專利名稱：：一種治療心衰的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種治療心衰的藥物組合物，屬藥物領域。
背景技術：
：附子配伍干姜為中醫(yī)藥古今臨床應用頻率很高的對藥，附子干姜湯，首見于《傷寒論'太陽病篇》。附子辛溫大熱，《本草經(jīng)讀》曰"味辛氣溫，火性迅發(fā)，溫里回陽較強，可使心陽振奮。無所不到，故為回陽救逆第一品藥。"干姜辛溫，《傷寒藥性賦》謂其"能去沉寒"。正因為附子走而不守，干姜守而不走，兩者互補性極強，古人又有"附子無姜不熱"之說。附子、干姜均能入心經(jīng)回心陽，心陽得救則神不外越，故有回陽勿忘治心之說。近年來，現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)以附子、干姜配伍為主的四逆湯具有明顯的強心、抗休克、改善微循環(huán)等作用，說明亡陽證與心力衰竭、休克、微循環(huán)障礙等有關。臨床上，附子配伍干姜也常與其它藥加減應用治療心衰、心肌梗死、休克、竇性心動過緩、急性肺心病等。在現(xiàn)代臨床中，附子常用于救治急性心肌梗塞所致的休克、低血壓狀態(tài)、冠心病及風心病等，均有很好療效，這均與其具有增強心肌收縮力、抗心律失常等心血管方面的作用有關。楊帆，林樹新，張福琴，等.四川江油附子提取物抗失血性休克的作用研究[J].第四軍醫(yī)大學學報，1996，17(2):116，表明附子水溶性部分分離獲得的尿嘧啶類化合物具有抗失血性休克的作用。其主要作用機理是增強心肌收縮力，提高心輸出量與平均動脈血壓，并可提高休克后大鼠存活率。張梅，張藝，陳海紅，等.附子抗心律失常有效組分研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2000，11(3):193-194，對附子抗心律失常有效組分的研究結果表明，附子正丁醇提取物、乙醇提取物及水提物均對氯仿所致小鼠室顫有預防作用，其中尤以水提物作用最為明顯。干姜為溫里之藥，具有溫經(jīng)止痛、溫通血脈、回陽救逆、溫中散寒、溫肺止咳等功效，現(xiàn)代藥理研究其有鎮(zhèn)痛消炎、抗變態(tài)反應、抗栓抗凝、調節(jié)血液循環(huán)系統(tǒng)、抗缺氧、鎮(zhèn)吐、促消化、止瀉、保肝等作用。王夢，錢紅美，蘇簡單.干姜乙醇提取物解熱鎮(zhèn)痛及體外抑菌作用研究.中藥新藥與臨床藥理，2001，14(5):299-301，等采用小鼠耳殼腫脹法，傷寒、副傷寒甲乙三聯(lián)菌苗導致家免發(fā)熱反應以及小鼠扭體法觀察干姜醇提物的抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用。朱林平。附子毒性研究概況.江西中醫(yī)藥，2004，35(6):53-55，從附子毒性的相關因素進行了總結，認為附子毒性與品種及采摘季節(jié)、炮制、劑量、煎煮方法與時間、配伍不當、蓄積性中毒等有關。附子的毒效關系非常密切。附子有明顯的常壓耐缺氧作用，附子除去毒性生物堿后，常壓耐缺氧作用減弱，甚至消失；附子也有較強的鎮(zhèn)痛作用，附子除去毒性成分后，其鎮(zhèn)痛作用明顯減弱。附子所含烏頭堿對心臟的毒性最為明顯，其機理一是興奮迷走神經(jīng)，二是直接對心臟的毒性作用，引起心律失常。藥理試驗證實附子中所含的生物堿毒性較大，但毒性成分遇熱能分解，較長時間的浸泡和煎煮能將其水解成毒性較小的苯甲酰烏頭原堿(Benzoylaconine)類生物堿，進而分解為毒性更小的烏頭原堿(Aconine)類生物堿(李榮宗.附子、川烏、草烏的合理炮制經(jīng)驗[J].海峽藥學，2001，13(2):49)，從而降低其毒性。姜附相配，除可增強回陽救逆的功效外，傳統(tǒng)認為還能降低附子的毒性。歷代有關姜附配伍用于回陽救逆的方劑較多。實驗研究表明，附子具有明顯的心血管藥理作用，可強心、降壓、擴張血管、抗休克；干姜煎劑則無明顯的強心作用。二者配伍，干姜可使附子強心作用明顯增強(許信國.經(jīng)方附子應用的探討.北京中醫(yī)雜志，1986,(3):33)。上述報道均是含有附子、干姜的大處方制劑，沒有僅僅使用附子、干姜配伍的相關報道，且由于附子、干姜中的藥效成分復雜，發(fā)揮藥效的成分的部位均不確定，目前也沒有報道將其中有效部分配伍使用，達到減毒增效的相關報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的技術方案是提供了一種治療心衰的藥物組合物，本發(fā)明的另一技術方案是提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明提供了一種治療心衰的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿1-5份、干姜有效部位1-2份，所述的干姜有效部位為干姜提取物、干姜揮發(fā)油。其中，干姜提取物，總姜酚含量以辣椒素計15%w/w;干姜揮發(fā)油，在硅膠薄層色譜條件下，與干姜對照藥材揮發(fā)油在相同位置有相同斑點。附子總生物堿、干姜提取物、干姜揮發(fā)油的提取制備方法可以按教科書或文獻公開的方法提取制備，如肖崇厚.中藥化學.上?？茖W技術出版社.1997;邱琴，張國英，劉辛欣,等.超臨界2流體萃取法與水蒸氣蒸餾法提取干姜片揮發(fā)油化學成分的比較.上海中醫(yī)藥雜志.2005:39(3);王夢，錢紅美，蘇簡單.干姜乙醇提取物解熱鎮(zhèn)痛及體外抑菌作用研究，2001;14(5):299;陳鹽生，林玉蓮.干姜與炮姜揮發(fā)油成分比較.南京中醫(yī)藥大學學報，1999;15(6):378;余成浩.烏頭類有毒中藥常用配伍藥對的物質基礎研究.成都中醫(yī)藥大學2006級博士學位論文.指導教師，彭成。其中，所述的附子總生物堿中，總生物堿含量以烏頭堿計為100150mg/ml。進一步優(yōu)選地，所述的附子總生物堿中，總生物堿含量以烏頭堿計為127.6mg/ml。進一歩優(yōu)選地，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿1-2份、干姜提取物或干姜揮發(fā)油1份。其中，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿2份、干姜提取物1份。