專利名稱：包含vx-950的共晶體和包含所述共晶體的藥物組合物的制作方法
包含VX-950的共晶體和包含所述共晶體的藥物組合物 交叉引用本申請(qǐng)要求2006年2月27日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng) 60/777,221的權(quán)益，所述申請(qǐng)通過引用結(jié)合到本文中。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒("HCV")感染是人類必須面對(duì)的醫(yī)學(xué)難題。 現(xiàn)已認(rèn)識(shí)，HCV為大多數(shù)非甲非乙型肝炎病例的病原體。全球感染 人數(shù)估計(jì)為，/。[A. Aiberti等人，"Natmul History of Hepatitis C(丙型 肝炎的歷史)"， /T^/ Co/ogy， 31(Suppl. 1), 17-24頁(yè)(1999)]。單在 美國(guó)就有接近四百萬(wàn)人被感染[M丄Alter等人，"The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States(美國(guó)病毒性肝炎的流行病學(xué))"， Gos^oe"fera/. C//". A^Y/z ^w., 23, 437-455頁(yè)(1994); M. J. Alter,
"Hepatitis C Virus Infection in the United States(美國(guó)丙型肝炎病毒感 染)，，，j:/^/^o/ogy， 31(Suppl. 1)， 88-91頁(yè)(1999)].在最初暴露于HCV時(shí)，只有約20%感染個(gè)體患上急性臨 床肝炎，而其他人似乎感染自發(fā)消退。然而，在差不多70%的情況 下，病毒建立持續(xù)數(shù)十年的慢性感染[S. Iwarson，"The Natural Course of Chronic Hepatitis(慢性肝炎的自然過程)"，尸五MS Mz'cTo6/o/ogy及ev&ws, 14, 201-204頁(yè)(1994); D.Lavanchy， "Global Surveillance and Control of Hepatitis C(丙型肝炎的全-求監(jiān)一見和控 制)，，，6， 35-47頁(yè)(1999)]。這通常產(chǎn)生反復(fù)漸進(jìn)的 惡性肝炎，這通常將導(dǎo)致更嚴(yán)重的病癥，如肝^^化和肝癌[M,C Kew， "Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma(丙型肝炎和肝癌)，，， F五MSM/cra6/o/ogvi^v/ev^， 14， 211-220頁(yè)(1994); I. Saito等人，"Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma(丙型肝炎病毒感染伴隨肝癌的發(fā)展)"， A^/. Aw/. t/&4， 87， 6547-6549頁(yè)(1990)]。遺憾的是，對(duì)于這種 慢性HCV的緩慢*沒有廣泛有效的治療方法。 HCV基因組編碼3010-3033個(gè)氨基酸的多蛋白[Q.L. Choo 等人,"Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus(丙型 肝炎病毒的遺傳組織和多樣性)"，尸rac.Ato/.爿cat/. t/5^， 88， 2451-2455頁(yè)(1991); N. Kato等人，"Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non-A, Non-B Hepatitis(來自日本非曱非乙肝炎患者的人丙型肝炎病毒基因組的分子 克隆)"，/Voc. Ato/., 87， 9524-9528頁(yè)(1990); A.
Takamizawa等人,"Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers(分離自人載體的丙型肝炎病毒 基因組的結(jié)構(gòu)和組織)"， /Wro/., 65, 1105-1113頁(yè)(1991)]。推測(cè)是 由HCV非結(jié)構(gòu)(NS)蛋白提供病毒復(fù)制的必要催化機(jī)制。NS蛋白由 多蛋白的蛋白酶裂解衍生而得到[R. Bartenschlager等人， "Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine-Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 and NS4/5 Junctions(丙型 肝炎病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白3編碼用于裂解NS3/4和NS4/5接合所需的 絲氨酸型蛋白酶)"，JWra/., 67， 3835-3844頁(yè)(1993); A. Grakoui 等人,"Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded Serine Proteinase: Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites(丙型肝炎編碼的絲氨酸蛋白酶的表征蛋白酶依賴性 多蛋白裂解部位的確定)"，J:Wra/.， 67, 2832-2843頁(yè)(1993); A. Grakoui等人,"Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products(丙型肝炎病毒多蛋白裂解產(chǎn)物的表達(dá)和 鑒定)，，，J ， 67， 1385-1395頁(yè)(1993); L. Tomei等人，"NS3 is a serine protease required for processing of hepatitis C virus
