專利名稱：：芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物及其制備方法和應(yīng)用。很長(zhǎng)時(shí)間以來(lái)，氮芥類化合物及其衍生物已經(jīng)用作抗腫瘤藥物，多用作化療藥物，臨床治療效果很好(王澤民，《苦/e^^^^^全桌A1993年，2046-2186)。它們對(duì)于很多惡性腫瘤，例如惡性淋巴瘤、惡性黑色素瘤、慢性白血病等有明顯的抑制活性。尤其是其中的環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide)、瘤可寧(Chlorambucil)和米爾法蘭(Melphalan)等，由于其良好的治療效果至今仍作為一線藥物用于臨床。但是，骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)等副作用，給用藥患者帶來(lái)很大痛苦，嚴(yán)重限制了它們?cè)谂R床上的應(yīng)用。廠o、^^ci八^cici^^a為降低氮芥類化合物及其衍生物的毒副作用，幾十年來(lái)，國(guó)內(nèi)外藥物工作者對(duì)其進(jìn)行了多方面的結(jié)構(gòu)改造，發(fā)現(xiàn)了一些較理想的化合物。例如，以下結(jié)構(gòu)的環(huán)磷酰胺衍生物Telcyta是最早應(yīng)用的谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶tt活4t前藥(LyttleMH，SatyamA，HockerMD，etal.J.M/.CAew.1994，37,1501)，X寸癌細(xì)胞特別是對(duì)化療耐藥的癌細(xì)胞具有選擇性和靶向作用，應(yīng)用該藥可以使對(duì)紫杉醇和鉑類藥物耐藥的腫瘤更加敏感，提高傳統(tǒng)化療藥物的有效性，目前已由美國(guó)生物技術(shù)公司Telik開(kāi)發(fā)進(jìn)入三期臨床。
背景技術(shù)：
：5以下結(jié)構(gòu)的瘤可寧衍生物(Huang,Zh,H.;Yang，G,J.;ZLin,H,L.;Huang，J,L.說(shuō)o.MM.C&m.丄饑2001，11,1099)不僅抗腫瘤活性高，而且毒性(LD50為130.76mg/kg，0.225mmol/kg)也低于瘤可寧(49.56mg/kg，0.163mmol/kg)。以下瘤可寧衍生物(Jina，G.-Zh.;Youb,Y,J.;Kimb，Y.;Namb，N,H.;Ahnb，B,Z.乂M/.C力ew.2001，36，361)的體內(nèi)抗腫瘤活性為瘤可寧的2-25倍(ED50<4.lug/ml)以下結(jié)構(gòu)的瘤可寧衍生物(Coggiola,B.;Pagliai,F.;Allegrone,G.;Genazzani，A.A.;Tron，G.C.她dC力e附.2005,15,3551)對(duì)SH-SY5Y成神經(jīng)細(xì)胞瘤的抗腫瘤活性也好于瘤可寧。以下結(jié)構(gòu)的米爾法蘭衍生物(Jin，G,Zh.;Youb,Y.-J.;Ahnb,B,Z.說(shuō)o.MedCA柳.丄批2001，11,1473)的體內(nèi)S，抗腫瘤活性為米爾法蘭的10倍。顯然，上述所有這些結(jié)構(gòu)改造，都遵循一個(gè)共同的原則，即氮芥部分作為該類藥物的關(guān)鍵藥效團(tuán)而保留不變。然而，發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量研究、試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將氮芥類化合物及其衍生物的氮芥部分改造成哌嗪季銨鹽的結(jié)構(gòu)時(shí)，所得哌嗪季銨鹽衍生物既具有前藥的性質(zhì)，又增加水溶性。由此可以保留或增強(qiáng)氮芥類化合物及其衍生物的抗腫瘤活性，并顯著降低毒性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物，其具有良好的抗腫瘤活性，并且毒性較低。本發(fā)明的另一目的在于提供上述芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物的制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供上述芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物的用途。以下對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。本發(fā)明提供以下通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽R2通式I其中，R'為H;飽和或不飽和的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選飽和的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選碳原子數(shù)在16之間的垸基，更優(yōu)選優(yōu)原子數(shù)在13之間的垸基，如甲基、乙基、丙基等，優(yōu)選甲基和乙基，所述烴基可以被選自鹵素、氨基、取代氨基、羥基、氰基、硝基、芳基和取代芳基的取代基任意取代，優(yōu)選被取代氨基或取代芳基取代，例如1，4-二羥基-蒽-9,10-二酮-2-基甲基或N-對(duì)氨基苯磺?；?N-2-嘧啶基氨乙基等；芳基或取代芳基，例如5-(3,4，5-三甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基-苯基等；A為飽和或不飽和的直鏈或支鏈亞烴基，優(yōu)選主鏈碳原子數(shù)《的飽和直鏈或支鏈亞烷基，更優(yōu)選為乙基或丙基，所述烴基可以被酰胺基取代，例如甲酰氨基-乙基；Ar為亞芳香基，優(yōu)選為亞苯基，更優(yōu)選為對(duì)亞苯基；R2、RS各自獨(dú)立的為氫或甲基，優(yōu)選均為氫；n和m為02的整數(shù)，且n與m不同時(shí)為0，優(yōu)選n+m=2，更優(yōu)選n和m同時(shí)是1;B和D彼此獨(dú)立地表示d-C3的直鏈或支鏈垸基、CPC3的直鏈或支鏈亞烷基，優(yōu)選為-CH3、-CH2-、-CH2CHr、-CH(CH3)-、-CH2CH2CH2-或-CH2CH(CH3)-，更優(yōu)選B和D同時(shí)為-013、-(CH2)2-、-CH2CH(CH3)-或-012012012-;Y為-CHR4-、-O-、-S-、-S(O)-、-S02-、-NR4-、取代的或未取代的亞苯基，其中W為H、具有l(wèi)-6個(gè)碳原子的飽和或不飽和烷基、任意取代或未取代的芳基、或芳雜環(huán)取代的甲基或乙基，RM尤選為H或l-3個(gè)碳原子的烷基，更優(yōu)選為H、甲基或乙基；或者當(dāng)B和D都為烷基時(shí)，Y是不存在從，即此時(shí)是開(kāi)環(huán)的，并沒(méi)有形成螺環(huán)；當(dāng)所述的基團(tuán)Y為取代的或未取代的亞苯基時(shí)，優(yōu)選的是鄰亞苯基，其可以任意被選自-N02、-Me、-OMe、-CN、-C02H和-C02Et的取代基所取代；X—為藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)負(fù)離子，特別是藥學(xué)上可接受酸形成的負(fù)離子，例如下述藥學(xué)上可接受酸形成的，負(fù)離子無(wú)機(jī)酸，如鹽酸、硫酸、氫溴酸、氫氟酸、氫碘酸、硝酸、磺酸、磷酸等，或有機(jī)酸，如乙酸、草酸、檸檬酸、馬來(lái)酸、富馬酸、琥珀酸、蘋果酸、甲磺酸、甲苯磺酸等，優(yōu)選的負(fù)離子為鹵素負(fù)離子，特別是氯或溴的負(fù)離子。Ri優(yōu)選為H、甲基、乙基、丙基、取代或未取代芳基或雜環(huán)芳基、1，4-二羥基-蒽-9,10-二酮-2-基甲基、N-對(duì)氨基苯磺?；?N-2-嘧啶基氨乙基或5-(3,4，5-三甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基-苯基。Y優(yōu)選為-CHR4-、-O-、-S-、-NR4-或未取代的亞苯基，更優(yōu)選為-CH2-、-CH(CH3)-、-O-、-N(CH3)或-N(C2Hs)。本發(fā)明通式I化合物包括其立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體。