專(zhuān)利名稱(chēng)：：葡萄內(nèi)酯的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及葡萄內(nèi)酯在抗老年癡呆及促進(jìn)胃腸動(dòng)力方面的用途。具體來(lái)說(shuō)在老年性癡呆癥(Alzhimer'sdisease,AD)、血管性癡呆(Vasculardementia,VD)和混合性癡呆(Multi-dementia)以及促進(jìn)胃腸動(dòng)力，如胃脹、厭食、消化不良等胃動(dòng)力缺乏性疾病的藥物用途和保健用途。
背景技術(shù)：
：胃腸動(dòng)力是一種復(fù)雜、高度協(xié)調(diào)的神經(jīng)肌肉活動(dòng)，是消化系統(tǒng)最重要的生理功能之一。近年研究證實(shí)，胃腸動(dòng)力障礙性疾病的發(fā)生與中樞祌經(jīng)系統(tǒng)(CNS)、自主神經(jīng)系統(tǒng)(ANS)、腸肌間神經(jīng)叢(ENS)、胃腸道平滑肌等每一水平或其相互間的功能障礙有關(guān)。這些組織結(jié)構(gòu)的功能依賴(lài)于各種神經(jīng)遞質(zhì)、調(diào)節(jié)因子和肽類(lèi)激素的釋放而建立聯(lián)系，并通過(guò)它們與其相應(yīng)的受體結(jié)合產(chǎn)生不同的生理功能。不同器官和結(jié)構(gòu)中受體類(lèi)型和分布的不同是胃腸動(dòng)力藥發(fā)揮藥理作用的生理學(xué)基礎(chǔ)興奮性的神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(Ach)與平滑肌上毒蕈堿樣受體(M受體)結(jié)合，促使平滑肌收縮；5—羥色胺(5—HT)受體能激動(dòng)胃腸道膽堿能中間神經(jīng)元及肌間神經(jīng)叢的5—HT受體，促使乙酰膽堿釋放，產(chǎn)生胃腸道動(dòng)力的作用；多巴胺(M)通過(guò)興奮DA受體來(lái)抑制平滑肌收縮；非腎上腺素能非膽堿能(NANC)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放可產(chǎn)生抑制作用；某些肽類(lèi)激素的釋放和離子通道的開(kāi)放也調(diào)節(jié)著胃腸道的運(yùn)動(dòng)功能。當(dāng)上述神經(jīng)遞質(zhì)和激素水平以及胃腸道平滑肌本身病變時(shí)可造成胃腸運(yùn)動(dòng)功能紊亂，表現(xiàn)出胃腸動(dòng)力障礙的綜合癥狀。葡萄內(nèi)酯(auraptene)能夠抑制膽堿脂酶(Ache)促使乙酰膽堿釋放，產(chǎn)生胃腸道動(dòng)力的作用，增強(qiáng)胃腸平滑肌收縮力，協(xié)調(diào)胃腸運(yùn)動(dòng)，促進(jìn)胃腸排空和轉(zhuǎn)運(yùn)，從而達(dá)到治療的效果。阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)，已成為老齡化社會(huì)的一個(gè)日益突出的社會(huì)問(wèn)題，嚴(yán)重威脅著人們的健康和生命安全。體內(nèi)乙酰膽堿水平的降低可能是AD發(fā)生的機(jī)制之一，刺激乙酰膽堿系統(tǒng)可能改善病人的認(rèn)知、學(xué)習(xí)和記憶?？鼓憠A酯酶藥物用于治療AD病人取得了良好的療效。研究發(fā)現(xiàn)NMDA受體減少可能使AD病人記憶缺損惡化。而NMDA受體的激活后打開(kāi)了陽(yáng)離子通道，可引起鈉離子和鈣離子內(nèi)流。胞內(nèi)鈣離子增加將啟動(dòng)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致突觸活性的加強(qiáng)。這種活性依賴(lài)性突觸加強(qiáng)作用被稱(chēng)為長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(long-termpotentiation),被看作是學(xué)習(xí)和記憶的模式。