專利名稱：：二氫人參皂苷Rg₂的制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種新型的人參三醇皂苷類化合物——二氫人參皂苷Rg2及其制備方法和用途。技術(shù)背景人參為五加科多年生草本植物,入藥部份主要為人參的根和須，現(xiàn)在也有將人參葉和人參花蕾作藥用的。在我國(guó)以人參作為中藥應(yīng)用于中醫(yī)臨床已有上千年的歷史，依據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論，其功效主要為大補(bǔ)元?dú)?，補(bǔ)益脾肺，安神益智，生津止渴。人參中包括的主要成分有人參皂苷、人參多糖、人參醇、揮發(fā)油、低分子肽、氨基酸、維生素、有機(jī)酸和多種微量元素。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)也證明，人參除了能滋補(bǔ)強(qiáng)身外，在防腫瘤、抗衰老、抗心律失常、抑制細(xì)胞凋亡、降糖降脂、改善學(xué)習(xí)記憶、增強(qiáng)性功能和免疫功能方面均具有一定的療效。根據(jù)皂苷元的母核結(jié)構(gòu)不同，人參皂苷類化合物可分為達(dá)瑪烷型皂苷和齊墩果酸型皂苷兩大類。其中達(dá)瑪烷型又可分為原人參二醇型和原人參三醇型兩類。人參皂苷Rg2(GinsenosideRg2)，分子式C42H72013。屬于達(dá)瑪烷型人參皂苷。人參皂苷Rg2對(duì)心腦血管方面有較強(qiáng)的藥理作用，但因人參皂苷Rg2天然來(lái)源有限，難以滿足臨床需求，尤其口服制劑所需量更大。因此需要合成高活性人參皂苷Rg2衍生物。人參皂苷Rg2在側(cè)鏈具有不飽和鍵(雙鍵)，對(duì)其側(cè)鏈末端雙鍵的氫化尚未有文章報(bào)道。該化合物是否具有比人參皂苷Rg2更強(qiáng)的活性，甚至新的活性，對(duì)于人參的深入研究具有很高的參考價(jià)值。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種新型的人參三醇皂苷類化合物一一二氫人參皂苷Rg2及其制備方法；本發(fā)明另一目的在于提供該化合物的用途。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種新型的人參三醇皂苷類化合物一一二氫人參皂苷R&的特征如下分子式C42H74013分子量786.5理化性質(zhì)該化合物為無(wú)定型白色粉末，易溶于甲醇、乙酸乙酯，不溶于氯仿；UV無(wú)吸收，分子結(jié)構(gòu)中無(wú)不飽和雙鍵；20(S)-二氫人參皂苷Rg2的m.p.為248.1248.2°C;20(R)-二氫人參皂苷Rg2的m.p,為259.1259.2。C;結(jié)構(gòu)式為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>20(R)-二氫人參皂苷Rg2。上述化合物或其混合物的制備方法如下稱取原料人參皂苷Rg2400-600重量份，置40-80體積份圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳80-120重量份，將氫氣持續(xù)通入溶液底部;室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2350-550重量份。本發(fā)明還提供單一構(gòu)型(20S或20R)二氫人參皂苷Rg2的制備方法如下按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2350-550重量份，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為60-80:25-35的甲醇-水；4000-12000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2,分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(S)-二氫人參皂苷Rg280-120重量份、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2170-230重量份。所述的原料人參皂苷Rg2為五加科人參屬人參中所獲得的人參皂苷Rg2;上述甲醇可以用低級(jí)垸醇或是不影響氫化反應(yīng)的其他溶劑代替，乙醇、異丙醇、丁醇、戊醇中的一種或多種。上述鈀碳可以用雷尼鎳、鈷、鉑中的一種或多種代替。上述化合物的制備方法優(yōu)選如下-稱取原料人參皂苷Rg2500重量份，置50體積份圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳100重量份，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2450重量份。