5polyprotein(NS3是一種處理丙型肝炎病毒多蛋白所需的絲氨酸蛋白 酶)"，67, 4017-4026頁(yè)(1993)]. HCVNS蛋白3(NS3)為病毒復(fù)制和感染性所必需 [Kolykhalov， K/n /ogv， 74巻，2046-2051頁(yè)2000"Mutations at the HCV NS3 Serine Protease Catalytic Triad abolish infectivity of HCV RNA in Chimpanzees(黑猩猩HCV RNA的HCV NS3絲氨酸蛋白酶催 化三元組消失傳染性的突變)，，]。已知黃熱病毒NS3蛋白酶突變P爭(zhēng)低 病毒感染性[Chambers， T丄等人，"Evidence that the N-terminal Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific Cleavages in the Viral Polyprotein(來自黃熱病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白NS3的N-末端結(jié)構(gòu)域的證據(jù) 是絲氨酸蛋白酶響應(yīng)病毒多蛋由的位置特異牲裂解)"，JVa". jcad 5W. C/&4， 87, 8898-8902頁(yè)(19卯)]。NS3的前181個(gè)氨基酸 (病毒多蛋白的殘基1027-1207)顯示包含NS3的絲氨酸蛋白酶域，該 絲氨酸蛋白酶域具有HCV多蛋白的所有四個(gè)下游部位[C. Lin等人， "Hepatitis C Virus NS3 Serine Proteinase: Trans-Cleavage Requirements and Processing Kinetics(丙型肝炎NS3絲氨酸蛋白酶反式裂解的要 求和進(jìn)程動(dòng)力學(xué))"，JPW., 68, 8147-8157頁(yè)(1994)]。 HCV NS3絲氨酸蛋白酶及其相關(guān)輔因子NS4A幫助加工所 有的病毒酶，因此認(rèn)為其對(duì)病毒復(fù)制必不可少。它的加工似乎類似 于人免疫缺陷病毒天冬氨酰蛋白酶進(jìn)行的加工(同樣涉及病毒酶加 工)。抑制病毒蛋白加工的fflV蛋白酶抑制劑是人的有效抗病毒劑， 表明中斷病毒生活周期的這一階,殳得到具有治療的活性劑。因此， HCVNS3絲氨酸蛋白酶也是藥物發(fā)現(xiàn)的有吸引力的目標(biāo)。直到最近，為HCV疾病建立的唯一療法為干擾素治療。 然而，干擾素有明顯的副作用[M. A. Wlaker等人，"H印atitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress(丙型肝炎目 前的方法和進(jìn)展的綜述)"，DDr, 4， 518-29頁(yè)(1999); D. Moradpour等人，"Current and Evolving Therapies for Hepatitis C(丙型
6肝炎的目前和將來的治療)"，J GaWrae"fera/. Z/epWo/., 11， 1199-1202頁(yè)(1999); H. L. A. Janssen等人，"Suicide Associated with Alfa-Interferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis(伴隨慢性病毒性肝 炎的oc干擾素療法的自殺性行為)"，J7/印ato/., 21， 241-243頁(yè) (1994); P.F. Renault等人，"Side Effects of Alpha Interferon(oc干擾素 的副作用)，,，&w/"^s/"Z/vw￡fceose， 9, 273-277頁(yè)(1989)]，并且 只誘導(dǎo)一小部分( 25%)病例得到長(zhǎng)期緩解
。最近引 入聚乙二醇型干擾素(PEG-INTRON②和PEGASYS⑧)和利巴韋林與干 擾素的聯(lián)合治療(REBETROL⑧)只略微提高好轉(zhuǎn)率，且只部分減小副 作用。另外，有效抗HCV疫苗的前景還不確定。因此，需要更有效的抗HCV治療藥物。此類抑制劑應(yīng)具 有作為蛋白酶抑制劑的治療潛力，尤其作為絲氨酸蛋白酶抑制劑， 更尤其作為HCVNS3蛋白酶抑制劑。具體地講，這些化合物可用作 抗病毒劑，尤其是作為抗HCV藥。具有以下所示結(jié)構(gòu)的HCV抑制劑VX-950就是所需的這 類化合物。VX-950描述于PCT公開號(hào)WO 02/18369中，所述專利 全文通過引用結(jié)合到本文中。
發(fā)明概迷本發(fā)明主要涉及包含HCV抑制劑VX-950和特定共晶體 前體(CCF)的組合物在某些情況下，VX-950和CCF可一起形成晶 體組合物，即共晶體。與它們的游離形式比較，特定VX-950共晶體
