專(zhuān)利名稱(chēng)：N末端取代的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及刺激患者(例如哺乳動(dòng)物如人類(lèi))胃腸蠕動(dòng)的方法。該方法包括給予所述罹患胃腸蠕動(dòng)障礙或處于該風(fēng)險(xiǎn)的受試者治療上有效量的根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ IDNO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物的步驟。
一方面，本發(fā)明提供治療胃腸蠕動(dòng)障礙病癥的方法，通過(guò)給予治療有效量的適于減弱此種胃腸病癥的生長(zhǎng)素釋放肽肽類(lèi)似物或其前藥，其中所述類(lèi)似物或前藥包括根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛酰基)17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。本發(fā)明的方法用于促進(jìn)患者(例如哺乳動(dòng)物如人類(lèi))胃和胃腸蠕動(dòng)，并且如此，用于治療因改善的胃和胃腸蠕動(dòng)而獲益的病癥，例如胃食管反流病(GERD)、腸易激惹綜合癥(IBS)、便秘、腸梗阻、嘔吐、胃輕癱、結(jié)腸假性梗阻等。
另一方面，本發(fā)明提供用于促進(jìn)患者(例如哺乳動(dòng)物如人類(lèi))胃和胃腸蠕動(dòng)的方法，通過(guò)給予治療有效量的根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選給予根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物，其中胃蠕動(dòng)障礙或腸梗阻與給予阿片劑(例如但不限于嗎啡)有關(guān)。
另一方面，本發(fā)明提供治療腸梗阻、胃輕癱或嘔吐的方法，通過(guò)給予治療有效量的適于減弱腸梗阻、嘔吐或胃輕癱的根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選給予根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。又另一方面，由本發(fā)明方法治療的病癥是腸梗阻，例如手術(shù)后腸梗阻并且該手術(shù)可能是胃腸手術(shù)如腹部手術(shù)。手術(shù)后的腸梗阻可能發(fā)生于腸道的任何部位，例如，胃、小腸或大腸。手術(shù)后的腸梗阻可能伴有嗎啡的存在。另一方面，腸梗阻由除胃腸手術(shù)以外的因素所造成并且可發(fā)生于腸道的任何部位，例如，胃、小腸或大腸。本發(fā)明的又另一方面，由本發(fā)明方法治療的病癥是嘔吐，例如與給予抗癌化療劑、懷孕、貪食癥或厭食癥相關(guān)或由給予抗癌化學(xué)治療劑、懷孕、貪食癥或厭食癥引起的嘔吐。又另一方面，由本發(fā)明方法治療的病癥是胃輕癱。例如糖尿病胃輕癱。所述糖尿病可為I型或II型糖尿病。
另一方面，本發(fā)明提供對(duì)患者進(jìn)行手術(shù)的方法，其包括向所述患者給予治療有效量的根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。就在前述的實(shí)施方式中，進(jìn)行手術(shù)的方法包括確定需要所述手術(shù)的患者。
進(jìn)行手術(shù)的方法的一個(gè)實(shí)施方式中，該手術(shù)可直接或間接操作胃腸道。可獲益于本發(fā)明方法的手術(shù)類(lèi)型包括但不限于剖腹手術(shù)、移植手術(shù)、對(duì)泌尿生殖系統(tǒng)的手術(shù)、對(duì)淋巴系統(tǒng)的手術(shù)、對(duì)呼吸系統(tǒng)的手術(shù)和治療腹腔內(nèi)任何器官或組織癌癥的手術(shù)。可以在手術(shù)前、手術(shù)期間或手術(shù)后或其任何組合給予用于參與進(jìn)行手術(shù)方法的化合物，所述化合物為根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中的一或多種，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。
另一方面，本發(fā)明提供對(duì)需要預(yù)防手術(shù)后腸梗阻的患者進(jìn)行預(yù)防的方法，其包括在手術(shù)前、手術(shù)期間或手術(shù)后或以其任何組合方式向所述患者給予治療有效量的根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛酰基)17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。
另一方面，本發(fā)明提供對(duì)需要預(yù)防反流病、嘔吐、胃輕癱、腸易激惹綜合癥、便秘、或結(jié)腸假性梗阻的患者進(jìn)行預(yù)防的方法，其包括給予所述患者治療有效量的根據(jù)上述通式的一或多種化合物，更優(yōu)選根據(jù)如本文上面所定義，第1組、第2組、第3組、第4組，(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)和/或(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)中一或多種的化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。嘔吐可能與抗癌化療劑治療、懷孕、貪食癥或厭食癥相關(guān)。該胃輕癱可能與糖尿病相關(guān)；所述糖尿病可為I型或II型糖尿病。
根據(jù)上述通式(I)的化合物的第二最優(yōu)選組(通篇稱(chēng)作第5組化合物)，由根據(jù)下述通式的化合物組成 (Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO1) (1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO1) (Ac-Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO8)和 (Ac-1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQID NO8) 或其藥學(xué)可接受鹽。
一方面，優(yōu)選的化合物是Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO1)或其藥學(xué)可接受鹽。另一方面，優(yōu)選的化合物是(1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ IDNO1)或其藥學(xué)可接受鹽。另一方面，優(yōu)選的化合物是(Ac-Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO8)或其藥學(xué)可接受鹽。另一方面，優(yōu)選的化合物是(Ac-1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO8)或其藥學(xué)可接受鹽。
另一方面，本發(fā)明提供藥物組合物，其包括有效量的上述通式的化合物，更優(yōu)選根據(jù)如本文上面所定義的第5組化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，和其藥學(xué)可接受載體或稀釋劑。
一方面，本發(fā)明提供篩選能夠結(jié)合GHS受體的化合物的方法，包括測(cè)量化合物影響如本文上面所定義的第5組化合物或其藥學(xué)可接受鹽與受體、受體片段、包括該受體片段的多肽或多肽的衍生物結(jié)合的能力。
另一方面，本發(fā)明提供在需要的受試者中引起來(lái)自生長(zhǎng)素釋放肽受體應(yīng)答的方法，其包括給予該受試者治療有效量的根據(jù)如本文上面所定義的第5組生長(zhǎng)素釋放肽抗拮劑類(lèi)似物化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物。
另一方面，本發(fā)明提供在受試者中實(shí)現(xiàn)有益效果的方法，包括給予該受試者有效量的根據(jù)如本文上面所定義，第5組的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物，其中有效量對(duì)于產(chǎn)生有助于治愈或降低疾病或紊亂嚴(yán)重性或降低疾病或紊亂發(fā)作或嚴(yán)重性的可能性的有益效果是有效的。一方面，該有益效果幫助治愈或降低疾病或紊亂的嚴(yán)重性或降低疾病或紊亂發(fā)作或嚴(yán)重性的可能性。
GH分泌的過(guò)于豐富在臨床上造成多種疾病和/或病癥。本發(fā)明另一方面的特征為在需要的受試者中抑制GH分泌的方法，包括給予有效量的根據(jù)如本文上面所定義第5組的一或多種化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物，其中所述有效量是至少足以產(chǎn)生GH分泌可檢測(cè)的減少的量，并且優(yōu)選足以在患者中實(shí)現(xiàn)有益效果的量。
也可以使用如本文上面所定義第5組的生長(zhǎng)素釋放肽抗拮劑化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物以在患者中實(shí)現(xiàn)有益效果。前述緊鄰的方法的優(yōu)選方法是其中所述GH分泌的抑制表明促進(jìn)體重減輕和/或食欲減少、保持理想體重、扭轉(zhuǎn)肥胖癥、治療糖尿病及其并發(fā)癥，例如視網(wǎng)膜病變、和/或改善心血管紊亂。過(guò)重是不同疾病的成因，該疾病包括但不限于高血壓、糖尿病、血脂異常、心血管疾病、膽結(jié)石形成、骨關(guān)節(jié)炎、普-威綜合癥和/或某些形式的癌癥。已經(jīng)證明了當(dāng)對(duì)于此類(lèi)疾病進(jìn)行所開(kāi)出處方的部分治療時(shí)，體重減輕減少此類(lèi)疾病的可能性。
另一方面，本發(fā)明提供在需要抑制生長(zhǎng)激素分泌的受試者中進(jìn)行抑制的方法，包括給予受試者有效量的根據(jù)如本文上面所定義的第5組生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物，或其藥學(xué)可接受鹽，或其如本文定義的組合物的步驟，其中所述有效量是至少足以產(chǎn)生生長(zhǎng)激素分泌可檢測(cè)的減少的量。
前述緊鄰方面的一方面，生長(zhǎng)激素分泌的抑制指示用于治療特征為過(guò)量生長(zhǎng)激素分泌的疾病或病癥，用于促進(jìn)過(guò)重體重的減輕，用于促進(jìn)食欲減少，用于促進(jìn)體重保持，用于治療肥胖癥，用于治療糖尿病，用于治療糖尿病的并發(fā)癥(包括視網(wǎng)膜病變)，或用于治療心血管紊亂。另一方面，過(guò)重是包括高血壓、糖尿病、血脂異常、心血管疾病、膽結(jié)石、骨關(guān)節(jié)炎和癌癥的疾病或病癥的成因。預(yù)期體重減輕的促進(jìn)將降低此類(lèi)疾病或病癥的可能性。另一方面，促進(jìn)體重減輕包括所述疾病或病癥治療的至少一部分。另一方面，過(guò)重是由于普-威綜合癥。又另一方面，治療肥胖癥。
可通過(guò)任何可接受的醫(yī)學(xué)手段將有效量的一或多種根據(jù)及適合用于實(shí)踐本發(fā)明任何方面的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物及其組合物給予需要其的受試者，所述手段包括但不限于靜脈、皮下或口服方法，或緩釋制劑的植入。
從本文提供的包括不同實(shí)施例的其他說(shuō)明可顯見(jiàn)本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)。提供的實(shí)施例說(shuō)明用于實(shí)踐本發(fā)明的不同組分和方法學(xué)。該實(shí)施例不限制所主張的發(fā)明。基于本發(fā)明公開(kāi)內(nèi)容，熟練技術(shù)人員可以鑒別并使用可用于實(shí)踐本發(fā)明的其他組分和方法學(xué)。
發(fā)明詳細(xì)說(shuō)明 本發(fā)明的特征為抗蛋白質(zhì)水解但在GHS受體處促進(jìn)(即，激動(dòng)劑)或抑制(即，抗拮劑)生長(zhǎng)素釋放肽活性的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物。如上面詳述，本發(fā)明的類(lèi)似物用于治療受試者的多種疾病。
如本文所使用，“受試者”指哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物，包括例如而不限于人、大鼠、小鼠或家畜。提到受試者并不必然意味著存在疾病或紊亂。術(shù)語(yǔ)“受試者”包括例如作為實(shí)驗(yàn)部分的正在劑量給予生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物的哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物，正在治療以幫助減輕疾病或紊亂的哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物，和正預(yù)防性地治療以延遲或預(yù)防疾病或紊亂發(fā)作的哺乳動(dòng)物或非哺乳動(dòng)物。
不論配制或給藥途徑，本發(fā)明化合物或組合物的“治療可接受量”是引起受試者中期望的生物反應(yīng)的量。治療量的生物效果可在生物體的許多水平上發(fā)生并測(cè)量。例如，該治療量的生物效果可在細(xì)胞水平發(fā)生并通過(guò)測(cè)量與生長(zhǎng)素釋放肽和/或生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物結(jié)合的受體的反應(yīng)而測(cè)量，或者該治療量的生物效果可在系統(tǒng)水平發(fā)生并測(cè)量，例如影響循環(huán)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素水平的增加/減少。該治療量的生物效果可在生物體水平發(fā)生并測(cè)量，例如患者癥狀或者疾病或病癥的發(fā)展的減輕。不論配制或給藥途徑，治療可接受量的本發(fā)明化合物或組合物可造成受試者一或多種生物反應(yīng)。在體外系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)本發(fā)明化合物或組合物的情況下，化合物或組合物的治療可接受量可視為在所選體外系統(tǒng)中給出可測(cè)量反應(yīng)的量。
本文所述的生長(zhǎng)素釋放肽激動(dòng)劑和抗拮劑，例如第1、2、3、4和/或5組中的那些可用于增加、減少和/或保持需要其的受試者的體重。通常測(cè)量體重并用體重來(lái)確定身體質(zhì)量指數(shù)(“BMI”)。通過(guò)計(jì)算體重(kg)除以身高(m)的平方來(lái)確定受試者的BMI值。本領(lǐng)域眾所周知BMI“正常”范圍為19-22。身體質(zhì)量指數(shù)落在“正?！狈秶碌哪切﹤€(gè)體更易感疾病并且某些有益的醫(yī)學(xué)治療如化學(xué)治療對(duì)于具有低于正常的BMI的個(gè)體不太有效。
如本文所使用，肥胖受試者或哺乳動(dòng)物的特征為具有比所述受試者正常體重高近20％、近25％、近30％或更高的體重?？赏ㄟ^(guò)在早先一個(gè)時(shí)間點(diǎn)(例如當(dāng)生長(zhǎng)素釋放肽水平為正常時(shí))比較受試者的體重來(lái)確定正常體重，或者通過(guò)與類(lèi)似年齡和/或病癥的其他受試者的平均值比較受試者的生長(zhǎng)素釋放肽水平而確定。
如本文所使用，過(guò)重受試者或哺乳動(dòng)物的特征為具有比所述受試者正常體重高近5％至高近20％的體重?？赏ㄟ^(guò)在早先一個(gè)時(shí)間點(diǎn)(例如當(dāng)生長(zhǎng)素釋放肽水平為正常時(shí))比較受試者的體重來(lái)確定正常體重，或者通過(guò)與類(lèi)似年齡和/或病癥的其他受試者的平均值比較受試者的生長(zhǎng)素釋放肽水平而確定。
如本文所使用，正常受試者或哺乳動(dòng)物的特征為具有比所述受試者正常體重高出近5％至低于近5％的體重?？赏ㄟ^(guò)在早先一個(gè)時(shí)間點(diǎn)(例如當(dāng)生長(zhǎng)素釋放肽水平為正常時(shí))比較受試者的體重來(lái)確定正常體重，或者通過(guò)與類(lèi)似年齡和/或病癥的其他受試者的平均值比較受試者的生長(zhǎng)素釋放肽水平而確定。正常體重受試者可具有近19-22范圍的BMI。
如本文所使用，清瘦受試者或哺乳動(dòng)物的特征為具有比所述受試者正常體重低近5％至30％或者甚至低50％的體重。可通過(guò)在早先一時(shí)間點(diǎn)(例如當(dāng)生長(zhǎng)素釋放肽水平為正常時(shí))比較受試者的體重來(lái)確定正常體重，或者通過(guò)與類(lèi)似年齡和/或病癥的其他受試者的平均值比較受試者的生長(zhǎng)素釋放肽水平而確定。
如本文所使用，術(shù)語(yǔ)“治療”和“進(jìn)行治療”包括減輕、治愈和預(yù)防性治療。
如本文所使用，“可測(cè)量的”指生物效果是可重復(fù)的并且與檢測(cè)方法的基線(xiàn)變化顯著不同。
如本文所使用，“蛋白水解”指通過(guò)由蛋白水解的細(xì)胞酶(稱(chēng)作蛋白酶)水解肽鍵而對(duì)肽的直接降解(即，切割)。
除非另有說(shuō)明，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。此外，本文提及的所有出版物、專(zhuān)利申請(qǐng)、專(zhuān)利和其他文獻(xiàn)通過(guò)引用合并入本文。
本發(fā)明化合物中存在的某些氨基酸可以且在本文中表示如下 命名和縮寫(xiě) 符號(hào) 含義 Abuα-氨基丁酸 Acc1-氨基-1-環(huán)(C3-C9)烷基羧酸 A3c 1-氨基-1-環(huán)丙烷羧酸 A4c 1-氨基-1-環(huán)丁烷羧酸 A5c 1-氨基-1-環(huán)戊烷羧酸 A6c 1-氨基-1-環(huán)己烷羧酸 Act 表示結(jié)構(gòu)
Aib α-氨基異丁酸 Aic 2-氨基茚滿(mǎn)-2-羧酸 Ala或A 丙氨酸 β-Ala β-丙氨酸 Apc 表示結(jié)構(gòu)
Arg或R 精氨酸 hArg 高精氨酸 Asn或N 天冬酰胺 Asp或D 天冬氨酸 Ava 5-氨基-正戊酸 Cha β-環(huán)己基丙氨酸 Cys或C 半胱氨酸 hCys 高同型半胱氨酸 Dab 2，4-二氨基丁酸 Dap 2，3-二氨基丙酸 Dhp 3，4-脫氫脯氨酸 Dmt 5，5-二甲基噻唑烷-4-羧酸 2-Fua β-(2-呋喃)-丙氨酸 Gln或Q谷氨酰胺 Glu或E谷氨酸 Gly或G甘氨酸 His或H組氨酸 3-Hyp 反-3-羥基-L-脯氨酸，即(2S，3S)-3-羥基吡咯烷-2-羧 酸 4-Hyp 4-羥脯氨酸，即(2S，4R)-4-羥基吡咯烷-2-羧酸 Ile或I異亮氨酸 Inc 二氫吲哚-2-羧酸 Inp 六氫異煙酸 Ktp 4-酮脯氨酸 Leu或L亮氨酸 hLeu 高亮氨酸 Lys或K賴(lài)氨酸 Met或M甲硫氨酸 1-Nal β-(1-萘基)-L-丙氨酸 2-Nal β-(2-萘基)-L-丙氨酸 Nle 正亮氨酸 Nva 正纈氨酸 Oic 八氫吲哚-2-羧酸 Orn 鳥(niǎo)氨酸 2-Pal β-(2-吡啶)丙氨酸 3-Pal β-(3-吡啶)丙氨酸 4-Pal β-(4-吡啶)丙氨酸 Phe或F苯丙氨酸 hPhe 高苯丙氨酸 Pip 哌啶酸 Pro或P脯氨酸 Ser或S絲氨酸 Taz β-(4-噻唑)丙氨酸，即
2-Thi β-(2-噻吩)丙氨酸 3-Thi β-(3-噻吩)丙氨酸 Thp 4-氨基-4-羧基四氫吡喃 Thr或T蘇氨酸 Thz 噻唑烷-4-羧酸 Tic 1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸 Tle 叔-亮氨酸 Trp或W色氨酸 Tyr或Y酪氨酸 Val或V纈氨酸 當(dāng)氨基酸具有同分異構(gòu)型時(shí)，除非另有明確說(shuō)明，否則表示的是氨基酸的L型。
用于定義肽的命名是本領(lǐng)域通常使用的，其中N末端氨基出現(xiàn)在左側(cè)而C末端羧基出現(xiàn)在右側(cè)，即，代表-NH-CI(R’)-CO-的結(jié)構(gòu)，其中R和R’獨(dú)立地，各為氫或氨基酸側(cè)鏈(例如，對(duì)于Ala，R＝CH3而R’＝H)，或者R和R’可相連以形成環(huán)體系。對(duì)于N末端氨基酸，縮寫(xiě)代表結(jié)構(gòu)
或者當(dāng)N末端氨基酸是六氫異煙酸(Inp)時(shí)，該縮寫(xiě)代表結(jié)構(gòu)
本發(fā)明的肽在此也以另一形式表示，例如(Aib2)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2，其中天然序列的取代氨基酸置于第一組括號(hào)內(nèi)(例如，在人生長(zhǎng)素釋放肽中Aib2取代Ser2)。第二組括號(hào)內(nèi)的數(shù)字指存在于肽中的氨基酸數(shù)(例如，人生長(zhǎng)素釋放肽(1-18)指人類(lèi)生長(zhǎng)素釋放肽肽序列的1-18位氨基酸)。例如，(Aib2)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2中指定的“NH2”表明肽的C末端被酰胺化。(Aib2)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)或者(Aib2)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-OH表明C末端是游離酸。在“生長(zhǎng)素釋放肽”之前插入小寫(xiě)字母以表明其來(lái)源或起源，即“h”表明該生長(zhǎng)素釋放肽是在人類(lèi)中發(fā)現(xiàn)的生長(zhǎng)素釋放肽的同系物。
除非另有說(shuō)明，以L-對(duì)映體提供那些具有手性中心的氨基酸。提及的“其衍生物”指經(jīng)修飾的氨基酸，例如相應(yīng)的D-氨基酸、N-烷基-氨基酸、β-氨基酸或標(biāo)記的氨基酸。
如本文所使用，Acc包括選自1-氨基-1-環(huán)丙烷羧酸(A3c)；1-氨基-1-環(huán)丁烷羧酸(A4c)；1-氨基-1-環(huán)戊烷羧酸(A5c)；1-氨基-1-環(huán)己烷羧酸(A6c)；1-氨基-1-環(huán)庚烷羧酸(A7c)；1-氨基-1-環(huán)辛烷羧酸(A8c)和1-氨基-1-環(huán)壬烷羧酸(A9c)的氨基酸。
“?；敝窻″-C(O)-，其中R″是H、烷基、取代的烷基、雜烷基、取代的雜烷基、烯基、取代的烯基、芳基、烷基芳基或取代的烷基芳基。
“烷基”指含有一或多個(gè)碳原子的烴基，其中如果存在多個(gè)碳原子則通過(guò)單鍵連接。該烷烴基可以是直鏈的或含有一或多個(gè)支鏈或環(huán)形基團(tuán)的。
“取代的烷基”指其中烴基的一或多個(gè)氫原子由一或多個(gè)取代基所取替的烷基，該取代基選自鹵素(即，氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、由1-6個(gè)鹵素取代的-C1-20烷基、-CF3、-OCH3、-OCF3和-(CH2)0-20-COOH。不同實(shí)施方式中，存在1、2、3或4個(gè)取代基。-(CH2)0-20-COOH的存在導(dǎo)致烷基酸的產(chǎn)生。含有-(CH2)0-20-COOH或由-(CH2)0-20-COOH組成的烷基酸的實(shí)例包括但不限于2-降莰烷乙酸、叔丁酸和3-環(huán)戊基丙酸。
“雜烷基”指其中烴基中的一或多個(gè)碳原子由一或多個(gè)下述基團(tuán)所取替的烷基氨基、酰氨基、-O-、-S-或羰基。不同實(shí)施方式中，存在1或2個(gè)雜原子。
“取代的雜烷基”指其中烴基的一或多個(gè)氫原子由一或多個(gè)取代基所代替的雜烷基，該取代基選自鹵素(即，氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、由1-6個(gè)鹵素取代的-C1-20烷基、-CF3、-OCH3、-OCF3和-(CH2)0-20-COOH。不同實(shí)施方式中，存在1、2、3或4個(gè)取代基。
“烯基”指由兩或多個(gè)碳組成的烴基，其中存在一或多個(gè)碳-碳雙鍵。烯烴基可為直鏈的或含有一或多個(gè)支鏈或環(huán)基團(tuán)的。
“取代的烯基”指其中一或多個(gè)氫由一或多個(gè)取代基所代替的烯基，該取代基選自鹵素(即氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NHCH3、-NO2、由1-6個(gè)鹵素取代的-C1-20烷基、-CF3、-OCH3、-OCF3和-CH2)0-20-COOH。不同實(shí)施方式中，存在1、2、3或4個(gè)取代基。
“芳基”指任選含有至少一個(gè)具有共軛π-電子系，含有至多兩個(gè)共軛或稠環(huán)系的芳香基團(tuán)。芳基，包括但不限于羧基芳基、雜環(huán)芳基和聯(lián)芳基基團(tuán)。優(yōu)選地，芳基是5或6元環(huán)。對(duì)于雜環(huán)芳基的優(yōu)選原子是一或多個(gè)硫、氧和/或氮原子。芳基的實(shí)例包括但不限于苯基、1-萘基、2-萘基、吲哚、喹啉、2-咪唑和9-蒽。芳基取代基選自-C1-20烷基、-C1-20烷氧基、鹵素(即，氟、氯、溴和碘)、-OH、-CN、-SH、-NH2、-NO2、由1-5個(gè)鹵素取代的-C1-20烷基、-CF3、-OCF3和-(CH2)0-20-COOH。不同實(shí)施方式中，芳基含有0、1、2、3或4個(gè)取代基。
術(shù)語(yǔ)“鹵代”包含氟、氯、溴和碘。
術(shù)語(yǔ)“(C1-C12)烴部分”包含烷基、烯基和炔基，并且在烯基和炔基的情況下是C2-C12。
“烷基芳基”指與“芳基”相連的“烷基”。
Glu(NH-己基)指
Ser(正辛酰基)或Ser(C(O)-庚基)指
N末端氨基酸Inp和Apc的結(jié)構(gòu) Inp
1-Apc
4-Apc
本發(fā)明包括非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體以及它們的消旋及溶解的對(duì)映體的純形式。生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物可以含有D-氨基酸、L-氨基酸或其任何組合。優(yōu)選地，生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物中存在的氨基酸是L-對(duì)映體。
優(yōu)選的本發(fā)明類(lèi)似物的衍生物包括D-氨基酸、N-烷基-氨基酸、β-氨基酸和/或一或多種標(biāo)記的氨基酸(包括D-氨基酸、N-烷基-氨基酸或β-氨基酸的標(biāo)記形式)。標(biāo)記的衍生物表示具有可檢測(cè)標(biāo)記的氨基酸或氨基酸衍生物的改動(dòng)?？蓹z測(cè)標(biāo)記的實(shí)例包括發(fā)光的、酶的和放射性標(biāo)記。標(biāo)記類(lèi)型以及標(biāo)記位置都可以影響類(lèi)似物活性。應(yīng)選擇并定位標(biāo)記以便基本上不改變生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物對(duì)GHS受體的活性?？梢允褂脺y(cè)量生長(zhǎng)素釋放肽活性和/或結(jié)合的測(cè)定來(lái)確定具體標(biāo)記和位置對(duì)生長(zhǎng)素釋放肽活性的影響。
與C末端羧基共價(jià)結(jié)合的保護(hù)基團(tuán)在體內(nèi)條件下降低羧基末端的反應(yīng)性。羧基末端保護(hù)基團(tuán)優(yōu)選連接至最后一個(gè)氨基酸的α-羰基上。優(yōu)選的羧基末端保護(hù)基團(tuán)包括酰胺、甲基酰胺和乙基酰胺。
本文使用的某些其它縮寫(xiě)如下所定義 命名和縮寫(xiě)