本發(fā)明還提供單一構(gòu)型(20S或20R)二氫人參皂苷Rg2的制備方法優(yōu)選如下按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2450重量份，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為70-30:25-35的甲醇-水；10000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2，分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(S)-二氫人參皂苷Rg2100重量份、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2200重量份。上述重量份和體積份的關(guān)系為mg/ml。本發(fā)明的二氫人參皂苷Rg2可直接與相應(yīng)藥物載體或其他醫(yī)用載體結(jié)合制成各種制劑來(lái)進(jìn)行應(yīng)用，例如注射劑，如粉針劑和溶液注射劑等；片劑，如糖衣片、薄膜衣片等；膠囊劑，如普通膠囊或微型膠囊；氣霧劑；栓劑，如肛門栓、陰道栓等；口粘膜貼劑；口嚼片；糖漿劑、口服液；霜?jiǎng)?，雪花膏，面膜等。本發(fā)明的二氫人參皂苷Rg2也可制成含二氫人參皂苷Rg2的藥物，含二氫人參皂苷Rg2的藥物是指任何一種構(gòu)型或混合構(gòu)型的二氫人參皂苷Rg2與一種或多種醫(yī)藥上可接受的載體/輔料制成的或者與任何一種或多種中藥或西藥制成的注射劑、膠囊、片劑、氣霧劑、口服液、貼劑、栓劑，微囊和微球等。所述載體/輔料是指淀粉，滑石粉，糖,矯味劑,可溶性淀粉，糊精類，乙醇，聚乙二醇，丙二醇，植物油，明膠，以及吐溫等其它表面活性劑；還包括稀釋劑、賦形劑如水等；填充劑如淀粉、蔗糖等；粘合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮；濕潤(rùn)劑如甘油;崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進(jìn)劑如季銨化合物；表面活性劑如十六烷醇；吸附載體如高嶺土和皂粘土；潤(rùn)滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣和鎂和聚乙二醇等。本發(fā)明所制備的二氫人參皂苷Rg2組合物具有預(yù)防或治療微循環(huán)障礙相關(guān)疾病的作用，將應(yīng)用于預(yù)防或治療微循環(huán)障礙等相關(guān)疾病，也用于護(hù)膚等外用制劑或化妝品領(lǐng)域。生物活性比較試驗(yàn)表明，二氫人參皂苷Rg2能明顯改善由高分子右旋糖苷所致的大鼠軟腦膜微循環(huán)障礙；也可明顯改善腎上腺素所致小鼠耳廓微循環(huán)，且其作用強(qiáng)度提高(4倍以上)；另比較試驗(yàn)表明，二氫人參皂苷Rg2明顯擴(kuò)張正常小鼠耳廓微動(dòng)脈、微靜脈管徑、增加血流速度和網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)，與人參皂苷Rg2比較，強(qiáng)度明顯提高，約5倍以上。圖1化合物1和2的液相圖譜圖2化合物1的高分辨質(zhì)譜圖3化合物2的高分辨質(zhì)譜下述實(shí)驗(yàn)用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)施例1二氫人參皂苷Rg2制備方法實(shí)驗(yàn)儀器和試劑Varian400MHzFT-醒SpectrometerI,a400:Silicagel60F254(Merck););0DS填料(4360^m)(FUJISILYSIACHEMICALLTD.);Agelient1100HPLC，MicroT0Fdetecter(BrukerDaltonics)，AlltimaC185//mcolumn(Alltech);LC-MS流動(dòng)相甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。Pd/C。方法稱取人參皂苷Rg2500mg，，置50ml圓底燒瓶中，加甲醇適量，使溶解，加入鈀碳100mg，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得20(S，R)二氫人參皂苷Rg2450mg，產(chǎn)率90%,再用c_18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相甲醇-水(70:30:)，分別收集20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液并回收溶媒，減壓干燥，分別得到化合物l即20(S)-二氫人參皂苷Rg2)100mg、化合物2即20(R)-二氫人參皂苷Rg2200mg。