專利名稱：：酪蛋白復(fù)合物的制作方法酪蛋白復(fù)合物本發(fā)明涉及酪蛋白復(fù)合物。更精確地，本發(fā)明涉及包含酪蛋白和白藜蘆醇的復(fù)合物、其制造方法、其用途和包含它們的組合物。優(yōu)選地，包含酪蛋白和白藜蘆醇的復(fù)合物是酪蛋白白藜蘆醇復(fù)合物。系統(tǒng)命名為3，4，,5-三羥基二苯乙烯的白藜蘆醇是一種已知的、天然存在的化合物，其由于有價值的生物學(xué)特性和藥理學(xué)作用而在過去數(shù)年間獲得了大量的關(guān)注。已報道白藜蘆醇顯示許多治療性質(zhì)以及疾病預(yù)防性質(zhì)，包括導(dǎo)致所謂的"法蘭西悖論"(FrenchParadox)的那些性質(zhì)。法蘭西悖論是下述事實在以含有高水平脂肪和醇的地中海膳食為生的人群中，未觀察到預(yù)期的癌癥和心臟病的增加。白藜蘆醇在多種細(xì)胞和動物實驗中已顯示例如不僅抑制皮膚腫瘤和白血病，而且抑制血小板聚集和血小板凝固。另外，白藜蘆醇已被證實是血管舒張劑、抗微生物劑和殺真菌劑。最近公開的數(shù)據(jù)表明白藜蘆醇能夠延長以高脂肪膳食飼養(yǎng)的小鼠壽命。因此，白藜蘆醇越來越成為有下述用途的化合物，其不僅適用于預(yù)防和治療特定疾病和綜合征，而且適用于在生理、心理上和更多方面普遍地改善哺乳動物(優(yōu)選地為人)的健康狀態(tài)。這導(dǎo)致人們需要制造穩(wěn)定(物理、化學(xué)、顏色、口味)形式的白藜聲醇和具有長保質(zhì)期和改進(jìn)的溶解度(特別是在水性介質(zhì)中改進(jìn)的溶解度)的配制物形式的白藜蘆醇，從而允許其在例如食物、飼料、藥物和化妝品等領(lǐng)域中(特別是在飲料中)廣泛應(yīng)用。白藜蘆醇在水中具有非常低的溶解度/分散度，這使得難以(如果不是不可能的話)制備飲料工業(yè)中常用的在長時間段中具有良好穩(wěn)定性的濃縮儲存溶液，所述儲存溶液用于制造具有約10-20mg/240ml白藜蘆醇濃度的最終澄清溶液。本發(fā)明的一個目的是克服這些困難并提供下述物理形式的白藜蘆醇，所述物理形式允許其在許多
技術(shù)領(lǐng)域：
中，特別是在食品和飲料工業(yè)中廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)在驚人地發(fā)現(xiàn)可通過使用與酪蛋白復(fù)合物形式的白藜蘆醇來克服這些困難。因此，本發(fā)明的主要方面涉及白藜蘆醇與酪蛋白的復(fù)合物。本文以其最廣泛的含義使用術(shù)語"白藜蘆醇"，包括白藜蘆醇自身、其反式以及順式形式、生理學(xué)可接受的衍生物、代謝產(chǎn)物及其類似物。在一個優(yōu)選的實施方案中，術(shù)語"白藜戸醇"包括由通式I包括的化合物，其中A表示碳-碳單鍵或雙鍵，后者可以是反式或順式的，Rl、R2、R3、R4、R5和R6彼此獨立地表示氫、羥基、醚化的羥基或酯化的羥基。優(yōu)選其中A為雙鍵(-CI^CH-)的化合物I。盡管符號A表示的碳-碳雙鍵可以是反式或順式的，但是上式I被理解為也包括順式/反式的混合物。然而，其中A為反式碳-碳鍵的式I的化合物是優(yōu)選的。經(jīng)酯化或醚化的羥基可衍生自具有1到26個碳原子的、未經(jīng)取代的或經(jīng)取代的、直鏈或支鏈的烷基，或衍生自具有1到26個碳原子的、未經(jīng)取代的或經(jīng)取代的、直鏈或支鏈的脂肪族、芳香脂肪族(araliphatic)或芳香族羧酸。經(jīng)醚化的羥基還可以是糖苷基，經(jīng)酯化的羥基還可以是葡糖苷酸或硫酸根。其中A為-C&CH-的式I的化合物的例子是白藜蘆醇(Rl、R3和R5二氫，R2、R4和R6=羥基)、白皮杉醇(piceatannol，R3和R5=氫，Rl、R2、R4和R6=羥基)，和丹葉大黃素(rhapontigenin,R5=氫，Rl、R3、R4和R6=羥基，和R2=甲氧基)。