專利名稱：：延長(zhǎng)釋放活性成分的藥物制劑及其應(yīng)用，尤其是治療應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于延長(zhǎng)釋放一種或多種活性物質(zhì)AP(尤其是蛋白質(zhì)和肽活性成分)的基于水性膠體懸浮液的新型藥物制劑，本發(fā)明還涉及這些制劑的應(yīng)用，尤其是在治療學(xué)上的應(yīng)用。這些藥物制劑既用于人類又用于動(dòng)物。
背景技術(shù)：
：在藥物活性成分，特別是治療蛋白質(zhì)的延長(zhǎng)釋放領(lǐng)域中，在很多情形中，要盡可能地確?；颊叩难獫{蛋白或肽濃度接近健康對(duì)象的值。這個(gè)目標(biāo)因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在血漿里存在的時(shí)間短而不能實(shí)現(xiàn)，因此需要重復(fù)注射治療蛋白質(zhì)。故治療蛋白質(zhì)的血槳濃度具有"鋸齒"形，其特征是高濃度的峰和極低濃度的谷。峰濃度遠(yuǎn)大于健康對(duì)象體內(nèi)的基礎(chǔ)濃度，由于治療蛋白質(zhì)如白細(xì)胞介素IL2的高毒性，其具有非常顯著的有害效應(yīng)。另外，谷濃度低于治療效果所需的濃度，所以患者接受的治療覆蓋較少，而承受嚴(yán)重的長(zhǎng)期后果。此外，為保證患者的治療蛋白質(zhì)血漿濃度接近其治療的理想值，所討論的藥物制劑必須允許延長(zhǎng)釋放治療蛋白質(zhì)，以限制血槳濃度隨著時(shí)間變化。而且，這種活性制劑優(yōu)選應(yīng)該符合以下為所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知的規(guī)范.-1-延長(zhǎng)釋放活性的和非變性的治療蛋白質(zhì)，例如人或合成蛋白質(zhì)，以使血漿濃度保持在治療水平；2-足夠低的注射粘度以便于注射；3-生物適應(yīng)性和生物可降解性的形式；4-無(wú)毒并且無(wú)免疫原性的形式；5-優(yōu)良的局部耐受性的形式。為了實(shí)現(xiàn)這些目標(biāo)，現(xiàn)有技術(shù)提出的最佳方法之一是開(kāi)發(fā)用于延長(zhǎng)釋放治療蛋白質(zhì)的形式，其由加載治療蛋白質(zhì)的納米顆粒的低粘度液體懸浮液組成。這些懸浮液有助于天然的治療蛋白質(zhì)的給藥。FlamelTechnologies已經(jīng)提出了一種方法，其中治療蛋白質(zhì)和含有疏水基團(tuán)和親水基團(tuán)的共聚氨基酸的納米顆粒結(jié)合。專利US-B-5904936描述了一種兩性分子聚氨基酸共聚物的平均尺寸0.01-0.5pm的亞微米顆粒(NPV)和平均尺寸0.5-20pm的微米顆粒(MPV)，所述共聚物包括至少兩種類型的氨基酸，一種是中性和疏水性的，另一種是可電離的。在水性溶液中，蛋白質(zhì)如胰島素被自然地吸附到這些顆粒上。這種聚氨基酸共聚物是例如聚(L-亮氨酸-嵌段-L-谷氨酸鈉)的嵌段共聚物。該專利描述了通過(guò)向聚-Leu/Glu的膠體懸浮液加入單價(jià)陽(yáng)離子鹽(硫酸銨)或多價(jià)陽(yáng)離子鹽(Fe2+、Fe3+、Zn2+、Ca2+、Al2+、八13+或012+)、酸(HC1)或陽(yáng)離子聚合物(聚賴氨酸)引發(fā)的NPV向MPV的聚集。專利申請(qǐng)WO-A-2005/033181公開(kāi)了線性的、兩性的、陰離子的均聚氨基酸，其含有天冬氨酸單元或谷氨酸單元，并且其末端帶有含有8-30碳原子的疏水基團(tuán)。具體地說(shuō)，該"疏水改性的"遠(yuǎn)螯均聚氨基酸是例如帶有PheOC18/C18末端的聚[GluONa]或帶有PheOC18/a-生育酚末端的聚[GluONa]。在水中，這些"疏水改性的"遠(yuǎn)螯均聚氨基酸自發(fā)地形成一種納米顆粒膠體懸浮液，所述納米顆粒在pH7.4的水性懸浮液中易于和至少一種活性蛋白質(zhì)(胰島素)相結(jié)合。根據(jù)US-B-5904936和WO-A-2005/033181，由懸浮液"矢量化的"活性蛋白質(zhì)(如胰島素)的體內(nèi)釋放時(shí)間能夠有利地增加。在PCT申請(qǐng)WO-A-05/051416中描述的藥物形式也部分實(shí)現(xiàn)了釋放時(shí)間的增加。在該專利申請(qǐng)中，一種疏水改性的聚(L-谷氨酸鈉)的納米顆粒(0.001-0.5pm)的膠體懸浮液在一定濃度下注射，使得在皮下注射后，其和內(nèi)源性的血清白蛋白接觸，在患者的注射部位形成凝膠體。然后這種蛋白質(zhì)緩慢釋放，通常超過(guò)一周的時(shí)間。然而，當(dāng)給藥的治療蛋白質(zhì)濃度相對(duì)高時(shí)，例如人生長(zhǎng)激素的情形時(shí)，其釋放時(shí)間只能局限在幾天。不論何種情形，這些涉及疏水改性的聚氨基酸納米顆?；蛭⒚最w粒膠體的現(xiàn)有技術(shù)都沒(méi)有公開(kāi)能夠?qū)崿F(xiàn)以下目的的制劑(I)在胃腸外注射例如皮下注射后增加活性蛋白質(zhì)的釋放時(shí)間，尤其是當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度高時(shí)，(II)和/或，在含有所述活性蛋白質(zhì)的制劑注射后降低其濃度峰值。
發(fā)明內(nèi)容在這些條件下，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，用于AP的延長(zhǎng)釋放，它克服了現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，具體地說(shuō)，能夠使胃腸外(例如皮下)注射后，非變性AP(例如治療蛋白質(zhì)和肽和小分子)，如人或合成蛋白質(zhì)的體內(nèi)釋放時(shí)間得到延長(zhǎng)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，能夠使胃腸外(例如皮下)注射后，高濃度治療蛋白質(zhì)和肽的體內(nèi)釋放時(shí)間得到延長(zhǎng)，例如那些幾mg/ml的。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，用于體內(nèi)AP的延長(zhǎng)釋放，該制劑在物理化學(xué)和生理?xiàng)l件下均儲(chǔ)存穩(wěn)定。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，用于體內(nèi)AP的延長(zhǎng)釋放，它至少具有以下性質(zhì)生物相容性、生物降解性、非毒性、優(yōu)良的局部耐受性。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，用于AP在體內(nèi)的緩慢延長(zhǎng)釋放，所述制劑包括聚合物PO的微米顆粒，聚合物PO和至少一種AP自動(dòng)結(jié)合或者能夠和至少一種AP自動(dòng)結(jié)合，PO是一種帶有疏水基團(tuán)(GH)和可電離基團(tuán)(GI)的水溶性的生物可降解的聚合物，能夠在水中自發(fā)形成膠體納米顆粒的懸浮液。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，含有前面所述的聚合物PO的微米顆粒，其在皮下注射后釋放治療蛋白質(zhì)或者肽的時(shí)間比在該AP和聚合物PO的膠體懸浮液的水性介質(zhì)中混合的相同蛋白質(zhì)給藥后的釋放時(shí)間更長(zhǎng)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種藥物制劑，用于AP在體內(nèi)的緩慢延長(zhǎng)釋放，這種制劑包括聚合物PO的微米顆粒，聚合物PO和至少一種AP自動(dòng)結(jié)合，該聚合物PO例如是一種聚氨基酸，其主鏈由天冬氨酸殘基和/或谷氨酸殘基構(gòu)成，這些殘基中的至少部分殘基通過(guò)在鏈中和/或鏈端接枝至少一個(gè)疏水性基團(tuán)GH而被改性，PO還是生物降解性的、水溶性的和兩性的。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供前面所列目標(biāo)中所指的制劑和/或該制劑前體的衍生產(chǎn)品。申請(qǐng)人的貢獻(xiàn)是，發(fā)現(xiàn)了根據(jù)WO05/051416所述制劑的納米顆粒聚集成為帶有確定的比例的和基團(tuán)GI極性相反的多價(jià)離子的微米顆粒，可導(dǎo)致特定數(shù)量的微顆粒的選擇，使這些微顆粒相結(jié)合的AP(例如蛋白質(zhì)或肽)的釋放時(shí)間得以顯著地延長(zhǎng)。申請(qǐng)人的另一貢獻(xiàn)是，發(fā)現(xiàn)了特定的多價(jià)離子可以使根據(jù)本發(fā)明的制劑具有優(yōu)良的耐受性。因此本發(fā)明涉及一種用于延長(zhǎng)釋放AP的液體藥物制劑，其含有基于聚合物(PO)微米顆粒的低粘度的水性膠體懸浮液，i.該聚合物PO是水溶性、生物降解性、兩性分子的共聚物，帶有疏水性基團(tuán)(GH)和至少部分電離的可電離的親水性基團(tuán)(GI)，并且在pH7.0，等滲條件下自發(fā)地在水中形成納米顆粒的膠體懸浮液，ii.所述顆粒在水pH7.0，等滲條件下能夠自發(fā)地和至少一種活性成分(AP)非共價(jià)地相結(jié)合，制劑的特征在于，PO的微米顆粒以T試驗(yàn)測(cè)定的尺寸在0.5-10(Him之間，優(yōu)選在1-70pm之間，特別優(yōu)選在2-40iim之間，其特征還在于它還包括化合價(jià)小于或等于4的多價(jià)離子，優(yōu)選二價(jià)離子，三價(jià)離子或其混合物，所述離子和聚合物的基團(tuán)GI的極性相反，所述多價(jià)離子加入的目的是使聚合物的納米顆粒聚集成一定數(shù)量的微米顆粒，使得比例r值在0.3-10之間、優(yōu)選在0.6-5.0之間，特別優(yōu)選在0.8-3.0之間，r以M試驗(yàn)測(cè)定，其定義為公式r^"x^，其中-n是所述多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是可電離基團(tuán)的摩爾濃度。根據(jù)本發(fā)明選擇的這些微米顆粒通過(guò)大量?jī)尚怨簿畚锏募{米顆粒的聚集生成。這種聚集優(yōu)選由和共聚物所帶的可電離基團(tuán)GI(至少部分電離)極性相反的多價(jià)離子的存在而引起。通過(guò)和屬于不同納米顆粒的聚合物鏈復(fù)合，這些和共聚物的基團(tuán)GI極性相反的多價(jià)離子引起聚合物的納米顆粒絮結(jié)成微米顆粒。該AP能夠在共聚物PO的納米顆粒聚集成微米顆粒之前自然地和其結(jié)合，和/或在聚集期間和/或之后自然地和微米顆粒結(jié)合。此外，根據(jù)本發(fā)明的制劑是無(wú)毒的并且具有良好的局部耐受性。公開(kāi)的全文中，術(shù)語(yǔ)"亞微顆粒"或"納米顆粒"和本發(fā)明制劑的具有微米級(jí)尺寸的微米顆粒不同，它們表示顆粒尺寸(在下述的T'試驗(yàn)中測(cè)定)大于或等于lnm并且小于500nm,優(yōu)選5-250nm。根據(jù)本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)"蛋白質(zhì)"表示蛋白質(zhì)或者肽，無(wú)論其為寡肽或多肽。這種蛋白質(zhì)或肽可以是改性的或者未改性的，例如接枝一個(gè)或多個(gè)聚乙二醇基團(tuán)。這里公開(kāi)的內(nèi)容中，活性成分由AP指代；AP表示至少一種活性成分。根據(jù)本發(fā)明的目的，這里公開(kāi)的內(nèi)容中，用于描述一種或多種AP和聚合物PO(例如聚氨基酸)關(guān)系的術(shù)語(yǔ)"結(jié)合"(名詞和動(dòng)詞)表示AP非共價(jià)地結(jié)合到聚合物PO，例如通過(guò)靜電和/或疏水相互作用和/或氫鍵和/或立體位阻。離心的角速度以rpm表示(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù))，每分鐘一轉(zhuǎn)(r/min)的單位是l2;r」"rpm=—rad.s。^60通過(guò)激光衍射測(cè)量微顆粒尺寸的T試驗(yàn)a-Tl試驗(yàn)，其中微顆粒的形式為水性分散物1裝置和操作條件激光顆粒測(cè)量?jī)xMalvemMastersizer2000模塊Hydro2000SM濕樣分散單位分散的載體流體體積150ml波長(zhǎng)(藍(lán)和紅)466和632nm攪拌速度、2400rpni分析范圍0.02降2000|Lim光學(xué)模型(Mie氏理論)所用的折光指數(shù)值分散流體(水)M流體-1.33+i.O聚苯乙烯橡膠m聚苯乙烯橡膠1.59+i.O觸發(fā)分析的遮攔值5o/o-20o/o捕獲時(shí)間10s2樣品制備用于分析的樣品通過(guò)在5ml的試管中用600W去離子水稀釋400iil樣品然后在Vortex上攪拌lOs(10±5)制備。