專利名稱：：半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物及其合成方法和在抗腫瘤方面的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一組半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物；本發(fā)明還涉及所說所有化合物的合成方法以及在抗腫瘤方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：糖類化合物在生物體內(nèi)作為能量的存儲載體早己為人們所熟悉，隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的深入發(fā)展，糖的其它生物功能也逐漸被人們所揭示，作為信息分子它在體內(nèi)許多識別過程中起著重要作用，如細(xì)菌和病毒感染生物體、信號ft導(dǎo)等[Cleophax,丄；Olesker.A.;Rolland,A.;Gero，S.D.7^ra/z/ra"1977,33,1303.]，H類的研究已經(jīng)成為一'個熱點領(lǐng)域[(a)Spedaliere，C丄；Ginter,丄M.;Johnston,M.V.;Mueller,E.G.iC7z6饑Soc.2004,126，12758.⑨Chayajarus,K.;Chambers,D丄；Chughtai,M丄；Fairbanks,A丄Og.2004,3797.(c)Xu，R.;Hanson.S.R.;Zhang,Z.W.;Yang,Y.Y.;Schultz，P.G.;Wong,C.H.,/v4肌CZ;ew.Soc.2004，126,15654.(d)Casas-Solvas,丄M.;Vargas-Berenguel,A.;Capita-Vallvey，L.F.;Santoyo-Gonzfilez，F(xiàn).Org.2004,6(21),3687.]，li類tti合'物/L乎參與著生命體內(nèi)所有生物過程，是一種重要的生物活性物質(zhì)。實驗證明，糖的衍生物也有許多生物活性，如5-氟尿嘧啶葡糖氮苷具有抗腫瘤活性[(a)孫昌俊，戚聿新，李愛霞，張華坤，張建國，爐^i^激眾^^雜,志，1999，9，245.(b)孫昌俊，王義貴，陳再成，薛鵬，胡為峰，徐貝力，趙越然，王美玲，高箏^^眾學(xué)學(xué)條7，1994,15，1168.]，1，7-二芳基-3,5-庚二醇的葡糖氧苷有殺死細(xì)胞毒素的活性[Akihito,Y.;Yoshihiro，M.;Hiroshi,S.;Yutaka,S.■/Ato.ZVod.2002，65,283.]，乙酰苯類葡糖苷具有抗發(fā)炎活性[Araceli,S.;Maria，C.R.;RosaManrM,G.;Salvador,M.;Jos6-Luis,R.乂Ato.iVod2001,64,1360.]，黃酉同類葡糖苷具有抗氧化活性[Hou,L.F.;Zhou,B.;Yang,L.;Liu,Z丄.Og.歷oorg.O;e附.2004,2,1419.]，靈芝多糖、香菇多糖用于防癌抗癌活性，拜糖平(Acarbose)治療糖尿病活性等[Service,R.F.Sc'.置e2001，291,2340.]。硫脲衍生物以其廣泛的生物活性受到人們的關(guān)注[Schroeder,D.C.C&訓(xùn)仏v,1995,181.]。但糖基硫脲衍生物的合成及性質(zhì)研究卻鮮有報道[Goodman,I.AO^0/z>*Ctew,1958,13:233.]，而作為生物體內(nèi)的可適性分子的糖類化合物，可以信號分子糖參與了生命體內(nèi)幾乎所有的生物過程[AjitVarki.G/少coWo/ogy,1993,3(2)，97.]，并且氮苷類化合物本身也表現(xiàn)出眾多重要的生理活性[Garg,H.G;Jeanloz,R.WJCar6o/y^CA柳歷ocfe附，1985,43,135.]，另外，糖基片斷的引入可以顯著地改善酰氨基硫脲類<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>化合物的水溶性。因此，合成在同一分子內(nèi)既含有糖基又含有酰氨基硫脲的化合物無疑是一項十分有意義的工作。目前，這一領(lǐng)域的研究已得到了開展，如于建新等[于建新,劉方明,李燕萍,程亮，范歆,劉育亭.應(yīng)^眾，，1996，16(4)，化]合成了l-芳?；?4-(1，-#-/-/)-吡喃型木糖基)氨基硫脲化合物，通式為1，此類化合物中主要結(jié)構(gòu)為糖基氨基硫脲，另外一個分子片斷為芳基，鑒于此類結(jié)構(gòu)的化合物所具有的優(yōu)秀生物活性以及良好的理化性質(zhì)(水溶性好)，合成新的糖基氨基硫脲衍生物已吸引了廣大化學(xué)及醫(yī)藥科學(xué)家們的極大關(guān)注。迄今為止，這類化合物中芳基主要為苯的^7生物，包括苯并類雜環(huán)堿基，且開展的工作并不很多，而芳基為天然堿基及其衍生物所組建而成的化合物并未見報道。OArHO為研究糖基氨基硫脲雜環(huán)化合物、合成方法、及其抗腫瘤活性，本發(fā)明合成了半乳糖基氨基硫脲腺嘌呤、半乳糖基氨基硫脲苯并咪唑、半乳糖基氨基硫脲甲氧基苯甲酰氨苯并咪啤，并進(jìn)行抗腫瘤活性的研究，以期篩選得到新型糖基氨基硫脲雜環(huán)類抗腫瘤化合物。本發(fā)明所提供的半乳糖基氨基硫脲腺嘌呤、半乳糖基氨基硫脲苯并詠嗶、半乳糖基氨基硫脲甲氧基苯甲酰氨苯并咪唑，迄今均為未見有相關(guān)報道的新化合物。