7是有利的，因?yàn)樗鼈儽确蔷蜼X-950分散體具有改善的溶解作用， 較高的水溶解性和更高的固態(tài)物理穩(wěn)定性。特定VX-950共晶體提供 減小的劑型體積(mass of the dosage form),并因此有較低服藥負(fù)擔(dān) (pill burden),因?yàn)閂X-950共晶體相對(duì)于非晶型顯示較高的堆積密 度。另外，相對(duì)于需要噴霧干燥、熔融擠出、凍干或沉淀的非晶 型，VX-950共晶體提供了制造上的優(yōu)點(diǎn)。 —方面，本發(fā)明提供的組合物分別包含VX-950和選自水 楊酸(SA)、 4-氨基水楊酸(4-ASA)和草酸(OA)的作為CCF的CCF化 合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，VX-950和CCF—起在組合物中為結(jié)晶形 式。另一方面，本發(fā)明提供三種VX-950共晶體，三種共晶體 分別包含VX-950和CCF。具體地講，第一種共晶體包含VX-950和 作為CCF的水楊酸(SA)。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)CCF為SA時(shí)，共 晶體的X射線粉末衍射(XRPD)譜顯示在2 6為約4.43 、 7.63 、 8.53 、 9.63、 12.89、 14.83和16.29處有峰;并且其差示掃描量熱法(DSC)差 示熱分析圖顯示熔點(diǎn)在約137。C和約223。C。第二種共晶體包含VX-950 和作為CCF的4-氨基水楊酸(4-ASA)。在一些實(shí)施方案中，當(dāng) CCF為4-ASA時(shí)，共晶體的XRPD譜顯示在2 6為約4.37、 7.57、 8.47、 9.59、 12.81和14.75處有峰；并且其DSC差示熱分析圖顯示 熔點(diǎn)在約177°C。第三種共晶體包含VX-950和作為CCF的草酸 (OA)。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)CCF為OA時(shí)，此共晶體的XRPD譜 顯示在2 6為約4.65、 6.17、 9.63、 12.65、 14.91和28.97處有峰。在 一些實(shí)施方案中，晶胞中VX-950與CCF的分子數(shù)之比為0.2-5(例如 1)。在一些實(shí)施方案中，VX-950和CCF均為固態(tài)(例如晶體)，并且 非共價(jià)結(jié)合(例如通過氫鍵結(jié)合)。另一方面，本發(fā)明提供式(VX-950)m:(CCF)n的共晶體，其 中CCF為選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸的共晶體前體，m和n 獨(dú)立為1至5的整數(shù)。在一些實(shí)施方案中，m和n均為l。
另一方面，本發(fā)明提供VX-950和CCF的共晶體，其中 CCF在室溫為固體，并且VX-950和CCF通過非共價(jià)4建相互作用。 在一些實(shí)施方案中，CCF選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸。在某 些實(shí)施方案中，VX-950和CCF之間的非共價(jià)4建相互作用包括氫鍵和 范德華相互作用。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含上述三種VX-950共晶體 之一的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物進(jìn)一步包 含稀釋劑、溶劑、賦形劑或載體。本發(fā)明的另一方面提供一種制備VX-950和CCF的共晶 體的方法，所述CCF選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸。所述方法 包括以下步驟提供VX-950;提供共晶體前體水楊酸、4-氨基水楊 酸或草酸；在結(jié)晶條件下，在溶液中將VX-950與所述共晶體前體研 磨，加熱，共升華，共熔融或接觸，以在固相中形成共晶體；然后 任選分離由此形成的共晶體。在一些實(shí)施方案中，制備VX-950和 CCF的共晶體包括提供約10至約0.1摩爾比的VX-950和CCF。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種調(diào)節(jié)共晶體的相關(guān)化學(xué) 或物理性質(zhì)(如熔點(diǎn)、溶解度、溶解、吸濕度和生物利用度)的方法， 所述共晶體包含VX-950和選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸的 CCF。所述方法包括以下步驟檢測(cè)VX-950和共晶體相關(guān)的關(guān)注化 學(xué)或物理性質(zhì)；確定得到相關(guān)化學(xué)或物理性質(zhì)所需調(diào)節(jié)的VX-950和 共晶體前體的摩爾分?jǐn)?shù)；并制備具有所確定的摩爾分?jǐn)?shù)的共晶體。本發(fā)明的組合物和共晶體可用于治療與HCV相關(guān)的疾病 或伴隨HCV的疾病。因此，本發(fā)明還包括治療此類疾病的方法，所 述方法包括給予需要的受試者治療有效量的本發(fā)明的共晶體或本發(fā) 明的組合物。本發(fā)明的組合物和共晶體也可作為晶種制備其他共晶 體，所述其他共晶體包含可與VX-950相同或不同的活性成分，以及 也可與水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸相同或不同的CCF。例如，可
9將少量本發(fā)明的共晶體放入含所需活性成分和CCF的溶液，并將所
得混合物放置，以便使所述其他共晶體能夠在所述存在的共晶體存 在下形成并且生長(zhǎng)。另外，本發(fā)明的組合物和共晶體可用作研究工具。例 如，共晶體的晶體結(jié)構(gòu)可用于分子建模，以識(shí)別其他可能的共晶體 形式?？捎盟鼈冄芯克幚韺W(xué)性質(zhì)(如生物利用度、代謝作用和功效)。
附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示VX-950和SA的共晶體熱重量分析(TGA)譜圖。圖2顯示VX-950和4-ASA的共晶體TGA i普?qǐng)D。
圖3顯示VX-950和SA的共晶體DSC差示熱分才斤圖。
圖4顯示VX-950和4-ASA的共晶體DSC差示熱分析圖。圖5顯示在室溫、水(上部)和1。/。HPMC(下部)中6小時(shí)