其中，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿1份、干姜揮發(fā)油1份。其中，所述的藥劑是片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或口服液。本發(fā)明還提供了一種制備治療心衰的藥物組合物的方法，包括如下步驟a、附子總生物堿1-5份、干姜有效部位l-2份，所述的干姜有效部位為干姜提取物、干姜揮發(fā)油；b、混合，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。本發(fā)明還提供了該藥物組合物在制備治療心衰的藥物中的用途。附子總生物堿既是附子的主要毒性組分，又是附子發(fā)揮回陽救逆功效的主要有效組分，其毒效關系異常密切。附子總生物堿與干姜提取物2:1配伍、附子總生物堿與干姜揮發(fā)油1:l配伍時，具有減毒增效作用，藥效明確，毒性低，為臨床提供了一種新的選擇。具體實施例方式實施例1本發(fā)明藥物的制備方法取原料附子100g、干姜100g，加至10倍量水煎煮，煮沸后煎6h傾出上清液，過濾，然后濃縮至相當于每毫升含lg附子，加入淀粉制粒，加入硬脂酸鎂，壓片，得片劑。實施例2本發(fā)明藥物的制備取原料附子500g、干姜200g，按實施例l的方法提取，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例3本發(fā)明藥物的制備取原料附子100g、干姜200g，按常規(guī)藥材提取方法或實施例1的方法提取，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例4本發(fā)明藥物的制備取市售附子總生物堿500g、干姜提取物100g，加入淀粉、糊精，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例5本發(fā)明藥物的制備取市售附子總生物堿100g、干姜提取物100g，加入淀粉、糊精，制粒，壓片，得片劑。實施例6本發(fā)明藥物的制備取市售附子總生物堿500g，干姜揮發(fā)油200g，加入淀粉、糊精，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例7本發(fā)明藥物的制備取市售附子總生物堿300g，干姜揮發(fā)油200g，加入淀粉、糊精，制粒，裝膠囊，得膠囊劑。實施例8本發(fā)明藥物的制備取市售附子總生物堿100g，干姜揮發(fā)油100g，加入淀粉、糊精，制粒，壓片，得片劑。以下通過具體藥效學試驗證明本發(fā)明的有益效果。試驗例1本發(fā)明藥物中原生藥材附子干姜配伍試驗一、左心室內(nèi)壓最大上升速率的變化試驗表l心衰大鼠左心室內(nèi)壓最大上升速率的變化C1士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與空白對照組比較^P〈0.001;與模型對照組比較Ap〈0.05，AAP〈0.01，P〈0.0013.5附子千姜配伍左心室內(nèi)壓最大下降速率的變化表2心衰大鼠左心室內(nèi)壓最大下降速率的變化(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與空白對照組比較，PO.001;與模型對照組比較AP0.05,"P0.01,PO.0013.6附子干姜配伍左心室內(nèi)壓的變化表3心衰大鼠左心室—內(nèi)壓的變化(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與空白對照組比較，PO.001;與模型對照組比較ApO.05,"PO.01PO,OOl3.7附子干姜配伍左心室舒張末期壓的變化表4心衰大鼠左心室舒張末期壓的變化(5士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與空白對照組比較^P〈0.001;與模型對照組比較AP0.05,"P〈0.013.8附子干姜配伍心率的變化—表5心衰大鼠心率的變化(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與空白對照組比較，PO.001;與模型對照組比較AP0.05"P0.014.實驗結論SD大鼠于股靜脈注射鹽酸普羅帕酮注射液(16.5mg/kg)造模后，于十二指腸給藥附子和干姜各有效組分附子干姜各單組分，動物左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)、左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)及心率(服)均有不同程度的升高，其中附子總堿于十二指腸給藥藥效最好，其次是附子多糖，再次是附子水堿。干姜提取物和干姜揮發(fā)油對于SD大鼠于股靜脈注射鹽酸普羅帕酮注射液(16.5mg/kg)造模后藥效不甚顯著。上述試驗表明，附子配伍干姜煎劑對大鼠左室內(nèi)壓最大上升、下降速率均有不同程度改善，其中1:1，5:2組與急性心衰模型組比較有顯著性差異，提示附子配伍千姜可能通過增強心肌收縮力，從而起到改善心功能，增強其回陽救逆的作用；1:1，2:1，5:2組與急性心衰模型組比較，還有不同程度降低腎素、血管緊張素、醛固酮、心鈉素、內(nèi)皮素的作用。試驗例2本發(fā)明附子總生物堿與干姜有效部位配伍減毒作用的實驗1、附子、干姜減毒作用組分配伍的選擇從上述附子、干姜單組分急性毒性研究結果表明附子的毒性組分主要為附子總生物堿，附子水溶性生物堿、附子多糖、干姜揮發(fā)油、干姜提取物均未見明顯毒性。因此，在進行減毒作用的組分配伍選擇時，主要選擇毒性較大的附子總生物堿，分別與干姜揮發(fā)油、干姜提取物配伍進行減毒研究。在減毒作用組分配伍比例的選擇上，采用附子總生物堿與干姜揮發(fā)油、干姜提取物配伍l:1、2:1、1:2、5:2四個比例進行組分配伍的減毒研究，確定附子、干姜組分配伍與附子、干姜飲片配伍減毒作用之間的關系。2、實驗材料2.1藥物附子總生物堿，每ml相當于原生藥lkg，總生物堿含量為127.6mg/ml(以烏頭堿計)；干姜提取物，每ml相當于原生藥2g;干姜揮發(fā)油，每ml相當于原生藥40g。均由成都中醫(yī)藥大學中藥化學教研室提供。實驗時所有受試藥物均配成每ml相當于原生藥lg備用，然后在實驗前半小時以附子總生物堿半數(shù)致死量與干姜提取物、干姜揮發(fā)油的不同配伍比例配成1:1、1:2、2:1、5:2共8個比例的組分配伍備用。