合成的方法 可以使用本文實(shí)施例中公開(kāi)的技術(shù)以及本領(lǐng)域公知的技術(shù)來(lái)生產(chǎn)本發(fā)明的化合物。例如，可以化學(xué)或生化合成及修飾生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物的多肽區(qū)。Ausubel，Current Protocols in Molecular Biology，John Wiley，1987-1998和Sambrook等人，在Molecular Cloning，A LaboratoryManual，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989中提供了涉及將核酸導(dǎo)入細(xì)胞并表達(dá)核酸的生化合成技術(shù)的實(shí)例。用于化學(xué)合成多肽的技術(shù)也是本領(lǐng)域公知的(Vincent，Peptide and Protein Drug Delivery，New York，N.Y.，Dekker，1990)。例如，可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)固相肽合成來(lái)制備本發(fā)明的肽(Stewart，J.M.等人，Solid Phase Synthesis，Pierce ChemicalCo.，第二版，1984)。
可通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法將上述通式的取代基R2連接到N末端氨基酸的自由胺上。例如，可使用還原烷基化來(lái)連接烷基，例如(C1-C30)烷基。也可使用還原烷基化來(lái)連接羥烷基，例如(C1-C30)羥烷基，其中自由羥基由叔丁酯所保護(hù)。通過(guò)將完全樹(shù)脂與3摩爾當(dāng)量的二氯甲烷中的游離酸和二異丙基碳二亞胺混合1h，通過(guò)偶聯(lián)游離酸(例如E1COOH)可將?；?例如COE1)連接至N末端氨基酸的游離胺上。如果游離酸含有自由羥基，例如p-羥基苯丙酸，那么應(yīng)當(dāng)用額外的3摩爾當(dāng)量HOBT進(jìn)行偶聯(lián)。
當(dāng)R1是NH-X2-CH2-CONH2，(即，Z0＝CONH2)，由偶聯(lián)至Rink酰胺-MBHA樹(shù)脂(獲自

