專利名稱：游離堿或鹽形式的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]-1h-吲哚-5-甲腈的藥物應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一些GSK3抑制劑，即2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡 啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈在制備用于治療和/或預(yù)防骨相關(guān)疾病或病癥 例如骨質(zhì)疏松，以及提高骨形成和骨礦物質(zhì)密度的藥物中的新的應(yīng)用。 本發(fā)明還涉及治療和/或預(yù)防這些疾病或病癥的方法。
背景技術(shù)：
糖原合酶激酶3 (GSK3)是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，由兩種同種型 (oc和p)組成，這兩種同種型由不同基因編碼，但它們在催化域內(nèi)是高 度同源的。GSK3在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中高度表達(dá)。GSK3將幾種底 物磷酸化，所述底物包括Tau, (3-連環(huán)蛋白、糖原合酶、丙酮酸脫氫酶 和延長引發(fā)因子2b(elF2b)。胰島素和生長因子激活蛋白激酶B，蛋白 激酶B將絲氨酸9殘基上的GSK3磷酸化，并且讓其失活。
GSK3和骨相關(guān)病癥
骨骼的再造是連續(xù)過程，由全身激素例如曱狀旁腺激素(PTH)、局 部因子(例如前列腺素E2)、細(xì)胞因子以及其他生物活性物質(zhì)控制。兩種 細(xì)胞類型是至關(guān)重要的成骨細(xì)胞(負(fù)責(zé)骨形成)和破骨細(xì)胞(負(fù)責(zé)骨吸 收)。通過RANK、 RANK配體和osteoprotegerm調(diào)節(jié)系統(tǒng)，這兩種類. 型細(xì)胞相互作用以保持正常骨更新(Bell NH, Cw/re^ i>wg 7^ge" -/附wwwe， ^Woch恥& MgtoZ)o/z'c D^oniers, 2001, 1:93-102》
骨質(zhì)疏松是 一 種骨骼病癥，其中低的骨質(zhì)和骨微結(jié)構(gòu)的退化導(dǎo)致 骨易碎性和骨折危險增加。為了治療骨質(zhì)疏松，有兩種主要方法來抑 制骨吸收或刺激骨形成。目前市售的用于治療骨質(zhì)疏松的大部分藥物 所起的作用都是通過抑制破骨細(xì)胞骨吸收來增加骨質(zhì)。應(yīng)該認(rèn)識到。 能夠提高骨形成的藥物在治療骨質(zhì)疏松以及具有提高患者骨折愈合可 能性方面具有高的價值。
最近的體外研究表明，GSK3p在成骨細(xì)胞分化中起作用。首先，
已經(jīng)表明，在培養(yǎng)物中的成骨細(xì)胞分化期間，糖皮質(zhì)激素抑制細(xì)胞周
期進(jìn)行。其中的機(jī)理是成骨細(xì)胞中GSK3p的活化，導(dǎo)致c-Myc下調(diào)以 及G^S細(xì)胞周期轉(zhuǎn)變的阻礙。當(dāng)使用氯化鋰抑制GSK3P時，減弱的 細(xì)胞周期以及降低的c-Myc水平返回正常(Smith等人，說o/. C&附.， 2002, 277:18191-18197)。其次，在多潛能間質(zhì)細(xì)胞系C3H10T1/2中抑 制GSK3J3導(dǎo)致內(nèi)源性p-連環(huán)蛋白信號活性顯著增加。這又誘導(dǎo)堿性磷 酸酶mRNA和蛋白一一種早期成骨細(xì)胞分化的標(biāo)志物的表達(dá)(Bain等 人,Bz'oc/z，.說o/ /z，. Commww., 2003, 301:84-91》
仍然缺乏證實(shí)GSK3p對于成骨細(xì)胞分化的體外效果的出版的體內(nèi) 數(shù)據(jù)。然而，本發(fā)明者們進(jìn)行的研究清楚地表明了用GSK3p抑制劑治 療的大鼠中提高的骨形成(見下文中的實(shí)施例)。還應(yīng)當(dāng)指出，用鋰治療 的患者具有增高水平的骨特異性堿性磷酸酶，這給抑制GSK3P將導(dǎo)致 成骨細(xì)胞刺激和骨形成增加的觀點(diǎn)間接提供了支持(Broulik等人， C/ze脂c"cto, 1984, 140:151-155)。
發(fā)明詳述
本發(fā)明涉及其游離堿或可藥用鹽形式的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲 基)吡啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈(化合物(1》在制備用于治療和/或預(yù)防骨 相關(guān)疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用
