專利名稱：：有助于治療癌癥的方法、組合物和制品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及通過施用內(nèi)皮素激動劑和化學(xué)治療劑有助于治療癌癥(包括實(shí)體瘤)的方法、組合物和制品。
背景技術(shù)：
：盡管對腫瘤細(xì)胞分子生物學(xué)的理解逐漸增加并可獲得更大量的潛在治療劑，但是癌癥(包括實(shí)體瘤)的成功治療仍然是未解決的醫(yī)學(xué)目標(biāo)。例如，乳腺癌發(fā)病率在過去IO年間大量增加，并且是美國40-49歲婦女死亡的單一主導(dǎo)原因。癌癥治療中的一個(gè)問題是，大范圍的潛在化學(xué)治療劑的有效劑量由于其對正常組織非選擇性的、高毒性的作用而受到限制。結(jié)果，許多患者經(jīng)受化學(xué)療法的副作用而不能獲得治療的益處。例如化學(xué)治療劑紫杉醇(paditaxd)抑制腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡。然而，紫杉醇的臨床效用被其劑量限制性毒性(doselimitingtoxicity)妨礙，所述毒性包括超敏感性、中性粒細(xì)胞減少癥和外周神經(jīng)病。因此，存在開發(fā)更特異和更低毒性的癌癥療法的需要?；瘜W(xué)治療劑到腫瘤的定向遞送可具有增強(qiáng)化學(xué)治療劑益處同時(shí)最小化其全身性毒效應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)。這類定向遞送也可用于降低需要的化學(xué)治療劑劑量，從而有效地降低這些藥劑的不可接受的不良作用。達(dá)到化學(xué)治療劑定向遞送的一種可能途徑是利用腫瘤脈管系統(tǒng)的獨(dú)特特征。尺寸比數(shù)毫米更大的腫瘤需要持久的營養(yǎng)供應(yīng)，并因此發(fā)育了其自身的血管床和血流。Folkman，CancerRes,46:467(1986)。沒有來自這些發(fā)育中的血管的持久營養(yǎng)時(shí)，腫瘤會變得含氧量低并隨后死亡。從預(yù)成的血管中募集新脈管系統(tǒng)被稱作"血管發(fā)生"。在血管發(fā)生期間，腫瘤血管與正常的脈管系統(tǒng)顯著不同地發(fā)育，并具有不同的特性。單層上皮細(xì)胞是首先快速形成的腫瘤血管。這些新形成的腫瘤血管不具有平滑肌層或神經(jīng)分布。腫瘤還摻有具有所有自動調(diào)節(jié)功能的成熟的血管。Mattsson"a/.，TumorBloodCirculation,CRCPress,BocaRaton,pg.129(1979);Reinhold，TumorBloodCirculation,CRCPress,BocaRaton，pg.115(1979);Warren,TumorBloodCirculation,CRCPress,BocaRaton，pg.26(1979)。血管緊張性(血管膨脹或收縮的程度)被許多內(nèi)源性因素如H+、K+、Ca2+、p02、pC02和一氧化氮(NO)以及其他調(diào)節(jié)物質(zhì)如內(nèi)皮素(ET-l)控帝lj。Secombe&g/"Landes，Austin,pg.40(1994);Luscher"a/"Theendothelium:modulatorofcardiovascularfunction,CRCPress,BocaRaton,pg.61(1990)。ET-1顯著有助于調(diào)節(jié)血管緊張性(Yanagisawa""/.,Nature,332:411(1988))，并且研究人員已經(jīng)證實(shí)實(shí)體瘤(包括乳腺癌)中ET1和ETs受體表達(dá)的提高。Alanen"a/.,Histopathology,36:161(2000);Nelson"a/.，CancerRes,56:663(1996);Karda/.,BiochemBiophysResCommun216:514(1995);Pagotto"a/.,JClinInvest,96:2017(1995);Yamashita"a/.，CancerRes，52:4046(1992);Yamashita"a/"ResCommunChemPatholPharmacol,74:363(1991)。另外，ETB受體的刺激通過腫瘤血管舒張引起對腫瘤供血的增加。本發(fā)明通過使用ETB受體激動劑利用該事實(shí)選擇性地增加流向腫瘤的血流量，以增強(qiáng)化學(xué)治療劑的定向遞送。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及施用內(nèi)皮素激動劑和化學(xué)治療劑以幫助治療癌癥，包括實(shí)體瘤。具體地，腫瘤具有獨(dú)特的脈管系統(tǒng)，其包含增加量的ETb受體，所述受體結(jié)合時(shí)導(dǎo)致血管舒張。因?yàn)镋TB受體是血管舒張劑，所以與化學(xué)治療劑組合的ETB受體激動劑適用于治療實(shí)體瘤，如在乳腺癌中發(fā)現(xiàn)的實(shí)體瘤。ETB受體激動劑可更有效地將化學(xué)治療劑遞送至腫瘤，導(dǎo)致增強(qiáng)的治療。特別地，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案包含有助于治療癌癥的方法，該方法包括施用ETB激動劑和化學(xué)治療劑。在根據(jù)本發(fā)明的多個(gè)實(shí)施方案中，ETB激動劑和化學(xué)治療劑可基本上同時(shí)施用或先后施用(化學(xué)治療劑在ETB激動劑之前被施用，或ETB激動劑在化學(xué)治療劑之前被施用)。在根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，當(dāng)ETB激動劑和化學(xué)治療劑基本上同時(shí)被施用時(shí)，它們可作為單一組合物被施用。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案包括包含化學(xué)治療劑、ETB激動劑和任選的賦形劑的組合物。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案包括含有組合物和指導(dǎo)信息的制品，所述組合物包含ETB激動劑，所述指導(dǎo)信息指示將組合物與化學(xué)治療劑一起施用，以治療實(shí)體瘤。根據(jù)本發(fā)明的制品可進(jìn)一步包含一種或多種化學(xué)治療劑。當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的制品包含一種或多種化學(xué)治療劑時(shí)，ETB激動劑和化學(xué)治療劑可以是同一組合物的部分，也可以作為獨(dú)立的組合物提供，或兩種情況兼有?？梢杂酶鶕?jù)本發(fā)明的方法、組合物和制品治療的癌癥可包括實(shí)體瘤，包括但不限于卵巢腫瘤、結(jié)腸腫瘤、卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)、乳腺腫瘤、黑色素瘤、前列腺腫瘤、腦脊膜瘤、肝腫瘤、乳腺分葉狀瘤(breastphyllodetumor)及其組合。依照本發(fā)明的方法、組合物或制品使用的內(nèi)皮素B激動劑能夠選擇性地提高對實(shí)體瘤的供血，從而提高化學(xué)治療劑到實(shí)體瘤的遞送。能夠依照本發(fā)明使用的內(nèi)皮素B激動劑可包括，但不限于以下一種或多種ET-l,ET隱2，ET-3,BQ3020,IRL1620(N-suc-[Glu9,Ala11,15]ET-l(8-21》、角蝰毒素6(sarafotoxin)56c、[Alal,3,11,15]ET-1及其組合?；瘜W(xué)治療劑可包括，但不限于下述一種或多種阿霉素(adriamycin)、喜樹堿(camptothecin)、卡鉬(carboplatin)、順鉬(cisplatin)、柔紅霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、a千擾素、/3干擾素、7干擾素、白介素2、伊立替康(irinotecan)、多西紫杉醇(docetaxel)、紫杉醇、拓?fù)涮婵?topotecan)、5-氟尿嘧啶及其組合。根據(jù)本發(fā)明的具體方法、組合物或制品包括作為ETV激動劑的IRL1620，和選自以下的化學(xué)治療劑紫杉醇、多柔比星、5-氟尿嘧啶及其組合。圖1顯示IRL1620在腫瘤灌注(perfusion)中對紫杉醇誘導(dǎo)的改變的影響；圖2A-2E顯示ET-1對無癌大鼠和患乳腺腫瘤大鼠全身性血流動力學(xué)的影響；圖3A-3B顯示ET-1在無癌大鼠和患乳腺腫瘤大鼠的乳腺組織中對血流量和局部血管阻力的影響；圖4A-4C顯示ET-1在無癌大鼠和患乳腺腫瘤大鼠的乳腺組織中對灌注、移動血細(xì)胞濃度(CMBC)和血細(xì)胞流速的影響；圖5A-5C顯示BQ788在無癌和患乳腺腫瘤大鼠的乳腺組織中，對ET-l誘導(dǎo)的血液灌注、CMBC和血細(xì)胞流速改變的影響；圖6顯示通過HPLC測定的載體或IRL1620在正常大鼠和患腫瘤大鼠中對紫杉醇的血漿藥代動力學(xué)的影響；圖7和8顯示通過液體閃爍計(jì)數(shù)測定的載體或IRL1620對[3司-紫杉醇的血漿藥代動力學(xué)的影響；圖9A和9B顯示通過激光多普勒血流儀測量的IRL1620對乳腺腫瘤灌注的影響；圖10顯示IRU620施用對患有乳腺腫瘤的大鼠的腫瘤和主要器官中[3司-紫杉醇濃度的時(shí)間依賴性影響；圖ll顯示與治療開始時(shí)相比，患乳腺腫瘤的大鼠體重差異百分比；圖12顯示IRL1620施用對患乳腺腫瘤大鼠腫瘤體積的影響；圖13顯示患乳腺腫瘤的大鼠中IRL1620施用對腫瘤發(fā)展、停滯和消退的影響；圖14A和14B顯示通過激光多普勒血流儀測量的不同劑量的IRL1620對前列腺腫瘤灌注的影響(14A)，和施用IRL1620后前列腺腫瘤灌注與基線相比的百分比改變(14B);圖15顯示IRL1620對患前列腺腫瘤大鼠的腫瘤和其他主要器官中["C]-多柔比星(DOX)濃度的影響；圖16顯示施用IRL1620和DOX后患有前列腺腫瘤的大鼠的體重(16A);腫瘤體積(16B);和腫瘤重量(16C);圖17顯示施用IRL1620和5-氟尿嘧啶(5-FU)后患有前列腺腫瘤的大鼠的體重(17A);腫瘤體積(17B);和腫瘤重量(17C);圖18A和18B顯示通過激光多普勒血流儀(18A)測量的IRL1620對黑色素瘤灌注的影響，和施用IRL1620后黑色素瘤灌注與基線相比的百分比改變(18B);圖19顯示IRL1620對患有黑色素瘤的大鼠的腫瘤和其他主要器官中[3司-紫杉醇濃度的影響；圖20顯示多種濃度的IRL1620(使用或不使用輻射)對腫瘤體積隨時(shí)間的影響。為了比較的目的，也顯示了鹽水和輻射和無處理對腫瘤體積的影響。發(fā)明詳述I.定義指導(dǎo)信息本文使用的術(shù)語"指導(dǎo)信息"將表示伴隨著藥物產(chǎn)品的材料，其提供了如何施用該產(chǎn)品的描述，以及允許醫(yī)生、藥劑師和患者關(guān)于產(chǎn)品的用途做出有見識的決定所需的安全性和效力數(shù)據(jù)。該指導(dǎo)信息一般被稱作藥物產(chǎn)品的"標(biāo)簽"。指導(dǎo)信息可以以許多形式出現(xiàn)，包括但不限于含有關(guān)于藥物產(chǎn)品的信息的紙插入物，C.D.Rom或網(wǎng)站地址。前藥本文使用的術(shù)語"前藥"將表示下述化合物，其在體內(nèi)例如通過水解快速轉(zhuǎn)化為本發(fā)明中有用的化合物。前藥的徹底討論在HigUChi"a/.，ProdrugsasNovelDeliverySystems,Vol.14，oftheA.C.S.D.SymposiumSeries禾口Roche(ed.)，BioreversibleCarriersinDrugDesign,AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,1987中提供。治療，或有助于治療本文中使用術(shù)語"治療"和"有助于治療"將表示預(yù)防癌癥、延遲癌癥的發(fā)展或生長、縮小或消除癌癥，所述癌癥包括實(shí)體瘤。