，San Diego，CA的酰胺-4-甲基二苯甲基胺)的Fmoc-HN-X2-CH2-COOH來(lái)起始肽的合成。如果R1是NH-X2-CH2-COOH(即，Z0-COOH)，由偶聯(lián)至Wang樹(shù)脂的Fmoc-HN-X2-CH2-COOH來(lái)起始肽的合成。
含有A5c、A6c和/或Aib的本發(fā)明生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物的合成中，對(duì)于這些殘基和緊接其之后的殘基的偶聯(lián)時(shí)間是2小時(shí)。
下面提供的實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的不同特征。該實(shí)施例也說(shuō)明用于實(shí)踐本發(fā)明的有用的方法學(xué)。這些實(shí)施例不限制所主張的發(fā)明。
實(shí)施例2(Ac-1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO8) 使用芴甲氧羰基(Fmoc)化學(xué)品在433A肽合成儀(獲自Applied

，F(xiàn)oster City，CA，U.S.A.)上合成側(cè)鏈保護(hù)的Fmoc-(Aib2，10，Glu3)人生長(zhǎng)素釋放肽(2-28)-Rink酰胺-MBHA樹(shù)脂。使用0.64mmol/g帶取代的Rink酰胺-4-甲基二苯甲基胺(MBHA)樹(shù)脂(獲自

，San Diego，CA，U.S.A.)。所用Fmoc氨基酸(獲自

，San Jose，CA，U.S.A.)為Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Glu(tBu)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH和Fmoc-Val-OH。此外，在A3使用Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)-OH(獲自

，San Diego，CA，U.S.A.)。以0.1mmol規(guī)模進(jìn)行合成。通過(guò)用在N-甲基吡咯烷酮(NMP)中的20％的哌啶處理30分鐘來(lái)除去Fmoc基團(tuán)。每個(gè)偶聯(lián)步驟中，首先用2mLNMP中的0.45M 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，2，3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽/1-羥基-苯并三唑(HBTU/HOBT)溶液預(yù)活化Fmoc氨基酸(3eq，0.3mmol)。為了活化氨基酸酯，加入1mL二異丙基乙胺(DIEA)和1mL NMP。對(duì)ABI 433A肽合成儀設(shè)定程序來(lái)進(jìn)行下面反應(yīng) (1)用NMP洗滌； (2)用在NMP中的20％哌啶處理30分鐘，除去Fmoc保護(hù)基團(tuán)； (3)用NMP洗滌；和 (4)與預(yù)活化的Fmoc氨基酸偶聯(lián)1-3小時(shí)。
根據(jù)標(biāo)題肽序列依次偶聯(lián)該樹(shù)脂。肽鏈組裝后，使用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和二氯甲烷(DCM)徹底洗滌該樹(shù)脂。
在433A上組裝肽鏈結(jié)束時(shí)，將肽樹(shù)脂轉(zhuǎn)移至搖床上的反應(yīng)容器中并用25％Pip/DMF除去Fmoc，持續(xù)30分鐘。用DMF洗滌樹(shù)脂。使用TFFH(四甲基氟代脲六氟磷酸酯，獲自Perceptive

，Warrington，U.K，0.4mmol)、HOAt(0.4mmol)、DMAP(二甲基氨基吡啶，0.1g)和DIEA(1.2mmol)偶聯(lián)Fmoc-Apc-OH(0.4mmol)一個(gè)4小時(shí)循環(huán)然后再過(guò)夜。
按上述除去Fmoc基團(tuán)并且使用DMF中的Ac2O(乙酸酐，5mmol)和DIEA(5mmol)對(duì)肽加帽30分鐘。使用DCM中的2×3％TFA進(jìn)行10分鐘循環(huán)，從Glu3除去PhiPr基團(tuán)。使用DCM中的Boc2O(0.8mmol)和DIEA(0.8mmol)過(guò)夜替代從Lys側(cè)鏈部分除去的Boc。然后用PyAOP(7-氮雜苯并三唑-1-基-氧基三(吡咯烷)鏻-六氟磷酸鹽，獲自Applied

，F(xiàn)oster City，CA，U.S.A.，0.6mmol)、HOAt(0.6mmol)、DMAP(0.1g)和DIEA(1.8mmol)進(jìn)行10分鐘循環(huán)來(lái)處理該樹(shù)脂，之后加入己基-NH2，即己胺(獲自Sigma-Aldrich

，St.Louis，MO，U.S.A.，2.0mmol)并且對(duì)生成的樹(shù)脂持續(xù)過(guò)夜振蕩。
為了切割該標(biāo)題肽，用TFA、H2O和三異丙基硅烷(TIS)(9.5mL/0.85mL/0.86mL)混合物處理該樹(shù)脂4小時(shí)。濾出該樹(shù)脂并且將過(guò)濾物倒入200mL醚中。通過(guò)離心收集沉淀。在乙腈和水的混合物中溶解此粗產(chǎn)物并且在使用C18 DYNAMAX-100 A0柱(4×43cm)(獲自

，WalnutCreek，CA，U.S.A.)的反向制備型HPLC系統(tǒng)中純化。使用92％A∶8％B至72％A∶28％B的線(xiàn)性梯度洗脫該柱近1小時(shí)，其中A是水中的0.1％TFA而B(niǎo)是乙腈中的0.1％TFA。通過(guò)分析性HPLC檢測(cè)級(jí)分、收集含有純產(chǎn)物的那些級(jí)分、冷凍至干燥以得到1.5mg(0.5％)白色固體產(chǎn)物。使用HPLC檢測(cè)純度并發(fā)現(xiàn)其為約97.5％。電噴霧離子阱質(zhì)譜(ESI-MS)分析得到分子量為3435.1(與計(jì)算的分子量3434.5一致)。
實(shí)施例4(1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO1) 使用芴甲氧羰基(Fmoc)化學(xué)品在433A肽合成儀(獲自Applied

，F(xiàn)oster City，CA，U.S.A.)上合成側(cè)鏈保護(hù)的Fmoc-(Aib2，10，Glu3)人生長(zhǎng)素釋放肽(2-28)-Rink酰胺-MBHA樹(shù)脂。使用0.64mmol/g帶取代的Rink酰胺-4-甲基二苯甲基胺(MBHA)樹(shù)脂(獲自

，San Diego，CA，U.S.A.)。所用Fmoc氨基酸(獲自

，San Jose，CA，U.S.A.)為Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Glu(tBu)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH和Fmoc-Val-OH。此外，在A3使用Fmoc-Glu(O-2-PhiPr)-OH(獲自

，San Diego，CA，U.S.A.)。以0.1mmol規(guī)模進(jìn)行合成。通過(guò)用在N-甲基吡咯烷酮(NMP)中的20％哌啶處理30分鐘循環(huán)來(lái)除去Fmoc基團(tuán)。每個(gè)偶聯(lián)步驟中，首先在2mLNMP中的0.45M 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，2，3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽/1-羥基-苯并三唑(HBTU/HOBT)溶液中預(yù)活化Fmoc氨基酸(3eq，0.3mmol)。為了活化氨基酸酯，向樹(shù)脂加入1mL二異丙基乙胺(DIEA)和1mL NMP。對(duì)ABI 433A肽合成儀設(shè)置程序來(lái)進(jìn)行下面反應(yīng) (1)用NMP洗滌； (2)用在NMP中的20％哌啶處理30分鐘，除去Fmoc保護(hù)基團(tuán)； (3)用NMP洗滌；和 (4)與預(yù)活化的Fmoc氨基酸偶聯(lián)1-4小時(shí)。根據(jù)標(biāo)題肽序列依次的偶聯(lián)該樹(shù)脂。肽鏈組裝后，使用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和二氯甲烷(DCM)徹底洗滌該樹(shù)脂。
在433A上組裝肽鏈結(jié)束時(shí)，將肽樹(shù)脂轉(zhuǎn)移至搖床上的反應(yīng)容器中并在25％Pip/DMF溶液中浸泡近30分鐘而除去Fmoc。此后用DMF洗滌樹(shù)脂。使用TFFH(四甲基氟代脲六氟磷酸酯，獲自Perceptive

，Warrington，U.K，0.4mmol)、HOAt(0.4mmol)、DMAP(二甲基氨基吡啶，0.1g)和DIEA(1.2mmol)偶聯(lián)Fmoc-Apc-OH(0.4mmol)一個(gè)4小時(shí)循環(huán)然后再次過(guò)夜。
按上述除去Fmoc基團(tuán)。使用DCM中的3％TFA從Glu3除去PhiPr基團(tuán)，兩個(gè)循環(huán)每個(gè)循環(huán)10分鐘。使用DCM中的Boc2O(0.8mmol)和DIEA(0.8mmol)來(lái)過(guò)夜替代反應(yīng)過(guò)程中從Lys側(cè)鏈部分除去的Boc。用PyAOP(7-氮雜苯并三唑-1-基-氧基三(吡咯烷)鏻-六氟磷酸鹽，獲自Applied

，F(xiàn)oster City，CA，U.S.A.，0.6mmol)、HOAt(0.6mmol)、DMAP(0.1g)和DIEA(1.8mmol)處理該樹(shù)脂10分鐘，之后加入己基-NH2，即己胺(獲自Sigma-Aldrich

，St.Louis，MO，U.S.A.，2.0mmol)并且過(guò)夜振蕩樹(shù)脂溶液。
通過(guò)用TFA、H2O和三異丙基硅烷(TIS)(9.5mL/0.85mL/0.8mL)混合物處理樹(shù)脂近4小時(shí)而從樹(shù)脂切割標(biāo)題肽。濾出樹(shù)脂并且將過(guò)濾物倒入200mL醚中。通過(guò)離心收集沉淀。在乙腈和水的混合物中溶解此粗產(chǎn)物并且在使用C18DYNAMAX-100A0柱(4×43cm)(獲自