3樣品分析濕樣分散系統(tǒng)中剩余的循環(huán)流體倒出，加入新鮮的去離子水。Hydro2000SM的攪拌速度單位設(shè)置在2400rpm.測(cè)試在下面提到的試驗(yàn)條件下開(kāi)始1-校正激光束2-記錄背景噪音這些步驟之后操作員按照以下方式加入分析樣品滴加稀釋的樣品(用Pasteur管)，直到遮攔值為5%-20%，開(kāi)始捕獲。獲得數(shù)據(jù)和D50有關(guān)，它是一個(gè)數(shù)值，即被分析目標(biāo)中直徑小于該值的占50%。在三個(gè)不同樣品中檢測(cè)D50值三次，然后取其平均值。b-T2試驗(yàn)，其中微顆粒處于干燥形式1裝置和操作條件<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>捕獲時(shí)間10s2樣品制備-制備Span80的0.1%庚烷溶液(于20ml燒瓶中稱量0.01g粉末化的Span80，然后加入庚烷至最終重量為10g)。-稱6mg粉末于5ml的試管中。-加入0.7g含0.1。/。Span80的庚垸于該試管中。-試管置于超聲池中2分鐘以徹底分散粉末。3樣品分析濕樣分散系統(tǒng)中剩余的循環(huán)流體倒出，加入庚垸。Hydro2000SM的攪拌速度單位設(shè)置在2400rpm.測(cè)試在下面提到的試驗(yàn)條件下開(kāi)始1-校正激光束2-記錄背景噪音這些步驟之后操作員按照以下方式加入分析樣品滴加稀釋的樣品(用Pasteur管)，直到遮攔值為5%-20%，開(kāi)始捕獲。獲得數(shù)據(jù)和D50有關(guān)，它是一個(gè)數(shù)值，即被分析目標(biāo)中直徑小于該值的占50%。在三個(gè)不同樣品中檢測(cè)D50值三次，然后取其平均值。通過(guò)彈性光散射測(cè)量納米顆粒尺寸的T'試驗(yàn)根據(jù)本發(fā)明的聚合物PO顆粒的平均水力直徑通過(guò)下面定義的規(guī)程Md測(cè)制備介質(zhì)為0.15MNaCl濃度為l或2mg/ml的PO溶液，攪拌24h。這些溶液先通過(guò)0.8-0.2(im的濾膜，然后在MalvernCompactGoniometerSystem用垂直偏振的波長(zhǎng)632.8nm的He-Ne激光束進(jìn)行動(dòng)力光散射分析。聚合物PO顆粒的水力直徑由電場(chǎng)自相關(guān)函數(shù)通過(guò)加和方法計(jì)算獲得，其在"SurfactantScienceSeries"叢書(shū)，第22巻，SurfactantSolutions(Ed.R.Zana,chap.3,M.Dekker,1984)中有描述。通過(guò)離子色譜檢測(cè)多價(jià)離子含量的M試驗(yàn)多價(jià)離子Mg&的量化將作為一個(gè)例子。該方法和檢測(cè)其他陽(yáng)離子的方法基本相同(只是對(duì)照組變化)。1裝置和試劑離子色譜配備傳導(dǎo)率檢測(cè)器、陽(yáng)離子自行-再生抑制器和自動(dòng)調(diào)溫箱的DionexICS2500離子色譜系統(tǒng)掛(Dionex):IonPacCS165x250mm柱保護(hù)柱(Dionex):IonPacCGI65x50mm保護(hù)柱陽(yáng)離子抑制器(Dionex):CSRS-ULTRAII-4mm用于離子色譜的塑料瓶(Di—去離子水(MilliO)0.1N鹽酸(HC1)(RiedeldeHa紐)甲磺酸(MSA)(Aldrich)多價(jià)離子的硫酸鹽例如MgS04(Aldrich)2溶液的制備溶劑0.01NHC1100ml0.1NHC1加入到含有約500mlMilliQ水的l升燒瓶中。用MilliQ水補(bǔ)足至1升，然后磁力攪拌。流動(dòng)相30mMMSA使用錐形瓶，將2升MilliQ水加入到離子色譜的2升塑料瓶中。用自動(dòng)吸液管加入3.89ml到MSA。燒瓶置于裝置中，氦氣鼓泡使該相混合并脫氣。3對(duì)照組和樣品的制備對(duì)照組的制備在Mg"農(nóng)度lmg/1-2.6mg/l制備三個(gè)對(duì)照組。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>SM2100ml燒瓶80mg補(bǔ)足至100ml磁力攪拌SM3100ml燒瓶130mg補(bǔ)足至100ml磁力攪拌制備儲(chǔ)備液的稀釋液。SMx0,01NHC1Tl100ml燒瓶1ml補(bǔ)足至100mlT2100ml燒瓶1ml補(bǔ)足至IOOmlT3100ml燒瓶1ml補(bǔ)足至IOOml樣品的制備取樣前顆粒制劑在Vortex充分?jǐn)嚢瑁缓笥米詣?dòng)吸液管混合。通過(guò)調(diào)整重量和稀釋體積獲得至少一種稀釋液，其預(yù)期的Mg^濃度在lmg/l-2.6mg/L稀釋液在0.01NHC1中獲得以使聚合物沉淀。如果必要可進(jìn)行連續(xù)稀釋。該溶液磁力攪拌至少30分鐘。通過(guò)0.45pm濾膜后轉(zhuǎn)移到燒瓶中。每個(gè)樣品準(zhǔn)備兩個(gè)制品。4離子色譜條件進(jìn)樣體積25)il流速1ml/min分析時(shí)間25min檢測(cè)傳導(dǎo)率pS/min洗脫液30mMMSA柱溫40°C抑制器陽(yáng)離子電流87mA5結(jié)果處理標(biāo)準(zhǔn)線的確定采用序列中的所有對(duì)照組獲得回歸線。相關(guān)系數(shù)必須>0.99。19該線的方程如下Y=aX+b其中，Y=鎂峰的面積X=對(duì)照溶液的濃度(mg/1)樣品中鎂離子含量的檢測(cè)Ms-ax/^-2+M=Mg2+含量(g/1)Yassay=所分析的鎂峰的面積a=標(biāo)準(zhǔn)線的斜率b=標(biāo)準(zhǔn)線起點(diǎn)的縱坐標(biāo)Vd=稀釋體積(ml)Pe=樣品重量(mg)最終結(jié)果是2次分析的平均值。離子色譜中通常接受的變量系數(shù)為10%，該方法驗(yàn)證時(shí)還會(huì)再確認(rèn)。比率r的計(jì)算在上面的方案中我們討論了鎂含量的測(cè)定。其它多價(jià)離子(C^+、Zn2+、A產(chǎn)等)的含量T按照類似的方法以相同的方式測(cè)定。一旦按照這種方式測(cè)定了M的值，它就用于計(jì)算多價(jià)離子的摩爾濃度IM:[/M]=!，其中Mi。n是多價(jià)離子的摩爾重量，單位g/mo1。知道可電離聚合物的結(jié)構(gòu)，尤其是其理論聚合程度DP、其理論分子量Mp及其疏水接枝率(g卩，通過(guò)疏水性接枝改性的基團(tuán)的部分(XH)，就能夠計(jì)算一定的聚合物濃度C的可電離基團(tuán)的摩爾濃度(以g/l表示)這用于計(jì)算〃=^^，其中n是多價(jià)離子的化合價(jià)。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的制劑的特征在于微米顆粒具有0.05-1.0，優(yōu)選0.07-0.7，特別優(yōu)選0.1-0.5的表觀聚合物密度dapp，其以下面描述的試驗(yàn)D測(cè)定。測(cè)定表觀密度d^的試驗(yàn)D具有聚合物濃度C(mg/g)的微顆粒懸浮液用磁力攪拌使其均質(zhì)化。用微吸管取2ml倍數(shù)的顆粒懸浮液置于一預(yù)先稱出皮重的離心管中。置于該管中的微顆粒懸浮液稱重(重量m，單位g)。該管置于離心機(jī)中并于8000rpm離心30分鐘。用合適的微吸管精確移去上清液。這用于計(jì)算沉淀物的體積Vsed(ml):表觀聚合物密度dapp(g/cm,通過(guò)下式算出<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>加載AP的微米顆粒的懸浮液能夠有價(jià)值地使AP(例如治療蛋白質(zhì)或肽)的釋放時(shí)間得到顯著延長(zhǎng)，并且使血漿濃度峰值降低。具體地說(shuō)，和現(xiàn)有技術(shù)的制劑相比，尤其是和專利申請(qǐng)WO05/051416相比，AP的釋放時(shí)間得到顯著的延長(zhǎng)。由于AP(例如治療蛋白質(zhì))完全是生物活性的并且是未變性的，根據(jù)本發(fā)明的制劑所實(shí)現(xiàn)的AP體內(nèi)釋放時(shí)間的延長(zhǎng)更具有價(jià)值。因此，根據(jù)本發(fā)明的制劑的一個(gè)有利的功能性特征是AP的釋放時(shí)間TV比不含有多價(jià)離子的相同制劑的釋放時(shí)間tr長(zhǎng)，優(yōu)選TV大于或等于l.lxtr，特別優(yōu)選Tr大于或等于1.5xtr，兩者均以試驗(yàn)L測(cè)定。用于測(cè)定AP從根據(jù)本發(fā)明的微顆粒釋放的試驗(yàn)L將吸附性聚丙烯材料裁成2x2cm的正方形。磷酸鹽緩沖溶液(稱為PBS)通過(guò)將一片PBS(AIdrich)溶解于200ml水中制備。這樣可以獲得含有0.01M磷酸鹽緩沖液+0.0027M氯化鉀和0.137M氯化鈉的溶液200ml。含有30mg/g的牛白蛋白緩沖溶液(稱為BSA)通過(guò)將6g牛血清蛋白，流分V(SAFQ溶解于預(yù)先制備好的294gPBS中制得。兩個(gè)50m聰Falcon管，分別含有用于浸泡吸附材料的PBS和BSA溶液，儲(chǔ)存于冰箱中。4或5ml的這些溶液置于5ml容量的密封管中(兩種介質(zhì)每種準(zhǔn)備5個(gè)樣品)。它們儲(chǔ)存在冰箱中。15小時(shí)間隔后，這些含有連續(xù)相當(dāng)5ml管再置于37'C下l小時(shí)。這些正方形的吸附材料于37。C浸泡1小時(shí)，其中5個(gè)浸泡在PBS中，5個(gè)浸泡在BSA中(如果注射有問(wèn)題則更多)。用27G針(1ml注射器)將0.5ml制劑注射到每個(gè)正方形吸附材料的中央(與其表面平行)，事先在紙上用海綿擦拭。標(biāo)記注射的那一面。該步驟應(yīng)用于10個(gè)正方形吸收材料，它們直到后期才浸泡到連續(xù)相中，以使所有的動(dòng)力學(xué)同步。這些正方形吸收材料以注射點(diǎn)和管的頂部靠近的方式放置。這些樣品置于固定器中并且全部都放入37。C的烘箱中，振搖。振搖會(huì)顯著影響釋放的動(dòng)力學(xué)，因此需要控制振搖設(shè)置在40，兩個(gè)障礙欄的距離為9cm。在不同時(shí)間點(diǎn)取IOOpl得連續(xù)相。通過(guò)HPLC分析蛋白使用了兩種洗脫相—洗脫相A:1260ml水/680ml乙腈/60mlTHF/1.8mlTFA-洗脫相B:630ml乙腈/340水/30mlTHF/0.8mlTFAHPLC條件的比較見(jiàn)下表儀器Agilent1100,裝配以下部件-冷卻的自動(dòng)進(jìn)樣器-UV和FLD檢測(cè)器-自動(dòng)積分儀色譜柱KeystoneBetaBasic-18-4.6x150mm-3(am-孔徑150人梯度時(shí)間(min)%A%B0100015505035109036100022401000分析時(shí)間40min(+進(jìn)樣間洗滌20min)流速1.5ml/min柱溫38。C樣品溫度冷卻(4'C)進(jìn)樣體積100pl檢湖!j280nmUV吸收熒光-296nm(激發(fā))-330nm(輻射)然后，連續(xù)介質(zhì)中的蛋白質(zhì)濃度按照時(shí)間作圖。當(dāng)曲線處于最高點(diǎn)并且穩(wěn)定后，釋放的蛋白質(zhì)總量可以從該曲線讀出為了使試驗(yàn)有效，該值必須代表最初加入蛋白的至少40%。時(shí)間1\，即釋放50M所加入的AP所需的時(shí)間，可以隨后從該曲線讀出。根據(jù)一個(gè)優(yōu)選地特征，根據(jù)本發(fā)明的液體藥物制劑的特征在于，懸浮液的微米顆粒能夠在水性液體中通過(guò)向聚合物PO納米顆粒和可選的一種AP的混懸液加入含有多價(jià)離子，優(yōu)選二價(jià)離子的鹽獲得，所述離子和聚合物PO的基團(tuán)GI的極性相反。在一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的制劑包括一種和PO的顆粒結(jié)合的AP。這種制劑的優(yōu)點(diǎn)是可以胃腸外注射并且在注射條件下是液體。根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語(yǔ)"液體"、"低粘度"或"極低粘度"優(yōu)選對(duì)應(yīng)于20。C時(shí)的動(dòng)力學(xué)粘度低于或等于IOOOmPa.s。優(yōu)選地，該制劑的動(dòng)力學(xué)粘度，以20。C時(shí)1000s"的剪切梯度測(cè)定，優(yōu)選小于或等于500mPa.s，特別優(yōu)選2-200mPa.s，例如I.O-IOOmPa.s或1.0-50mPa.s。