專利名稱：蔥子提取物及制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蔥子提取物及其制備方法，以及該蔥子提取物在制備防治心肌缺血性心血管疾病藥物或食品中的用途。

背景技術(shù)：
心肌缺血是發(fā)病率較高的一類心血管疾病，發(fā)作時(shí)，患者感覺心前區(qū)劇烈陣發(fā)性悶痛或絞痛；當(dāng)反復(fù)發(fā)作及再灌注發(fā)生時(shí)還會(huì)引起心肌細(xì)胞的損傷和心臟功能的紊亂，主要表現(xiàn)為心律失常、血管損傷甚至血液滯留、心肌功能喪失、加速缺血致?lián)p傷心肌細(xì)胞的壞死、心肌細(xì)胞水腫等。我國(guó)每年死于心腦血管疾病患者達(dá)300多萬(wàn)，而幸存下來(lái)的患者之中，75％不同程度的喪失勞動(dòng)能力，4％重殘，極大地影響了生活質(zhì)量。
國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究表明，蔥屬植物中含有黃酮，甾體皂苷，硫化物，生物堿，脂肪酸等成分，主要用于抗菌及抗真菌，抗腫瘤，抗血小板聚集，抗氧化等。近幾年來(lái)，對(duì)蔥的研究主要集中在其全草的心血管藥理作用方面，據(jù)報(bào)道蔥粗提物對(duì)雄性SD大鼠具有顯著的抗凝血作用(The Journal Of Nutrition，2000；130(1)34-37)；有學(xué)者考察了蔥提取物對(duì)細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]及血小板內(nèi)核苷酸水平的影響(Life Sciences，2000；66(17)1571-1579)；另有實(shí)驗(yàn)證明蔥提取物可以通過(guò)內(nèi)皮依賴或非依賴方式調(diào)整血管緊張度(Journal Of Cardiovascular Pharmacology，1999；33(4)515-520)；還有人考察了大蔥對(duì)于高血壓的形成及自氧化的作用(Bioscience，Biotechnology，And Biochemistry，2005；69(7)1311-1317)。
蔥子(Semen Allii Fistulosi)是百合科蔥屬植物蔥(Allium fistulosum L.)的干燥成熟種子，具有補(bǔ)中益精，明目散風(fēng)的功效，用于腎虛，目眩，風(fēng)寒感冒等癥，在全國(guó)各地廣泛栽培，資源豐富。
目前尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道有關(guān)蔥子提取物及其在防治心肌缺血性心血管疾病方面的用途。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種防治心肌缺血的有效部位，即蔥子的提取物及其制備方法，以及該蔥子提取物在制備防治心肌缺血性心血管疾病藥物或食品中的用途。
本發(fā)明的一種蔥子提取物，是通過(guò)以下制備方法制得的蔥子干燥藥材粉碎后，以純水加熱提取2-5次，合并提取液，濃縮后離心，棄去沉淀，取上清液進(jìn)行大孔樹脂吸附，以蒸餾水淋洗除去雜質(zhì)，再用15％-65％含水乙醇溶液進(jìn)行洗脫，合并洗脫液，濃縮干燥后即得蔥子提取物。
本發(fā)明的一種蔥子提取物的制備方法是蔥子干燥藥材粉碎后，以純水加熱提取2-5次，合并提取液，濃縮后離心，棄去沉淀，取上清液進(jìn)行大孔樹脂吸附，以蒸餾水淋洗除去雜質(zhì)，再用15％-65％含水乙醇溶液進(jìn)行洗脫，合并洗脫液，濃縮干燥后即得蔥子提取物。
本發(fā)明還通過(guò)如下實(shí)驗(yàn)證明了蔥子提取物在制備防治心肌缺血性心血管疾病藥物或食品中的用途 1.采用麻醉犬冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎造成心肌梗塞模型，觀察蔥子提取物灌胃給藥的治療作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，蔥子提取物15、45、90mg/kg灌胃給藥可顯著降低犬冠脈結(jié)扎后心肌缺血的程度，縮小心肌缺血的范圍；與生理鹽水對(duì)照組比較，蔥子提取物可顯著減小梗塞范圍；2.觀察蔥子提取物灌胃給藥對(duì)SD大鼠缺血再灌注所致心肌損傷的影響。結(jié)扎SD大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支，制成急性缺血模型，缺血同時(shí)灌胃給予蔥子提取物，缺血30min再灌注30min，發(fā)現(xiàn)蔥子提取物低、中、高劑量組血清肌酸激酶、乳酸脫氫酶活性，心肌梗塞區(qū)與心臟重量比例明顯低于模型組；結(jié)果表明蔥子提取物灌胃給藥對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，可明顯縮小心肌梗塞范圍；3.觀察蔥子提取物灌胃給藥對(duì)麻醉犬心肌耗氧量的影響，同時(shí)觀察平均動(dòng)脈壓、主動(dòng)脈流量、冠脈流量。結(jié)果顯示蔥子提取物15、45、90mg/kg灌胃后心肌耗氧量變化與同時(shí)間點(diǎn)生理鹽水組相比顯著下降；心肌氧攝取率明顯降低，冠脈流量增加，冠脈阻力降低，作用強(qiáng)度與劑量有一定的關(guān)系?？梢?，本發(fā)明的蔥子提取物對(duì)心肌缺血性心血管疾病具有防治作用。