本發(fā)明通式I化合物的具體實(shí)例包括氯化4—(4，-乙氧羰丙基苯基)-1，"二甲基"，4-二氮雜環(huán)己垸；氯化2，4-二甲基-9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一垸；氯化3-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二烷；氯化9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.5]H^—垸；氯化3-甲基-9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—垸;氯化3-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.5]十一垸；氯化8-(4，-乙氧羰丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5]癸垸；氯化4—(4，-甲氧羰丙基苯基)-1，l-二甲基-l，4-二氮雜環(huán)己烷；氯化2，4-二甲基-9-(4'-甲氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化3_(4'-甲氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二垸(10);氯化9_(4'-甲氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.5]十一垸；氯化3-甲基-9-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—垸；氯化3—(4，-甲氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.5]十一垸；氯化8_(4'-甲氧羰丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5]癸烷；氯化4-(4，-羧丙基苯基)-1，l-二甲基-l，4-二氮雜環(huán)己烷；氯化2,4-二甲基-9-(4，-羧丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化3-(4'-羧丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二烷；氯化9-(4'-羧丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.5]十一烷；氯化3-甲基-9-(4，-羧丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一垸；氯化3-(4'-羧丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化8-(4'-羧丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5]癸垸；氯化3-甲基-9-[4'-(l"，4"-二羥基-蒽-9"，10"-二酮-2"-基甲氧羰基丙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—烷；氯化3-甲基-9-[4，-(N-對(duì)氨基苯磺?；?N-2"-嘧啶基氨乙氧羰基丙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—烷；氯化3-甲基-9-[4，-[5"-(3"，,4'",5"，-三甲氧基苯乙烯基)-2"-甲氧基-苯氧羰基苯基丙基]苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一垸；禾口氯化3-甲基-9-[4，-(r'，4"-二羥基-蒽-9"，10"-二酮-2"-基甲氧羰基-甲酰氨基-乙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一烷。本發(fā)明還提供了上述通式I化合物的制備方法，該方法包括(1)中間體硝基取代的芳垸基羧酸酯的合成ooII，a,IIHO——C——A——Ar——N02+R10H-R'O——C——A——Ar——N02反應(yīng)條件a)DCC，CH2C12,r丄(2)中間體氨基取代的芳烷基羧酸酯的合成OOR10一C—A——Ar——N07R10—C一A——Ar——麗2反應(yīng)條件b)Fe/HOAc，回流(3)中間體N-取代芳基二乙醇胺的合成R'O—C—A—Ar——NHR2/CICI.R2R3、OHoR10—C—A—A「N,OH、OH反應(yīng)條件c)CaC03，&0，回流(4)中間體N-取代芳基氮芥的合成:R^O—C一A—A「NR2o+R0一C一A—A「NR3OHR3A反應(yīng)條件d)PXn，CHCl3，回流(5)目標(biāo)產(chǎn)物的合成o，IIR!0—C一A-/\HN、-NR2YR,011O—C—A—Ar—N\"/B\D反應(yīng)條件e)NaHC03,乙醇,回流以上說(shuō)明了制備本發(fā)明通式I化合物的一般方法。對(duì)于某些特別的通式I化合物，例如也可以用下列方法制備反應(yīng)條件a)A1C13，CS2，r.t;b)85%N2H4.H20,KOH,140-190°C,HC1;c)S0C12,乙醇；d)CaC03,H20，KI,回流；e)POCl3,苯，回流；f)HCl,乙醇當(dāng)R'為簡(jiǎn)單取代基時(shí)，例如甲基或乙基10<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反應(yīng)條件a)NaHC03，乙醇，回流，10h其中，CLBM和CLBM1的定義如預(yù)備實(shí)施例,當(dāng)R'為其它復(fù)雜取代基時(shí)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反應(yīng)條件a)DCC，CH2C12，r丄b)NaHC03,乙醇，回流，10h當(dāng)W為氫原子時(shí)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反應(yīng)條件a)Na0H，THF/H20，回流；然后用HC1處理本發(fā)明的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物，具有良好的水溶性，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成為相應(yīng)的氮芥類化合物，對(duì)于惡性腫瘤，尤其是實(shí)體瘤、急性白血病等惡性腫瘤有良好的治療效果，而且毒副作用較低。具體實(shí)施例方式以下通過(guò)具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)將由于這些描述而更為清晰。但是，這些實(shí)施例僅僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。預(yù)備實(shí)施例14-[4-(雙氯乙基氨基)苯基I丁酸乙酯和4-[4-(雙氯乙基氨基)苯基]丁酸甲酯的制備0-(4-乙酰氨基苯甲酰基)-丙酸的制備2000ml三口瓶接冷凝管和機(jī)械攪拌，冰浴下將無(wú)水三氯化鋁(500g,3.75mol)混懸于600ml二硫化碳中，將乙酰苯胺(150g，l.llmol)和琥珀酸酐(lllg，l.llmol)研磨充分的混合物快速加入。15分鐘后移去冰水浴，待出現(xiàn)絳紅色沉降物時(shí)停止攪拌，室溫放置3-4天。傾去上層二硫化碳，加冰水(約1500ml)降解紅色混合物，產(chǎn)生大量氯化氫氣體，待紅色消失，抽濾，水洗濾餅兩次，將濾餅溶于飽和碳酸鈉水溶液，過(guò)濾，濾液以6N鹽酸酸化至弱酸性，析出大量白色固體，抽濾得白色固體141g，收率54.8%，Mp:196-200。C(文獻(xiàn)202-205。C)。'HNMR(DMSO，300MHz):12.12(bs，1H，COOH)，10.28(s，1H，腿)，7.93(d，2H，8.7Hz，ArH)，7.70(d，2H，/=8.7Hz，ArH)，3.18(t，2H，/=6.3Hz，Ph-C-CH2)，2.54(t，2H，J二6.3Hz，Ph-C-CH7-CH2)，2.08(s，3H，-CH!)。Y-(對(duì)氨基苯基)丁酸的制備將/3-(4-乙酰氨基苯甲?；?