，WalnutCreek，CA，U.S.A.)的反向制備型HPLC系統(tǒng)中純化。使用92％A∶8％B至72％A∶28％B的線(xiàn)性梯度洗脫該柱近1小時(shí)，其中A是水中的0.1％TFA而B(niǎo)是乙腈中的0.1％TFA。通過(guò)分析性HPLC檢測(cè)級(jí)分、收集含有純產(chǎn)物的那些級(jí)分、冷凍至干燥以得到4.6mg(1.4％)白色固體。使用HPLC檢測(cè)純度并發(fā)現(xiàn)其為約99.8％。電噴霧離子阱質(zhì)譜(ESI-MS)分析得到分子量為3393.5(與計(jì)算的分子量3393.1一致)。
實(shí)施例11(Inp1，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ IDNO6) 使用芴甲氧羰基(Fmoc)化學(xué)品在型號(hào)433A肽合成儀(獲自Applied

，F(xiàn)oster City，CA，U.S.A.)上合成側(cè)鏈保護(hù)的Fmoc-(Ser17)人生長(zhǎng)素釋放肽(2-28)-Rink酰胺-MBHA樹(shù)脂。使用0.64mmol/g帶取代的Rink酰胺-4-甲基二苯甲基胺(MBHA)樹(shù)脂(獲自

，San Diego，CA，U.S.A.)。所用Fmoc氨基酸(獲自

，San Jose，CA，U.S.A.)為Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Glu(tBu)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH和Fmoc-Val-OH。此外，在A3和A17使用Fmoc-Ser(Trt)-OH(也獲自

，San Jose，CA，U.S.A.)。以0.2mmol規(guī)模進(jìn)行合成。通過(guò)用在N-甲基吡咯烷酮(NMP)中的20％哌啶處理30分鐘來(lái)除去Fmoc基團(tuán)。每個(gè)偶聯(lián)步驟中，首先在2mL NMP中的0.45M2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，2，3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽/1-羥基-苯并三唑(HBTU/HOBT)溶液中預(yù)活化Fmoc氨基酸(3eq，0.3mmol)。為了活化氨基酸酯，加入1mL二異丙基乙胺(DIEA)和1mL NMP。對(duì)ABI 433A肽合成儀設(shè)置程序來(lái)進(jìn)行下面反應(yīng) (1)用NMP洗滌； (2)用在NMP中的20％哌啶處理30分鐘，除去Fmoc保護(hù)基團(tuán)； (3)用NMP洗滌；和 (4)與預(yù)活化的Fmoc氨基酸偶聯(lián)1或2小時(shí)。
根據(jù)標(biāo)題肽序列依次偶聯(lián)該樹(shù)脂。肽鏈組裝后，使用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和二氯甲烷(DCM)徹底洗滌該樹(shù)脂。
在433A上組裝肽鏈結(jié)束時(shí)，將肽樹(shù)脂轉(zhuǎn)移至搖床上的反應(yīng)容器中并使用25％Pip/DMF溶液，持續(xù)30分鐘循環(huán)而除去Fmoc。用DMF洗滌樹(shù)脂。使用TFFH(四甲基氟代脲六氟磷酸酯，獲自Perceptive

，Warrington，U.K，1.0mmol)、HOAt(1.0mmol)、DMAP(二甲基氨基吡啶，0.1g)和DIEA(3.0mmol)偶聯(lián)Fmoc-Inp-OH(1.0mmol)一次，過(guò)夜。
使用DCM中的3％TFA從Ser3和Ser17除去Trt基團(tuán)，兩個(gè)循環(huán)每個(gè)循環(huán)持續(xù)近10分鐘。使用DCM中的Boc2O(0.8mmol)和DIEA(0.8mmol)過(guò)夜替代從如上所示的Lys側(cè)鏈部分除去的Boc。過(guò)夜使用DCM中的DIC(5mmol)、DMAP(0.2mg)和DIEA(5mmol)將辛酸(10mmol)偶聯(lián)至Ser3和Ser17側(cè)鏈。
通過(guò)在25％Pip/DMF中浸泡30分鐘而除去末端Fmoc。然后用DMF洗滌該樹(shù)脂。使用TFA、H2O和三異丙基硅烷(TIS)(9.5mL/0.85mL/0.8mL)混合物從樹(shù)脂上切割標(biāo)題肽近4小時(shí)。濾出該樹(shù)脂并且將過(guò)濾物倒入200mL醚中。通過(guò)離心收集沉淀。在乙腈和水的混合物中溶解此粗產(chǎn)物并且在使用C18 DYNAMAX-100 A0柱(4×43cm)(獲自

，WalnutCreek，CA，U.S.A.)的反向制備型HPLC系統(tǒng)中純化。使用85％A∶15％B至55％A∶45％B的線(xiàn)性梯度洗脫該柱近1小時(shí)，其中A是水中的0.1％TFA而B(niǎo)是乙腈中的0.1％TFA。通過(guò)分析性HPLC檢測(cè)級(jí)分、收集含有純產(chǎn)物的那些級(jí)分、冷凍至干燥以得到41.7mg(5.9％)白色固體產(chǎn)物。使用HPLC檢測(cè)純度并發(fā)現(xiàn)其為約96.6％。電噴霧離子阱質(zhì)譜(ESI-MS)分析得到分子量為3507.4(與計(jì)算的分子量3508.16一致)。
使用與上文公開(kāi)大體類(lèi)似的那些合成過(guò)程，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以制備本發(fā)明下述肽 實(shí)施例1(Ac-Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO8) 實(shí)施例2(Ac-1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO8) 實(shí)施例3(Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO1) 實(shí)施例4(1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO1) 實(shí)施例5(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO2) 實(shí)施例6(Inp1，Aib2)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO2) 實(shí)施例7(Inp1，Aib2，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO3) 實(shí)施例8(Inp1，Aib2，10)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO4) 實(shí)施例9(Inp1，Aib2，8)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO5) 實(shí)施例10(Inp1，Aib2，Ser(正辛酰基)17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO6) 實(shí)施例11(Inp1，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQID NO6)和 實(shí)施例12(Inp1，Aib2，8，Ser(正辛酰基)17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO7) 通過(guò)電噴霧離子阱質(zhì)譜(ESI-MS)分析上面列舉的優(yōu)選實(shí)施方式的選擇來(lái)確定分子量。下示表1記錄了此檢測(cè)期間收集的數(shù)據(jù)。使用HPLC檢測(cè)也提供了每種所選化合物的純度。
表1-所選化合物的分子量和純度 使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)，分析上面列舉的優(yōu)選實(shí)施方式的選擇以確定穩(wěn)定性，即大鼠模型中血漿半衰期。下示表2記錄了此檢驗(yàn)期間收集的數(shù)據(jù)。
表2-所選化合物的大鼠血漿半衰期 生物活性的確定 本文所述為可以表征并且已用于表征本發(fā)明化合物的方法。熟練技術(shù)人員知曉并理解可產(chǎn)生結(jié)果相當(dāng)?shù)倪@些測(cè)定的變化。熟練技術(shù)人員也應(yīng)知曉并理解可使用其它測(cè)定來(lái)產(chǎn)生結(jié)果并辨別本文所述的特性。
GHS受體結(jié)合確定檢測(cè) 使用如那些在下面提供的實(shí)施例中所述的技術(shù)可以確定并且已經(jīng)確定了本發(fā)明化合物對(duì)GHS受體的活性。對(duì)于IC50，越大表示效力并因此表明需要越小量來(lái)實(shí)現(xiàn)結(jié)合抑制。
可以使用存在于不同環(huán)境中的重組產(chǎn)生的GHS受體多肽進(jìn)行結(jié)合檢測(cè)。該環(huán)境包括，例如，含GHS受體多肽的細(xì)胞提取物和純化的細(xì)胞提取物，該多肽由重組核酸或天然發(fā)生的核酸表達(dá)；以及也包括，例如使用通過(guò)重組手段或來(lái)自導(dǎo)入不同環(huán)境中的天然發(fā)生核酸所產(chǎn)生的純化的GHS受體多肽。
GHS受體活性化合物的篩選 使用重組表達(dá)受體有助于GHS受體活性化合物的篩選。重組表達(dá)的GHS受體提供若干優(yōu)點(diǎn)，例如在規(guī)定的細(xì)胞系統(tǒng)中表達(dá)該受體的能力以便可以更容易地將GHS受體對(duì)化合物的反應(yīng)與其他受體的反應(yīng)相區(qū)別。例如，GHS受體可以通過(guò)表達(dá)載體在例如通常不表達(dá)該受體的HEK293、COS7和CHO細(xì)胞系中表達(dá)，其中沒(méi)有表達(dá)受體的相同細(xì)胞系可以用作對(duì)照。
在提供GHS受體活性的檢測(cè)中，使用生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物有助于篩選降低GHS受體活性的化合物?？梢詼y(cè)量受試化合物對(duì)此活性的影響以鑒定例如變構(gòu)調(diào)節(jié)物和抗拮劑。
可以使用不同的技術(shù)，如檢測(cè)GHS受體的胞內(nèi)構(gòu)象、G-蛋白偶聯(lián)的活性和/或胞內(nèi)信使的變化來(lái)測(cè)量GHS受體活性。優(yōu)選地，使用諸如那些測(cè)量胞內(nèi)Ca2+的技術(shù)來(lái)測(cè)量GHS受體活性。本領(lǐng)域已知可以用于測(cè)量Ca2+的技術(shù)的實(shí)例包括使用諸如Fura-2的染料以及使用諸如水母發(fā)光蛋白的Ca2+-生物發(fā)光敏感的受體蛋白質(zhì)。使用水母發(fā)光蛋白來(lái)測(cè)量G-蛋白活性的細(xì)胞系的實(shí)例是HEK293/aeq17(Button，D.等人，Cell Calcium，(1993)，14(9)663-71和Feighner，S.D.等人，Science，(1999)，284(5423)2184-8)。
也可以使用含有與不同的G-蛋白功能性偶聯(lián)的生長(zhǎng)素釋放肽結(jié)合區(qū)的嵌合受體來(lái)測(cè)量GHS受體活性。嵌合GHS受體含有N-末端胞外結(jié)構(gòu)域、由跨膜區(qū)，胞外環(huán)區(qū)和胞內(nèi)環(huán)區(qū)組成的跨膜結(jié)構(gòu)域以及胞內(nèi)羧基末端。例如，國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)No.PCT/US96/12336[WO97/05252]和美國(guó)專(zhuān)利5,264,565提供了用于產(chǎn)生嵌合受體以及測(cè)量G-蛋白偶聯(lián)反應(yīng)的技術(shù)，它們?cè)诖送ㄟ^(guò)引用作為參考。
GHS受體活性的刺激 可以使用生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物來(lái)刺激GHS受體活性，其可用于例如研究GHS受體調(diào)節(jié)和/或GH分泌的作用、鑒定生長(zhǎng)素釋放肽抗拮劑和/或有利于罹患下述疾病或病癥的受試者如GH缺乏狀態(tài)、減少的肌肉質(zhì)量和/或骨密度、性功能障礙、不健康的體重、運(yùn)動(dòng)技能和/或軀體功能的喪失和/或缺少正常食欲。
增重或增加食欲對(duì)于維持易于體重減輕個(gè)體(例如患病者或年長(zhǎng)者)的理想、健康體重至關(guān)重要。體重過(guò)輕受試者的體重或食欲的喪失可以導(dǎo)致嚴(yán)重的健康問(wèn)題。在罹患造成體重減輕和/或缺乏正常食欲的疾病或經(jīng)歷造成體重?fù)p失和/或缺乏正常食欲的醫(yī)學(xué)治療的患者中，所述疾病或病癥的治療效力視患者維持始終如一的體重的能力而定。
相反地，生長(zhǎng)素釋放肽的抗拮劑在促進(jìn)必須減重的那些受試者的體重減輕治療中是有用的。
生物測(cè)定-實(shí)施例 1.受體結(jié)合測(cè)定 1A.表達(dá)人重組GHS受體的CHO-K1細(xì)胞的制備 使用本領(lǐng)域眾所周知的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)克隆人GH促分泌素受體(hGHS-R或生長(zhǎng)素釋放肽受體)的cDNA，其中使用人腦RNA為模板(獲自

，Palo Alto，CA，U.S.A.)，人GHS-R全長(zhǎng)編碼序列側(cè)翼的基因特異性引物，(S5′-ATGTGGAACGCGACGCCCAGCGAAGAG-3′和AS5′-TCATGTATTAATACTAGATTCTGTCCA-3′和Advantage 2PCR

(購(gòu)自

，Palo Alto，CA，U.S.A.)。使用Original TA Cloning

(購(gòu)自

，Carlsbad，CA，U.S.A.)將PCR產(chǎn)物克隆進(jìn)pCR2.1載體。將全長(zhǎng)人GHS-R亞克隆入哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pcDNA 3.1(購(gòu)自

Carlsbad，CA，U.S.A.)。使用已知的如Wigler，M.等人，Cell，(1977)，11(1)223-32所述的磷酸鈣法，將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系CHO-K1(來(lái)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture

