(1.626):(0.01-0.16)。本發(fā)明所述的獐牙菜苦苷(Swertiamarin)、龍膽苦苦(Gentiopicrin)、獐牙菜苷(Sweroside)、芒果苷(Mangiferin)、異葒草苷(Isoorientin),它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)分別如下另一方面，本發(fā)明提供的一種制備上述藏茵陳提取物的方法，其包括如下步驟(1)取藏茵陳藥材，4分碎或切^:;(2)用7-15倍量的0-95%乙醇水溶液或丙酮水溶液提取3次，合并3次提取液；(3)將4是取液減壓濃縮；(4)濃縮液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行分配，各種有機(jī)溶劑的分配次lt為4次，每次體積為濃縮液初始體積；(5)減壓濃縮各溶劑分配溶液，得各溶劑分配部位稠膏；(6)將正丁醇分配部位稠膏用適量蒸餾水溶解，加樣于預(yù)處理好的樹脂材料I的大孔樹脂柱上端，吸附4-10小時；(7)用5-20BV蒸餾水以0.5-2BV/h的流速洗脫，再用10-95%的乙醇水溶液以0.5-2BV/h的流速線性梯度洗脫，分段收集洗脫液；(8)合并10-40%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇味；(9)將以上步驟的濃縮液加樣于樹脂材料I1的大孔樹脂柱上端，吸附4-10小時；(10)用3-8BV的蒸餾水以0.5-3BV/h的流速洗脫，再用10-95%乙醇水溶液線性梯度洗脫；(11)收集10-30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮該收集液，干燥，賴"淬即得藏茵陳提取物。其中，上述的BV表示樹脂柱的柱床體積。具體地說，本發(fā)明提供的一種制備上述藏茵陳提取物的方法，其包括如下步驟(1)取藏茵陳藥材，粉碎或切段，用10-15倍量的0-95°/。乙醇水溶液或丙酮水溶液提取三次，合并三次4是取液，減壓濃縮，濃縮液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行分配，各有機(jī)溶劑的分配次數(shù)為4次，每次體積為濃縮液初始體積。減壓濃縮各溶劑分配溶液，回收溶劑，得各溶劑分配部位稠膏；(2)將正丁醇分配部位稠膏用適量蒸餾水溶解，加樣于預(yù)處理好的樹脂材料I的大孔樹脂柱上端，吸附4-10小時后，用5-20BV蒸餾水以0.5-2BV/h的流速洗脫。隨后以0.5-2BV/h的流速線性梯度洗脫，洗脫液為10-95%的乙醇水溶液，分段收集洗脫液，合并10-40%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇味；(3)將步驟(2)中濃縮液進(jìn)行第二次大孑L樹脂柱分離，具體步驟為將濃縮^口樣于樹脂材料II的大孔樹脂柱上端，吸附4-10小時，用蒸餾水以0.5-3BV/h的流速洗脫，洗脫液為3-8BV,用10-95%乙醇水溶液線性梯度洗脫，收集10-30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮該收集液，干燥，4分碎即得淺黃色至淺黃褐色的藏茵陳抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷粉末。本發(fā)明制備藏茵陳提取物的過程中使用的樹脂材料I和/或樹脂材料II可以任意地分別選自S-8、X-5、MG-2、FL-3、DlOl、SA-3、AB-8、HPDIOO、HPD300、HPD400、HPD500、HPD700或HPD800等。本發(fā)明提供的從藏茵陳藥材中提取的具有抗肝纖維化的活性成分組藏茵陳苷，該提f^物的提取工藝顯著特點在于通過該工藝能夠提取藏茵陳5種活性成分總含量可達(dá)到60%以上，優(yōu)選可達(dá)到75%以上，更優(yōu)選可達(dá)到85%提取工藝中應(yīng)用大孔樹脂，、育l有效地出去糖、蛋白質(zhì)、tt酸等雜志，提高活性成分含量。本發(fā)明提供的藏茵陳提取物，其中的抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的HPLC含量測定方法，含量測定方法如下色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長為254nm,理論板數(shù)按龍膽苦苦計算不低于3000。流動相:見表l。_表l藏茵陳提取物HPLC測定流動相_<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>供試品溶液的制備取本品25mg，精密稱定，用曱醇溶解后置于100ml容量瓶中，曱醇定容于刻度，搖勻，即得。對照品溶液的制備取獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和異葒草苷對照品各10mg，精密稱定，加曱醇溶解并定容于50ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得。測定方法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10pl，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，計算，即得。通過以上方法測定本發(fā)明制備的藏茵陳提取物。作為本發(fā)明優(yōu)選的實施方案的藏茵陳提取物，其中包含獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、異葒草香，所述五種成分的質(zhì)量比為(0.040.71):(20~40):(115):(1.626):(0.01~0.16)。作為本發(fā)明更優(yōu)選的實施方案的藏茵陳提取物，其中的含龍膽苦香為40wt°/o-70wt%，優(yōu)選為50wt%-70wt%。以上方法還可以適用于藏茵陳提取物的指紋圖譜的測定。以上方法還可以適用于含有所述藏茵陳提取物的藥物組合物的定量測定。即，所述的藥物組合物中，通過以上的HPLC法測定，獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苦異葒草苷的質(zhì)量比為(0.040.71):(20-40):(1~15):(1.6~26):(0.01~0.16)。再一方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物。具體的，本發(fā)明的藥物組合物，包括治療有效量的如本發(fā)明上述的藏茵陳提取物，和任選的藥學(xué)可接受的載體。在該藥物組合物中，獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比為(0.040.71):(2040):(1~15):(1.6-26):(0.01~0.16)。在本發(fā)明的藥物組合物中，藏茵陳提取物和藥學(xué)可接受的載體的二者比例是可以根據(jù)需要在較大范圍內(nèi)變化，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，作為較好的實施方案，二者的重量比(藏茵陳提取物藥學(xué)可4妻受的載體，w/w)可以為1:99~99:1。在發(fā)明的藥物組合物中，五種苷占組合物的重量百分比可因具體組合物的形式、使用途徑等因素而改變，是可以不必作出限定的，只要能夠提供足量的治療有效量的提取物施用于患者即可。根據(jù)本發(fā)明的上述藥物組合物，其為適用于口服給藥、胃腸外給藥或局部給藥、外用給藥的藥物劑型。根據(jù)本發(fā)明的上述藥物組合物，所述的藥物劑型選自片劑、膠嚢劑、顆粒劑、注射液、注射用粉劑、透皮貼劑、軟膏劑、凝膠劑、栓劑、口服溶液、口服混懸液、注射用乳劑、口服乳劑等、緩釋片劑、控釋片劑等。在一種實施方案中，該藏茵陳提取物-使用藥學(xué)可接受的配方施用于受試者，例如，以藥學(xué)可接受的配方施用于該受試者后，藥學(xué)可接受的配方給個體提供了持續(xù)有效達(dá)至少1小時、2小時、3小時、4小時、6小時、8小時、12小時的藏茵陳提:f又物。本發(fā)明上述的藥物組合物可以適合于局部或經(jīng)口施用于個體。在如以下詳細(xì)描述的實施方案中，本發(fā)明的該藥物組合物可以特別地配制用于以固體或液體形式施用，包括如下適用的(l)經(jīng)口施用，例如，灌服劑(水性或非水性溶液或混懸液)、片劑、大丸劑、散劑、顆粒劑、糊劑；(2)胃腸外施用，例如，通過皮下的、月幾內(nèi)的或靜脈內(nèi)的注射劑，例如，滅菌溶液混懸液；(3)局部應(yīng)用，例如，乳膏劑、軟膏劑用于皮膚的噴霧劑；(4)陰道內(nèi)或直腸內(nèi)，例如，陰道栓劑、乳膏劑或泡沫劑；或者(5)氣霧劑，例如，水性氣霧劑、脂質(zhì)體制劑或含有本發(fā)明藏茵陳提取物活性成分的固體微粒。所述的短語"藥學(xué)可接受的"指的是本發(fā)明藏茵陳提取物、含有該藏茵陳提取物的組合物和/或劑型，它們在可靠的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適用于與人類和動物的組織接觸而沒有過高的毒性、刺激、過敏性應(yīng)答或其它問題或并發(fā)癥，具有適當(dāng)合理的利益/風(fēng)險比。