因此，這些術(shù)語適當(dāng)時(shí)包括醫(yī)學(xué)治療和/或預(yù)防性治療二者?；就瑫r(shí)本文使用術(shù)語"基本同時(shí)"將表示同時(shí)施用兩種藥物制劑(即ETB激動劑和化學(xué)治療劑)。根據(jù)該定義，"同時(shí)"將被理解為包括精確地同時(shí)以及在約IO分鐘范圍內(nèi)。大部分化學(xué)治療劑具有細(xì)胞毒性，該細(xì)胞毒性旨在破壞癌細(xì)胞，但是在該過程中造成對身體正常生理學(xué)系統(tǒng)的可觀損傷。因此，將化學(xué)治療劑選擇性地遞送至實(shí)體瘤從而幫助避免癌癥治療的這些負(fù)作用會是非常有利的。腫瘤血管的血管結(jié)構(gòu)與正常血管的結(jié)構(gòu)不同。Carmeliet&Jain，Nature,407:249(2000)。因此，腫瘤的血管反應(yīng)性與正常組織不同。例如，一氧化氮供體、煙酰胺和緩激肽激動劑的施用調(diào)控流向腫瘤的血流量。Jordan"flZ.,IntJRadiatOncolBiolPhys,48:565(2000);Fukumura"fl/"AmJPathol，150:713(1997);Hirstaa/.,BrJRadiol,67:795(1994)。內(nèi)皮素(Endothelin)是一種血管活性物質(zhì)，其調(diào)控血流量并且以比正常乳腺組織更高的濃度存在于乳腺癌組織中(具體地，與正常乳腺組織中約0.12pg/mg相比，內(nèi)皮素可以以約12pg/mg的量存在于乳腺癌組織中)。Kojima"a/.,SurgOncol，4(6):309(1995);Kurbel"a/.,MedHypotheses,52(4):329(1999);Patel"a/"MolCellEndocrinol,126(2):143(1997);Yamashita"a/"CancerRes,52(14):4046(1992);YamashitaWa/"ResCommunChemPatholPharmacol,74(3):363(1991)。內(nèi)皮素是具有21個(gè)氨基酸的環(huán)肽的家族，其在哺乳動物中包含三種異型體(isoform):ET-l、ET-2禾HET-3。Inoue"a/.,ProcNatlAcadSciUSA86:2863(1989);Yanagisawaa/.,Nature,332:411(1988)。內(nèi)皮素通過與兩種不同的細(xì)胞表面受體ETa和ETB結(jié)合發(fā)揮其作用。ETB受體以相等的親和力結(jié)合三種肽異型體。相反，ETA受體以比其他異型體更高的親和力結(jié)合ET-1。兩種受體均屬于G蛋白偶聯(lián)受體系統(tǒng)，并介導(dǎo)來自多種刺激的生物應(yīng)答，所述刺激包括生長因子、血管活性多肽、神經(jīng)遞質(zhì)和激素。Masaki,JCardiovascPharmacol,35:S3(2000);Gulati,Preface.AdvDrugDelivRev,40:129(2000);Gulati"a/"AmJPhysiol,273:H827(1997);Levin,NEnglJMed，333:356(1995)。本發(fā)明的焦點(diǎn)ETb受體既存在于內(nèi)皮細(xì)胞(ECs)中又存在于血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)中，并且與正常乳腺組織相比在乳腺癌組織(包括人中的侵入性乳腺癌組織以及導(dǎo)管和小葉乳腺癌組織)中水平較高。Wulfmg"a/.，OncolRep,11:791(2004);Wulfmgaa/.，ClinCancerRes，9:4125(2003);Alanene"/.，Histopathology,36(2):161(2000)。內(nèi)皮素作用于ETb受體，產(chǎn)生血管膨脹并增加流向乳腺腫瘤組織的血流量。作用于EC的ETb受體通過釋放諸如前列環(huán)素和一氧化氮的因子導(dǎo)致血管舒張。deNuccia/.，ProcNatlAcadSciUSA,85:9797(1988)。因?yàn)镋T-1通過刺激ETB受體導(dǎo)致流向腫瘤的血流量增加，所以ETB受體激動劑可被用于選擇性地提高流向腫瘤的供血，從而提高定向遞送和導(dǎo)致的化學(xué)治療劑效力。ETB受體已在例如但不限于卵巢癌、成肌纖維細(xì)胞、卡波西肉瘤腫瘤和瘤內(nèi)導(dǎo)管、乳腺癌和黑色素瘤中被發(fā)現(xiàn)。Bagnato"/.,AmJPathol，158:841(2001);Alanen"a/.，Histopathology，36(2):161(2000);Bagnato"a/.,CancerRes，59:720(1999);Kikuchi"a/"BiochemBiophysResComm,219:734(1996)。因此，與化學(xué)治療劑組合的ETB受體激動劑的施用可被用于幫助治療實(shí)體瘤，包括但不限于卵巢癌、結(jié)腸癌、卡波西肉瘤、卵巢癌和黑色素瘤。根據(jù)本發(fā)明有用的ETB激動劑包括，但不限于ET-l、ET-2、ET-3、BQ3020、IRL1620(N-suc-[Glu9,Ala1U5]ET-l(8-21》、角蝰毒素56c、[Ala1'3，"'15]ET-1及其組合。[Ala1'3，u'15]ET-1是ET-1的一種線性類似物，其中二硫鍵通過Ala對Cys殘基的取代被去除。Saeki""/.,BiochemBiophysResCommun,179:286(1991)。BQ3020和IRL1620是ET-1的截短的線性合成類似物，并且是最廣泛使用的選擇性合成激動劑。IRL1620是線性ET-10類似物，其結(jié)構(gòu)基于ET-1的羧基端，并対ETb受體具有120,000倍的選擇性。Okada&Nishikibe,CardiovascDrugRev,20:53(2002);Douglas""/.，BrJPharmacol,114:1529(1995)。IRL1620是一種高度選擇性和有效的EIV激動劑，有證據(jù)報(bào)道其對ETB1受體亞型的選擇性優(yōu)先于ETB2亞型。Brooks"a/.,JCardiovascPharmacol,26Suppl3:S322(1995)。適用于本發(fā)明的化學(xué)治療劑包括，例如但不限于垸化劑、抗代謝物、激素及其拮抗劑、放射性同位素、抗體，以及天然產(chǎn)物及其組合。例如，ETB激動劑可與抗體(如多柔比星和其他蒽環(huán)類似物)、氮芥(例如但不限于環(huán)磷酰胺)、嘧啶類似物(例如但不限于5-氟尿嘧啶)、順鉑、羥基脲，及其天然和合成的衍生物等等一起被施用。作為另一個(gè)例子，在混合性腫瘤(如乳腺腺癌，其中該腫瘤包括絨促性素依賴性和非絨促性素依賴性細(xì)胞，)的情況下，ETB激動劑能夠與亮丙瑞林(leuprolide)或戈舍瑞林(goserelin，LH-RH的合成肽類似物)一起(但不僅限于此)被施用。可根據(jù)本發(fā)明使用的化學(xué)治療劑的其他非限制性例子包括阿霉素、喜樹堿、卡鉬、順鉑、柔紅霉素、多柔比星、干擾素(仏/5和/或7)、白介素2、伊立替康、多西紫杉醇、紫杉醇、拓?fù)涮婵导捌渲委熡行У念愃莆锖脱苌?。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，內(nèi)皮素激動劑與化學(xué)治療劑一起被用于幫助治療實(shí)體瘤。在該方法中，內(nèi)皮素激動劑(特別是ETV激動劑)增加流向腫瘤的血流量，所述腫瘤中富含ETb受體。因此，ETB激動劑為化學(xué)治療劑提供了更具選擇性的靶標(biāo)，并改進(jìn)該藥劑的化學(xué)治療作用。在本文中推論但不依賴于內(nèi)皮素激動劑刺激ETB受體使腫瘤血管膨脹，從而增加血流量和由此導(dǎo)致的化學(xué)治療劑到腫瘤的遞送。由內(nèi)皮素激動劑引起的增加的腫瘤血液灌注也提高了組織的氧合作用。改進(jìn)的氧合作用可增強(qiáng)化學(xué)治療劑的治療功能。內(nèi)皮素還可具有促有絲分裂特性。一起被施用時(shí)，內(nèi)皮素的促有絲分裂功能可幫助提高化學(xué)治療劑的功能。內(nèi)皮素激動劑的促有絲分裂作用可通過改善化學(xué)治療劑進(jìn)入分裂細(xì)胞中的整合并從而提高其效力，來提高化學(xué)治療劑的功能?；瘜W(xué)療法常被稱為癌癥治療中手術(shù)的佐劑。輔助治療中化學(xué)療法的目標(biāo)是當(dāng)原發(fā)性腫瘤被控制時(shí)，降低復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)并增強(qiáng)無疾病生存率(disease-freesurvival)。化學(xué)療法通常在疾病是遷移性時(shí)被用作癌癥的治療佐劑。因此ETB激動劑尤其適合在手術(shù)前或手術(shù)后與化學(xué)療法一起用于實(shí)體瘤的治療。乳腺腫瘤模型實(shí)施例1.IRL1620和紫杉醇對乳腺腫瘤灌注的影響進(jìn)行以下的研究檢査正常大鼠和患乳腺腫瘤大鼠中ET-1的全身性血流動力學(xué)和局部線路作用。一種廣泛研究的乳腺腫瘤模型是化學(xué)誘導(dǎo)的大鼠乳房致癌作用模型。vanZwieten，Theratasanimalmodelinbreastcancerresearch.MartinusNijhoffPublishers,Boston,pg.206(1984);Dao"g/.，JNatlCancerInst,71:201(1983);Russow"/.,JNatlCancerInst,61:1439(1978);Huggins"a/.,Science,137(1962);Huggins"a/"Proc歸AcadSciUSA，45:1294(1959)。大鼠中化學(xué)誘導(dǎo)的乳房腫瘤發(fā)生是與人癌癥最密切相似的模型。Russo"a/.,LabInvest,62:244(1990)。就組織結(jié)構(gòu)而言，大鼠的乳腺可與人類婦女的乳腺相比。其由間質(zhì)(stroma)和覆蓋輸送管(duct)和腺泡(alveoli)的上皮組成，所述間質(zhì)是支撐該器官的結(jié)締組織。這兩種區(qū)室在胚胎發(fā)育和整個(gè)成年期期間都在連續(xù)的相互作用中。因此，選擇該本生的(autochthonous)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ妥鳛榍笆鲅芯恐械哪Ｐ?，因?yàn)槠渥钆c人癌癥最緊密相似。同前?；瘜W(xué)誘導(dǎo)的大鼠乳房致癌作用典型地通過施用7,12-二甲苯(a)蒽(DMBA)或N-甲基亞硝脲(MNU)達(dá)成。RogersWa/.,Chemicallyinducedmammaryglandtumorsinrats:modulationbydietaryfat.AlanR.Liss,Inc.,NewYork255(1996)。由DMBA或MNU誘導(dǎo)的腫瘤具有不同的形態(tài)學(xué)特征。具體地，由MNU誘導(dǎo)的腫瘤更多位于乳腺并且更不可能轉(zhuǎn)移。Macejovaa/.,EndocrRegul，35:53(2001)。因此，通常選擇MNU用于大鼠中特異的乳腺腫瘤誘導(dǎo)。這些乳腺腫瘤可以是良性的纖維腺瘤和乳頭狀瘤，或它們可以是惡性的。vanZwieten，MartinusNijhoffPublishers,Boston,pg.206(1984)。大鼠具有六對乳腺，一對在頸區(qū)，兩對在胸部，一對在腹部，兩對在腹股溝區(qū)。同前AstwoodWa/.,AmJAnat,61(1937)。用MNU處理的未交配雌性大鼠在胸部產(chǎn)生比腹部更多的腫瘤。RussoWa/.,LabInvest,57:112(1987)。使用重量為180-200克的雌性SpragueDawley大鼠(HarlanCo.,Madison，Wis.)。所有的動物在溫度(23士1。C)、濕度(50±10%)和人工光(0600-1800hr)受控的房間內(nèi)居住，每籠三只。對動物無限制地提供食物和水。在動物對環(huán)境適應(yīng)至少4天后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。