其中A為-CH2-CH2-的式I的化合物的例子是二氫白藜蘆醇(Rl、R3和R5=氫；R2、R4和R6-羥基)、二氫白皮杉醇(R3和R5-氫，Rl、R2、R4和R6-羥基)和川斯汀(tristin,R3和R5-氫；Rl、R2、R4和R6-甲氧基)。這些化合物是公知的和可商業(yè)獲得的，或可以根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法獲得。就本發(fā)明的目的而言，白藜蘆醇可以是天然的或合成的。在兩種情況下反式異構(gòu)體均是主導(dǎo)的，在后一情況下幾乎是唯一的。白藜戸醇的代謝產(chǎn)物是例如二氫白藜蘆醇、白皮杉醇、二氫白皮杉醇和川斯汀(3-甲基-二氫白皮杉醇)。本發(fā)明的白藜蘆醇組分可使用經(jīng)典的化學(xué)合成法或微生物學(xué)方法(包括基因工程和轉(zhuǎn)化體)來合成或半合成制備，或可以是天然來源的，這表示其以或多或少被濃縮和純化的形式得自天然來源，例如葡萄籽、花生或虎杖提取物。另外，白藜盧醇可作為單一活性化合物使用，或作為上文定義的兩種或多種化合物的混合物使用。本文使用術(shù)語"酪蛋白"是指本領(lǐng)域技術(shù)人員已知命名為酪蛋白的乳蛋白級分的所有成員，其包括a-、/3-、7-、k-和X-酪蛋白作為亞組，其單獨存在或者是其天然存在或合成制備的混合物的形式。在這些亞組中，存在大量遺傳變異，其取決于作為乳來源的動物類型和品種。就本發(fā)明而言，來自所有種類哺乳動物(包括人)的乳均可用作酪蛋白的來源。優(yōu)選的來源是來自奶牛的乳。除了具有特定的氨基酸序列和形成二聚體、三聚體和更高級寡聚物的趨勢這些特征以外，酪蛋白可帶有不同數(shù)量的磷酸基團(tuán)和碳水化合物基團(tuán)。碳水化合物基團(tuán)中有半乳糖、半乳糖胺和N-乙酰-神經(jīng)氨酸基團(tuán)。本文使用的術(shù)語"酪蛋白"還包括酪蛋白與堿的鹽，其中包括與堿金屬(鈉、鉀)和堿土金屬(鈣)的鹽，并優(yōu)選銨鹽。通常作為三聚體或更高級寡聚物存在的k-酪蛋白(其中肽鏈通過硫橋連接)，是存在鈣離子時在天然存在的乳濃度下唯一可溶的主要酪蛋白組分。另外，zc-酪蛋白可通過構(gòu)建復(fù)合物保護(hù)可被鈣離子沉淀的那些酪蛋白級分免于沉淀。7-酪蛋白是乳蛋白水解酶對3-酪蛋白的降解產(chǎn)物，而V酪蛋白主要含有a-酪蛋白的片段，所述片段可通過用纖溶酶(一種堿性奶牛蛋白酶)在體外孵育of-酪蛋白獲得。因此，本發(fā)明使用的術(shù)語"酪蛋白"也涵蓋通過水解獲得的酪蛋白片段或水解產(chǎn)物，所述水解包括全長鏈酪蛋白的酶切割。盡管酶切割是位點選擇性的切割，一般產(chǎn)生明確定義的片段，但是在酸性或堿性條件下的水解也可產(chǎn)生更短肽鏈的較不明確定義的混合物。水6解程度(DH)可顯著地變化，并可具有1%和70%之間的任何值，優(yōu)選地在1%和10%、15%、20%、25%、30%或35%之間的任何值，這表示以各個百分比表示的數(shù)量的肽鍵斷裂。在仔細(xì)控制的水解降解條件下，可獲得具有典型分子量分布的肽混合物。高度有營養(yǎng)并且也適合在具有降低的變應(yīng)原物質(zhì)含量的嬰兒配方中用作蛋白質(zhì)來源的酪蛋白水解產(chǎn)物的一個例子是PEPTIGENIF-2050ofArlaFoodsIngredients,Viby,丹麥，其由具有低苦味的短鏈肽組成，通過仔細(xì)控制的酶降解獲得。其DH為22-27，且其平均MW(道爾頓)為850-1200(少于1500:81,7%;1500—3500:17.2%;3500—6000:l.l%(w/w))。