專利名稱：用于控制高眼壓及治療青光眼的異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總地涉及對(duì)高眼壓和青光眼的治療，更具體涉及用于治療高眼壓和青光眼的異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。

背景技術(shù)：
被稱為青光眼的疾病狀態(tài)以視神經(jīng)的不可逆損傷導(dǎo)致的永久性視覺功能喪失為特征。高眼內(nèi)壓(IOP)是幾個(gè)形態(tài)或功能上不同類型的青光眼的典型特征，其被認(rèn)為與該疾病的病理過(guò)程有原因地相關(guān)。高眼壓是眼內(nèi)壓升高，但無(wú)明顯的視覺功能喪失發(fā)生的情況，這樣的患者被認(rèn)為處于最終發(fā)生與青光眼相關(guān)的視覺喪失的高危狀態(tài)。如果能早檢測(cè)出青光眼或高眼壓，并立即用有效降低高眼內(nèi)壓的藥物治療，通常可改善視覺功能喪失或其進(jìn)展惡化。另外，有些患有青光眼視野缺損的患者具有相對(duì)較低的的眼內(nèi)壓。這些所謂壓力正?；虻脱蹓盒郧喙庋鄣幕颊咭部墒芤嬗诮档秃?或控制IOP的藥劑。
經(jīng)證明對(duì)降低眼內(nèi)壓有效的藥物療法包括減少眼房水產(chǎn)生的藥劑和增加流出能力的藥劑兩者。所述療法一般通過(guò)局部(直接施用于眼)或口服兩種可能途徑之一施用。但藥學(xué)上的眼部抗高壓方法卻表現(xiàn)出多種不良副作用。例如，縮瞳藥如毛果蕓香堿可引起視覺模糊、頭痛及其它負(fù)面的視覺副作用。全身施用的碳酸酐酶抑制劑還可引起惡心、消化不良、疲乏和代謝性酸中毒。某些前列腺素引發(fā)充血、眼癢及睫毛和眶周皮膚變暗。所述負(fù)面副作用可導(dǎo)致患者依從性降低或?qū)е轮委熃K止，以致正常視覺繼續(xù)惡化。另外還有在用某些已有的青光眼治療方法治療時(shí)反應(yīng)不佳的個(gè)體。因此，需要其它治療青光眼和高眼壓的治療劑。
異戊烯轉(zhuǎn)移酶是異戊間二烯生物合成途徑的一部分，所述途徑包括膽固醇合成和甲羥戊酸生成。甲羥戊酸的下游代謝產(chǎn)物(如牻牛兒基牻牛兒基焦磷酸(GGPP)和法尼基焦磷酸(FPP))被用于蛋白的翻譯后加工。該加工過(guò)程中，異戊烯轉(zhuǎn)移酶-法尼基轉(zhuǎn)移酶和牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶將法尼基(C15)或牻牛兒基牻牛兒基(C20)脂錨定蛋白轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)C-末端氨基酸基序CAAX中的半胱氨酸殘基上。經(jīng)加工的蛋白如Ras、Rab和Rho可參與細(xì)胞生長(zhǎng)，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞凋亡(Doll，等人，Curr Opin Drug Discov Devel.，2004，Vol.7(4)478-486)。尤其是細(xì)胞肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的Rho-依賴性變化可導(dǎo)致細(xì)胞形狀、收縮性和運(yùn)動(dòng)性改變，或許涉及眼組織(Rao等人，IOVS，2001，Vol.421029；Rao等人，Exp Eye Res，2005，Vol.80197-206；Cellini等人，Ophth Res，2005，Vol.3743-49)。本領(lǐng)域正積極探索異戊烯轉(zhuǎn)移酶在癌癥疾病狀態(tài)中的作用。
在高眼內(nèi)壓的情況中由小梁網(wǎng)細(xì)胞產(chǎn)生的活性劑如結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)和纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)可升高。Kirwan等人，Glia.，2005 Dec.，Vol.52(4)309-24；Liton等人，J CellPhysiol.，2005 Dec.，Vol.205(3)364-71；Esson等人，InvestOphthalmol Vis Sci.，2004 Feb.，Vol.45(2)485-91；Daniels等人，Am J Pathol.，2003 Nov.，Vol.163(5)2043-52；Liang等人，J Biol Chem.，2003 Jul 18，Vol.278(29)27267-77；Ho，等人，Br.J.Ophthalmol.，2005，Vol.89169-173。因此這類活性劑可能促成青光眼的發(fā)病機(jī)理。
發(fā)明概述 本發(fā)明涉及使用異戊烯轉(zhuǎn)移酶-牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶(GGTase)和法尼基轉(zhuǎn)移酶(FTase)的抑制劑對(duì)青光眼和高眼壓的治療。本發(fā)明的實(shí)施方案認(rèn)識(shí)到，牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和/或法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑可改變眼房水流出，且證明其有利于高眼壓和青光眼的治療。在優(yōu)選的實(shí)施方案中通過(guò)眼局部給藥、眼前房?jī)?nèi)給藥、玻璃體內(nèi)給藥、視網(wǎng)膜下給藥或經(jīng)鞏膜給藥遞送這些抑制劑。