，Rockville，MD，U.S.A.)。通過(guò)篩選在補(bǔ)充有10％胎牛血清和1mM丙酮酸鈉的含0.8mg/ml G418的RPMI1640培養(yǎng)基(購(gòu)自

Grand Island，NY，U.S.A.)中克隆環(huán)上生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)染細(xì)胞，獲得穩(wěn)定表達(dá)人GHS-R的單細(xì)胞克隆。
1B.GHS-R結(jié)合測(cè)定 使用設(shè)置為6檔，持續(xù)約15秒的Brinkman

(

Westbury，NY，U.S.A.)在約20ml冰冷的50mM Tris-HCl中，可以并已經(jīng)通過(guò)同質(zhì)化上述表達(dá)人重組GHS受體的CHO-K1細(xì)胞而制得用于放射配體結(jié)合研究的膜。將此勻漿通過(guò)離心(39,000g/10分鐘)洗滌兩次并且將最終的沉淀重懸于含2.5mM MgCl2和0.1％牛血清白蛋白(BSA)的約50mM Tris-HCl中。對(duì)于所選擇的測(cè)定，用含0.05ml未標(biāo)記的競(jìng)爭(zhēng)性受試肽，以及無(wú)該未標(biāo)記的競(jìng)爭(zhēng)性受試肽的0.05nM(125I)生長(zhǎng)素釋放肽(～2000Ci/mmol；Perkin Elmer Life

，Boston，MA，U.S.A.)孵育約0.4ml的若干等份樣品。在4℃約60分鐘后，用在0.5％聚乙烯亞胺/0.1％BSA中預(yù)浸泡的GF/C濾紙(可購(gòu)自

，Gaithersburg，MD，U.S.A.)快速過(guò)濾，將結(jié)合的(125I)生長(zhǎng)素釋放肽與游離的生長(zhǎng)素釋放肽分離。然后將濾膜用5ml冰冷的50mM Tris-HCl和0.1％BSA的等份樣品洗滌3次。用γ射線(xiàn)光譜法(使用購(gòu)自Wallace

，Gaithersburg，MD，U.S.A的光譜測(cè)定儀)計(jì)算捕獲在濾紙上的所結(jié)合的放射性。從總(125I)生長(zhǎng)素釋放肽結(jié)合減去在1000nM生長(zhǎng)素釋放肽(可購(gòu)自

，Torrence，CA，U.S.A.)存在下結(jié)合的(125I)生長(zhǎng)素釋放肽來(lái)確定特異性結(jié)合。
使用上面討論的受體結(jié)合測(cè)定對(duì)優(yōu)選實(shí)施方式的選擇進(jìn)行檢測(cè)并且這些化合物的記錄于下示表3中。
表3-所選化合物的受體結(jié)合Ki值 2.GHS-R功能活性檢測(cè) 2A.體外GSH受體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)iCa2+轉(zhuǎn)移 在25℃，用0.3％EDTA/磷酸鹽緩沖的生理鹽水溶液孵育來(lái)收獲上述表達(dá)人GSH受體的CHO-K1細(xì)胞；然后通過(guò)離心洗滌該細(xì)胞2次。將洗滌后的細(xì)胞在Hank氏緩沖的生理鹽水溶液(HBSS)中重懸以裝載熒光Ca2+指示劑Fura-2AM。在25℃，將約106細(xì)胞/ml的細(xì)胞懸浮液與2μMFura-2AM孵育約30分鐘。在HBSS中離心2次除去未負(fù)載的Fura-2AM，并將最終的懸浮物轉(zhuǎn)移至配備有磁攪拌機(jī)械和溫控比色皿支架的熒光分光光度計(jì)(型號(hào)Hitachi