試驗(yàn)結(jié)果及結(jié)構(gòu)鑒定液相圖譜(圖l)顯示人參皂苷Rg2的氫化反應(yīng)處理后得到的2個(gè)化合物，化合物1和化合物2的高分辨質(zhì)譜如圖2、3所示。化合物1的結(jié)構(gòu)鑒定-化合物l為無(wú)定型白色粉末，m.p.248.1248.2。C.易溶于甲醇、乙酸乙酯，不溶于氯仿。質(zhì)譜中由分子離子峰m/z:C42H73013[M-H]—785.5068,得該化合物的分子式為C42H74013(m/z:[M-H]—(:4晶3013計(jì)算值為785.5051),UV無(wú)吸收，初步判斷該化合物分子結(jié)構(gòu)中無(wú)不飽和鍵。'H-NMR圖譜中給出8個(gè)甲基單峰，分別在S0.89(H-26，H-27),0.97(，H-30)，0.99(H-19)，1.29(H-18,)，1.38(H-29)，1.40(H-21)，1.81(H-6，，)，2.15(H-28)。3位氫信號(hào)S3.50，12位氫信號(hào)S3.96，6位氫信號(hào)S4.73。找到葡萄糖1位氫信號(hào)55.29，鼠李糖1位氫信號(hào)56.53.與人參皂苷Rg2的NMR文獻(xiàn)值[11]中葡萄糖基和鼠李糖基的數(shù)據(jù)比較，兩者基本一致。由于側(cè)鏈末端雙鍵氫化成為單鍵使H-26與H-27化學(xué)位移等價(jià)。"CNMR圖譜中未能找到任何烯碳信號(hào)，找到4個(gè)連氧碳信號(hào)，分別在S78.8(C—3)、74.8(C-6)、71.5(C—12)、73.6(C—20)，以及C—5位信號(hào)S61.3(C-5)，推測(cè)其為雙鍵飽和的人參三醇型皂苷。根據(jù)S55.1(C-17)、27.6(C-21)、36.3(C-22)，推測(cè)該化合物苷元具有20(S)構(gòu)型。與20(S)-二氫原人參三醇的13CNMR圖譜數(shù)據(jù)[1°]比較，苷元6位碳信號(hào)向低場(chǎng)位移至S74.8，說(shuō)明6位已苷化。另夕卜，13CNMR圖譜給出S102.2、102.4糖端基碳峰，表明有2個(gè)糖，S63.6-79.9可見兩個(gè)糖的9個(gè)信號(hào)，S63.6(C-6')表明其中的一個(gè)糖為葡萄糖。在519.2的第10個(gè)糖的碳信號(hào)表明其中的一個(gè)糖為鼠李糖。葡萄糖2位碳信號(hào)向低場(chǎng)移至S79.9，說(shuō)明鼠李糖與葡萄糖是l-2連接。進(jìn)一步與人參皂苷Rg2的"C-NMR文獻(xiàn)值[11]中葡萄糖基和鼠李糖基的數(shù)據(jù)比較，兩者基本一致。參考二氫原人參三醇13CNMR文獻(xiàn)值[1]和反應(yīng)起始原料人參皂苷Rg2的"CNMR文獻(xiàn)值叫，在S28.9、40.8出現(xiàn)2個(gè)碳信號(hào)分別屬于C-25，C-24。人參皂苷Rg,C-NMR文獻(xiàn)值""中其C-26(S27.1)與C-27(517.4)之間的化學(xué)位移有很大差距，而碳信號(hào)523.3(C-26)、23.4(C-27)的出現(xiàn)是由于其C24、C25之間C-C鍵由雙鍵轉(zhuǎn)化為單鍵后使C26與C27化學(xué)位移等價(jià)。.化合物1的化學(xué)結(jié)構(gòu)式鑒定結(jié)果如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>化合物1該化合物此前并未見有文獻(xiàn)報(bào)道，故命名其為20(S)-二氫人參皂苷Rg2，化學(xué)名為0-D-Glucopyranoside,3P，6a,12P,20(S)-3,12,20-trihydroxylda腿ar-6-yl2-0-(6-deoxy-a_L-mannopyranosyl)4.1.3.2.化合物2的結(jié)構(gòu)鑒定化合物2無(wú)定型為無(wú)定型白色粉末，m.p.259.1259.2'C.易溶于甲醇、乙酸乙酯，不溶于氯仿。質(zhì)譜中由分子離子峰m/zC42H73013[M-H]一785.5075，得該化合物的分子式為C42H740I3(C42H73013[M_H]—計(jì)算值為785.5051)。UV無(wú)吸收，初步判斷該化合物分子結(jié)構(gòu)中無(wú)不飽和鍵。'HNMR圖譜中給出8個(gè)甲基單峰，分別在50.89(H-26，H-27),0.97(，H-30)，0.99(H-19),1.29(H-18,)，1.38(H-29),1.40(H-21)，1.81(H-6，，)，2.15(H-28)。3位氫信號(hào)S3.50，12位氫信號(hào)S3.96，6位氫信號(hào)S4.73。找到葡萄糖1位氫信號(hào)S5.29，鼠李糖1位氫信號(hào)S6.53.與人參皂苷Rg2的^NMR文獻(xiàn)值中葡萄糖基和鼠李糖基的數(shù)據(jù)比較，兩者基本一致。