圖1 蔥子提取物對(duì)犬冠脈結(jié)扎心外膜電圖ST段總和(∑ST)的影響 圖2 蔥子提取物對(duì)犬冠脈結(jié)扎心肌梗塞范圍(N-ST)的影響 圖3 蔥子提取物對(duì)犬心肌耗氧量(mL/min·100g-1)的影響 圖4 蔥子提取物對(duì)犬心肌氧攝取率(％)的影響 圖5 蔥子提取物對(duì)犬冠脈流量(mL/min)的影響 圖6 蔥子提取物對(duì)犬冠脈阻力(Kpa/mL/min)的影響 圖7 蔥子提取物對(duì)犬心輸出量(L/min)的影響 圖8 蔥子提取物對(duì)總外周阻力(TPR，dyn·s·cm-5)的影響(

n＝5)
具體實(shí)施例方式 下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明的實(shí)施并不僅限于此。
實(shí)施例1蔥子提取物的制備 10公斤蔥子干燥藥材粉碎后，投入提取罐，以50升純水在90-100℃煮提三次，每次提取時(shí)間為1小時(shí)，合并三次提取液，濃縮至20升，離心后過(guò)濾，棄去沉淀，上清液用蒸餾水調(diào)節(jié)至50升。緩緩?fù)ㄟ^(guò)裝有6公斤聚苯乙烯多孔性吸附大孔樹脂的吸附柱，用80升蒸餾水淋洗除去雜質(zhì)；再用50升50％含水乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，進(jìn)一步干燥并粉碎，得黃色粉末狀的蔥子提取物0.09公斤，按生藥量記得率為0.9％。
實(shí)施例2蔥子提取物對(duì)犬急性心肌缺血的治療作用 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)麻醉犬灌胃給予不同劑量的蔥子提取物，觀察其對(duì)急性心肌缺血的改善和治療作用。
1材料與方法 1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雜種犬(第二軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物飼養(yǎng)合格證號(hào)SCXK(滬)2002-0006；性別雄雌兼用；體重9～14kg；每組5條；動(dòng)物總數(shù)25條) 1.2給藥方法 給藥方式灌胃給藥 給藥劑量犬低、中、高劑量分別為15mg/kg(相當(dāng)于原生藥1.9g/kg)，45mg/kg和90mg/kg；陽(yáng)性對(duì)照杏靈顆粒，為300mg/kg(相當(dāng)于銀杏酮酯15mg/kg)；生理鹽水按2mL/kg灌胃給藥 給藥次數(shù)單次給藥 1.3試驗(yàn)方法 參照相關(guān)文獻(xiàn)(西藥新藥研究指南(藥學(xué)，藥理學(xué)，毒理學(xué))，1993；藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，第二版，1991804-807，830-832，921-922，924-926，1022-1023；新藥與臨床，1994；13(3)140-143)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)犬急性心肌缺血模型采用Harris兩步結(jié)扎法，而后灌胃給藥，陰性對(duì)照組給生理鹽水。在心臟表面連接30點(diǎn)心外膜電極，經(jīng)多導(dǎo)轉(zhuǎn)換開關(guān)連至Powerlab system 8s生理記錄儀，記錄30點(diǎn)心外膜電圖。計(jì)算規(guī)定的不同時(shí)間點(diǎn)心外膜電圖ST段升高的導(dǎo)聯(lián)數(shù)(NST)和ST段升高值的總和(∑ST)為指標(biāo)觀察給藥前后的變化，以了解心肌缺血的程度與范圍。
冠脈結(jié)扎前及給藥后3小時(shí)各取右心室血3mL，取血清測(cè)乳酸脫氫酶(LDH)、血清肌酸激酶(CK)。在UV751GD型紫外/可見光分光光度計(jì)上進(jìn)行比較。給藥3小時(shí)后取心臟，染色。梗死區(qū)不著色，非梗死區(qū)著暗藍(lán)色，剪去著色部分，將未著色的梗死區(qū)稱重。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用