VX-950和4-ASA的共晶體XRPD語(yǔ)圖。圖6顯示在室溫、水中l(wèi)小時(shí)(上部)、2小時(shí)(中部)和6
小時(shí)(下部)VX-950和SA的共晶體XRPD語(yǔ)圖。圖7顯示在室溫、1%HPMC中1小時(shí)(中部)、2小時(shí)(上
部)和6小時(shí)(下部)VX-950和SA的共晶體XRPD譜圖。圖8顯示VX-950和SA之間的共晶體XRPD譜圖。
圖9顯示VX-950和4-ASA的共晶體XRPD譜圖。
圖IO顯示VX-950和OA的共晶體XRPD譜圖。
發(fā)明詳述制備和表征共晶體的方法在文獻(xiàn)中充分說明。參見例如 Trask等人，C/2e附.Commww.， 2004， 890-891; O. Almarsson和M丄 Zaworotko， Cowmw".， 2004, 1889-1896。這些方法一般也適
10用于制備和表征本發(fā)明的共晶體。用活性藥物成分和CCF制備共晶體的實(shí)例包括球磨、在 反應(yīng)塊中熔融，蒸發(fā)溶劑、漿料轉(zhuǎn)化、共混、升華或建模。在球磨 方法中，將一定摩爾比共晶體的各組分(例如本發(fā)明中相關(guān)的化合物 如VX-950和CCF)混合，并與球一起研磨。任選將溶劑(如曱基乙基 酉同)加入到正被球磨的混合物中。研磨后，可在室溫或在加熱條件、 在真空下將混合物干燥， 一舶:得到粉末產(chǎn)物。在熔融方法中，將共 晶體的各組分(例如CCF和VX-950)混合，任選與溶劑(例如乙腈)混 合。然后將混合物放入帶有封蓋的反應(yīng)塊中，隨后加熱到吸熱。然 后將所得反應(yīng)混合物冷卻，并除去溶劑(如果使用)。在溶劑蒸發(fā)方法 中，首先將共晶體的各組分分別溶于溶劑(或溶劑混合物，如50/50 曱苯和乙腈)，然后將溶液一起混合。隨后使混合物靜置，溶劑蒸發(fā) 至干，得到共晶體。表征方法的實(shí)例包括熱重量分析(TGA)、差示掃描量熱法 (DSC)、 X-射線粉末衍射(XRPD)、溶解度分析、動(dòng)態(tài)蒸氣吸附、紅 外尾氣分析(infraredoff-gasanalysis)和懸浮穩(wěn)定性。可用TGA研究共 晶體樣品中殘余溶劑的存在，并確定各共晶體樣品發(fā)生分解的溫
度?？捎肈SC尋找作為溫度函數(shù)的共晶體樣品中發(fā)生的熱轉(zhuǎn)化，并 確定各共晶體樣品的熔點(diǎn)?？捎肵RPD對(duì)共晶體進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征?？?進(jìn)行溶解度分析，以反映各共晶體樣品的物理狀態(tài)變化。也可用懸 浮穩(wěn)定性分析確定溶劑中共晶體樣品的化學(xué)穩(wěn)定性。可用有效量的分別包含VX-950和共晶體前體(CCF)的本 發(fā)明的共晶體或組合物治療與HCV相關(guān)的疾病或伴隨HCV的疾 病，所述共晶體前體選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸。有效量為給 予被治療受試者(例如患者)治療效果所需的量。VX-950和CCF的共 晶體的有效量為約0.1mg/kg至約150mg/kg(例如約lmg/kg至約 60mg/kg)。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識(shí)，有效劑量也根據(jù)給藥途徑、賦 形齊1,可能性而變化。本發(fā)明的共晶體或藥物組合物可通過允許輸送化合物VX-950的任何方法(例如口服、靜脈內(nèi)或胃腸外)給予需要的受試者(例如細(xì)胞、組織或患者(包括動(dòng)物或人))。例如，它們可通過丸劑、片劑、膠嚢劑、氣霧劑、栓劑、液體制劑用于攝食或注射，或者用作滴眼劑或滴耳劑、食品補(bǔ)充劑和局部制劑。所述藥物組合物可包含稀釋劑、溶劑、賦形劑和載體，如水、林格氏液、等滲鹽水、5%葡萄糖和等滲氯化鈉溶液。在另一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物可進(jìn)一步包含增溶劑，如環(huán)糊精。適合的稀釋劑、溶劑、賦形劑、載體和增溶劑的另外實(shí)例可參見例如U.S.Pharmacopeia 23/National Formulary 18， Rockville， MD, U.S.Pharmacopeia Convention, Inc., (1—995); Ansel HC， PopovichNG,Allen Jr LV. Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,Baltimore MD， Williams & Wilkins, (1995); GennaroAR.,Remingtons: The Science and Practice of Pharmacy, EastonPA， MackPublishing Co., (1995); Wade A., Weller PJ. Handbook ofPharmaceutical Excipients, 第二版，Washington DC ， AmericanPharmaceutical Association, (1994》 BanerGS, Rhodes CT. ModernPharmaceutics, 第三版,New York, Marcel Dekker， Inc., (1995);Ranade VV, Hollinger MA. Drug Delivery Systems. Boca Raton, CRCPress, (1996)。所述藥物組合物也可包含共晶體在等滲鹽水、5%葡萄糖或其他熟知的藥學(xué)上可接受賦形劑的水溶液?？捎迷鋈軇?，如環(huán)糊精或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的其他增溶劑作為輸送治療化合物VX-950的藥物賦形劑。關(guān)于給藥途徑，共晶體或藥物組合物可口服給藥、鼻內(nèi)給藥、透皮給藥、皮內(nèi)給藥、陰道給藥、耳內(nèi)給藥、眼內(nèi)給藥、口腔給藥、直腸給藥、經(jīng)粘膜給藥或經(jīng)吸入或靜脈內(nèi)給藥。組合物也可通過氣嚢導(dǎo)管靜脈內(nèi)輸藥。組合物可對(duì)動(dòng)物給藥(如哺乳動(dòng)