本發(fā)明考慮的某些化合物可兼具牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制活性，且可單獨(dú)施用或在組合物中施用。在其它實(shí)施方案中，將分開的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物在同一組合物中一起施用或各自分別施用或以不同的組合物施用。
本發(fā)明的另一方面是提供治療或預(yù)防青光眼的方法，以顯著降低小梁網(wǎng)細(xì)胞產(chǎn)生結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)和纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)。
以上簡(jiǎn)要概述寬泛地描述了本發(fā)明的某些實(shí)施方案的特征和技術(shù)優(yōu)點(diǎn)。以下發(fā)明詳述將描述另外特征和技術(shù)優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)發(fā)明詳述結(jié)合任何附圖考慮會(huì)更好地理解據(jù)信是本發(fā)明特征性的新特性。但本文提供的附圖旨在輔助說(shuō)明本發(fā)明或輔助對(duì)本發(fā)明的理解，不為限定本發(fā)明的范圍。
附圖簡(jiǎn)述 參照以下描述結(jié)合附圖(其中類似的參照數(shù)字指示類似的特征)可更加全面理解本發(fā)明及其優(yōu)點(diǎn)，其中

圖1是顯示牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)TM細(xì)胞系中CTGF基因的基礎(chǔ)表達(dá)及TGFβ2-誘導(dǎo)的表達(dá)的影響的圖； 圖2是顯示法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)TM細(xì)胞系中CTGF基因的基礎(chǔ)表達(dá)及TGFβ2-誘導(dǎo)的表達(dá)的影響的圖； 圖3是顯示牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)TM細(xì)胞系中PAI-1基因的基礎(chǔ)表達(dá)及TGFβ2-誘導(dǎo)的表達(dá)的影響的圖；及 圖4顯示牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的細(xì)胞毒性效應(yīng)的圖。
發(fā)明詳述 本發(fā)明在幾個(gè)實(shí)施方案中涉及用于治療高眼壓和青光眼的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑。其它實(shí)施方案包括通過(guò)施用所述牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物治療高眼壓和青光眼的方法。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案施用所述牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶/法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑可允許抑制劑以治療水平到達(dá)適合的靶組織，如小梁網(wǎng)，從而減輕及防止青光眼導(dǎo)致的進(jìn)一步眼損傷。
用于本發(fā)明的實(shí)施方案的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑特別包括美國(guó)專利No.6,693,123、No.6,627,610、No.6,210,095、No.6,221,865、No.6,204,293、No.5,965,539和No.5,789,558中所列的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物，這些專利通過(guò)引用并入文本。
用于本發(fā)明的實(shí)施方案的法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑特別包括美國(guó)專利No.6,693,123、No.6,627,610、No.6,310,095、No.6,221,865、No.6,218,375、No.6,204,293、No.6,083,985、No.6,083,917、No.6,011,175、No.5,856,310和No.5,834,434中所列的法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物，這些專利通過(guò)引用并入文本。用于本發(fā)明的實(shí)施方案的其它法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑是FTI-276、FTI-277、L-739，749、L-739，750、L-745，631、RPR-130401、BMS-193269、BMS-184878、SCH-66336、BZA-2B、BZA-5B、R-115777、B956、B1086和法尼基甲基羥基氧膦基甲基膦酸(Sebti等人，Exp Opin Invest Drugs，2000，Vol.9(12)2767-2782；Sebti，The Oncologist，2003，Vol.8(Supp3)30-38)。