動(dòng)力學(xué)粘度的測(cè)定動(dòng)力學(xué)粘度的對(duì)照測(cè)量可以在2(TC時(shí)使用配備錐板式幾何學(xué)(4cm，2°)的AR1000流變儀(TA儀器)完成。粘度v在1000s"的剪切梯度測(cè)定。低粘度可以使本發(fā)明的制劑容易以胃腸外方式注射，尤其是通過(guò)粘膜、肌內(nèi)、皮內(nèi)、腹腔或腦內(nèi)途徑或尤其是注射到腫瘤中。根據(jù)本發(fā)明的制劑也可以通過(guò)口腔、鼻腔、肺部、陰道、眼部或頰部途徑給藥。本發(fā)明制劑的液體狀態(tài)或低粘度可同時(shí)存在于對(duì)應(yīng)于室溫的注射溫度(例如4-3(TC)和生理溫度。對(duì)本發(fā)明有用的聚合物PO是帶有疏水基團(tuán)GH和可電離基團(tuán)GI的水溶性生物可降解聚合物。和鏈的剩余部分相比，疏水基團(tuán)的數(shù)目可以少一些，并且可以從側(cè)面連接到鏈上或者插在鏈中，并且可以隨機(jī)分布(無(wú)規(guī)共聚物)或者以序列或者接枝的形式分布(嵌段共聚物或連續(xù)共聚物)。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，疏水基團(tuán)GH從側(cè)面連接到鏈上。不受限制地，疏水改性的聚合物PO可以選自以下組群聚氨基酸、(多)肽、明膠、蛋白質(zhì)、多糖-優(yōu)選自以下亞組卜多糖或殼聚糖或粘多糖或右旋糖苷或半乳甘露聚糖或聚透明質(zhì)酸-及其混合物。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，PO選自兩性分子的(共)聚氨基酸。根據(jù)本發(fā)明的目的和公開(kāi)的內(nèi)容，術(shù)語(yǔ)"^^"^^5'覆蓋天然和合成的聚氨基酸，以及包括10到20個(gè)"氨基酸殘基"的氨基酸低聚物和包括超過(guò)20個(gè)"氨基酸"殘基的聚氨基酸。優(yōu)選地，本發(fā)明有用的聚氨基酸是低聚物或均聚物，含有谷氨酸或天冬氨酸重復(fù)單元，或共聚物體，含有這兩種類型"氨基酸"殘基的混合物。這些聚合物中所述的殘基是具有D、L或D/L構(gòu)形的氨基酸，就谷氨酸或谷氨酸殘基來(lái)說(shuō)，其通過(guò)它們的a或Y位結(jié)合，就天冬氨酸或天冬氨酸殘基來(lái)說(shuō)，其通過(guò)它們的的ct或(3位結(jié)合。優(yōu)選的聚氨基酸主鏈的"氨基酸"殘基是具有L構(gòu)形和oc型鍵合的那些殘基。在本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，PO是天冬氨酸殘基和/或谷氨酸殘基形成的聚氨基酸，至少一些這些殘基中帶有包含至少一個(gè)疏水基GH的接枝。PCT申請(qǐng)WO-A-00/30618中特別描述了這些類型的聚氨基酸。第一種可能，聚合物可以由下列通式(I)定義,24其中■其中，R'是H，C2到C10的直鏈垸基或C3到C10的支鏈垸基，芐基，末端氨基酸單元或-R、[GH];■W是H，C2到C10的直鏈?；駽3到C10的支鏈?；鶊F(tuán)，聚谷氨酸或-R4-[GH〗；■W是H或陽(yáng)離子單元，優(yōu)選自-金屬陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括鈉，鉀，鈣和鎂的亞組，-有機(jī)陽(yáng)離子，優(yōu)選自亞組基于胺的陽(yáng)離子，基于低聚胺的陽(yáng)離子，基于聚胺的陽(yáng)離子(優(yōu)選聚乙烯亞胺)，基于氨基酸的陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括基于賴氨酸或精氨酸的陽(yáng)離子類；-以及陽(yáng)離子聚氨基酸，優(yōu)選自包括聚賴氨酸和低聚賴氨酸的亞組；■^是直接鍵或基于1到4個(gè)氨基酸殘基的"間隔子"；■獨(dú)立地，A是基團(tuán)-CH2-(天冬氨酸單元)或-CH2-CH2-(谷氨酸單元)；■n/(n+m)為摩爾接枝率，pH為7，25'C時(shí)溶于水中PO的摩爾連接率值足夠低，以形成PO超微化顆粒的膠體懸浮液，n/(n+m)優(yōu)選在l和25moiyo之間，特別優(yōu)選在1和15mol。/。之間；■n+m為聚合度，其在10到1000之間，優(yōu)選在50和300之間；以及■GH是疏水基。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，該制劑的特征在于所述疏水基團(tuán)GH衍生自醇前體，選自以下組群辛醇，十二烷醇，十四醇，鯨蠟醇，十八碳醇，油醇，生育酚和膽固醇，并且W是直接鍵。第二種可能，PO可以是以下通式(II)、(III)和(IV)中的一種OH其中■GH是疏水基；■R"是C2到C6的直鏈垸基；■RS'是H或陽(yáng)離子單元，優(yōu)選自-金屬陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括鈉，鉀，鈣和鎂的亞組，-有機(jī)陽(yáng)離子，優(yōu)選自亞組基于胺的陽(yáng)離子，基于低聚胺的陽(yáng)離子，基于聚胺的陽(yáng)離子(優(yōu)選聚乙烯亞胺)，和基于氨基酸的陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括基于賴氨酸或精氨酸的陽(yáng)離子類；-以及陽(yáng)離子聚氨基酸，優(yōu)選自包括聚賴氨酸和低聚賴氨酸的亞組；■RSG是C2到C6的垸基，二烷基或二胺基；■R"是直接鍵或基于l到4個(gè)氨基酸殘基的"間隔子"；■獨(dú)立地，A是基團(tuán)-CH2-(天冬氨酸單元)或-CH2-CH2-(谷氨酸單元)；并且■(n'+m')和n〃為聚合度，其在10到1000之間，優(yōu)選50到300之間。優(yōu)選地，PO的GH基團(tuán)彼此獨(dú)立，為下式的單價(jià)基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>其中-rs是甲基(丙氨酸)，異丙基(纈氨酸)，異丁基(亮氨酸)，仲丁基(異亮氨酸基)或芐基(苯丙氨酸)；-rs是含6到30個(gè)碳原子的疏水基團(tuán)；以及-l為0到6。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)顯著特征，PO的所有或部分疏水基rS是獨(dú)立的，選自以下組群■含6到30個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基以及含至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選O、N或S)或至少一個(gè)不飽和單元，■含6到30個(gè)碳原子的垸氧基，其具有一個(gè)或多個(gè)碳環(huán)，可選地，含至少一個(gè)不飽和單元或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選O、N或S)，以及■含7到30個(gè)碳原子的烷氧基芳基或芳氧基烷基，并且含至少一個(gè)不飽和單元或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選O、N或S)。在實(shí)踐上，并且沒(méi)有限制性地，聚合物PO的接枝的疏水基團(tuán)Re衍生自醇前體，選自以下組群辛醇，十二垸醇，十四醇，鯨蠟醇，十八碳醇，油醇，生育酚和膽固醇。優(yōu)選地，聚氨基酸的主鏈?zhǔn)莂-L-谷氨酸根或a-L-谷氨酸均聚物；a-L-天冬氨酸根或a-L-天冬氨酸均聚物；或a-L-天冬氨酸根/a-L-谷氨酸根或a-L天冬氨酸/a-L-谷氨酸共聚物。優(yōu)選地，PO的聚氨基酸主鏈的天冬氨酸和/或谷氨酸殘基的分布使得到的聚合物是無(wú)序的或嵌段型的或多嵌段型的。根據(jù)另一種定義，用于根據(jù)本發(fā)明制劑的PO的分子量在2000和100,000g/mol之間，優(yōu)選在5000和40,000g/mol之間。在一個(gè)具體實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的制劑的PO帶有至少一個(gè)聚二醇類接枝，其與谷氨酸根和/或天冬氨酸根殘基鍵合。優(yōu)選地，該聚二醇類接枝為下式(V)所示27<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>(V)其中-R"是直接鍵或I到4個(gè)氨基酸殘基的"間隔子"；-X是選自氧、氮和硫的雜原子；-R7和R8獨(dú)立地為H或直鏈的C1到C4烷基；以及-n，，，為10到1000，優(yōu)選地，為50到300。在實(shí)踐中，聚二醇是例如聚乙二醇。根據(jù)本發(fā)明，所需聚二醇接枝的摩爾百分率為1到30%。此外，聚氨基酸PO在下述方面非常有價(jià)值，即它們以可調(diào)節(jié)的接枝率分散在pH為7.4(如，以磷酸鹽緩沖液調(diào)節(jié))的水中，形成膠態(tài)懸浮液。而且，一些活性成分AP，例如蛋白質(zhì)，肽或小分子，可以自發(fā)地與包括這些聚氨基酸PO的納米顆粒結(jié)合。應(yīng)該理解的是，包含可電離基團(tuán)的PO可以是中性的(如COOH)或電離的(COO—)，視pH和組合物而定。因此，在水相中的溶解度直接取決于可電離基團(tuán)的比例和pH。當(dāng)水溶液中有羧基時(shí)，抗衡離子可以是金屬陽(yáng)離子(例如鈉、鈣或鎂)，或有機(jī)陽(yáng)離子(例如三羥乙基胺，三羥甲基氨基甲烷)，或聚胺(如聚乙烯亞胺)。用于本發(fā)明制劑的聚氨基酸類的PO可以通過(guò)例如為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的方法得到。無(wú)序聚氨基酸可以通過(guò)普通的偶聯(lián)反應(yīng)，將疏水基(預(yù)先被"間隔子"功能化)直接連接到聚合物上而得到。嵌段或復(fù)塊聚氨基酸PO可以通過(guò)相應(yīng)氨基酸N-羧基酐(NCA)的連續(xù)聚合得到。例如，共聚谷氨酸根或共聚天冬氨酸聚氨基酸或嵌段，復(fù)塊或無(wú)序谷氨酸根/天冬氨酸根共聚物由常規(guī)方法制備。為得到a型聚氨基酸，最常用的方法是基于氨基酸N-羧基酐(NCA)的聚合，對(duì)該方法描述在題為"Biopolymers"，1976,15，1869的文章以及H.R.Kricheldorf所作的題為"a-aminoacidN-carboxyanhydridesandrelatedheterocycles"，SpringerVerlag(1987)的書(shū)中。NCA衍生物優(yōu)選為NCA-O-Me、NCA-O-Et或NCA-O-Bz衍生物(Me二甲基，Et-乙基，Bz-節(jié)基)。然后將聚合物在適當(dāng)?shù)臈l件下水解，以得到它的酸形式聚合物。這些方法基于申請(qǐng)人的專利FR-A-2801226。本發(fā)明使用的許多聚合物，例如，分子量不同的聚(a-L-天冬氨酸)、聚(a-L-谷氨酸)、聚(cc-D-谷氨酸)和聚(Y-L-谷氨酸)類，均可在市場(chǎng)上買到。ot-P型的聚天冬氨酸聚合物經(jīng)天冬氨酸的縮合(以得到聚琥珀酰亞胺)，然后是堿水解得到(參考Tomida等人的polymer,1997，38，4733-36)。接枝物與聚合物酸根的偶合通過(guò)聚氨基酸在碳二亞胺作為偶聯(lián)劑、以及可選地，催化劑例如4-二甲基氨基吡啶的存在下，于適當(dāng)?shù)娜軇┲羞M(jìn)行反應(yīng)，溶劑例如為二甲基甲酰胺(DMF)、N-甲基吡咯垸酮(NMP)或二甲亞砜(DMSO)。碳二亞胺可以是二環(huán)己基碳二亞胺或二異丙基碳二亞胺。接枝率由組分和反應(yīng)物的化學(xué)當(dāng)量控制，或通過(guò)反應(yīng)時(shí)間控制。通過(guò)常規(guī)的肽偶合或通過(guò)在酸催化之下直接縮合，以"間隔子"功能化疏水基。這些技術(shù)均為所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。由預(yù)先與疏水性接枝合成的NCA衍生物來(lái)合成嵌段或復(fù)塊共聚物。例如，疏水NCA衍生物與NCA-O-Bz進(jìn)行異分子聚合，然后通過(guò)水解選擇性除去芐基。在優(yōu)選地具體實(shí)施方式中，本發(fā)明的制劑包括至少一種AP，其基于一種PO的納米顆粒和至少一種AP在水溶液介質(zhì)中，通過(guò)非共價(jià)結(jié)合而得。制備時(shí)，PO和/或AP可以是固態(tài)(優(yōu)選為粉末)和/或液態(tài)(優(yōu)選為膠體的水性懸浮液)。按照本發(fā)明公開(kāi)的內(nèi)容，AP/PO結(jié)合，AP通過(guò)一個(gè)或多個(gè)非共價(jià)化學(xué)鍵和聚合物po[例如，一個(gè)或多個(gè)聚氨基酸:i相連。本發(fā)明的一種或多種AP與PO的結(jié)合技術(shù)，特別描述在專利申請(qǐng)WO-A-00/30618中。