2.2動物昆明種小鼠，雌雄各半，體重1822g，由成都中醫(yī)藥大學實驗動物研究中心提供，合格證號川實動管04-11。檢疫后備用。2.3儀器PA2003電子天平，上海天平儀器廠生產(chǎn)。3、實驗方法取昆明種小鼠72只，雌雄各半，隨機分為空白組(N=8)、附子總堿與干姜提取物配伍l:l組(N=8)、h2組(N=8)、2:l組(N=8)、5:2組(N=8)，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:l組(N=8)、1:2組(N=8)、2:1組(N=8)、5:2組(N=8)。禁食不禁水12hr，附子總堿干姜提取物組1:1(0.25ml總堿+0.25ml干姜提取物)；附子總堿干姜提取物組2:1(0.5ml總堿+0.25ml干姜提取物)；附子總堿干姜提取物組1:2(0.25ml總堿+0.50ml干姜提取物)；附子總堿千姜提取物組5:2(0.5ml總堿+0.20ml干姜提取物)；附子總堿干姜揮發(fā)油組l:1(0.25ml總堿+0.25ml干姜揮發(fā)油)；附子總堿干姜揮發(fā)油組2:1;(0.50ml總堿+0.25ml干姜揮發(fā)油)；附子總堿干姜揮發(fā)油組l:2(0.25ml總堿+0.50ml干姜揮發(fā)油)；附子總堿干姜揮發(fā)油組5:2(0.50ml總堿+0.20ml干姜揮發(fā)油)。所有受試藥物組均以每次最大容積0.40ml/10g.B.W的劑量灌胃，3次/d，連續(xù)14d。觀察記錄動物有無死亡及毒性反應4、實驗結果存活動物的體重逐漸增長，小鼠發(fā)育正常、被毛濃密有光澤且緊貼身體、呼吸正常、精祌萎靡、食欲欠佳，無異常分泌物，肛周潔凈，自發(fā)活動減少。昆明種小鼠在第一次給藥后，附子總堿配伍干姜提取物1:1(0.25ml總堿+0.251111干姜提取物)，1:2(0.25ml總堿+0.5ml干姜提取物)中，分別有2只及1只動物死亡；在第二次給藥后，附子總堿配伍干姜提取物1:1(0.25ml總堿+0.25ml干姜提取物，即半數(shù)致死量)，1:2(0.25ml總堿+0.5ml干姜提取物)中，分別又有2只及1只動物死亡；在第三次給藥后，附子總堿配伍干姜揮發(fā)油5:2(0.50ml總堿+0.20ml干姜揮發(fā)油)比例有1只動物死亡。肉眼尸解動物普遍見腸腔充血，肉眼心、腦、肝腎及其他組織未見明顯異常。其他比例組分配伍未發(fā)現(xiàn)動物死亡。結束后解剖存活小鼠，各主要臟器均未見異常。各組體重變化詳見表6。表6:附子干姜組分配伍對小鼠體重和存活的影響(I士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>上述配伍減毒試驗說明，在附子總堿+干姜提取物在2:l、1-5:2時，均能達到減輕附子總堿毒性的作用；附子總堿與干姜揮發(fā)油在1:1、(1-5):(1-2)配比時，均能達到減輕附子總堿毒性的作用。試驗例3本發(fā)明附子總生物堿與干姜有效部位增效作用組分配伍的選擇附子對急性心衰陽虛大鼠發(fā)揮回陽救逆作用的有效組分主要為附子總生物堿，附子水溶性生物堿、附子多糖、干姜揮發(fā)油、干姜提取物對急性心衰陽虛大鼠的回陽救逆作用不明顯。在進行增效(回陽救逆)作用的組分配伍選擇時，主要選擇回陽救逆作用明顯的附子總生物堿，分別與干姜揮發(fā)油、干姜提取物配伍進行增效(回陽救逆)研究。采用附子總生物堿與干姜揮發(fā)油、干姜提取物配伍l:1、2:1、1:2、5:2四個比例進行組分配伍的增效(回陽救逆)作用研究，探討附子、干姜組分配伍與附子、干姜飲片配伍增效作用之間的關系。1、實驗材料Ll藥物受試藥物附子總生物堿，每ml相當于原生藥lkg，總生物堿含量為127.6mg/ml(以烏頭堿計)；干姜提取物，每ml相當于原生藥2g;干姜揮發(fā)油，每ml相當于原生藥40g。均由成都中醫(yī)藥大學中藥化學教研室提供。實驗時所有受試藥物均配成每ml相當于原生藥lg備用，然后在實驗前半小時以附子總生物堿相當于原生藥10倍量(2.5ml/kg)，分別與干姜提取物、干姜揮發(fā)油配成l:1、1:2、2:1、5:2共8個比例的組分配伍備用。陽性對照藥物參附注射液雅安三九藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號國藥準字Z51020664,規(guī)格10ml/支。造模藥物鹽酸普羅帕酮注射液廣州白云山明興制藥廠生產(chǎn)，批號030501規(guī)格35mg/10ml。1.2實驗動物健康SD大鼠，雌雄均有，體重250士20g，動物生產(chǎn)許可證號04-11。均由成都中醫(yī)藥大學實驗動物研究中心提供，檢疫后備用。1.3實驗儀器光電分析天平:上海第二天平儀器廠提供BL-420四道生理記錄儀成都泰盟科技有限公司提供；LDR4-8.4型低速冷凍離心機北京醫(yī)用離心機廠；針狀電極；壓力換能器；塑料三通開關；心室插管；動脈夾；止血鉗；眼科剪；鑷子；手術刀；注射器；灌胃器；電子天平；秒表；濾紙。1.4實驗試劑75%乙醇成都天華科技服務股份有限公司生產(chǎn)，GB/T679-2002,生產(chǎn)批號20060017，規(guī)格250ml/瓶。肝素鈉天津化學制藥廠生產(chǎn)，批準文號津衛(wèi)藥準字第001562號，規(guī)格6250u/ml，每支2ml。2、實驗方法附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠血流動力學的實驗研究取健康SD大鼠66只，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物l:l組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物1:2組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物2:1組(N:::6)、附子總生物堿與干姜提取物5:2組(^6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油h1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:2組(N二6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油2:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油5:2組(N=6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法同附子、干姜單組分回陽救逆功效的實驗研究。