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，使用天然存在的酪蛋白及其水解產(chǎn)物。適用于本發(fā)明實踐的許多不同種類的上述酪蛋白可商業(yè)獲得并且以不同的商標(biāo)為人所知。另一方面，根據(jù)公知的經(jīng)典方法可如下獲得酪蛋白在35—50°C范圍內(nèi)的溫度下和4.2-4.6的pH下，用酸(例如HC1、H2S04、H3P04、乳酸)從脫脂乳中沉淀，用產(chǎn)乳酸的微生物發(fā)酵或添加蛋白水解酶(胃蛋白酶或凝乳酶)，分離沉淀物，洗滌并干燥?？赏ㄟ^將酸性酪蛋白溶液用氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鈣溶液中和至pH6.7獲得酪蛋白的堿金屬鹽和堿土金屬鹽(即酪蛋白酸鹽)?？缮虡I(yè)獲得的酪蛋白酸鉀的一個例子是來自AriaFoodIngredients,Viby，丹麥的MIPRODAN55，其通過酪蛋白的酸沉淀、直接中和和噴霧干燥從新鮮的經(jīng)巴氏消毒的脫脂乳中制造。本發(fā)明的酪蛋白復(fù)合物中白藜蘆醇:酪蛋白的重量比在約0.1:99.9-50:50的范圍內(nèi)，優(yōu)選地在l:98-1:2的范圍內(nèi)，并可以是例如3:97、5:95或15:85。本發(fā)明的又一方面是制造上文定義的酪蛋白復(fù)合物的方法，其為水性溶液(優(yōu)選地是濃縮的)或干物質(zhì)的形式。該方法可以以本身已知的方式進(jìn)行，并包括將白藜蘆醇的溶液或分散液(優(yōu)選地在白藜蘆醇在其中具有顯著的溶解度的可與水混合的有機(jī)溶劑中，或在這類溶劑與水的混合物中)與酪蛋白的水性溶液以期望的重量比在合適的混合設(shè)備中(需要時在加熱下)混合，并且需要時將得到的溶液轉(zhuǎn)化為濃縮的水性溶液或干粉?；蛘?，可簡單地向含酪蛋白的組合物中添加白藜蘆醇，從而形成白藜蘆醇-酪蛋白復(fù)合物。術(shù)語"濃縮的溶液"表示其中白藜蘆醇的濃度比非復(fù)合的形式中更高。可與水混合的有機(jī)溶劑是極性溶劑如單元、二元或多元醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇等，或甘油)，酮如丙酮，或甚至二甲基甲酰胺。優(yōu)選生理學(xué)可接受的有機(jī)溶劑和批準(zhǔn)用于食品和飼料技術(shù)的溶劑。優(yōu)選地，在攪拌下將白藜蘆醇溶液緩慢添加至水性酪蛋白溶液?？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法(例如通過汽化或蒸發(fā))去除有機(jī)溶劑并將剩余的水性溶液濃縮，需要時隨后在合適的設(shè)備中通過公知的干燥方法(例如對流、接觸、冷凍或噴霧干燥)將濃縮物轉(zhuǎn)化為干粉，需要時同時或隨后進(jìn)行碎裂，例如碾磨。在復(fù)合物的離散粉末顆粒的情況下，顆粒平均大小或直徑在從5-2000/mi的范圍內(nèi)。在分散液中，尤其是在水性分散液中，初級顆粒(primaryparticle,即未聚集的顆粒)大小通常在50-3000/mi的范圍內(nèi)，優(yōu)選低于250nm，即100-250nm或50-250nm的范圍內(nèi)。藥片應(yīng)用的優(yōu)選顆粒大小為100-850/mi。本發(fā)明又一方面涉及提高白藜蘆醇在水性環(huán)境中溶解度/分散度和穩(wěn)定性的方法，該方法將白藜蘆醇以酪蛋白復(fù)合物的形式添加至環(huán)境中，或?qū)邹继J醇作為非復(fù)合的化合物添加至含酪蛋白的環(huán)境中，或?qū)⒗业鞍滋砑又梁邹紤醮嫉沫h(huán)境中。