N-甲基亞硝脲(MNU)購自AshStevensInc.(Detroit,Mich)。IRL1620和內(nèi)皮素-l(ET-l)得自AmericanPeptideCompanyInc.(Sunnyvale,Calif)。ET匿l溶于0.1%白蛋白中。將畫U(50mg/kg)或鹽水(1ml/kg)腹膜內(nèi)(i.p.)注射給雌性SpragueDawley大鼠。腫瘤直徑達(dá)到約2-4cm時(shí)進(jìn)行血流實(shí)驗(yàn)。在血流實(shí)驗(yàn)中，用烏拉坦(urethane，1.5g/kg，i.p.)(SigmaChemicals,St.Louis,Mo.)麻醉大鼠，并對左股靜脈插管(PE50管，ClayAdams,Parsip纖y,N.J.)用于藥物施用。將動物分為以下幾組第I組正常大鼠(N-4)中鹽水+紫杉醇(紫杉醇；3mg/kg;施用鹽水后15分鐘)；第II組正常大鼠(N-4)中IRL1620(3nmol/kg)+紫杉醇(3mg/kg;施用IRL1620后15分鐘)；第III組患腫瘤大鼠(N-4)中鹽水+紫杉醇(3mg/kg;施用鹽水后15分鐘)；禾口第IV組患腫瘤大鼠(N-4)中IRL1620(3nmol/kg)+紫杉醇(3mg/kg;施用IRL1620后15分鐘)。使用激光多普勒血流儀測量流向大鼠乳腺的血液灌注。見Songe/"/.,IntJRadiatOncolBiolPhys,18:903(1990);Song"a/"IntJRadiatOncolBiolPhys，17:1041(1989)。在該步驟中，將動物乳頭周圍剃毛，并將乳腺周圍的皮膚切開。將標(biāo)準(zhǔn)模型光纖探針固定在乳房動脈中并與PerifluxPF2b4000激光多普勒血流儀(PerimedKB,Stockholm,Sweden)相連。時(shí)間常數(shù)設(shè)為1.5秒，帶寬設(shè)定為4KHz。使用方差分析(ANOVA)分析數(shù)據(jù)，之后進(jìn)行鄧肯檢驗(yàn)(Duncan'stest)。p<0.05的水平被認(rèn)為是顯著的。在施用鹽水或IRL1620和紫杉醇后流向正常大鼠乳腺組織的血流中未觀察到改變。在IRL1620注射后(36.3%,pO.05)與IRL1620后施用紫杉醇后(51.9%,pO.0.5)之間觀察到顯著差異(見圖1)。該研究因此證明IRL1620能夠提供癌癥治療(包括施用化學(xué)治療劑)的重要佐劑。實(shí)施例2.ET-1灌注對正常大鼠和患腫瘤大鼠的全身性血流動力學(xué)和流向乳房組織的血流的影響在研究前三個(gè)月通過腹膜內(nèi)注射進(jìn)行MNU和鹽水處理。處理后四周開始對大鼠有規(guī)律地觸診。一旦腫瘤直徑達(dá)到約4-8mm，開始實(shí)驗(yàn)。用烏拉坦(1.5g/kg，腹膜內(nèi))(SigmaChemicals,St.Louis，Mo.)將大鼠麻醉。將所有的手術(shù)區(qū)域剃毛并用醇拭子清潔。對左股靜脈插管(PE50管,ClayAdams，Parsipanny,N丄)用于藥物施用。對左股動脈插管(PE50管)并用于在微球研究中使用抽吸泵(Model22,HarvardApparatus,SouthNatick，Mass.)抽取參考血樣。對右股動脈插管(PE50管)并與GouldP23ID壓強(qiáng)傳感器連接，用于通過7PI前置放大器在GrassP7D多道生理記錄儀(GrassInstrumentCo.,Quincy，Mass.，USA)上記錄血壓。通過由血壓信號觸發(fā)的7P4BGrass速度記錄儀(GmssInstrumentCo.,Quincy,Mass.)記錄心率(HR)。暴露右頸動脈并將PE50管通過頸總動脈引入左心室中。通過使用StathamP23DC壓強(qiáng)傳感器(GrassInstrumentCo.,Quincy，Mass.)在Grass多道生理記錄儀上記錄壓強(qiáng)來證實(shí)左心室中插管的存在。當(dāng)插管達(dá)到左心室時(shí)，舒張壓降至零。為了維持血p02、pC02和pH恒定并避免呼吸對血壓和HR的影響，通過插入與嚙齒動物呼吸機(jī)(Model683，HarvardApparatusInc.,SouthNatick,Mass.)相連的氣管內(nèi)插管使動物保持恒定速率的人工呼吸。最初將大鼠分為兩組，各接受以下的一種處理第I組在用鹽水處理的大鼠(正常大鼠)(N-6)中ET-1(50ng/kg/min)灌注30分鐘；和第II組在用MNU處理的大鼠(50mg/kg，腹膜內(nèi)；腫瘤大鼠)(N二6)14中ET-1(50ng/kg/min)灌注30分鐘。在基線處、開始ET-1(50ng/kg/min)灌注后30、60和120分鐘時(shí)測定全身性血流動力學(xué)和局部循環(huán)參數(shù)。因?yàn)镋T-1灌注進(jìn)行了30分鐘，所以30分鐘的數(shù)據(jù)顯示ET-1的作用，而60分鐘和120分鐘的數(shù)據(jù)指出ET-1作用的持續(xù)時(shí)間。使用文獻(xiàn)描述的步驟測定全身性血流動力學(xué)和局部血循環(huán)。見Gulati"JLabClinMed，126:559(1995);Gulatida/.，LifeSci.,55:827(1994);Sharmaaa/.,ArtifCellsBloodSubstitImmobilBiotechnol，22:593(1994)。在各測量中，將0.2ml鹽水中用46Sc(鈧)、113Sn(錫)、141Ce(鈰)或95Nb(鈮)(NewEnglandNuclearCorporation,Boston,Mass.,USA)標(biāo)記的約100，000個(gè)微球(直徑15ilpm)的充分混合的懸浮液注射進(jìn)左心室，并用0.3ml鹽水在15秒的周期中沖洗。為了計(jì)算血流量，以0.5ml/min的速率通過右股動脈抽取動脈血。從微球注射前5-10秒開始抽血90秒。使用激光多普勒血流儀測量流向大鼠乳腺的血液灌注。見Songe/"/.,IntJRadiatOncolBiolPhys,18:903(1990);Song"a/.,IntJRadiatOncolBiolPhys,17:1041(1989)。將動物乳頭周圍剃毛。將乳腺周圍的皮膚切開約6cm寬和約4cm長的皮瓣(lambeau)。將標(biāo)準(zhǔn)模型光纖探針置于皮瓣表面，并通過雙面膠帶固定在組織上。該皮瓣被置于金屬支架上并粘住以防移動，然后與PerifluxPF2b4000激光多普勒血流儀(PerimedKB,Stockholm,Sweden)相連。時(shí)間常數(shù)設(shè)為1.5秒，帶寬設(shè)定為4KHz。使用方差分析來分析數(shù)據(jù)，之后進(jìn)行鄧肯檢驗(yàn)(Duncan'stest)。p<0.05的水平被認(rèn)為是顯著的。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用超劑量的戊巴比妥鈉處死動物。將所有的組織和器官切開、稱重并置于管中。在PackardMinaxiAuto-Gamma5000型7計(jì)數(shù)器(PackardInstrumentsCo.,DownersGrove,III.)中計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)樣、血樣和組織樣品中的放射性，用預(yù)置窗分辨同位素能量。計(jì)算以下的參數(shù)(l)心輸出量(CO)((注射的放射性X動脈血的抽取速率)/樣品動脈血中的放射性)，(2)搏出量(SV)(CO/HR)，(3)總外周阻力(TPR)(平均動脈壓(MAP)/CO)，(4)局部血流量((組織中的放射性X動脈血的抽取速率)/樣品動脈血中的放射性)，和(5)局部血管阻力(MAP/局部血流量)。使用文獻(xiàn)中描述的計(jì)算機(jī)程序計(jì)算數(shù)據(jù)。SaxenaWa/.，ComputProgramsBiomed，12:63(1980)。正常(鹽水處理的)大鼠中基線全身性血流動力學(xué)參數(shù)為MAP:111.1±4.8mmHg;CO:268.6±17.6ml/min;SV:0.87±0.06ml;TPR:419.6±.24.37mmHg.min/ml;和HR:312.5士20.2搏動/min。在正常大鼠中，在ET-1灌輸后30分鐘(14.5%;pO.05)時(shí)觀察到MAP的顯著提高，120分鐘(17.8%;pO.05)時(shí)觀察到MAP的降低。120分鐘時(shí)TPR提高(49.2%;p<0.05)。在ET-1灌輸后60分鐘和120分鐘CO下降(分別為22.9%和42.5%;p<0.05)。灌輸后60分鐘和120分鐘SV下降(分別為20.9%和36%;p<0.05)。未觀察到HR的顯著改變(圖2A-2E)。患腫瘤(經(jīng)MNU處理的)大鼠中的基線全身性血流動力學(xué)參數(shù)與正常大鼠中相似。在患腫瘤大鼠中ET-1灌輸后30分鐘(19.1%;pO.05)和60分鐘(15.3%;pO.05)時(shí)觀察到MAP的顯著提高。施用ET-1后30分鐘(73.9%;p<0.05)、60分鐘(39.7%;pO.05)和120分鐘(71.4%;p〈0.05)TPR提高。30、60和120分鐘CO降低(分別為29.4%、16.7%和36.1%;p<0.05)。30、60和120分鐘時(shí)SV顯著降低(分別為31.1°/。、17.9%和32.1%;p<0.05)。未觀察到HR改變(圖2A-2E)。在施用ET-1后，對正常鹽水處理的大鼠而言未觀察到顯著的流向乳腺組織血流量的改變或血管阻力的改變。在患腫瘤的(MNU處理的)大鼠乳腺組織與正常(經(jīng)鹽水處理)的大鼠之間觀察到血流量和局部血管阻力的顯著差異。在施用ET-1后60分鐘，觀察到與正常大鼠相比流向患腫瘤大鼠乳腺組織的血流量的顯著提高(153%;p<0.05)。在施用ET-1后基線時(shí)(102%;pO.05)和60分鐘時(shí)(147%;p<0,05)，患腫瘤的大鼠中血管阻力與正常大鼠相比顯著不同(圖3A-3B)。圖4A-4C顯示患腫瘤大鼠和正常大鼠的乳腺組織中灌注、移動血細(xì)胞濃度(CMBC)和紅細(xì)胞流速(RBC)的改變。ET-1施用后正常大鼠的乳腺組織中血液灌注未顯著改變。ET-1施用后30分鐘時(shí)與正常大鼠相比，患腫瘤大鼠的乳腺組織中灌注顯著提高(176。/。;p0.05)。在患腫瘤大鼠中，灌注的該提高在ET-1施用后60和120分鐘時(shí)恢復(fù)至基線。與正常大鼠相比，患腫瘤大鼠中CMBC在ET-1施用后60分鐘時(shí)顯著提高(54。/。;p0.05)。施用ET-1后120分鐘，CMBC恢復(fù)至基線。與正常大鼠相比，ET-1施用后30分鐘時(shí)RBC流速顯著提高(252%;p<0.05)。ET-1施用后兩小時(shí)(120分鐘)時(shí)，患腫瘤大鼠中的RBC流速恢復(fù)至基線(圖4A-4C)。另一個(gè)研究評價(jià)ETB受體對正常大鼠和患乳腺腫瘤的大鼠全身性血流動力學(xué)和流向乳腺組織的血流量的由ET-1誘導(dǎo)的改變的作用。BQ788(即1^-順式-2,6-二甲基哌啶基羰基丄-7-甲基-亮氨酰-0-1-甲氧基羰基色氨?；?D-Nle)是一種特異的ETb受體拮抗剤，其以1.2nM的1(35()值抑制與ETB受體的結(jié)合。因此，BQ788被用于測定ETs受體在乳腺腫瘤中ET-1誘導(dǎo)的血管舒張中的作用。該研究使用先前研究中所述的方法，不同之處是將動物分為以下幾組第I組在正常的經(jīng)鹽水處理的大鼠(N-5)中用BQ788(AmericanPeptideCompanyInc.(Sunnyvale,Calif)以0.5pmol/kg溶于鹽水中)灌輸20分鐘，隨后用ET-l(50ng/kg/min)灌輸30分鐘；和第II組在患腫瘤的經(jīng)MNU處理的大鼠(50mg/kg,腹膜內(nèi))(N二5)中用BQ788(0.5pmol/kg)灌輸20分鐘，隨后用ET-1(50ng/kg/min)灌輸30分鐘。圖5A-5C顯示BQ788分別在患腫瘤的大鼠和正常大鼠中對ET-1誘導(dǎo)的血液灌注、CMBC和RBC流速改變的影響。