所述的短語"藥學(xué)可接受的載體"包括藥學(xué)可接受的材料、組分或載體，例如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或包膠材料，參與將該藏茵陳提取物活性成分從一個器官或身體的部分運載或運輸至另一器官或身體的部分。在與配方其它成分相容性和對患者無害的意義上說，各載體應(yīng)當(dāng)是"可接受的"。一些可用于藥學(xué)可接受的載體的材料的實例包括(l)糖類，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉類，例如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；(3)纖維素及其衍生物，例如羧曱基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；(4)西黃蓍膠粉；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石粉；(8)賦形劑，例如可可脂和栓劑蠟類；(9)油類，例如花生油、棉子油、紅花油、芝麻油、梯^覽油、玉米油和大豆油；(10)乙二醇類，例如丙二醇；(ll)多元醇類，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯類，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；(15)海藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩沖溶液；和(21)其它非毒性可配伍的用于藥物配方的物質(zhì)。潤濕劑、乳化劑和潤滑劑，例如十二烷^f克酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜"未劑、調(diào)味劑和芳香劑，防腐劑和抗氧劑也可以出現(xiàn)于該組合物中。藥學(xué)可接受的抗氧劑的實例包括(l)水溶性抗氧劑，例如抗壞血酸、鹽酸半胱氨酸、硫酸氫鈉、亞碌u酸鈉、偏重亞好u酸鈉、亞硫酸鈉等；(2)油溶性抗氧劑，例如抗壞血酸棕櫚酸酯、叔丁基對羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基曱苯(BHT)、卵磷脂、丁羥基茴香醚、a-生育酚等；和(3)金屬螯合劑，例如枸櫞酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。含有藏茵陳提取物的組合物包括適合于經(jīng)口、經(jīng)鼻、局部(包括口頰和舌下)、直腸、陰道、氣霧劑和/或胃腸外施用的那些。該組合物可方便地以單位劑型呈現(xiàn)，并且可以通過任何藥學(xué)領(lǐng)域已知的方法制備。適合于經(jīng)口施用的本發(fā)明組合物可以^J交嚢劑、扁膠嚢劑、丸劑、片劑、錠劑(使用香味基質(zhì)，通常為蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠)、散劑、顆粒劑，或為在水或非水性液體中的溶液劑或混懸劑，或為水包油或油包水液體乳劑，或為酏劑或糖漿劑，或為軟錠劑(使用惰性基質(zhì)，例如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或為口腔洗劑等的形式，各自含有預(yù)定量的藏茵陳提取物的活性成分。藏茵陳提取物還可以以大丸劑、藥糖劑或糊劑施用。在本發(fā)明供經(jīng)口施用的固體劑型(膠嚢劑、片劑、丸劑、糖錠劑、散劑、顆粒劑等)中，藏茵陳提取物的活性成分與一種或多種藥學(xué)可接受的載體混合，該載體例如枸櫞酸鈉或磷酸二鈣，和/或如下任意的l)充填劑或增充劑，例如淀粉類、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合劑，例如，羧曱基纖維素、藻酸鹽類、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯膠；(3)保濕劑，例如甘油；(4)崩解劑，例如瓊脂、碳酸4丐、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些珪酸鹽類和碳酸鈉；(》溶解阻滯劑，例如石蠟；(6)吸收促進(jìn)劑，例如季胺類化合物；(7)潤濕劑，例如，乙酰醇(acetylalcohol)和單硬脂酸甘油酯；(8)吸收劑，例如高嶺土和膨潤土；(9)潤滑劑，例如滑石粉、硬脂酸4丐、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇類、十二烷基硫酸鈉及其混合物；和(10)著色劑。對于膠嚢劑、片劑和丸劑，該藥物組合物還可以包括緩沖劑。使用賦形劑使用乳糖以及高分子量聚乙二醇類等，相似類型的固體組分還可以作為充填劑用于軟和硬填充的明膠膠嚢劑。片劑可以任選地與一種或多種助劑通過壓制或沖莫制而制備。壓制片劑可以使用粘合劑(例如，明膠或羥丙基曱基纖維素)、滑潤劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如，淀粉幾乙酸鈉或交聯(lián)羧曱基纖維素鈉)、表面活性或分散劑而制備。模制片劑可以通過在適當(dāng)?shù)臋C(jī)器上將粉末化的用惰性液體稀釋劑潤濕的活性成分的混合物制模而得。本發(fā)明藥物組合物的片劑和其它固體劑型，例如糖錠劑、膠嚢劑、丸劑和顆粒劑可以任選地壓痕，或者以衣層或殼而制備，例如藥物配制領(lǐng)域/>知的腸溶衣或其它衣層。它們還可以配制成提供延緩或控制釋放的活性成分，其中使用例如，以不同比例提供期望的釋》丈才莫式的羥丙基曱基纖維素，其它聚合物基質(zhì)、脂質(zhì)體和/或微球。它們通過例如經(jīng)細(xì)菌截流濾器過濾，或通過將滅菌劑摻入無菌固體組合物中而除菌，該無菌固體組合物可以在使用前溶于無菌水或一些其它無菌可注射的介質(zhì)中。這些組合物還任選地含有遮光劑并且可以是僅僅、或優(yōu)選在胃腸道的某些部位，任選地以延緩的方式釋》文活性成分(類)的組合物。可以使用的包埋組合物的實例包括聚合物質(zhì)和蠟類。如果合適，該活性成分還可以是與一種或多種上述賦形劑的^l交嚢形式。藏茵陳提取物經(jīng)口施用的液體劑型包括藥學(xué)可接受的乳劑、微乳劑、溶液劑、混懸劑、；瞎?jié){劑和酏劑。除該活性成分外，液體劑型可以^^有通常用于本領(lǐng)域的惰性稀釋劑，例如，水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、節(jié)醇、苯曱酸節(jié)酯、丙二醇、1,3-丁烯乙二醇、油類(特別地，棉籽、花生、玉米、胚芽、橄欖、蓖麻和芝眛油)、甘油、四氫呋喃曱醇、聚乙二醇類和脫水山梨醇脂肪酸酯類及其混合物。除了惰性稀釋劑外，經(jīng)口服的組合物可以包括輔助劑例如潤濕劑、乳化劑和混懸劑、甜味劑、調(diào)味劑、著色劑、芳香劑和防腐劑。除了活性藏茵陳提取物外，混懸劑可以含有混懸劑，例如，乙氧基化異硬脂醇類、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯類、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂和西黃蓍膠及其混合物。本發(fā)明供直腸或陰道施用的藥物組合物可以是栓劑，其可以通過將藏茵陳提取物與一種或多種適合的非刺激性的包括例如可可脂、聚乙二醇類、栓劑蠟或水楊酸酯的賦形劑或載體混合而制備，并且該栓劑在室溫下為固體，但在體溫下為液體，并且因此在直腸或陰道腔中會熔化并釋放活性劑。本發(fā)明適合陰道施用的組合物還包括陰道栓劑、棉塞劑、乳膏劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或含有如本領(lǐng)域已知的適合的載體的噴霧配方。藏茵陳提取物的局部或經(jīng)皮施用的劑型包^^t劑、噴霧劑、軟膏劑、糊劑、乳膏劑、洗劑、凝力交劑、溶液劑、貼劑和吸入劑。該活性藏茵陳提取物可以在無菌條件下與藥學(xué)可接受的載體和任何防腐劑、緩沖劑或可能需要的拋射劑混合。除了本發(fā)明的藏茵陳提取物外，軟膏劑、糊劑、乳膏劑和^l交劑可以含有賦形劑，例如動物和植物脂肪類、油類、蠟類、石蠟類、淀粉、西黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇類、硅酮類、膨潤土、硅酸、滑石粉和氧化鋅或其混合物。除了藏茵陳提取物外，散劑和噴霧劑可以含有賦形劑例如乳糖、滑石粉、珪酸、氫氧化鋁、硅酸鉤類和聚酰胺粉，或這些物質(zhì)的混合物。噴霧劑還可以含有常用的拋射劑，例如氯氟碳?xì)浠衔锖蛽]發(fā)性未取代的碳?xì)浠衔?，例如丁夂克和丙火克。藏茵陳提取物可以另選地通過氣霧劑施用。這是通過制M有該藏茵陳^是取物的水性氣霧劑、脂質(zhì)制品或固體顆粒而實現(xiàn)?？梢証吏用非水性(例如石友氟化合物拋射劑)混懸劑。