表示，用SPSS 10.0軟件進(jìn)行方差分析，檢驗(yàn)差異的顯著性 2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2.1對(duì)心肌缺血程度(心外膜電圖∑ST)的影響 冠脈結(jié)扎后15min生理鹽水組心外膜電圖ST段總和(∑ST)升高，30min時(shí)∑ST升高達(dá)221mv，此后緩慢回落；蔥子提取物低劑量組(15mg/kg)從15min起可顯著減輕心肌缺血程度，作用可持續(xù)至60min；在90、120min和180min后與生理鹽水組比較無(wú)顯著性差異；蔥子提取物中、高劑量組(45、90mg/kg)灌胃給藥后能劑量依賴性地減輕心肌缺血程度，∑ST顯著下降(P＜0.01)，作用從給藥15min持續(xù)至180min。陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒組在給藥后15min至60min，∑ST下降與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較差異顯著(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，圖1。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蔥子提取物15-90mg/kg灌胃給藥能顯著降低心肌缺血后心外電圖ST段總和(∑ST)升高，即降低犬冠脈結(jié)扎引起的急性心肌缺血程度，并且作用迅速，各劑量組在15min內(nèi)即起效，蔥子提取物低劑量組結(jié)果與陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒相當(dāng)。
2.2蔥子提取物對(duì)心肌缺血范圍(心外膜電圖N-ST)的影響 蔥子提取物低劑量組(15mg/kg)30min N-ST值降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較差異非常顯著(P＜0.01)，作用可持續(xù)至60min(P＜0.05)；中劑量組(45mg/kg)N-ST值降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較，在15、90min差異顯著(P＜0.05)，30、60min差異非常顯著(P＜0.01)；高劑量組(90mg/kg)能縮小心肌缺血范圍，降低N-ST值，作用可持續(xù)180min，30min至180min N-ST值降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較，有非常顯著差異(P＜0.01)。陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒組在給藥后30、60min時(shí)N-ST值降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較差異非常顯著(P＜0.01)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2、圖2。
2.3蔥子提取物對(duì)心肌梗塞范圍影響的定量組織學(xué)檢測(cè) 用定量組織學(xué)檢測(cè)心肌梗塞范圍即用N-BT染色，結(jié)果顯示蔥子提取物對(duì)心肌梗塞范圍的影響與心外膜電圖測(cè)定的結(jié)果一致。蔥子提取物15~90mg/kg灌胃給藥能劑量依賴性地減少心肌梗塞范圍。蔥子提取物低、中、高劑量組(15、45、90mg/kg)梗塞區(qū)/左心室的比值與生理鹽水組比較下降非常顯著(P＜0.01)；蔥子提取物中、高劑量組(45、90mg/kg)梗塞區(qū)/全心的比值與生理鹽水組比較下降非常顯著(P＜0.01)，低劑量組(15mg/kg)梗塞區(qū)/全心的比值與生理鹽水組比較下降顯著(P＜0.05)。其中高劑量組(90mg/kg)梗塞區(qū)/全心的比值和梗塞區(qū)/左心室的比值分別由生理鹽水組的14.01±3.76％，24.90±3.54％下降到8.20±1.54％，13.07±2.25％。陽(yáng)性對(duì)照組杏靈顆粒組能顯著地縮小心肌梗塞范圍，梗塞區(qū)/左心室的比值和梗塞區(qū)/全心的比值與生理鹽水組比較下降均非常顯著(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。
2.4蔥子提取物對(duì)冠脈結(jié)扎后血清生化指標(biāo)的影響 冠狀動(dòng)脈結(jié)扎后各組血清LDH、CK均升高，其中生理鹽水組LDH、CK可分別由256.88±47.81、155.42±19.33上升到730.36±120.93、484.08±33.08(IU/L)。蔥子提取物低、中、高劑量組(15、45、90mg/kg)及陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒組均能非常顯著的降低血清乳酸脫氫酶(LDH)的升高程度(P＜0.01)；蔥子提取物中、高劑量組(45、90mg/kg)及陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒組均能非常顯著的降低血清肌酸激酶(CK)的升高程度(P＜0.01)，低劑量組(15mg/kg)顯著降低血清CK的升高程度(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。
表1 蔥子提取物對(duì)犬冠脈結(jié)扎心外膜電圖ST段總和(∑ST)的影響(mV，