，Tokyo，Japan)中。平衡至37℃后，加入生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物以測(cè)量細(xì)胞內(nèi)Ca2+轉(zhuǎn)移。激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別是340和510nm。測(cè)量到Ca2+量的上升表示受試肽的激動(dòng)劑活性，而測(cè)量到Ca2+量的下降(或者無(wú)Ca2+)則表示受試肽的抗拮劑活性。
使用這種分析方法，發(fā)現(xiàn)實(shí)施例1、2、3和4的化合物對(duì)生長(zhǎng)素釋放肽受體展現(xiàn)了抗拮活性。
2B.體內(nèi)GH釋放/抑制 如本領(lǐng)域公知，可檢測(cè)化合物體內(nèi)刺激或抑制GH釋放的能力(Deghenghi，R.等人，Life Sciences，(1994)，54(18)1321-8和國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)No.PCT/EP01/07929[WO 02/08250])。為了確認(rèn)化合物刺激體內(nèi)GH釋放的能力，將劑量約300mg/kg的所選化合物皮下注射入10日齡大鼠。注射約15分鐘后測(cè)量循環(huán)中的GH，并與由溶劑對(duì)照注射的大鼠中GH水平進(jìn)行比較。
類(lèi)似地，可檢測(cè)所選化合物在體內(nèi)拮抗生長(zhǎng)素釋放肽誘導(dǎo)的GH分泌的能力。將300mg/kg劑量的本申請(qǐng)化合物與生長(zhǎng)素釋放肽一起皮下注射入10日齡大鼠。然后注射約15分鐘后測(cè)量循環(huán)中的GH，并與只注射生長(zhǎng)素釋放肽的大鼠中GH水平進(jìn)行比較。
2C.對(duì)胃腸蠕動(dòng)的作用 已經(jīng)顯示生長(zhǎng)素釋放肽增加罹患胃輕癱的受試者的胃蠕動(dòng)和促進(jìn)胃排空?？梢允褂孟率龅臏y(cè)定，檢測(cè)本發(fā)明化合物以確定該化合物在胃排空和腸轉(zhuǎn)移中的作用。
2C(i).生長(zhǎng)素釋放肽對(duì)腸轉(zhuǎn)移的體內(nèi)研究 可進(jìn)行天然生長(zhǎng)素釋放肽和根據(jù)本發(fā)明的生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物對(duì)腸轉(zhuǎn)移的作用。該研究中，每組8只大鼠的組禁食近24小時(shí)但可自由飲水。將天然生長(zhǎng)素釋放肽、所選生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物或如阿托品的對(duì)照給予經(jīng)麻醉的檢測(cè)受試者。開(kāi)始給藥生長(zhǎng)素釋放肽、所選生長(zhǎng)素釋放肽或?qū)φ占s5分鐘后，通過(guò)食道管飼法將2ml含碳餐食給予測(cè)試受試者。大約另外25分鐘后，頸斷裂處死測(cè)試受試者并取出小腸。測(cè)量碳自胃幽門(mén)所移動(dòng)的距離。
2C(ii)生長(zhǎng)素釋放肽對(duì)胃排空的體內(nèi)研究 可以檢測(cè)本發(fā)明化合物以確定該化合物在胃排空中的作用。在此研究中，每組8只雄性Sprague Dawley大鼠(體重200-250gms)的組禁食近24小時(shí)且可自由飲水。向經(jīng)麻醉的測(cè)試受試者靜脈給予天然生長(zhǎng)素釋放肽、所選生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物及諸如胃復(fù)安的對(duì)照化合物。開(kāi)始給藥天然生長(zhǎng)素釋放肽、所選類(lèi)似物或?qū)φ占s5分鐘后，通過(guò)食道管飼法向每個(gè)測(cè)試受試者給予1.5ml由酚紅標(biāo)記的餐食(在總?cè)橐褐?.5mg/ml酚紅和1.5％甲基纖維素)。大約另外20分鐘后，頸斷裂處死受測(cè)受試者，并取出胃及各自粉碎。提取受測(cè)受試者胃中的殘余酚紅，并在560nm波長(zhǎng)下進(jìn)行分光光度測(cè)量。
其他實(shí)驗(yàn)中，每組8只雄性Sprague Dawley大鼠(體重200-250gms)的組禁食近24小時(shí)并可自由飲水。向該動(dòng)物皮下注射載體或不同劑量的天然生長(zhǎng)素釋放肽或所選生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物。約15分鐘后，向大鼠口服給予1.5ml由酚紅標(biāo)記的營(yíng)養(yǎng)餐(在總?cè)橐褐?.5mg/ml酚紅和1.5％甲基纖維素)。大約另外15分鐘過(guò)后，頸斷裂處死受測(cè)受試者，并在夾住幽門(mén)及噴門(mén)后取出胃。提取胃中的殘余酚紅，并在560nm波長(zhǎng)下以分光光度法測(cè)量。
2C(iii).對(duì)大鼠中POI的作用 異氟烷麻醉后，使用3cm剖腹來(lái)誘發(fā)雄性Sprague Dawley大鼠(體重200-250gms)中的胃腸梗阻?？p合腹肌和皮膚，并允許動(dòng)物恢復(fù)約2小時(shí)45分鐘。在此期間，將載體或所選生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物皮下注射腹部剖腹的動(dòng)物。該化合物或載體給藥約15分鐘后，向該動(dòng)物喂酚紅標(biāo)記的餐食(見(jiàn)上)。大約另外15分鐘后，頸斷裂處死受試者，并按上述測(cè)量胃排空。
2C(iv).嗎啡存在下對(duì)大鼠中POI的作用 異氟烷麻醉后，使用3cm剖腹來(lái)誘發(fā)雄性Sprague Dawley大鼠(體重200-250gms)中的胃腸梗阻?？p合腹肌和皮膚，并允許動(dòng)物恢復(fù)約2.5小時(shí)，在此期間該腹部剖腹的動(dòng)物接受皮下給藥4mg/kg嗎啡。接受嗎啡約15分鐘后，將載體或所選生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物皮下給予腹部剖腹的動(dòng)物。給予該化合物或載體約15分鐘后，向該動(dòng)物喂酚紅標(biāo)記的餐食(見(jiàn)上)。大約另外15分鐘后，頸斷裂處死受試者，并按上述測(cè)量胃排空。
2C(v).嗎啡存在下對(duì)大鼠胃蠕動(dòng)的影響 使雄性Sprague Dawley大鼠(體重200-250g)接受4mg/kg嗎啡皮下給藥。接受嗎啡約15分鐘后，將載體或所選生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物皮下給予該動(dòng)物。給予該化合物或載體約15分鐘后，向該動(dòng)物喂酚紅標(biāo)記的餐食(見(jiàn)上)。大約另外15分鐘后，頸斷裂處死受試者，并按上述測(cè)量胃排空。
2D.對(duì)體重的影響 按照下述方法，可以對(duì)本發(fā)明的黑皮素受體的配體檢測(cè)其對(duì)食物攝取和/或體重的影響。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解可使用與本文所述那些類(lèi)似的方法來(lái)檢測(cè)本發(fā)明的化合物對(duì)食物攝取和/或體重的影響。
2D(i).短期喂食實(shí)驗(yàn)(禁食) 將雄性Sprague Dawley大鼠(250g)安置在單獨(dú)的籠中并保持12小時(shí)晝對(duì)12小時(shí)夜的狀態(tài)。在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前，對(duì)該大鼠禁食18小時(shí)但可以隨意飲水。時(shí)間0時(shí)，以選定的劑量(如500或100nmol/kg)向該大鼠皮下注射所選化合物或載體，并提供食物。在注射后約1、2、3、4、5和6小時(shí)測(cè)量個(gè)體的食物消耗。
2D(ii).短期喂食實(shí)驗(yàn)(非禁食) 將雄性Sprague Dawley大鼠(250g)安置在單獨(dú)的籠中，并保持12小時(shí)晝對(duì)12小時(shí)夜的狀態(tài)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)中大鼠可隨意攝取食物和飲水。時(shí)間0時(shí)，按8μmol/kg的劑量向大鼠皮下注射化合物或載體。在注射后約0.5、1、1.5、2、3和4小時(shí)后，測(cè)量個(gè)體的食物消耗。
2D(iii)長(zhǎng)期進(jìn)食實(shí)驗(yàn) 將雄性Sprague Dawley大鼠(250g)安置在單獨(dú)的籠中，并保持12小時(shí)晝對(duì)12小時(shí)夜的狀態(tài)，大鼠可隨意攝取食物和飲水。以不同劑量化合物或載體每天3次(0800、1200和1600h)皮下注射大鼠為期7天。每天測(cè)量個(gè)體的體重和食物消耗。
給藥 可以使用本領(lǐng)域眾所周知的技術(shù)及本文提供的指導(dǎo)來(lái)配制并向受試者給予生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物。優(yōu)選的給藥途徑確保有效量的化合物到達(dá)靶標(biāo)。例如，Remington′s Pharmaceutical Sciences第18版，Gennaro編，MackPublishing，1990和Modem Pharmaceutics第二版，Banker和Rhodes編，Marcel Dekker，Inc.，1990，總體上都提供了藥物給藥的指南，通過(guò)引用將其作為參考。
可以將生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物制備為酸性或堿性鹽。藥學(xué)可接受鹽(為水溶或油溶性或可分散的產(chǎn)品的形式)包括常規(guī)非毒性鹽或者無(wú)機(jī)或有機(jī)酸或堿形成的季銨鹽。此種鹽的實(shí)例包括但不限于酸加成鹽，例如醋酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過(guò)硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽；以及堿性鹽如銨鹽，堿金屬鹽如鈉和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣和鎂鹽，含有機(jī)堿的鹽(如二環(huán)己基胺鹽，N-甲基-D-葡糖胺)和含氨基酸(如精氨酸和賴(lài)氨酸)的鹽。
可以使用不同途徑給予生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物，該途徑包括口服和鼻吸入或經(jīng)皮和經(jīng)粘膜注射?？梢愿鶕?jù)制藥領(lǐng)域眾所周知的技術(shù)將活性成分制備為口服給予的懸劑，并且該懸劑可含有用于賦予體積的微晶纖維素，用作懸浮劑的海藻酸或海藻酸鈉，作為粘度增強(qiáng)劑的甲基纖維素和甜味劑/增味劑。作為速釋片劑，藥物制劑可含有微晶纖維素、磷酸二鈣、淀粉、硬脂酸鎂和乳糖和/或其他賦形劑、粘合劑、填充劑、崩解質(zhì)、稀釋劑和潤(rùn)滑劑。
例如，可使用芐基醇或其他適合的防腐劑，吸收促進(jìn)劑以增強(qiáng)生物可利用性，使用氟碳和/或使用其他溶解的或分散的試劑，以生理鹽水溶液制備經(jīng)鼻給藥的氣霧劑或吸入制劑。
生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物也可經(jīng)靜脈(推注和灌注)、腹膜內(nèi)、皮下、局部(有或沒(méi)有吸留)或肌肉內(nèi)給藥。當(dāng)注射給藥時(shí)，可使用適當(dāng)?shù)姆嵌拘?、胃腸道外可接受稀釋劑或溶劑(如Ringer溶液或等滲氯化鈉溶液)，或適當(dāng)?shù)姆稚┗驖?rùn)濕劑和懸浮劑例如滅菌的、溫和的、混合油，包括合成的單?；蚨８视秃椭舅?包括油酸)來(lái)配制注射液或懸劑。
優(yōu)選地，考慮本領(lǐng)域眾所周知的因素來(lái)確定適當(dāng)?shù)姆幏桨?，所述因素包括待服藥的受試者的?lèi)型；受試者的年齡、體重、性別和醫(yī)學(xué)病癥；給藥途徑；受試者的腎臟和肝功能；期望的效果和所使用的具體化合物。
在產(chǎn)生效力而無(wú)毒性的范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)藥物濃度的最佳精度需要基于藥物在靶位點(diǎn)利用度的動(dòng)力學(xué)的方案。這包括對(duì)藥物的分布、平衡和消除的考慮。期望的受試者的每日劑量在每個(gè)受試者每天0.01和1000mg之間。
可以由藥盒提供生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物。該藥盒通常含有用于給藥的劑量形式的活性化合物。劑量形式含有足量的活性化合物，以致當(dāng)在1或多天的療程期間以常規(guī)間隔(例如一天1-6次)給予受試者時(shí)可以獲得期望的效果。優(yōu)選地，藥盒含有使用劑量形式以實(shí)現(xiàn)期望效果以及在特定時(shí)間段劑量形式需服用量的說(shuō)明書(shū)。
以說(shuō)明的方式描述了本發(fā)明，并且應(yīng)理解所使用的術(shù)語(yǔ)旨在具有所說(shuō)明措詞的本質(zhì)而非限制。顯然，考慮到上述教導(dǎo)對(duì)本發(fā)明的許多修改和改變是可能的。因此，應(yīng)理解可在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)而并非按具體的說(shuō)明來(lái)實(shí)踐本發(fā)明。
本文參考的專(zhuān)利和科學(xué)文獻(xiàn)代表本領(lǐng)域技術(shù)人員可用的知識(shí)。因而本文引用的所有專(zhuān)利、專(zhuān)利出版物和其他出版物通過(guò)引用整體作為參考。
序列表
<110>生物測(cè)量公司
<120>N末端取代的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物
<130>169P Yankwich BIO-169
<140>PCT/US2007/XXXXXX
<141>2007-09-27
<150>US 60/847423
<151>2006-09-27
<160>8
<170>patentIn version 3.3
<210>1
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)或1-Apc
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
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<222>(3)..(3)
<223>用NH-己基修飾
<220>
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<222>(10)..(10)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>1
Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>2
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
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<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)
<220>
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<223>Xaa＝Ser或α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>2
Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>3
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
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<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(3)..(3)
<223>用NH-己基修飾
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>3
Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>4
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(10)..(10)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>4
Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>5
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(8)..(8)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>5
Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Xaa His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>6
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)或Ser
<220>
<221>MOD_RES
<222>(17)..(17)
<223>用正辛?；揎?br> <220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>6
Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Ser Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>7
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MISC FEATURE
<222>(8)..(8)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(17)..(17)
<223>用正辛酰基修飾
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>7
Xaa Xaa Ser Phe Leu Ser Pro Xaa His Gln Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Ser Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 25
<210>8
<211>28
<212>PRT
<213>人工
<220>
<223>生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(1)
<223>Xaa＝六氫異煙酸(Inp)或1-Apc，都使用?；?Ac)修飾
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(2)..(2)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(3)..(3)
<223>用NH-己基修飾
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(10)..(10)
<223>Xaa＝α-氨基異丁酸(Aib)
<220>
<221>MOD_RES
<222>(28)..(28)
<223>酰胺化
<400>8
Xaa Xaa Glu Phe Leu Ser Pro Glu His Xaa Arg Val Gln Gln Arg Lys
1 5 10 15
Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg
20 2權(quán)利要求
1.根據(jù)通式(I)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物
(R2)-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-R1 (I)
其中
A1是Inp、1-Apc或4-Apc；
A2是Ser、Abu、Acc、Act、Aib、Ala、Ava、Thr或Val；
A3是Ser、Asp(NH-R3)、Asp(O-R4)、Cys(S-R5)、Dab(S(O)2-R6)、Dap(S(O)2-R7)、Glu(NH-R8)、Glu(O-R9)、Ser(C(O)-R10)、Thr(C(O)-R11)或HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)；