由于側(cè)鏈末端雙鍵氫化成為單鍵使H-26與H-27化學(xué)位移等價(jià)。^固R圖譜中未能找到任何烯碳信號(hào)，找到4個(gè)連氧碳信號(hào)，分別在S78.8(C-3)、74.8(C-6)、71.4(C-12)、73.6(C-20),以及C-5位信號(hào)61.3(C-5)，推測(cè)其為雙鍵飽和的人參三醇型皂苷。根據(jù)550.1(C-17)、23.3(C-21)、43.9(C-22)推測(cè)該化合物苷元具有20(R)構(gòu)型。與20(R)-二氫原人參三醇的13CNMR圖譜數(shù)據(jù)比較，苷元6位碳信號(hào)向低場(chǎng)位移至S74.8,說(shuō)明6位己苷化。另外，13CNMR圖譜給出S102.2、102.4糖端基碳峰，表明有2個(gè)糖，563.6-79.9可見兩個(gè)糖的9個(gè)信號(hào)，563.6(C-6')表明其中的一個(gè)糖為葡萄糖。在519.2第10個(gè)糖的碳信號(hào)表明其中的一個(gè)糖為鼠李糖。葡萄糖2位碳信號(hào)向低場(chǎng)移至S79.9，說(shuō)明鼠李糖與葡萄糖是l-2連接。進(jìn)一步與人參皂苷Rg2的"C-NMR文獻(xiàn)值中葡萄糖基和鼠李糖基的數(shù)據(jù)比較，兩者基本一致。參考二氫原人參三醇13CNMR文獻(xiàn)值[1]和反應(yīng)起始原料人參皂苷Rg2的"CNMR文獻(xiàn)值，在S28.9、40.8出現(xiàn)2個(gè)碳信號(hào)分別屬于C-25，C-24。人參皂苷Rg213CNMR文獻(xiàn)值中其C-26(527.l)與C-27(S17.4)之間的化學(xué)位移有很大差距，而化合物213CNMR圖譜中碳信號(hào)S23.3(C-26)、23.4(C-27)的出現(xiàn)是由于C24、C25之間C_C鍵由雙鍵轉(zhuǎn)化為單鍵后使C26與C27化學(xué)位移等價(jià)。該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式鑒定結(jié)果如下OHOH化合物2該化合物此前并未見有文獻(xiàn)報(bào)道，故命名其為20(R)-二氫人參皂苷Rg2，化學(xué)名為D-Glucopyranoside，3P，6a,12P，20(R)-3，12，20-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>43.9(C-22)，21.8(C-23),40.6(C-24),28.7(C-25),23.2(C-26)，23.4(C-27)，32.6(C-28)，17.4(C-29),17.7(C-30)，102.2(C-l，)，79.9(C-2，)，79.0(C-3，)，72.9(C-4，)，78.9(C-5,),63.6(C-6，)，102.4(C-1，，)，72.7(C-2，，)，73.1(C-3，，)，74.6(C-4，，)，69.9(C-5，，)，19.2(C-6，，)實(shí)驗(yàn)例2(20S,R)二氫人參皂苷Rg2對(duì)大鼠腦微循環(huán)的影響實(shí)驗(yàn)方法取體重為200250g大鼠，雌雄各半分8組，每組8只。生理鹽水組、溶媒組(1.2丙二醇25%:聚乙二醇25%:水50%)、人參皂苷Rg2(2.5、5.0、10.0mgkg-1)三個(gè)劑量組、二氫人參皂苷Rg2(2.5、5.0、mg*kg—0兩個(gè)劑量及山莨菪堿(5mg*kg—0作為陽(yáng)性對(duì)照組。各組均靜脈注射給藥。用水合氯醛ip麻醉，將大鼠平放在操作臺(tái)上，腹部向下，沿顱骨正中線和耳上方作T形切口。剝離肌肉，骨膜，暴露顱骨。避開矢狀竇，在距其0.5厘米處作方形切口，用特制小鋸條鋸出切口，用剪刀翹開。暴露硬腦膜，放置鏡下，舌下靜脈注射高分子右旋糖苷(10%高分子右旋糖苷6ml/kg)后5分鐘，立即尾靜脈注射所試藥物，找一條微靜脈(V)和微動(dòng)脈(A)，分別用圖像分析儀測(cè)定其管徑和流速。記錄給于高分子右旋糖苷前及給藥后15、30、45、60、min的各項(xiàng)指標(biāo)，計(jì)算iv高分子右旋糖苷前-后變化百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果見表l、2。結(jié)果生理鹽水組和溶媒組于注射高分子右旋糖苷后時(shí)間延長(zhǎng)明顯縮小軟腦膜微動(dòng)、靜脈管徑，也明顯減慢其流速，隨時(shí)間延長(zhǎng)其百分率的下降更為明顯，但兩組間無(wú)明顯差異，表明所用溶媒對(duì)微循環(huán)障礙無(wú)明顯。(20S，R)二氫人參皂苷Rg2、人參皂苷Rg2及山莨菪堿均明顯抑制由高分子右旋糖苷引起的大鼠軟腦膜微動(dòng)脈、微靜脈管徑縮小及流速減慢，其作用可持續(xù)60分鐘以上。