n＝5只/組)
*P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 表2蔥子提取物對(duì)犬冠脈結(jié)扎心肌梗塞范圍(N-ST)的影響(點(diǎn)數(shù)，

n＝5只/組)
*P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)的改變值比較 表3蔥子提取物對(duì)N-BT染色測(cè)定心肌梗塞范圍的影響

n＝5只/組) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 表4蔥子提取物對(duì)冠脈結(jié)扎動(dòng)脈血清生化指標(biāo)的影響

n＝5只/組) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 3結(jié)論 實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，蔥子提取物灌胃給藥能顯著降低冠脈結(jié)扎犬的心肌缺血程度，縮小心肌缺血范圍，作用強(qiáng)度與劑量有一定的關(guān)系，定量組織學(xué)檢測(cè)與心外膜電圖測(cè)定的結(jié)果一致，與生理鹽水對(duì)照組比較，梗塞區(qū)顯著縮小，證明蔥子提取物灌胃給藥對(duì)犬冠狀動(dòng)脈結(jié)扎引起的心肌梗塞有明顯的治療作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明，蔥子提取物能顯著降低犬冠脈結(jié)扎后血清肌酸激酶及乳酸脫氫酶升高的程度；提示其可減少急性缺血心肌細(xì)胞CK、LDH的溢出，減輕心肌缺血時(shí)的細(xì)胞損害，對(duì)心肌細(xì)胞有保護(hù)作用。蔥子提取物灌胃給藥對(duì)急性心肌缺血有保護(hù)作用，可減輕心肌缺血程度和范圍，保護(hù)缺血心肌細(xì)胞。
實(shí)施例3蔥子提取物對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給大鼠灌胃給予不同劑量的蔥子提取物，觀察其對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
1材料與方法 1.1試驗(yàn)動(dòng)物 Sprague-Dawley大鼠(中國(guó)科學(xué)院上海分院動(dòng)物中心提供；動(dòng)物合格證號(hào)SCXK(滬)2002-0010；等級(jí)清潔級(jí)，合格證號(hào)醫(yī)動(dòng)字第02-64號(hào)；體重250-300g；性別雌性；每組10只；總數(shù)60只) 1.2給藥方法 給藥方式灌胃給藥 給藥劑量大鼠低低、中、高劑量分別為50mg/kg，150mg/kg和300mg/kg。陽(yáng)性藥劑量為900mg/kg(相當(dāng)于銀杏酮酯45mg/kg) 給藥次數(shù)均單次給藥 1.3試驗(yàn)方法 雄性SD大鼠，各組灌胃給藥后立即結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支造成心肌缺血，缺血30min后剪斷結(jié)扎線，使前降支再灌注30min。
再灌注結(jié)束后，股動(dòng)脈取血，紫外分光法測(cè)定血清乳酸脫氫酶(LDH)、血清肌酸激酶(CK)活性。給藥后60分鐘取心臟，染色。梗死區(qū)不著色，非梗死區(qū)著暗藍(lán)色，剪去著色部分，將未著色的梗死區(qū)稱重。
各組數(shù)據(jù)以