12物，例如人、非人靈長(zhǎng)類、馬、狗、牛、豬、綿羊、山羊、貓、小鼠、老鼠、豚鼠、兔、倉(cāng)鼠、沙鼠、雪貂、晰蜴、爬行動(dòng)物或鳥)。本發(fā)明的共晶體或藥物組合物也可利用可植入裝置通過
植入(例如外科)輸送。可才直入裝置的實(shí)例包括但不限于支架、輸藥泵、血管濾器和可植入控制釋放組合物?？捎萌魏慰芍踩胙b置輸送
作為本發(fā)明共晶體或藥物組合物活性成分的化合物VX-950，條件為l)所述裝置、化合物VX-950和包含所述化合物的任何藥物組合物生物相容，和2)所述裝置可輸送或釋放有效量的化合物，以給予被治療患者治療效果。通過支架、輸藥泵(例如微型滲透泵)和其他可植入裝置輸送治療劑在本領(lǐng)域已知。參見例如Hofma等人，"RecentDevelopments in Coated Stents(包^皮支架的最新ii展)"，Cwrew//"fervewrio"a/Cara^/ogyi e/ orte， 2001， 3:28-36,其全部?jī)?nèi)容(包括其中引用的文獻(xiàn))通過引用結(jié)合到本文中?？芍踩胙b置(如支架)的其他說明可參見美國(guó)專利6，569，195和6,322,847及PCT國(guó)際公開WO04/0044405、 WO 04/0018228、 WO 03/0229390、 WO 03/0228346、WO 03/0225450、 WO 03/0216699和WO 03/0204168，各專利(及其中引用的其他公開)全文通過引用結(jié)合到本文中。以下描述制備和表征本發(fā)明共晶體的實(shí)施例，這些實(shí)施例僅為說明，并不以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例l.通過球磨方法制備水楊酸(SA):將70mg VX-950和等摩爾當(dāng)量作為CCF的SA(Sigma Chemicals Co.(西格瑪化學(xué)公司)，St Louis, MO， USA)與50(xL曱基乙基酮("MEK")混合。這些組分用Wig-L-Bug設(shè)備研磨10分鐘。研磨后，將一批料在75。C真空烘箱中干燥2小時(shí)。得到的物質(zhì)為灰白色。 4-氨基水楊酸(4-ASA):將70mg VX-950和等摩爾當(dāng)量作
13為CCF的4-ASA(15.8mg)(Sigma Chemicals Co.(西格瑪化學(xué)公司)，St.Louis， MO， USA)與50pL乙腈("ACN，，)混合。然后用球磨設(shè)備RetschMM200(GlenMillsInc, Clifton, NJ),以15Hz頻率，將這些組分研磨3小時(shí)。將混合物放入由熔結(jié)的剛玉制成的研磨隔室中。研磨后，使物料轉(zhuǎn)移至20mL螺旋蓋閃爍管(無蓋)中，并在室溫真空中干燥16小時(shí)。干燥后將蓋擰上。得到的物質(zhì)為灰白色。草酸(OA):將70mg VX-950和等摩爾當(dāng)量作為CCF的OA(Sigma Chemicals Co.(西格瑪化學(xué)公司)，St.Louis， MO， USA)與5pL至少一種以下溶劑混合(基于10mg總固體計(jì)算)乙酸乙酯、曱基乙基酮、乙腈、水或l,2-二氯乙烷。將各組分一起研磨。在實(shí)施了上述相同的步驟后，得到VX-950和OA的共晶體。
實(shí)施例2.通過熔融方法制備將100mgVX-950和等摩爾當(dāng)量選自水楊酸、4_氨基水楊酸和草酸(Sigma Chemicals Co.(西格瑪化學(xué)公司)，St. Louis， MO，USA)的CCF經(jīng)渦旋混合5分鐘。此步驟進(jìn)行兩次。 一次在沒有溶劑下進(jìn)行。在第二次，對(duì)4-氨基水楊酸、水楊酸和草酸分別用IOOmL.的乙腈、曱基乙基酮和乙酸乙酯進(jìn)行。將混合物放入帶有封蓋的反應(yīng)塊(reaction block)(Radley Discovery Technologies ， RR98072)中，并加熱到吸熱。將混合物在吸熱溫度保持30分鐘，然后將所得混合物在去蓋環(huán)境條件下冷卻，并除去溶劑(如有使用)。
實(shí)施例3.通過溶劑蒸發(fā)方法制備將VX-950和選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸(SigmaChemicals Co.(西格瑪化學(xué)公司)，St.Louis, MO， USA)的CCF分別溶于50%曱苯/乙腈的溶劑混合物。經(jīng)旋轉(zhuǎn)和超聲處理幫助溶解，直到溶液目測(cè)透明。以0:1、 1:3、 1:1和3:1、 l:0的摩爾比，將VX-950 溶液與CCF溶液在20rnL螺旋蓋閃爍管中混合，最終體積均為3mL。將這些管開蓋放入通風(fēng)櫥中，經(jīng)數(shù)天時(shí)間使溶劑蒸發(fā)至干，得到固態(tài)物質(zhì)。
實(shí)施例4.由建模方法制備建模同樣得到VX-950和選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸(Sigma Chemicals Co.(西格瑪化學(xué)公司)，St.Louis， MO, USA)的CCF的共晶體。