-丙酸(89g，378mmo1)、氫氧化鉀(88g，1.57mol)、65ml85%水合肼和450ml二甘醇加熱回流(約140°C)1.5小時(shí),移去將冷凝管使溫度升高到195°C，蒸出多余的水合肼，保持此溫度繼續(xù)回流4個(gè)小時(shí)。后冷卻至室溫，反應(yīng)體系用約400ml水稀釋，6N鹽酸調(diào)pH至中性，析出晶體，過(guò)濾，水洗，得白色晶體44g，收率65.0%，Mp:118-127°C(文獻(xiàn)73%，115-120°C)。'HNMR(DMSO，300MHz):11.2-12.3(b，1H，COOli)，6.81(d，2H，/=8.0Hz，ArH)，6.47(d，2H，8.0Hz，ArH)，4.60-5.70(bs，2H，腿2)，2.38(t，2H，J二7.4Hz，Ph-CH2)，2.15(t，2H，h7.4Hz，CH2-COOH)，1.68(m，2H，Ph-CH7-CH2)。7-(對(duì)氨基苯基)丁酸乙酯鹽酸鹽的制備將120ml乙醇冷卻到-10。C，攪拌下緩慢滴加氯化亞砜(31ml，416mmo1)，然后反應(yīng)IO分鐘，加入7-(對(duì)氨基苯基)丁酸(23g，128mmo1)，室溫過(guò)夜，再回流2小時(shí)，減壓蒸出溶劑，再加乙醇溶解，減壓濃縮，直至除盡氯化亞砜，以乙醇-乙醚重結(jié)晶，得白色晶體23g，收率73.2%，Mp:136-142。C。NMR(D20，300MHz):7.22(d，2H，J=8.4Hz，ArH)，7.14(d，2H，《/=8.4Hz，ArH)，3.89(q，2H，>/=7.2Hz,CH2-CHO，2.54(t，2H，J^7.2Hz,Ph-CH2)，2.20(t，2H，h7.2Hz，CH2-COOCHO，1.78(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.04(t，3H，《/=72Hz，CH2-CHP。7-(對(duì)氨基苯基)丁酸甲酯鹽酸鹽的制備該甲酯鹽酸鹽產(chǎn)物的制備同上述T(對(duì)氨基苯基)丁酸乙酯鹽酸鹽，只是用甲醇代替乙醇，收率83.6%，Mp:138-146°C。7-(對(duì)氨基苯基)丁酸甲酯的制備甲酯鹽酸鹽以飽和碳酸氫鈉水溶液中和后，用乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗，以乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶，得黃色晶體，收率67.9%，Mp:40-42°C(文獻(xiàn)值40-42°C)。'HNMR(CDC13，300MHz):6.97(d，2H，J=8.4Hz，ArH)，6.64(d，2H，J二8.4Hz，ArH)，3.66(bs，3H，O-CH^,2.54(t，2H，J二7.2Hz，Ph-CH2)，231(t，2H，J=75Hz，辺2陽(yáng)COOCH3)，1.90(m，2H，Ph-CH，-CH2)。4-(4-(雙(2-羥乙基)氨基)苯基)丁酸乙酯的制備將7-(對(duì)氨基苯基)丁酸乙酯鹽酸鹽(4.0g，16mmoD、碳酸鈣(7.0g，70mmo1)、碘化鉀(O.lg)，50ml水和2ml氯乙醇(29mmo1)加入150ml圓底瓶中，每隔5小時(shí)補(bǔ)加2ml的氯乙醇，加熱回流24小時(shí)，TLC檢測(cè)原料點(diǎn)和中間產(chǎn)物消失后停止反應(yīng)。抽濾,乙酸乙酯洗除去碳酸鈣，濾液用乙酸乙酯萃取(20mlx2)，合并有機(jī)相，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，加壓硅膠柱色譜分離(洗脫劑石油醚乙酸乙酯=1:1)得黃色油狀物4.0g，收率82.5%。'HNMR(CDC13，300MHz):7,03(d，2H，J=8.4Hz，ArH)，6.62(d，2H，《/=8.4Hz，ArH)，4,11(q，2H，J二7.2Hz，CH2-CH;)，3.50-3.79(m，8H，HO墨CH2-CH2)，2.54(t，2H，J二7.5Hz，Ph-CH2)，2.30(t，2H，h7.5Hz，￡HrCOOC2H5)，1.89(m，2H，Ph-CH7-CH2)1.24(t，3H，J二7.2Hz，CH廣CHP。4-[4-(雙羥乙基氨基)苯基l丁酸甲酯的制備該甲酯產(chǎn)物制法同上述4-(4-(雙(2-羥乙基)氨基)苯基)丁酸乙酯，得黃色油狀物，收率80.9%。^NMR(CDC13，300MHz):7.03(d，2H，《/=8.3Hz，ArH)，6.63(d，2H，J^8.3Hz，ArH)，3.51-3.83(m，IIH，HO-CHrCH2，COO-CH2)，2.54(t，2H，J"二7.5Hz，Ph-CH2)，2.32(t，2H，《/=7.5，CH2-COOCHO，1.90(m，2H，Ph-CH7-CH2)。4-[4-(雙氯乙基氨基)苯基l丁酸(CLB)的制備4-[4-(雙羥乙基氨基)苯基]丁酸甲酯(4.0g，13mmo1)溶于50ml苯中，加入三氯氧磷(3ml，32.3mmo1)，回流1.5小時(shí)，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀物，加入40ml濃鹽酸，60。C下攪拌30分鐘，接著回流15分鐘，減壓濃縮后，以30ml冰水稀釋，濃氨水中和，乙酸乙酯萃取(20mlx2)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，減壓濃縮，加壓硅膠柱色譜分離，洗脫劑為石油醚乙酸乙酯(加少量乙酸)=7:1，乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶得淡黃色晶體2.3g，收率53.1%，Mp:62-66°C(文獻(xiàn)68%，64-66°C)。^NMR(CDC13，300MHz):7.08(d，2H，J=8.2Hz，ArH)，6.67(d，2H，J=8.7Hz，ArH)，3.63-3.71(m，8H，CI-CH2-CH2)，2.59(t，2H，J=7.5Hz，Ph-CH2)，2.37(t，2H，J=7.5Hz，CH2-COOH)，1.95(m，2H，Ph-CH-CH2)。4-[4-(雙氯乙基氨基)苯基I丁酸乙酯(CLBM)的制備4-(4-(雙(2-羥乙基)氨基)苯基)丁酸乙酯(5.2g，17mmo1)溶14于100ml苯中，加入三氯氧磷(3.5ml，37.7mmol)，回流1.5小時(shí)，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀物，加50ml水?dāng)嚢瑁霈F(xiàn)白色乳濁液，濃氨水中和，乙酸乙酯萃取，TLC指示直至萃取完全，合并酯層，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，加壓硅膠柱色譜分離，洗脫劑石油醚乙酸乙酯=10:1，得4.9克黃色油狀物，收率83.8%。^NMR(CDC13，300MHz):7.08(d，2H，J二9.0Hz，ArH)，6.66(d，2H，/=9.0Hz，ArH)，4.13(q，2H，《/=7.2Hz，CH2-CHO，3.60-3.73(m，8H，Cl陽(yáng)CH2-CH2)，2.56(t，2H，J^7.5Hz，Ph-CH2)，2.31(t，2H，J^7.5Hz，CH2-COOGHO，1.92(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.26(t，3H，A7.2Hz，CH7-CH2)。4-[4-(雙氯乙基氨基)苯基丁酸甲酯(CLBMl)的制備按以上方法制備4-[4-(雙氯乙基氨基)苯基]丁酸甲酯，只是用4-(4-(雙(2-羥乙基)氨基)苯基)丁酸甲酯代替4-(4-(雙(2-羥乙基)氨基)苯基)丁酸乙酯，得黃色油狀物，收率45.1%。iHNMR(CDC13，300MHz):7.04(d，2H，《/=8.7Hz，ArH)，6.66(d，2H，《/=8.7Hz，ArH)，3.53-3.84(m，IIH，C1-CH2-CH2，0-CH3)，2.55(t，2H，J^7.5Hz，Ph-CH2)，2.32(t，2H，h7.5Hz，CH2-COOCHO，1.90(m，2H，Ph-CH7-CH2)。制備實(shí)施例1氯化4-(4，-乙氧羰丙基苯基)-1，l-二甲基-l，4-二氮雜環(huán)己烷的制備將CLBM(2.0g，6mmo1)、二甲胺鹽酸鹽(0.6g，7mmo1)、40ml乙醇和碳酸氫鈉(5.0g，59mmo1)的混合液攪拌并加熱回流24小時(shí)，TLC顯示大部分原料已反應(yīng)完，過(guò)濾除去多余碳酸氫鈉，減壓蒸干濾液，加20ml水溶解，乙酸乙酯提取兩次(15mlx2)，水層減壓蒸干，乙醇-乙酸乙酯重結(jié)晶，得1.4g白色針狀結(jié)晶，收率68.2%，Mp:230-237°C。'HNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，■/=8.7Hz，ArH)，6.90(d，2H，J二8.7Hz，ArH)，3.87(q，2H，J=6.9Hz,CH2U，3.43-3.47(m，4H，N國(guó)CH二)，3.35-3.37(m，4H，N+-CH2)，3.08(s，6H，N十-CHp，2.45(t，2H，J:7.2Hz，Ph-CHP，2.19(t，2H，J二7.2Hz,Ph-CH-CH7-CH2)，1.72-1.77(m，2H，Ph-CH7-CHp,1.04(t，3H，/=6.9Hz,CH-CHp。元素分析C18H29C1N202，測(cè)量值C，63.05;H，8.76;N，8.08;理論值C，63.42;H，8.57;N，8.22。制備實(shí)施例2氯化2,4-二甲基-9-U，-乙氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一烷的制備按照制備實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備，CLBM和2，6-二甲基嗎啡啉等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理得白色片狀結(jié)晶，收率76.2%，Mp:276-278°C。iHNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，J=8.7Hz，ArH)，6.89(d，2H，J二8.7Hz，ArH)，4.13(m，2H，O-CH)，3.87(q，2H，J二7.2Hz，CH2-CH》，2.91-3.77(m，12H，N-CH"N+-CH2)，2.44(t，2H，h7.2Hz，Ph-CH2)，2.18(t，^7.2Hz，2H，Ph-CH7-CH7-CH2)，1.72-1.79(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.09(d，6H，J^6.3Hz，O-CH-CH^,1.04(t，3H，J=7.2Hz，CH7-CHP。元素分析C22H35C1N203，測(cè)量值C，64.10;H，8.48;N，6.60;理論值C，64.29;H，8.58;N，6.82。制備實(shí)施例3氯化3-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6)十二烷的制備按照制備實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備，CLBM和氮雜環(huán)庚垸等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=10:1，得白色發(fā)泡狀固體，吸潮嚴(yán)重，收率78.8%。'HNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，J二8.7Hz，ArH)，6.89(d，2H，J=8.7Hz，ArH)，3.88(q，2H，J=7,2Hz，CH2-CH)，3.35-3.45(m，12H，N-CH7，N十-CH，)，2.45(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH2)，2.19(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH7-CH7-CHi)，1.75(m，6H，N+-CH7-CH2-CH7，Ph-CH7-CH2，)，1.55(bs，4H，N+-CH7-CH7-CH2)，1.05(t，3H，^7.2Hz，元素分析:C22H35C1N202，測(cè)量值C，66.79;H，8.68;N，7.04;理論值C，66.90;H，8.93;N，7.09。制備實(shí)施例4氯化9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6,9-二氮雜-螺[5.5十一烷的制備按照制備實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備，CL麗和嗎啡啉等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=15:1，得白色發(fā)泡狀固體，吸潮嚴(yán)重，收率56.4%。'HNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，/=8.1Hz，ArH)，6.90(d，2H，《/=8.4Hz，ArH)，3.85-3.94(m，6H，CH2-CHi，N-CH2)，3.67(m，4H，N-CH7-CH2)，3.54(m，4H，0-CH，-CH2)，3.38(m，4H，0-CH2)，2.45(t，2H，/=7.2Hz，Ph-CH2)，2.19(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH-CH7-CH2)，1.75(m，2H，Ph-CH-CH2)，1.05(t，3H，《/=7.2Hz，CH^-CH^元素分析C20H31ClN2O3'0.3H2O，測(cè)量值C，61.49;H，7.94;N，7.33;理論值C，61.86;H，8.20;N，7.21。制備實(shí)施例5氯化3-甲基-9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6,9-三氮雜螺[5.5十一垸的制備按照制備實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備，CLBM和N-甲基哌嗪等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=5:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率67.1%。1HNMR(D20，300MHz):7.06(d，2H，J二8.4Hz，ArH)，6.87(d，2H，J二8.4Hz'ArH)，3.85(q，2H，《/=7.2Hz，CH2-CHO，3.32-3.57(m，12H,Ph-N陽(yáng)CH^，N+-CH2)，2.70(bs，4H，CH，,-N-CH2)，2.42(t，2H，J-7.2Hz，Ph-CH2)，2.14-2.20(m，5H，N-CHVPh-CH2-CH2-CH2)，1.67-1.77(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.01(t，3H，J=7.2Hz，CH7-CH2)。元素分析C21H34ClN3O2'0.6H2O，測(cè)量值C，61,90;H，8.54;N，10.15;理論值C，62.01;H，8.72;N，10.33。制備實(shí)施例6氯化3-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.5十一垸的制備按照制備實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備，CLBM和六氫吡啶等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=8:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率66.9%。iHNMR(D20，300MHz):7.07(d，2H，/=8.7Hz，ArH)，6.87(d，2H，/=8.7Hz，ArH)，3.85(q，2H，/=7.2Hz，CH2-CHO，3.29-3.49(m，12H，Ph-N-涯，N+-CH2)，2.42(t，2H，J二7.2Hz，Ph-CH2)，2.17(t，2H，■/=7.2Hz，Ph-CH2-CH2-涯)，1.70-1.74(m，6H，Ph-CHrCH^N+-CH7-CH2-CH7)，1.52-1.57(m，2H，N+-CH，-CH7-CH2)，1.02(t，3H，7=7.2Hz，CH7-CH2)。元素分析C21H33ClN2O2'0.5H2O，測(cè)量值C，64.99;H，8.49;N，6.86;理論值C，64.68;H，8.79;N，7.18。