這些技術(shù)將至少一種AP加入到包含PO納米顆粒的液體介質(zhì)中，以得到載有一種或多種AP的納米顆粒的膠體懸浮液。根據(jù)本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)"多價(jià)離子"指二價(jià)離子、三價(jià)離子、四價(jià)離子以及這些離子的混合物。當(dāng)PO具有陰離子基團(tuán)GI時(shí)，所述多價(jià)離子是多價(jià)陽(yáng)離子，優(yōu)選二價(jià)陽(yáng)離子并且特別優(yōu)選自包括M^+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、012+及其混合物的組群，和/或三價(jià)離子，特別優(yōu)選自包括A^+、F^+及其混合物的組群。除多價(jià)離子外，根據(jù)本發(fā)明的制劑可以包括單價(jià)離子(例如陽(yáng)離子)，它們?cè)诩{米顆粒聚集成微米顆粒的過(guò)程中可以起作用。這些多價(jià)離子優(yōu)選以水性(有機(jī)或礦物)鹽溶液的形式，例如多價(jià)離子的硫酸鹽、氯化物、乙酸鹽、葡糖酸鹽或谷氨酸鹽(或其它陰離子氨基酸)的溶液加入到本發(fā)明的制劑中。為了改善其穩(wěn)定性，該制劑優(yōu)選含有至少一種穩(wěn)定劑，選自以下組群—至少一種聚合物PO的納米顆粒，PO是一種水溶性的、可生物降解的、兩性分子的共聚物，其帶有疏水性基團(tuán)(GH)和至少部分電離的可電離的親水性基團(tuán)(GI)，其能夠在等滲條件下，pH二7.0時(shí)在水中自發(fā)地形成一種納米顆粒的膠體懸浮液；—聚二醇類，優(yōu)選聚乙二醇類；—共聚二醇類，優(yōu)選乙二醇/丙二醇共聚物(泊洛沙姆、Pluronic或Lutrol類的)；—纖維素聚合物及其衍生物，優(yōu)選羧基垸基纖維素(例如羧甲基纖維素)或烷基纖維素(如甲基纖維素)；—山梨聚糖和一種或多種脂肪酸的酯類，優(yōu)選吐溫或聚山梨醇酯類的聚氧烯烴(例如聚氧乙烯)二醇和至少一種酸(例如油酸)的酯類；—基于磷脂和聚烯烴二醇的表面活性劑，優(yōu)選聚乙二醇；4氫化或非氫化的糖類，例如海藻糖、山梨醇、甘露醇或蔗糖；—多元醇，如丙二醇或甘油；~>明膠類，優(yōu)選水解明膠；—含氮(共)聚物，優(yōu)選自含有聚丙烯酰胺、聚-N-乙烯酰胺、聚乙烯吡咯垸酮(PVP)和聚-N-乙烯內(nèi)酰胺的組群；—聚乙烯醇類(PVA);—及其混合物。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選的穩(wěn)定劑中的一種由至少一種聚合物PO的納米顆粒構(gòu)成，所述PO和構(gòu)成所述微米顆粒的聚合物相同(優(yōu)選)或不同。制劑中所用穩(wěn)定劑的量?jī)?yōu)選0.01-10%重量，特別優(yōu)選O.1-0.5%重量。至于含有納米顆粒的穩(wěn)定劑，它們優(yōu)選以1.5-3.5%重量用于所述制劑，30例如2.0-3.0%(-2.5%)重量。關(guān)于AP，優(yōu)選自以下組群蛋白質(zhì)、醣蛋白、與一個(gè)或多個(gè)聚二醇鏈結(jié)合的蛋白質(zhì)[優(yōu)選聚乙二醇(PEG)鏈"聚乙二醇化的蛋白質(zhì)"]、肽、聚糖、脂糖、寡聚核苷酸、多核苷酸及其混合物，并且特別優(yōu)選自以下亞組群血紅蛋白、催產(chǎn)素、后葉加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、表皮生長(zhǎng)因子、血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)、造血刺激因子及其混合物、vm因子和ix因子、血色素、細(xì)胞色素、泌乳刺激素、白蛋白、黃體激素釋放激素(LHRH)、LHRH拮抗劑、LHRH競(jìng)爭(zhēng)劑、人、豬或牛生長(zhǎng)因子(GH)、生長(zhǎng)激素釋放因子、胰島素、生長(zhǎng)激素抑制素、胰高血糖素、白介素或其混合物(IL-2、IL-ll、IL-12)、oc-、P-或Y-干擾素、胃泌素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素、分泌素、降鈣素、腦啡肽、內(nèi)嗎啡肽、血管緊張素、促甲狀腺素釋放激素(TRH)、腫瘤壞死因子(TNF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、肝素酶、骨成形素蛋白(BMP)、hANP、類高血糖素樣肽(GLP-1)、VEG-F、重組乙型肝炎表面抗原(rHBsAg)、腎素、細(xì)胞因子、緩激肽、桿菌肽、多粘菌素、粘菌素、短桿菌酪肽、短桿菌肽、環(huán)孢菌素類、和酶、細(xì)胞因子、抗體、抗原和疫苗的合成類似物和藥學(xué)活性改性物和片段。在一個(gè)變化例中，活性成分是"小的"、疏水的、疏水的或兩性分子的有機(jī)分子，其類型屬于蒽環(huán)霉素、紫杉醇或喜樹(shù)堿家族，或是肽(如亮丙瑞林或環(huán)孢子菌素)以及它們的混合物。本發(fā)明的內(nèi)容中，"小"分子特別指非蛋白小分子，如沒(méi)有氨基酸的小分子。在另一個(gè)變化例中，所述AP優(yōu)選自以下活性物質(zhì)類別治療酗酒的藥物、治療阿爾茨海默病毒藥物、麻醉藥、治療肢端肥大癥的藥物、鎮(zhèn)痛藥物、平喘藥、治療過(guò)敏的藥物、抗腫瘤藥、抗炎藥、抗凝血?jiǎng)┖涂寡ㄐ纬蓜⒖贵@厥藥、抗癲癇藥、抗糖尿病藥、止吐藥、抗青光眼藥、抗組胺藥、抗感染藥、抗生素、抗真菌藥、抗病毒藥、抗帕金森病藥、抗膽堿藥、止咳藥、碳酸酐酶抑制劑、心血管藥物、降血脂藥、抗心律失常藥、血管擴(kuò)張藥、抗心絞痛藥、抗高血壓藥、血管保護(hù)劑、膽堿酯酶抑制劑、治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)的藥物、中樞神經(jīng)系統(tǒng)刺激劑、避孕藥、生殖促進(jìn)藥、分娩促進(jìn)藥和抑制劑、治療粘液粘稠病的藥物、多巴胺受體激動(dòng)劑、治療子宮內(nèi)膜異位的藥物、治療勃起障礙的藥物、治療生育的藥物、治療胃腸道疾病的藥物、免疫調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑、治療記憶疾病的藥物、抗偏頭痛藥、肌松藥、核苷類似物、治療骨質(zhì)疏松的藥物、擬副交感神經(jīng)藥、前列腺素、心理治療藥、鎮(zhèn)靜藥、催眠和鎮(zhèn)定藥、安定藥、抗焦慮藥、精神振奮藥、抗抑郁藥、治療皮膚病的藥物、甾體和激素、安非他明、減肥藥、非鎮(zhèn)痛型止痛藥、抗癲癇藥、巴比妥類、苯并二氮雜卓類、催眠藥、放松藥、精神藥品以及這些產(chǎn)品的聯(lián)合使用。從定量的角度看，不與微米顆粒結(jié)合的AP[非結(jié)合AP]的重量百分率為以下數(shù)值時(shí)特別有價(jià)值-[非結(jié)合AP]Sl,-優(yōu)選[非結(jié)合AP]^0.5。在一個(gè)變化例中，AP可以是一定劑量的重組人生長(zhǎng)激素hGH，例如0.2-2mg/kg，并且優(yōu)選0.5-lmg/kg。在另一個(gè)變化例中，AP可以是一定劑量的胰島素，例如0.2-2Ul/kg，并且優(yōu)選0.5-lUl/kg。在另一個(gè)變化例中，AP可以是一定劑量的a-2b干擾素，例如20-100Hg/kg，并且優(yōu)選40-80pg/kg。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的制劑用于制備藥物，尤其用于胃腸外、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)給藥、腹腔給藥或腦內(nèi)途徑給藥，或注射到腫瘤中，或口服、經(jīng)鼻、經(jīng)肺部、經(jīng)陰道、或經(jīng)眼部途徑給藥。根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)特征、本發(fā)明涉及上述制劑的制備方法。該制劑制備方法的特征主要在于a.取至少一種PO納米顆粒的膠體懸浮液，b.可選地，優(yōu)選在水性溶液中，將該P(yáng)O的納米顆粒的膠體懸浮液與至少一種AP混合，c.可選地，過(guò)濾所得的懸浮液，d.加入和聚合物PO的基團(tuán)GI極性相反的多價(jià)離子(優(yōu)選以鹽的形式)，所述多價(jià)離子加入到量使得按照下式定義的比值r在0.3-10，優(yōu)選0.6-5.0，特別優(yōu)選0.8-3.0之間，,="督射-n是多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是可電離基團(tuán)GI的摩爾濃度，以及e.如有必要，調(diào)節(jié)pH和/或摩爾滲透壓濃度(例如通過(guò)滲濾)。根據(jù)本發(fā)明的制劑優(yōu)選在室溫下(e.g.25'C)制備。可以展望AP和微米顆粒的不同結(jié)合方式(參見(jiàn)上文)。優(yōu)選地，通過(guò)聚集的方式使AP和用以形成微米顆粒納米顆粒結(jié)合。也可以使AP直接和微米顆粒結(jié)合。兩種結(jié)合方法可以聯(lián)合使用。為了和納米顆?；蛭⒚最w粒結(jié)合，AP優(yōu)選以水性懸浮液或溶液的形式和PO的納米顆?；蛭⒚最w粒的膠體懸浮液相混合。在一個(gè)實(shí)施方式中，AP可以固體形式使用，然后和納米顆?；蛭⒚最w粒的懸浮液混合。本發(fā)明還涉及衍生自包含于根據(jù)本發(fā)明的制劑的PO的納米顆粒和微米顆粒的固體產(chǎn)品。在實(shí)踐中，這些衍生產(chǎn)品可以尤其主要由粉末、凝膠、植入物或薄膜組成。因此本發(fā)明涉及衍生自根據(jù)本發(fā)明的制劑的產(chǎn)品，它們和其制備方法無(wú)關(guān)。因此，這里的衍生產(chǎn)品的特征在于它是非液體形式的并且它包括聚合物(PO)的微米顆粒。i.該聚合物PO，是水溶性的、生物降解性的、兩性分子的共聚物，帶有疏水性基團(tuán)(GH)和可電離的親水性基團(tuán)(GI)，，并且在水中、pH7.0，等滲條件下自然地形成納米顆粒的膠體懸浮液，ii.所述顆粒在水pH7.0，等滲條件下能夠自然地和至少一種活性成分(AP)非共價(jià)地相結(jié)合；PO的這些微米顆粒具有一定尺寸，以T試驗(yàn)測(cè)定，在0.5-100pm之間，優(yōu)選在1-70pm之間并且特別優(yōu)選在2-40pm之間；還在于它包括和聚合物的基團(tuán)GI的極性相反的多價(jià)離子，優(yōu)選二價(jià)離子的衍生物，以下式定義的比值r在0.3-10之間、優(yōu)選0.6-5.0之間并且特別33優(yōu)選0.8-3.0之間，nx^J，其中[G/]-n是所述多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是可電離基團(tuán)的摩爾濃度。這種衍生產(chǎn)品可以由例如粉末或凝膠組成。本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的制劑的衍生產(chǎn)品，其作為中間體產(chǎn)生于根-據(jù)本發(fā)明的制劑的制備。本發(fā)明因此還涉及至少一種這些衍生產(chǎn)品的制備方法。該方法的特征主要在于干燥微米顆粒的懸浮液以得到固體形式，優(yōu)選能夠儲(chǔ)存或給藥的微米顆粒的粉末。這些衍生產(chǎn)品提供了制備根據(jù)本發(fā)明的制劑的另一種方法，這種方法的特征主要在于取至少一種由上面定義的方法獲得的衍生產(chǎn)品，將衍生產(chǎn)品和水或重構(gòu)的水性溶液S相混合。在后面的情形中，該液體藥物制劑可以在使用前通過(guò)在注射前將固體衍生產(chǎn)品(例如粉末)和水或S相混合立即重構(gòu)獲得。例如，S可以含有一種水性溶液并且可以簡(jiǎn)單地是注射用水。而且，S可以任選地含有-至少一種緩沖液或可注射鹽(磷酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液、氯化鈉)，濃度為例如0.001M-0.1M，優(yōu)選0.005M-0.02M，這種緩沖液或這種可注射鹽能夠調(diào)節(jié)溶液的pH;和-至少一種可注射的表面活性劑，優(yōu)選聚山梨醇酯，例如吐溫⑧20或吐溫@80，或者是泊洛沙姆類的，例如Lutrol⑧F38、LutrolF68或LutrofF127，濃度為例如O.01%-2%，優(yōu)選0.05-0.5%。S還可以包括增加密度的試劑，例如糖類，如蔗糖、D-甘露醇或海藻糖，濃度為0.1%-10%，并且優(yōu)選0.5-5%。這種重構(gòu)溶液還可以含有可注射的增粘聚合物，選自包括多糖、合成聚合物(如羧甲基纖維素鈉)、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯垸酮、聚二醇(如聚乙二醇)及其混合物的組群。更為通常地，可以加入到根據(jù)本發(fā)明的制劑的賦形劑的例子是本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的抗微生物劑、緩沖劑、抗氧化劑和滲透壓調(diào)劑?？