水性環(huán)境可以是水性溶液或含水的組合物。含酪蛋白的環(huán)境包括含有酪蛋白或富含酪蛋白的產(chǎn)物?？梢杂门c已知用于白藜蘆醇的相同方式來使用本發(fā)明白藜盧醇的酪蛋白復(fù)合物，并且本發(fā)明白藜蘆醇的酪蛋白復(fù)合物可用于已知用于白藜蘆醇的相同應(yīng)用形式和配制物中，本發(fā)明白藜蘆醇的酪蛋白復(fù)合物可用作具有文獻(xiàn)中描述的多種有益活性的試劑，所述活性包括其改善哺乳動物(尤其是人)一般生理和/或心理狀態(tài)的能力。因此，本發(fā)明還涉及包含白藜蘆醇的酪蛋白復(fù)合物的組合物，所述組合物是固體和分散的/溶解的形式，例如是自由流動的粉末或分散液/溶液，優(yōu)選地為水性分散液/溶液，所述組合物在藥物和化妝品制劑中和在食品或詞料補劑中(包括飲料以及藥物和化妝品制劑、食品和飼料補劑和食品和飼料自身，其含有這些復(fù)合物作為單一活性成分或者與一種或多種其他生理學(xué)活性成分組合)用作活性劑。本發(fā)明在一個優(yōu)選的方面涉及以補充營養(yǎng)的用量含有本發(fā)明的白藜蘆醇酪蛋白復(fù)合物的飲料，所述復(fù)合物是穩(wěn)定溶液(即不含ringing或沉淀)的形式，優(yōu)選地是光學(xué)澄清溶液的形式。這類用量在20mg/1-2000mg/l的范圍內(nèi)。術(shù)語"飲料"包括所有種類的可飲用水，例如天然或人工的礦物水、軟飲、礦物飲品、運動飲品、果汁、水果賓治、果茶(fruitnectar)，其為濃縮或稀釋的形式。飲料可含有二氧化碳、水果和果味香料、水溶性維生素以及脂溶性維生素和具有營養(yǎng)重要性的礦物質(zhì)和微量元素，其均為人工或天然來源。舉例而言，果汁和果味香料中的水果包括以下水果葡萄、梨、百香果、菠蘿、香蕉、杏、橙、檸檬、酸橙、葡萄柚、蘋果、可樂(cola)、蔓越莓、番茄、芒果、木瓜、紅橘、油桃、李子、櫻桃、樹莓和胡蘿卜。這些水果和香料的任何組合是可能的，包括巧克力和其他非水果香料。術(shù)語"飲料"還包括任何種類的乳，并可用本發(fā)明的白藜蘆醇復(fù)合物強化。本發(fā)明營養(yǎng)組合物(即以作為活性成分的白藜戸醇為基礎(chǔ)的蓋侖制劑和化妝品制劑和食品、飼料和飲料補劑)的制造可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法使用生理學(xué)可接受的配方進(jìn)行。本發(fā)明的營養(yǎng)組合物含有下述用量的白藜蘆醇，所述用量足夠?qū)Τ赡耆?體重約70kg)施用從約0.5mg/天到約2000mg/天，優(yōu)選地從約5mg/天到約500mg/天的劑量。因此，如果營養(yǎng)藥物性組合物是食品或飲料，則其中含有的白藜蘆醇的含量適當(dāng)?shù)卦诿糠輳?.2mg到約500mg的范圍內(nèi)。如果營養(yǎng)藥物性組合物是藥物配制物，則這類配制物可含有每固體劑量單位(例如每粒膠囊或藥片)從約0.5mg到約500mg，或從每日劑量約0.5mg到每日劑量約2000mg的液體配制物。以下的實施例更詳細(xì)地闡述本發(fā)明。9實施例1溶液A:將27.1g具有7.54。/。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55,AriaFoods,DK)溶于181.2g去離子水中。溶液B:將1.5g白藜戶醇(DSMNutritionalProducts,CH)在40。C下溶于70g乙醇中，并向溶液中添加35g去離子水。在4(TC攪拌條件下，將208.3g溶液A緩慢添加至106.5g溶液B中。然后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醇。