其中，(20S，R)二氫人參皂苷Rg22.5mgkg—1作用強(qiáng)度相當(dāng)于人參皂苷Rg210.0mg*kg—i的作用，而人參皂苷Rg22.5mg.kg—'無(wú)明顯作用(P<0.05)。表明，人參皂苷Rg2在側(cè)鏈不飽和鍵(雙鍵)完全被氫化后，明顯改善腦微循環(huán)障礙，且作用強(qiáng)度明顯提高(4倍以上)。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表2、二氫人參皂苷Rg2對(duì)右旋糖苷所致大鼠軟腦膜微循環(huán)障礙(微血管血流速度變化％)的影響(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>實(shí)驗(yàn)例3(20S,R)二氫人參皂苷Rg2對(duì)正常小鼠耳廓微循環(huán)的影響實(shí)驗(yàn)方法取體重為2325g雄性小鼠分成4組，每組8只。溶媒組(1.2丙二醇25%:聚乙二醇25%:水50%);(20S,R)人參皂苷Rg2(50mgkg—1)組、(20S，R)二氫人參皂苷Rg2(lOmgkg—1)及山莨菪堿(5mgkg-1)組。各組由靜脈給藥。用烏拉坦ip麻醉，將耳廓置于顯微鏡下，找一條微靜脈(V)和微動(dòng)脈(A)，用圖像分析儀分別測(cè)定其管徑，流速，網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)，溶媒組和給藥組均尾靜脈注射，給藥體積為10mlkg—、于給藥后10、20、30分鐘觀察微動(dòng)、靜脈管徑、流速、網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)。計(jì)算iv給藥前-后變化百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，與溶媒組比較，計(jì)算t值。結(jié)果見表3、4。結(jié)果，二氫人參皂苷Rg2明顯擴(kuò)張小鼠耳廓微動(dòng)脈、微靜脈管徑、增加網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)及血流速度，且其作用強(qiáng)度明顯高于人參皂苷Rg2。二氫人參皂苷Rg210mgkg'作用強(qiáng)度相當(dāng)于人參皂苷Rg250.0mg'kg—'的作用，提高5倍以上。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表4、二氫人參皂苷Rg2對(duì)正常小鼠耳廓微循環(huán)的影響(網(wǎng)焦點(diǎn)數(shù)變化％)(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實(shí)驗(yàn)例420(S,R)二氫人參皂苷Rg2對(duì)腎上腺素所致小鼠耳廓微循環(huán)的影響實(shí)驗(yàn)方法取雄性小鼠，分成5組，每組8只；20(S，R)人參皂苷Rg2(10mgkg-'和20kg-1)組、(SR)二氫人參皂苷Rg2(5mgkg—1)及山莨菪堿(10mgkg—"組。各組均由靜脈給藥。用烏拉坦ip麻醉，將耳廓置于顯微鏡下，找一條微靜脈(V)和微動(dòng)脈(A)，用圖像分析儀分別測(cè)定其管徑、網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)以及動(dòng)靜脈血流速，iv各受試藥物和等體積的同上溶媒，給藥體積10ml*kg—、于給藥后5分鐘，再iv腎上腺素0.Olmgkg-1，于iv腎上腺素后5、10、20、30分鐘測(cè)定微動(dòng)、靜脈管徑及其血流速度、網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)。計(jì)算iv腎上腺素前-后變化百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)算t值。結(jié)果見表5、6、7。結(jié)果，溶媒組于iv腎上腺素后明顯縮小微動(dòng)、靜脈管徑，減慢其流速，減少網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)，隨時(shí)間延長(zhǎng)其百分率的下降更為明顯，30分鐘時(shí)百分率下降45%以上。20(S，R)二氫人參皂苷Rg2明顯抑制由腎上腺素引起的小鼠耳廓微動(dòng)脈、微靜脈管徑縮小、網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)減少及其及流速減慢，且其作用強(qiáng)度相當(dāng)于人參皂苷Rg2的4倍。表明，(SR)二氫人參皂苷Rg2明顯抑制由腎上腺素所致的微循環(huán)障礙，且作用強(qiáng)度明顯提高。