發(fā)明內(nèi)容針對現(xiàn)有技術(shù)的不足以及本領(lǐng)域研究和應(yīng)用的需求，本發(fā)明的目的是提供一組半乳糖基硫脲化合物；同時本發(fā)明還提供了所述所有化合物的合成方法以及在抗腫瘤方面的應(yīng)用。本發(fā)明是以半乳糖基硫脲為目標(biāo)化合物的骨架，參照1-芳酰基-4-(1，-#^-1>吡喃型木糖基)氨基硫脲化合物結(jié)構(gòu)特點，將其中的芳?；秒s芳環(huán)香?；校?jīng)多歩反應(yīng)，設(shè)計合成了一類新型的半乳糖基氨基硫脲腺嘌呤、半乳糖基氨基硫脲苯并咪嘩、半乳糖基氨基硫脲甲氧基苯甲酰氨苯并咪唑，并研究了它們的抗腫瘤活性。本發(fā)明提供的一組糖基硫脲雜環(huán)化合物，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>(I)射B為腺嘌呤、鳥嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧^、胸腺嘧淀、三氮唑、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡唑(吲唑)、咪啤、吡啤、吡咯、吲哚、咔唑、吡咯并咪唑、噻吩并咪唑、噻嗶并咪唑之一。其中上述雜環(huán)堿基基團上可被一個或多個選自下列取代基的基團所取代(1)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基;(4)硝基；(5)氨基；(6)C1—C5烷基，C2—C5烯基或C2—C5炔基，其中各基團均可以被至少--個或多個鹵原子所取代；(7)C1—C5垸氧基，C2—C5鏈烯氧基或C2—C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少-一個或多個鹵原子所取代；C8)C1一C5烷硫基，C2—C5鏈烯硫基或C2—C5鏈炔硫基，其中各基閉均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(10)迭氮基；(11)C1一C5酯基。本發(fā)明是以全乙酸酯化的半乳糖，溴水，硫氰酸鉛，雜環(huán)堿基，氯乙酸乙酯，水合肼為原料，經(jīng)六歩合成，合成路線如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>Reactionconditions:i)P,Br2;ii)Pb(SCN)2,(CH3)2C6H4;iii)NaH,CICH2COOC2H5;iv)H2NNH2.H2Q,MeOH/EtOH;v)Ar，DMF;vi)MeONa/MeOH,pH=8.0.其中，B與權(quán)利要求1中相同。第一步l-溴-2,3,4，6-四-0-乙?；?ot-D-半乳糖的合成三口瓶中加入紅磷和酸性溶劑，用滴液漏斗加入溴水，混合反應(yīng)液在1080。C條件下攪拌0.210小時，過濾棄去紅磷。加入全乙酰化的半乳糖，同樣溫度下反應(yīng)，直到薄層層析檢測反應(yīng)物全乙?；陌肴樘侨肯?。減壓除去酸性溶劑，殘渣用飽和碳酸鈉和三氯甲烷萃取，有機萃取液用飽和食鹽水洗滌25次，無水硫酸鈉干燥，減壓除去有機溶劑得白色固體l-溴-2,3,4，6-四-0-乙?；?ct-D-半乳糖。本歩驟適用于所有上述1-溴-2，3，4，6-四-0-乙?；?-/)-半乳糖的合成。第二歩2,3,4,6-四-0-乙?；?ct-Z)-半乳糖基異硫氰酸酯的合成硫氰酸鉛、無水苯系溶劑加入三口瓶中，加熱回流后用滴液漏斗加入1-溴-2,3,4,6-四-0-乙?；?-1)-半乳糖的二甲苯溶液，反應(yīng)液回流反應(yīng)0.572小時,過濾棄去剩余的硫氰酸鉛，減壓除去溶劑，殘渣用等比例的甲苯和石油醚混合溶劑重結(jié)品，得白色固體結(jié)品2,3,4,6-四-0-乙?；誅-半乳糖基異硫氰酸酯。本歩驟適用于所有上述2,3,4,6-四-0-乙?；?《-/)-半乳糖基異硫氰酸酯的合成。第三歩雜芳環(huán)基乙酸乙酯的合成雜芳環(huán)堿基和無水堿性惰性溶劑加入三口瓶中，冰水浴冷卻后分批加入堿性催化劑，室溫攪拌2小時，氯乙酸乙酯在0.56小時內(nèi)用滴液漏斗滴加完畢，反應(yīng)液溫度控制在050"C下再反應(yīng)0.572小時，真空蒸餾除去溶劑，殘渣倒入水中并攪拌，濾出析出的固體，再用醇溶劑重結(jié)品得淡黃色品體雜芳環(huán)基乙酸乙酯。本步驟適用于所有上述雜芳環(huán)基乙酸乙酯的合成。第四歩雜芳環(huán)基乙酰肼的合成雜芳環(huán)基乙酸乙酯溶解在醇溶劑中，加熱反應(yīng)液直到固體完全溶解，加入水合肼，溫度控制在1090'C下攪拌反應(yīng)，反應(yīng)液出現(xiàn)固體后繼續(xù)攪拌反應(yīng)0.572小時。反應(yīng)液進(jìn)行抽濾，所得固體用無水醇溶劑洗滌至中性，真空干燥得白色固體雜芳環(huán)基乙酰肼。本歩驟適用于所有上述雜芳環(huán)基乙酰肼的合成。第五步l-雜芳環(huán)酰基-4-(l'-W-2',3',4',6'-四-0-乙?；鵡-D-半乳糖基)-氨基硫脲的合成雜芳環(huán)基乙酰肼和無水堿性惰性溶劑加入三口瓶，攪拌此懸浮液并加熱到140°C，繼續(xù)反應(yīng)直到變成均相反應(yīng)液，反應(yīng)液慢慢冷卻到070。