蓞⒖?"/e"a6/eDeve/opwew一書(shū)，P.K.Gupta等，InterpharmPress,Denver,Colorado,1999。根據(jù)本發(fā)明，可以展望使用過(guò)濾除菌的方式，在孔徑0.2pm的濾膜上，提供根據(jù)本發(fā)明的制劑的聚集成微米顆粒的納米顆粒懸浮液。因此根據(jù)上面描述的方法在無(wú)菌條件下的聚集可以使制劑直接注射給病人。根據(jù)本發(fā)明的制劑的主要性質(zhì)包括，在相同的pH、相同的蛋白質(zhì)濃度下和相同的聚合物濃度下給藥，其釋放AP的時(shí)間比相同的聚合物的納米顆粒的膠體懸浮液更長(zhǎng)。本發(fā)明還涉及藥物的制備方法，特別是用于胃腸外、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)給藥、腹腔給藥或腦內(nèi)途徑給藥或腫瘤內(nèi)給藥，或口服、經(jīng)鼻、經(jīng)肺部、經(jīng)陰道、或經(jīng)眼部途徑給藥的藥物，其特征主要在于使用了上面定義的制劑本身，或根據(jù)上面定義的方法獲得的制劑，或任何衍生自所述制劑的產(chǎn)品，或任何所述制劑的前體。雖然根據(jù)本發(fā)明的制劑優(yōu)選用于藥物，但不排除用于化妝品，飲食品或植物檢疫制劑，該制劑包括至少一種上述PO和至少一種AP。本發(fā)明還涉及一種治療方法，其主要在于通過(guò)胃腸外、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)給藥、腹腔給藥或腦內(nèi)途徑給藥或腫瘤內(nèi)給藥，或通過(guò)口服、經(jīng)鼻、經(jīng)肺部、經(jīng)陰道、或經(jīng)眼部途徑給予本說(shuō)明書(shū)中描述的制劑。在本發(fā)明的一個(gè)具體變化例中，該治療方法在于通過(guò)胃腸外注射、皮下注射、肌內(nèi)注射、皮內(nèi)注射、腹腔注射或腦內(nèi)途徑注射或注射到腫瘤內(nèi)給藥，優(yōu)選以在注射位點(diǎn)形成貯庫(kù)的方式給藥上述制劑。通過(guò)以下實(shí)施例將更清楚地理解本發(fā)明，且本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和實(shí)施方式將更顯而易見(jiàn)，所述實(shí)施例描述了由聚氨基酸與疏水基連接形成的PO的合成，以及它們轉(zhuǎn)變?yōu)锳P的持續(xù)釋放體系，即本發(fā)明的制劑(穩(wěn)定的水溶膠體懸浮液)，并闡述了這種體系不僅可以和治療蛋白質(zhì)結(jié)合，而且，特別是可以形成膠凝體/交聯(lián)的能力，以在體內(nèi)以非常持久的方式釋放治療蛋白質(zhì)。唯一的附圖是一曲線，顯示試驗(yàn)L中，根據(jù)其是否包含在PO納米顆粒，納米顆粒23mg/g]或?qū)嵤├?所制備的PO微顆粒^微顆粒73mg/g]中，人生長(zhǎng)激素[hGH相對(duì)于所注射總濃度的。/。]的釋放和時(shí)間[t:分鐘]的函數(shù)。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:兩性分子聚合物PO用oc-生育酚作為合成來(lái)源接枝聚谷氨酸的合成在8(TC加熱15ga-L-聚谷氨酸(相對(duì)于聚氧乙烯標(biāo)準(zhǔn)的分子量為16,900Da左右，其通過(guò)聚合NCAGluOMe然后水解得到，如專利申請(qǐng)F(tuán)R-A-2801226所描述)直到其溶解在288ml二甲基甲酰胺(DMF)里。將溶液冷卻至15。C，連續(xù)加入預(yù)先溶解在8mlDMF里的2.5gD,L-a-生育酚(〉98X，購(gòu)自Fluka⑧)、預(yù)先溶解在lmlDMF里的280mg4-二甲基氨基吡啶和預(yù)先溶解在6mlDMF里的1.6g二異丙基碳二亞胺。攪拌3小時(shí)后，將反應(yīng)介質(zhì)倒入1200ml含有15X的氯化鈉和鹽酸(pH二2)的水中。然后通過(guò)過(guò)濾并用0.1N鹽酸、水和二異丙醚洗滌來(lái)回收沉淀的聚合物。然后該聚合物在40。C真空箱中干燥，得到的產(chǎn)率約為90%。用體積排除色譜法測(cè)得的相對(duì)于聚氧乙烯標(biāo)準(zhǔn)的分子量為15,500。用質(zhì)子NMR光譜法評(píng)估的生育酚的接枝比例為5.1mol%。將其溶解在水中，并將pH調(diào)節(jié)(中和羧酸鹽)至7±1，獲得聚合物在水中的納米顆粒懸浮液。實(shí)施例2:制備100g裝載有hGH的聚合物PO納米顆粒的膠體懸浮液2.1制備兩性分子聚合物PO的膠體溶液聚合物置于溶液中過(guò)夜以達(dá)到3(TC恒溫。稱出35.3g實(shí)施例l的聚合物PO。用26.65g無(wú)菌注射用水稀釋(對(duì)于濃度為28.4mg/g的聚合物PO)。磁力攪拌該聚合物溶液。加入1.89g的5.13MNaCl水溶液(30。/。w/w)將該溶液的摩爾滲透壓濃度調(diào)整至300土20mOsm。加入0.38g的lNNaOH溶液將pH調(diào)節(jié)至7.4士0.2。得到濃度為15.61mg/g的聚合物溶液64.22g。2.2蛋白質(zhì)和聚合物的結(jié)合重組人生長(zhǎng)激素(稱為hGH)溶液在25。C解凍90分鐘。然后將35.92g的hGH溶液(濃縮的，3.9mg/g)在攪拌下加入64.15g預(yù)先36制備的聚合物膠體溶液中。裝載有蛋白質(zhì)的該溶液在室溫下陳化2小時(shí)。然后將其通過(guò)0.8-0.2pm的過(guò)濾器并陳化過(guò)夜。得到100g用于注射的制劑，其含有1.4mg/g的hGH和10mg/g的PO型聚合物。實(shí)施例3:用MgCl2制備微米顆粒懸浮液該懸浮液由實(shí)施例2制得的溶液制備，所述溶液具有調(diào)整后的pH和摩爾滲透壓濃度，并含有10.0mg/g的PO。a)使用遞送速度為約20ml/h的動(dòng)作受控的注射器，在攪拌下(第9號(hào)裝置)加入lMMgCl2溶液使溶液絮凝。這種情況下表示添加陽(yáng)離子的比例等于3.36。得到含有8.51mg/g的PO的溶液。b)在2500rpm的速度下離心25分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度是646mOsm。c)用無(wú)菌水(初始溶液體積的l/8)洗滌殘余物，并在2500rpm的速度下離心10分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度是350mOsm。d)在2500rpm的速度下離心10分鐘。該制劑的特性如下ph6,64摩爾滲透壓濃度349mOsm「poi50.77mg/g粒徑D50(根據(jù)Tl試驗(yàn))2Q)_im實(shí)施例4:用CaCl2并在降低的pH下制備微顆粒懸浮液該懸浮液由實(shí)施例2制得的溶液制備，所述溶液具有1.2mg/g的hGH和25.9mg/g的PO的最終特性。a)使用遞送速度為約70ml/h的動(dòng)作受控的注射器，在攪拌下(600rpm)加入0.1NHC1，將初始制劑的pH調(diào)節(jié)至5.52。b)使用遞送速度為約39ml/h的動(dòng)作受控的注射器，在攪拌下(600rpm)加入lMCaCl2溶液使聚合物絮凝。這種情況下表示添加陽(yáng)離子的比例r=2x等于1.68。c)在2500rpm的速度下離心8分鐘。清澈的上清液的pH為4.73且摩爾滲透壓濃度為653mOsm。d)用MilliQ水(初始溶液體積的l/8)洗滌殘余物并在2500rpm的速度下離心4分鐘。清澈的上清液的pH為4.72且摩爾滲透壓濃度為378mOsm。e)在2500rpm的速度下離心4分鐘來(lái)濃縮殘余物，得到濃縮的懸浮液。所得懸浮液具有以下特性-<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>實(shí)施例5:用CaCl2制備微顆粒懸浮液該懸浮液由實(shí)施例2制得的溶液制備，所述溶液具有1.2mg/g的hGH和26.01mg/g的PO的最終特性。a)使用遞送速度為約40.3ml/h的動(dòng)作受控的注射器，在攪拌下(600rpm)加入lMCaCl2溶液使初始制劑絮凝，直到比例r為3.36。得到含有0.93mg/g的hGH和20.28mg/g的PO的制劑。b)在2500rpm的速度下離心4分鐘。清澈的上清液的pH為6.34且摩爾滲透壓濃度為832mOsm。c)用MilliQ水(初始溶液體積的l/3)洗滌殘余物并在2500rpm的速度下離心8分鐘。清澈的上清液的pH為6.56且摩爾滲透壓濃度為334mOsm。d)通過(guò)在2500rpm的速度下離心8分鐘來(lái)濃縮殘余物，得到濃縮的懸浮液。所得懸浮液具有以下特性<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>實(shí)施例6:用ZnCh制備微顆粒懸浮液該懸浮液由實(shí)施例2制得的溶液制備，所述溶液具有1.4mg/g的hGH和10.00mg/g的PO的最終特性。a)使用遞送速度為約20ml/h的動(dòng)作受控的注射器，在攪拌下(第9號(hào)裝置)加入1MZnCl2溶液使溶液絮凝，直到比例r為1.54。得到含有9.64mg/g的PO的溶液。b)在2500rpm的速度下離心4分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度為389mOsm。c)用無(wú)菌水(初始溶液體積的l/13)洗滌殘余物并在2500rpm的速度下離心8分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度為237mOsm。d)用0.9。/。NaCl(初始溶液體積的l/8)洗滌殘余物。在2500rpm的速度下離心8分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度為253mOsm。計(jì)算的理論濃度則為64.97mg/ml。所得懸浮液具有以下特性<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>實(shí)施例7:在條件l下用MgCl2制備微顆粒懸浮液該懸浮液由實(shí)施例2制得的溶液制備，所述溶液具有0.48mg/g的hGH和23.05mg/g的PO的最終特性，具有調(diào)整后的pH和摩爾滲透壓濃度。a)用0.9。/oNaCl稀釋至10.0mg/g。b)使用遞送速度為約20ml/h的動(dòng)作受控的注射器，在攪拌下(第10號(hào)裝置)加入lMMgCl2溶液使溶液絮凝，直到比例r為6.93。得到含有8.59mg/g的PO的溶液。c)在2500rpm的速度下離心10分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度為654mOsm。d)用無(wú)菌水(初始溶液體積的l/7)洗滌殘余物并在2500rpm的速度下離心10分鐘。清澈的上清液的摩爾滲透壓濃度為291mOsm。所得懸浮液具有以下特性<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>實(shí)施例8:在條件2下用MgCl2制備顆粒懸浮液該懸浮液由實(shí)施例2制得的溶液制備，所述溶液具有1.33mg/g的hGH和10.10mg/g的PO的最終特性，具有調(diào)整后的pH和摩爾滲透壓濃度。a)在氮?dú)饬鞔嬖谙?，使用遞送速度為約8ml/min的泵，在攪拌下(500rpm)加入2MMgCl2，6H20溶液使溶液絮凝，直到比例r為10.01。得到含有8.98mg/g的PO和摩爾滲透壓濃度為914mOsm的溶液。b)在攪拌下陳化3小時(shí)。c)使用Microza組件(UJP-0047R-Pall)，其比表面積為0.02m2。該組件首先經(jīng)歷狀態(tài)良好化(通過(guò)浸泡在水中除去甘油和乙醇)、去除內(nèi)毒素(用7%NaOH然后用水沖洗)和高壓滅菌。d)用摩爾滲透壓濃度為900mOsm的MgCl2溶液使該組件處于良好狀態(tài)。e)用無(wú)菌水(絮凝制劑體積的1.04倍)洗滌，所述無(wú)菌水以8ml/min的速度加入以保持總體積恒定。該循環(huán)由25%功率的泵確保，壓力保持在0.3巴。該步驟持續(xù)3小時(shí)。清澈的濾液的摩爾滲透壓濃度為459mOsm。f)使用Microza組件(0.02m2)，其循環(huán)由25%功率的泵確保。以4.4ml/min的透過(guò)流率濃縮。該步驟持續(xù)160分鐘。濾液的最終摩爾滲透壓濃度為324mOsm。該制劑為白色流體懸浮液，具有以下特性<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>實(shí)施例9:在條件3下用MgCl2制備穩(wěn)定的顆粒懸浮液a)制備實(shí)施例2制得的PO溶液，以下稱為初始制劑hGH1.4mg/g/PO10mg/g。