制備實(shí)施例7氯化8-(4，-乙氧羰丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.51癸烷的制備按照制備實(shí)施例1中的方法進(jìn)行制備，CLBM和四氫吡咯等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=10-.1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率63.0%。iHNMR(D20，300MHz):7.07(d，2H，8.4Hz，ArH)，6.89(d，2H，J-8.4Hz，ArH)，3.85(q，2H，J-7.2Hz，CH2-CH》，3.43-3.51(m，8H，Ph-N-CHpN+-CH2-CH7-CH7-N)，3.32(bs，4H，N+-CH2-CH7-CH7)，2.43(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH2)，2.17(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH2-CH2-CH2)，2.05(bs，4H，N+-CH-CH2-CH7)，1.68-1.78(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.02(t，3H，J二7.2Hz，CH"CH二)。元素分析C2()H31C1N202'1.3H20，測(cè)量值C，61.38;H，8.56;N，6.92;理論值C，61.54;H，8.68;N，7.18。制備實(shí)施例8氯化4-(4，-甲氧羰丙基苯基)-1,1-二甲基-1，4-二氮雜環(huán)己烷的制備將CLBM1(2.0g，6mmo1)、二甲胺鹽酸鹽(0.6g，7mmo1)、40ml甲醇和碳酸氫鈉(5.0g，59mmo1)的混合液攪拌并加熱回流24小時(shí)，TLC顯示大部分原料已反應(yīng)完，過(guò)濾除去多余碳酸氫鈉，減壓蒸干濾液，加20ml水溶解，乙酸乙酯提取兩次(15mlx2)，水層減壓蒸干，甲醇-乙酸乙酯重結(jié)晶，得l.lg白色針狀結(jié)晶，收率53.5%，Mp:210-216°C。'HNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，J-8.7Hz，ArH)，6.90(d，2H，J-8.7Hz，ArH)，3.44(bs，7H，N-CH2，0-CH3)，3.37(m，4H，N+-CH2)，3.08(s，6H，N+-CHP,2.44(t，2H，《/=7.2Hz，Ph-CH2)，2.20(t，2H，《/=7.2Hz，Ph-CH7-CH7-CH2)，1.71-1.76(m，2H，Ph-CH7-CH2)。元素分析C17H27C1N202.H20，測(cè)量值C，59.42;H，8.43;N，7.99;理論值C，59.20;H，8.48;N，8.12。制備實(shí)施例9氯化2，4-二甲基-9-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5j十一烷的制備按照制備實(shí)施例8中的方法進(jìn)行制備，CLBM1和2，6-二甲基嗎啡啉等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理得白色片狀結(jié)晶，收率67.6%，Mp:249-253°C。iHNMR(D20，300MHz):7.07(d，2H，/=8.1Hz，ArH)，6.88(d，2H，J=8,lHz，ArH)，4.09-4.15(m，2H，O-CH)，2.90-3.76(m，15H，N-C%N+-CH2，0-CH2)，2.43(t，2H，J^7.2Hz,Ph-巡)，2.19(t，2H，J=7.2Hz,Ph-CH"CH7-CH2)，1.70-1.77(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.07(d，6H，J-，0-CH-CH3)。元素分析C21H33C1N203，測(cè)量值C，63.78;H，8.12;N，6.99;理論值C，63.54;H，8.38;N，7.06。制備實(shí)施例10氯化3-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺5.6十二垸的制備按照制備實(shí)施例8中的方法進(jìn)行制備，CLBM1和氮雜環(huán)庚垸等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理得白色片狀結(jié)晶，收率72.3%，Mp:217-221°C。!HNMR(D20，300MHz):7.10(d，2H，J=8.7Hz，ArH)，6.92(d，2H，JUHz，ArH)，3.36-3.48(m，15H，O-CHN-CH匸，N+-CH2)，2.46(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH2)，2.20(t，2H，J"=7.2Hz，Ph-CH7-CH-CH2)，1.78(m，6H，N+-CH7-CH2-CH7，Ph-CH2U，1.56(bs，4H，N+-CH7-CH-CH2)。元素分析C21H33C1N202，測(cè)量值C，66.22;H，8.48;N，7.25;理論值C，66.21;H，8.73;N，7.35。制備實(shí)施例11氯化9-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.51十一烷的制備按照制備實(shí)施例8中的方法進(jìn)行制備，CLBM1和嗎啡啉等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=15:1，得白色發(fā)泡狀固體，吸潮嚴(yán)重，收率40.2%。^NMR(D20，300MHz):7.08(d，2H，>/=8.4Hz，ArH)，6.89(d，2H，J^8.4Hz，ArH)，3.91(m，4H，N-CH2)，3.66(m，4H，N-CH7-CH2)，3.53(m，4H，0-CH7-CH2)，3.44(s，3H，O-CH!),3,37(m，4H，0-CH2)，2.44(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CH2)，2.00(t，2H，J^7.2Hz，Ph-CH2-CH2-CH2)，1.73(m，2H，Ph-CH7-CH2)。元素分析C19H29C1N203，測(cè)量值C，61.67;H，7.98;N，7.24;理論值C，61.86;H，7.92;N，7.59。制備實(shí)施例12氯化3-甲基-9-(4'-甲氧羰丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5十一垸的制備按照制備實(shí)施例8中的方法進(jìn)行制備，CLBM1和N-甲基哌嗪等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=5:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率46.9%。'HNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，《/=8.1Hz，ArH)，6.90(d，2H，J:8.1Hz，ArH)，3.37-3.60(m，15H，Ph-N-CH"O-CHN+-CH2)，2.74(bs，4H，CH，'-N-CH2)，2.45(t，2H，/=7.2Hz，Ph-CH2)，2.19-2.23(m，5H，N-CH3，Ph-CH7-CH-CH2)，1.72-1.77(m，2H，Ph-CH7-CH2)。元素分析C2()H32C1N302'H20，測(cè)量值C，60.20;H，8.45;N，10.31;理論值C，60.06;H，8.57;N，10.51。制備實(shí)施例13氯化3-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3,6-二氮雜螺[5.5]十一烷的制備按照制備實(shí)施例8中的方法進(jìn)行制備，CLBM1和六氫吡啶等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=8:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率58.1%。'