C，溶解在無水堿性惰性溶劑中的2,3,4,6-四-0-乙?；?cc-D-半乳糖基異硫氰酸酯形成溶液，用滴液漏斗將其加入反應(yīng)瓶，溫度控制在070'C下反應(yīng)0.572小時。真空除去溶劑，棕黃色殘渣用無水醇溶劑溶解后用硅膠拌樣，溶劑蒸發(fā)后研成粉末狀后柱層析，收集組分，除去溶劑得淡黃色固體粉末l-雜芳環(huán)?；?4-(l'-W-2',3',4',6'-四-0-乙?；?fZ)-半乳糖基)氨基硫脲。本歩驟適用于所有上述l-雜芳環(huán)?；?4-(l'-W-2',3',4',6'-四-O-乙?；狣-半乳糖基)氨基硫脲的合成。第六步l-雜芳環(huán)?；?4-(l'-W-,Z)-半乳糖基)氨基硫脲的合成1-雜芳環(huán)酰基-4-(1'-W-2'，3',4'，6'-四-(9-乙?；?y^D-半乳糖基)氨基硫脲溶解在無水醇溶劑中，用溶解在醇溶劑中的堿性催化劑調(diào)整PH在7.510.5之間，溫度控制在070'C下反應(yīng)0.518小時，直到薄層層析檢測反應(yīng)物1-雜芳環(huán)?；?4-(1'_#-2',3',4',6'-四-6>-乙酰基-^0-半乳糖基)氨基硫脲完全消失。反應(yīng)液用陽離子交換樹脂處理至中性后有絮狀物出現(xiàn)，抽濾，所得固體真空干燥，得白色固體粉末1-雜芳環(huán)?；?4-(r-w-p-D-半乳糖基)氨基硫脲。本步驟適用于所有上述1-雜芳環(huán)?；?4-(1'-W-Z-Z)-半乳糖基)氨基硫脲的合成。其中第一步反應(yīng)中的酸性溶劑為體積百分比是5%95%的乙酸或三氟乙酸的水溶液；第二步反應(yīng)中的苯系溶劑為二甲苯、甲苯或乙苯；第三歩反應(yīng)中的堿性惰性溶劑為N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氧六環(huán)、吡啶；堿性催化劑為氫化鈉、無水碳酸鉀、甲醇鈉；醇溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、無水甲醇、無水乙醇；第四歩反應(yīng)中的醇溶劑同第三歩；第五步反應(yīng)中的堿性惰性溶劑、醇溶劑同第四歩；第六歩反應(yīng)中的醇溶劑、堿性惰性溶劑、堿性催化劑同第三歩。基中上述反應(yīng)中所有雜芳環(huán)基B為腺嘌呤、嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧啶、胸腺嘧啶、三氮唑、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡唑(吲啤:)、咪唑、吡啤、吡咯、口引哚、咔唑、吡咯并咪唑、噻盼并咪唑、噻唑并咪啤之--.。其中上述雜環(huán)堿基基團上可被-一個或多個選自下列取代基的基團所取代(l)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基；(4)硝基；(5)氨基；(6)C1—C5烷基，C2—C5烯基或C2一C5炔基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(7)C1—C5垸氧基，C2—C5鏈烯氧基或C2—C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(8)C1—C5烷硫基，C2—C5鏈烯硫基或C2—C5鏈炔硫基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(10)迭氮基；(11)C1一C5酯基。在上述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物的制備方法中，第一歩反應(yīng)中的酸性溶劑優(yōu)選為體積百分比是5%95%的乙酸水溶液；第二歩反應(yīng)中的苯系溶劑優(yōu)選為二F卩苯；第三歩反應(yīng)中的堿性惰性溶劑優(yōu)選為N，N-二甲基甲酰胺；堿性催化劑優(yōu)選為氫化鈉；醇溶劑優(yōu)選為甲醇；第四歩反應(yīng)中的醇溶劑優(yōu)選為甲醇；第五歩反應(yīng)中的堿性惰性溶劑優(yōu)選為N.N-二甲基甲酰胺；醇溶劑優(yōu)選為甲醇；第六歩反應(yīng)中的醇溶劑優(yōu)選為甲醇；堿性惰性溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺；堿性催化劑優(yōu)選為甲醇鈉?；猩鲜龇磻?yīng)中所有雜芳環(huán)基B優(yōu)選為腺嘌呤、鳥嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧啶、胸腺嘧啶、三氮唑、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡啤(吲唑)、咪唑、吡唑、吡咯、噴哚、咔啤、吡咯并咪嘩、噻n分并咪啤、噻啤并咪唑之一。其中上述雜環(huán)堿基基團上可被一個或多個選自下列取代基的基團所取代(1)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基；(4)硝基；(5)氨基；(6)C1—C5垸基，C2—C5烯基或C2—C5炔基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代(7)C1—C5烷氧基，C2—C5鏈烯氧基或C2—C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(8)Cl-C5垸硫基，C2—C5鏈烯硫基或C2—C5鏈炔硫基，其中各基團均可以被至少-一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(10)迭氮基；(11)C1—C5酯基。