在BQ788施用或ET-1灌注后正常大鼠的乳腺組織中血液灌注未顯著改變。然而，在用BQ177預(yù)處理的大鼠中，ET-1灌輸后30分鐘(25.25.+-.5.7%;PO.05)和60分鐘(25.17.+-.2.8%;PO.05)時(shí)，患腫瘤大鼠的乳腺腫瘤組織中灌注顯著降低。用BQ788預(yù)處理減弱了患腫瘤大鼠中ET-1誘導(dǎo)的灌注提高。在BQ788預(yù)處理的大鼠中，ET-1施用后患腫瘤的大鼠和正常大鼠乳腺組織之間未觀察到差異。該結(jié)果提示ET-1引發(fā)的致血管舒張(vasodilatory)應(yīng)答是通過ETB受體介導(dǎo)的?；寄[瘤大鼠中的基線CMBC比正常大鼠的乳腺組織基線CMBC顯著17更高(42.4%;P<0.05)。然而，在BQ788灌輸后，患腫瘤大鼠和正常大鼠的CMBC之間未觀察到差異。另外，兩組之間未觀察到RBC流速差異(圖5A畫5C)。以上測試顯示了ET-1對經(jīng)鹽水處理的和經(jīng)MNU處理的患腫瘤大鼠的全身性血流動力學(xué)和流向乳腺組織的血流量的影響。已知ET-1通過促進(jìn)VEGF的生產(chǎn)來刺激血管發(fā)生。研究顯示ET-1在許多癌癥組織如乳腺癌(Yamashitaa/.,ResCommunChemPatholPharmacol,74:363(1991))、乳腺分葉狀瘤(Yamashita"a/.,CancerRes，52:4046(1992))、前列腺癌(Nelson"a/.,CancerRes,56:663(1996》、肝癌(Kar"a/.,BiochemBiophysResCommun216:514(1995))和一些腦脊膜瘤(Pagotto"a/.，JClinInvest,96:2017(1995))中被提高。以上測試證明乳腺腫瘤中ET-1誘導(dǎo)的血管應(yīng)答的改變。這些測試中使用的方法是研究全身性血流動力學(xué)和局部血循環(huán)的被廣泛接受的放射性微球技術(shù)。Gulati"a/.,AmJPhysiol,273:H827(1997);Gulati"a/"CritCareMed，24:137(1996);Gulati"JLabClinMed，126:559(1995);GulatiWa/.，LifeSci,55:827(1994)。實(shí)施例3.IRL1620對紫杉醇藥代動力學(xué)的影響改變身體中血流量血流動力學(xué)可顯著地影響治療性成分的藥代動力學(xué)，并且已知紫杉醇具有復(fù)雜的藥代動力學(xué)特性。參見例如SparreboomWfl/.，CancerRes56:2112(1996a);Gianni"a/.，JNatlCancerInst87:1169(1995b);Sonnichsen&Relling，ClinPha腿cokinet27:256(1994);HuizingWa/"JClinOncol11:2127(1993);BrownWa/"JClinOncol9:1261(1991);Longnecker^a/"CancerTreatRep71:53(1987);WiemikWa/.,CancerRes47:2486(1987b)。因此理解IRL1620對紫杉醇血漿藥代動力學(xué)的影響是重要的。因此進(jìn)行前述研究測定選擇性的ETb受體激幼剤IRL1620是否改變患乳腺腫瘤的大鼠中紫杉醇的藥代動力學(xué)。該研究使用48天齡(120-140g)的未交配雌性SpragueDawley大鼠(HarlanCo.,Madison，WI)。抵達(dá)后所有的動物在具有受控的溫度(23士1。C)、濕度(50±10%)和人工光(0600-1800hr)的房間內(nèi)居住，每籠三只。對動物無限制地提供食物和水。僅在動物對環(huán)境適應(yīng)至少4天后開始實(shí)驗(yàn)。IRL1620購自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO)。紫杉醇(6mg/mL溶液)購自BenVenueLaboratoriesInc.(BedfordOH)。氯胺酮和賽拉嗪購自PhoenixScientific,Inc.(St.Joseph,MO)。[3司-紫杉醇(ImCi,6.4Ci/mmol,比活)購自MoravekBiochemicals(MoravekBiochemicals，CA)。烏拉坦購自SigmaAldrich(SigmaChemicals,St.Louis,MO)。N-甲基-n-亞硝基脲(MNU)以50mg/kg的劑量腹膜內(nèi)施用，并對大鼠每周觸診兩次。一旦腫瘤達(dá)到約75-100mm3，則進(jìn)行藥代動力學(xué)研究。HPLC-UV研究。通過單次腹膜內(nèi)注射烏拉坦(1.5mg/kg)(SigmaChemicals,StLods，MO)將大鼠麻醉。將右股區(qū)剃毛并用手術(shù)消毒劑和醇清潔。暴露右股動脈和靜脈并用無菌的PE-50管插管。將頸部剃毛并用手術(shù)消毒劑和醇清潔。在頸區(qū)周圍制造適中切口，插入導(dǎo)管并與嚙齒動物呼吸機(jī)(Model683,HarvardApparatusInc.,SouthNatick，MA)連接。所有的手術(shù)在無菌條件下進(jìn)行。對傷口應(yīng)用新孢霉素抗生素霜劑(Pfizer，MorrisPlains,NJ)預(yù)防感染。在藥物施用前給予45分鐘的恢復(fù)周期。使用正常(鹽水處理的)和患腫瘤(MNU處理的)大鼠。在施用IRL1620(3nmol/kg)或載體(鹽水3mL/kg)后15分鐘時(shí)靜脈注射紫杉醇(3mg/kg)。在IRL1620施用前收集血以提供基線值。在紫杉醇施用后基線時(shí)、5、30分鐘和2、6和10小時(shí)時(shí)在肝素化的注射器中從大鼠抽取0.5mK血。離心樣品，收集血漿并儲存于-8(TC直至分析。使用HPLC系統(tǒng)針對紫杉醇分析血漿樣品。簡言之，將血漿融化并與50內(nèi)標(biāo)N-環(huán)己基苯甲酰胺(3mM，較低標(biāo)準(zhǔn)曲線，禾B30mM，較高標(biāo)準(zhǔn)曲線)和3mL乙基醚(FisherScientific,Chicago,IL)在13X100的玻璃培養(yǎng)管中混合。使用往復(fù)振蕩器將混合物搖動5分鐘，然后在4"下以3000rpm離心5分鐘。將得到的上清液移至13X100硼硅玻璃培養(yǎng)管中，并在加熱的水浴(37。C)中在氮流下蒸發(fā)。用200^L流動相A(50%去離子水，50%乙腈)重溶殘液。將重溶材料的100nL(較低標(biāo)準(zhǔn)曲線和在IV施用后收集的樣品)等分試樣注射進(jìn)4mmNovaPak20X3.9mmC18前置柱中，隨后是NovaPak150X3.9mmCI8柱(WatersAssociates,Milford，MA)，使用與設(shè)定在227nm處的Waters2487吸光度檢測器連接的Waters2695分離模塊。線性梯度從以1mL/min的流速被泵出的100%流動相A開始。然后從10到11分鐘將流動相A減少至70%，從11到16分鐘將流動相A維持在70%,從而在下一次注射前去除從柱中緩慢洗脫的材料。隨后，從16到17分鐘將流動相A增加至100%，并將100%流動相A維持三分鐘，提供20分鐘的總運(yùn)行時(shí)間。紫杉醇的血漿濃度從紫杉醇峰面積與N-環(huán)己基苯甲酰胺峰面積的比例計(jì)算，使用最小二乘法線性回歸并通過1/x加權(quán)。通過變異系數(shù)測量的一天內(nèi)和數(shù)天之間的變異性為<10%。比較了正常大鼠和患腫瘤大鼠的血槳濃度模式。液體閃爍計(jì)數(shù)研究。通過單次腹膜內(nèi)注射氯胺酮(100mg/kg)和賽拉嗪(2mg/kg)的組合將大鼠麻醉。將頸部剃毛并用手術(shù)消毒劑和醇清潔。暴露右頸動脈并用無菌的PE50管插管。在頸區(qū)周圍制造正中切口，并用PE50管對左頸動脈插管用于取血樣。將導(dǎo)管皮下穿過并在頸底部露出，然后使用手術(shù)釘閉合切口。Buehler"a/.,FreeRadicBiolMed37:124(2004)。用釣魚線將開放的管閉合。所有的手術(shù)在無菌條件下進(jìn)行。對傷口應(yīng)用新孢霉素抗生素霜劑(Pfizer，MorrisPlains,NJ)防止傷口感染。在藥物施用之前給予45分鐘的恢復(fù)周期。對患腫瘤的動物以3nmol/kg的劑量靜脈施用IRL1620。將卩H]-紫杉醇(160pCi/kg)與未標(biāo)記的紫杉醇混合。在載體或IRL1620施用后15分鐘靜脈施用紫杉醇。在載體或IRL1620施用之前收集血漿以提供基線值。在基線處、1、5、15和30分鐘和1、2、4、6、8、12和24小時(shí)處在肝素化的注射器中從大鼠抽取約0.2mL血。對樣品離心，血漿被分離并儲存于-8(TC直至分析。使用BeckmanCoulter液體閃爍計(jì)數(shù)器(LS6500型)測量血漿樣品中[3司-紫杉醇的濃度。簡言之，將血漿融化并與20mL液體閃爍混合物混合。對樣品計(jì)數(shù)并使用下式將計(jì)數(shù)從"dpm"單位轉(zhuǎn)化為"fmol/mL":fmol/mL=dpm值X衰變因子X2.2x1(T12/1(T12X以mL計(jì)的樣品體積轉(zhuǎn)化為fmol/mL后，使用fH]-紫杉醇比未標(biāo)記的紫杉醇的比例計(jì)算總紫杉醇的藥代動力學(xué)。在WinNonlinPro4.1(PharsightCorp,Mt.View,CA)中進(jìn)行，使用非區(qū)室(non-compartmental)分析和區(qū)室分析二者測定血漿紫杉醇藥代動力學(xué)參數(shù)。在非區(qū)室分析中，使用梯形法則(trapezoidalrule)估計(jì)直到最后可測量濃度(Clast)的曲線下面積(AUCO-。)，并通過用Clast除以log-線性血漿濃度對時(shí)間曲線末端斜率(A)的負(fù)值外推至無窮大。還計(jì)算了以下的參數(shù)平均滯留時(shí)間(MRTiv)被計(jì)算為入的倒數(shù)，全身清除率(CL)被計(jì)算為劑量與AUC0-^的比例，表觀體積分布(apparentvolumedistribution)被計(jì)算為CL和A的比例。血漿半衰期被計(jì)算為0.693(自然對數(shù)2)和MRTiv的乘積。在區(qū)室分析中，一系列非線性區(qū)室模型針對血漿濃度對時(shí)間曲線數(shù)據(jù)被擬合。具體地，比較了一區(qū)室、兩區(qū)室和三區(qū)室模型。測試了基于均一(Uniform)數(shù)據(jù)和預(yù)測數(shù)據(jù)的加權(quán)。模型的最終選擇基于診斷繪圖(觀察到的與預(yù)測到的相比和殘差繪圖)、AkaikeInformationCriteria(AIC)和SchwartzCriteria(SC)。具有較低AIC和SC標(biāo)準(zhǔn)的模型被認(rèn)為是最終的模型。通過單通道ANOVA，隨后通過針對HPLC-UV研究的Duncan's檢驗(yàn)和通過針對液體閃爍研究的t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)。p<0.05被認(rèn)為是顯著的。在這些藥理學(xué)應(yīng)答研究中測量的主要輸出是血漿中紫杉醇濃度的差異。在正?；蚧寄[瘤大鼠中，紫杉醇的藥代動力學(xué)模式不受IRL1620施用(圖6和7)的影響。血漿藥代動力學(xué)模式的HPLC分析與放射性紫杉醇分布的更廣泛模式相似。圖7指出用載體處理的和用IRL1620處理的患腫瘤大鼠中，紫杉醇放射性的藥代動力學(xué)模式。藥代動力學(xué)模式通過非區(qū)室的方法和區(qū)室方法分析。在非區(qū)室分析中，針對載體+紫杉醇組計(jì)算的AUC為9433.53±1465.00ng*h/mL并與IRL1620處理的腫瘤大鼠類似(p〉0.05)。消除半衰期被計(jì)算為0.14±0.08小時(shí)。作為劑量/AUC計(jì)算的清除率被估計(jì)為0.56±0.07L/h/kg。發(fā)現(xiàn)作為清除率/Kel計(jì)算的分布體積是10.11±4.17L/kg。總之，并在下表中可看出，IRL1620不影響紫杉醇的藥代動力學(xué)模式。