HNMR(D20，300MHz):7.07(d，2H，/=8.4Hz，ArH)，6.88(d，2H，J=8.4Hz，ArH)，3.44-3.49(m，7H，Ph陽(yáng)N-CI^，O-CH!),3.29-3.36(m，8H，N+-CH2)，2.42(t，2H，《/=7.2Hz，Ph-CH2)，2.19(t，2H，^7.2Hz，Ph-CH-CH-CH2)，1.66-1.76(m，6H，N+-CH7-CH2-CH"Ph-CH2-^M2)，1,52-1,58(m，2H，N+-CH-CH7-CH2)。元素分析C2。H31C1N202，測(cè)量值C，65.45;H，8.80;N，7.75;理論值C，65.47;H，8.52;N，7.63。制備實(shí)施例14氯化8-(4，-甲氧羰丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5癸烷的制備按照制備實(shí)施例8中的方法進(jìn)行制備，CLBM1和四氫吡咯等摩爾量反應(yīng)，經(jīng)后處理再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=10:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率55.7%。iHNMR(D20，300MHz):7.08(d，2H，J=8.7Hz，ArH)，6.90(d，2H，/:8.7Hz，ArH)，3.33-3.49(m，15H，0-CH^，Ph-N-涯，N+-CH2)，2.43(t，2H，J^7.2Hz，Ph-CH2)，2.19(t，2H，《/=7.2Hz，Ph-CH7-CH7-CH2)，2.05(bs，4H，N+-CH"CH2-CH7)，1.68-1.77(m，2H，Ph-CH7-CH2)。元素分析C19H29ClN2O2.0.5H2O，測(cè)量值C，63.13;H，8.73;N，7.78;理論值C，63.06;H，8.36;N，7.74。制備實(shí)施例15氯化4-(4，-羧丙基苯基)-1,1-二甲基-1，4-二氮雜環(huán)己烷的制備向100ml圓底瓶中加入化合物8(制備實(shí)施例8)(1.2g，3.7mmo1)和20ml四氫呋喃，用2N氫氧化鈉水溶液調(diào)pH至12-13，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，1N稀鹽酸中和后過(guò)濾，減壓蒸去溶劑，以水-丙酮重結(jié)晶，得白色針狀結(jié)晶0.4g，收率35.2%，Mp:235-236°C。'HNMR(D20，300MHz):7.10(d，2H，■/=8.7Hz，ArH)，6.91(d，2H，A8.7Hz，ArH)，3.37-3.47(m，8H，N+-CH2-CH2)，3.09(s，6H，N十-迅)，2.46(t，2H，《/=7.5Hz，Ph-CH2)，2.20(t，2H，J=7.5Hz，Ph-CH-CH7-CH2)，1.70-1.77(m，2H，Ph-CH7-CH2)。元素分析C16H25C1N202，測(cè)量值C，61.33;H，7.98;N，8.73;理論值C，61.43;H，8.05;N，8.95。22制備實(shí)施例16氯化2,4-二甲基-9-U，-羧丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5十一烷的制備以化合物9(制備實(shí)施例8)為原料，按照制備實(shí)施例15中的方法進(jìn)行制備，收率30.1%，結(jié)晶易吸潮，無(wú)Mp。iHNMR(D20，300MHz):7.11(d，2H，《/=8.7Hz，ArH)，6.90(d，2H，《/=8.7Hz，ArH)，4.11-4.16(m，2H，O-CH)，2.92-3.75(m，12H，N-CH匸，N+-CH2)，2.45(t，2H，《/=7.2Hz，Ph-CH2)，2.17(t，2H，J=7.2Hz，Ph-CHyCH7-CH2)，1.67-1.76(m，2H，Ph-CH7-CH2)，1.09(d，6H，/=6.0Hz，O-CH-巡)。元素分析C20H31ClN2O3.0.5H2O，測(cè)量值C，61.21;H，7.86;N，7.20;理論值C，61.29;H，8.23;N，7.15。制備實(shí)施例17氯化3-(4，-羧丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二烷的制備以化合物10(制備實(shí)施例10)為原料，按照制備實(shí)施例15中的方法進(jìn)行制備，得無(wú)色片狀結(jié)晶，測(cè)熔點(diǎn)時(shí)發(fā)現(xiàn)在238。C顏色加深，分解，收率26.9%。iHNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，J二8.7Hz，ArH)，6.89(d，2H，J二8.7Hz，ArH)，3.35-3.47(m，12H,N-CH^，N+-CH2)，2.44(t，2H，J^7.2Hz,Ph-CH2)，2.18(t，2H，J=7.2Hz,Ph-CH-CH7-CH2)，1.66-1.76(m，6H，Ph-CH2-QM2，N+-CH7-CH2-CH7)，1.54(bs，4H，N+-CH7-CH7-CH2)。元素分析C20H31ClN2O2，測(cè)量值C，65.51;H，8.24;N，7.60;理論值C，65.47;H，8,52;N，7.63。制備實(shí)施例18氯化9-(4'-羧丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.51十一烷的制備以化合物ll(制備實(shí)施例ll)為原料，按照制備實(shí)施例15中的方法進(jìn)行制備，再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇(加少量乙酸)=5:1，得白色發(fā)泡狀固體，吸潮嚴(yán)重，收率16.9%。'HNMR(D20，300MHz):7.10(d，2H，J=8.4Hz，ArH)，6.89(d，2H，J二8.4Hz，ArH)，3.90(bs，4H，N-CH2)，3.64(bs，4H，N-CH2-￡M2)，3.52(bs，4H，0-CH7-CH2)，3.36(bs，4H，0-CH2)，2.40(t，2H，/二7.5Hz,Ph-CH2)，2.00(t，2H，J^7.5Hz,Ph-CH7-CH7-CH2)，1.60-1.70(m，2H，Ph-CH2-涯)。元素分析C18H27C1N203'2.2H20，測(cè)量值C，54.63;H，7.63;N，6.76;理論值C，54.80;H，8.02;N，7.10。制備實(shí)施例19氯化3-甲基-9-(4，-羧丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5十一垸的制備以化合物12(制備實(shí)施例12)為原料，按照制備實(shí)施例15中的方法進(jìn)行制備，再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇(加少量乙酸)=3:1，得白色發(fā)泡狀固體0.4g，易吸潮，收率21.5%。'HNMR(D20，300MHz):7.09(d，2H，J二8.1Hz，ArH)，6.87(d，2H，■/=8.1Hz，ArH)，3.32-3.55(m，12H，Ph-N-CH"N+-CH2)，2.71(bs，4H，CHrN-CH2)，2.39(t，2H，J=7.2Hz,Ph-CH2)，2.20(s，3H，N-CH3)，1.99(t，2H，J^7.2Hz,Ph-CH-CH7-CH2)，1.58-1.68(m，2H，Ph-CH，-CH2)。元素分析C19H3QClN3O2'0.5CH3OH'Al2O3，測(cè)量值C，48,28;H，6.66;N，8.28;理論值C，48.20;H，6.64;N，8.65。制備實(shí)施例20氯化3-(4，-羧丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.51十一烷的制備HOOC^^^/N\7以化合物13(制備實(shí)施例13)為原料，按照制備實(shí)施例15中的方法進(jìn)行制備，再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇(加少量乙酸)=5:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率27.0%。'HNMR(D20，300MHz):7.14(d，2H，/=8.4Hz，ArH)，6.90(d，2H，■/=8.4Hz，ArH)，3.34-3.49(m，12H，Ph-N-CH"N+-CH2)，2.45(t，2H，/=7.2Hz,Ph-CH2)，2.18(t，2H，/=7.2Hz,Ph-CH7-CH7-CH2)，1.66-1.76(m，6H，N+-CH7-CH2-CH7，Ph-CH7-CH2)，1.52-1.56(m，2H，N+-CH7-CH7-CH2)。