附子總生物堿與干姜提取物1:1組按0.5g/100g給予、附子總生物堿與干姜提取物l:2組按0.75g/100g給予、附子總生物堿與干姜提取物2:l組按0.375g/100g給予、附子總生物堿與干姜提取物5:2組按0.35g/100g給予；附子總堿與干姜揮發(fā)油l:1組按0.5g/100g給予、附子總堿與干姜揮發(fā)油l:2組按0.75g/100g給予、附子總堿與干姜揮發(fā)油2:1組按0.375g/100g給予、附子總堿與干姜揮發(fā)油5:2組按0.35g/100g給予。(受試藥物組給藥劑量相當于人用生藥量的10倍)于十二指腸給藥。陽性藥物組經(jīng)股靜脈按6.67ml/kg給予參附注射液(相當于人用量10倍)。模型藥物組經(jīng)十二指腸給予等量蒸餾水。分別觀察給藥后5min、10min、15min、20min、25min、30min、35min、40min、50min、60min藥物對左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)、左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/d加ax)及心率(HR)的影響。參數(shù)設定心電增益G500倍，時間常數(shù)T0.1S,濾波F300Hz，掃描速度200ms/div，左心室內(nèi)壓增益G50倍，時間常數(shù)TDC，濾波F30Hz，掃描速度200ms/div，左心室微分內(nèi)壓增益G100倍，時間常數(shù)TDC,濾波F10Hz，掃描速度200ms/div。實驗數(shù)據(jù)資料用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理。3、實驗結果干姜組分配伍對急性心衰大鼠血流動力學的影響(1)對急性心衰陽虛大鼠心率的影響分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍l:1、2:1、1:2、5:2后，各組在各個時間段對急性心力衰竭大鼠心率均有一定程度的提高。除附子總生物堿與干姜提取物配伍h2組各時間段與模型組比較無統(tǒng)計學差異外，其余各組在不同時間段與模型組比較均有統(tǒng)計學差異。其中，附子總堿與干姜提取物配伍2:l組于給藥后25分鐘、30分鐘、35分鐘，附子總堿與干姜提取物配伍5:2組于給藥后15分鐘、25分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:l組于給藥后15分鐘、25分鐘、30分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍2:1組于給藥后IO分鐘、15分鐘、25分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘，急性心力衰竭大鼠心率與附子總堿組比較有顯著性差異。結果詳見表7。表7對急性心衰陽虛大鼠心率的影響(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注與空白組比較，<0.05，"P<0.01，"印<0.001;與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;與附子總堿組比較，<0.05，"P〈0.01，"<().001。(2)對左心室內(nèi)壓最大上升速率的影響分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍l:1、2:1、1:2、5:2后，各組在各個時間段對急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)均有明顯升高。除附子總生物堿與干姜提取物配伍l:1組于給藥后50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍l:2組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍5:2組于給藥后15分鐘、20分鐘25分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:l組于給藥后60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍2:1組于給藥后35分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:2組于給藥后10分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總堿與千姜揮發(fā)油配伍5:2組于給藥后30分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘與模型組比較無統(tǒng)計學差異外，其余各組在其它不同時間段與模型組比較均有統(tǒng)計學差異。其中，在給藥后25分鐘，附子總堿與干姜提取物配伍1:1組、2:1組均能顯著升高急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)，與附子總堿組比較有顯著性差異。其余各組在其它不同時間段雖也能升高急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)，但配伍后卻不同程度地降低了附子總生物堿升高急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)的作用，其中附子總生物堿與干姜提取物配伍l:l組于給藥后50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍l:2組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍5:2組于給藥后5分鐘、10分鐘、15分鐘、20分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍2:l組于給藥后50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:2組于給藥后5分鐘、10分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍5:2組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘，能明顯降低附子總堿對急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大上升速率(dp/dtmax)的作用，與附子總堿組比較有顯著性差異。