葡萄內(nèi)酯能抑制Ache的活性(INHIBITIONOFProdudLetters,2001,15(3>:2G5-210),并能很好的透過(guò)血腦屏障，這為治療阿爾茨海默病帶來(lái)了新的希望。枳實(shí)(Fructusaurantiiiramaturus)為蕓香科植物酸橙(CitrusaurantiumL.)及其變種或甜橙(Citrussinensis0sbeck)的干燥幼果。具有破氣消積、化痰散痞之功效。枳殼(Fructusaurantii)為蕓香科植物酸橙(CitrusaurantiumL.)及其變種的干燥未成熟果實(shí)。貝冇理氣寬中、行滯消脹之功效。葡萄內(nèi)酯(aumptene)是一種從枳實(shí)(殼)中提取分離出來(lái)的具有抗老年癡呆和促進(jìn)胃腸動(dòng)力作用的化合物。無(wú)色針晶，mp5254'C;(正己烷/丙酮)，紫外燈(365nm)下顯藍(lán)色熒光?；瘜W(xué)分子式C19H2203;分子量298.38。結(jié)構(gòu)式如下
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及葡萄內(nèi)酯在制備抗老年癡呆及促進(jìn)胃腸動(dòng)力藥物中的用途，其特征是將從中藥枳實(shí)(殼)中提取的葡萄內(nèi)酯作為活性成分與藥用載體及添加劑混合，制成針劑、片劑、顆粒劑、丸劑、膠囊劑、泡騰片、糖漿劑、膏磁劑、軟膠囊、乳劑、微乳制劑、散劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑，作為治療老年性癡呆癥(Alzhimer'sdisease,AD)、血管性癡呆(Vasculardementia,VD)和混合性癡呆(Multi-dementia);促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)為治療胃脹、厭食、消化不良等胃動(dòng)力缺乏性疾病的藥物用途。所述的葡萄內(nèi)酯的制取方法如下取枳實(shí)、枳殼粉碎為粗粉，用95%乙醇10倍量回流提取4次，每次2.5小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味。將上述提取的浸膏在水中分散后用乙酸乙酯萃取，萃取5次，減壓回收乙酸乙酯萃取液得浸膏后，制成水溶液，上D-101型、AB-8型大孔樹(shù)脂柱，用去離子水洗脫后，分別用20%、40%、70%乙醇洗脫，再用95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫液，減壓回收至無(wú)醇味后經(jīng)硅膠柱色譜，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，減壓濃縮，用石油醚-乙酸乙酯反復(fù)重結(jié)晶得到葡萄內(nèi)酯純化合物。本發(fā)明藥理實(shí)驗(yàn)如下1、葡萄內(nèi)酯對(duì)阿爾茨海默病大鼠認(rèn)知功能的影響(抗老年癡呆用途)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為健康雄性SD大鼠，體重200250g，由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物經(jīng)篩選與分組將合格大鼠35只隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組各10只，葡萄內(nèi)酯組15只。假手術(shù)組(Sham):側(cè)腦室注射檸檬酸平衡液。鏈脲菌素組(STZ):STZ造模后不用治療藥物。葡萄內(nèi)酯組(Aur):STZ造模后第13天開(kāi)始給予葡萄內(nèi)酯3mg/kg,藥物溶于生理鹽水中，口服確胃)給藥，每日一次，共6周。'