A4是Phe、Acc、Aic、Cha、2-Fua、1-Nal、2-Nal、2-Pal、3-Pal、4-Pal、hPhe、(X1，X2，X3，X4，X5)Phe、Taz、2-Thi、3-Thi、Trp或Tyr；
A5是Leu、Abu、Acc、Aib、Ala、Cha、Ile、hLeu、Nle、Nva、Phe、Tle或Val；
A6是Ser、Abu、Acc、Act、Aib、Ala、Gly、Thr或Val；
A7是Pro、Dhp、Dmt、3-Hyp、4-Hyp、Inc、Ktp、Oic、Pip、Thz或Tic；
A8是Glu、Acc、Aib、Arg、Asn、Asp、Dab、Dap、Gln、Lys、Orn或HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)；
A9是His、Acc、Apc、Aib、2-Fua、2-Pal、3-Pal、4-Pal、(X1，X2，X3，X4，X5-)Phe、Taz、2-Thi或3-Thi；
A10是Gln、Acc、Aib、Asn、Asp或Glu；
A11是Arg、Apc、hArg、Dab、Dap、Lys、Orn或HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)；
A12是Val、Abu、Acc、Aib、Ala、Cha、Gly、Ile、Leu、Nle、Nva或Tle；
A13是Gln、Acc、Aib、Asn、Asp或Glu；
A14是Gln、Acc、Aib、Asn、Asp或Glu；
A15是Arg、Acc、Aib、Apc、hArg、Dab、Dap、Lys或Orn；
A16是Lys、Acc、Aib、Apc、Arg、hArg、Dab、Dap、Orn或刪除；
A17是Glu、Arg、Asn、Asp、Dab、Dap、Gln、Lys、Orn、Asp(NH-R3)、Asp(O-R4)、Cys(S-R5)、Dab(S(O)2-R6)、Dap(S(O)2-R7)、Glu(NH-R8)、Glu(O-R9)、Ser(C(O)-R10)、Thr(C(O)-R11)、HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)或刪除；
A18是Ser、Abu、Acc、Act、Aib、Ala、Thr、Val或刪除；
A19是Lys、Acc、Aib、Apc、Arg、hArg、Dab、Dap、Orn或刪除；
A20是Lys、Acc、Aib、Apc、Arg、hArg、Dab、Dap、Orn或刪除；
A21是Pro、Dhp、Dmt、3-Hyp、4-Hyp、Inc、Ktp、Oic、Pip、Thz、Tic或刪除；
A22是Pro、Dhp、Dmt、3-Hyp、4-Hyp、Inc、Ktp、Oic、Pip、Thz、Tic或刪除；
A23是Ala、Abu、Acc、Act、Aib、Apc、Gly、Nva、Val或刪除；
A24是Lys、Acc、Aib、Apc、Arg、hArg、Dab、Dap、Orn、HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)或刪除；
A25是Leu、Abu、Acc、Aib、Ala、Cha、Ile、hLeu、Nle、Nva、Phe、Tle、Val或刪除；
A26是Gln、Aib、Asn、Asp、Glu或刪除；
A27是Pro、Dhp、Dmt、3-Hyp、4-Hyp、Inc、Ktp、Oic、Pip、Thz、Tic或刪除；
A28是Arg、Acc、Aib、Apc、hArg、Dab、Dap、Lys、Orn、HN-CH((CH2)n-N(R12R13))-C(O)或刪除；
R1是-OH、-NH2、-(C1-C30)烷氧基或NH-X6-CH2-Z0，其中X6是(C1-C12)烷基或(C2-C12)烯基和Z0是-H、-OH、-CO2H或-C(O)-NH2；
R2是H、(C1-C30)烷基、(C1-C30)雜烷基、(C1-C30)酰基、(C2-C30)烯基、(C2-C30)炔基、芳基(C1-C30)烷基、芳基(C1-C30)?；?、取代的(C1-C30)烷基、取代的(C1-C30)雜烷基、取代的(C2-C30)?；?、取代的(C2-C30)烯基、取代的芳基(C1-C30)烷基、取代的(C2-C30)炔基或取代的芳基(C1-C30)?；?；
R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10和R11中的每個(gè)在每種情況下獨(dú)立地選自(C1-C40)烷基、(C2-C40)烯基、取代的(C1-C40)烷基、取代的(C2-C40)烯基、烷基芳基、取代的烷基芳基、芳基和取代的芳基；
R12和R13的每個(gè)，在每種情況下獨(dú)立地選自H、(C1-C40)烷基、(C1-C40)雜烷基、(C1-C40)?；?C2-C40)烯基、(C2-C40)炔基、芳基(C1-C40)烷基、芳基(C1-C40)?；⑷〈?C1-C40)烷基、取代的(C1-C40)雜烷基、取代的(C1-C40)?；⑷〈?C2-C40)烯基、取代的(C2-C40)炔基、取代的芳基(C1-C40)烯基、取代的芳基(C1-C40)?；?、(C1-C40)烷基磺?；?C(NH)-NH2；
n在每種情況下獨(dú)立地為1、2、3、4或5；
X1、X2、X3、X4和X5的每個(gè)，在每種情況下獨(dú)立地選自H、F、Cl、Br、I、(C1-10)烷基、取代的(C1-10)烷基、芳基、取代的芳基、OH、NH2、NO2和CN；
只要
當(dāng)R12是(C1-C40)酰基、芳基(C1-C40)酰基、取代的(C1-C40)?；?、取代的芳基(C1-C40)?；?C1-C40)烷基磺?；?、或-C(NH)-NH2時(shí)，R13是H或(C1-C40)烷基、(C1-C40)雜烷基、(C2-C40)烯基、(C2-C40)炔基、芳基(C1-C40)烷基、取代的(C1-C40)烷基、取代的(C1-C40)雜烷基、取代的(C2-C40)烯基、取代的(C2-C40)炔基、或取代的芳基(C1-C40)烷基；
或其藥學(xué)可接受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中
A2是Ser或Aib；
A3是Ser或Glu(NH-R8)；
A4是Phe；
A5是Leu；
A6是Ser；
A7是Pro；
A8是Glu或Aib；
A9是His；
A10是Gln或Aib；
A11是Arg；
A12是Val；
A13是Gln；
A14是Gln；
A15是Arg；
A16是Lys；
A17是Glu或Ser(C(O)-R10)；
A18是Ser；
A19是Lys；
A20是Lys；
A21是Pro；
A22是Pro；
A23是Ala；
A24是Lys；
A25是Leu；
A26是Gln；
A27是Pro；和
A28是Arg；
或其藥學(xué)可接受的鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中
R1是NH2；
R2是H或酰基；
R8是己基；和
R10是辛基；
或其藥學(xué)可接受的鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中
A2是Aib；
A3是Glu(NH-己基)；
A8是Aib；
A10是Aib；和
A17是Ser(正辛?；?；
或其藥學(xué)可接受的鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中所述化合物選自
(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO2)
(Inp1，Aib2)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO2)
(Inp1，Aib2，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO3)
(Inp1，Aib2，10)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO4)
(Inp1，Aib2，8)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO5)
(Inp1，Aib2，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO6)
(Inp1，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ ID NO6)和
(Inp1，Aib2，8，Ser(正辛?；?17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO7)
或其藥學(xué)可接受的鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中所述化合物是(Inp1)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO2)或其藥學(xué)可接受的鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中所述化合物是(Inp1，Aib2，Ser(正辛酰基)17)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ ID NO6)或其藥學(xué)可接受的鹽。
8.一種藥物組合物，包括有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，以及藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑。
9.一種篩選能夠結(jié)合GHS受體的化合物的方法，所述方法包括測(cè)量化合物影響根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的化合物結(jié)合所述受體、結(jié)合所述受體的片段、結(jié)合包括所述受體的所述片段的多肽、或者結(jié)合所述多肽的衍生物的能力的步驟。
10.一種在需要引起來(lái)自生長(zhǎng)素釋放肽受體反應(yīng)的受試者中引起反應(yīng)的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
11.一種在需要引起來(lái)自生長(zhǎng)素釋放肽受體反應(yīng)的受試者中引起反應(yīng)的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
12.一種在需要實(shí)現(xiàn)有益效果的受試者中實(shí)現(xiàn)該效果的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽的步驟，其中所述有效量對(duì)于產(chǎn)生有助于治愈或降低疾病或紊亂的嚴(yán)重性或降低疾病或紊亂發(fā)作或嚴(yán)重性的可能性的有益效果是有效的。
13.一種在需要實(shí)現(xiàn)有益效果的受試者中實(shí)現(xiàn)該效果的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽的步驟，其中所述有效量對(duì)于產(chǎn)生有助于治愈或降低疾病或紊亂的嚴(yán)重性或降低疾病或紊亂發(fā)作或嚴(yán)重性的可能性的有益效果是有效的。
14.一種在需要刺激生長(zhǎng)激素分泌的受試者中進(jìn)行此刺激的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽的步驟，其中所述有效量是至少足以產(chǎn)生生長(zhǎng)激素分泌可檢測(cè)的增加的量。
15.一種在需要刺激生長(zhǎng)激素分泌的受試者中進(jìn)行此刺激的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽的步驟，其中所述有效量是至少足以產(chǎn)生生長(zhǎng)激素分泌可檢測(cè)的增加的量。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述生長(zhǎng)激素分泌的刺激指示用于治療生長(zhǎng)激素缺乏狀態(tài)、用于增加肌肉質(zhì)量、用于增加骨密度、用于治療男性或女性的性功能障礙、用于促進(jìn)體重增加、用于促進(jìn)體重維持、用于促進(jìn)軀體功能維持、用于促進(jìn)軀體功能恢復(fù)或用于促進(jìn)食欲增加。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所述促進(jìn)增加體重、促進(jìn)體重維持或促進(jìn)食欲增加指示用于患有伴體重減輕的疾病或紊亂或正經(jīng)歷伴體重減輕的治療的患者。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述體重減輕是由于惡病質(zhì)。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中所述惡病質(zhì)是罹患厭食癥、貪食癥、癌癥、AIDS或慢性阻塞性肺病的所述受試者易于發(fā)生的。
20.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述體重減輕是由于消耗綜合癥的發(fā)作。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中罹患消耗綜合癥的有需要的所述患者是體弱者和年老者。
22.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述體重減輕是原因不明的并且其中所述受試者是健康的年老者。
23.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述體重減輕是阿爾茨海默氏病發(fā)作的前兆。
24.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述伴有體重減輕的治療選自化療、放療、臨時(shí)性固定、永久性固定和透析。
25.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述有需要的受試者既沒(méi)有罹患疾病或紊亂也沒(méi)有經(jīng)歷伴有體重減輕的治療并且是另外的健康者。
26.一種向需要治療慢性阻塞性肺病的受試者進(jìn)行治療的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
27.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述生長(zhǎng)激素分泌的刺激指示用于治療生長(zhǎng)激素缺乏狀態(tài)、用于增加肌肉質(zhì)量、用于增加骨密度、用于治療男性或女性的性功能障礙、用于促進(jìn)體重增加、用于促進(jìn)體重維持、用于促進(jìn)軀體功能維持、用于促進(jìn)軀體功能恢復(fù)或用于促進(jìn)食欲增加。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中所述促進(jìn)體重增加、促進(jìn)體重維持或促進(jìn)食欲增加指示用于患有伴體重減輕的疾病或紊亂或正經(jīng)歷伴體重減輕的治療的患者。
29.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述體重減輕是由于惡病質(zhì)。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中所述惡病質(zhì)是罹患厭食癥、貪食癥、癌癥、AIDS或慢性阻塞性肺病的所述受試者易于發(fā)生的。
31.根據(jù)權(quán)利要求28的方法，其中所述體重減輕是由于消耗綜合癥的發(fā)作。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中罹患消耗綜合癥的有需要的所述患者是體弱者和年老者。
33.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中所述體重減輕是原因不明的并且其中所述受試者是健康的年老者。
34.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中所述體重減輕是阿爾茨海默氏病發(fā)作的前兆。
35.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中所述伴有體重減輕的治療選自化療、放療、臨時(shí)性固定、永久性固定和透析。
36.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所述有需要的受試者既沒(méi)有罹患疾病或紊亂也沒(méi)有經(jīng)歷伴有體重減輕的治療并且是另外的健康者。
37.一種向需要治療慢性阻塞性肺病的受試者進(jìn)行治療的方法，包括給予所述受試者治療有效量的權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
38.一種向需要刺激胃腸蠕動(dòng)的受試者進(jìn)行刺激的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，其中所述患者是人。
40.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，其中所述需要刺激胃腸的患者罹患胃食管反流病、腸梗阻、嘔吐、胃輕癱、IBS、便秘或結(jié)腸假性梗阻。
41.根據(jù)權(quán)利要求40的方法，其中所述患者罹患腸梗阻、嘔吐或胃輕癱。
42.根據(jù)權(quán)利要求40的方法，其中所述患者罹患腸梗阻。
43.根據(jù)權(quán)利要求42的方法，其中所述患者罹患與給予阿片劑相關(guān)的腸梗阻。
44.根據(jù)權(quán)利要求43的方法，其中所述阿片劑是嗎啡。
45.根據(jù)權(quán)利要求42的方法，其中所述腸梗阻是手術(shù)后腸梗阻。
46.根據(jù)權(quán)利要求45的方法，其中所述手術(shù)后腸梗阻伴有嗎啡的存在。
47.根據(jù)權(quán)利要求45的方法，其中所述手術(shù)后腸梗阻是在腹部手術(shù)后。
48.根據(jù)權(quán)利要求47的方法，其中所述腸梗阻是胃、小腸或大腸的梗阻。
49.根據(jù)權(quán)利要求42的方法，其中所述腸梗阻是由除腹部手術(shù)以外的因素所造成。
50.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中所述腸梗阻是胃、小腸或大腸的梗阻。
51.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中所述患者罹患嘔吐。
52.根據(jù)權(quán)利要求51的方法，其中所述患者罹患與抗癌化療劑治療、懷孕、貪食癥或厭食癥相關(guān)的嘔吐。
53.根據(jù)權(quán)利要求52的方法，其中所述嘔吐與抗癌化療劑治療相關(guān)。
54.根據(jù)權(quán)利要求52的方法，其中所述嘔吐與懷孕相關(guān)。
55.根據(jù)權(quán)利要求52的方法，其中所述嘔吐與貪食癥相關(guān)。
56.根據(jù)權(quán)利要求52的方法，其中所述嘔吐與厭食癥相關(guān)。
57.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中所述患者罹患胃輕癱。
58.根據(jù)權(quán)利要求57的方法，其中所述胃輕癱與糖尿病相關(guān)。
59.根據(jù)權(quán)利要求58的方法，其中所述糖尿病是I型糖尿病。
60.根據(jù)權(quán)利要求58的方法，其中所述糖尿病是II型糖尿病。
61.根據(jù)權(quán)利要38的方法，其中所述治療有效量的所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或組合物是經(jīng)靜脈、皮下、口服給予，或通過(guò)植入緩釋制劑而給予。
62.根據(jù)權(quán)利要求61的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)靜脈給予。
63.根據(jù)權(quán)利要求61的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)皮下給予。
64.根據(jù)權(quán)利要求61的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是口服給予。
65.根據(jù)權(quán)利要求61的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物作為緩釋制劑而被植入。
66.一種向需要刺激胃腸蠕動(dòng)的受試者進(jìn)行刺激的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
67.根據(jù)權(quán)利要求66的方法，其中所述患者是人。
68.根據(jù)權(quán)利要求66的方法，其中所述需要刺激胃腸的患者罹患胃食管反流病、腸梗阻、嘔吐、胃輕癱、IBS、便秘或結(jié)腸假性梗阻.
69.根據(jù)權(quán)利要求68的方法，其中所述患者罹患腸梗阻、嘔吐或胃輕癱。
70.根據(jù)權(quán)利要求69的方法，其中所述患者罹患腸梗阻。
71.根據(jù)權(quán)利要求70的方法，其中所述患者罹患與給予阿片劑相關(guān)的腸梗阻。