用噴霧干燥器(NiroMobileMinor2000，Copenhagen,DK)以209。C的入口溫度和105。C的出口溫度將剩余的水性混合物(約208g)干燥，產(chǎn)生以UV分析為基礎(chǔ)測定具有約5.1%白藜蘆醇含量的粉末。將1.035g該粉末分散在去離子水中，得到500ml分散液，所述分散液在3天后具有127-130nm的平均顆粒大小、44.8NTU的濁度和119ppm的白藜蘆醇濃度。實施例2溶液A:將34.4g具有6.44。/。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55,AriaFoods,DK)溶于235.6g去離子水中。溶液B:將3.68g白藜蘆醇(DSMNutritionalProducts,CH)在室溫下溶于156g乙醇中。將159.7g溶液B在攪拌下添加至270g溶液A中。將混合物置于旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器的圓底燒瓶中并在55'C水浴中旋轉(zhuǎn)1小時，不使用真空。然后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)在真空下去除乙醇。用噴霧干燥器(NiroMobileMinor2000，Copenhagen,DK)以199"的入口溫度和約92。C的出口溫度將剩余的水性混合物(約250g)干燥，產(chǎn)生具有約10%白藜蘆醇含量的粉末。將0.21g該粉末分散在200ml水中。巴氏消毒并在室溫下在黑暗中儲存4周后分析樣品，白藜蘆醇濃度為89.2ppm。實施例3溶液A:將34.4g具有6.44y。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55,AriaFoods,Copenhagen,DK)溶于235.6g去離子水中。10溶液B:將3.68g白藜戸醇(DSMNutritionalProducts,CH)在室溫下溶于156g乙醇中。將159.7g溶液B在攪拌下緩慢添加至270g溶液A中。將混合物置于旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器的圓底燒瓶中并在5(TC水浴中旋轉(zhuǎn)1小時，不使用真空。然后通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)在真空下去除混合物中的乙醇和大部分水，得到含約6.05%白藜聲醇的樹膠狀材料。將1.050g該材料分散于5(TC去離子水中，得到1000ml的分散液。冷卻至室溫后，用0.1NHC1將pH調(diào)節(jié)至6.5。然后將混合物填充在玻璃瓶中，并于7(TC下巴氏消毒20分鐘。將樣品于室溫下在黑暗中儲存6周。顆粒大小、濁度和白藜蘆醇濃度(通過UV測定)分別被測定為215nm、25.6NTU和63.3ppm。實施例4溶液A:將15.3g具有6.44。/。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55,AriaFoods,Copenhagen,DK)溶于236.7g去離子水中。溶液B:將3.68g白藜戸醇(DSMNutritionalProducts,CH)在室溫下溶于156g乙醇中。將159.7g溶液B在攪拌下緩慢添加至252g溶液A中。將混合物置于旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器的圓底燒瓶中并在5(TC水浴中旋轉(zhuǎn)1小時，不使用真空。然后通過5(TC下的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)在真空下去除混合物中的乙醇和水。