本發(fā)明還提供了所述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。以上所述的一種用抗腫瘤作用的藥物，其中化合物通式中堿基B為腺嘌呤、鳥嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧啶、胸腺嘧啶、三氮卩坐、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡唑(吲唑)、咪唑、吡唑、吡咯、吲哚、咔唑、吡咯并咪唑、噻吩并咪唑、噻唑并咪唑之一。其中上述雜環(huán)堿基基團上可被一個或多個選自下列取代基的基團所取代(1)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基；(4)硝基；(5)氨基；(6)C1—C5烷基，C2—C5烯基或C2—C5炔基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(7)C1—C5烷氧基，C2—C5鏈烯氧基或C2—C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(8)C1—C5烷硫基，C2—C5鏈烯硫基或C2—C5鏈炔硫基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(10)迭氮基；(11)C1一C5酯基。本
發(fā)明內(nèi)容中，可為一種藥物組合物，其特點在于包含有效量的式(I)化合物，其用途是作為治療和預(yù)防各種良性或惡性腫瘤。其中所述腫瘤包括肺癌、肝癌、前列癌、白血病、皮膚癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、淋巴癌、大腸癌、鼻咽癌、口腔癌，其中特別是指肺癌和肝癌。所述藥物組合物，含有藥物活性成分的至少式(I)化合物本身或其與-一種或多種可藥用的惰性元素賦形劑或載體的混合物。下面以本發(fā)明所述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物在抗腫瘤，尤其是對人類肺癌細(xì)胞(PG)和人類肝癌細(xì)胞(BEL-7402)等方面的實驗來進(jìn)一步闡述其應(yīng)用。采用MTT法，測定本發(fā)明化合物在體外對人類肺癌細(xì)胞株(PG)和人類肝癌細(xì)胞株(BEL-7402)的抑制作用?？鼓[瘤活性研究中，人類肺癌細(xì)胞株(PG)和人類肝癌細(xì)胞株(BEL-7402)為目標(biāo)細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基為含有10。/。BCS的1640培養(yǎng)基，對數(shù)生長期細(xì)胞用胰酶消化后，調(diào)節(jié)細(xì)胞密度為3~5^103個/匕接種在96孔培養(yǎng)板中，每孔lOO(il，放入溫度為37。C，C02含量為0.5%的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。將配制好的不同濃度的樣品往96孔培養(yǎng)板中添加50)!l/孔，不同稀釋濃度的陽性對照藥齊多夫定(Zidovudine,AZT)藥液為陽性對照，放入溫度為37°C，C02含量為0.5%的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48小時。取出96孔培養(yǎng)板，每孔加入20pl的5mg/mL的MTT，繼續(xù)培養(yǎng)4小時。取出培養(yǎng)板，倒出培養(yǎng)基，每孔加入15(^1DMSO，37。C振蕩6分鐘，490nm處測定各孔的光密度值。計算抑制率(OD陰性對照一OD樣品)/OD陰性對照x100%。本發(fā)明的化合物和藥物組合物可用于制備腫瘤的藥物。本發(fā)明藥物組合物的各種劑型可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備，例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選含有重量比為0.1%-99.5%的活性成分，最優(yōu)選含有重量比為0.5%-95%的活性成分。按照前述所說合成路線和方法，能夠穩(wěn)定、可重復(fù)性地制備得到本發(fā)明化合物；采用本發(fā)明方法制備本發(fā)明所述化合物，成本低廉、操作簡便；多次體外抗病毒活性試驗證明，本發(fā)明化合物抗病毒和抗腫瘤活性測試結(jié)果重現(xiàn)性良好。本發(fā)明化合物的體外抗腫瘤試驗結(jié)果表明所有試驗化合物對人類腫癌細(xì)胞株(PG)和人類肝癌細(xì)胞(BEL-7402)均有抑制作用。具體實施方式:以下實施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。所有化合物的結(jié)構(gòu)經(jīng)'H-NMR、"C-NMR所確定。