聲波霧化器是優(yōu)選的，因為它們使該藏茵陳提取物曝露于剪切力減至最小，該剪切力可引起藏茵陳提取物中的活性成分降解。通常，水性氣霧劑是通過將該藏茵陳提取物的水性溶液或混懸液與常規(guī)的藥學(xué)可接受的載體和穩(wěn)定劑配制而制備。該載體和穩(wěn)定劑因特定化合物的需要量而改變，但是典型地包括非離子型表面活性劑(吐溫類、普流羅尼克類或聚乙二醇類)、無毒蛋白類如血清白蛋白、脫水山梨酯類、油酸、卵磷脂、氨基酸例如甘氨酸、緩沖劑、鹽類、糖類或糖醇類。氣霧劑通常由等滲溶液制備。透皮貼劑具有向身體提供控制釋放藏茵陳提取物的額外優(yōu)點。該劑型可以通過將該藏茵陳提取物活性成分溶解或M至適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中而制備。還可使用吸收促進(jìn)劑以增加該活性成分穿過皮膚的流量。該流量的速率可以通過提供速率控制膜或者將活性成分^:至聚合物1^質(zhì)或凝膠中而得到控制。眼科配方、眼膏劑、散劑、溶液劑等也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明適合胃腸外施用的藥物組合物包含藏茵陳提取物與一種或多種藥學(xué)可接受的無菌等滲水性或非水性溶液劑、分歉劑、混懸劑或乳劑，或者臨用前可以復(fù)溶于無菌可注射溶液劑或^:劑中的無菌粉末，該藥物組合物可以含有抗氧劑、緩沖劑、抑菌劑、使該配方與意欲接受者的血液等滲的溶質(zhì)或者混懸或增稠劑?？梢杂糜诒景l(fā)明藥物組合物的適合的水性或非水性載體的實例包括水、乙醇、多元醇類(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇類等)及其適合的混合物、植物油類如橄欖油和可注射的有^/L酯類例如油酸乙酯?？梢浴酱舫诌m合的流動性，例如，通過使用包衣材料例如卵磷脂、在分散劑時通過維持需要的粒子徑和通過^f吏用表面活性劑。這些組合物還可以含有輔助劑例如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和^t劑。通過包含各種抗細(xì)菌劑和抗真菌劑可以確保防止微生物的作用。該抗細(xì)菌劑和抗真菌劑例如對鞋基苯曱酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等。還可以需要等滲劑例如糖類、氯化鈉等包含于組合物中。另外，通過包含延緩吸收例如單硬脂酸鋁和明膠的成分，可以使可注射藥物劑型延長吸收。在某些情況下，為了延長藥物的作用，需要減緩從皮下或肌內(nèi)注射的藥物的吸收。這可以通過使用具有弱水溶性的結(jié)晶或無定形材料的液體混懸劑而實現(xiàn)。藥物的吸收速率依賴于其溶解速率，該溶解又依賴于晶體粒度、晶型等?；蛘?，胃腸外施用的藥物劑型的延緩吸收是通過將該藥物溶解或混懸于油性載體中而實現(xiàn)的?？勺⑸涞馁A庫形式是通過在生物可降解聚合物例如聚交酯-聚乙醇酸交酯中將藏茵陳提取物形成微膠嚢基質(zhì)而制備的。依據(jù)藥物與聚合物的比，以及所用特定聚合物的性質(zhì)，可以控制藥物的釋放速率。其它生物可降解聚合物的實例包括聚(原酸酯類)和聚(酐類)。貯庫型可注射配方還可通過將藥物包陷在與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳劑中而制備。當(dāng)藏茵陳提取物作為藥物施用于人或動物時，它們可以以其本身給予，即不加任何的上述藥學(xué)可接受的載體，將本發(fā)明上述的藏茵陳提取物以原形直接施用于患者；或者可以是以含有例如0.199.5%(更優(yōu)選0.590%)的藏茵陳提取物與藥學(xué)可接受的載體組合的藥物組合物給予。不論所選擇的施用途徑，本發(fā)明的可以以適當(dāng)水合的形式使用的藏茵陳提取物和/或藥物組合物，它們是通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)方法而配制成藥學(xué)可接受的劑型。在本發(fā)明藥物組合物中的活性成分，其實際的劑量7]c平和施用的時程可以改變以^f更獲得一種活性成分的量，該量對于特定的患者、組合物和施用方法而言可有效地獲得期望的治療應(yīng)答而對患者無毒性。示例性的劑量范圍內(nèi)是以龍膽苦苷計每日0.120mg/kg體重。本發(fā)明藏茵陳提取物的優(yōu)選劑量是患者可耐受的最大的并且不發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)的量。優(yōu)選地，本發(fā)明的藏茵陳提取物以龍膽苦苷計，每日以約0.5mg~約16.0mg/kg體重，更優(yōu)選約1.0mg約8.0mg//kg體重或更優(yōu)選約1.5mg~約4.0mg/kg體重的濃度施用。上述值的中間范圍也是本發(fā)明的部分。進(jìn)一步的，本發(fā)明提供了一種上述藏茵陳提取物在制備預(yù)防或治療肝纖維化的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明上述制備的藥物，可以直接是本發(fā)明上述提供的藏茵陳提取物，也可以是本發(fā)明的藏茵陳提取物與任選的藥學(xué)可接受的載體經(jīng)制藥工藝加工制成的如上述的藥物組合物。特別地，上述的藥物中包含治療有效量的本發(fā)明上述的藏茵陳提取物。還特別地，上述的藥物中包含的藏茵陳^是取物，其中的獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比為(0.04~0.71):(2040):(1~15):(1.6~26):(0.01~0.16)。本發(fā)明所述的肝纖維化是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一種疾病。所述的肝纖維化是肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生，細(xì)胞外基質(zhì)過度沉積的病理過程，是向肝硬化甚至原發(fā)性肝癌發(fā)展的中間環(huán)節(jié)。同時，肝纖維化也是慢性肝病向肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段，各種原因引起的肝損傷在其發(fā)生發(fā)展的過程中都會經(jīng)歷肝纖維化這個病理過程，肝臟纖維化變時ALT、AST活性，血清HA、LN、PCin和CIV含量及肝勻漿HYP明顯增加(與正常對照組比較差異有顯著性P<0.05)，肉目M見察病變肝組織顏色灰白，質(zhì)較硬，顯微4竟下可見肝組織結(jié)構(gòu)部分破壞，肝細(xì)胞變性壞死，有明顯纖維組織增生。目前，藥理實驗中多采用四氯化碳對大鼠進(jìn)行肝損傷，肝損傷經(jīng)發(fā)展經(jīng)歷肝纖維化，進(jìn)而形成肝硬化，從而造成抗肝纖維化(肝硬化^莫型。本發(fā)明中制得的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)以藏茵陳提取物質(zhì)量計，大鼠以0.05、0.1和0,2g/Kg/天的劑量灌胃給藥，對四氯化碳肝纖維化模型有治療作用，能促進(jìn)四氯化碳大鼠肝纖維化逆轉(zhuǎn)。本發(fā)明中制得的藏茵陳提取物能夠降低病變肝組織羥脯氨酸含量，降低四氯化碳肝纖維化大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性和總膽紅素(T-BILI)含量，明顯降低大鼠血清透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、肝膽酸、III前膠原(PCIII)及IV型膠原(CIV)的含量(與模型組比較差異有顯著性P<0.05)。本發(fā)明制得的藏茵陳提取物中，大劑量(0.2g/Kg)可使肝小葉結(jié)構(gòu)明顯改善，膠原纖維間隔減少，使肝細(xì)胞壞死、炎性細(xì)胞浸潤少見，匯管區(qū)結(jié)締組織增生減輕。本發(fā)明制得的藏茵陳提取物中劑量(0.1g/Kg)灌胃給藥使肝組織羥脯氨酸含量較模型對照組降低70%;低劑量(0.05g/Kg)灌胃給藥使肝組織羥脯氨酸含量，交4莫型對照組降^f氐62%。盡管本發(fā)明提供了詳細(xì)的動物試驗結(jié)果，但是，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識，按照這些動物試驗數(shù)據(jù)，在不付出創(chuàng)造性勞動的基礎(chǔ)上，完全可以推知本發(fā)明的藏茵陳提取物及其組合物在用于人類患者時的劑量、給藥方案等。通過本發(fā)明制得的抗肝纖維化活性成分組藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)中，其中包含的獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比為(0.040.71):(20~40):(1~15):(1.6~26):(0.01~0.16)。優(yōu)選的實施方案中，龍膽苦苷含量40-70wt%。藥理實驗發(fā)現(xiàn)本發(fā)明制得的活性成分組能夠改善肝損傷造成的各項指標(biāo)，促進(jìn)肝纖維化過程的逆轉(zhuǎn)，較好的預(yù)防肝硬化。