結果詳見表8。表8對急性心衰陽虛大鼠dp/dtmax的影響(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注與空白組比較，AP<0.05，"P<0.01，"^<0.001;與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001;與附子總堿組比較，"<0.05，"<()01，"<().001。(3)、對左心室內(nèi)壓最大下降速率的影響分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍l:1、2:1、1:2、5:2后，各組在各個時間段對急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)均有明顯升高。除附子總生物堿與千姜提取物配伍l:l組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍2:1組、1:2組于給藥后35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍5:2組于給藥后各個時間段，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:1組于給藥后60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍2:1組于給藥后50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:2組于給藥后10分鐘、15分鐘、20分鐘、30分鐘、35分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍5:2組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘與模型組比較無統(tǒng)計學差異外，其余各組在其它不同時間段與模型組比較均有統(tǒng)計學差異。其中，附子總堿與干姜提取物配伍2:1組在給藥后25分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍hl組在給藥后5分鐘、25分鐘均能顯著升高急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)，與附子總堿組比較有顯著性差異。其余各組在其它不同時間段雖也能升高急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)，但配伍后卻不同程度地降低了附子總生物堿升高急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)的作用，其中附子總生物堿與干姜提取物配伍1:l組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍2:l組于給藥后40分鐘，附子總生物堿與干姜提取物配伍1:2組、5:2組于給藥后40分鐘、50分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍2:l組于給藥后50分鐘，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:2組于給藥后40分鐘、50分鐘、60分鐘，能明顯降低附子總堿對急性心力衰竭大鼠左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)的作用，與附子總堿組比較有顯著性差異。結果詳見表9。表9對急性心衰陽虛大鼠-dp/dtmax的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注與空白組比較，<0.05，"P<0.01，▲▲▲<().001;與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，*"P<0.001;與附子總堿組比較，"<0.05，01，"<().001。上述試驗證明，附子總生物堿既是附子的主要毒性組分，又是附子發(fā)揮回陽救逆功效的主要有效組分，其毒效關系異常密切。結合試驗例1的結論可知，附子總生物堿與干姜提取物2:l配伍、附子總生物堿與干姜揮發(fā)油1:l配伍時，具有減毒增效作用；附子總生物堿與干姜提取物5:2配伍、附子總生物堿與干姜揮發(fā)油l:2、2:1、5:2配伍時，具有減毒減效作用；附子總生物堿與干姜提取物l:l配伍時，具有增毒增效作用；附子總生物堿與干姜提取物h2配伍時，具有增毒減效作用。針對上述試驗，將本發(fā)明藥物進行作用機理研究，試驗如下試驗例4本發(fā)明附子總生物堿與干姜有效部位配伍增強回陽救逆作用機制的實驗1實驗材料1.1藥物受試藥物附子總生物堿，每ml相當于原生藥lkg，總生物堿含量為127.6mg/ml(以烏頭堿計)；干姜提取物，每ml相當于原生藥2g;干姜揮發(fā)油，每ml相當于原生藥40g.均由成都中醫(yī)藥大學中藥化學教研室提供。實驗時所有受試藥物均配成每ml相當于原生藥lg備用，然后在實驗前半小時以附子總生物堿相當于原生藥10倍量(2.5ml/kg)，分別與干姜提取物、干姜揮發(fā)油配成l:1、1:2、2:1、5:2共8個比例的組分配伍備用。陽性對照藥物參附注射液雅安三九藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號國藥準字Z51020664,規(guī)格10ml/支。造模藥物鹽酸普羅帕酮注射液廣州白云山明興制藥廠生產(chǎn)，批號030501規(guī)格35mg/10ml。1.2實驗動物健康SD大鼠，雌雄均有，體重250士20g，動物生產(chǎn)許可證號04-11。