本發(fā)明又一方面涉及下列式(I)化合物的可藥用鹽在制備用于治療 和/或預(yù)防骨相關(guān)疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用 2_羥基_3_[5-(嗎啉-4-基甲基)。比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈檸檬酸鹽，2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基"比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈曱磺酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)p比啶-2-基]l/7-吲哚-5-甲腈乙磺酸鹽， 2_羥基_3_[5-(嗎啉-4-基甲基戶比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈乙二磺酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基戶比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈磷酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基"比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈富馬酸鹽和 2_羥基_3_[5-(嗎啉-4-基曱基"比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈馬來酸鹽。
本發(fā)明的 一個方面涉及游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物在治 療骨質(zhì)疏松中的應(yīng)用。
本發(fā)明的 一個方面涉及游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物在提 高和促進(jìn)哺乳動物骨形成中的應(yīng)用。
本發(fā)明的 一個方面涉及游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物在提 高哺乳動物骨礦物質(zhì)密度中的應(yīng)用。
本發(fā)明的另 一個方面涉及游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物在 哺乳動物中降低骨折速度和/或提高骨折愈合速度中的應(yīng)用。
本發(fā)明的另 一個方面涉及游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物在 提高哺乳動物中松質(zhì)骨形成和/或新骨形成中的應(yīng)用。
本發(fā)明的另 一個方面涉及用于預(yù)防和/或治療骨相關(guān)疾病的方法， 所述方法包括給需要這種預(yù)防和/或治療的哺乳動物施用治療有效量的 游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物。
本發(fā)明的另 一 個方面涉及用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松的方法，所 述方法包括給需要這種預(yù)防和/或治療的哺乳動物施用治療有效量的游 離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物。
本發(fā)明的另 一個方面涉及提高骨形成的方法，所述方法包括給需 要這種治療的哺乳動物施用治療有效量的游離石咸或可藥用鹽形式的式 (I)化合物。
本發(fā)明的另一個方面涉及提高骨礦物質(zhì)密度的方法，所述方法包 括給需要這種治療的哺乳動物施用治療有效量的游離堿或可藥用鹽形 式的式(I)化合物。
本發(fā)明的另 一個方面涉及降低骨折發(fā)生率的方法，所述方法包括 給需要這種治療的哺乳動物施用治療有效量的游離堿或可藥用鹽形式 的式(I)化合物。
本發(fā)明的另 一個方面涉及提高骨折愈合的方法，所述方法包括給
需要這種治療的哺乳動物施用治療有效量的游離石威或可藥用鹽形式的 式(I)化合物。
本發(fā)明的另 一個方面涉及所述方法，并且其中所述哺乳動物是人。 本發(fā)明的另一個方面涉及所述方法，并且其中所述哺乳動物是動
物，優(yōu)選但不限于較大的動物，例如馬、駱駝、單峰駱駝，但不限于此。
游離堿或可藥用鹽形式的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基"比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈公開在WO03/082853中。已經(jīng)評估了本發(fā)明化合物 (I)對于骨生長的作用。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這樣的化合物非常適于促進(jìn)和提高 骨形成，提高骨礦物質(zhì)密度以及因此抑制骨相關(guān)病癥例如骨質(zhì)疏松。
GSK3抑制劑，式(I)化合物在原發(fā)性和繼發(fā)性骨質(zhì)疏松中的應(yīng)用，
骨質(zhì)疏松，并且繼發(fā)性骨質(zhì)疏松包括可的松誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏;卜>,以及任 何其他類型的誘導(dǎo)的繼發(fā)性骨質(zhì)疏松包括在骨質(zhì)疏松的術(shù)語中。除此 以外，GSK3抑制劑還可用于治療骨髓瘤。在不同的制劑方案中，GSK3 抑制劑可以局部或全身給藥以治療這些病癥。
促進(jìn)和提高骨形成使得式(I)化合物適于降低骨折發(fā)生率，降低骨 折速度和/或提高骨折愈合速度，以提高哺乳動物中松質(zhì)骨形成和/或新 骨形成。
促進(jìn)和提高新骨形成可以與手術(shù)聯(lián)合使用。本發(fā)明化合物可以在 手術(shù)期間使用，其中治療外科醫(yī)生把本發(fā)明化合物在合適的制劑中局 部置于有缺陷的骨附近和/或體腔中。骨可以例如已經(jīng)破碎，將本文描 述和要求保護(hù)的本發(fā)明化合物在開放骨折修復(fù)期間放置在骨折處或接 近骨折處。在某些情況下，骨片可能丟失(例如除去腫瘤或嚴(yán)重事故之 后)，將本文描述和要求保護(hù)的本發(fā)明化合物放置在接近構(gòu)建骨手術(shù)的 位置。