重組人生長(zhǎng)激素溶液在25X:解凍2小時(shí)([hGH]=3.9mg/ml，pH=7.2，330mOsm)。稀釋并調(diào)節(jié)聚合物PO(300mOsm，pH=7.4,15.6mg/g)。將hGH溶液倒在聚合物上，然后使hGH/PO混合物(1.4/10mg/g)脫氣。在室溫下過(guò)夜實(shí)現(xiàn)結(jié)合。POpH=7.4—300mOsmM(PCT)2317.90grpoi15.61mg/ghGHM(hGH)1302.30g「hGHl3.9mg/g初始制劑M3497.00g「hGHl1.35mg/g岡10.01mg/gb)制備顆粒hGH5mg/g/Mg微顆粒40mg/g通過(guò)控制加入2MMgCl2使初始制劑絮凝，比例r為9.01，之后整體置放陳化l小時(shí)(熟化)。通過(guò)切向微濾(購(gòu)自Pall的Microza組件，其比表面積為0.32m"洗滌懸浮液，直到摩爾滲透壓濃度為約300mOsm。然后濃縮使PO濃度為38至41mg/g。__初始制劑M3458.4g1.399mg/g岡10.01mg/g絮凝M(MgCl2.2M)457.6g流速8.47g/minM(懸浮液)3883.4g「POl8.84mg/g摩爾滲透壓濃度942mOsm洗滌M(H20)4241g流速42.43mg/min摩爾滲透壓濃度330mOsm濃縮M(濾液)3157g41<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>實(shí)施例10:通過(guò)本發(fā)明方法的第一種實(shí)施方式由微顆粒懸浮液制備裝載有hGH的干微米顆粒首先，在實(shí)施例8a)到e)步驟(絮凝、陳化、洗滌)所述的條件下制備裝載有hGH的微顆粒懸浮液。洗滌懸浮液直到摩爾滲透壓濃度為約280mOsm。將含有約10mg/g聚合物的懸浮液在液氮中冷凍76小時(shí)之后，在BioblockALPHA1-4LSC設(shè)備上凍干。懸浮液的重組和表征40mg粉末中加入lml注射用水。手動(dòng)攪拌該溶液數(shù)秒，以實(shí)現(xiàn)粉末的均勻潤(rùn)濕。該溶液放置10分鐘。手動(dòng)攪拌數(shù)秒使其均勻，并用21G的針抽取，得到lml用于注射的溶液。該懸浮液的性質(zhì)描述如下。<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>實(shí)施例ll:通過(guò)本發(fā)明方法的第二種實(shí)施方式由微顆粒懸浮液制備裝載有hGH的聚合物的干微米顆粒首先，在實(shí)施例8a)到e)步驟(絮凝、陳化、洗滌)所述的條件下制備裝載有hGH的顆粒懸浮液。洗滌懸浮液直到摩爾滲透壓濃度為約280mOsm。然后將含有約IOmg/g聚合物的懸浮液在BiichiB290霧化裝置上干燥。以5ml/min的速度抽出液體溶液，并通過(guò)供氮(7bar-5001/h)的噴嘴霧化。抽出速度(干空氣)為40m3/h。進(jìn)口溫度維持在90。C，這促使這些條件下的出口溫度為45°。。在這些條件下，所得顆粒的粒徑D(0.5)(根據(jù)T2試驗(yàn))為5pm(50%的體積由直徑"pm的顆粒占據(jù))。懸浮液的重組和表征30mg粉末中加入lml注射用水。手動(dòng)攪拌該溶液數(shù)秒，以實(shí)現(xiàn)粉末的均勻潤(rùn)濕。該溶液放置10分鐘。手動(dòng)攪拌數(shù)秒使其均勻，并用21G的針抽取，得到lml用于注射的溶液。該懸浮液的性質(zhì)描述如下。<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>實(shí)施例12:皮下注射基于兩性分子聚氨基酸的納米顆粒和微顆粒形式的不同制劑之后，狗中hGH的藥代動(dòng)力學(xué)用下列制劑處理12只naive小獵犬(重量7到10kg):制劑狗的編[hGH][PO]劑量劑量體積號(hào)(mg/ml)(mg/ml)(mg/kg)(ml/kg)hGHIR44010.23制劑l4522,610.22制劑245117.510.20hGHIR相當(dāng)于重組人生長(zhǎng)激素溶液([hGH]=4mg/ml，pH=7.2,330mOsm)o根據(jù)實(shí)施例2制備制劑1，根據(jù)實(shí)施例7制備制劑2。hGH由ELISA(DSL10-1900kit)分析。下表比較了藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)制劑Cmax土(ng/ml)T>5ng/ml±SD(h)AUC0—last±SD(ng.h/ml)RBA(%)T50y。auc±SD(h)hGHIR582±15518±33209±2761004±1制劑1135±3744±62579±5168025±5制劑225±5129±261759±24655121±33其中-Cmax是最大血清hGH濃度，-T>5ng/ml是血清hGH濃度大于5ng/ml的時(shí)間，-AUC表示血清hGH濃度作為時(shí)間函數(shù)的曲線下面積，-RBA表示相對(duì)于速釋制劑的生物利用度，-丁5。％,表示釋放總hGH的50%所需的時(shí)間。hGHIR具有速釋曲線，其最大血清濃度為582士155ng/ml，在2小時(shí)的中位時(shí)間后達(dá)到。之后hGH根據(jù)單指數(shù)降低被相當(dāng)迅速地消除(表觀P/2約為2小時(shí))。24小時(shí)以后循環(huán)hGH不可測(cè)量。制劑l具有延緩的hGH釋放曲線，其具有慢吸收相，之后在24小時(shí)的中位時(shí)間后達(dá)到可比較的最大血清濃度(分別是44±6和37±4ng/ml)。48小時(shí)以后消除斜率顯示缺乏可測(cè)量的hGH(血清濃度為4.8±3.1ng/ml)。該制劑在這種情況下顯示hGH較慢地釋放入血室中，如圍繞24小時(shí)的C,中的變化所闡明。然而，這種現(xiàn)象不像是顯著延長(zhǎng)了hGH在血清中的存在，因?yàn)?8小時(shí)的循環(huán)濃度似乎是0。制劑1的AUC相對(duì)于參照物IR似乎輕微地減少生物利用度為80%。44另一方面，制劑2提供了藥代動(dòng)力學(xué)曲線的主要修正，其具有伴隨有4小時(shí)的滯后時(shí)間的非常慢的釋放，然后在108小時(shí)的中位時(shí)間(范圍72-168小時(shí))后達(dá)到最大血清濃度25±5ng/ml。帝U劑2的藥代動(dòng)力學(xué)的總體趨勢(shì)是一種類輸注型的假穩(wěn)態(tài)形式的非常平坦的曲線。循環(huán)hGH水平在168小時(shí)至240小時(shí)(7至10天)回到不可測(cè)量的濃度。該制劑具有小得多的AUC:相對(duì)生物利用度損失45%(RBA=55%)。實(shí)施例13:皮下注射基于兩性分子聚氨基酸的微顆粒形式的制劑之后，狗中hGH的藥代動(dòng)力學(xué)用下列制劑處理12只naiVe小獵犬(重量7到10kg):制劑狗的編[hGH][PO]pH/劑量劑量體積號(hào)(mg/ml)(mg/ml)mOsm(mg/kg)(ml/kg)hGHIR64.107.4/3215x0.1/天0.024制劑364.364,26.4/4090.50.122hGHIR相當(dāng)于重組人生長(zhǎng)激素溶液([hGH]=4.1mg/ml，pH=7.2,330mOsm)。根據(jù)實(shí)施例9制備制劑3。下表比較了藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù):制劑Cmax士SD(ng/ml)T>1ng/ml±SD(h)AUC0.last±SD(ng,h/ml)RBA(%)T50%auc±SD(h)hGHIR90±2439258±261002±0.3制劑326±16108±38999±2947766±14其中-C腿是最大血清hGH濃度，-T>1ng/mL是血清hGH濃度大于lng/ml的時(shí)間，-AUC表示血清hGH濃度作為時(shí)間函數(shù)的曲線下面積，-RBA表示相對(duì)于速釋制劑的生物利用度，-丁5。％,表示釋放總1^11的50%所需的時(shí)間。微顆粒在超過(guò)5天的時(shí)間內(nèi)釋放hGH，生物利用度損失23%。對(duì)比例14:hGH從PO的本發(fā)明微顆粒和納米顆粒中的體外釋放(L試驗(yàn))L試驗(yàn)進(jìn)行了hGH從PO納米顆粒(實(shí)施例2)和PO的微顆粒(;實(shí)施例8:)中45的釋放比較。連續(xù)相是30mg/g的白蛋白緩沖液。唯一的附圖顯示制劑在可注射的濃度條件下釋放507。蛋白質(zhì)(hGH)所需的時(shí)間-含有23mg/g的納米顆粒tr=40min，即0.67h一含有73mg/g的微顆粒Tr=973min，即16.22h包含在微顆粒中的hGH的釋放比包含在納米顆粒中的hGH的釋放慢24倍。實(shí)施例15:制備含有聚合物PO微顆粒和胰島素(IOOUI/燒瓶)的凍干粉的單個(gè)燒瓶制備濃縮至500Ul/g(17,5mg/g)的350g胰島素溶液將6.4g重組人胰島素(粉末)(28,6UI/g，含水量4.5%)引入玻璃燒瓶。加入157g水，在低磁力攪拌下將胰島素分散。加入46.6g0.1NHC1，直到得到酸性胰島素的清澈溶液。然后加入69.8g0.1N的碳酸鈉，以獲得pH為7至8的最終清澈溶液。加入70.2g的水將該溶液稀釋至所需的濃度。與聚合物PO溶液混合將所得的326g濃縮胰島素溶液緩慢倒入(伴隨磁力攪拌)3426g聚合物PO溶液(濃縮至llmg/g)中。該混合物通過(guò)0.2iim的過(guò)濾器并在低攪拌下放置過(guò)夜。在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行下面的步驟。絮凝-洗滌-濃縮通過(guò)控制添加377g2MMgCl2使前述制劑絮凝(比例r為7.2)。陳化l小時(shí)后，通過(guò)切向微濾(購(gòu)自Pall的Microza組件，其比表面積為0.32m勺洗滌該懸浮液，直到摩爾滲透壓濃度為約340mOsm并濃縮至PO濃度為約27mg/g。在該懸浮液中加入lNNaOH溶液(約6g)將pH調(diào)至6.5。得到含有約100UI/g胰島素(精確值可通過(guò)在連接C18的硅膠柱上進(jìn)行HPLC獲得)的懸浮液。加入聚乙烯吡咯烷酮由可注射的聚乙烯吡咯垸酮粉末(例如K17)得到200g濃縮至約40mg/g的聚乙烯吡咯垸酮原液通過(guò)0.2pm的無(wú)菌過(guò)濾器。然后在無(wú)菌條件下將120g濾液加入1200g前述懸浮液中，混合物攪拌15分鐘。所得懸浮液含有91Ul/g的胰島素。凍干將前述懸浮液分配在單個(gè)燒瓶中，每個(gè)燒瓶100UI(約1.1g前述懸浮液/燒瓶)燒瓶在無(wú)菌條件下凍干一個(gè)循環(huán)72小時(shí)。然后密封直到使用。實(shí)施例16:實(shí)施例15得到的顆粒/胰島素?zé)康闹貥?gòu)該懸浮液按照如下步驟臨時(shí)重構(gòu)(在使用前)用注射器和針將lml水加入燒瓶中，所述燒瓶含有前實(shí)施例所得的IOOUI的胰島素。手動(dòng)攪拌燒瓶數(shù)秒以得到均勻(乳狀:)懸浮液該懸浮液用注射器抽出，例如用30G的針注射。重構(gòu)的懸浮液含有-23mg/ml的聚合物PO-100Ul/ml的胰島素(3.5mg/ml)-4mg/ml的聚乙烯吡咯烷酮-0,18mmol/mlWMg2+(r=2.8)。該重構(gòu)的懸浮液的特性如下，峰2+C根據(jù)M試驗(yàn))PH摩爾滲透壓濃度mOsm粒徑D(0.5)nm(根據(jù)T1試驗(yàn))d卿(mg/ml)(根據(jù)D試驗(yàn))2.86.530015.00.13在2(TC下測(cè)定的動(dòng)力學(xué)粘度等于5mPa.s。實(shí)施例17:皮下注射基于兩性分子聚氨基酸的微顆粒形式的制劑之后，狗中hGH的藥代動(dòng)力學(xué)在2個(gè)周期的交叉試驗(yàn)中用以下制劑連續(xù)處理兩組naive小獵犬(每組6只，重量10.4土0.6kg);47制劑狗的編號(hào)[胰島素](UI/g)[po](mg/g)劑量(UI/kg)劑量體積("L/kg)Lantus(批次12100011040N300)制劑41210020110該試驗(yàn)的參照物L(fēng)antus⑧是Sanofi-Aventis提供的改良的胰島素類似物(甘精胰島素)。兩個(gè)氨基酸殘基在人胰島素一級(jí)結(jié)構(gòu)上的修飾由于就地沉淀而賦予Lantus⑧在24小時(shí)周期內(nèi)延長(zhǎng)釋放的某些特性。根據(jù)實(shí)施例16制備制劑4。血糖由酶法(己糖激酶)在自動(dòng)生化分析儀(Advia1650,BayerDiagnostics)上測(cè)定。藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果的分析基于基礎(chǔ)血糖的百分比和時(shí)間的函數(shù)。