實施例1:1-腺嘌吟基-乙酰基-4-(1'-A^-D-半乳糖基)-氨基硫脲(化合物編號為a)的合成(1)l-溴-2,3，4,6-四-0-乙?；語)-半乳糖的合成在250mL三口瓶中加入紅磷(4.5g，3.63mmol)禾卩60mL冰醋酸，邊攪拌邊用滴液漏斗加入溴水(12mL，234.10mmol)，反應(yīng)混合反應(yīng)液在室溫條件下攪拌半小時，過濾棄去紅磷。加入全乙?；腄-半乳糖(39g，lOOmmol)，同樣溫度下反應(yīng)，直到薄層層析檢測反應(yīng)物全乙酰化的D-半乳糖全部消失。減壓除去冰醋酸，殘渣用飽和碳酸鈉和三氯甲垸萃取三次，有機萃取液用飽和食鹽水洗滌三次，無水硫酸鈉干燥，減壓除去有機溶劑得白色固體1-溴-2,3,4,6-四-0-乙?；?a-Z)-半乳糖。(2)2，3,4,6-四-0-乙酰基普D-半乳糖基異硫氰酸酯的合成硫氰酸鉛(9.69g,30mmol)和50mL無水二甲苯加入250mL三口瓶中，加熱回流后，用滴液漏斗加入l-溴-2,3,4，6-四-(9-乙酰基-ct-D-半乳糖(7.9g,20mmol)的10mL無水二甲苯溶液，反應(yīng)液回流反應(yīng)3.58.5小時,過濾棄去剩余的硫氰酸鉛，減壓除去溶劑，殘渣用等比例的甲苯和石油醚混合溶劑重結(jié)晶，得白色固體結(jié)晶2,3,4,6-四-0-乙酰基-cc-D-半乳糖基異硫氰酸酯。(3)腺嘌呤基乙酸乙酯的合成腺嘌呤(5.0g,37mmol)加入盛有100mL無水N,N-二甲基甲酰胺的250mL三口瓶中，攪拌，冰水浴冷卻后分批加入氫化鈉NaH(6.1g,0.15mol,60%的油分散液)，反應(yīng)液室溫攪拌2小時，氯乙酸乙酯(150mL,140mmol)在2小時內(nèi)用滴液漏斗滴加完畢，室溫條件下再反應(yīng)2小時，真空蒸餾除去溶劑，殘渣倒入250mL水中并攪拌，濾出析出的固體，再用甲醇重結(jié)品得淡黃色晶體腺嘌呤基乙酸乙酯5.56g，產(chǎn)率為70%。(4)腺嘌呤基乙酰肼的合成腺嘌呤基乙酸乙酯(5.0g,23mmol)溶解在盛有30mL甲醇的100mL三口瓶中，加熱反應(yīng)液直到固體完全溶解，加入80。/。水合肼(2.8mL,48mmo1)，室溫下攪拌反應(yīng)，在反應(yīng)液出現(xiàn)固體后繼續(xù)攪拌反應(yīng)8小時。反應(yīng)液進(jìn)行抽濾，所得固體用無水乙醇洗滌至中性，真空干燥得白色固體腺嘌呤基乙酰肼3.60g，產(chǎn)率81%。(5)1-腺嘌呤基-乙?；?4-(1'-,2',3',4',6'-四力-乙酰基-^/)-半乳糖基)-氨基硫脲的合成腺嘌呤基乙酰肼(248mg,1.2mmol)加入到盛有15mL的100mL三口瓶中，形成的懸浮液加熱到140'C，攪拌反應(yīng)直到變成均相，反應(yīng)液慢慢冷卻到70°C。2，3，4,6-四-(9-乙酰基普￡-半乳糖異硫氰酸酯(373mg，1mmol)溶解在5mL無水無水N,N-二甲基甲酰胺中，用滴液漏斗分批將其加入反應(yīng)瓶，反應(yīng)液冷卻至室溫攪拌反應(yīng)8小時。真空除去溶劑，棕黃色殘渣用無水甲醇溶解后用硅膠拌樣，溶劑蒸發(fā)后研成粉術(shù)狀后柱層析，收集組分，除去溶劑得淡黃色固體粉末l-腺嘌呤基-乙?；?4-(1'-W-2',3'，4',6'-四-0-乙酰基-P-i)-半乳糖基)-氨基硫脲441mg，產(chǎn)率76%。IR(KBr，vmax):3433(NH)，1749,1643(C=0)，1369(Me),1231(gly-H)，1081(C=S)cm-1;'HNMR(500MHz,DMSO-d6):S9.75(1H,s，NH)，9.75(1H,s,NH)，8.73(1H,s,NH)，8.23(1H,s,adeninering-H),8.14(1H,s，adeninering-H)，7.26(2Hs,NH2),4.04-5.32(7H,m,gly-H,CH2),4.30(2Hs，COCH2)，1.91-2.16(12H，m,CH3CO);元素分析C22H28N8O10S理論值C，44.29;H,4.73;N,18.78.測量值C,44.18;H,4.69;N,18.28.ESI-MS:(MH+)597.6.(6)l-腺嘌呤基-乙?；?4-(r-W-P-D-半乳糖基)-氨基硫脲(a)的合成l-腺嘌呤基-乙?；?4-(r-,2',3',4',6'-四-0-乙?；?，D-半乳糖基)-氨基硫脲(596mg,1mmol)溶解在15mL無水甲醇中，用甲醇鈉的甲醇溶液調(diào)整PH為8左右，室溫下攪拌直到薄層層析檢測反應(yīng)物1-腺嘌呤基-乙?；?4-(1'-W-2',3',4'，6'-四-O-乙?；鵚-Z)-糖基)-氨基硫脲完全消失。反應(yīng)液用陽離子交換樹脂處理至中性后有絮狀物析出，抽濾，所得固體真空干燥，得白色固體粉末1-腺嘌呤基-乙?；?4-(r-A^-D-半乳糖基)-氨基硫脲377mg，產(chǎn)率88%。IR(KBr,v畫)3325(OH),1649(C=0)，1255(gly-H),1082(C=S)cm";'HNMR(500MHz,DMSO-d6):S9.69(1H，s,NH),8.26(1H,s，NH)，8.14(1H，s,NH),8.20(IH,s,adeninering-H),8.04(1H,s,adeninering-H),7.25(s,2H,NH2),5.59-3.39(IIH，m,gly—H,overlappedwithHofOH),3.53(2H,m,COCH2);元素分析Cl4H20N8O6S理論值C，39.25;H,4.71;N,26.15.