專利名稱：：一種aFGF脂質(zhì)體、制備方法及其應用的制作方法一種aFGF脂質(zhì)體、制備方法及其應用背景資料-人酸性成纖維細胞生長因子(aFGF)是一類對來源于中胚層和神經(jīng)外胚層的多種類型的細胞，具有廣泛的生物學活性，主要分布于腦、垂體、神經(jīng)組織、視網(wǎng)膜、腎上腺、心臟和骨等器官或組織內(nèi)，在其它組織中含量很少。FGF可促進血管生成、創(chuàng)傷愈合、骨骼修復、潰瘍愈合、眼晶狀體再生、神經(jīng)組織修復、神經(jīng)突起的生長以及胚胎的發(fā)育與分化。創(chuàng)傷愈合在臨床上經(jīng)常遇到的難題是，燒傷等開放性創(chuàng)傷、潰瘍、褥瘡、糖尿病或感染等原因常會造成創(chuàng)面愈合障礙。因此，如何縮短治療時間、提高愈合質(zhì)量是目前臨床上待解決的課題。研究證實，aFGF和bFGF可促進各種組織損傷的修復，改善傷口的愈合。此外，與表皮生長因子(EGF)相比較，EGF可促進I型膠原的合成，導致瘢痕疙瘩形成；而FGF能通過對aI型前膠原基因表達的下行調(diào)節(jié)作用，抑制成纖維細胞的膠原合成，減少成纖維細胞的膠原蛋白的過量沉積，有助于防止瘢痕疙瘩的產(chǎn)生。因而應用aFGF和bFGF治療燒傷創(chuàng)面和慢性難愈性傷口(如褥瘡、慢性感染的傷口，糖尿病、營養(yǎng)缺乏癥、類固醇化病人的傷口，以及放射性傷口等)，有著廣闊的前景，可提高這類病人的傷口愈合速度和質(zhì)量，進而提高患者的生活質(zhì)量。aFGF(酸性成纖維細胞生長因子)是一種多功能強力的細胞因子，對促進成纖維細胞的代謝和膠原蛋白的形成發(fā)揮著重要功能。臨床試驗證明aFGF對皮膚光澤、滋潤、柔軟、減皺等綜合效果評價，其有效率達到93%,對祛粉剌、祛色斑、增白、改善皮膚彈性、損傷皮膚修復等綜合效果評價，有效率達到95%。如果體內(nèi)或皮膚組織中細胞因子缺乏或者失去生理平衡，不但會促進和加快皮膚老化的過程，而且還會使正常皮膚組織出現(xiàn)一系列生理功能障礙，甚至誘導病理性皮膚問題的出現(xiàn)。正是由于aFGF的獨特生理作用和生物效應，使它成為最有潛力的新型產(chǎn)品，為美容業(yè)帶來了極其廣闊的美好前景。但是，由于aFGF本身具有常溫穩(wěn)定性差，易降解，易失活；生物利用度低、半衰期短、代謝迅速等缺點，在常規(guī)劑型應用中存在諸如穩(wěn)定性差、給藥方式單一、用藥損傷大、生物利用度低等眾多缺點?，F(xiàn)今市售的aFGF主要有凍干制劑和液體制劑，尚未見其他劑型報道。脂質(zhì)體做為多肽、蛋白類藥物的載體，具有眾多優(yōu)點和用途，已被廣泛應用于制藥和化妝品中?，F(xiàn)今，國外許多知名企業(yè)紛紛以不同方式介入脂質(zhì)體藥物的市場開發(fā)，并涌現(xiàn)了一批專門從事脂質(zhì)體研究開發(fā)的公司如INEX公司、Biomira公司等，它們均擁有自己的脂質(zhì)體專利技術(shù)和產(chǎn)品。與此同時，各類脂質(zhì)體新藥紛紛上市，并迅速擴大國際醫(yī)藥市場。近年來，伴隨生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展，多肽、蛋白類藥物脂質(zhì)體產(chǎn)品的開發(fā)也取得了巨大的進步，如BernaBiotech公司采用Virosome技術(shù)，在脂質(zhì)體的磷脂雙分子層上嵌入病毒膜蛋白，制備脂質(zhì)體疫苗。已經(jīng)成功開發(fā)InflexalV流感疫苗和Epaxal甲肝疫苗兩個產(chǎn)品。是奧地利的Polymun公司，以交叉流注射(cross-flowinjection)技術(shù)研究了可產(chǎn)業(yè)化的人Cu-Zn超氧化物歧化酶脂質(zhì)體。