表5、(20S,R)二氫人參皂苷Rg2對(duì)腎上腺素所致小鼠耳廓微動(dòng)脈和微靜脈管徑變化X的影響(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注與溶媒組比較※P〈0.05，※※P〈0.02,※※※〈P0.01;200710175442.X勢(shì)溢a被17/215t<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表7、(20S,R)二氫人參皂苷Rg2對(duì)腎上腺素所致小鼠耳廓網(wǎng)焦點(diǎn)數(shù)變化X的影響(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>注與溶媒組比較※p〈0.05，※※P〈0.02，※※※〈P0.01;綜上生物活性比較試驗(yàn)表明，(20S，R)二氫人參皂苷Rg2能明顯改善由高分子右旋糖苷所致的大鼠軟腦膜微循環(huán)障礙；也可明顯改善腎上腺素所致小鼠耳廓微循環(huán)，且其作用強(qiáng)度提高(4倍以上)；另比較試驗(yàn)表明，(20S，R)二氫人參皂苷Rg2明顯擴(kuò)張正常小鼠耳廓微動(dòng)脈、微靜脈管徑、增加血流速度和網(wǎng)交點(diǎn)數(shù)，與人參皂苷Rg2比較，強(qiáng)度明顯提高，約5倍以上。下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:稱取原料人參皂苷Rg2500mg,置50ml圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳100mg,將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2450mg。實(shí)施例2:稱取原料人參皂苷Rg2600mg，置80ml圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳120mg，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2550mg。實(shí)施例3:稱取原料人參皂苷Rg2400mg,置40ml圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳80mg，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2350mg。實(shí)施例4:按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2550mg，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為80:35的甲醇-水；10000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2，分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(S)-二氫人參皂苷Rg2120mg、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2220mg。實(shí)施例5:按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2450mg，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為70:30的甲醇-水；6000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2，分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(S)-二氫人參皂苷Rg2100mg、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2200mg。實(shí)施例6:按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2370mg，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為60:25的甲醇-水；5000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2，分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(S)-二氫人參皂苷Rg280mg、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2170mgc權(quán)利要求1、一種化合物，該化合物的結(jié)構(gòu)式為20(S)-二氫人參皂苷Rg2或20(R)-二氫人參皂苷Rg2。