實(shí)施例5.熱重量分析(TGA)進(jìn)行各樣品的TGA測(cè)試，使用Q500型熱重量分析儀(TA Instruments, New Castle， DE， USA),利用控制ThermalAdvantage Q SeriesTM壽大件，片反本2.2.0.248, Thermal AdvantageRelease 4.2.1 (TA Instruments-Water LLC),具有以下組成部分QAdv.exe版本2.2 build 248.0; RhDII.d〗版本2.2 build 248.0;RhBase.dll版本2.2 build 248.0; RhCo匪.dll版本2.2 build 248.0;TaLicense.dll版本2.2 build 248.0;和TGA.dll版本2.2 build 248.0。此外，所用分析軟件為Universal Analysis 2000軟件(操作系統(tǒng)Windows 2000/XP,版本4.1 D build 4.1,0.16(TA Instruments)。對(duì)于所有試驗(yàn)，進(jìn)行TGA測(cè)試的基本步驟包括將樣品的等分試樣(約3-8mg)移入鉑樣品盤中(盤部件編號(hào)952018.906， TAInstruments),將盤放在裝載臺(tái)上，然后用控制軟件自動(dòng)載入Q500Thermogravimetric Analyzer(熱重量分析儀)中。通過單獨(dú)加熱樣品得到差示熱分析圖，加熱在流動(dòng)干燥氮?dú)庀?壓縮氮?dú)猓?.8級(jí)(BOCGases, Murray Hill, NJ, USA)，以10。C/分鐘的升溫速率，在一定溫度范圍(一般室溫至30(TC)內(nèi)進(jìn)行，樣品清洗流速為90L/分鐘，平衡清洗流速為10L/分鐘。用儀器提供的分析軟件觀察和分析熱轉(zhuǎn)化(例如重量變化)。如圖l所示，VX-950和SA(摩爾比為l)的共晶體TGA
15譜圖顯示在達(dá)到145。C時(shí)發(fā)生約2.3。/。重量損失，而在達(dá)到160。C時(shí)發(fā)生18%重量總損失。這與l:l共晶體的水楊酸預(yù)料損失一致。第一個(gè)重量損失可能是由于水楊酸升華所致，升華開始于76'C。如圖2所示，VX-950和4-ASA(摩爾比同樣為l)的共晶體TGA譜圖顯示在達(dá)到125。C時(shí)發(fā)生約1.4%重量損失(由于溶劑釋放)，而在達(dá)到約250。C時(shí)發(fā)生約13%重量損失。
實(shí)施例6.差示掃描量熱法(DSC)進(jìn)行DSC分析，使用MDSC Q100 Differential ScanningCalorimeter(差示掃描量熱儀)(TAInstruments),利用控制ThermalAdvantage Q Series 軟件，版本2.2.0.248 ， Thermal AdvantageRelease 4.2.1，具有以下組成部分QAdv.exe版本2.2 buiM 2招.0;RhDll.dll版本2.2 build 248.0; RhBase.dll版本2.2 build 248.0;RhComm.dll版本2.2 build 248.0; TaLicense.dll版本2.2 build 248.0;和DSC.dll版本2.2 build 248.0。此外，所用分析軟件為UniversalAnalysis 2000軟件(操作系統(tǒng)Windows 2000/XP,版本4.1 D build.4.1.0.16(TA Instruments)。儀器用銦校準(zhǔn)。對(duì)于所有DSC試驗(yàn)，將樣品的等分試樣(約2mg)稱重并移入鋁樣品盤中(盤部件編號(hào)900786.901;蓋部件編號(hào)900779.901， TAInstruments)。通過以單一小孔巻曲將樣品盤封閉，然后載入裝配有自動(dòng)進(jìn)樣器的Q100 Differential ScanningCalorimeter(差示掃描量熱儀)。通過單獨(dú)加熱各樣品得到差示熱分析圖，加熱在流動(dòng)干燥氮?dú)庀?壓縮氮?dú)猓?.8級(jí)(BOC Gases, MurrayHill, NJ, USA),升溫速率10。C/分鐘，在一定溫度范圍(一4殳室溫至30(TC)內(nèi)進(jìn)行，樣品清洗流速為60L/分鐘，平衡清洗流速為40L/分鐘。用與具有樣品的盤相同的方式制備的空鋁盤作為參比。用儀器上提供的分析軟件觀察和分析熱轉(zhuǎn)化。如圖3所示，DSC差示熱分析圖顯示VX-950和SA的共晶體首先在約137。C熔融。SA和VX-950的熔點(diǎn)分別為159。C和247 。C。在223C的第二熔融轉(zhuǎn)變粗略相應(yīng)于游離化合物的熔融轉(zhuǎn)變。觀 察到較低熔點(diǎn)是由于存在雜質(zhì)，但可能包括一些分解。如圖4所示，DSC差示熱分析圖顯示VX-950和4-ASA 的共晶體在約177。C熔融。表1顯示本發(fā)明所用VX-950和CCF之間潛在相互作用 的DSC篩選匯總。
表1
CCF 吸收，Tm共形成物吸收，Tm可能的共
rc) 晶(。c)
4-ASA 134 167
OA lOi & 192 國(guó)
SA 159 & 176 122
實(shí)施例7. X-射線粉末衍射(XRPD)
在XRPD分析中，使用購(gòu)自Bruker或Rigaku的儀器。