本發(fā)明提供的抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的活性成分含量測定方法能夠準(zhǔn)確檢測5種活性成分的含量，達(dá)到控制提取物品質(zhì)的目的。圖1為本發(fā)明藏茵陳提取物的HPLC分析的典型色譜圖，其所使用的藏茵陳中藥材為川西獐牙菜。圖l中，川西獐牙菜提取的抗肝炎活性成分組的各種藏茵陳苷中的活性成分分別如下峰號化合物2獐牙菜苦苦(Swertiamarin)3龍膽苦苷(Gentiopicrin)4獐牙菜苦(Sweroside)5芒果苦(Mangiferin)6異葒草苦(Isoorientin)圖2為治療后的大鼠肝臟羥脯氨酸測定結(jié)果。具體實施方式以下參考通過具體實施方式進(jìn)一步說明本發(fā)明。但是，這些實施方式只是為了便于理解本發(fā)明而作說明之用，并非用于限制本發(fā)明。實施例1.川西獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取川西獐牙菜藥材15公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于200升的提取罐中，用95%乙醇150升70。C提取三次(三次共用450升)，提取時間分別為10小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約400升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約IO升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各40升，分別分四次，每次10升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約l.l公斤。將正丁醇部位用5升蒸餾水溶解，上30公斤大孑L樹脂柱(AB-8)進(jìn)行分離，先用500升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用120升的10%,30%,40%，60%，80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并10%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至3升。濃縮液上20公斤大孔樹脂(HPD100)柱進(jìn)行分離，先用200升蒸餾水洗脫，再依次分別用60升的20%,40%,60%，80%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、40。/o乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約600克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苦=53wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.51:28:9:7.5:0.09。實施例2.川西獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取川西獐牙菜藥材l公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于10升的提取罐中，用75。/。乙醇9升70。C提取三次(三次共用27升)，提:f又時間分別為10小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約20升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約0.5升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各2升，分別分四次，每次0.5升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約61克。將正丁醇部位用250毫升蒸餾水溶解，上2.4公斤大孔樹脂柱(HPD100)進(jìn)行分離，先用30升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用8升的15%，30%，40%,60%，80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并15%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至3升。濃縮液上2/>斤大孑L樹脂(AB-8)柱進(jìn)行分離，先用12升蒸餾水洗脫，再依次分別用5升的20%,30%，60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并千燥得到約34克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦香=46wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.6:31:11:16:0.12。實施例3.川西獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取川西獐牙菜藥材2公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于20升的提取罐中，用30%乙醇20升70。C提取三次(三次共用60升)，提取時間分別為8小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約46升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約1升)，濃縮液進(jìn)4于溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各4升，分別分四次，每次l升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約110克。將正丁醇部位用500毫升蒸餾水溶解，上4公斤大孑L樹脂柱(S-8)進(jìn)行分離，先用35升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用10升的10%,25%，40%，60%，80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并10%、25%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至1升。濃縮液上37>斤大孔樹脂(HPD700)柱進(jìn)行分離，先用15升蒸餾水洗脫，再依次分別用9升的20%,30%,60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約73克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳^R取物(含有多種藏茵陳苦)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦香-61wt。/o;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.05:22:3:5.1:0.04。實施例4.抱莖獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取抱莖獐牙菜藥材2公斤，粉碎(過20目篩)，置于20升的提取罐中，用70%乙醇10升75t^是取三次(三次共用30升)，^是取時間分別為8小時，6小時，6小時。合并三次提取液(約22升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約0.5升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各3升，分別分四次，每次0.7升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約98克。將正丁醇部位用400毫升蒸餾水溶解，上3.0公斤大孔樹脂柱(HPD100)進(jìn)行分離，先用38升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用9升的15%,30%,40%,70°/。，80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并15%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至3.5升。濃縮液上2.5公斤大孔樹脂(AB-8)柱進(jìn)行分離，先用14升蒸餾水洗脫，再依次分別用6升的20%,30%,60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并20°/。