依據(jù)本發(fā)明使用的化合物的合適的可藥用鹽是例如酸加成鹽，其 具有足夠堿性，例如與無機(jī)酸或有機(jī)酸形成鹽。此外，充分酸性的本 發(fā)明化合物的合適的可藥用鹽是堿金屬鹽，堿土金屬鹽，或者與能提 供生理可接受陽離子的有機(jī)堿形成的鹽。
式(I)化合物或其鹽可以按照WO03/082853中描述的方法制得，其 引入本文以供參考。
式(I)化合物的所需鹽，2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]11^-吲哚-5-甲腈檸檬酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、乙二磺酸鹽、磷酸鹽、 富馬酸鹽或馬來酸鹽的形成可以通過將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)口比 啶-2-基]1 H-丐l哚-5-甲腈與合適的酸在溶劑存在下混合來制得。合適的 酸的當(dāng)量可以為0.5-1摩爾當(dāng)量。該反應(yīng)可以在溶劑中進(jìn)行，合適的溶 劑有醚例如1,4-二氧雜環(huán)己烷、乙醚，或醇例如甲醇、乙醇、丙醇，或 酮例如丙酮、異丁基曱基酮，或乙酸酯例如乙酸乙酯、乙酸丁酯，或 有機(jī)酸例如乙酸，或水，或其混合物。使用的溶劑的總體積可以為1 (v/w) 至100 (v/w)體積份/原料重量，優(yōu)選為10 (v/w)至45 (v/w)體積份/原料 重量。反應(yīng)的溫度可以為-30至150° C,優(yōu)選為-5° C至IOO。 C。
純的式(I)化合物，2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]lH-吲哚 -5-曱腈檸檬酸鹽、曱磺酸鹽、乙磺酸鹽、乙二磺酸鹽、磷酸鹽、富馬 酸鹽或馬來酸鹽可以這樣獲得使用或不使用添加劑，在合適的溶劑 中結(jié)晶，以獲得純度為約95%,優(yōu)選約98%的結(jié)晶固體。
藥物纟且合物
依據(jù)本發(fā)明使用的組合物可以呈適于口服給藥的形式，例如片劑、 丸劑、糖漿劑、粉劑、粒劑或膠嚢的形式，用于胃腸外給藥(包括靜脈 內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、血管內(nèi)或輸注)的無菌溶液、懸浮液或乳劑的形式， 用于局部給藥的膏劑、貼劑或霜劑的形式，用于直腸給藥的栓劑形式， 以及用于在體腔或骨腔內(nèi)局部給藥的形式。
在治療哺乳動物，包括人時，當(dāng)經(jīng)口給藥時，式(I)化合物的合適 的曰劑量為大約0.01至250 mg/kg體重，在胃腸外給藥時，日劑量為 約0.001至250 mg/kg體重?；钚越M分的典型日劑量在寬的范圍內(nèi)改變， 并且將取決于多種因素例如相關(guān)適應(yīng)癥、給藥途徑、患者的年齡、體 重和性別，可以由醫(yī)師確定。
包含游離堿或可藥用鹽形式的式(I)化合物，2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]lH-吲哚-5-曱腈的示例性代表藥物劑型描述在 WO03/082853中，所述可藥用鹽包括其^ 檬酸鹽、曱^^黃酸鹽、乙^t酸 鹽、乙二磺酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽或馬來酸鹽，所述劑型引入本文 以供參考。
對于獸醫(yī)應(yīng)用，不同成分的量、劑型以及藥物的劑量可以改變， 并且取決于多種因素，例如所治療動物的個體需求。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過使用上述式(I)化合物，可以提高骨形成和骨礦物 質(zhì)密度。除非另有相反的說明，本文所用術(shù)語"治療"也包括"預(yù)防"。 術(shù)語"治療的"和"治療地"也應(yīng)當(dāng)相應(yīng)的解釋。
實(shí)施例
下面的實(shí)施例1-7描述了作為本發(fā)明方面的所指定的化合物(I)的 具體鹽的制備。
實(shí)施例1
2-羥基-3-「5-(嗎啉-4-基曱基V比啶-2-基llH-吲哚-5-甲腈檸檬酸鹽
在室溫將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]1H-吲哚-5-曱腈 (5.14 kg, 15.4 mol)懸浮在乙醇(54 L)中。將該懸浮液加熱至70。 C的 內(nèi)溫，力。入杼檬酸(3.424 kg, 17.82 mol)在水(103 L)中的溶液，把內(nèi)溫 保持在65°C以上。將該混合物加熱至回流。將所得溶液與活性炭(0.412 kg)混合后，繼續(xù)回流3.5小時，之后把該反應(yīng)混合物在83° C過濾， 然后用20小時冷卻至室溫。過濾后，將沉淀用冷的乙醇/水(6.9 L/13.7L) 混合物洗滌兩次。在50。C真空干燥后，以82.2%產(chǎn)率獲得了 6.648 kg2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)p比啶-2-基]lH-吲哚-5-曱腈檸檬酸鹽，其純度 為至少98%。鈀含量小于1 ppm,并且鋅含量4氐于10 ppm。