本發(fā)明的某些實(shí)施方案包括兼有牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制活性的化合物，且一般是基于CAAX基序的擬肽(peptidomimetic)抑制劑。所述化合物實(shí)例包括，但不限于C-V-I-M、C-V-L-L、FTI-276、FTI-277、GGTI-297、GGTI-298、FTI-2148、FTI-2153、GGTI-2154、GGTI-2166、R115777、SCH66336、HFPA(Sebti等人，Exp Opin Invest Drugs，2000，Vol.9(12)2767-2782；Sebti，The Oncologist，2003，Vol.8(Supp 3)30-38)。已顯示對(duì)咪唑-甲基二芳基醚結(jié)構(gòu)的修飾具有雙重的法尼基轉(zhuǎn)移酶和牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制活性(法尼基轉(zhuǎn)移酶IC50＝2.9nM、牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶IC50＝7.1nM)。以下顯示了這些化合物中的幾個(gè)，連同具有牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶特異性活性的化合物(GGTI-286和GGTI-298)
上述商品化的化合物的抑制常數(shù)可以得到且顯示于下表1。這些化合物也可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)合成。
表1.所選異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑的抑制常數(shù) 認(rèn)識(shí)到本文公開的化合物可含有一個(gè)或多個(gè)手性中心。本發(fā)明考慮本文所公開化合物的所有對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體和混合物。此外，本發(fā)明的某些實(shí)施方案包括所公開化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽包括，但不限于，適合于治療疾病而無(wú)不適當(dāng)?shù)牟涣夹?yīng)(如變態(tài)反應(yīng)或者毒性)的可溶或可分散形式的化合物。代表性的藥學(xué)上可接受的鹽包括，但不限于，酸加成鹽如乙酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽或磷酸鹽，和堿加成鹽如鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽或鋁鹽。
重要的是認(rèn)識(shí)到，取代基當(dāng)引入到所示結(jié)構(gòu)單元中時(shí)可單一或多個(gè)存在。例如，取代基鹵素(指氟、氯、溴或碘)將表示其所連的單元可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子取代，其中所述鹵素原子可相同或不同。
遞送模式 可將本發(fā)明的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物摻入多種類型的眼用制劑中用于遞送。可使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的技術(shù)將所述化合物直接遞送至眼(例如局部眼滴劑或眼藥膏；緩釋裝置如植入穹隆或植入鄰近鞏膜或在眼內(nèi)的藥用遞藥海綿；眼周、結(jié)膜、眼球筋膜下、眼前房?jī)?nèi)、玻璃體內(nèi)或小管內(nèi)注射)或全身性遞送(例如經(jīng)口；靜脈內(nèi)、皮下或肌肉內(nèi)注射；胃腸外、皮膚或鼻遞送)。還考慮可將本發(fā)明的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物制成眼內(nèi)插入物或可植入裝置。
優(yōu)選將本文公開的牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物摻入用于遞送到眼的局部眼用制劑?？蓪⑺龌衔锱c眼科學(xué)上可接受的防腐劑、表面活性劑、增粘劑、滲透促進(jìn)劑、緩沖劑、氯化鈉和水組合形成含水的無(wú)菌眼用懸液或溶液?？赏ㄟ^(guò)將化合物溶于生理學(xué)上可接受的等滲水性緩沖液來(lái)制備眼用溶液制劑。所述眼用溶液還可包括眼科學(xué)上可接受的表面活性劑以輔助溶解所述化合物。此外，所述眼用溶液還可含有增加粘度的試劑(如羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等)以改善所述制劑在結(jié)膜囊中的保留。也可使用膠凝劑，包括，但不限于膠凝糖和黃原膠。為制備無(wú)菌眼藥膏制劑，在合適的賦形劑(如礦物油、液體羊毛脂或白凡士林)中組合活性成分與防腐劑?？筛鶕?jù)類似眼用制劑的已公開配方，通過(guò)將所述化合物懸浮于制備自例如卡波普-974等的組合的親水性基質(zhì)中來(lái)制備無(wú)菌眼用凝膠制劑；可摻入防腐劑和張度劑。
優(yōu)選將牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物制成pH約4-8的局部眼用懸液或溶液。所述局部懸液或溶液中所述化合物的含量足以在經(jīng)歷IOP升高的患者中降低IOP和/或足以在青光眼患者中維持正常IOP水平。這樣的量在本文中被稱為“有效控制IOP的量”或更簡(jiǎn)稱為“有效量”。這些制劑中所述化合物的正常含量是0.01-5重量/體積百分比(“w/v％”)，但優(yōu)選含量是0.25-2w/v％。因此，對(duì)于局部呈遞，根據(jù)臨床醫(yī)師決定，可將1-2滴這些制劑遞送到眼表面，每日1-4次。