均由成都中醫(yī)藥大學實驗動物研究中心提供，檢疫后備用。1.3實驗儀器光電分析天平:上海第二天平儀器廠提供BL-420四道生理記錄儀成都泰盟科技有限公司提供；LDR4-8.4型低速冷凍離心機北京醫(yī)用離心機廠針狀電極；壓力換能器；塑料三通開關；心室插管；動脈夾；止血鉗；眼科剪；鑷子；手術刀；注射器；灌胃器；電子天平；秒表；濾紙。1.4實驗試劑75%乙醇成都天華科技服務股份有限公司生產(chǎn)，GB/T679-2002，生產(chǎn)批號20060017，規(guī)格250ml/瓶。肝素鈉天津化學制藥廠生產(chǎn)，批準文號津衛(wèi)藥準字第001562號，規(guī)格6250u/ml，每支2ml;血管緊張素I放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20060820。血管緊張素II放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20060820。醛固酮放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20050401。心鈉素放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20051201。內(nèi)皮素放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20051201。腫瘤壞死因子放免分析藥盒由北京北方生物技術研究所提供，批號20040601A。2實驗方法2.1附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)的實驗研究取健康SD大鼠66只，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物l:l組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物1:2組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物2:1組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物5:2組(^6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油h1組(N二6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:2組(N二6)、附子總堿與千姜揮發(fā)油2:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油5:2組(N二6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均于給藥后60分鐘于股動脈取血，分離血漿，測定血漿血管緊張素I，血管緊張素II、醛固酮的含量。各組數(shù)據(jù)以I±SD表示，用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行組間的t檢驗。(l)血管緊張素I(AI)、血管緊張素II(AII)的測定股動脈取血2ml，立即注入到預冷的酶抑制劑抗凝管中(含EDTA20ul、二巰基丙醇10ul、羥基喹啉硫酸鹽20ul)，將管口封好后上下顛倒數(shù)次，混勻后即刻放入冰水浴種l小時，取出后2500r/分，離心7分鐘，分離血衆(zhòng)，-2(TC保存待測。測定前，將樣品置于室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉淀管的放射性計數(shù)(按分析盒說明檢測)。(2)醛固酮的測定股動脈取血lml，立即注入到預冷的含肝素鈉離心管中(肝素鈉0.1mg/ml血液)，搖勻，在2000r/min離心5分鐘，分離血漿，-2(TC保存待測。測定前，將樣品置于室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉淀管的放射性計數(shù)(按分析盒說明檢測)。2.2附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠心鈉素的實驗研究取健康SD大鼠66只，雌雄各半，體重250土20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物hl組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物1:2組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物2:1組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物5:2組(N二6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:1組(N二6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:2組(N二6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油2:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油5:2組(N二6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均于給l^后60分鐘于股動脈取血，分離血漿，測定血漿心鈉素的含量。各組數(shù)據(jù)以i士SD表示，用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行組間的t檢驗。心鈉素(ANP)的測定股動脈取血lml,立即注入到準備好的取血管中(含EDTA20ul、抑肽酶10ul)，將管口封好后上下顛倒數(shù)次，混勻后2000r/分，離心5分鐘，分離血漿，-20匸保存待測。測定前，將樣品置于室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉淀管的放射性計數(shù)(按分析盒說明檢測)。