力NMR (必醫(yī)DMSO, 400 MHz) 5 14.7 (br s, 1 H), 11.55 (s, 1 H), 10.98 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.08(brd, J= 1.84Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.90 (br d, J = 8.92Hz， 1 H), 7.31 (d, J = 8.0Hz, 1 H), 7.02 (d, J= 8.0Hz), 4.28 (s, 2H)， 3.97 (m, 2 H), 3.94 (m, 2H), 3.35 (m, 9H), 3.32 (m, 2H) ppm; 13CNMR(>/6-DMSO, 400MHz) 5 168.9, 148.5, 142.7， 139.8， 137.5, 126.4, 124.9, 124.8, 120.9, 119.4, 118.4, 113.3， 109.0, 101.6, 85.7, 63.1, 55.5, 50.3, 40.1， 39.9, 39.7, 39.2, 39.0， 38.8ppm; MS (ES) w/z[M++l] 335。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。晶形A的衍射圖表現(xiàn)出 以下以埃給出的d-值和相對強(qiáng)度12.7(vs), 7.6(w), 6.8(vs), 6.3(s), 5，9(w), 5.7(m), 5.1(m)， 4.87(w)， 4.57(m)， 4.38(s), 4.23(s)， 4.16(w)， 4.07(m)， 3.80(w), 3.69(m)， 3.65(w), 3.41(m)， 3.37(w)， 3.32(m), 3.17(m)，
3.12(m), 2.88(w)， 2.86(m)， 2.78(w), 2.65(w), 2.50(w), 2.45(w)。 顯著的以埃給出的d-值和相對強(qiáng)度是12.7(vs)， 6.8(vs), 6.3(s),
4.38(s), 4.23(s), 3.41(m)。
相對強(qiáng)度(rel.int.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
實(shí)施例2
2-羥基-3-「5-(嗎啉-4-基甲基)口比啶-2-基11//-吲咮-5-甲腈曱磺酸鹽
將-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)他啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈(0.6145 g) 懸浮在乙醇(lml)和曱磺酸(O.ll ml)中。將該溶液在40° C加熱14小時， 然后在2小時中冷卻至室溫。將晶體過濾，用乙醇(2ml)洗滌，并且在 40° C真空干燥47小時。干燥后，獲得了 0.6690 g 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基"比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈曱磺酸鹽。
H (500 MHz, DMSO-d6): 14.75 (1H， brs), 10.97 (1H, s), 9.92 (1H, brs), 8.25 (IH, s), 8.00 (1H, s), 7.89 (2H， br m), 7.33 (1H, dd), 7.03 (1H, d), 4.30 (2H, br s), 3.98 (2H, br s), 3.66 (2H, br s), 3.37 (2H, brs), 3.12 (2H, br s), 2.38 (3H, s)。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。書f射圖表現(xiàn)出以下d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度12.7(vs), 9.0(w), 7.3(vw)， 6.4(s), 5.8(vw), 5.7(vw), 5.3(w), 4.93(w)， 4.80(m)， 4.72(m), 4,53(m)， 4.46(m), 4.31(m), 4.24(m), 4.09(s), 3.96(m)， 3.79(m)， 3.33(s), 3.21(m)， 2.94(w), 2.73(w), 2.47(w) A。
顯著的d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度是12.7(vs), 6.4(s), 4.53(m), 4.09(s), 3.33(s)A。
相對強(qiáng)度(。/。rel.int.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
vs(非常強(qiáng)):
s(強(qiáng))
m(中等)
w(弱)
vw(非常弱)
〉60%相對強(qiáng)度 23-60%相對強(qiáng)度 9-23%相對強(qiáng)度 4-9%相對強(qiáng)度 <4%相對強(qiáng)度 vs(非常強(qiáng))〉83 s(強(qiáng))60-83 m(中等)17-60 w(弱)7-17 vw(非常弱)<7
實(shí)施例3
2-羥基-3-「5-(嗎啉-4-基甲基>比啶-2-基11//-口引哚-5-甲腈乙磺酸鹽
將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)敗啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈(0.5006 g) 懸浮在乙醇(5ml)和乙磺酸(0.12ml)中。將該溶液在40。 C加熱14小時， 然后在2小時中冷卻至室溫。將晶體過濾，用乙醇(2ml)洗滌，并且在 40° C真空干燥47小時。干燥后，獲得了 0.5487 g 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)p比啶-2-基]l/Z-吲哚-5-曱腈乙磺酸鹽。