元素分析C19H29ClN2O2'0.4H2O，測(cè)量值C，63.48;H，8.10;N，7.43;理論值C，63.37;H，8.34;N，7.78。制備實(shí)施例21氯化8-(4，-羧丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5癸垸的制備以化合物14(制備實(shí)施例14)為原料，按照制備實(shí)施例15中的方法進(jìn)行制備，再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇(加少量乙酸)=5:1，得白色發(fā)泡狀固體，易吸潮，收率47.9%。iHNMR(D20，300MHz):7.11(d，2H，J=8.7Hz，ArH，6.91(d，2H，/=8.7Hz，ArH)，3.35-3.77(m，12H，Ph-N扁CH^，N+-CH2)，2.46(t，2H，>/=7.2Hz,Ph-CH2)，2.17(t，2H，/=7.2Hz,Ph-CH7-CH7-CH2)，2.07(bs，4H，N+-CH7-CHrCH)，1.74-1.69(m，2H，Ph-CH7-CH2)。元素分析C18H27C1N202H20，測(cè)量值C，60.94;H，8.01;N，7.78;理論值C，60.58;H，8.19;N，7.85。制備實(shí)施例22氯化3-甲基-9-[4，-(l"，4"-二羥基-蒽-9"，10"-二酮-2"-基甲氧羰基丙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一垸的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>以CLB和2-(1,4-二羥基-蒽-9,10-二酮)基甲醇為原料，DCC為縮合劑在二氯甲垸中等摩爾反應(yīng)后，所得產(chǎn)物按照制備實(shí)施例1中的方法，和N-甲基哌嗪反應(yīng)，后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=8:1，得白色固體，易吸潮，收率60%。制備實(shí)施例23氯化3-甲基-9-[4，-(N-對(duì)氨基苯磺?；?N-2"-嘧啶基氨乙氧羰基丙基)苯基-3，6，9-三氮雜螺[5.5I十一烷的制備N-對(duì)氨基苯磺?；?N-2，-嘧啶基氨基乙醇代替2-(1，4-二羥基-蒽-9,10-二酮)基甲醇為原料，按照制備實(shí)施例22中的方法進(jìn)行制備，得白色固體，易吸潮，收率53%。制備實(shí)施例24氯化3-甲基-9-[4，-[5"-(3"，，4"，，5"，-三甲氧基苯乙烯基)-2"-甲氧基-苯氧羰基苯基丙基苯基-3，6，9-三氮雜螺[5.51十一烷的制備5-(3'，4，，5，-三甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基-苯酚代替2-(1,4-二羥基-蒽-9，10-二酮)基甲醇為原料，按照制備實(shí)施例22中的方法進(jìn)行制備，得白色固體，易吸潮，收率73%。制備實(shí)施例25氯化3-甲基-9-4，-(1，，,4"-二羥基-蒽-9"，lO"-二酮-2"-基甲氧羰基-甲酰氨基-乙基)苯基-3，6,9-三氮雜螺[5.5]十一垸的制備以甲酰溶肉瘤素和2-(1，4-二羥基-蒽-9,10-二酮)基甲醇為原料，DCC為縮合劑在二氯甲烷中等摩爾反應(yīng)后，所得產(chǎn)物按照制備實(shí)施例1中的方法，和N-甲基哌嗪反應(yīng)，后處理后再通過(guò)常壓氧化鋁柱色譜分離，洗脫劑乙酸乙酯甲醇=8:1，得白色固體，易吸潮，收率57%。本發(fā)明芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物的抗腫瘤活性試驗(yàn)一、材料與方法1.動(dòng)物ICR小鼠，雄性，18-22g，SPF級(jí)，購(gòu)自北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，食水不限，生活環(huán)境室溫25。C，室內(nèi)濕度45%-55%。2.腫瘤細(xì)胞株小鼠肉瘤180(S18。)和小鼠肝癌22，由天然藥物及仿生藥物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室藥理組細(xì)胞庫(kù)提供。3.LC5Q、LD^的測(cè)定取小鼠50只，10只/組，共5組。分別腹腔注射給藥不同濃度試驗(yàn)衍生物，給藥后觀察小鼠一般表現(xiàn)及死亡情況，連續(xù)觀察7-10天。4.實(shí)體腫瘤試驗(yàn)取小鼠(S，和H^腫瘤細(xì)胞，經(jīng)處理后將細(xì)胞稀釋為5X10Vml。在無(wú)菌條件下，按0.2ml/只的量接種于小鼠左前肢腋下。接種24h后，分組給藥(給藥劑量參見(jiàn)下表l)，每天腹腔注射給藥一次，連續(xù)10天。第12天剝瘤稱重，計(jì)算每組平均瘤重、標(biāo)準(zhǔn)差及P值。結(jié)果列于下表l中。二、氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物的抗腫瘤活性試驗(yàn)結(jié)果(1)通過(guò)上述試驗(yàn)，本發(fā)明實(shí)施例1、2、5、8、9、12、15、16、19、21和22的衍生物對(duì)ICR小鼠移植腫瘤株H22、S18。(i.p)的抑制作用結(jié)果如下表l:表l衍生物對(duì)ICR小鼠移植腫瘤株的抑制作用實(shí)對(duì)H22劉導(dǎo)對(duì)s180施介u里化合物結(jié)構(gòu)n(i.p)抑(i.p)抑例g制率(％)制率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>**P<0.01*P<0.05采用和對(duì)照組比較的成對(duì)學(xué)生t-檢驗(yàn)從表1中我們可以看出，與陽(yáng)性對(duì)照藥CLB相比，實(shí)施例中的季銨鹽衍生物對(duì)ICR小鼠移植腫瘤株H22、S18。(i.p)的抑制活性明顯，而且，在相同劑量甚至是更低劑量下，部分化合物的抗腫瘤活性高于苯丁酸氮芥或與其相當(dāng)，如實(shí)施例l、8、21、22等。所有實(shí)施例中合成的化合物由于結(jié)構(gòu)中含有季銨鹽結(jié)構(gòu)，在甲醇、乙醇等醇類溶劑和水中的溶解度都非常好，進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)過(guò)程中，均配置成水溶液后注射，而陽(yáng)性對(duì)照藥苯丁酸氮芥只能溶于DMSO后使用。這些結(jié)果表明，將氮芥部分改造成季銨鹽結(jié)構(gòu)后，可以保持/提高抗腫瘤活性，藥物開(kāi)發(fā)前景良好。(2)部分化合物的急性毒性研究<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>部分化合物的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物化合物連有季銨鹽結(jié)構(gòu)后，由于水溶性提高，毒性明顯小于苯丁酸氮芥(CXB)。權(quán)利要求1、通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽通式I其中，R1為H；飽和或不飽和的直鏈或支鏈烴基，所述烴基可以被選自鹵素、氨基、取代氨基、羥基、氰基、硝基、芳基和取代芳基的取代基任意取代；芳基或取代芳基；A為飽和或不飽和的直鏈或支鏈亞烴基，所述烴基可以被酰胺基取代；Ar為亞芳香基；R2、R3各自獨(dú)立的為氫或甲基；n和m為0～2的整數(shù)，且n與m不同時(shí)為0；B和D彼此獨(dú)立地表示C1-C3的直鏈或支鏈烷基、C1-C3的直鏈或支鏈亞烷基；Y為-CHR4-、-O-、-S-、-S(O)-、-SO2-、-NR4-、取代的或未取代的亞苯基，其中R4為H、具有1-6個(gè)碳原子的飽和或不飽和烷基、任意取代或未取代的芳基、或芳雜環(huán)取代的甲基或乙基；或者當(dāng)B和D都為烷基時(shí)，Y是不存在從，即此時(shí)是開(kāi)環(huán)的，并沒(méi)有形成螺環(huán)；X-為藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)負(fù)離子。