21<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>從血漿樣品中的dpm計(jì)數(shù)計(jì)算紫杉醇的血漿濃度。三區(qū)室模型最好地描述了紫杉醇的藥代動力學(xué)。圖8描繪了對載體處理的和IRL1620處理的大鼠而言，觀察到的與預(yù)測的藥代動力學(xué)繪圖對比。載體處理的大鼠中紫杉醇的AUC為9.42±3.18pg-h/mL。穩(wěn)態(tài)分布體積(Vss)為10.31±4.54L/Kg。清除率被估計(jì)為0.69±0.17L/h/Kg。o;t1/2、]St1/2、0^/2分別為0.03±0.01小時(shí)、1.0±0.32小時(shí)和25.87+17.81小時(shí)。平均滯留時(shí)間為27.92±19.84小時(shí)。從下表中可以看出，在IRL1620處理組中評估的這些參數(shù)并未顯著區(qū)別于載體處理組中的參數(shù)。組<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>在該研究中，三區(qū)室模型最好地描述了紫杉醇的血漿藥代動力學(xué)。該模型提出紫杉醇被分布于多種器官，無論器官中的血液灌注是高、中還是低。IRL1620施用未改變紫杉醇的分布。對用載體和IRL1620處理的組而言，通過3區(qū)室模型產(chǎn)生的血漿藥代動力學(xué)參數(shù)展示了相似的清除率、分布體積和吸收、分布和消除半衰期。然而，IRL1620提高腫瘤血液灌注和月中瘤紫杉醇濃度。Raida/.,AmericanAssociationofPharmaceuticalScientists,PharmaceuticsandDrugDeliveryConference.Philadelphia,PA(2004);Rai&Gulati，CancerChemotherPharmacol,51:21(2003)。因此，IRL1620選擇性地提高腫瘤灌注而不會顯著地改變紫杉醇的藥代動力學(xué)模式。這些研究證明IRL1620的使用不影響紫杉醇的藥代動力學(xué)。藥代動力學(xué)研究通常被認(rèn)為是化合物安全性研究的代替品。因此，這些結(jié)果也提出紫杉醇的安全性不因?yàn)镮RL1620的施用而改變。因此，IRL1620可被用于促進(jìn)紫杉醇效力并允許適當(dāng)?shù)膭┝空{(diào)整以使其嚴(yán)重毒性最小化。實(shí)施例4.IRL1620的劑量應(yīng)答作用、IRL1620對主要器官和腫瘤組織中"H1-紫杉醇分布的影響和IRL1620對紫杉醇對腫瘤狀態(tài)的效力的影響本實(shí)施例中描述的實(shí)驗(yàn)被設(shè)計(jì)為進(jìn)一步評價(jià)(a)ETB受體激動劑IRL1620對正常和患腫瘤大鼠乳腺灌注的劑量應(yīng)答作用，(b)IRL1620對主要器官和腫瘤組織中[3印-紫杉醇的生物分布的影響，和(c)在MNU-誘導(dǎo)的患腫瘤大鼠中，IRL1620對紫杉醇對腫瘤狀態(tài)的效力的影響。未交配雌性SpragueDawley大鼠(HarlanCompany,Madison,WI)在40天齡時(shí)購買，并且每籠兩只在23±1°C并維持在12小時(shí)光/12小時(shí)暗時(shí)間表下的溫度受控室內(nèi)居住。它們無限制接受水和標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動物膳食。IRL1620得自SigmaChemicalCo.(St.Louis，MO)。[3印畫紫杉醇購自MoravekBiochemicals(Brea,CA)。紫杉醇(6mg/ml溶液)購自BenVenueLaboratoriesInc.(Bedford,OH)。氯胺酮和賽拉嗪購自PhoenixScientific,Inc.(St.Joseph,MO)。組織增溶劑(TS-2)購自RPICorp.(Chicago,IL)。在48天齡后，每只動物接受50mg/kg劑量的N-甲基亞硝基脲(MNU,AshStevens,Detroit,MI)的單次腹膜內(nèi)注射。將MNU溶于3%乙酸中并在0.9。/。NaCl中稀釋(終濃度12.5mg/ml)，制備后30分鐘內(nèi)施用。該處理在致癌劑處理后約100天在大鼠中誘導(dǎo)接近100%的乳腺癌發(fā)病率。Mehta,EurJCancer,36:1275(2000)。通過手工乳腺觸診監(jiān)測腫瘤外觀和定位，并用數(shù)字測徑器測量腫瘤表面。選擇具有500-800mm3體積腫瘤的大鼠用于研究。灌注研究。使用前述PerifluxPF2b4000激光多普勒血流儀(Perimed,Stockholm,Sweden)測量流向大鼠乳腺組織和腫瘤的灌注。簡言之，使用氯胺酮(IOOmg/kg)和賽拉嗪(2mg/kg)作為組合的單次腹膜內(nèi)注射將大鼠麻醉。將乳頭周圍剃毛，并將動物置于加熱毯(37。C)上以最小化溫度變化。23將乳腺周圍的皮膚切開約6mm寬和約4mm長的皮瓣。在暴露組織的表面上應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)模型光纖探針(MP3流量探針，MoorsInstruments,Devon,England)。然后將其與PerifluxPF2b4000激光多普勒血流儀連接。時(shí)間常數(shù)設(shè)定為1.5秒，帶寬設(shè)定為4kHz。該方法測量激光(通量)中的多普勒頻移，其由紅細(xì)胞數(shù)和流速決定，并與給定體積的組織中的總血流量成比例。使用Polyview軟件獲得通量值。在施用鹽水或IRL1620之前獲得15分鐘的穩(wěn)定記錄基線。對動物施用1、3或9nmol/kg的IRL1620并記錄灌注3小時(shí)。每個(gè)劑量被施用給至少4個(gè)動物。發(fā)現(xiàn)IRL1620施用對腫瘤灌注的影響是短暫的和劑量相關(guān)的(圖9A)。在施用3nmol/kgIRL1620后30分鐘觀察到從腫瘤灌注基線起244.0%的最大提高0><0.001)。發(fā)現(xiàn)與基線以及鹽水處理的大鼠相比，灌注的提高在15、30和60分鐘是顯著的。(圖9A和9B)。1和9nmol/kgIRL1620的施用僅產(chǎn)生與基線灌注和鹽水處理的大鼠相比微小的乳腺腫瘤灌注提高。分別在1和9nmol/kgIRL1620后120分鐘和30分鐘記錄到灌注的最大提高(60.9和63.3%)。然而，發(fā)現(xiàn)在9nmol/kglRL1620處理的動物中，與鹽水處理的大鼠相比灌注的提高在15、30和60分鐘是顯著的(圖9A)。對患腫瘤的大鼠施用鹽水不產(chǎn)生與基線相比血灌注的任何顯著改變(圖9A)。在正常雌性大鼠中，鹽水或l、3或9nmol/kgIRL1620的施用不產(chǎn)生任何乳腺灌注的顯著改變(數(shù)據(jù)未顯示)。這些結(jié)果顯示3nmol/kg或9nmol/kgIRL1620的施用產(chǎn)生與基線和載體處理的大鼠相比腫瘤灌注的提高。盡管1、3和9nmol/kgIRL1620均稍微提高腫瘤灌注，但是3nmol/kg劑量產(chǎn)生最大的影響。生物分布研究。在如前所述的腫瘤形成后，使用氯胺酮(100mg/kg)和賽拉嗪(2mg/kg)作為組合的腹膜內(nèi)注射將大鼠麻醉。記錄大鼠的體重、腫瘤定位和腫瘤體積。然后將動物隨機(jī)分組，以通過尾靜脈(tailvein)接受終體積0.2mL的鹽水或IRL1620(3nmol/kg)。然后在IRL1620后15、120和240分鐘時(shí)來自每組的大鼠接受1.0ml終體積的[3印紫杉醇(40pCi/大鼠，在50:50的CremophorEL和乙醇中)。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)研究六只大鼠，總計(jì)使用36只大鼠。施用[3司紫杉醇后3小時(shí)將動物處死。測定腫瘤組織、腎、肝、肺和脾中[3司紫杉醇的濃度。具體地，將腫瘤和器官切成小片。將約500mg組織或腫瘤置于獨(dú)立的含組織增溶劑(6ml)的管中，并在50。C水浴中孵育。在組織或腫瘤溶解后將管從水浴中取出，并添加1.2ml的10%冰醋酸。將管的內(nèi)容物等分為3管，向每管中添加15ml液體閃爍混合物(SafetySolve,RPICorp,Chicago,IL)并保持過夜以便平衡。使用液體閃爍計(jì)數(shù)器(BeckmanCoulter,LS6500)計(jì)數(shù)管中的放射性。與鹽水處理的大鼠相比，經(jīng)IRL1620(3nmol/kg)處理的大鼠的腫瘤中[3司紫杉醇的濃度顯著提高。在IRL1620施用后15分鐘，施用紫杉醇的動物組中觀察到最大作用。IRL1620施用后15、120和240分鐘時(shí)分別施用紫杉醇時(shí)，觀察到腫瘤紫杉醇濃度277.1%、151.9%和34.7%的提高(圖10)。與對照動物相比，IRL1620施用不顯著改變紫杉醇在肝、肺、腎和脾中的積累(圖10)。效力研究。將患腫瘤的(MNU-介導(dǎo)的)動物隨機(jī)分為七組(12只大鼠/組)第I組一鹽水；第II組一IRL1620(3nmol/kg);第III組一CremophorEL:乙醇；第IV組一載體(鹽水)十紫杉醇(lmg/kg);第V組一載體(鹽水)十紫杉醇(5mg/kg);第VI組一IRL1620(3nmol/kg)+紫杉醇(1mg/kg);禾口第VII組一IRL1620(3nmol/kg)+紫杉醇(5mg/kg)。給藥時(shí)間表是每三天一次，共計(jì)5齊lj。每隔兩天監(jiān)測體重、腫瘤大小和位置，在最后一次給藥后總計(jì)監(jiān)測30天。使用以下的標(biāo)準(zhǔn)評分發(fā)展與治療開始時(shí)相比，以面積計(jì)腫瘤生長了比40%更多；停滯在治療的整個(gè)過程中，腫瘤與其最初面積相比波動不超過40%;部分消退與其最初面積相比腫瘤消退了多于40%;完全消失腫瘤不再是可觸及的或可測量的；腫瘤多樣性治療期間新腫瘤的出現(xiàn)；和30天的觀察時(shí)間。最后(第5次)給藥后30天處死動物。使用方差分析和隨后的Dmican，s測試分析數(shù)據(jù)。PO.05的水平被認(rèn)為是顯著的。25體重。圖11中給出了從基線(處理前)到最后給藥后30天，動物體重的百分比差異。在鹽水處理的對照大鼠中，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)與基線體重相比的體重增加百分比為7.2±1.7%。在用載體+紫杉醇(lmg/kg)、載體+紫杉醇(5mg/kg)、IRL1620+紫杉醇1mg/kg禾卩IRL1620+紫杉醇5mg/kg處理的動物組中，分別存在5.1土3.6、9.4±2.4、14.3±3.1和13.1±1.8%的體重增加(圖11)。與基線相比，發(fā)現(xiàn)施用CremophorEL:乙醇和IRL1620的動物體重的增加百分比<10%(數(shù)據(jù)未顯示)。腫瘤體積。在處理開始時(shí)多個(gè)組中的腫瘤體積是相似的，并且彼此無顯著差異(圖12)。對照大鼠的腫瘤體積以快速和可變的速率增加。腫瘤生長的巨大變異性可歸因于本生型生長的腫瘤的隨機(jī)生長模式。在30天觀察周期結(jié)束時(shí)，對照腫瘤具有2693.4±790.9mm3的腫瘤體積。IRL1620處理的大鼠具有類似的發(fā)育模式，最終腫瘤體積為2560.5±844.4mm3。CremophorEL:乙醇處理也導(dǎo)致類似的生長模式，最終腫瘤體積為2338±1329mm3。因此，IRL1620和cremophorEl:乙醇自身對MNU-誘導(dǎo)的乳腺腫瘤生長不具有顯著的影響(數(shù)據(jù)未顯示)。載體+紫杉醇(1mg/kg)處理的大鼠顯示顯著降低的腫瘤大小(1960.8±611.9mm3)生長。與對照大鼠相比時(shí)，載體+紫杉醇(5mg/kg)組顯示更大的腫瘤體積(1682.7±497.3mm3)減小。IRL1620+紫杉醇(1mg/kg)處理的大鼠也顯示腫瘤大小(1707.2±621.1mm"的減小。然而，在用IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)處理的動物組中觀察到最低的平均腫瘤大小(730.1士219.4mm3)。