2.3附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠內(nèi)皮素的實驗研究取健康SD大鼠66只，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N二6)、模型對照組(N:6)、參附陽性對照組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物l:l組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物1:2組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物2:1組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物5:2組(^6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:2組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油2:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油5:2組(N=6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均于給藥后60分鐘于股動脈取血，分離血漿，測定血漿內(nèi)皮素的含量。各組數(shù)據(jù)以f士SD表示，用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行組間的t檢驗。內(nèi)皮素(ET)的測定股動脈取血lml，立即注入到準備好的取血管中(含EDTA15ul)，將管口封好后上下顛倒數(shù)次，混勻，室溫放置l小時后，3000r/分，離心10分鐘，分離血漿，-2(TC保存待測。測定前，將樣品置于室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉淀管的放射性計數(shù)(按分析盒說明檢測)。2.4附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠腫瘤壞死因子的實驗研究取健康SD大鼠66只，雌雄各半，體重250士20g，隨機分成空白對照組(N=6)、模型對照組(N=6)、參附陽性對照組(N=6)、附子總生物堿與干姜提取物l:l組(N=6)、附子總生物堿與千姜提取物1:2組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物2:1組(N二6)、附子總生物堿與干姜提取物5:2組(N二6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油1:2組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油2:1組(N=6)、附子總堿與干姜揮發(fā)油5:2組(N=6)。急性心衰造模方法同前，給藥方法、劑量同附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠的血流動力學實驗研究。各組動物均于給藥后60—分鐘于股動脈取血，分離血槳，測定血漿腫瘤壞死因子的含量。各組數(shù)據(jù)以^士SD表示，用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行組間的t檢驗。腫瘤壞死因子(TNF)的測定股動脈取血2ml，立即注入到準備好的取血管中(含EDTA6ul)，混勻，立即在2000r/分，離心5分鐘，分離血漿，立即取0.8ml血漿，加入8ul抑肽酶，搖勻，-20"條件保存待測。測定前，將樣品置于室溫放置15分鐘，3500r/分，離心15分鐘，吸棄上清夜，測個沉淀管的放射性計數(shù)(按分析盒說明檢測)。3、實驗結果3.1附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的影響(1)血管緊張素I(AI)含量的變化模型組大鼠給予鹽酸普羅帕酮(16.5mg/kg)造模后，血管緊張素I(AI)水平顯著升高，與空白組比較有顯著性差異。分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:1、2:1、1:2、5:2后，除陽性對照組、附子總堿與千姜提取物l:l、2:1組升高血管緊張素I夕卜，其余各組均能降低急性心衰大鼠血管緊張素I(AI)的水平，其中尤以附子總堿與干姜提取物1:2組降低較為明星，但與模型組比較，均無顯著性差異。結果詳見表IO。_表IO對急性心衰陽虛大鼠AI的影響(I土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>注與空白組比較，*P<0.05，**P<0.01。(2)、血管緊張素II(All)含量的變化分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍l:1、2:1、1:2、5:2后，除附子總堿與干姜提取物配伍1:2、5:2，附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍l:2對急性心力衰竭大鼠血管緊張素n(An)有降低作用外，其余各組對急性心衰大鼠血管緊張素n(aii)均有一定程度的升高。其中附子總堿與干姜提取物配伍2:l組、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:1組能明顯升高急性心力衰竭大鼠血管緊張素II(All)水平，經(jīng)統(tǒng)計學處理，其結果有顯著性差異。結果詳見表ll。表11對急性心衰陽虛大鼠AII的影響(Z±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，命P〈0.05，^^P〈0.01。(3)、醛固酮(Aid.)含量的變化分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍l:1、2:1、1:2、5:2后，陽性對照組、附子總堿與千姜提取物配伍l:1、2:1、1:2組、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍2:1、5:2組均能降低急性心力衰竭大鼠血漿醛固酮(Aid.)水平，但與模型組比較，均無顯著性差異。