在10%濕度烘箱和然后在真空烤箱中進(jìn)一步干燥殘余物直到干燥，然后研磨成粉末。將1.050g該材料分散于200ml去離子水中，然后將混合物在7(TC下巴氏消毒20分鐘。將分散液置于玻璃瓶中并在黑暗中儲存。一天后，顆粒大小、濁度和白藜蘆醇濃度(通過UV測定)分別被測定為259nm、11.4NTU和100.6ppm。實施例5溶液A:將11.55g具有6.44Q/。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55，AriaFoods,Copenhagen,DK)溶于278g去離子水中。溶液B:將3.68g白藜戶醇(DSMNutritionalProducts,CH)在室溫下溶ii于156g乙醇中。將159.7g溶液B在攪拌下緩慢添加至289.6g溶液A中。將得到的混合物置于旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器的圓底燒瓶中并在5(TC水浴中旋轉(zhuǎn)1小時，不使用真空。然后通過5(TC下的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)在真空(15mbar)下去除混合物中的乙醇和水。在真空烤箱中于4(TC下將殘余物進(jìn)一步干燥直到干燥，并研磨成粉末。將0.263g粉末分散于1000ml70。C的去離子水中。將200ml樣品裝入玻璃瓶中并在7(TC加熱20分鐘(未完全分散)，并在90。C再加熱20分鐘，直到完全分散。顆粒大小、濁度和白藜蘆醇濃度(通過UV測定)分別被測定為244.9nm、13.8NTU和106.5卯m。實施例6溶液A:將30.2g具有6.44。/。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55，AriaFoods,Copenhagen,DK)溶于250g去離子水中。將159.7g溶液A與1.84g白藜蘆醇混合。將混合物在圓底燒瓶中于75。C水浴中加熱1.5小時，將材料轉(zhuǎn)移至燒杯并在90°-95°C水浴中磁性攪拌加熱2小時。所得糊劑在真空烤箱中于4(TC干燥過夜。粉末含有約4.82%白藜蘆醇。將2.178g粉末分散在1000ml去離子水中，調(diào)節(jié)至pH6.5，然后在75'C下巴氏消毒20分鐘。顆粒大小為213nm，濁度為33.3NTU，白藜蘆醇濃度為107ppm。實施例7溶液A:將60.6g具有6.7P/。水分含量的酪蛋白水解產(chǎn)物(Peptigen⑧IF-2050,ArlaFoods，DK)溶于235g去離子水中。溶液B:將3.68g白藜戶醇(DSMNutritionalProducts,CH)在室溫下溶于156g乙醇中。將159.68g溶液B在攪拌下緩慢添加至295.6g溶液A中。將混合物轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶并在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器中于5(TC水浴中旋轉(zhuǎn)1小時，不使用真空，然后在真空中干燥。將干燥的材料研磨成粉末。12將粉末(20g)分散在去離子水(180g,pH6.8)中并攪拌15分鐘。向2268g去離子水中添加32g所得分散液，并用稀釋的碳酸氫鈉溶液將6.2的pH調(diào)節(jié)至6.8。將分散液在95'C水浴中加熱20分鐘。冷卻至室溫后，獲得含70ppm白藜蘆醇的澄清白藜蘆醇分散液。在25'C儲存1周后，溶液仍保持澄清并仍然含有70ppm白藜蘆醇。實施例8溶液A:將60.4g具有6.44。/。水分含量的酪蛋白酸鉀(Miprodan⑧55,AriaFoods,Copenhagen,DK)溶于500g去離子水中。