與施用鹽水+紫杉醇(5mg/kg)的大鼠相比，每隔兩天用IRL1620然后用5mg/kg紫杉醇共計(jì)5次給藥顯著(pO.05)減小了腫瘤體積(圖12)。當(dāng)與用IRL1620或cremophorEL:乙醇任一處理的大鼠相比，還發(fā)現(xiàn)在IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)組中腫瘤體積也更小(數(shù)據(jù)未顯示)。腫瘤多樣性。在30天的觀察周期結(jié)束時(shí)，所有處理組中的動物產(chǎn)生了額外的腫瘤。用鹽水、crem叩horEL:乙醇和IRL1620處理的動物中，額外腫瘤出現(xiàn)分別存在58.4%、57.1%和60.8%的增加。在施用載體+紫杉醇(分別為1和5mg/kg)的動物中，發(fā)現(xiàn)新腫瘤發(fā)生率為78.3%和41%。然而，在IRL1620+紫杉醇(分別為1和5mg/kg)中，發(fā)現(xiàn)額外腫瘤的百分比為69.2%和44.8%(數(shù)據(jù)未顯示)。腫瘤發(fā)展。如前文所述計(jì)算發(fā)展的、保持停滯的、消退的或消失的腫瘤百分比。在鹽水處理的組中73.5%的腫瘤發(fā)展了超過最初腫瘤大小的40%。IRL1620(82.7%)和cremophorEL:乙醇(80.4。/。)處理的組具有超過最初腫瘤大小40%的相似的腫瘤發(fā)展百分比。在載體+紫杉醇(5mg/kg)組(71.4%)、載體+紫杉醇(1mg/kg)組(61.P/。)和IRL1620+紫杉醇(1mg/kg)組(69%)中，更低百分比的腫瘤發(fā)展。但是，在IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)組中看到最低的百分比(40%)(圖13)。腫瘤停滯。鹽水處理的組中16.9%的腫瘤維持停滯，在30天的終點(diǎn)時(shí)未生長超出40%的范圍。其他對照組顯示輕微更低百分比的腫瘤維持停滯IRL1620(13.7%)、cremophorEL:乙醇(15.2。/0)。載體+紫杉醇(1mg/kg)(22.2%)和載體+紫杉醇(5mg/kg)(19.5%)處理的大鼠顯示更高百分比的腫瘤維持停滯。IRL1620+紫杉醇(1mg/kg)(23.8%)處理的大鼠和IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)處理的大鼠顯示最大百分比的腫瘤維持停滯(26.6y。)(圖13)。腫瘤消退。與對照動物相比，5mg/kg紫杉醇處理前施用IRU620顯著地降低腫瘤的發(fā)展。鹽水處理的大鼠顯示與最初腫瘤體積相比9.2°/。的腫瘤消退。CremophorEL:乙醇(4.3%)、IRL1620(3.4%)和載體+紫杉醇(1mg/kg)(9.5%)處理的大鼠在腫瘤大小消退百分比中與對照組無顯著不同。在第5次給藥結(jié)束時(shí)，與對照大鼠相比，IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)處理的大鼠和載體+紫杉醇(5mg/kg)處理的大鼠中腫瘤分別消退76.1±10.5和45.9土11.5%。在用IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)和載體+紫杉醇(5mg/kg)處理的動物中，分別存在80.2±6.9%(p<0.05)和33.8士19.4%的消退(圖13)。IRL1620+紫杉醇(1mg/kg)和載體+紫杉醇(1mg/kg)組中的腫瘤消退率分別為47.1±15.4和37.7±16.2%。IRL1620后15分鐘施用紫杉醇(5mg/kg)產(chǎn)生與鹽水后15分鐘施用紫杉醇(5mg/kg)相比顯著更大的腫瘤消退。在任何時(shí)間點(diǎn)，cremophorEl:乙醇和IRL1620處理的組在其腫瘤消退上與對照大鼠相比無顯著差異(數(shù)據(jù)未顯示)。腫瘤減輕。僅在兩組中觀察到完全消失(其中腫瘤完全消失)-頁IRL1620+紫杉醇(1mg/kg)(2.3%)和IRL1620+紫杉醇(5mg/kg)(15%)處理的大鼠(圖13)。這些效力研究的結(jié)果指出，與施用紫杉醇的經(jīng)鹽水處理的大鼠相比，IRL1620的施用顯著提高紫杉醇誘導(dǎo)的腫瘤體積減小。在5mg/kg劑量的紫杉醇中觀察到的增強(qiáng)的治療益處維持到最后一次給藥后30天。這表明腫瘤體積沒有復(fù)發(fā)，且IRL1620在增強(qiáng)紫杉醇效力中的作用一直維持穩(wěn)定到研究結(jié)束時(shí)。然而，鹽水處理之后用紫杉醇(l和5mg/kg)不產(chǎn)生腫瘤生長的這類顯著改變。另外，在用IRL1620和隨后用紫杉醇(5mg/kg)處理的大鼠組中，腫瘤多樣性被降低。因此，在紫杉醇(5mg/kg)之前施用IRL1620對紫杉醇效力具有顯著的影響。這通過腫瘤負(fù)荷、腫瘤消退百分比、未受影響的體重和多樣性的降低闡明。另外，在用IRL1620和隨后用紫杉醇(l和5mg/kg)處理的動物組中，與任何其他組相比，分別存在最初腫瘤2.3%和15%的完全消失。來自乳腺腫瘤模型的這些實(shí)施例中描述的實(shí)驗(yàn)清楚地顯示ETB受體激動劑IRL1620顯著地提高腫瘤血流量。IRL1620的施用產(chǎn)生腫瘤血流量的提高，而對照健康組織中的灌注未被改變。腫瘤灌注的提高持續(xù)3小時(shí)。在提高的灌注窗口期間施用[3司紫杉醇顯著地僅增加腫瘤組織但不增加其他器官中的[3司紫杉醇濃度。另外，該實(shí)施例中所述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供了施用IRL1620可刺激紫杉醇的抗腫瘤效力的證據(jù)。與對照大鼠相比，每隔兩天用紫杉醇(5mg/kg)處理總計(jì)5次給藥的大鼠中存在60.0%的腫瘤體積減小。然而，當(dāng)在紫杉醇最后給藥后一個(gè)月記錄時(shí)，與對照大鼠相比，在IRL1620施用后15分鐘施用紫杉醇將腫瘤體積減小268.9%。與單獨(dú)用紫杉醇處理的大鼠相比，施用了IRL1620的大鼠中存在130.4%的腫瘤體積減小。存在下述可能性提高的腫瘤灌注可能提高養(yǎng)分的可利用度，這可能有助于腫瘤生長。這些結(jié)果顯示與鹽水處理的大鼠相比，用IRL1620處理的大鼠的腫瘤體積和腫瘤多樣性不存在顯著的提高，表明單獨(dú)的IRL1620不對腫瘤體積和多樣性產(chǎn)生任何影響。前列腺腫瘤模型28實(shí)施例5.IRL1620對前列腺腫瘤灌注、生物分布和多柔比星與5-氟尿嘧啶效力的影響在證實(shí)了IRL1620能夠增強(qiáng)紫杉醇在乳腺腫瘤模型中的效力后，還檢查了其在前列腺腫瘤模型中的作用。特定地，檢查了IRL1620是否能夠增強(qiáng)多柔比星(DOX)和5-氟尿嘧啶(5-FU)在前列腺癌腫瘤模型中的抗癌作用。選擇體重為100-120克的五周齡Copenhagen患前列腺腫瘤大鼠(Harlan,Indianapolis,IN)用于所述前列腺腫瘤模型研究中。動物設(shè)施被置于受控的溫度(23±1。C)、濕度(50±10%)和12小時(shí)光/暗人工光照時(shí)間表(L0600-1800h)中。使大鼠每籠三只居住并無限制地給予食物和水。在獸醫(yī)檢査和開始實(shí)驗(yàn)之前允許大鼠對環(huán)境適應(yīng)至少一周。所有的操作和動物護(hù)理根據(jù)AnimalCareCommitteeoftheUniversityofIllinoisatChicago建立的f旨南進(jìn)行。動物設(shè)施根據(jù)FederalRegulations保養(yǎng)并由AmericanAssociationforAccreditationofLaboratoryAnimalCare認(rèn)可。IRL1620購自AmericanPeptide(Sunnyvale,CA)。["C]多柔比星鹽酸化物(["C]阿霉素)購自GEHealthcare(Buckinghamshire,UK)。氯胺酮和賽拉嗪購自PhoenixScientific,Inc.(St.Joseph,MO)。組織增溶劑(TS-2)得自RPICorp.(Chicago,IL)。使用得自ATCC(Manassas，VA)的JHU-4(MAT-LyLu)細(xì)胞在雄性Copenhagen大鼠中誘導(dǎo)前列腺腫瘤。見Gaddipati"a/.,JExpTherOncol,4(3):203-12(2004)，其通過參考并入本文。細(xì)胞在補(bǔ)充有胎牛血清(10%)的RPMI1640培養(yǎng)基中，于含5%<:02的37°<:下潮濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。從頸的背側(cè)剃除毛發(fā)，并通過皮下(s.c.)注射用100)Lll磷酸鹽緩沖鹽水中的10000JHU-4(MAT-LyLu)細(xì)胞接種動物。通過手動觸診監(jiān)測腫瘤的出現(xiàn)和位置，并用數(shù)字測徑器測量腫瘤直徑。當(dāng)腫瘤大小達(dá)到約200mm3時(shí)開始實(shí)驗(yàn)步驟。灌注研究。使用氯胺酮(100mg/kg)和賽拉嗪(2mg/kg)作為組合的腹膜內(nèi)注射將大鼠麻醉。將腫瘤區(qū)域周圍剃毛，并將動物置于加熱毯(37。C)上以最小化溫度變化。將腫瘤組織周圍的皮膚切開約3mm寬和約3mm29長，以暴露腫瘤。在暴露的腫瘤表面上應(yīng)用與PerifluxPF2b4000激光多普勒血流儀連接的標(biāo)準(zhǔn)模型光纖探針(MP3流量探針，MoorsInstruments,Devon,England)。時(shí)間常數(shù)設(shè)定為1.5秒，帶寬設(shè)定為4kHz。該方法測量激光(通量)中的多普勒頻移，其由紅細(xì)胞數(shù)和流速決定，并與給定體積的組織中的總血流量成比例。使用Polyview軟件獲得通量值。在施用鹽水或IRL1620之前獲得15分鐘的穩(wěn)定記錄基線。通過尾靜脈對動物施用總體積0.2ml的IRL1620(1、3或6nmol/kg)并記錄灌注3小時(shí)。如從圖14A和14B中可以看出，鹽水或1nmol/kgIRL1620的施用在患腫瘤的大鼠中不產(chǎn)生任何顯著的腫瘤血灌注改變。3nmol/kg或6nmol/kg的施用分別引起與基線相比102.8%和79.12%的腫瘤血灌注最大提高。與基線和鹽水處理的大鼠相比時(shí)，灌注的該提高在15、30和60分鐘是顯著的(p〈0.005)。因此，適當(dāng)劑量的IRL1620短暫地提高前列腺癌動物模型中腫瘤血灌注。生物分布研究。將患腫瘤的大鼠隨機(jī)分組(N-6/組)以通過尾靜脈接受終體積為0.2ml的鹽水或IRL1620(1、3或6nmol/kg)。然后在鹽水或IRL1620施用后15分鐘，來自每組的大鼠通過靜脈注射接受終體積1.0ml的["C]多柔比星(lmCi/rat)。檢查腫瘤、心、腦、腎、肝、肺、骨髓、前列腺、骨骼肌和脾中["C]多柔比星的濃度。具體地，將腫瘤和器官切成小片。將來自兩條腿的股骨分離并稱重，其中使用含組織增溶劑的注射器將骨髓沖掉。將約500mg組織或腫瘤置于獨(dú)立的含組織增溶劑(6ml)的管中，并在約5(TC的水浴中孵育。在組織或腫瘤溶解后將管從水浴中取出，并添加1.2ml的10%冰醋酸。然后將管的內(nèi)容物等分為3管，向每管中添加15ml液體閃爍混合物(SafetySolve,RPICorp,Chicago,IL)并保持過夜以便平衡。使用液體閃爍計(jì)數(shù)器(BeckmanCoulter,LS6500)計(jì)數(shù)管中的放射性。如從圖15中可以看出，1nmol/kgIRL1620的施用不對腫瘤或其他組織中["C]多柔比星的攝取產(chǎn)生任何顯著的改變。然而在接受3nmd/kgIRL1620(115.85%提高；p<O.Ol)或6nmol/kgIRL1620(80.02%提高；p<0.05)的那些大鼠中，腫瘤中「C]多柔比星的濃度與鹽水處理的大鼠相比顯著提高。與對照動物相比，沒有一種劑量的IRL1620對心、腦、腎、肝、肺、骨髓、前列腺、骨骼肌或脾中["c]多柔比星的積累產(chǎn)生顯著提高。因此，IRL1620能夠選擇性地提高化學(xué)治療劑到腫瘤組織的遞送。