a. Bruker使用配備有密封管源和Hi-Star平面^r測(cè)器的Bruker D8 Discover diffractometer(BrukerAXS, Madison， WI， USA)，在室溫 以反射模式得到XRPD圖。銅鈀X射線管(Siemens)在40kV和35mA 工作。用Bruker提供的石墨單色器和0.5mm準(zhǔn)直管產(chǎn)生平行單色束 (CuKa， 1=1.5418A)。樣品和檢測(cè)器之間的距離為約30cm。將樣品放 在Si零背景晶片(The Gem Dugout, State College, PA)上，然后放 在XYZ平臺(tái)上，位于XYZ平臺(tái)中央。用GADDS軟件(操作系統(tǒng) Windows NT,版本4丄16)(Bruker AXS， Madison, WI， USA)采集 數(shù)據(jù)。以120秒/幀曝露時(shí)間記錄兩個(gè)幀。在曝露期間，樣品以X和 Y兩個(gè)方向振動(dòng)，幅度為lmm。隨后以0.02。步長(zhǎng)在20為3°至41。 整個(gè)范圍對(duì)數(shù)據(jù)積分，并合并成一個(gè)連續(xù)圖案。用剛玉板(NIST標(biāo)準(zhǔn) 1976)校準(zhǔn)儀器。b. Rigaku利用旋轉(zhuǎn)陽(yáng)極RUH3RX-射線發(fā)生器(Rigaku， The Woodlands, TX， USA)和Rigdm Raxis IIC檢測(cè)器，在室溫以透射模 式記錄XRPD圖。使用在50kV和100mA的CuK輻射。用聚焦鏡和 Ni濾光器產(chǎn)生平行單色束(卜1.5418A)。在試驗(yàn)期間，將樣品保持在 2mm直徑硼玻璃毛細(xì)管(Hampton Research, AlisoViejo ， CA， USA) 中，并圍繞f軸旋轉(zhuǎn)。樣品和檢測(cè)器之間的距離為約25cm。用 Rigaku開發(fā)的Crystalclear軟件，版本1.3.5 SP2記錄300秒曝露時(shí)間 的單幀。隨后以約0.02。步長(zhǎng)在2q為3。至41°范圍對(duì)數(shù)據(jù)積分。用 硅粉末(NIST標(biāo)準(zhǔn)640c)校準(zhǔn)儀器。
f0058]如圓5所示，在室溫，水中和1%夯丙基平基拜維素 (HPMC)中6小時(shí)后，VX-950和4-ASA的共晶體沒有顯示在最多6 小時(shí)培育時(shí)間后轉(zhuǎn)化成游離形式的跡象。在24小時(shí)時(shí)間點(diǎn)，共晶體 在1。/。HPMC溶液中仍然完整。然而，在水中的樣品在24小時(shí)時(shí)間 點(diǎn)已轉(zhuǎn)化回到游離形式。相反，如圖6所示，在室溫、水中懸浮后，VX-950和 SA的共晶體的XRPD圖顯示(i)在l小時(shí)后，顯示共晶體略微轉(zhuǎn)化 成游離形式，如在9.1 2-e(。)的峰增長(zhǎng)所示，(ii)在2小時(shí)時(shí)間點(diǎn)，顯 示另外轉(zhuǎn)化，并且(iii)在6小時(shí)時(shí)間點(diǎn)，顯示完全轉(zhuǎn)化。在1% HPMC水溶液中懸浮后，相同的共晶體在l小時(shí)時(shí)間點(diǎn)和2小時(shí)時(shí) 間點(diǎn)顯示從共晶體略微轉(zhuǎn)化成游離形式，并且在6小時(shí)時(shí)間點(diǎn)觀察 到另外轉(zhuǎn)化。參見圖7。圖8、圖9和圖10分別為SA、 4-ASA和OA的VX-950 共晶體的XRPD譜圖。具體地講，VX-950和SA共晶體的XRPD顯 示在20為4.43、 7.63、 8.53、 9.63、 12.89、 14.83和16.29處有峰; VX-950和4-ASA共晶體的XRPD顯示在26為4.37、 7.57、 8.47、 9.59、 12.81和14.75處有峰；VX-950和OA共晶體的XRPD顯示在
1820為4.65、 6.17、 8.21、 9.63、 12.65、 14.91和28.97處有峰。 實(shí)施例8.溶解度分析將樣品的等分試樣^:入管中，然后加入水性介質(zhì)。在設(shè) 定時(shí)間點(diǎn)抽取上清液等分部分，通過0.45PTFE微米過濾器(Millex， LCR, Millipore)過濾并進(jìn)行處理，用于高效液相色譜(HPLC)分析 (Agilent 1100; PaioAlto， CA, USA)。系統(tǒng)配備有設(shè)定于25。C的自 動(dòng)進(jìn)樣器。進(jìn)行處理樣品，用乙腈以l:l(體積比)稀釋樣品的等分試 樣。樣品用設(shè)定于270nm的檢測(cè)器等度(isocmtically)進(jìn)行試驗(yàn)。柱為 XTerra Phenyl柱150mm x 4.6mm, 3.5,粒度(P/N 186001144) (Waters, Milford, MA, USA)。流動(dòng)相為60:40(v/v)磷酸鉀緩沖劑 (lOmM， pH-7.U):甲賻。試驗(yàn)在lrfiL/min流速進(jìn)行，并在15fflin內(nèi) 完成。以下表2總結(jié)VX-950及其與4-ASA的共晶體在24小時(shí)時(shí)間 點(diǎn)、室溫、模擬腸流體(pH6.8)中的溶解度(用VX-950當(dāng)量表示(VX-950在8.8分鐘洗脫))。
表2
C, mg/mL C, mg/mL 系統(tǒng) 對(duì)照 熔體 XRPD
0.025 非晶形(在室溫達(dá)2小時(shí)) 單獨(dú)VX-950O.OI83 在室溫到約4小時(shí)開始結(jié)晶
未檢測(cè) 結(jié)晶到24小時(shí)
VX-950和4-ASA 0.148 結(jié)晶達(dá)24小時(shí)。沒有變化
實(shí)施例9.懸浮穩(wěn)定性評(píng)估共晶體在懸浮于水性介質(zhì)時(shí)的物理穩(wěn)定性。在25 。C，以約6mg/ml的標(biāo)稱濃度，在(l)未緩沖的去離子水和 (2)l%(w/w)HPMC溶液(低粘度級(jí))使共晶體粉末成漿。用石茲性攪拌棒 和板混合漿料。在l、 2、 6和24小時(shí)時(shí)間間隔過濾分離固體樣品。在水中懸浮l、 2和6小時(shí)后，VX-950和水楊酸的共晶