測量值C,39.02;H,4.69;N,25.99.ESI-MS:(MH+)429.4.實施例2:l-苯并咪唑基-乙酰基-4-(l'-A^-D-半乳糖基)-氨基硫脲(化合物編號為b)的合成(1)1-溴-2，3，4,6-四-(9-乙?；鶗﨑-半乳糖的合成采用實施例1中(1)的方法和條件合成。(2)2,3,4,6-四-0-乙?；?ct-D-半乳糖基異硫氰酸酯的合成采用實施例1中(2)的方法和條件合成。(3)苯并咪唑基乙酸乙酯的合成采用實施例l中(3)的方法和條件合成，只將腺嘌呤改為苯并咪唑。(4)苯并咪唑基乙酰肼的合成采用實施例1中(4)的方法和條件合成，只將腺嘌呤基乙酸乙酯改為苯并咪唑基乙酸乙酯?！?)1-苯并咪唑基-乙?；?4-(1'-W-2'，3',4'，6'-四-0-乙?；?y-Z)-半乳糖基)-氨基硫脲的合成采用實施例1中(5)的方法和條件合成，只將反應(yīng)物改為苯并咪唑基乙酰肼，得淡黃色固體499mg，產(chǎn)率86%。'HNMR(500MHz，DMSO-d6):S10.25(1H,bs,NH)，9.84(1H，bs，NH)，8.68(1H，bs，NH),7.168.19(5H，m,benzimidazolering陽H),3.90~5.88(9H，m,gly-HandCOCH2),1.852.01(12H，3s，CH3CO);兀素分析C24H29N5O10S理.論值:C,49.74;H,5.04;N，12.08.測量值:C,49.86;H,5.08;N，12.01.ESI-MS:(MH+)580.6.(6)l-苯并咪唑基-乙?；?4-(r-AS-Z)-半乳糖基)-氨基硫脲(b)的合成采用實施例2中(6)的方法和條件合成，只將反應(yīng)物改為1-苯并咪唑基-乙?；?4-(1'—W-2',3',4',6'-四-O-乙?；?yS-D-半乳糖基)-氨基硫脲，得白色岡體粉末382mg，產(chǎn)率93%。'HNMR(500MHz,DMSO-d6):510.37(1H,bs，NH)，9.71(1H，bs,NH),8.68(1H,bs,NH),7.20~8.49(5H,m，benzimidazolering-H)，3.155.65(13H,m:gly-HandCOCH2，wereoverlappedwithHofH-O);元素分析C16H21N506S理論值:C,46.71;H,5.14;N,17.02.測量值C,46.67;H,5.08;N，17.10.ESI-MS:(MH+)412.4.以上述同樣類似的方法可以合成得到1-[2-(4-甲氧基)]-苯并咪唑基-乙?；?(r-A^-D-半乳糖萄-氨基硫脲(化合物編號為c)等。實施例3:對人類肺癌細(xì)胞株(PG)的抑制活性測定采用MTT法，以人類肺癌細(xì)胞株(PG)為目標(biāo)細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基為含有10%BCS的1640培養(yǎng)基，對數(shù)生長期細(xì)胞用胰酶消化后，調(diào)節(jié)細(xì)胞密度為3~5xl03個/孔，接種在96孔培養(yǎng)板中，每孔100^d，放入溫度為37。C，CO2含量為0.5。/。的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。將配制好的不同濃度的樣品往96孔培養(yǎng)板中添加50^1/孔，不同稀釋濃度的陽性對照藥藥齊多夫定(Zidovudine,AZT)藥液為陽性對照，放入溫度為37°C，C02含量為0.5。/。的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48小時。取出％孔培養(yǎng)板，每孔加入20pi的5mg/mL的MTT，繼續(xù)培養(yǎng)4小時。取出培養(yǎng)板，倒出培養(yǎng)基，每孔加入150WDMSa37。C振蕩6分鐘，490nm處測定各孔的光密度值。計算抑制率(OD陰性對照—OD樣品)/OD陰性對照x1000/0，并采用Reed&Muench法計算出藥物在細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)半數(shù)有效濃度(EC50)實施例4:對人類肝癌細(xì)胞株(BEL-7402)的抑制活性測定以實施例3類似方法測定所述化合物對人類肝癌細(xì)胞株(BEL-7402)的抑制活性。所述各化合物抑制人類肺癌細(xì)胞(PG)和人類膀胱癌細(xì)胞(T24)的活性數(shù)據(jù)如表所示表l:半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物抑制肺癌細(xì)胞(PG)和肝癌細(xì)胞(BEL-7402)的活性數(shù)據(jù)化合物EC50闊3PGbBEL-7402Czidovudine94.582.254.90.582200>10022.84.62"半有效濃度。6人類肺細(xì)胞。'H人類肝細(xì)胞結(jié)果表明本發(fā)明所有試驗化合物對人類肺癌細(xì)胞(PG)和人類肝癌細(xì)胞(BEL-7402)均有不同程度的抑制作用，其中三種化合物對人類肺癌細(xì)胞(PG)均有較好的抑制作用，ECsq在54.9(aM94.5^M;而化合物c對人類肝癌細(xì)胞(BEL-7402)有較強的抑制作用，ECso達(dá)到了22.8pM，a和b具有較弱的抑制活性，ECso均大于lOO(iM。