、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約51克川西獐牙茱抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳香)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苷=50wt°/。；獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苦的質(zhì)量比=0.59:29:13:21:0.14。實施例5.抱莖獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取抱莖獐牙菜藥材2公斤，粉碎(過20目篩)，置于20升的提取罐中，用50%乙醇10升80。C提取三次(三次共用30升)，^是取時間分別為8小時，6小時，6小時。合并三次提取液(約22升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約0.5升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各3升，分別分四次，每次0.7升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約115克。將正丁醇部位用400毫升蒸餾水溶解，上3.0公斤大孔樹脂柱(S-8)進(jìn)行分離，先用38升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用9升的15%，20%,30%,60°/。，80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并15%、20%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至3.5升。濃縮液上2.5公斤大孔樹脂(D101)柱進(jìn)行分離，先用14升蒸餾水洗脫,再依次分別用6升的10°/。，30%,60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并10%、30°/。乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約63克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果^口下龍膽苦苷二42.2wt。/。；獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.65:35:14:22:0.15。實施例6.印度獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取印度獐牙菜藥材10公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于100升的提取罐中，用95。/。乙醇80升70。C提取三次(三次共用240升)，提取時間分別為IO小時，6小時，6小時。合并三次提取液(約200升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約5升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各20升，分別分四次，每次5升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約600克。將正丁醇部位用3000毫升蒸餾水溶解，上30公斤大孔樹脂柱(X-5)進(jìn)行分離，先用250升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用90升的15%，25%,40%,60%,80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并15%、25°/。、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至5升。濃縮液上20公斤大孔樹脂(HPD300)柱進(jìn)行分離，先用200升蒸餾水洗脫，再依次分別用70升的10%，30%，60%,80。/。的乙醇水溶液洗脫，合并10%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約320克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苦)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苦=49.5wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.57:30:12:14:0,1。實施例7.印度獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取印度獐牙菜藥材IO公斤，粉碎(過20目篩)，置于100升的提取罐中，用85%乙醇90升70。C提取三次(三次共用270升)，提取時間分別為8小時，6小時，6小時。合并三次提取液(約220升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約6升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各24升，分別分四次，每次6升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約640克。將正丁醇部位用3500毫升蒸餾水溶解，上30公斤大孔樹脂柱(？1^3)進(jìn)行分離，先用240升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用90升的15%,30%，40%,60%,80%和95。/。的乙醇水溶液洗脫，合并15%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至5升。濃縮液上25公斤大孔樹脂(HPD300)柱進(jìn)行分離，先用200升蒸餾水洗脫，再依次分別用80升的30%，50%，60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約300克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苷=47.0wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.58:29:12:13:0.11。實施例8.花錨抗肝纖維化活性成分組藏茵陳普的制備工藝取花錨藥材2公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于20升的提取罐中，用75%乙醇15升70。C提取三次(三次共用45升)，提取時間分別為10小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約35升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約0.8升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各3.2升，分別分四次，每次0.8升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約190克。將正丁醇部位用800毫升蒸餾水溶解，上4公斤大孔樹脂柱(HPD100)進(jìn)行分離，先用50升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用12升的10°/。，30%,50%,60%,80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并10%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至2升。濃縮液上3公斤大孔樹脂(D101)柱進(jìn)行分離，先用30升蒸餾水洗脫，再依次分別用8升的20%,30%，50%，80%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30°/。乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約110克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苷=54.0wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.51:26:11:15:0.08。實施例9.花錨抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取花錨藥材2公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于20升的提取罐中，用50%乙醇15升70。