19體XRPD圖顯示在1小時(shí)后共晶體略微轉(zhuǎn)化成游離形式，如在9.1 20(。)的峰增長(zhǎng)所示。在2小時(shí)時(shí)間點(diǎn)觀察到另外轉(zhuǎn)化，在6小時(shí)時(shí) 間點(diǎn)發(fā)現(xiàn)完全轉(zhuǎn)化。在1%HPMC的水溶液中懸浮1、 2和6小時(shí)后，VX-950 和水楊酸的共晶體XRPD圖顯示在1小時(shí)時(shí)間點(diǎn)和2小時(shí)時(shí)間點(diǎn)共 晶體略微轉(zhuǎn)化成游離形式。在6小時(shí)時(shí)間點(diǎn)觀察到另外轉(zhuǎn)化。HPMC 似乎已降低共晶體轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x形式的轉(zhuǎn)變速率。緩慢轉(zhuǎn)變也由在9.1
2e(。)的增長(zhǎng)峰證明。在水和1% HPMC的水溶液中懸浮6小時(shí)后，VX-950和 4-氨基水楊酸的共晶體XRPD圖。在兩種情況下，共晶體均沒有顯 示在最多6小時(shí)培育時(shí)間后轉(zhuǎn)化成游離形式的跡象。在24小時(shí)時(shí)間 點(diǎn)，共晶體在1。/。把MC溶液中仍然完整。然而，在水中的樣品在 24 'J 、時(shí)時(shí)間點(diǎn)已轉(zhuǎn)化回到游離形式。
其他實(shí)施方案應(yīng)了解，雖然說明書已經(jīng)詳述描述了本發(fā)明，但前面的 詳述旨在說明，并未限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的范圍在附加權(quán)利 要求書中限定。其他方面、優(yōu)點(diǎn)和修改在以下權(quán)利要求書的范圍 內(nèi)。
20
權(quán)利要求
1. 一種共晶體，所述共晶體包含VX-950和水楊酸。
2. 權(quán)利要求l的共晶體，其中所述VX-950和水楊酸的摩爾比 為約1:1。
3. 權(quán)利要求2的共晶體，所述共晶體在2 6為約4.43、 7.63、 8.53、 9.63、 12.89、 14.83、 16.29處具有X射線粉末衍射峰。
4. 權(quán)利要求2的共晶體，所述共晶體的DSC差示熱分析圖中在 約137。C和223。C處具有峰。
5. —種共晶體，所述共晶體包含VX-950和4-氨基水楊酸。
6. 權(quán)利要求5的共晶體，其中所述VX-950和4-氨基水楊酸的摩 爾比為約1:1。
7. 權(quán)利要求6的共晶體，所述共晶體在2 6為約4.37、 7.57、 8.47、 9.59、 12.81和14.75處具有X射線粉末書亍射峰。
8. 權(quán)利要求6的共晶體，所述共晶體的DSC差示熱分析圖中在 約177。C處具有峰。
9. 一種共晶體，所述共晶體包含VX-950和草酸。
10. 權(quán)利要求9的共晶體，其中所述VX-950和草酸的摩爾比為 約1:1。
11. 權(quán)利要求IO的共晶體，所述共晶體在2 6為約4.65、 6.17、 8.21、 9.63、 12.65、 14.91和28.97處具有X射線粉末衍射峰。
12. —種式(VX-950)m:(CCF)n的共晶體，其中CCF為選自水楊 酸、4-氨基水楊酸和草酸的共晶體前體，m和n獨(dú)立為l至5的整數(shù)。
13. 權(quán)利要求12的共晶體，其中m和n均為l。
14. 一種藥物組合物，所述藥物組合物包含VX-950和選自水楊 酸、4-氨基水楊酸和草酸的共晶體前體。
15. 權(quán)利要求14的藥物組合物，其中所述VX-950和共晶體前體一起為結(jié)晶形式。
16. 權(quán)利要求14的藥物組合物，其中所述VX-950和共晶體前 體的摩爾比為約1。
17. 權(quán)利要求15的藥物組合物，所述藥物組合物進(jìn)一步包含稀 釋劑、溶劑、賦形劑、載體或增溶劑。
18. —種制備共晶體的方法，所述方法包括a. 提供VX-950，b. 提供選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸的共晶體前體，c. 在結(jié)晶條件下，在溶液中將VX-950與共晶體前體研磨，加 熱，共升華，共熔融或接觸，以在固相中形成共晶體，和d. 任選分離步驟(c)所形成的共晶體。
19. 一種調(diào)節(jié)共晶體相關(guān)化學(xué)或物理性質(zhì)的方法，所述方法包括a. 檢測(cè)VX-950和共晶體前體的相關(guān)化學(xué)或物理性質(zhì)，b. 確定將得到相關(guān)化學(xué)或物理性質(zhì)所需的調(diào)節(jié)的VX-950和共 晶體前體的摩爾分?jǐn)?shù)，和c. 制備具有步驟(b)中所確定的摩爾分?jǐn)?shù)的共晶體。
20. —種制備共晶體的方法，所述方法包括提供現(xiàn)有的共晶體作 為制備共晶體的晶種，其中所述現(xiàn)有的共晶體包含VX-950和選自水 楊酸、4-氨基水楊酸和草酸的共晶體前體；并且所述共晶體包含可與 VX-950相同或不同的活性成分，和也可與現(xiàn)有共晶體所含共晶體前 體相同或不同的共晶體前體。
全文摘要
本發(fā)明涉及分別包含VX-950和選自水楊酸、4-氨基水楊酸和草酸的共晶體前體(co-crystal former)的組合物和共晶體。制備和使用所述組合物和共晶體的方法也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
文檔編號(hào)A61K31/497GK101489557SQ200780015244
公開日2009年7月22日 申請(qǐng)日期2007年2月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月27日
發(fā)明者M·陶伯, P·R·康內(nèi)利, S·莫里塞特 申請(qǐng)人:弗特克斯藥品有限公司