也可將所述牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物與其它治療高眼內(nèi)壓或青光眼的藥劑(如，但不限于rho激酶抑制劑、β-受體阻斷劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、α2激動(dòng)劑、縮瞳藥和神經(jīng)保護(hù)劑)組合使用。
生物活性測(cè)定 體外生物活性測(cè)定 在某些實(shí)施方案中可通過(guò)體外測(cè)定(如體外異戊烯轉(zhuǎn)移酶測(cè)定，描述于Burke等人，PNAS，1999，Vol.962313062-13067和Goossens等人，J.Pharm.Biomed.Analy.，2005，Vol.37417-422)評(píng)價(jià)某些化合物抑制牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶的能力。簡(jiǎn)言之，使用Goossens的方法制備包含牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶或法尼基轉(zhuǎn)移酶連同對(duì)于每種酶的丹磺酰肽底物的實(shí)驗(yàn)制劑和對(duì)照制劑。將測(cè)試化合物加入實(shí)驗(yàn)制劑，允許反應(yīng)進(jìn)行。反應(yīng)后，測(cè)量每個(gè)肽的熒光反應(yīng)，與對(duì)照相比測(cè)量到的熒光的降低表示測(cè)試化合物的抑制活性較大。
體內(nèi)生物活性測(cè)試 在某些實(shí)施方案中可通過(guò)使用新西蘭白兔和/或食蟹猴的體內(nèi)測(cè)定評(píng)價(jià)某些牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物安全抑制各相應(yīng)酶的能力。
在新西蘭白兔中評(píng)價(jià)眼安全 給5只新西蘭白兔的雙眼局部施用一份30μL于賦形劑中的測(cè)試化合物，另外5只動(dòng)物給予單獨(dú)的賦形劑。給藥后繼續(xù)監(jiān)測(cè)動(dòng)物0.5小時(shí)，然后每0.5小時(shí)監(jiān)測(cè)一次直至2小時(shí)或直至效果不再明顯。
新西蘭白兔中的急性IOP反應(yīng) 用0.1％丙對(duì)卡因進(jìn)行輕角膜麻醉后，使用Mentor Classic 30氣動(dòng)式眼壓計(jì)測(cè)定眼內(nèi)壓(IOP)。每次測(cè)量后用1或2滴鹽水清洗眼睛?；€IOP測(cè)量后，將測(cè)試化合物于一份30μL試樣中滴入每只動(dòng)物的一只或兩只眼中，或?qū)⒒衔锏稳胍恢谎劬Χ鴮①x形劑滴入對(duì)側(cè)眼中。隨后于0.5小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)和5小時(shí)時(shí)測(cè)量IOP。
食蟹猴中的急性IOP反應(yīng) 如前所述用0.1％丙對(duì)卡因進(jìn)行輕角膜麻醉后，使用Alcon氣動(dòng)式眼壓計(jì)測(cè)定眼內(nèi)壓(IOP)(Sharif等人，J.Ocular Pharmacol.Ther.，2001，Vol.17305-317；May等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，2003，Vol.306301-309)。每次測(cè)量后用1或2滴鹽水清洗眼睛。在基線IOP測(cè)量后，將測(cè)試化合物于一份(300μg)或兩份(600μg)30μL試樣中滴入9只食蟹猴的所選眼睛中。將賦形劑滴入另外6只動(dòng)物的所選眼睛中。隨后于1小時(shí)、3小時(shí)和6小時(shí)時(shí)測(cè)量IOP。所有動(dòng)物的右眼接受激光小梁成形術(shù)以誘導(dǎo)高眼壓。所有左眼正常，因此具有正常的IOP。
實(shí)施例 提供以下實(shí)施例以說(shuō)明本發(fā)明的某些實(shí)施方案，但不應(yīng)將其理解為對(duì)權(quán)利要求施加任何限制。例如，實(shí)施例4中的術(shù)語(yǔ)“異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑”指所描述的制劑被認(rèn)為適合為本文公開的任何牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制化合物。
實(shí)施例1 RNA分離和定量RT-PCR 使用Qiagen RNeasy 96系統(tǒng)根據(jù)廠商說(shuō)明書(Qiagen)從TM細(xì)胞中分離總RNA。
基本上如前所述(Shepard等人，IOVS，2001，Vol.423173)使用ABI

7700序列檢測(cè)系統(tǒng)(Applied Biosystems)通過(guò)定量實(shí)時(shí)RT-PCR(QRT-PCR)驗(yàn)證CTGF和PAI-1的差異表達(dá)。用PrimerExpress軟件(Applied Biosystems)設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增CTGF的引物，以退火到Genbank登錄#NM_001901.1的鄰近外顯子(CAGCTCTGACATTCTGATTCGAA，nts 1667-1689和TGCCACAAGCTGTCCAGTCT，nts 1723-1742，探針序列6FAM-AATCGACAGGATTCCGATTCCTGAACAGTG-TAMRA)，產(chǎn)生76bp的擴(kuò)增子。用于擴(kuò)增PAI-1的引物購(gòu)自ABI(Hs00167155_ml)，其對(duì)應(yīng)于Genbank登錄#NM_000602.1。