C提取三次(三次共用45升)，提取時間分別為10小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約35升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約0.8升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各3.2升，分別分四次，每次0.8升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約190克。將正丁醇部位用800毫升蒸鎦水溶解，上4公斤大孔樹脂柱(HPD100)進(jìn)行分離，先用50升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用12升的10%,30%,40%，60%,80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并10%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至2升。濃縮液上37>斤大孔樹脂(DIOI)柱進(jìn)行分離，先用30升蒸餾水洗脫，再依次分別用8升的20°/。，30%,60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約80克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳^^取物(含有多種藏茵陳苦)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苷=52.0wt°/0;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.55:30:13:17:0.09。實施例10.抱莖獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取抱莖獐牙菜藥材4公斤，粉碎(過20目篩)，置于40升的提取罐中，用95%乙醇30升75。C提取三次(三次共用90升)，提取時間分別為8小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約78升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約l.O升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各5升，分別分四次，每次1.25升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約188克。將正丁醇部位用700毫升蒸餾水溶解，上5.0公斤大孑L樹脂柱(HPD300)進(jìn)行分離，先用55升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用16升的10%，30°/。，40°/。，70°/。，80°/。和95%的乙醇水溶液洗脫，合并10%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至3.5升。濃縮液上3.5公斤大孔樹脂(HPD-100)柱進(jìn)行分離，先用24升蒸餾水洗脫，再依次分別用9升的15%,30%，60%，80%的乙醇水溶液洗脫，合并15%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約78克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦香=70.3wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苦獐牙菜普芒果苷異葒草芬的質(zhì)量比=0.04:40:1:1.6:0.01實施例11.印度獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取印度獐牙菜藥材IO公斤，粉碎(過20目篩)，置于IOO升的提取罐中，用50。/。乙醇90升70。C提取三次(三次共用270升)，提取時間分別為10小時，8小時，8小時。合并三次提取液(約210升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約5.5升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各22升，分別分四次，每次5.5升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約920克。將正丁醇部位用3600毫升蒸鎦水溶解，上30公斤大孔樹脂柱(X-5)進(jìn)行分離，先用240升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用90升的20%，30%,40%，60%,80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至5升。濃縮液上25公斤大孔樹脂(HPD100)柱進(jìn)行分離，先用200升蒸餾水洗脫，再依次分別用80升的20%,30%,60%,80%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約525克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳香)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苦=40.0wt%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苦的質(zhì)量比=0.71:20:15:26:0.5。實施例12.花錨抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝取花錨藥材2公斤，切段(約1.5-2.5厘米)，置于20升的提取罐中，用80%乙醇15升70。C提取三次(三次共用45升)，4是取時間分別為7小時，5小時，5小時。合并三次提取液(約37升)，用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至原來體積的四十分之一(約0.8升)，濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各3.2升，分別分四次，每次0.8升進(jìn)行溶劑分配。分別回收溶劑，得正丁醇部位約160克。將正丁醇部位用800毫升蒸餾水溶解，上4公斤大孔樹脂柱(HPD300)進(jìn)行分離，先用50升蒸餾水洗脫，隨后依次分別用12升的20%，30%,40%，60%，80%和95%的乙醇水溶液洗脫，合并20%、30%、40%乙醇水溶液洗脫液，濃縮至2升。濃縮液上37>斤大孔樹脂(DIOI)柱進(jìn)行分離，先用30升蒸餾水洗脫，再依次分別用8升的30%,40%，60%，80%的乙醇水溶液洗脫，合并30°/。、乙醇水溶液洗脫液，濃縮并干燥得到約92克川西獐牙菜抗肝炎活性成分組的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苷-55.0wt。/o;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.3:35:8:12:0.25。實施例13.川西獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝(l)取川西獐牙菜藥材l公斤，粉碎，置于提取罐中；(2)用7倍量的水在70。C下提取三次，每次提取10小時，合并三次提取液；(3)用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至約0.5升；(4)濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各2升，分別分四次，每次0.5升進(jìn)行溶劑分配；(5)減壓濃縮各溶劑分配溶液，得各溶劑分配部位稠膏；(6)將正丁醇分配部位稠膏用約250毫升蒸餾水溶解，加樣于預(yù)處理好的2.5公斤的AB-8的大孑L樹脂柱上端，吸附4小時；(7)用5BV蒸餾水以0.5BV/h的流速洗脫，再用10-95%的乙醇7jc溶液以0.5BV/h的流速線性梯度洗脫，分段收集洗脫液；(8)合并10-40%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇p未(約3升)；(9)將以上步驟的濃縮液加樣于2公斤的HPD100的大孔樹脂柱上端，吸附4小時；(10)用3BV的蒸鎦水以0.5BV/h的流速洗脫，再用10-95%乙醇水溶液線性梯度洗脫；(11)收集10-30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮該收集液，干燥，并分碎即得藏茵陳提取物。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苦=40.7^%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.71:20:15:26:0.08。