力(500 MHz， DMSO-d6): 14.72 (1H, br s), 10.98 (1H, s), 9.85 (1H, brs), 8.25 (1H, s), 8.00 (1H, s), 7.88 (2H, dd), 7.34 (1H, d)， 7.03 (1H, d), 4.32 (2H, br s), 4.00 (2H， brd)， 3.64 (2H, brt), 3.37 (2H, brs), 3.13 (2H, bds), 2.40 (2H, q)， 1.07 (3H, t)。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。衍射圖表現(xiàn)出以下d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度15.3(m), 12.6(s), 9.1(m), 7.6(vw), 7.4(m), 6.3(m), 5.9(w)， 5.5(w), 5.2(vw)， 5.0(w), 4.87(m), 4.74(m), 4.47(m)， 4.32(m), 4.16(s), 4.12(s), 4.04(m), 3.85(m), 3.41(s), 3.19(m), 2.92(vw), 2.72(w) A。
顯著的d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度是12.6(s), 6.3(m), 4.47(m), 4.16(s)， 4.12(s), 3.41(s)A。
相對強(qiáng)度(。/。re1.mt.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
s(強(qiáng))〉50 m(中等)12-50 w(弱》8-12 vw(非常弱)<8
實(shí)施例4
2-羥基-3-「5-。馬啉-4-基曱基V比啶-2-基l 1//-吲哚-5-曱腈乙二磺酸鹽
將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈(0.6568 g)懸浮在乙醇(6.55ml)和1,2-乙二磺酸(0.3471 g)中。將該溶液在40° C加熱14小時，然后在2小時中冷卻至室溫。將晶體過濾，用乙醇(2 ml) 洗滌，并且在40° C真空干燥47小時。干燥后，獲得了 0.7797 g2-羥 基_3-[5-(嗎啉-4-基甲基戶比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈乙二磺酸鹽。 力(500 MHz， DMSO-d6): 14.74 (1H, brs), 10.98 (1H, s), 9.87 (1H， brs), 8.27 (1H, s), 8.00 (1H, d), 7.89 (2H, br m), 7.33 (1H, dd), 7.03 (1H, d), 4.33 (2H, s), 4.00 (2H， d)， 3.65 (2H, t), 3.39 (2H, d), 3.14 (2H, brq), 2.74 (4H, s)。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。衍射圖表現(xiàn)出以下d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度19.9(m)， 18.1(w), 15.3(s), 13.2(vw)， 11.3(m), 9.0(vw)， 8.2(w), 8.0(w), 7.6(w), 7.4(w), 6.8(w), 6.6(m), 6.3(m), 6.0(w), 5.6(s), 5.4(m), 5.2(m), 5.1(m), 5.0(m), 4.85(m), 4'32(s), 4.24(m), 4.17(w), 4,12(s)， 4.08(s), 3.90(w), 3.82(w), 3.66(w), 3.53(m), 3.35(m), 3.27(m)， 3.00(vw)A。
顯著的d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度是15.3(s), 11.3(m), 5.6(s), 4.32(s), 4.12(s)， 4.08(s)A。
相對強(qiáng)度(。/。rel.int.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
s(強(qiáng)》〉55 m(中等)24-55 w(弱)13-24 vw(非常弱)<13
實(shí)施例5
2-羥基-3-『5-(嗎啉-4-基曱基>比啶-2-基11//-吲哚-5-曱腈磷酸鹽
將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈(0.5919 g )懸浮在乙醇(5.9 ml )和o-亞磷酸(O.l ml)中。將該溶液在40° C加熱 14小時，然后在2小時中冷卻至室溫。將晶體過濾，用乙醇(2 ml)洗滌， 并且在40° C真空干燥47小時。干燥后，獲得了 0.6666 g 2-羥基
-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)他啶-2-基]1//-吲咮-5-曱腈磷酸鹽。
!H (500 MHz, DMSO-d6): 14.78 (1H, br s), 10.90 (1H, s), 8.12 (1H,