72.根據(jù)權(quán)利要求71的方法，其中所述阿片劑是嗎啡。
73.根據(jù)權(quán)利要求70的方法，其中所述腸梗阻是手術(shù)后腸梗阻。
74.根據(jù)權(quán)利要求73的方法，其中所述手術(shù)后腸梗阻伴有嗎啡的存在。
75.根據(jù)權(quán)利要求73的方法，其中所述手術(shù)后腸梗阻是在腹部手術(shù)后。
76.根據(jù)權(quán)利要求75的方法，其中所述腸梗阻是胃、小腸或大腸的梗阻。
77.根據(jù)權(quán)利要求70的方法，其中所述腸梗阻是由除腹部手術(shù)以外的因素造成。
78.根據(jù)權(quán)利要求77的方法，其中所述腸梗阻是胃、小腸或大腸的梗阻。
79.根據(jù)權(quán)利要求69的方法，其中所述患者罹患嘔吐。
80.根據(jù)權(quán)利要求79的方法，其中所述患者罹患與抗癌化療劑治療、懷孕、貪食癥或厭食癥相關(guān)的嘔吐。
81.根據(jù)權(quán)利要求80的方法，其中所述嘔吐與抗癌化療劑治療相關(guān)。
82.根據(jù)權(quán)利要求80的方法，其中所述嘔吐與懷孕相關(guān)。
83.根據(jù)權(quán)利要求80的方法，其中所述嘔吐與貪食癥相關(guān)。
84.根據(jù)權(quán)利要求80的方法，其中所述嘔吐與厭食癥相關(guān)。
85.根據(jù)權(quán)利要求69的方法，其中所述患者罹患胃輕癱。
86.根據(jù)權(quán)利要求85的方法，其中所述胃輕癱與糖尿病相關(guān)。
87.根據(jù)權(quán)利要求86的方法，其中所述糖尿病是I型糖尿病。
88.根據(jù)權(quán)利要求86的方法，其中所述糖尿病是II型糖尿病。
89.根據(jù)權(quán)利要66的方法，其中所述治療有效量的所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或組合物是經(jīng)靜脈、皮下、口服給予，或通過(guò)植入緩釋制劑而給予。
90.根據(jù)權(quán)利要求89的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)靜脈給予。
91.根據(jù)權(quán)利要求89的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)皮下給予。
92.根據(jù)權(quán)利要求89的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是口服給予。
93.根據(jù)權(quán)利要求89的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物作為緩釋制劑而植入。
94.一種對(duì)患者進(jìn)行手術(shù)的方法，包括給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
95.根據(jù)權(quán)利要求97的方法，其中所述方法還包括鑒定需要所述手術(shù)的患者。
96.根據(jù)權(quán)利要求94的方法，其中所述手術(shù)選自胃腸道的直接操作、胃腸道的間接操作、剖腹手術(shù)、移植手術(shù)、泌尿生殖系統(tǒng)的手術(shù)、淋巴系統(tǒng)的手術(shù)、呼吸系統(tǒng)的手術(shù)和治療腹腔內(nèi)任何器官或組織的癌癥的手術(shù)。
97.根據(jù)權(quán)利要求94的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之前、所述手術(shù)期間或所述手術(shù)后或以其任何組合方式進(jìn)行給予。
98.根據(jù)權(quán)利要求97的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之前給予。
99.根據(jù)權(quán)利要求97的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)期間給予。
100.根據(jù)權(quán)利要求97的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)后給予。
101.一種向需要預(yù)防手術(shù)后腸梗阻的患者進(jìn)行預(yù)防的方法，其中所述方法包括在手術(shù)之前、手術(shù)期間或手術(shù)后或以其任何組合方式給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
102.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之前給予。
103.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)期間給予。
104.根據(jù)權(quán)利要求101的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之后給予。
105.一種對(duì)患者進(jìn)行手術(shù)的方法，其包括給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
106.根據(jù)權(quán)利要求105的方法，其中所述方法還包括鑒定需要所述手術(shù)的患者。
107.根據(jù)權(quán)利要求105的方法，其中所述手術(shù)選自胃腸道的直接操作、胃腸道的間接操作、剖腹手術(shù)、移植手術(shù)、泌尿生殖系統(tǒng)的手術(shù)、淋巴系統(tǒng)的手術(shù)、呼吸系統(tǒng)的手術(shù)和治療腹腔內(nèi)任何器官或組織的癌癥的手術(shù)。
108.根據(jù)權(quán)利要求105的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之前、所述手術(shù)期間或所述手術(shù)后或以其任何組合方式進(jìn)行給予。
109.根據(jù)權(quán)利要求105的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之前給予。
110.根據(jù)權(quán)利要求105的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)期間給予。
111.根據(jù)權(quán)利要求105的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之后給予。
112.一種向需要預(yù)防手術(shù)后腸梗阻的患者進(jìn)行預(yù)防的方法，其中所述方法包括在手術(shù)前、手術(shù)期間或手術(shù)后或以其任何組合方式給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
113.根據(jù)權(quán)利要求112的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之前給予。
114.根據(jù)權(quán)利要求112的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)期間給予。
115.根據(jù)權(quán)利要求112的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物在所述手術(shù)之后給予。
116.一種在需要預(yù)防胃食管反流病、嘔吐、胃輕癱、腸易激惹綜合癥、便秘或結(jié)腸假性梗阻的患者中進(jìn)行預(yù)防的方法，其中所述方法包括給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
117.根據(jù)權(quán)利要求116的方法，其中胃食管反流病得到預(yù)防。
118.根據(jù)權(quán)利要求116的方法，其中腸易激惹綜合癥得到預(yù)防。
119.根據(jù)權(quán)利要求116的方法，其中便秘得到預(yù)防。
120.根據(jù)權(quán)利要求116的方法，其中結(jié)腸假性梗阻得到預(yù)防。
121.根據(jù)權(quán)利要求116的方法，其中嘔吐得到預(yù)防。
122.根據(jù)權(quán)利要求121的方法，其中所述嘔吐與抗癌化療劑治療、懷孕、貪食癥或厭食癥相關(guān)。
123.根據(jù)權(quán)利要求122的方法，其中所述嘔吐與抗癌化療劑治療相關(guān)。
124.根據(jù)權(quán)利要求122的方法，其中所述嘔吐與懷孕相關(guān)。
125.根據(jù)權(quán)利要求122的方法，其中所述嘔吐與貪食癥相關(guān)。
126.根據(jù)權(quán)利要求122的方法，其中所述嘔吐與厭食癥相關(guān)。
127.根據(jù)權(quán)利要求116的方法，其中所述胃輕癱與糖尿病相關(guān)。
128.根據(jù)權(quán)利要求127的方法，其中所述糖尿病是I型糖尿病。
129.根據(jù)權(quán)利要求127的方法，其中所述糖尿病是II型糖尿病。
130.一種在需要預(yù)防胃食管反流病、嘔吐、胃輕癱、腸易激惹綜合癥、便秘或結(jié)腸假性梗阻的患者中進(jìn)行預(yù)防的方法，其中所述方法包括給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
131.根據(jù)權(quán)利要求130的方法，其中胃食管反流病得到預(yù)防。
132.根據(jù)權(quán)利要求130的方法，其中腸易激惹綜合癥得到預(yù)防。
133.根據(jù)權(quán)利要求130的方法，其中便秘得到預(yù)防。
134.根據(jù)權(quán)利要求130的方法，其中結(jié)腸假性梗阻得到預(yù)防。
135.根據(jù)權(quán)利要求130的方法，其中嘔吐得到預(yù)防。
136.根據(jù)權(quán)利要求135的方法，其中所述嘔吐與抗癌化療劑治療、懷孕、貪食癥或厭食癥相關(guān)。
137.根據(jù)權(quán)利要求136的方法，其中所述嘔吐與抗癌化療劑治療相關(guān)。
138.根據(jù)權(quán)利要求136的方法，其中所述嘔吐與懷孕相關(guān)。
139.根據(jù)權(quán)利要求136的方法，其中所述嘔吐與貪食癥相關(guān)。
140.根據(jù)權(quán)利要求136的方法，其中所述嘔吐與厭食癥相關(guān)。
141.根據(jù)權(quán)利要求130的方法，其中所述胃輕癱與糖尿病相關(guān)。
142.根據(jù)權(quán)利要求141的方法，其中所述糖尿病是I型糖尿病。
143.根據(jù)權(quán)利要求141的方法，其中所述糖尿病是II型糖尿病。
144.一種在需要預(yù)防手術(shù)后腸梗阻、胃食管反流病、嘔吐、胃輕癱、IBS、便秘或結(jié)腸假性梗阻的患者中進(jìn)行預(yù)防的方法，通過(guò)給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽，其中所述給予是經(jīng)靜脈、皮下、口服給予或通過(guò)植入緩釋制劑而給予。
145.根據(jù)權(quán)利要求144的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)靜脈給予。
146.根據(jù)權(quán)利要求144的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)皮下給予。
147.根據(jù)權(quán)利要求144的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)靜脈口服給予。
148.根據(jù)權(quán)利要求144的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物作為緩釋制劑而植入。
149.一種在需要預(yù)防手術(shù)后腸梗阻、胃食管反流病、嘔吐、胃輕癱、IBS、便秘或結(jié)腸假性梗阻的患者中進(jìn)行預(yù)防的方法，通過(guò)給予所述患者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求8的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽，其中所述給予是經(jīng)靜脈、皮下、口服給予或通過(guò)植入緩釋制劑而給予。
150.根據(jù)權(quán)利要求149的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)靜脈給予。
151.根據(jù)權(quán)利要求149的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是經(jīng)皮下給予。
152.根據(jù)權(quán)利要求149的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物是口服給予。
153.根據(jù)權(quán)利要求149的方法，其中所述生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物作為緩釋制劑而植入。
154.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物選自
(Ac-Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO8)
(Ac-1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)NH2；(SEQID NO8)
(Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2；(SEQ IDNO1)和
(1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)NH2；(SEQ IDNO1)
或其藥學(xué)可接受鹽。
155.根據(jù)權(quán)利要求154的化合物，其中所述化合物是
(Ac-Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ IDNO8)或其藥學(xué)可接受鹽。
156.根據(jù)權(quán)利要求154的化合物，其中所述化合物是
(Ac-1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)NH2(SEQID NO8)或其藥學(xué)可接受鹽。
157.根據(jù)權(quán)利要求154的化合物，其中所述化合物是
(Inp1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)-NH2(SEQ IDNO1)或其藥學(xué)可接受鹽。
158.根據(jù)權(quán)利要求154的化合物，其中所述化合物是
(1-Apc1，Aib2，10，Glu(NH-己基)3)-人生長(zhǎng)素釋放肽(1-28)NH2(SEQ IDNO1)或其藥學(xué)可接受鹽。
159.一種藥學(xué)組合物，包括有效量的根據(jù)權(quán)利要求154-158中任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)可接受鹽，及藥學(xué)可接受載體或稀釋劑。
160.一種篩選能夠結(jié)合GHS受體的化合物的方法，所述方法包括測(cè)量化合物影響根據(jù)權(quán)利要求154-158中任一項(xiàng)的化合物結(jié)合所述受體、所述受體的片段、包括所述受體的所述片段的多肽、或者所述多肽的衍生物的能力的步驟。
161.一種在需要引起來(lái)自生長(zhǎng)素釋放肽受體反應(yīng)的受試者中引起反應(yīng)的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求154-158中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
162.一種在需要引起來(lái)自生長(zhǎng)素釋放肽受體反應(yīng)的受試者中引起反應(yīng)的方法，包括給予所述受試者治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求159的組合物。
163.一種在受試者中實(shí)現(xiàn)有益效果的方法，包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求154-158中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽，其中所述有效量對(duì)于產(chǎn)生有助于治愈或降低疾病或紊亂嚴(yán)重性或降低疾病或紊亂發(fā)作或嚴(yán)重性的可能性的有益效果是有效的。
164.一種在受試者中實(shí)現(xiàn)有益效果的方法，包括給予所述受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求159的組合物，其中所述有效量對(duì)于產(chǎn)生有助于治愈或降低疾病或紊亂嚴(yán)重性或降低疾病或紊亂發(fā)作或嚴(yán)重性的可能性的有益效果是有效的。
165.一種在需要抑制生長(zhǎng)激素分泌的受試者中進(jìn)行此抑制的方法，包括給予受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求154-158中任一項(xiàng)的生長(zhǎng)素釋放肽類(lèi)似物化合物或其藥學(xué)可接受鹽的步驟，其中所述有效量是至少足以產(chǎn)生生長(zhǎng)激素分泌可檢測(cè)的減少的量。
166.一種在需要抑制生長(zhǎng)激素分泌的受試者中進(jìn)行此抑制的方法，包括給予受試者有效量的根據(jù)權(quán)利要求159的組合物的步驟，其中所述有效量是至少足以產(chǎn)生生長(zhǎng)激素分泌可檢測(cè)的減少的量。
167.根據(jù)權(quán)利要求165的方法，其中所述生長(zhǎng)激素分泌的抑制指示用于治療特征為過(guò)量生長(zhǎng)激素分泌的疾病或病癥，用于促進(jìn)過(guò)重體重的減輕，用于促進(jìn)食欲降低，用于促進(jìn)體重維持，用于治療肥胖癥，用于治療糖尿病，用于治療包括視網(wǎng)膜病變的糖尿病的并發(fā)癥，或用于治療心血管紊亂。
168.根據(jù)權(quán)利要求167的方法，其中所述過(guò)重是包括高血壓、糖尿病、血脂異常、心血管疾病、膽結(jié)石、骨關(guān)節(jié)炎和癌癥的疾病或病癥的成因。
169.根據(jù)權(quán)利要求167的方法，其中所述促進(jìn)體重減輕降低此類(lèi)疾病或病癥的可能性。
170.根據(jù)權(quán)利要求167的方法，其中所述促進(jìn)體重減輕包括此類(lèi)疾病或病癥治療的至少一部分。
171.根據(jù)權(quán)利要求167的方法，其中所述過(guò)重是由于普-威綜合癥。
172.根據(jù)權(quán)利要求167的方法，其中肥胖癥得到治療。
173.根據(jù)權(quán)利要求166的方法，其中所述生長(zhǎng)激素分泌的抑制指示用于治療特征為過(guò)量生長(zhǎng)激素分泌的疾病或病癥，用于促進(jìn)過(guò)重體重的減輕，用于促進(jìn)食欲降低，用于促進(jìn)體重維持，用于治療肥胖癥，用于治療糖尿病，用于治療包括視網(wǎng)膜病變的糖尿病的并發(fā)癥，或用于治療心血管紊亂。
174.根據(jù)權(quán)利要求173的方法，其中所述過(guò)重是包括高血壓、糖尿病、血脂異常、心血管疾病、膽結(jié)石、骨關(guān)節(jié)炎和癌癥的疾病或病癥的成因。
175.根據(jù)權(quán)利要求173的方法，其中所述促進(jìn)體重減輕降低此類(lèi)疾病或病癥的可能性。
176.根據(jù)權(quán)利要求173的方法，其中所述促進(jìn)體重減輕包括此類(lèi)疾病或病癥治療的至少一部分。
177.根據(jù)權(quán)利要求173的方法，其中所述過(guò)重是由于普-威綜合癥。
178.根據(jù)權(quán)利要求173的方法，其中肥胖癥得到治療。
全文摘要
本發(fā)明包括對(duì)GHS受體有活性，具有更大穩(wěn)定性的根據(jù)下述通式描述的生長(zhǎng)素釋放肽的肽類(lèi)似物(R2)-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-R1，其中除了N末端氨基酸必須選自Inp、1-Apc和4-Apc以外，本說(shuō)明書(shū)提供了A1-A28、R1和R2的定義；其藥學(xué)可接受鹽和包括有效量的所述化合物的藥物組合物；以及其治療和非治療的用途。
文檔編號(hào)A61K38/00GK101541341SQ200780043625
公開(kāi)日2009年9月23日 申請(qǐng)日期2007年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月27日
發(fā)明者Z·X·董 申請(qǐng)人:益普生制藥兩合公司