表示，用SPSS 10.0軟件進(jìn)行方差分析，進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。
2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 心肌缺血再灌注后，血清LDH、CK活性明顯增加，心肌梗塞區(qū)重量明顯增加，與假手術(shù)對(duì)照組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)；蔥子提取物各劑量組血清LDH、CK活性，心肌梗塞區(qū)與心臟重量百分比明顯低于模型組。其中蔥子提取物各劑量組(50、150、300mg/kg)血清LDH降低與模型組比較差異具有非常顯著意義(P＜0.01)；血清CK活性降低與模型組比較差異具有顯著意義(P＜0.05)。蔥子提取物中、高劑量組(150、300mg/kg)心肌梗塞區(qū)與心臟重量百分比降低與模型組比較差異非常顯著(P＜0.01)；低劑量組(50mg/kg)心肌梗塞區(qū)與心臟重量百分比降低與模型組比較差異顯著(P＜0.05)。其中高劑量組梗塞區(qū)與心臟重量比例由生理鹽水對(duì)照組的31.09±4.52％下降到23.09±3.67。杏靈顆粒組與蔥子提取物給藥組相似，血清LDH、CK活性、心肌梗塞區(qū)重量明顯降低，與模型組比較有顯著差異(P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01)。見表5。
表5 蔥子提取物對(duì)心臟缺血再灌注損傷大鼠的影響

n＝10) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 △△P＜0.01與假手術(shù)組比較 3結(jié)論 蔥子提取物灌胃給藥對(duì)缺血再灌注所致SD大鼠心肌損傷有保護(hù)作用，可明顯抑制缺血再灌注所致大鼠心肌損傷時(shí)LDH、CK溢出，降低血清LDH、CK活性，可明顯縮小心肌梗塞范圍，并有一定的量效關(guān)系。與實(shí)驗(yàn)劑量的杏靈顆粒比較，中劑量蔥子提取物的效果與杏靈顆粒相似。
實(shí)施例4蔥子提取物對(duì)麻醉犬心肌耗氧量的影響 1材料與方法 1.1試驗(yàn)動(dòng)物 健康雜種犬(第二軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物飼養(yǎng)合格證號(hào)SCXK(滬)2002-0006；性別雄雌兼用；體重10～14kg；每組5條；動(dòng)物總數(shù)25條) 1.2給藥方法 給藥方式灌胃給藥 給藥劑量蔥子提取物低、中、高劑量分別為15mg/kg，45 mg/kg和90mg/kg。陽(yáng)性對(duì)照杏靈顆粒為300mg/kg(相當(dāng)于銀杏酮酯15mg/kg) 給藥次數(shù)均單次給藥 1.3試驗(yàn)方法 分離麻醉犬左側(cè)股動(dòng)脈，向心插入導(dǎo)管，用于監(jiān)測(cè)記錄外周血壓(BP)；分離右側(cè)股動(dòng)脈，備動(dòng)脈血?dú)夥治?。游離升主動(dòng)脈根部和左冠狀動(dòng)脈前降支上部，分別放置適宜內(nèi)徑的電磁流量計(jì)探頭測(cè)定記錄主動(dòng)脈流量(心輸出量)和冠脈流量。分離右側(cè)頸靜脈，插入心導(dǎo)管。同步抽取冠狀竇及股動(dòng)脈血標(biāo)本(0.5％肝素抗凝)，用血?dú)夥治鰞x測(cè)定p02，pH，動(dòng)脈和靜脈血氧含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)將心臟稱重，并以墨水逆流灌注于電磁流量計(jì)測(cè)量部位以下區(qū)域，切下染黑區(qū)并稱重，用于計(jì)算心肌耗氧量。公式為 (1)、心肌耗氧量(ml/min/100g)＝冠脈血流量mL/min/100g×(動(dòng)脈血氧mL％-冠狀竇血氧mL％) (2)、心肌氧攝取率(％)＝(動(dòng)脈血氧mL％-冠狀竇血氧mL％)/動(dòng)脈血氧mL％ (3)、體循環(huán)總外周阻力(TPR，dyn·s·cm-5)＝平均動(dòng)脈壓[MAP(KPa)]×80/心輸出量[CO(L/min)](＝平均動(dòng)脈壓[MAP(mmHg)]×10.6/心輸出量[CO(L/min)]) (4)、冠脈阻力(Kpa/mL/min)＝平均血壓/冠脈流量試驗(yàn)結(jié)果以