下表比較了藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)制劑Cmin士SD(%)APGC0-36h±SD(%.h)APGC制劑4/APGCLantus±SD(%)T50%APGC±SD(h)Eantus40±61250±342_13.3±3.1制劑445±41389±309118±3719.7±3.7其中-C^是已觀察到的基礎(chǔ)血糖的最小百分比，-APGC。-36h表示基礎(chǔ)血糖和基礎(chǔ)血糖百分比之間的面積作為劑量后0到36小時(shí)的函數(shù)，-T腦APGc表示獲得50。/。的APGCo—36h所需的時(shí)間。參照物L(fēng)antus⑧的給藥允許血糖從第一小時(shí)起迅速減少。然后甘精胰島素的低血糖行為保持18至36小時(shí)的時(shí)期(平均在30小時(shí)后血糖回到其基礎(chǔ)水平)。作為比較，制劑4的給藥也允許血糖從第一小時(shí)起迅速減少。然后，基礎(chǔ)血糖的百分比平均維持穩(wěn)態(tài)直到36小時(shí)。制劑4得到的Cmin明顯高于參照物L(fēng)antus⑧得到的值(p0.005，一對(duì)、單邊研究t-試驗(yàn))，這能夠可觀地減少糖尿病病人嚴(yán)重低血糖階段。帝iJ劑4的作用時(shí)間明顯大于長(zhǎng)效作用的參照物L(fēng)antus⑧的作用時(shí)間。這由制劑4明顯較高的T蒸APGc值證實(shí)(p<0.005，一對(duì)、單邊研究t-試驗(yàn))。與參照物L(fēng)antus⑧相比，沒(méi)有觀察到制劑4的APGCQ.36h的損失。實(shí)施例18:制備聚合物PO和干擾素ot-2b微顆粒的凍干粉制備含15mg/g的聚合物PO和0.19mg/g的d'IFN的溶液將166g16.5mg/g聚合物PO溶液加入500ml燒瓶中。加入2.3g0.3M蛋氨酸溶液。冷凍的IFNa-2b溶液(濃縮至2.4mg/g)在25"C解凍l小時(shí)，將13g這種冷凍的溶液加入含有聚合物溶液的燒瓶中。該混合物在室溫下放置14小時(shí)。該溶液通0.2)iim無(wú)菌過(guò)濾器。所有以下步驟在無(wú)菌條件下進(jìn)行。絮凝-洗滌-濃縮通過(guò)控制加入148.5g2MMgCl2使129.5g前述制劑絮凝(比例r為7.0)。該懸浮液分配在4個(gè)燒瓶中(每個(gè)燒瓶37g)并在3000rpm/min的速度下離心15分鐘。小心不接觸離心殘余物的情況下，從燒瓶中移出30.5g上清液。然后用17g無(wú)菌水洗滌每個(gè)燒瓶中的殘余物。該步驟中，摩爾滲透壓濃度為約300mOsm。凍干將前述懸浮液分配在凍干期間允許保持懸浮液無(wú)菌的Lyoguard⑧型(Gore⑧)的盤中然后該盤在無(wú)菌條件下用實(shí)驗(yàn)凍干器(Christ)凍干一個(gè)循環(huán)72小時(shí)。實(shí)施例19:由實(shí)施例18制得的凍干粉末重構(gòu)含有干擾素a-2b的微顆粒懸、、、、為確定精確地獲得制劑中干擾素含量為0.5mg/g要使用的粉末的量，進(jìn)行預(yù)重構(gòu)試驗(yàn)，干擾素a-2b由連接C18的硅膠柱的HPLC分析。懸浮液按照如下步驟臨時(shí)重構(gòu)(使用前)49將13.58g水加到1.22g凍干粉上，得到的懸浮液是均勻的(乳狀)針注射。重構(gòu)的懸浮液含有-46mg/ml聚合物PO-0.5mg/ml干擾素a-2b-0.34mmol/n^Mg2+(r=2.6)。該重組懸浮液的特性如下，錄2+(根據(jù)M試驗(yàn))pH摩爾滲透壓濃度mOsm2.66.1705實(shí)施例20:皮下注射基于兩性分子聚氨基酸的微顆粒形式的制劑之后，狗中hGH的藥代動(dòng)力學(xué)用以下制劑處理8只naiVe小獵犬(重量9土0.6kg):制劑狗的編號(hào)[IFN](mg/ml)[PO](mg/ml)pH/mOsm劑量(^g/kg)劑量體積(ml/kg)IFNIR40，506.45/354600.12制劑540,5466.1/705600.12IFNIR相當(dāng)于重組人干擾素溶液(PCGEn，批次IB05.0516，具有調(diào)節(jié)后的濃度、pH和摩爾滲透壓濃度([IFN]=0.5mg/ml，pH=6.45,354mOsm).制劑5根據(jù)實(shí)施例19由相同批次的干擾素(PCGen)制備。下表比較了藥代動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)制劑C腦x土SD(ng/mL)T>50pg/mL±SD(h)AUC0-all±SD(ng.h/ml)RBA(%)T50%auc±SD(h)IFNIR25.2±0.422.6±0.6162.5±27.21005.1±0.7制劑50.9±0.6219.8±29.895.5±47.5〉5996.7±31.7其中:懸浮液用磁力棒均質(zhì)化l小時(shí)。:懸浮液用注射器抽取并例如用30G50-C膽x是最大血清IFN濃度，-T>50pg/ml是血清IFN濃度大于50pg/ml的時(shí)間，-AUC表示血清IFN濃度作為時(shí)間函數(shù)的曲線下面積，-RBA表示相對(duì)于速釋制劑的生物利用度，-T，進(jìn)表示釋放總IFN的50%所需的時(shí)間。IFNIR具有速釋曲線，其最大血清濃度為25.2士0.4ng/ml，在5小時(shí)的中位時(shí)間(范圍3-5h)后達(dá)到。24小時(shí)以后循環(huán)IFN不可測(cè)量。制劑1提供了IFN藥代動(dòng)力學(xué)曲線的主要修正，其釋放非常緩慢，最大血清濃度為0.9士0.6ng/ml(比IR濃度低28倍)，在108小時(shí)的中位時(shí)間(范圍66-144h)后達(dá)到。藥代動(dòng)力學(xué)的總體趨勢(shì)是假穩(wěn)態(tài)形式的平坦曲線。循環(huán)IFN水平在168小時(shí)至240小時(shí)(7至10天)回到不可測(cè)量的濃度。該制劑具有較小的AUC:相對(duì)生物利用度損失41%(RBA=59%)。T50%aue比IFNIR的丁5。％匿大了約19倍。權(quán)利要求1、用于延長(zhǎng)AP釋放的液體藥物制劑，其含有基于聚合物(PO)微米顆粒的低粘度水性膠體懸浮液，i.該聚合物PO是水溶性、可生物降解、兩性分子的聚合物，帶有疏水性基團(tuán)(GH)和至少部分電離的可電離的親水性基團(tuán)(GI)，以及在pH7.0和等滲條件下在水中自發(fā)地形成納米顆粒的膠體懸浮液，ii.所述顆粒在pH7.0和等滲條件下能夠自發(fā)地和至少一種活性成分(AP)非共價(jià)結(jié)合；其特征在于，該P(yáng)O的微米顆粒以T試驗(yàn)測(cè)定的尺寸為0.5-100μm，優(yōu)選為1-70μm，特別優(yōu)選為2-40μm，其還包括化合價(jià)小于或等于4的多價(jià)離子，優(yōu)選二價(jià)離子、三價(jià)離子或其混合物，所述多價(jià)離子和該聚合物的可電離基團(tuán)GI的極性相反，所述多價(jià)離子加入的目的是使聚合物的納米顆粒聚集成一定數(shù)量的微米顆粒，從而使M試驗(yàn)測(cè)定的比例r值為0.3-10、優(yōu)選為0.6-5.0，更優(yōu)選為0.80-3.0，所述r的定義公式為其中-n是所述多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是可電離基團(tuán)GI的摩爾濃度。2、如權(quán)利要求l所述的制劑，其特征在于，所述微米顆粒以D試驗(yàn)測(cè)定的表觀聚合物密度cUpp為0.05-1.0，優(yōu)選為0.07-0.7，特別優(yōu)選為0.1-0.5。3、如權(quán)利要求l所述的制劑，其特征在于，相對(duì)于不含有多價(jià)離子的相同的可注射制劑的釋放時(shí)間l指定AP的釋放時(shí)間TV增加了，所述TV和仁均以L試驗(yàn)測(cè)定，這種增加使IV大于或等于l.lxtr，優(yōu)選使i;大于或等于1.5xt^4、如權(quán)利要求l所述的制劑，其特征在于，其包含至少一種與PO的微顆粒結(jié)合的AP。5、如權(quán)利要求l所述的制劑，其特征在于，所述制劑以2(TC時(shí)1000s"的剪切梯度測(cè)定的動(dòng)力學(xué)粘度小于或等于500mPa.s，優(yōu)選2-200mPa.s。6、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述的疏水基團(tuán)(GH)從側(cè)面連接到鏈上。7、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述聚合物PO選自下列成分構(gòu)成的組聚氨基酸、(多)肽、明膠、蛋白質(zhì)、多糖-優(yōu)選自以下亞組卜多糖和/或殼聚糖和/或粘多糖-及其混合物。8、如權(quán)利要求7所述的制劑，其特征在于，所述疏水改性的聚合物PO選自(共)聚氨基酸。9、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述聚合物(PO)是聚氨基酸，其主鏈由天冬氨酸殘基或谷氨酸殘基構(gòu)成，至少部分這些殘基通過(guò)在其鏈中或鏈端接枝至少一個(gè)疏水性基團(tuán)(GH)而被改性。10、如權(quán)利要求6至9中任一項(xiàng)所述的制劑，其特征在于，所述疏水改性的聚合物PO由以下通式(I)定義其中■W是H，C2到C10的直鏈垸基或C3到C10的支鏈烷基、芐基、氨基酸末端殘基或-R、[GH];■W是H，C2到C10的直鏈酰基或C3到C10的支鏈?；鶊F(tuán)，焦谷氨酸酯或-R4-[GH];■W是H或陽(yáng)離子體，優(yōu)選自-金屬陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括鈉、鉀、鈣和鎂的亞組，-有機(jī)陽(yáng)離子，優(yōu)選自下列亞組基于胺的陽(yáng)離子，基于低聚胺的陽(yáng)離子，基于聚胺的陽(yáng)離子(特別優(yōu)選聚乙烯亞胺)，和基于一種或多種氨基酸的陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括基于賴氨酸或精氨酸的陽(yáng)離子類；-以及陽(yáng)離子聚氨基酸，其優(yōu)選自包括聚賴氨酸和低聚賴氨酸的亞組；[GH]/■R"是直接鍵或基于1到4個(gè)氨基酸殘基的"間隔子"；■A獨(dú)立地為基團(tuán)-CH2-(天冬氨酸殘基)或-CH2-CH2-(谷氨酸殘基)；■n/(n+m)定義為摩爾接枝率，其值對(duì)于在pH為7，25°C時(shí)溶于水中的PO足夠低，以形成PO的亞微顆粒的膠體懸浮液，n/(n+m)優(yōu)選為l至25moP/。，特別優(yōu)選為l至15mol。/。；■n+m為10至1000，優(yōu)選為50至300;以及■GH是疏水基。11、如權(quán)利要求10所述的制劑，其特征在于，所述疏水基團(tuán)GH衍生自醇前體，所述醇前體選自以下組辛醇、十二烷醇、十四醇、鯨蠟醇、十八碳醇、油醇、生育酚和膽固醇，并且W是直接鍵。12、如權(quán)利要求7至9中任一所述的制劑，其特征在于，所述PO具有以下通式(II)、(in)和(iv)之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula>其中■GH是疏水基；■R^是C2到C6的直鏈烷基；■W是H或陽(yáng)離子單元，優(yōu)選自-金屬陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括鈉、鉀、鈣和鎂的亞組，-有機(jī)陽(yáng)離子，優(yōu)選自亞組基于胺的陽(yáng)離子，55基于低聚胺的陽(yáng)離子，基于聚胺的陽(yáng)離子(優(yōu)選聚乙烯亞胺)，基于氨基酸的陽(yáng)離子，優(yōu)選自包括基于賴氨酸或精氨酸的陽(yáng)離子類；-以及陽(yáng)離子聚氨基酸，優(yōu)選自包括聚賴氨酸和低聚賴氨酸的亞組；■R^是C2到C6的垸基、二烷氧基或二胺基；■R"是直接鍵或基于l到4個(gè)氨基酸殘基的"間隔子"；■A獨(dú)立地為基團(tuán)-CH2-(天冬氨酸殘基)或-CH2-CH2-(谷氨酸殘基)；和(n'+m')和n〃為聚合度，其為10到1000，優(yōu)選50到300。13、如權(quán)利要求IO所述的制劑，其特征在于，所述PO的n基團(tuán)GH彼此獨(dú)立地為下式的單價(jià)基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>其中-RS是甲基(丙氨酸)、異丙基(纈氨酸)、異丁基(亮氨酸)、仲丁基(異亮氨酸基)或芐基(苯丙氨酸)基團(tuán)；-Re是含6到30個(gè)碳原子的疏水基團(tuán)；以及l(fā)為0到6。