溶液B:將3.68g白藜蘆醇(DSMNutritionalProducts,CH)在室溫下溶于156g乙醇中。將159.68g溶液B在攪拌下緩慢添加至溶液A(560，4g)中。將混合物轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶并在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器中于5(TC水浴中旋轉(zhuǎn)1小時，不使用真空，然后在真空中干燥。將干燥的材料在真空烤箱中于4(TC下進(jìn)一步干燥過夜。將經(jīng)烤箱干燥的材料研磨成粉末。將粉末(2.5g)分散在去離子水(47.5g)中并攪拌。在3000rpm下將分散液離心5分鐘(SigmaCentriftige6-10,SigmaLaborzentrifiigenGmbH,Germany)去除不能分散的材料。凍干上清液得到1.7g粉末。將粉末(lg)懸浮于去離子水(9g)中得到10%的均勻分散液。將分散液的樣品置于試管中并在室溫儲存3小時，然后在5'C儲存1天。從試管的上部取出小樣，然后在混合后取樣。從試管上部取出的樣品和混合后取出的樣品中分別含有0.422%和0.425%的白藜蘆醇。該結(jié)果表明分散液穩(wěn)定性。高濃度分散液可便利地用于藥物和化妝品、食品和飼料(特別是飲料)中的多種應(yīng)用中。該實施例顯示白藜蘆醇復(fù)合物優(yōu)于未復(fù)合的白藜蘆醇(純白藜蘆醇)的優(yōu)點。高于0.005%(使用類似分散條件時可能少得多)的未復(fù)合白藜蘆醇的分散液會導(dǎo)致白藜蘆醇沉淀。實施例913使用的白藜蘆醇-酪蛋白酸鹽復(fù)合物是實施例8中所述的經(jīng)烤箱干燥的材料(未通過離心去除不可分散的材料)。引入晶體白藜蘆醇用于比較。將復(fù)合的白藜戸醇和晶體白藜戸醇分散在pH6.8或3.0的去離子水中，得到60和80ppm濃度的最終目標(biāo)分散液。使用稀釋的HC1或NaHC03通過pH調(diào)節(jié)達(dá)到期望的pH。將樣品在水浴中加熱至80°C，然后在8(TC保持1分鐘。將樣品在黑暗中儲存于25。C和5。C下。儲存期間，一些樣品中白藜蘆醇結(jié)晶并沉淀。通過UV方法測定上清液中的白藜蘆醇濃度，結(jié)果在下文中顯示。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>拌。b)果汁混合物向483.3g橙汁濃縮物(65。Brix)和173.3gof檸檬汁濃縮物(45。Brix)中添加328.4g去離子水。柔和攪拌并允許果汁濃縮物水合。添加在轉(zhuǎn)子-定子-勻化器中預(yù)乳化的10%儲存溶液形式的10g/3-胡蘿卜素(來自DSM的10%CWS)和5g油性橙味香料。在高壓勻化器中勻化果汁混合物。c)飲料制備將0.2g苯甲酸鈉溶于100ml去離子水中。之后在攪拌下依次加入156.2g糖漿(64。Brix)、0.4g抗壞血酸精細(xì)粉末、5g檸檬酸(50。/。w/w溶液)、10g果膠溶液(2。/。w/w)、30g果汁混合物和13.3g10%白藜蘆醇復(fù)合物儲存溶液。然后用自來水或碳酸水將糖漿補足為l升飲料。實施例11制備含10%果汁的飲料a)白藜蘆醇復(fù)合物的10%儲存溶液向450g去離子水中添加50g白藜戸醇復(fù)合物(6%白藜戶醇)并攪拌。b)果汁混合物向483.3g橙汁濃縮物(65。Brix)和173.3gof檸檬汁濃縮物(45。Brix)中添加328.4g去離子水。柔和攪拌并允許果汁濃縮物水合。添加在轉(zhuǎn)子-定子-勻化器中預(yù)乳化的10%儲存溶液形式的10g/5-胡蘿卜素(來自DSM的10%CWS)和5g油性橙味香料。