效力研究IRL1620對多柔比星O)OXV效力的影響在該研究中，IRL1620(N-琥珀酰-[Glu9,Alall,15]內(nèi)皮素片段8-21)得自AmericanPeptides(Sunnyvale,CA)。多柔比星鹽酸化物(阿霉素，2mg/ml溶液)購自BenVenueLaboratoriesInc.(Bedford,OH)。5-氟尿嘧啶(50mg/ml)購自CadliaPharmaceuticals(Ahmedabad,India)。氯胺酮和賽拉嗪購自PhoenixScientific,Inc.(St.Joseph,MO)。如前所述在五周齡雄性Copenhagen大鼠(Harlan，Indianapolis,IN)中誘導(dǎo)前列腺腫瘤。腫瘤大小達(dá)到約200mm3時(shí)開始實(shí)驗(yàn)步驟。將患腫瘤的動物隨機(jī)分為六組(8只大鼠/組)。第I組鹽水；第II組IRL1620(3nmol/kg);第III組載體(鹽水)+DOX(2.5mg/kg);第IV組載體(鹽水)+DOX(5mg/kg);第V組IRL1620(3nmol/kg)+DOX(2.5mg/kg);和第VI組IRL1620(3nmol/kg)+DOX(5mg/kg)。在鹽水中將DOX稀釋至1.0ml的終體積并在鹽水或IRL1620施用后15分鐘通過尾靜脈注射。給藥時(shí)間表是每隔兩天一次，總計(jì)4次給藥。每隔兩天監(jiān)測體重和腫瘤大小，直到最后一次給藥后12天。最后(第4次)給藥后12天處死動物。將腫瘤分離并稱重，并觀察組織的大體轉(zhuǎn)移。將組織和腫瘤在10%緩沖的甲醛溶液中防腐用于組織病理學(xué)分析。體重。在用鹽水或IRL1620單獨(dú)處理的大鼠組中存在體重的增加。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)單獨(dú)的鹽水或IRL1620動物的體重分別是152±6.97和148.8±2.52g，在研究的第19天其分別增加至178.8±4.7和175.72±2.35g。接受鹽水和DOX或IRL1620和DOX的大鼠顯示體重的減輕。第13天，在用鹽水+DOX(5mg/kg)和IRL1620+DOX(5mg/kg)處理的大鼠組中，體重的最大減輕分別為-8.46±3.88和-10.03±2.12。然而，在施用DOX的任何組之間，在任何時(shí)間點(diǎn)，未觀察到與處理開始時(shí)相比顯著的體重減輕(圖16A)。腫瘤體積。鹽水或IRL1620處理的大鼠的腫瘤體積快速增加，并且由于巨大的腫瘤負(fù)荷在第19天將這些組中的所有大鼠處死。所有其他組在第22天被處死。處死時(shí)鹽水或IRL1620處理的大鼠分別具有10166±957和11033±873mm3的腫瘤體積。鹽水+DOX(2.511^/]^)和鹽水+DOX(5mg/kg)處理的大鼠的腫瘤體積分別為9102±1442和4204±299mm3。IRL1620+DOX(2.5mg/kg)處理的大鼠記錄到了5544±845mm3的腫瘤體積。在用IRL1620+DOX(5mg/kg)處理的組中觀察到最小的腫瘤體積(1965±332mm3)。與鹽水+DOX(5mg/kg)處理的大鼠相比，用IRL1620十DOX(5mg/kg)處理的大鼠中腫瘤體積的減小在第10、13、16、19和22天是顯著的(圖16B)。腫瘤重量。鹽水、IRL1620和鹽水+DOX(2.5mg/kg)處理的大鼠處死后具有相似的腫瘤重量(分別為19.14±1.8、20.77±1.64和17.14±2.42g)。在第22天被處死后，用鹽水+DOX(5mg/kg);IRL1620+DOX(2.5mg/kg)和IRL1620+DOX(5mg/kg)處理的大鼠的腫瘤重量分別被降低至7.19±0.56、10.44士1.42和3.31土1.64g。鹽水+DOX(5mg/kg)和IRL1620+DOX(5mg/kg)處理的大鼠(p<0.005)之間存在腫瘤重量的顯著差異。這些研究證明IRL1620顯著提高DOX的抗癌效力(圖16C)。效力研究IRL1620對5-氟尿嘧啶(5-FU〗效力的影響在隨訪研究中進(jìn)行相同的步驟，不同之處是將患腫瘤的大鼠隨機(jī)分為以下六組(6只大鼠/組)以檢查IRL1620對5-FU效力的影響第I組-鹽水；第II組—IRL1620(3nmol/kg);第III組-載體(鹽水)+5-FU(25mg/kg);第IV組-載體(鹽水)+5-FU(50mg/kg);第V組-IRL1620(3nmol/kg)+5-FU(25mg/kg);禾口第VI組—IRL1620(3nmol/kg)+5-FU(50mg/kg)。將5-FU在鹽水中稀釋至1.0ml的終體積并在鹽水或IRL1620施用后3215分鐘通過尾靜脈注射。給藥時(shí)間表和步驟與上述DOX研究相同。體重。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)鹽水或IRL1620動物的體重分別是172±4.87和176.9±6.19g，在第16天其分別增加至200.3±2.57和202.2±7.28g。第16天鹽水或IRL1620動物的體重增加與實(shí)驗(yàn)開始時(shí)的差異百分比分別為16.17±1.64和14.19土1.66。其他組中大鼠的體重在處理開始時(shí)相似，并且對鹽水+5-FU(25mg/kg)、鹽水+5-FU(50mg/kg)、IRL1620+5-FU(25mg/kg)和IRL1620+5-FU(50mg/kg)而言分別為170.38士2.61、174.6±3.45、174.7士5.78和179.45±2.53g。然而，其間體重降低以下的量鹽水+5畫FU(25mg/kg):-5.46±3.39;鹽水+5-FU(50mg/kg):-10.97±2.18;IRL1620+5-FU(25mg/kg):-8.27±2.31:禾口IRL1620+50mg/kg:-11.20±2,41(圖17A)。腫瘤體積。鹽水或IRL1620處理的大鼠具有快速的腫瘤體積發(fā)展，并且由于巨大的腫瘤負(fù)荷在第16天將這些組中的所有大鼠處死。施用鹽水+5-FU(25mg/kg)和IRL1620+5-FU(25mg/kg)的大鼠腫瘤大小不存在顯著差異。然而，與鹽水+FU(50mg/kg)處理的大鼠相比，在第13、16、19和22天，用IRL1620+5-FU(50mg/kg)處理的大鼠的腫瘤體積存在一致的顯著減小(圖17B)。腫瘤重量。在第16天處死后，施用鹽水或IRL1620的大鼠腫瘤重量不存在顯著的差異(重量分別為17.92±2.01和19.50±2.37g)。與鹽水+5-FU(25mg/kg)處理的動物相比，用IRL1620+5-FU(25mg/kg)處理的大鼠腫瘤重量存在38.18%的降低。另外，IRL1620+5-FU(50mg/kg)和鹽水+5-FU(50mg/kg)處理的大鼠(p〈O.Ol)之間存在167.19%的腫瘤重量差異(圖17C)。這些結(jié)果證實(shí)IRL1620顯著地提高5-FU在減小腫瘤體積和腫瘤重量中的效力。這些研究共同證明，IRL1620在前列腺癌的動物模型中有效地增強(qiáng)腫瘤血灌注、提高化學(xué)治療劑到腫瘤的遞送并增強(qiáng)化學(xué)治療劑的效力。黑色素瘤模型實(shí)施例6.IRL1620對腫瘤灌注和紫杉醇生物分布的影響在所述黑色素瘤模型研究中使用雄性裸鼠。所有的操作和動物護(hù)理根進(jìn)行。動物設(shè)施保持在控制的溫度(23±1。C)、濕度(50±10%)和人工光照(L0600-1800h)下。動物設(shè)施根據(jù)FederalRegulations保養(yǎng)并由AmericanIRL1620(N-琥珀酰-[Glu9，Alall,15]內(nèi)皮素片段8-21)得自SigmaChemicalCo.(St.Louis,MO)。[3印紫杉醇購自購自MoravekBiochemicals(Brea,CA)。紫杉醇(6mg/ml溶液)購自BenVenueLaboratoriesInc.(Bedford,OH)。氯胺酮和賽拉嗪購自購自PhoenixScientific,Inc.(St.Joseph,MO)。組織增溶劑(TS-2)得自RPICorp.(Chicago,IL)。該研究使用細(xì)胞系接種的移植的黑色素瘤模型。用一百萬人黑色素瘤細(xì)胞(UISO-MEL-2)皮下接種小鼠。選擇具有約200-400mm3腫瘤體積的小鼠用于研究。灌注研究。使用氯胺酮(100mg/kg)和賽拉嗪(2mg/kg)作為組合的腹膜內(nèi)注射將小鼠(N-4/組)麻醉。將動物置于加熱毯(37。C)上以最小化溫度變化。在腫瘤周圍的皮膚上制造10mm長的切口。在暴露的腫瘤表面上應(yīng)用與PerifluxPF2b4000激光多普勒血流儀連接的標(biāo)準(zhǔn)模型光纖探針(MP3流量探針，MoorsInstruments,Devon,England)。時(shí)間常數(shù)設(shè)定為1.5秒，帶寬設(shè)定為4kHz。使用Polyview軟件獲得通量值。在通過尾靜脈施用鹽水或IRL1620(3nmol/kg)之前獲得15分鐘的穩(wěn)定記錄基線，并記錄灌注3小時(shí)。鹽水的施用不對黑色素瘤小鼠的腫瘤血灌注產(chǎn)生任何顯著改變。在IRL1620施用后30、60、90、120和150分鐘分別觀察到與基線相比154.4%、189.0%、198.1%、172.8%和94.07.12%的腫瘤灌注提高。因此，與鹽水處理的對照相比，IRL1620顯著地提高黑色素瘤小鼠中的腫瘤血灌注。該作用是短暫的，持續(xù)約2小時(shí)(圖18A和18B)。生物分布研究。使用氯胺酮(150mg/kg)和賽拉嗪(2mg/kg)作為組合的腹膜內(nèi)注射將小鼠麻醉。然后將動物隨機(jī)分組(N-4/組)，以通過尾靜脈接受終體積0.1mL的鹽水或IRL1620(3nmol/kg)。然后在鹽水或IRL162034施用后15分鐘時(shí)，來自每組的小鼠也靜脈內(nèi)接受了l.Oml終體積的、被稀釋至20:80[3司紫杉醇鹽水濃度的[3司紫杉醇(10mCi/小鼠，在50:50的CremophorEL和乙醇中)。施用["H]紫杉醇后3小時(shí)將動物處死。測定腫瘤、心、腎、月干、肺和脾中陽潔杉醇的濃度。將腫瘤和器官切成小片。將500mg組織或腫瘤置于獨(dú)立的含組織增溶劑(6ml)的管中，并在50'C水浴中孵育。在組織或腫瘤溶解后將管從水浴中取出，并添加1.2ml的10%冰醋酸。將管的內(nèi)容物等分為3管，向每管中添加15ml液體閃爍混合物(SafetySolve,RPICorp，Chicago,IL)并保持過夜以便平衡。使用液體閃爍計(jì)數(shù)器(BeckmanCoulter,LS6500)計(jì)數(shù)管中的放射性。如圖19中所示，與鹽水處理的小鼠相比，在IRL1620處理的小鼠中腫瘤[3司紫杉醇濃度顯著提高。在[SH]紫杉醇施用前15分鐘注射了鹽水和IRL1620的動物中，腫瘤[3印紫杉醇濃度分別為40.77和274.28nmol/g組織。與載體處理的小鼠相比，用IRL1620處理的動物中腫瘤[311]紫杉醇存在572.99%的提高。然而，與鹽水處理的動物相比，IRL1620施用不對[311]紫杉醇在心、腎、肝、肺或脾中的累積產(chǎn)生顯著增加。因此，IRL1620能夠顯著地增強(qiáng)紫杉醇到腫瘤組織的吸收和遞送，而不影響其到其他器官的遞送?？傊?，IRL1620可被用作腫瘤選擇性的血管舒張劑，并可被用于選擇性地提高化學(xué)治療劑的遞送和效力。目前的研究清楚地證明通過采取該治療策略，可在腫瘤組織中達(dá)到多倍的更高藥物濃度。最后，根據(jù)本發(fā)明也已提出ETA受體拮抗劑改善腫瘤血流量(Sonveaux"fl/.，CancerRes,64:3209(2004))并可被用于增強(qiáng)抗癌藥到腫瘤的遞送。含有本發(fā)明活性成分的藥物組合物適用于施用給人或其它哺乳動物。典型地，所述藥物組合物是無菌的，并不含有施用時(shí)會引起有害反應(yīng)的有毒的、致癌的或致突變的化合物。該藥物組合物的施用可在實(shí)體瘤發(fā)生之前、之中或之后進(jìn)行。本發(fā)明的方法可使用如上所述的活性成分或其生理學(xué)可接受的鹽、衍生物、前藥或溶劑化物完成?；钚猿煞挚勺鳛榧兓衔锸┯茫蜃鳛楹我环N或所有成分的藥學(xué)組合物施用。藥學(xué)組合物包括下述組合物，其中以達(dá)到其期望目的的有效數(shù)量施用活性成分。