2、如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于該化合物由如下方法制成:稱取原料人參皂苷Rg2400-600重量份，置40-80體積份圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳80-120重量份，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2350-550重量份；按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2350-550重量份，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為60-80:25-35的甲醇-水；4000-12000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2，分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(5)-二氫人參皂苷Rg280-120重量份、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2170-230重量份。3、如權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于該化合物由如下方法制成稱取原料人參皂苷Rg2500重量份，置50體積份圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳100重量份，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2450重量份；按上述方法所得的混合構(gòu)型(20S,R)二氫人參皂苷Rg2450重量份，再用c-18反相填料柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為70-30:25-35的甲醇-水；10000體積份，以50體積分為單位，以液質(zhì)聯(lián)用儀檢測(cè)20S或20R二氫人參皂苷Rg2，分別收集并合并20S或20R二氫人參皂苷Rg2洗脫液，并回收溶劑，減壓干燥，分別得到化合物20(S)-二氫人參皂苷Rg2100重量份、化合物20(R)-二氫人參皂苷Rg2200重量份。4、如權(quán)利要求l-3所述的任一化合物，其特征在于該化合物與一種或多種醫(yī)藥上接受的載體/輔料制成的或者與任何一種或多種中藥或西藥制成的注射劑、膠囊、片劑、氣霧劑、口服液、貼劑、栓劑，微囊、微球、夕卜用制劑或化妝品。5、如權(quán)利要求1-3所述的任一化合物在制備治療微循環(huán)障礙相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。6、一種二氫人參皂苷Rg2的混合物，其特征在于由如下方法制成的稱取原料人參皂苷Rg2400-600重量份，置40-80體積份圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳80-120重量份，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2350-550重量份。7、如權(quán)利要求6所述的二氫人參皂苷Rg2的混合物，其特征在于由如下方法制成的稱取原料人參皂苷Rg2500重量份，置50體積份圓底燒瓶中，加甲醇適量使溶解，加入鈀碳100重量份，將氫氣持續(xù)通入溶液底部；室溫下攪拌，過濾，濃縮，減壓干燥，獲得混合構(gòu)型(20S，R)二氫人參皂苷Rg2450重量份。8、如權(quán)利要求6或7所述的混合物，其特征在于該混合物與一種或多種醫(yī)藥上接受的載體/輔料制成的或者與任何一種或多種中藥或西藥制成的注射劑、膠囊、片劑、氣霧劑、口服液、貼劑、栓劑，微囊、微球、外用制劑或化妝品。9、如權(quán)利要求6或7所述的混合物在制備治療微循環(huán)障礙相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。10、如權(quán)利要求9所述的微循環(huán)障礙相關(guān)疾病指全身或局部缺血性疾病，包括休克、心肌缺血、腦缺血、記憶力減退、糖尿病并發(fā)癥、疲勞的一種或多種。全文摘要本發(fā)明公開了一種新型的人參皂苷——二氫人參皂苷Rg₂的制備方法，該方法產(chǎn)率80％以上，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明二氫人參皂苷Rg₂具有預(yù)防或治療微循環(huán)障礙相關(guān)疾病的作用。文檔編號(hào)A61K31/704GK101397327SQ20071017544公開日2009年4月1日申請(qǐng)日期2007年9月29日優(yōu)先權(quán)日2007年9月29日發(fā)明者姜志宏,浩李,李龍?jiān)粕暾?qǐng)人:廣州天安醫(yī)藥科技有限公司;香港浸會(huì)大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院