其余各組對急性心力衰竭大鼠血漿醛固酮(Aid.)水平有一定升高作用，經(jīng)統(tǒng)計學分析，也無顯著性差異。結果詳見表12。表12對急性心衰陽虛大鼠Ald.的影響(J土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，^P〈0.05。3.2附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠心鈉素的影響分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:1、2:1、1:2、5:2后，除附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍5:2組外，其余各組均能降低急性心力衰竭大鼠血漿心鈉素(ANP)水平，經(jīng)與模型組比較，除附子總堿與干姜提取物配伍2:l組有顯著性差異外，其余各組差異無顯著性。結果詳見表13。_表13對急性心衰陽虛大鼠ANP的影響(I±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，^P〈0.05。3.3附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠內(nèi)皮素的影響分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍1:1、2:1、1:2、5:2后，除附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍5:2組對急性心力衰竭大鼠血漿內(nèi)皮素(ET)水平有升高作用(無統(tǒng)計學差異)外，其余各組均能降低急性心力衰竭大鼠血漿內(nèi)皮素(ET)水平，經(jīng)與模型組比較，均無顯著性差異。結果詳見表14?！?4對急性心衰陽虛大鼠ET的影響(i士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，<().05。3.4附子、干姜組分配伍對急性心衰大鼠腫瘤壞死因子的影響分別給予參附注射液及附子總堿與干姜提取物配伍、附子總堿與干姜揮發(fā)油配伍h1、2:1、1:2、5:2后，各組均能不同程度地降低急性心力衰竭大鼠血漿腫瘤壞死因子(TNF)水平，經(jīng)與模型組比較，差異均無顯著性。結果詳見表15。—表15對急性心衰陽虛大鼠TNF的影響(7±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>注與空白組比較，*P<0.05;與模型組比較，"<0.05。上述試驗證明，附子總生物堿與干姜提取物、干姜揮發(fā)油配伍發(fā)揮回陽救逆功效的機理，可能與其能降低急性心力衰竭大鼠血漿ANP、ET、TNF水平，調控RAAS有關。權利要求1、一種治療心衰的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子1-5份、干姜1-2份。2、根據(jù)權利要求1所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于它是由附子有效部位、干姜有效部位為活性成分制備而成的藥劑附子總生物堿l-5份、干姜有效部位l-2份，所述的干姜有效部位為干姜提取物或干姜揮發(fā)油，其中，干姜提取物，總姜酚含量以辣椒素計15。/。W/W;干姜揮發(fā)油，在硅膠薄層色譜條件下，與干姜對照藥材揮發(fā)油在相同位置有相同斑點。3、根據(jù)權利要求2所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于所述的附子總生物堿中，總生物堿含量以烏頭堿計為100150mg/ml。4、根據(jù)權利要求3所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于所述的附子總生物堿中，總生物堿含量以烏頭堿計為127.6mg/ml。5、根據(jù)權利要求l-4任一項所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿1-2份、干姜提取物或干姜揮發(fā)油1份。6、根據(jù)權利要求5所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿2份、干姜提取物l份。7、根據(jù)權利要求5所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿1份、干姜揮發(fā)油1份。8、根據(jù)權利要求1-7任一項所述的治療心衰的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑是片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或口服液。9、一種制備權利要求1所述的治療心衰的藥物組合物的方法，包括如下步驟a、附子總生物堿l-5份、干姜有效部位1-2份，所述的干姜有效部位為干姜提取物、干姜揮發(fā)油；b、混合，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。10、權利要求1所述的藥物組合物在制備治療心衰的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明提供了一種治療心衰的藥物組合物，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑附子總生物堿1-5份、干姜有效部位1-2份，所述的干姜有效部位為干姜提取物、干姜揮發(fā)油。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法和用途。附子總生物堿既是附子的主要毒性組分，又是附子發(fā)揮回陽救逆功效的主要有效組分，其毒效關系異常密切。附子總生物堿與干姜提取物2∶1配伍、附子總生物堿與干姜揮發(fā)油1∶1配伍時，具有減毒增效作用，藥效明確，毒性低，為臨床提供了一種新的選擇。文檔編號A61K36/9068GK101185752SQ20071018776公開日2008年5月28日申請日期2007年11月23日優(yōu)先權日2006年11月23日發(fā)明者余蔥蔥,唐勁松,成彭,曹小玉,曾代文,力郭申請人:成都中醫(yī)藥大學