將CTGF或PAI-1的擴(kuò)增相對(duì)于18S核糖體RNA表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)化，后者使用針對(duì)18S rRNA基因設(shè)計(jì)的引物(GenBank登錄#X03205；GTCCCTGCCCTTTGTACACAC，nts 1680-1700和CGATCCGAGGGCCTCACTA，nts 1730-1749，探針序列6FAM-CTGCAAGCATATAATACA-MGBNFQ)，產(chǎn)生69bp的擴(kuò)增子。CTGF或PAI-1的QRT-PCR與18S引物/探針組一起多路進(jìn)行，50μl終體積由40nM 18S或900nM CTGF或PAI-1引物、100nM 18S探針或100nM CTGF或250nM PAI-1探針、5μl RNA、1×Multiscribe and RNase InhibitorMix(ABI)和

Universal Mix(ABI)組成。熱循環(huán)條件為48℃ 30min，95℃ 10min，隨后40個(gè)循環(huán)的95℃ 15s，60℃ 1min。使用SDS軟件(1.9.1版，Applied Biosystems)和MS Excel 2002(Microsoft)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。如PE Biosystems用戶公告#2所述，使用ΔΔCt法定量相對(duì)RNA濃度。擴(kuò)增產(chǎn)物水平表示為一式四份QRT-PCR測(cè)定的平均值±SEM。使用SDS軟件(1.9.1版，AppliedBiosystems)和MS Excel 97(Microsoft)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
實(shí)施例2 對(duì)TGFβ-刺激的CTGF和PAI-1基因表達(dá)的抑制 本實(shí)施例中，研究了牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶和法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)培養(yǎng)的人小梁網(wǎng)細(xì)胞中的CTGF基因表達(dá)的效力。結(jié)果總結(jié)于圖1和圖2。本實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)實(shí)施例1的方案通過(guò)QRT-PCR測(cè)量并比較了CTGF/18S cDNA水平。
從圖1的結(jié)果總結(jié)可以看出，測(cè)試牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑GGTI-2133以測(cè)定其對(duì)多種不同TM細(xì)胞培養(yǎng)物中的CTGF水平的影響。如圖1所示，當(dāng)TGFβ2存在于賦形劑中時(shí)，所測(cè)得的CTGF水平相比單獨(dú)賦形劑有所升高。在用CTGF和GGTI-2133二者處理的細(xì)胞培養(yǎng)物中，測(cè)得的CTGF水平低于單獨(dú)賦形劑處理，且與用TGFβ2處理的細(xì)胞相比，其CTGF水平顯著降低。
圖2所示的結(jié)果說(shuō)明，當(dāng)比較單獨(dú)用TGFβ2處理的細(xì)胞系與用TGFβ2和FTI-277二者處理的細(xì)胞系時(shí)，法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑FTI-277也導(dǎo)致測(cè)得的CTGF水平降低。
圖3說(shuō)明，當(dāng)比較單獨(dú)用TGFβ2處理的細(xì)胞系與用TGFβ2和GGTI-2133或FTI-277二者處理的細(xì)胞系時(shí)，GGTI-2133和FTI-277均能導(dǎo)致測(cè)得的PAI-1降低。
實(shí)施例3 圖4顯示使用CytoTox-ONE Homogenous Membrane IntegrityAssay(Promega)呈現(xiàn)GGTI-2133和FTI-277的細(xì)胞毒性效應(yīng)的圖，所述測(cè)定測(cè)量用測(cè)試化合物處理后釋放到培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶(LDH)。所有測(cè)試濃度的兩種化合物都具有與單獨(dú)用賦形劑處理的測(cè)量結(jié)果相似的LDH釋放測(cè)量結(jié)果。由此看來(lái)，兩種化合物都具有相對(duì)低的細(xì)胞毒性。
實(shí)施例4 實(shí)施例5 實(shí)施例6 實(shí)施例7 已詳細(xì)描述了本發(fā)明及其實(shí)施方案。但無(wú)意將本發(fā)明的范圍限定到本說(shuō)明書中描述的任何過(guò)程、制備、物質(zhì)組合物、化合物、手段、方法和/或步驟的特定實(shí)施方案。在不脫離本發(fā)明的精神和/或必要特征的情況下，可對(duì)本文公開的材料做多種修改、替代和變更。相應(yīng)地，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可容易地從本文公開內(nèi)容認(rèn)識(shí)到，根據(jù)本發(fā)明的這類相關(guān)實(shí)施方案，可應(yīng)用與本文所述的實(shí)施方案行使實(shí)質(zhì)上相同功能或達(dá)到實(shí)質(zhì)上相同結(jié)果的后續(xù)修改、替代和/或變更。