s), 7.91 (1H, s), 7.85 (1H, brd)， 7.81 (1H, dd), 7.29 (1H, dd), 7.01 (IH, d), 3.60 (4H, brt)， 3.46 (2H, s), 2.45 (4H, br s)。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。衍射圖表現(xiàn)出以下d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度15.2(m)， 7.6(w), 5.1(w), 4.12(vw)， 2.29(vw)A。
顯著的d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度是15.2(m), 7.6(w), 5.1(w), 4.12(vw) A。
相對強(qiáng)度(％ rel.int.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
m(中等)>50 w(弱)15-50 vw(非常弱)<15
實(shí)施例6
2-鞋基-3-f5-(嗎啉-4-基甲基H匕啶-2-基l 1#-吲咮-5-甲腈富馬酸鹽
將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基"比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈(0.5765 g )懸浮在乙醇(5.7 ml)和富馬酸(0.1893 g )中。將該溶液在40。 C加熱 14小時，然后在2小時中冷卻至室溫。將晶體過濾，用乙醇(2 ml)洗滌， 并且在40° C真空干燥47小時。干燥后，獲得了 0.6316 g 2-羥基 _3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈富馬酸鹽。 力(500 MHz, DMSO-d6): 14.78 (1H, br s)， 10.89 (1H, s)， 8.11 (1H, brs), 7.91 (1H, brs), 7.85 (1H, br d), 7.80 (1H, brdd), 7.28 (1H， dd), 7.00 (1H, d)， 6.63 (2H, s), 3.59 (4H, brt), 3.42 (2H, s), 2.42 (4H， brs)。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。衍射圖表現(xiàn)出以下d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度19.8(w)， 16.5(m), 15.3(w), 13.1(m)， 12.7(m), 12.0(w), 10.5(w), 9.1(w), 7.6(w)， 6.8(m)， 6.5(w), 6.3(w), 6.2(w)， 6.0(m)， 5.6(w), 5.5(w)， 5.2(w)， 5.1(w)， 4.94(w)， 4.86(m), 4.71(w),4.63(w), 4.55(m), 4.38(m), 4.23(w)， 4.12(w), 3.58(m), 3.40(m), 3.26(s), 3.12(m) A。
顯著的d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度是16.5(m), 13.1(m)， 12.7(m), 6.8(m), 3.26(s)A。
相對強(qiáng)度(％ rel.int.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
s(強(qiáng))〉75 m(中等)33-75 w(弱)<33
實(shí)施例7
2-羥基-3-『5-(嗎啉-4-基曱基>比啶-2-基11//-吲咮-5-甲腈馬來酸鹽
將2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基戶比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈(0.5473 g) 懸浮在乙醇(5.47ml)和馬來酸(0.1719 g)中。將該溶液在40° C加熱14 小時，然后在2小時中冷卻至室溫。將晶體過濾，用乙醇(2ml)洗滌， 并且在40° C真空干燥47小時。干燥后，獲得了 0.5902 g 2-羥基 一3-[5-(嗎啉-4-基曱基>比啶-2-基]1//-口引咮-5-甲腈磷酸鹽。
(500 MHz, DMSO-d6): 14.75 (1H, br s), 10.94 (1H, s)， 8.19 (1H, s), 7.96 (1H, s), 7.88 (1H, brd), 7.83 (1H, dd), 7.32 (1H， dd), 7.02 (1H， d), 6.11 (2H, s), 3.93 (2H, br s), 3.72 (4H, br s), 2.89 (4H, br s)。
通過X-射線粉末衍射(XRPD)來分析晶體。衍射圖表現(xiàn)出以下d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度20.1(w), 18.5(m), 15.3(w), 12.7(s), 10.3(m), 10.0(m), 9.0(m), 7.9(vw), 7.6(w), 7.4(w), 6.8(s), 6.5(w)， 6.3(m), 6.1(m), 5.6(w), 5.3(w)， 5.2(w), 4.78(m)， 4.67(m), 4.58(s), 4.46(m), 4.36(m), 4.23(m), 3.98(w), 3.79(m), 3.14(w), 3.05(m), 2.94(w)A。
顯著的d-值(以埃給出)和相對強(qiáng)度是12.7(s), 6.8(s)， 6.1(m), 4.58(s), 3.05(m)A。
相對強(qiáng)度(％ rel.mt.)較不可靠，使用下列定義來替代數(shù)值