實施例14.川西獐牙菜抗肝纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝(1)取川西獐牙菜藥材l公斤，粉碎，置于提取罐中；(2)用IO倍量的30。/。丙酮/水在7(TC下提取三次，每次提取10小時，合并三次提取液；(3)用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至約0.5升；(4)濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各2升，分別分四次，每次0.5升進(jìn)行溶劑分配；(5)減壓濃縮各溶劑分配溶液，得各溶劑分配部位稠膏；(6)將正丁醇分配部位稠膏用約250毫升蒸餾水溶解，加樣于預(yù)處理好的2.5公斤的HPD100的大孔樹脂柱上端，吸附4小時；(7)用5BV蒸餾水以0.5BV/h的流速洗脫，再用10-95%的乙醇水溶液以0.5BV/h的流速線性梯度洗脫，分段收集洗脫液；(8)合并10-40%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇味(約3升)；(9)將以上步驟的濃縮液加樣于2公斤的AB-8的大孑L樹脂柱上端，吸附4小時；(10)用3BV的蒸餾水以0.5BV/h的流速洗脫，再用10-95%乙醇水溶液線性梯度洗脫；(11)收集10-30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮該收集液，干燥，4分碎即得藏茵陳提取物。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果龍膽苦普-55.5wt。/o;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.04:30:1:1.6:0.01。纖維化活性成分組藏茵陳苷的制備工藝(1)取川西獐牙菜藥材l公斤，粉碎，置于提取罐中；(2)用IO倍量的95%丙酮/水在70"下提取三次，每次提取10小時，合并三次提耳又液；(3)用大型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至約0.5升；(4)濃縮液進(jìn)行溶劑分配，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇各2升，分別分四次，每次0.5升進(jìn)行溶劑分配；(5)減壓濃縮各溶劑分配溶液，得各溶劑分配部位稠膏；(6)將正丁醇分配部位稠膏用約250毫升蒸餾水溶解，加樣于預(yù)處理好的2.5公斤的HPD100的大孑L樹脂柱上端，吸附4小時；(7)用5BV蒸餾水以0.5BV/h的流速洗脫，再用10-95%的乙醇水溶液以0.5BV/h的流速線性梯度洗脫，分4史收集洗脫液；(8)合并10-40%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇味(約3升)；(9)將以上步驟的濃縮液加樣于2公斤的HPD100的大孑L樹脂柱上端，吸附4小時；(10)用3BV的蒸餾水以0.5BV/h的流速洗脫，再用10-95%乙醇水溶液線性梯度洗脫；(11)收集10-30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮該收集液，干燥，粉碎即得藏茵陳提取物。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物，結(jié)果如下龍膽苦苷=70.1^%;獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.35:40:8:13:0.16。制劑例1、藏茵陳提取物的片劑制備制備方法將實施例1的藏茵陳提取物與淀粉混合均勻后，加入20%淀粉漿制成軟料，過14目篩制粒，在50-60。C下干燥，過12目整粒，加硬脂酸鎂混合后，處方:組分實施例1的藏茵陳提取物淀粉20%淀4分漿硬脂酸鎂處方量100g薦g50g4g壓制成2000片，即得。每片含有藏茵陳提取物50mg，每片相當(dāng)于含有龍膽苦苦26.5mg。采用本發(fā)明前述的HPLC方法測定本實施例制備的藏茵陳提取物的藥物組合物，結(jié)果如下獐牙菜苦苷龍膽苦苷獐牙菜苷芒果苷異葒草苷的質(zhì)量比=0.51:28:9:7.5:0.09。制劑例2、藏茵陳提取物的口服溶液制備處方組分處方量實施例1的藏茵陳提取物100g蜂蜜1000g山梨酸0.2g蒸餾水加至10L制備方法將實施例1的藏茵陳提取物100g溶于8L熱蒸餾水中，再緩緩加入蜂蜜，同時不斷攪拌，使溶液均勻，加入山梨酸0,2g,補加水至10L,過濾冷確，灌裝滅菌即得，每瓶灌裝10ml。制備的口服液含藏茵陳提取物10mg/ml，相當(dāng)于含龍膽苦香5.3mg/ml。制劑例3、藏茵陳4^取物的滴丸劑型制備處方組分處方量實施例1的藏茵陳提取物100g聚乙二醇6000250g制備方法將聚乙二醇6000熔融后加入藏茵陳提取物粉末并混合均勻，80。C以下保溫，用內(nèi)徑為2.1mm,外徑為3.3mm滴管，以100-120滴/分鐘滴速滴入曱基珪油中，收集滴丸，用濾紙吸出冷卻液，每丸重2.7~3.0mg。制備的滴丸每克相當(dāng)于含藏茵陳"R取物0.286g。制劑例4、藏茵陳提取物的顆粒劑制備處方<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>蔗糖670g糊精280g30%乙醇40ml制備方法向藏茵陳提取物50g與670g蔗糖和280g糊精的混合物中噴入30%乙醇40ml，混合均勻，壓過1620目的篩，制成顆粒，烘干，整粒，分裝為200袋。每袋重5g，按藏茵陳苷提取物計，每袋為0.25g。制劑例5、藏茵陳提取物的膠嚢劑制備處方組分處方量實施例1的藏茵陳提取物lOOg淀粉400g硬脂酸鎂8g制備方法將提取物與淀粉混合均勻后，在50-60。C下干燥，加硬脂酸鎂混合后，分裝成2000粒，即得。每粒含有藏茵陳提取物50mg。制劑例6、藏茵陳提取物的注射液制備處方組分處方量實施例1的藏茵陳提取物100g乙二胺四乙酸二鈉0.6g注射用水，適量，加至10000ml制備方法ioog藏茵陳提:f又物和o.6g乙二胺四乙酸二鈉溶解，加注射用水適量，攪拌溶解，再加注射用水至10000ml。調(diào)節(jié)pH值為6.0-7.0，用0.22pm微孔濾膜過濾至澄清，在充氮下以每支2ml灌裝到2ml安瓿瓶中，封口，在115。C下熱壓滅菌25分鐘，即得。每支含有藏茵陳提取物20mg。實驗例l、藏茵陳提一取物治療肝纖維化的藥效試驗試驗方法采用四氯化碳對試驗用大鼠(SD大鼠，青海地方病研究所提供)造肝損傷模型，每組12只大鼠，確認(rèn)肝纖維化模型成立后，再以不同劑量的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)對才莫型大鼠進(jìn)行恢復(fù)性治療，同時采用聯(lián)苯雙酯(有效治療肝炎、肝纖維化的國家批準(zhǔn)藥物，北京協(xié)和藥廠產(chǎn))，作為陽性對照藥對模型大鼠進(jìn)行治療。聯(lián)苯雙酯配置成0.45mg/ml的水溶液，以0.5ml/100g大鼠/天的劑量灌胃給藥，給藥的天數(shù)同藏茵陳提取物的給藥天數(shù)。采用實施例1制備的藏茵陳提取物，給藥劑量以提取物計，高劑量0.2g/kg大鼠/天(相當(dāng)于龍膽苦苷106mg/kg/天)，低劑量0.05g/kg大鼠/天(相當(dāng)于龍膽苦苷26.5mg/kg/天)，給藥時間為8周。從肝纖維化造模前后和不同給藥劑量大鼠的體重、肝組織羥脯氨酸含量、血液5項指標(biāo)對藏茵陳提取物的藥效學(xué)進(jìn)行了評價，結(jié)果分別見表2至表4。表2、治療期間試驗動物的體重(g)<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>表3、直接造沖莫治療給藥后(30天)血液情況指標(biāo)測試<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>表4、直接造才莫治療給藥后(30天)羥脯氨酸測試<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>以上數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的方法制備的含有固定比例的多種藏茵陳苦的藏茵陳提取物對四氯化碳造成的肝纖維化有明顯的逆轉(zhuǎn)和治療作用。大鼠體重明顯恢復(fù)，接近正常值；肝組織羥脯氨酸含量明顯較模型組下降、藥效好于陽性對照藥聯(lián)苯雙酯；血液5項不同程度地恢復(fù)，其測定值接近正常(空白)值，低劑量時治療效果較高劑量好，藥效好于陽性對照藥聯(lián)苯雙酯。實驗例2、藏茵陳提取物治療肝纖維化的藥效試驗試驗方法采用四氯化碳對試驗用大鼠(SD大鼠，青海地方病研究所提供)造肝損傷模型，每組12只大鼠，確認(rèn)肝纖維化模型成立后，再以不同劑量的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)對模型大鼠進(jìn)行恢復(fù)性治療，同時采用聯(lián)苯雙酯(有效治療肝炎、肝纖維化的國家批準(zhǔn)藥物，北京協(xié)和藥廠生產(chǎn))，作為陽性對照藥對才莫型大鼠進(jìn)行治療。