權(quán)利要求1、一組半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物，其結(jié)構(gòu)如下式(I)所示其中B為腺嘌呤、鳥嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧啶、胸腺嘧啶、三氮唑、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡唑(吲唑)、咪唑、吡唑、吡咯、吲哚、咔唑、吡咯并咪唑、噻吩并咪唑、噻唑并咪唑之一。其中上述雜環(huán)堿基基團上可被一個或多個選自下列取代基的基團所取代(1)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基；(4)硝基；(5)氨基；(6)C1-C5烷基，C2-C5烯基或C2-C5炔基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(7)C1-C5烷氧基，C2-C5鏈烯氧基或C2-C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(8)C1-C5烷硫基，C2-C5鏈烯硫基或C2-C5鏈炔硫基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(10)迭氮基；(11)C1-C5酯基。2、權(quán)利要求1所述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物的制備方法，其特征在于所述目標(biāo)化合物經(jīng)六步合成第一步l-溴-2,3,4,6-四-0-乙?；?a-Z)-半乳糖的合成三口瓶中加入紅磷和酸性溶劑，用滴液漏斗加入溴水，混合反應(yīng)液在1080'C條件下攪拌0.210小時，過濾棄去紅磷。加入全乙?；陌肴樘牵瑯訙囟认路磻?yīng)，直到薄層層析檢測反應(yīng)物全乙酰化的半乳糖全部消失。減壓除去酸性溶劑，殘渣用飽和碳酸鈉和三氯甲烷萃取，有機萃取液用飽和食鹽水洗滌25次，無水硫酸鈉干燥，減壓除去有機溶劑得白色固體l-溴-2，3，4,6-四-0-乙酰基-a-D-半乳糖。第二步2,3,4,6-四-0-乙酰基-a-D-半乳糖基異硫氰酸酯的合成硫氰酸鉛、無水苯系溶劑加入三口瓶中，加熱回流后用滴液漏斗加入1-溴-2，3，4，6-四-(9-乙?；?a-Z)-半乳糖的二甲苯溶液，反應(yīng)液回流反應(yīng)0.572小時,過濾棄去剩余的硫氰酸鉛，減壓除去溶劑，殘渣用等比例的甲苯和石油醚混合溶劑重結(jié)晶，得白色固體結(jié)晶2,3,4,6-四-0-乙?；?a-D-半乳糖基異硫氰酸酯。第三步雜芳環(huán)基乙酸乙酯的合成雜芳環(huán)堿基和無水堿性惰性溶劑加入三口瓶中，冰水浴冷卻后分批加入堿性催化劑，室溫攪拌2小時，氯乙酸乙酯在0.56小時內(nèi)用滴液漏斗滴加完畢，反應(yīng)液溫度控制在05(TC下再反應(yīng)0.572小時，真空蒸餾除去溶劑，殘渣倒入水中并攪拌，濾出析出的固體，再用醇溶劑重結(jié)晶得淡黃色晶體雜芳環(huán)基乙酸乙酯。第四步雜芳環(huán)基乙酰肼的合成雜芳環(huán)基乙酸乙酯溶解在醇溶劑中，加熱反應(yīng)液直到固體完全溶解，加入水合肼，溫度控制在io9or下攪拌反應(yīng)，反應(yīng)液出現(xiàn)固體后繼續(xù)攪拌反應(yīng)0.572小時。反應(yīng)液進(jìn)行抽濾，所得固體用無水醇溶劑洗滌至中性，真空干燥得白色固體雜芳環(huán)基乙酰肼。第五歩l-雜芳環(huán)?；?4-(r-U,3',4',6'-四-0-乙酰基-y9-D-半乳糖基)-氨基硫脲的合成雜芳環(huán)基乙酰肼和無水堿性惰性溶劑加入三口瓶，攪拌此懸浮液并加熱到14(TC，繼續(xù)反應(yīng)直到變成均相反應(yīng)液，反應(yīng)液慢慢冷卻到070。C，溶解在無水堿性惰性溶劑中的2,3,4,6-四-0-乙?；?cc-Z)-半乳糖基異硫氰酸酯形成溶液，用滴液漏斗將其加入反應(yīng)瓶，溫度控制在070'C下反應(yīng)0.572小時。真空除去溶劑，棕黃色殘渣用無水醇溶劑溶解后用硅膠拌樣，溶劑蒸發(fā)后研成粉末狀后柱層析，收集組分，除去溶劑得淡黃色固體粉水1-雜芳環(huán)酰基-4-(1'-iV-2',3',4',6'-四-O-乙?；?Z)-半乳糖基)氨基硫脲。第六歩l-雜芳環(huán)?；?4-(l'-ASe-Z)-半乳糖基)氨基硫脲的合成1-雜芳環(huán)?；?4-(1'-A^2'，3',4'，6'-四-0-乙?；?y5-D-半乳糖基)氨基硫脲溶解在無水醇溶劑中，用溶解在醇溶劑中的堿性催化劑調(diào)整PH在7.510.5之間，溫度控制在070'C下反應(yīng)0.518小時，直到薄層層析檢測反應(yīng)物1-雜芳環(huán)?；?4-(l'-7V-2',3'，4',6'-四-0-乙?；?p-D-半乳糖基)氨基硫脲完全消失。反應(yīng)液用陽離子交換樹脂處理至中性后有絮狀物出現(xiàn)，抽濾，所得固體真空干燥，得白色固體粉水1-雜芳環(huán)?；?4-(1'-A^^D-半乳糖基)氨基硫脲。