表示，用SPSS 10.0軟件進(jìn)行方差分析，作差異顯著性檢驗(yàn) 2實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2.1對(duì)犬心肌耗氧量的影響 蔥子提取物低、中、高劑量組(15、45、90mg/kg)灌胃后心肌耗氧量同生理鹽水組相比有所下降，其中低劑量組(15mg/kg)在60min時(shí)降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較差異顯著(P＜0.05)；中劑量組(45mg/kg)在15、30、120min時(shí)與生理鹽水組相比差異顯著(P＜0.05)，60、90min差異非常顯著(P＜0.01)；高劑量組各時(shí)間點(diǎn)心肌耗氧量變化率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比差異非常顯著(P＜0.01)；杏靈顆?？娠@著降低心肌耗氧量，在30-90min時(shí)耗氧量降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比，差異顯著(P＜0.05)。結(jié)果見表6，圖3。
2.2對(duì)犬心肌氧攝取率的影響 蔥子提取物灌胃后可顯著降低心肌氧攝取率。降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比，低劑量組(15mg/kg)在30、60min時(shí)差異顯著(P＜0.05)；中劑量組從15至90min差異非常顯著(P＜0.01)，120min時(shí)仍有效(P＜0.05)；高劑量組(90mg/kg)從15min至180 min時(shí)各點(diǎn)降低氧攝取率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比，差異非常顯著(P＜0.01)。陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆?？娠@著降低心肌氧攝取率，降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比30min至90min時(shí)各時(shí)間點(diǎn)差異非常顯著(P＜0.01)。結(jié)果見表7，圖4。
2.3對(duì)犬冠脈流量和冠脈阻力的影響 蔥子提取物中、高劑量組可增加冠脈流量；增加率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比，中劑量組(15mg/kg)從15min與生理鹽水組差異顯著(P＜0.05)，作用持續(xù)至90min(P＜0.01)；高劑量組(90mg/kg)從30min至180min差異均非常顯著(P＜0.01)。陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒組也可明顯增加冠脈流量，在30min至90min時(shí)冠脈流量比給藥前增加率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比，差異非常顯著(P＜0.01)。結(jié)果見表8，圖5。
蔥子提取物中、高劑量組(45、90mg/kg)可降低冠脈阻力，降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比，中劑量組(45mg/kg)在30、60、90min差異非常顯著(P＜0.01)；高劑量組(90mg/kg)分別在30、60、90min差異非常顯著(P＜0.01)，120、180min時(shí)差異顯著(P＜0.05)；陽(yáng)性對(duì)照藥杏靈顆粒組也可明顯降低冠脈阻力，在30、60、90min時(shí)冠脈阻力降低率與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)相比差異非常顯著(P＜0.01)。結(jié)果見表9、圖6。
2.4對(duì)犬心輸出量和總外周阻力的影響 蔥子提取物各劑量組(15、45、90mg/kg)、杏靈顆粒及生理鹽水組對(duì)犬心輸出量無(wú)明顯影響(P＞0.05)，蔥子提取物高劑量組(90mg/kg)、杏靈顆粒組可略降低總外周阻力，但變化率與生理鹽水組比較無(wú)顯著性差異。結(jié)果見表10、圖7、圖8。
3結(jié)論 蔥子提取物可明顯增加麻醉犬冠脈流量，明顯降低冠脈阻力、明顯降低冠心肌氧攝取率，顯著降低心肌耗氧量，對(duì)心輸出量、總外周阻力均無(wú)明顯影響。
由上可見，蔥子提取物可明顯減輕模型動(dòng)物心肌缺血的程度，減小梗死范圍；對(duì)缺血再灌注損傷亦有保護(hù)作用，可明顯縮小心肌梗塞范圍。因此，本發(fā)明的蔥子提取物對(duì)心肌缺血性心血管疾病具有防治作用。
表6蔥子提取物對(duì)犬心肌耗氧量(mL/min·100g-1)的影響