狹苯雙酯配置成0.50mg/ml的水溶液，以0.5ml/100g大鼠/天的劑量灌胃給藥，給藥的天數(shù)同藏茵陳提取物的給藥天數(shù)。采用實施例1制備的藏茵陳提取物，給藥劑量以提取物計，高劑量0.2g/kg大鼠/天(相當(dāng)于龍膽苦苷106mg/kg/天)，低劑量0.05g/kg大鼠/天(相當(dāng)于龍膽苦苷26.5mg/kg/天)，給藥時間為8周。從肝纖維化造模前后和不同給藥劑量肝組織羥脯氨酸含量、肝組織5項、轉(zhuǎn)氨酶16項為指標(biāo)對藏茵陳提取物的藥效學(xué)進(jìn)行了評價，結(jié)果分別見表5至表7。表5、直接造才莫治療給藥后(30天)肝臟情況指標(biāo)測試<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>#P〈0.05;##P〈0.01與空白比;%P<0.05;°/。0/0P<0.01與模型比；+P<0.05與陽性比專交表6、直接造模治療給藥后(30天)羥脯氨酸測試<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>表7、直接造模實驗(30天)轉(zhuǎn)氨酶數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表7(續(xù))、直接造模實驗(30天)轉(zhuǎn)氨酶數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表7(續(xù))、直接造模實驗(30天)轉(zhuǎn)氨酶數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>#P<0.05;##P<0.01與空白比;***P<0.001;**P<0.01;*P<0.05與J氐劑量比%P〈0.05與才莫型比；+P<0.05與陽性比較—P〈0.05;——P〈0.01與中劑量比較以上數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的方法制備的含有固定比例的多種藏茵陳苷的藏茵陳提取物對四氯化碳造成的肝纖維化有明顯的逆轉(zhuǎn)和治療作用。大鼠肝組織羥脯氨S吏含量明顯較模型組下降、藥效好于陽性對照藥聯(lián)苯雙酯；肝組織5項不同程度地恢復(fù)，其測定值接近正常(空白)值，低劑量時治療效果較高劑量好，藥效好于陽性對照藥聯(lián)苯雙酯；肝功16項中谷丙轉(zhuǎn)氨酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶給藥后明顯轉(zhuǎn)陰，效果接近或好于陽性對照藥；其余肝功14項指標(biāo)也都有不同程度的恢復(fù)并接近正常值。實驗例3、藏茵陳提取物治療肝纖維化的藥效試驗試驗方法采用四氯化碳對試驗用大鼠(SD大鼠，青海地方病研究所提供)造肝損傷模型，每組10只大鼠，確認(rèn)肝纖維化模型成立后，再以不同劑量的藏茵陳提取物(含有多種藏茵陳苷)對才莫型大鼠進(jìn)行恢復(fù)性治療，同時采用聯(lián)苯雙酯(有效治療肝炎、肝纖維化的國家批準(zhǔn)藥物，北京協(xié)和藥廠生產(chǎn))，作為陽性對照藥對4莫型大鼠進(jìn)行治療。聯(lián)苯雙酯配置成0.4mg/ml的水溶液，以0.5ml/100g大鼠/天的劑量灌胃給藥，給藥的天數(shù)同藏茵陳提取物的給藥天數(shù)。采用實施例1制備的藏茵陳提取物，給藥劑量以提取物計，高劑量0.2g/kg大鼠/天(相當(dāng)于龍膽苦苷106mg/kg/天)，低劑量0.05g/kg大鼠/天(相當(dāng)于龍膽苦苷26.5mg/kg/天)，給藥時間為8周。從肝纖維化造模前后和不同給藥劑量大鼠肝組織羥脯氨酸含量、血液和肝組織5項等為指標(biāo)對藏茵陳提取物的藥效學(xué)進(jìn)行了評價，結(jié)果分別見表8至表10。表8、直接造模治療給藥后(30天)血液情況指標(biāo)測試<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>#P<0.05;##P〈0.01與空白比;%P<0.05;%%P<0.01與模型比；+P〈0.05與陽性比較表IO、直接造模治療給藥后(30天)羥脯氨酸測試組別ng/g高劑量組低劑量組陽性組模型組空白組羥脯氨酸736.2±159.7671.9±112.8"**990.7±274.7#1177.5±289.7**512.6±64.3與空白比氺P〈0.05;**P<0.01;與才莫型H:并P〈0.05;##P<0.01以上數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的方法制備的含有固定比例的多種藏茵陳苷的藏茵陳提^f又物對四氯化碳造成的肝纖維化有明顯的逆轉(zhuǎn)和治療作用。大鼠肝組織羥脯氨酸含量明顯較模型組下降、藥效好于陽性對照藥聯(lián)苯雙酯；血液和肝組織肝纖維化5項不同程度地恢復(fù)，其測定值接近正常(空白)值，低劑量時治療效果較高劑量好，藥效好于陽性對照藥聯(lián)苯雙酯。權(quán)利要求1、一種藏茵陳提取物，包含獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、異葒草苷，所述五種成分的質(zhì)量比為(0.04～0.71)(20～40)(1～15)(1.6～26)(0.01～0.16)。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藏茵陳提取物，其中龍膽苦苷的含量為40-70wt%。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藏茵陳提取物，其中龍膽苦香的含量為50-70wt%。4、一種制備權(quán)利要求13任意一項所述的藏茵陳提取物的方法，其包括如下步驟(1)取藏茵陳藥材，粉碎或切段；(2)用7-15倍量的0-95%的乙醇或丙酮的水溶液4是取3次，合并3次提取液；(3)將提取液減壓濃縮；(4)濃縮液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行分配，各種有機(jī)溶劑的分配次數(shù)為4次，每次體積為濃縮液初始體積；(5)減壓濃縮各溶劑分配溶液，得各溶劑分配部位稠膏；(6)將正丁醇分配部位稠膏用適量蒸餾水溶解，加樣于預(yù)處理好的樹脂材料I的大孔樹脂柱上端，吸附4-10小時；(7)用5-20BV蒸餾水以0.5-2BV/h的流速洗脫，再用10-95%的乙醇水溶液以0.5-2BV/h的流速線性梯度洗脫，分段收集洗脫液；(8)合并10-40%乙醇水溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇p未；(9)將以上步驟的濃縮液加樣于樹脂材料II的大孔樹脂柱上端，吸附4-10小時；(10)用3-8BV的蒸餾水以0.5-3BV/h的流速洗脫，再用10-95%乙醇水溶液線性梯度洗脫；(11)收集10-30%乙醇水溶液洗脫液，濃縮該收集液，干燥，粉碎即得藏茵陳提取物。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所使用的樹脂材料I和/或樹脂材料II分別選自S-8、X畫5、MG-2、FL-3、D101、SA-3、AB-8、HPD100、HPD300、HPD400、HPD500、HPD700或HPD,。6、一種藥物組合物，包括治療有效量的權(quán)利要求13任意一項所述的藏茵陳提取物，和任選的藥學(xué)可接受的載體。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其為選自下列的藥物劑型片劑、膠嚢劑、顆粒劑、注射液、注射用粉劑、透皮貼劑、軟膏劑、凝膠劑、栓劑、口服溶液、口服混懸液、注射用乳劑、口服乳劑等、緩釋片劑、控釋片劑。8、權(quán)利要求13任意一項所述的藏茵陳提取物在制備預(yù)防或治療肝纖維化的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供了一種藏茵陳提取物，包含獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、異葒草苷，所述五種成分的質(zhì)量比為(0.04～0.71)∶(20～40)∶(1～15)∶(1.6～26)∶(0.01～0.16)。本發(fā)明還提供了該藏茵陳提取物的制備方法、包含該藏茵陳提取物的藥物組合物及該藏茵陳提取物的醫(yī)藥用途。本發(fā)明的藏茵陳提取物能夠改善肝損傷造成的各項指標(biāo)，促進(jìn)肝纖維化過程的逆轉(zhuǎn)，較好的預(yù)防肝硬化。文檔編號A61K9/00GK101396428SQ20071016309公開日2009年4月1日申請日期2007年9月30日優(yōu)先權(quán)日2007年9月30日發(fā)明者杜玉枝,肖遠(yuǎn)燦,鄒小艷,魏立新申請人:中國科學(xué)院西北高原生物研究所;東格爾藥業(yè)有限公司