3、權(quán)利要求2所述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物的制備方法，其特征在于，第一步反應(yīng)中的酸性溶劑為體積百分比是5%~95%的乙酸或三氟乙酸的水溶液；第二步反應(yīng)中的苯系溶劑為二甲苯、甲苯或乙苯；第三步反應(yīng)中的堿性惰性溶劑為N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氧六環(huán)、吡啶；堿性催化劑為氫化鈉、無水碳酸鉀、甲醇鈉；醇溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇、無水甲醇、無水乙醇；第四步反應(yīng)中的醇溶劑同第三步；第五步反應(yīng)中的堿性惰性溶劑、醇溶劑同第四步；第六步反應(yīng)中的醇溶劑、堿性惰性溶劑、堿性催化劑同第三步?；猩鲜龇磻?yīng)中3所有雜芳環(huán)基b為腺嘌呤、鳥嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧啶、胸腺嘧啶、三氮唑、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡唑(吲唑)、咪唑、吡唑、吡咯、巧l哚、咔唑、吡咯并咪唑、噻吩并咪唑、噻唑并咪唑之一。其中上述雜環(huán)堿基基團上可被一個或多個選自下列取代基的基團所取代(l)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基(4)硝基；(5)氨基；(6)C1—C5烷基，C2—C5烯基或C2—C5炔基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(7)C1—C5烷氧基，C2—C5鏈烯氧基或C2—C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(8)C1—C5烷硫基，C2—C5鏈烯硫基或C2—C5鏈炔硫基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(IO)迭氮基；(11)C1一C5酯基。4、權(quán)利要求3所述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物的制備方法，其特征在于，第一步反應(yīng)中的酸性溶劑優(yōu)選為體積百分比是5%95%的乙酸水溶液；第二歩反應(yīng)中的苯系溶劑優(yōu)選為二甲苯；第三歩反應(yīng)中的堿性惰性溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺；堿性催化劑優(yōu)選為氫化鈉；醇溶劑優(yōu)選為甲醇；第四歩反應(yīng)中的醇溶劑優(yōu)選為甲醇；第五步反應(yīng)中的堿性惰性溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺；醇溶劑優(yōu)選為甲醇；第六步反應(yīng)中的醇溶劑優(yōu)選為甲醇；堿性惰性溶劑優(yōu)選為N,N-二甲基甲酰胺；堿性催化劑優(yōu)選為甲醇鈉。基中上述反應(yīng)中所有雜芳壞基b優(yōu)選為腺嘌呤、鳥嘌呤、巰基嘌呤、次黃嘌呤、胞嘧啶、脲嘧啶、胸腺嘧啶、三氮唑、苯并咪唑、苯并三氮唑、苯并吡唑(U引唑)、咪唑、卩比唑、p比咯、吲哚、咔嘩、吡咯并咪唑、噻吩并咪唑、噻唑并咪唑之一。其中上述雜環(huán)堿基基團上^被-個或多個選自下列取代基的基團所取代(1)羥基；(2)鹵原子；(3)腈基；(4)硝基；(5)氨基；(6)C1—C5烷基，C2—C5烯基或C2—C5炔基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(7)C1—C5烷氧基，C2—C5鏈烯氧基或C2—C5鏈炔氧基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(8)C1一C5烷硫基，C2—C5鏈烯硫基或C2—C5鏈炔硫基，其中各基團均可以被至少一個或多個鹵原子所取代；(9)酰氨基；(10)迭氮基；(11)C1一C5酯基。5、權(quán)利要求l中任意一項所述半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物用作抗腫瘤的藥物。全文摘要本發(fā)明公開了一組半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物及其制備方法和生物活性，此類化合物由下列通式表示。通式中B如說明書中所定義。本發(fā)明介紹了以全乙酸酯化的半乳糖，溴水，硫氰酸鉛，雜環(huán)堿基，氯乙酸乙酯，水合肼為原料，以冰醋酸、三氟乙酸、二甲苯、甲苯、乙苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氧六環(huán)、吡啶、甲醇、乙醇、異丙醇、無水甲醇、無水乙醇為溶劑；以氫化鈉、無水碳酸鉀、甲醇鈉為堿性催化劑，經(jīng)六步合成半乳糖基硫脲雜環(huán)化合物的方法。本發(fā)明所述化合物對人類肺癌細(xì)胞株和人類肝癌細(xì)胞株有不同程度的抑制作用。文檔編號A61P35/00GK101307078SQ200810001708公開日2008年11月19日申請日期2008年1月3日優(yōu)先權(quán)日2008年1月3日發(fā)明者夏有鳳,張書圣,波楊,坤程,詹天榮申請人:青島科技大學(xué)