4表1不同時(shí)期大鼠Morris水S檢宮試驗(yàn)潛伏期(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>林*與假手術(shù)組比較，P<0.01;林與STZ組比較，P<0,01大鼠學(xué)習(xí)記憶能力觀(guān)察分別于造模后第10天及用藥后第6周進(jìn)行水迷宮試驗(yàn)，觀(guān)察大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果顯示術(shù)前Sham、STZ、AUR各組之間潛伏期各組之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；STZ造模后第10天，STZ組和葡萄內(nèi)酯組潛伏期明顯延長(zhǎng)，而過(guò)平臺(tái)次數(shù)明顯減少，與假手術(shù)組比較，P〈0.01,有顯著差異，表明STZ側(cè)腦室注射10天后，大鼠的認(rèn)知功能明顯下降；給予治療藥物6周后，葡萄內(nèi)酯組潛伏期明顯縮短，過(guò)平臺(tái)次數(shù)增多，分別與STZ組比較，P<0.01,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1和表2)。表2大鼠過(guò)平臺(tái)次數(shù)(x土s)(S)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>*林與假手術(shù)組比較，P<0.01;林與STZ組比較，P<0.012、葡萄內(nèi)酯對(duì)小鼠胃排空、小腸推進(jìn)功能的影響(促進(jìn)胃腸動(dòng)力)1)對(duì)正常小鼠胃排空、腸推進(jìn)的影響取NIH小鼠60只，雌雄兼用，分層隨機(jī)分為3組蒸餾水組、葡萄內(nèi)酯小劑量組、葡萄內(nèi)酯大劑量組。采用t檢驗(yàn)比較給藥組與蒸餾水組的差異。結(jié)果顯示葡萄內(nèi)酯小劑量組能促進(jìn)正常小鼠小腸推進(jìn)作用，大劑量組抑制正常小鼠小腸推進(jìn)作用。結(jié)果見(jiàn)表3。表3葡萄內(nèi)酯對(duì)腸推進(jìn)率的影響(5土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>2)對(duì)阿托品所致小鼠胃排空、小腸推進(jìn)抑制的影響取昆明種小鼠40只，雌雄兼用，隨機(jī)分為4組蒸餾水組、單純阿托品組、葡萄內(nèi)酯小劑量加阿托品組，葡萄內(nèi)酯大劑量加阿托品組。采用t檢驗(yàn)比較給藥組與單純阿托品組，阿托品組與蒸餾水組的差異。結(jié)果顯示葡萄內(nèi)酯小劑量組和大劑量組均能拮抗阿托品所致小鼠胃排空、腸推進(jìn)抑制的作用。結(jié)果見(jiàn)表4。表4葡萄內(nèi)酯對(duì)阿托品所致小鼠胃排空、腸推進(jìn)抑制的影響(x土"組別動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g/kg)胃酚紅殘留率(%)小腸推進(jìn)率(%)蒸餾水組阿托品組小劑量+阿托品組大劑量+阿托品組10101010等體積蒸餾水28.77±8.3658.77±2.11等體積蒸餾水48.21±8.66**42.58±5.43**0.004536.21±7.44A52.47±6.65A0.027047.87±9.12*44.71±9.85**與蒸餾水組比較，p<0.05林與蒸餾水組比較，P<0.01A與阿托組比較，P<0.013)對(duì)新斯的明所致小鼠胃排空、小腸推進(jìn)亢進(jìn)的影響取昆明種小鼠40只，雌雄兼用，隨機(jī)分為4組:蒸餾水組、單純新斯的明組、葡萄內(nèi)酯小劑量加新斯的明組，葡萄內(nèi)酯大劑量加新斯的明組。采用t檢驗(yàn)比較給藥組與單純新斯的明組，新斯的明組與蒸餾水組的差異。結(jié)果顯示葡萄內(nèi)酯小劑量組和大劑量組均不拮抗新斯的明所致的小鼠胃排空、小腸推進(jìn)亢進(jìn)的作用。結(jié)果見(jiàn)表5。表5葡萄內(nèi)酯對(duì)新斯的明所致的小鼠胃排空、小腸推進(jìn)亢進(jìn)的影響(；±"Hi5動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g/kg)胃酚紅殘留率(y。)