因此，以下的權(quán)利要求旨在將對(duì)本文公開的過(guò)程、制備、物質(zhì)組合物、化合物、手段、方法和/或步驟所做的修改、替代和變更包括在其范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.治療青光眼或高眼內(nèi)壓的方法，包括施用藥學(xué)上有效量的包含至少一種異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑的組合物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述至少一種異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑是牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑或法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述施用包括施用包含至少一種牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑和至少一種法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的組合物。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物還包含選自下列的化合物眼科學(xué)上可接受的防腐劑、表面活性劑、增粘劑、滲透促進(jìn)劑、膠凝劑、疏水性堿、賦形劑、緩沖劑、氯化鈉和水。
5.權(quán)利要求1的方法，還包括施用作為所述組合物的一部分或分別施用的選自下列的化合物β-受體阻斷劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、α2激動(dòng)劑、縮瞳藥、神經(jīng)保護(hù)劑及其任何組合。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物包含從約0.01w/v％至約5w/v％的所述至少一種異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
7.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物包含從約0.25w/v％至約2w/v％的所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
8.用于治療高眼內(nèi)壓和青光眼的組合物，包含藥學(xué)上有效量的異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
9.權(quán)利要求8的組合物，其中所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑是牻牛兒基牻牛兒基轉(zhuǎn)移酶抑制劑或法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
10.權(quán)利要求8的組合物，還包含選自下列的化合物眼科學(xué)上可接受的防腐劑、表面活性劑、增粘劑、滲透促進(jìn)劑、膠凝劑、疏水性堿、賦形劑、緩沖劑、氯化鈉和水。
11.權(quán)利要求8的組合物，其中所述組合物包含從約0.01w/v％至約5w/v％的所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
12.權(quán)利要求8的組合物，其中所述組合物包含從約0.25w/v％至約2w/v％的所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
13.權(quán)利要求8的組合物，其中所述組合物還包含選自下列的化合物β-受體阻斷劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、α2激動(dòng)劑、縮瞳藥、神經(jīng)保護(hù)劑、rho激酶抑制劑及其任何組合。
14.權(quán)利要求8的組合物，其中所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑選自GGTI-286、GGTI-287、GGTI-297、GGTI-298、GGTI-2133、GGTI-2147、FTI-276、FTI-277、FTI-2148、FTI-2153、R115777、其組合及其藥學(xué)上可接受的鹽。
15.治療青光眼或高眼內(nèi)壓的方法，包括給人或其它哺乳動(dòng)物施用治療有效量的選自下列的化合物GGTI-286、GGTI-287、GGTI-297、GGTI-298、GGTI-2133、GGTI-2147、FTI-276、FTI-277、FTI-2148、FTI-2153、R115777、其組合及其藥學(xué)上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明在一個(gè)實(shí)施方案中涉及治療青光眼或高眼內(nèi)壓的方法，包括施用藥學(xué)上有效量的組合物，所述組合物包含至少一種異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療高眼內(nèi)壓和青光眼的組合物，所述組合物包含藥學(xué)上有效量的異戊烯轉(zhuǎn)移酶抑制劑。
文檔編號(hào)A61K31/166GK101410104SQ200780010745
公開日2009年4月15日 申請(qǐng)日期2007年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月31日
發(fā)明者A·R·謝帕德, D·L·弗里諾爾 申請(qǐng)人:愛爾康研究有限公司