14、如權(quán)利要求13所述的制劑，其特征在于，所述PO的全部或部分疏水基116獨(dú)立地選自以下基團(tuán)■含6到30個(gè)碳原子并能含至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選O、N或S)或至少一個(gè)不飽和單元的直鏈或支鏈烷氧基，■含6到30個(gè)碳原子的烷氧基，其具有一個(gè)或多個(gè)融合碳環(huán)，可選地，其包含至少一個(gè)不飽和單元和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選0、N或S)，以及■具有7到30個(gè)碳原子并能含至少一個(gè)不飽和單元或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選0、N或S)的垸氧芳基或芳氧垸基。15、如權(quán)利要求13或14所述的制劑，其特征在于，所述PO的接枝的疏水基團(tuán)116衍生自醇前體，選自以下組辛醇、十二垸醇、十四醇、鯨蠟醇、十八碳醇、油醇、生育酚和膽固醇。16、如權(quán)利要求9所述的制劑，其特征在于，所述聚氨基酸的主鏈?zhǔn)?0丄-谷氨酸根或oc-L-谷氨酸均聚物。17、如權(quán)利要求9所述的制劑，其特征在于，所述聚氨基酸的主鏈?zhǔn)?1丄-天冬氨酸根或a-L-天冬氨酸均聚物。18、如權(quán)利要求9所述的制劑，其特征在于，所述聚氨基酸的主鏈?zhǔn)?1丄-天冬氨酸根/a-L-谷氨酸根或a-L-天冬氨酸/a-L-谷氨酸共聚物。19、如權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于，所述PO的分子量為2000至100,000g/mol，優(yōu)選為5000至40,000g/mol。20、如權(quán)利要求l所述的制劑，其特征在于，PO具有陰離子基團(tuán)GI，且所述多價(jià)離子是多價(jià)陽(yáng)離子，優(yōu)選為二價(jià)陽(yáng)離子，特別優(yōu)選自包括Mg"、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Ci^+及其混合物的組，或三價(jià)陽(yáng)離子，特別優(yōu)選自包括Al3+、F^+及其混合物的組。21、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述制劑含有至少一種穩(wěn)定劑，選自下列成分4至少一種聚合物PO的納米顆粒，PO是水溶性、可生物降解、兩性分子的共聚物，其帶有疏水性基團(tuán)(GH)和至少部分電離的可電離的親水性基團(tuán)(GI)，能夠在pH=7.0和等滲條件下在水中自發(fā)地形成納米顆粒的膠體懸浮液；—聚二醇類，優(yōu)選聚乙二醇類；—共聚二醇類，優(yōu)選乙二醇/丙二醇共聚物(泊洛沙姆、Pluronic或Lutrol類)；4纖維素聚合物及其衍生物，優(yōu)選羧基烷基纖維素(例如羧甲基纖維素)或垸基纖維素(如甲基纖維素)；—山梨聚糖和一種或多種脂肪酸的酯類，優(yōu)選吐溫或聚山梨醇酯類的聚氧烯烴(例如聚氧乙烯)二醇和至少一種酸(例如油酸)的酯類；4基于磷脂和聚烯烴二醇(優(yōu)選聚乙二醇)的表面活性劑；—?dú)浠蚍菤浠奶穷悾绾Ｔ逄?、山梨醇、甘露醇或蔗糖；~>多元醇，如丙二醇或甘油；~>明膠類，優(yōu)選水解明膠；—含氮(共)聚物，優(yōu)選自含有聚丙烯酰胺、聚-N-乙烯酰胺、聚乙烯吡咯垸酮(PVP)和聚-N-乙烯內(nèi)酰胺的組；—聚乙烯醇類(PVA);—及上述物質(zhì)的混合物。22、如權(quán)利要求l所述的制劑，其特征在于，所述AP選自以下組蛋白質(zhì)、醣蛋白、與一個(gè)或多個(gè)聚二醇鏈結(jié)合的蛋白質(zhì)[優(yōu)選聚乙二醇(PEG)鏈"聚乙二醇化的蛋白質(zhì)"]、肽、聚糖、脂糖、寡聚核苷酸、多核苷酸及其混合物，并且特別優(yōu)選自以下亞組血紅蛋白、催產(chǎn)素、后葉加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、表皮生長(zhǎng)因子、血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)、造血刺激因子及其混合物、VIII因子和IX因子、血色素、細(xì)胞色素、泌乳刺激素、白蛋白、黃體激素釋放激素(LHRH)、LHRH拮抗劑、LHRH競(jìng)爭(zhēng)劑、人、豬或牛生長(zhǎng)因子(GH)、生長(zhǎng)激素釋放因子、胰島素、生長(zhǎng)激素抑制素、胰高血糖素、白介素或其混合物(IL-2、IL-ll、IL-12)、a-、P-或Y-干擾素、胃泌素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素、分泌素、降鈣素、腦啡肽、內(nèi)嗎啡肽、血管緊張素、促甲狀腺素釋放激素(TRH)、腫瘤壞死因子(TNF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、肝素酶、骨成形素蛋白(BMP)、人心房鈉尿肽(hANP)、胰高血糖素樣肽(GLP-1)、VEG-F、重組乙型肝炎表面抗原(rHBsAg)、腎素、細(xì)胞因子、緩激肽、桿菌肽、多粘菌素、粘菌素、短桿菌酪肽、短桿菌肽、環(huán)孢菌素類，以及酶、細(xì)胞因子、抗體、抗原和疫苗的合成類似物和藥學(xué)活性改性物和片段。23、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述AP是"小的"疏水的、親水的或兩性分子的有機(jī)分子。24、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述活性成分選自以下活性物質(zhì)族治療酗酒的藥物、治療阿爾茨海默病毒藥物、麻醉藥、治療肢端肥大癥的藥物、鎮(zhèn)痛藥物、平喘藥、治療過(guò)敏的藥物、抗腫瘤藥、抗炎藥、抗凝血?jiǎng)┖涂寡ㄐ纬蓜⒖贵@厥藥、抗癲癇藥、抗糖尿病藥、止吐藥、抗青光眼藥、抗組胺藥、抗感染藥、抗生素、抗真菌藥、抗病毒藥、抗帕金森病藥、抗膽堿藥、止咳藥、碳酸酐酶抑制劑、心血管藥物、降血脂藥、抗心律失常藥、血管擴(kuò)張藥、抗心絞痛藥、抗高血壓藥、血管保護(hù)劑、膽堿酯酶抑制劑、治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)的藥物、中樞神經(jīng)系統(tǒng)刺激劑、避孕藥、生殖促進(jìn)藥、分娩促進(jìn)藥和抑制劑、治療粘液粘稠病的藥物、多巴胺受體激動(dòng)劑、治療子宮內(nèi)膜異位的藥物、治療勃起障礙的藥物、治療生育的藥物、治療胃腸道疾病的藥物、免疫調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑、治療記憶疾病的藥物、抗偏頭痛藥、肌松藥、核苷類似物、治療骨質(zhì)疏松的藥物、擬副交感神經(jīng)藥、前列腺素、心理治療藥、鎮(zhèn)靜藥、催眠和鎮(zhèn)定藥、安定藥、抗焦慮藥、精神振奮藥、抗抑郁藥、治療皮膚病的藥物、甾體和激素、安非他明、減肥藥、非鎮(zhèn)痛型止痛藥、抗癲癇藥、巴比妥類、苯并二氮雜卓類、催眠藥、放松藥、精神藥品以及這些產(chǎn)品的聯(lián)合使用。25、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，不與微米顆粒結(jié)合的AP[非結(jié)合AP]的重量百分率為-[非結(jié)合AP]Sl,-優(yōu)選[非結(jié)合AP]^0.5。26、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述AP是重組人生長(zhǎng)激素hGH。27、如權(quán)利要求1至25中任一所述的制劑，其特征在于，所述AP是胰島素。28、如權(quán)利要求1至25中任一所述的制劑，其特征在于，所述AP是干擾素a-2b。29、如前述任一權(quán)利要求所述的制劑，其特征在于，所述制劑用于制備藥物，尤其用于胃腸外、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)、腹腔或腦內(nèi)途徑給藥，或腫瘤內(nèi)給藥，或口服、經(jīng)鼻、經(jīng)肺、經(jīng)陰道或經(jīng)眼部途徑給藥。30、制備前述任一權(quán)利要求所述制劑的方法，其特征在于該方法主要在于a.取或制備至少一種PO納米顆粒的膠體懸浮液，b.優(yōu)選在水溶液中，可選地將該P(yáng)O納米顆粒的膠體懸浮液與至少一種AP混合，c.可選地，過(guò)濾所得的懸浮液，d.加入和聚合物PO的基團(tuán)GI極性相反的多價(jià)離子(優(yōu)選以鹽的形式)，所述多價(jià)離子加入的量使得按照下式定義的比值r為0.3-10，優(yōu)選0.6-5.0，特別優(yōu)選0.8-3.0，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>其中[(7/]，共屮-n是所述多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是可電離基團(tuán)GI的摩爾濃度，以及e.必要時(shí)，調(diào)節(jié)pH或摩爾滲透壓濃度。31、如權(quán)利要求30所述的方法，其特征在于，所述AP是水性懸浮液或溶液的形式，用于和PO的納米顆?；蛭㈩w粒的膠體懸浮液相混合。32、制備衍生自權(quán)利要求1至29中任一項(xiàng)所述的制劑或衍生自權(quán)利要求30所述的方法得到的制劑的產(chǎn)品的方法，其特征在于該方法主要在于干燥所述微米顆粒懸浮液以得到微米顆粒的能夠貯存或給藥的固體形式，優(yōu)選為粉末。33、制備權(quán)利要求1至29中任一項(xiàng)所述制劑的方法，其特征在于該方法主要在于取至少一種由權(quán)利要求32的方法獲得的衍生產(chǎn)品(裝載或不裝載AP)，將這種衍生產(chǎn)品和水或重構(gòu)的水性溶液S相混合。34、由權(quán)利要求1至29中任一項(xiàng)所述的制劑得到的衍生產(chǎn)品，其特征在于，該產(chǎn)品是非液體形式，且該產(chǎn)品含有聚合物(PO)的微米顆粒，i.該聚合物PO是水溶性、生物降解性、兩性分子的(共)聚合物，帶有疏水性基團(tuán)(GH)和可電離的親水性基團(tuán)(GI)，并且在pH7.0和等滲條件下在水中自發(fā)地形成納米顆粒的膠體懸浮液，ii.所述顆粒在pH7.0和等滲條件下能夠自發(fā)地和至少一種活性成分(AP)非共價(jià)結(jié)合；這些PO的微米顆粒以T試驗(yàn)測(cè)定的尺寸為0.5-100iim，優(yōu)選為1-70特別優(yōu)選為2-40|im;所述產(chǎn)品包括多價(jià)離子的衍生物，優(yōu)選二價(jià)離子的衍生物，所述離子具有和聚合物的基團(tuán)GI相反的極性，比例r由公式^="><^定義，其中-n是所述多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是可電離基團(tuán)的摩爾濃度，其值為0.3-10、優(yōu)選0.6-5.0，特別優(yōu)選0.80-3.0。35、如權(quán)利要求34所述的衍生產(chǎn)品，其特征在于，該產(chǎn)品由粉末或凝膠組成。36、制備藥物的方法，所述藥物尤其用于胃腸外、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)、腹腔或腦內(nèi)途徑給藥，或腫瘤內(nèi)給藥，或口服、經(jīng)鼻、經(jīng)肺、經(jīng)陰道或經(jīng)眼部途徑給藥，其特征在于該方法主要在于使用如權(quán)利要求1至29中任一所述的制劑、和/或由權(quán)利要求30至32中任一所述的方法得到的制劑、和/或由所述制劑得到的任何衍生產(chǎn)品、和/或所述制劑的任何前體中的至少一種。全文摘要本發(fā)明涉及基于水性膠體懸浮液的新的藥物制劑，其用于延長(zhǎng)釋放一種或多種活性成分-AP-，特別是蛋白質(zhì)和肽活性成分，本發(fā)明也涉及這些制劑的應(yīng)用，尤其是治療上的應(yīng)用。該制劑含有基于微米顆粒的低粘度水性膠體懸浮液，所述微米顆粒為水溶性、生物降解性、兩性分子的聚合物PO，其帶有疏水性基團(tuán)(GH)-α-生育酚-和至少部分電離的可電離的親水性基團(tuán)(GI)-Glu-，所述顆粒在pH7.0和等滲條件下能夠自發(fā)地和AP非共價(jià)結(jié)合，其尺寸為0.5-100μm。該懸浮液含有多價(jià)離子(Mg²⁺)，所述多價(jià)離子和PO的基團(tuán)GI的極性相反，比例r值介于0.3和1.0之間，其由公式r＝n×[IM]/[GI]定義，其中-n是所述多價(jià)離子的化合價(jià)，-[IM]是該多價(jià)離子的摩爾濃度，-[GI]是該可電離基團(tuán)的摩爾濃度。文檔編號(hào)A61K9/00GK101466353SQ200780021416公開(kāi)日2009年6月24日申請(qǐng)日期2007年6月11日優(yōu)先權(quán)日2006年6月9日發(fā)明者塞西爾·博內(nèi)-戈內(nèi),大衛(wèi)·紹尼奧特,奧利維耶·蘇拉,阿蘭·孔斯坦西斯申請(qǐng)人:弗拉梅技術(shù)公司