s(強(qiáng))>50 m(中等)14-50 w(弱)4-14 vw(非常弱)<4
如下所述，使用X-射線粉末衍射(XRPD)來分析2-羥基-3-[5-(嗎啉 -4-基曱基)吡啶-2-基]1^吲哚-5-甲腈檸檬酸鹽、曱磺酸鹽、乙磺酸鹽、 乙二磺酸鹽、磷酸鹽、富馬酸鹽或馬來酸鹽的結(jié)晶度
已經(jīng)從檸檬酸鹽結(jié)晶的衍射圖中提取了用由Bragg公式計算的d-值和強(qiáng)度表征的峰。僅把最有特征的、顯著的、獨(dú)特的和/或可再現(xiàn)的 主要峰列在表格中，但是另外的峰也可以使用常規(guī)方法從衍射圖中提 取出來。在大多數(shù)情況下，這些可再現(xiàn)并且在誤差限度內(nèi)的主要峰的 存在足以確定所述結(jié)晶鹽的存在。
X-射線衍射分析是使用PANalytical X' Pert Pro MPD衍射儀，從1 至40° 2e進(jìn)行64分鐘，使用或不使用內(nèi)標(biāo)參照物。26角是針對標(biāo)準(zhǔn) 值校正的，隨后計算成d-值(間距值)。d-值可以在最后一位給出的小數(shù) 位上以± 2改變。樣本制備是用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行的，例如在Giacovazzo, C.等人(1995), Fundamentals of Crystallography, Oxford University Press; Jenkins, R. and Snyder, R. L. (1996》 Introduction to X-Ray Powder Diffractometry， John Wiley & Sons, New York; Bunn, C. W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London or Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974》X-ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sons, New York中描述的方法。
通過表現(xiàn)出提高骨形成的以下實(shí)施例來描述本發(fā)明
實(shí)施例8
用2-羥基-3-「5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基11//-吲哚-5-甲腈治療的大鼠 中提高的骨形成
將化合物2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)口比啶-2-基]1//-吲咮-5-甲腈 檸檬酸鹽在水中配制成溶液，加入0.3-5% (w/v)羥丙基-P-環(huán)糊精和 0.5% (w/v)抗壞血酸。以15、 55或100 iumol/kg/天的劑量通過管飼法對
雄性和雌性Han Wistar大鼠給藥，給藥4周，并且與載體對照進(jìn)行比 較。進(jìn)行完全尸體剖檢，并且把組織保存在10%福爾馬林中。將股骨、 脛骨和胸骨脫釣，包埋在石蠟中，切成5]Lim厚的片，并且用蘇木精和 曙紅染色。通過光學(xué)顯微鏡評估，在100 Mmol/kg劑量水平，骨形成 提高，表現(xiàn)為小梁骨增厚、皮質(zhì)骨增厚、骨膜肥厚以及成骨細(xì)胞數(shù)目 增多(圖lb)。
圖la顯示了載體治療的對照大鼠中正常小梁骨以及股骨(骺)中的 骨髓。圖lb顯示了在用100 |umol/kg 2-鞋基-3-[5-(嗎淋-4-基甲基)處啶 -2-基]1//-吲哚-5-甲腈治療4周的大鼠中，類骨質(zhì)形成的顯著增加以及 股骨相同區(qū)域中成骨細(xì)胞數(shù)目的增加(放大倍數(shù)x ioo)。
權(quán)利要求
1. 游離堿或可藥用鹽形式的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]1H-吲哚-5-甲腈在制備用于治療和/或預(yù)防骨相關(guān)疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用。
2. 權(quán)利要求1的化合物的應(yīng)用，其中所述化合物是2-羥基 一3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈檸檬酸鹽。
3. 權(quán)利要求1的化合物的應(yīng)用，其中所述化合物是 2-鞋基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基>比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈甲磺酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基>比啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈乙磺酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)p比啶-2-基]l/Z-吲哚-5-曱腈乙二磺酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)他啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈磷酸鹽， 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)他啶-2-基]1//-吲哚-5-甲腈富馬酸鹽或 2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)p比啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈馬來酸鹽。