更特別地，"治療有效量"是指有效預(yù)防實(shí)體瘤發(fā)生、使其消退、延緩其發(fā)展或減小其尺寸的量。治療有效量的確定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力內(nèi)，特別是考慮到本文所提供的詳細(xì)公開內(nèi)容。"治療有效劑量"是指引起達(dá)到所期望效果的活性成分用量。這類活性成分的毒性和治療效力可在細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)動物中通過標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)操作確定，例如確定LD5Q(群體50%致死的劑量)和ED5Q(群體50%治療有效的劑量)。有毒效應(yīng)和治療效應(yīng)之間的劑量比例為治療指數(shù)，其被表示為LDso禾口EDso之間的比例。高治療指數(shù)是優(yōu)選的。獲得的數(shù)據(jù)可用于闡明用于人的劑量范圍?；钚猿煞值膭┝績?yōu)選位于包括幾乎沒有毒性或沒有毒性的ED5o的循環(huán)濃度范圍內(nèi)。劑量可在該范圍內(nèi)根據(jù)所使用的劑型和所使用的施用途徑改變。精確的配方和劑量由個(gè)體醫(yī)生考慮患者的條件決定。給藥量和間隔可被單獨(dú)調(diào)整，以提供足夠維持治療或預(yù)防效果的活性成分水平。所施用的藥學(xué)組合物的用量可取決于被治療的患者、患者的體重、痛苦的嚴(yán)重性、施用的方式和開處方的醫(yī)生的判斷?；钚猿煞挚蓡为?dú)施用，或與根據(jù)預(yù)期的施用途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐選擇的藥學(xué)載體混合施用。因此，可以使用一種或多種生理學(xué)可接受載體(包括賦形劑和輔料)以常規(guī)方式配制用于本發(fā)明用途的藥學(xué)組合物，所述載體是便于將活性成分加工為可藥學(xué)使用的制劑的。當(dāng)施用治療有效量的活性成分時(shí)，組合物可以是無熱原的、腸胃外可接受的水性溶液。這類具有合適的pH、等滲性、穩(wěn)定性等的腸胃外可接受溶液的配制屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員水平之內(nèi)。用于靜脈注射的優(yōu)選的組合物典型地會含有等滲載體，盡管該特征不是必需的。對獸醫(yī)用途而言，活性成分作為合適的可接受配方根據(jù)正常獸醫(yī)實(shí)踐施用。獸醫(yī)師可容易地確定最適合特定動物的給藥方案?？蓪?shí)施方案進(jìn)行多種改變和修飾，而不偏離本發(fā)明的范圍和精神使用，所述改變和修飾可按照不同于本文特定描述的方式來實(shí)踐。上述描述旨在用于說明而非限制。本發(fā)明的范圍僅由權(quán)利要求書確定。本文已使用的術(shù)語和表達(dá)作為術(shù)語的描述而非限制使用，并且在這類術(shù)語和表達(dá)的使用中不意欲排除所示和所述特征的等同或其部分，承認(rèn)多種修飾可能在本發(fā)明所要求的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明任何實(shí)施方案的任意一種或多種特征可以與本發(fā)明任意其它實(shí)施方案的任意一種或多種特征組合，而不偏離本發(fā)明的范圍。除非另有說明，用于說明書和權(quán)利要求書中的表達(dá)成分用量、性質(zhì)(如分子量)、反應(yīng)條件等的所有數(shù)字等應(yīng)理解為在所有情況下由術(shù)語"約"修飾。因此，除非指出反例，以下說明書和附加的權(quán)利要求書中公開的數(shù)量參數(shù)是近似值，其可根據(jù)本發(fā)明想要獲得的所需性質(zhì)而變化。至少，并不企圖限制將等同原則應(yīng)用于權(quán)利要求書的范圍，每個(gè)數(shù)量參數(shù)至少應(yīng)按照經(jīng)報(bào)導(dǎo)的有效數(shù)字的位數(shù)并通過應(yīng)用常規(guī)約數(shù)技術(shù)解釋。盡管公開本發(fā)明廣大范圍的數(shù)量范圍和參數(shù)為約數(shù)，但特定實(shí)施例中公開的數(shù)量值則是盡可能精確地報(bào)導(dǎo)的。然而，任何數(shù)量值固有地包含誤差，這是從它們各自檢測測量中發(fā)現(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)差必然地產(chǎn)生的。除非在本文另有說明或同上下文明顯抵觸，描述本發(fā)明的上下文中(特別是在以下的權(quán)利要求書上下文中)使用的術(shù)語"一個(gè)"("a"，"an")和"這個(gè)"("the")和類似的指代被解釋為包括單數(shù)和復(fù)數(shù)。對本文數(shù)值范圍的敘述僅意圖用作為引用落入該范圍的每個(gè)單獨(dú)的值的速記方法(shorthandmethod)。除非本文另有說明，每個(gè)單獨(dú)的值都被并入說明書，就像其被單獨(dú)地并入本文一樣。除非在本文另有說明或與上下文明顯抵觸，本文所述的所有方法可以以任何合適的順序進(jìn)行。本文所提供的任何和所有實(shí)例或舉例文字(例如"例如")的使用僅意欲用來更好地闡述本發(fā)明，而非對本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍設(shè)定限制。說明書中沒有提及的文字應(yīng)被解釋為指代實(shí)施本發(fā)明必需的任何不要求保護(hù)的元素。本文公開的備選元素或?qū)嵤┓桨傅姆纸M不應(yīng)解釋為限制。各組成員可被單獨(dú)提到或要求保護(hù)，或與本文發(fā)現(xiàn)的組的其它成員或其它元素任意組合。應(yīng)當(dāng)理解，由于便利和/或?qū)＠脑?，一組的一個(gè)或多個(gè)成員可以被包括進(jìn)一組中或從該組刪除。當(dāng)任何這類包括或刪除發(fā)生時(shí)，本申請文件被認(rèn)為含有經(jīng)改寫的組，以滿足對權(quán)利要求書中所用的所有馬庫什組的字37面支持。本文描述了根據(jù)本發(fā)明的某些實(shí)施方案，包括本發(fā)明的發(fā)明人已知的實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的最佳模式。當(dāng)然，本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)人員閱讀上述描述后會明白這些實(shí)施方案的變更。本發(fā)明人預(yù)期熟練的技術(shù)人員能適當(dāng)?shù)夭捎眠@類變更，且本發(fā)明人意欲使得本發(fā)明以與本文特定描述不同的方式應(yīng)用。因此，至少可適用的法律允許，本發(fā)明包括附加的權(quán)利要求書中所述的主體內(nèi)容的所有修飾和等價(jià)物。另外，除非本文另有說明或與上下文明顯抵觸，在其所有可能變化中，上述元件的任何組合由本發(fā)明所包括。另外，在本申請文件中，引用了大量專利和印刷出版物作為參考文獻(xiàn)。上述各參考文獻(xiàn)和印刷出版物通過引用其整體并入本文。最后，應(yīng)理解本文公開的本發(fā)明的實(shí)施方案僅用于闡述本發(fā)明的原則。其它可使用的修飾也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，通過示例而非限制的方式，可根據(jù)本文的教導(dǎo)利用本發(fā)明的備選形式。因此，本發(fā)明并非被限制為如精確地所示和所述的。權(quán)利要求1.有助于治療癌癥的方法，包括施用內(nèi)皮素B(ETB)激動劑和化學(xué)治療劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥是實(shí)體瘤。3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述實(shí)體瘤選自卵巢腫瘤、結(jié)腸腫瘤、卡波西肉瘤、乳腺腫瘤、黑色素瘤、前列腺腫瘤、腦脊膜瘤、肝腫瘤、乳腺分葉狀瘤及其組合。4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述ETV激動劑選自ET-1、ET-2、ET-3、BQ3020、IRL1620(N舊-[Glu9,Ala11,15]ET-l(8-21))、角蝰毒素56c、[Ala"3'"'i5]ET-l及其組合。5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化學(xué)治療劑選自阿霉素、喜樹堿、卡鉬、順鉑、柔紅霉素、多柔比星、a干擾素、/5干擾素、7千擾素、白介素2、伊立替康、多西紫杉醇、紫杉醇、拓?fù)涮婵怠?-氟尿嘧啶及其組合。6.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述ETB激動劑選擇性地提高對所述實(shí)體瘤的供血。7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中對所述腫瘤的供血的所述提高提高了所述化學(xué)治療劑至所述實(shí)體瘤的遞送。8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述ETB激動劑和所述化學(xué)治療劑基本上同時(shí)被施用。9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所述ETB激動劑和所述化學(xué)治療劑作為單一組合物被施用。10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述ETB激動劑和所述化學(xué)治療劑被先后施用。11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述化學(xué)治療劑在所述ETb激劫剤之前被施用，或所述ETB激動劑在所述化學(xué)治療劑之前被施用。12.包含化學(xué)治療劑、ETB激動劑和任選的賦形劑的組合物。13.包含組合物和指導(dǎo)信息的制品，所述組合物含有ETB激動劑，所述指導(dǎo)信息指示將所述組合物與化學(xué)治療劑一起施用以治療實(shí)體瘤。14.根據(jù)權(quán)利要求13的制品，其還包含所述化學(xué)治療劑。15.根據(jù)權(quán)利要求14的制品，其中所述ETB激動劑和所述化學(xué)治療劑是同一組合物的部分、作為獨(dú)立的組合物提供或兩種情況兼有。16.根據(jù)權(quán)利要求14的制品，其中所述ETB激動劑選自ET-1、ET-2、ET-3、BQ3020、IRL1620(N儒-[Glu9,Ala1U5]ET-l(8-21))、角蝰毒素56c、[Ala1'3'u'15]ET-1及其組合。17.根據(jù)權(quán)利要求14的制品，其中所述ETB激動劑是IRL1620。18.根據(jù)權(quán)利要求14的制品，其中所述化學(xué)治療劑選自阿霉素、喜樹堿、卡鉑、順鉑、柔紅霉素、多柔比星、a干擾素、^干擾素、7干擾素、白介素2、伊立替康、多西紫杉醇、紫杉醇、拓?fù)涮婵怠?-氟尿嘧啶及其組合。19.根據(jù)權(quán)利要求14的制品，其中所述化學(xué)治療劑是紫杉醇。20.根據(jù)權(quán)利要求14的制品，其中所述ETb激幼剤是IRL1620且所述化學(xué)治療劑選自紫杉醇、多柔比星、5-氟尿嘧啶及其組合。全文摘要本發(fā)明公開了有助于治療癌癥(包括實(shí)體瘤)的方法、組合物和制品。該方法、組合物和制品可利用內(nèi)皮素B(ET_B)激動劑增強(qiáng)化學(xué)治療劑的遞送和得到的效力。文檔編號A61K31/337GK101522186SQ200780028808公開日2009年9月2日申請日期2007年7月20日優(yōu)先權(quán)日2006年8月2日發(fā)明者古魯·雷迪,路吉·萊納茲,阿尼爾·古拉蒂申請人:光譜醫(yī)藥公司;伊利諾伊大學(xué)評議會