n＝5) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 表7 蔥子提取物對(duì)犬心肌氧攝取率(％)的影響

n＝5) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 表8蔥子提取物對(duì)犬冠脈流量(mL/min)的影響

n＝5) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 表9蔥子提取物對(duì)犬冠脈阻力(Kpa/mL/min)的影響

n＝5) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較 表10蔥子提取物對(duì)犬心輸出量(CO，L/min)的影響

n＝5) *P＜0.05，**P＜0.01與生理鹽水組比較
權(quán)利要求
1.一種蔥子提取物，是通過(guò)以下制備方法制得的蔥子干燥藥材粉碎后，以純水加熱提取2-5次，合并提取液，濃縮后離心，棄去沉淀，取上清液進(jìn)行大孔樹脂吸附，以蒸餾水淋洗除去雜質(zhì)，再用15％-65％含水乙醇溶液進(jìn)行洗脫，合并洗脫液，濃縮干燥后即得蔥子提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蔥子提取物，是通過(guò)以下制備方法制得的10公斤蔥子干燥藥材粉碎后，投入提取罐，以50升純水在90-100℃煮提三次，每次提取時(shí)間為1小時(shí)，合并三次提取液，濃縮至20升，離心后過(guò)濾，棄去沉淀，上清液用蒸餾水調(diào)節(jié)至50升，緩緩?fù)ㄟ^(guò)裝有6公斤聚苯乙烯多孔性吸附大孔樹脂的吸附柱，用80升蒸餾水淋洗除去雜質(zhì)；再用50升50％含水乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，進(jìn)一步干燥并粉碎，得黃色粉末狀的蔥子提取物。
3.一種蔥子提取物的制備方法，步聚如下蔥子干燥藥材粉碎后，以純水加熱提取2-5次，合并提取液，濃縮后離心，棄去沉淀，取上清液進(jìn)行大孔樹脂吸附，以蒸餾水淋洗除去雜質(zhì)，再用15％-65％含水乙醇溶液進(jìn)行洗脫，合并洗脫液，濃縮干燥后即得蔥子提取物。
4.如權(quán)利要求1所述的蔥子提取物在制備防治心肌缺血性心血管疾病藥物或食品中的用途。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蔥子提取物及其制備方法，以及該蔥子提取物在制備防治心肌缺血性心血管疾病藥物或食品中的用途。近幾年來(lái)，對(duì)蔥的研究主要集中在其全草的心血管藥理作用方面。本發(fā)明的目的在于提供一種防治心肌缺血的有效部位，即蔥子的提取物，是將蔥子藥材用純水熱提得提取液，采用大孔吸附樹脂分離，精制得蔥子提取物。經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，蔥子提取物可明顯減輕模型動(dòng)物心肌缺血的程度，減小梗死范圍；對(duì)缺血再灌注損傷亦有保護(hù)作用，可明顯縮小心肌梗塞范圍。因此，本發(fā)明的蔥子提取物對(duì)心肌缺血性心血管疾病具有防治作用。
文檔編號(hào)A61K36/88GK101181581SQ200710171720
公開日2008年5月21日 申請(qǐng)日期2007年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月4日
發(fā)明者孫連娜, 陳萬(wàn)生, 威 來(lái), 彥 邱, 陽(yáng) 楊 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)