4. 權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述藥物是用于預(yù) 防和治療骨質(zhì)疏松。
5. 權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述應(yīng)用是在制備 用于提高哺乳動物骨形成的藥物中的應(yīng)用。
6. 權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述應(yīng)用是在制備 用于提高松質(zhì)骨形成和/或新骨形成的藥物中的應(yīng)用。
7. 權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述應(yīng)用是在制備 用于提高哺乳動物骨礦物質(zhì)密度的藥物中的應(yīng)用。
8. 權(quán)利要求l-3任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述應(yīng)用是在制備 用于降低哺乳動物骨折發(fā)生率的藥物中的應(yīng)用。
9. 權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述應(yīng)用是在制備 用于提高哺乳動物骨折愈合的藥物中的應(yīng)用。
10. 權(quán)利要求1 -9任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述哺乳動物是人。
11. 權(quán)利要求l-9任一項(xiàng)的化合物的應(yīng)用，其中所述哺乳動物是動物。
12. 預(yù)防和/或治療骨相關(guān)疾病或病癥的方法，所述方法包括給有 此需要的哺乳動物施用治療有效量的游離堿或可藥用鹽形式的2-羥基 _3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]1//-吲哚-5-曱腈。
13. 預(yù)防和/或治療骨相關(guān)疾病的方法，所述方法包括給有此需要的哺乳動物施用治療有效量的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]1//-吲咮-5-甲腈檸檬酸鹽。
14. 預(yù)防和/或治療骨相關(guān)疾病的方法，所述方法包括給有此需要 的哺乳動物施用治療有效量的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]l/f-吲哚-5-甲腈曱磺酸鹽、2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡咬-2-基]1//-吲哚-5-曱腈乙磺酸鹽、2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]lF-吲哚-5-曱腈乙二磺酸鹽、2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]1//-口引哚-5-曱腈磷酸鹽、2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基戶比啶-2-基〗吲哚-5-甲腈富馬酸鹽或2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基曱基)吡啶-2-基]1//-口引 咮-5-甲腈馬來酸鹽。
15. 預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏水〉的方法，所述方法包括:纟合哺乳動物施 用治療有效量的權(quán)利要求12 -15任 一 項(xiàng)中描述的化合物。
16. 提高骨形成的方法，所述方法包括給哺乳動物施用治療有效量 的權(quán)利要求12-15任一項(xiàng)中描述的化合物。
17. 提高;^質(zhì)骨形成和/或新骨形成的方法，所述方法包括給哺乳 動物施用治療有效量的權(quán)利要求12-15任一項(xiàng)中描述的化合物。
18. 提高骨礦物質(zhì)密度的方法，所述方法包括給哺乳動物施用治療 有效量的權(quán)利要求12-15任一項(xiàng)中描述的化合物。
19. 降低骨折發(fā)生率的方法，所述方法包括給哺乳動物施用治療有 效量的權(quán)利要求12-15任一項(xiàng)中描述的化合物。
20. 提高骨折愈合的方法，所述方法包括給哺乳動物施用治療有效 量的權(quán)利要求12-15任一項(xiàng)中描述的化合物。
21. 權(quán)利要求12-20任一項(xiàng)的方法，其中所述哺乳動物是人。
22. 權(quán)利要求12-20任一項(xiàng)的方法，其中所述哺乳動物是動物。
全文摘要
本發(fā)明涉及游離堿或可藥用鹽形式的2-羥基-3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]1H-吲哚-5-甲腈在制備用于治療和/或預(yù)防骨相關(guān)疾病、骨質(zhì)疏松以及提高骨形成、骨礦物質(zhì)密度的藥物中的新應(yīng)用。本發(fā)明還涉及預(yù)防和/或治療這些疾病或病癥的方法。
文檔編號A61P19/10GK101378754SQ200780004363
公開日2009年3月4日 申請日期2007年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月2日
發(fā)明者A·-L·伯格, R·巴特 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司