2、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中W為飽和的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選碳原子數(shù)在16之間的垸基，更優(yōu)選優(yōu)原子數(shù)在13之間的垸基，如甲基、乙基、丙基等，優(yōu)選甲基和乙基；禾口/或其中R1為被取代氨基或取代芳基取代的烴基，例如為1,4-二羥基-蒽-9,10-二酮-2-基甲基或N-對(duì)氨基苯磺酰基-N-2-嘧啶基氨乙基；禾口/或其中W為5-(3，4，5-三甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基-苯基；和/或其中A為主鏈碳原子數(shù)《的飽和直鏈或支鏈亞烷基，更優(yōu)選為乙基或丙基；和/或通式I其中A為甲酰氨基-乙基。3、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中Ar為亞苯基，更優(yōu)選為對(duì)亞苯基。4、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中R2、W均為氫。5、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中n+n^2，更優(yōu)選n和m同時(shí)是l。6、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中B和D彼此獨(dú)立地表示-CH3、-CH2-、-CH2CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2CH2-或-CH2CH(CH3)-，更優(yōu)選B和D同時(shí)為-CH3、-(CH2)2-、-CH2CH(CH3)iCH2CH2CH2-。7、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中Y為-CHR4-、-O-、-S-、^&-或未取代的亞苯基，更優(yōu)選為-CH2-、-CH(CH3)-、-O-、-N(CH3)或-N(C2Hs);禾口/或所述R"為H或l-3個(gè)碳原子的垸基，更優(yōu)選為H、甲基或乙基；和/或當(dāng)所述的基團(tuán)Y為取代的或未取代的亞苯基時(shí)，Y是鄰亞苯基，其可以任意被選自-N02、-Me、-OMe、-CN、-C02H和-C02Et的取代基所取代。8、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中所述通式I化合物包括其立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體。9、如權(quán)利要求1的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，所述通式I化合物是氯化4-(4，-乙氧羰丙基苯基)-1，l-二甲基-l，4-二氮雜環(huán)己烷；氯化2，4-二甲基-9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化3-(4'-乙氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二垸；氯化9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.5]H^—垸；氯化3-甲基-9-(4，-乙氧羰丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一烷;氯化3-(4'-乙氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化8—(4，-乙氧羰丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5]癸烷；氯化4-(4'-甲氧羰丙基苯基)-1，l-二甲基-l，4-二氮雜環(huán)己垸；氯化2，4-二甲基-9-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化3_(4'—甲氧羰丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二垸(10);氯化9_(4'-甲氧羰丙基苯基)—3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.5]H^—垸；氯化3-甲基-9-(4，-甲氧羰丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一烷；氯化3_(4'_甲氧羰丙基苯基)_3，6-二氮雜螺[5.5]十一垸；氯化8_(4'-甲氧羰丙基苯基)_5，8-二氮雜-螺[4.5]癸垸；氯化4-(4'-羧丙基苯基)-1,l-二甲基-l，4-二氮雜環(huán)己垸；氯化2，4-二甲基-9-(4，-羧丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜螺[5.5]十一院；氯化3-(4'-羧丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.6]十二烷；氯化9-(4，-羧丙基苯基)-3-氧雜-6，9-二氮雜-螺[5.5]十一烷；氯化3-甲基-9-(4'-羧丙基苯基)-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一垸;氯化3-(4'-羧丙基苯基)-3，6-二氮雜螺[5.5]十一烷；氯化8—(4'-羧丙基苯基)-5，8-二氮雜-螺[4.5]癸垸；氯化3-甲基-9-[4'-(l"，4"-二羥基-蒽-9"，10"-二酮-2"-基甲氧羰基丙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—烷；氯化3-甲基-9-[4，-(N-對(duì)氨基苯磺?；?N-2"-嘧啶基氨乙氧羰基丙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—烷；氯化3-甲基-9-[4，-[5"-(3"，,4，"，5，"-三甲氧基苯乙烯基)-2"-甲氧基-苯氧羰基苯基丙基]苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]十一烷；或氯化3-甲基-9-[4，-(r，，4"-二羥基-蒽-9"，10"-二酮-2"-基甲氧羰基-甲酰氨基-乙基)苯基]-3，6，9-三氮雜螺[5.5]H^—垸。10、權(quán)利要求l一9的通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽或含有其的混合物在制造藥物中的用途，所述藥物用于抗腫瘤，尤其是惡性腫瘤，例如實(shí)體瘤、急性白血病等惡性腫瘤。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了通式I的芳香氮芥類哌嗪季銨鹽衍生物或其藥學(xué)可接受的鹽，其中，R¹為H；飽和或不飽和的直鏈或支鏈烴基，所述烴基可以被選自鹵素、氨基、取代氨基、羥基、氰基、硝基、芳基和取代芳基的取代基任意取代；芳基或取代芳基；A為飽和或不飽和的直鏈或支鏈亞烴基，所述烴基可以被酰胺基取代；Ar為亞芳香基；R²、R³各自獨(dú)立的為氫或甲基；n和m為0～2的整數(shù)，且n與m不同時(shí)為0；B和D彼此獨(dú)立地表示C₁-C₃的直鏈或支鏈烷基、C₁-C₃的直鏈或支鏈亞烷基；Y為-CHR₄-、-O-、-S-、-S(O)-、-SO₂-、-NR⁴-、取代的或未取代的亞苯基，其中R⁴為H、具有1-6個(gè)碳原子的飽和或不飽和烷基、任意取代或未取代的芳基、或芳雜環(huán)取代的甲基或乙基；或者當(dāng)B和D都為烷基時(shí)，Y是不存在從，即此時(shí)是開(kāi)環(huán)的，并沒(méi)有形成螺環(huán)；X^-為藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)負(fù)離子。文檔編號(hào)A61K31/4985GK101440073SQ20071017800公開(kāi)日2009年5月27日申請(qǐng)日期2007年11月23日優(yōu)先權(quán)日2007年11月23日發(fā)明者崎孫,崔景榮,功李,李潤(rùn)濤,程鐵明,葛澤梅申請(qǐng)人:北京大學(xué)