添加444.4g10%白藜蘆醇復(fù)合物儲存溶液。在高壓勻化器中勻化果汁混合物。c)飲料制備將0.2g苯甲酸鈉溶于100ml去離子水中。之后在攪拌下依次添加156.2g糖漿(64。Brix)、0.4g抗壞血酸精細(xì)粉末、5g檸檬酸水溶液(50%w/w)、10g果膠溶液(2。/。w/w)和30g果汁混合物。然后用自來水或碳酸水將糖漿補足為1升飲料。實施例12制備接近水的飲品將0.2g苯甲酸鈉溶于100ml去離子水中。添加0.4g抗壞血酸、7.2g糖、2g檸檬酸(50%w/w水溶液)、0.1g水溶性姜汁(gingerale)香料和0.2g水溶性檸檬香料并攪拌。添加13.3g10%白藜^醇儲存溶液(見實施例10a)并攪拌。用自來水或碳酸水或礦物水補足1升飲料。權(quán)利要求1.包含白藜蘆醇和酪蛋白的復(fù)合物。2.權(quán)利要求1的復(fù)合物，其中所述酪蛋白是酪蛋白堿金屬鹽、酪蛋白堿土金屬鹽或酪蛋白銨鹽或酪蛋白水解產(chǎn)物。3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的復(fù)合物，其中白藜蘆醇:酪蛋白組分的重量比為0.1:99.9到50:50。4.權(quán)利要求1-3中任一項的復(fù)合物，其為平均顆粒直徑從5到2000Hm的離散粉末顆粒形式。5.權(quán)利要求1-4中任一項的復(fù)合物，其作為食物、飼料的補劑或作為藥物或化妝品制劑的組分。6.權(quán)利要求1-3中任一項的復(fù)合物，其為分散液的形式。7.權(quán)利要求6的復(fù)合物，其中初級顆粒大小在50-3000nm的范圍內(nèi)。8.包含權(quán)利要求1-7中任一項的復(fù)合物的組合物。9.包含如權(quán)利要求1-4中任一項所述的復(fù)合物的食物或飼料。10.包含如權(quán)利要求1-4和6-7中任一項所述的復(fù)合物的飲料。11.藥物或化妝品制劑，其包含如權(quán)利要求1-4中任一項所述的復(fù)合物和生理學(xué)可以接受的載體。12.制造權(quán)利要求1-8中任一項所述復(fù)合物或組合物的方法，其包括將白藜蘆醇或白藜蘆醇溶液或白藜蘆醇分散液與酪蛋白的水溶液混合，并且如果需要的話，將得到的溶液轉(zhuǎn)化為濃縮溶液或干粉，或簡單地向含酪蛋白的組合物中添加白藜戸醇，其中所述白藜蘆醇溶液或白藜戸醇分散液優(yōu)選地在能與水混溶的、對白藜蘆醇具有顯著的溶解度的有機(jī)溶劑中或在這類溶劑與水的混合物中。13.提高白藜戸醇在水性環(huán)境中的溶解度/分散度和穩(wěn)定性的方法，該方法通過將白藜蘆醇以酪蛋白復(fù)合物的形式添加至水性環(huán)境，或?qū)邹继J醇作為非復(fù)合的化合物添加至含酪蛋白的環(huán)境，或?qū)⒗业鞍滋砑又梁邹紤醮嫉沫h(huán)境。14.權(quán)利要求1-4中任一項的復(fù)合物作為食物或飼料補劑的用途。15.權(quán)利要求l-4中任一項的復(fù)合物作為藥物活性劑的用途或在化妝品制劑中的用途。16.權(quán)利要求l-4中任一項的復(fù)合物用于改善哺乳動物生理或心理狀態(tài)的用途。17.說明書所述的本發(fā)明，特別是參考實施例描述的本發(fā)明。全文摘要本發(fā)明涉及包含白藜蘆醇和酪蛋白的復(fù)合物、其制造方法、其用途和包含它們的組合物。文檔編號A61K31/05GK101500549SQ200780029491公開日2009年8月5日申請日期2007年8月2日優(yōu)先權(quán)日2006年8月9日發(fā)明者齊-程·陳申請人:帝斯曼知識產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司