小腸推進(jìn)率(%)"~蒸餾水組15等體積蒸餾^^32.78±8.9954.15±7.19新斯的明10等體積蒸餾水18.66±5.95**81.03±6.96**小劑量+新斯的明100.004526.33±9.5375.21±8.52大劑量+新斯的明10,0.027034.81±6.58AA80.68±5.87AA林與蒸餾水組比較，p<0.01AA與蒸餾水組比較，P<0.01從以上研究結(jié)果，可以得出本發(fā)明具有以下特征1、葡萄內(nèi)酯為膽堿酯酶抑制劑，通過(guò)抑制乙酰膽堿酯酶，提高體內(nèi)乙酰膽堿水平，對(duì)鏈脲菌素組(STZ)造模10天后，大鼠的認(rèn)知功能明顯下降的大鼠，給葡萄內(nèi)酯(Aur)治療6周后，大鼠學(xué)習(xí)記憶能力明顯好轉(zhuǎn)。2、葡萄內(nèi)酯(auraptene)能夠抑制膽堿脂酶(Ache)促使乙酰膽堿釋放，產(chǎn)生胃腸道動(dòng)力的作用，增強(qiáng)胃腸平滑肌收縮力，協(xié)調(diào)胃腸運(yùn)動(dòng)，促進(jìn)胃腸排空和轉(zhuǎn)運(yùn)，并對(duì)胃腸動(dòng)力具有雙向調(diào)節(jié)作用。63、本發(fā)明可與藥學(xué)上可接受的賦形劑一起，采用藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備成各種劑型，如針劑、片劑、顆粒劑、丸劑、膠囊劑、泡騰片、糖漿劑、膏磁劑、軟膠囊、乳劑、微乳制劑、散劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑等。下面描述本發(fā)明的實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容不局限于此。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:制成片劑方法取葡萄內(nèi)酯4g，加賦形劑混合壓制成片劑，每片含葡萄內(nèi)酯4mg。實(shí)施例2:制成膠囊方法取葡萄內(nèi)酯4g,加賦形劑混合，裝入膠囊，每粒含葡萄內(nèi)酯4mg。權(quán)利要求1、葡萄內(nèi)酯(auraptene)在制備抗老年癡呆及促進(jìn)胃腸動(dòng)力的藥物方面的用途，其特征是將從中藥枳實(shí)(殼)中提取的葡萄內(nèi)酯作為活性成分與藥用載體及添加劑混合，制成針劑、片劑、顆粒劑、丸劑、膠囊劑、泡騰片、糖漿劑、膏磁劑、軟膠囊、乳劑、微乳制劑、散劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑，作為治療老年性癡呆癥(Alzhimer′sdisease，AD)、血管性癡呆(Vasculardementia，VD)和混合性癡呆(Multi-dementia)；促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)為治療胃脹、厭食、消化不良等胃動(dòng)力缺乏性疾病的藥物用途。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了葡萄內(nèi)酯(auraptene)的新用途，其特征是，將從中藥枳實(shí)(殼)中提取的葡萄內(nèi)酯作為活性成分與藥用載體及添加劑混合，制成針劑、片劑、顆粒劑、丸劑、膠囊劑、糖漿劑、膏磁劑、軟膠囊、乳劑、微乳制劑和其他制劑。其制取方法是取枳實(shí)、枳殼用乙醇提取、乙酸乙酯萃取，大孔樹(shù)脂柱、硅膠柱分離、洗脫、濃縮反復(fù)重結(jié)晶得到葡萄內(nèi)酯，然后加賦形劑制成片劑、膠囊、乳劑等，本發(fā)明制得的藥物作為抗老年性癡呆以及促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)的新型藥物，既能產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)效益，更具有廣泛的社會(huì)效益。文檔編號(hào)A61K31/366GK101461803SQ20071030551公開(kāi)日2009年6月24日申請(qǐng)日期2007年12月22日優(yōu)先權(quán)日2007年12月22日發(fā)明者嚴(yán)志宏,磊介,余寶金,劉建群,張普照,歡徐,明楊,楊世林,楊武亮,歐陽(yáng)勝,王少軍,羅小泉,蔣以號(hào),陳海芳,龔千鋒申請(qǐng)人:江西中醫(yī)學(xué)院