在我國，多肽蛋白類藥物脂質(zhì)體的開發(fā)也取得了可喜的成就，截至到2006年，我國已經(jīng)先后批準口服尿激酶脂質(zhì)體凍干品、人降鈣素基因相關肽脂質(zhì)體注射液、重組干擾素02b脂質(zhì)體乳裔和注射用尿激酶脂質(zhì)體凍干品等四個多肽、蛋白類藥物脂質(zhì)體產(chǎn)品。本專利將酸性成纖維細胞生長因子(aFGF)制備成脂質(zhì)體，可作為原料，輔以其他的活性物質(zhì)及輔料，制備成常用的藥劑形態(tài)發(fā)揮aFGF的藥效，或者與其他生物美容活性物質(zhì)如透明質(zhì)酸等一起，通過相應的制備工藝，制成水劑、霜劑、乳劑等護膚品，達到皮膚損傷的快速修復，皺紋的修復與袪皺，防曬、輻射檢驗后的護理，敏感性皮膚護理、各類疤痕的祛除修復等功效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個目的是利用脂質(zhì)體對aFGF進行保護。脂質(zhì)體包裹aFGF進入脂質(zhì)囊泡后,可有效避免aFGF與外界環(huán)境(如酸堿度等)的直接接觸失活。對aFGF起到較好的保護作用。本發(fā)明的另一個目的是利用脂質(zhì)體的細胞親和性與生物相容性提高aFGF的利用率。脂質(zhì)體囊泡具有類似生物膜脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)，對正常細胞和組織無損害和抑制作用，并可長時間吸附于靶細胞周圍，使aFGF能向靶細胞透過，aFGF脂質(zhì)體也能通過融合進入細胞內(nèi)，經(jīng)溶酶體消化釋放出aFGF,提高療效。本發(fā)明的另一個目的是利用脂質(zhì)體緩慢釋藥的特性實現(xiàn)aFGF的長效作用。脂質(zhì)體的脂質(zhì)囊泡具有貯存藥物的作用，制成aFGF脂質(zhì)體后給藥，藥物的釋放需要先透過磷脂膜因此釋放緩慢持久。本發(fā)明提供了一種aFGF脂質(zhì)體,包含1.2%~3.5%重量的aFGF、4.5X6.5M重量的磷脂、23~3.3°/。重量的膽固醇、和20~25°/。重量的保護劑。在本發(fā)明中，所述的aFGF選自基因工程發(fā)酵純化提取的aFGF，其宿主菌選自大腸桿菌BL21(DE3)、BL21(DE3)rosatta、BL21(DE3)plyss,優(yōu)選BL21(DE3)菌株。按照本發(fā)明，所述的磷脂為天然大豆磷脂、氫化磷脂、合成磷脂雙肉豆蔻磷脂酰膽堿(DMPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二肉豆蔻酰磷脂甘油(DMPG)、二棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二硬脂酸磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二棕櫚酰磷脂酸(DPPA)和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSP&PEG2000)等，優(yōu)選氫化磷脂或DSPE-PEG2000。本發(fā)明的脂質(zhì)體可以為混懸液的形式，進一步包含高分子材料如0.5°/<^3%的PVP作為助4懸劑。其中所述的脂質(zhì)體平均粒徑為100-300nm，優(yōu)選200腦。本發(fā)明的脂質(zhì)體可以為凍干產(chǎn)品的形式，進一步包含甘露醇。本發(fā)明還提供了一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體的制備方法，包含以下步驟(1)利用LB培養(yǎng)液發(fā)酵，菌體破碎液通過陽離子交換層析、肝素親和層析柱、HPLC進行分離，收集的aFGF蛋白；(2)加入磷脂與膽固醇混勻后，加無水乙醇溶解得脂質(zhì)溶液，蒸發(fā)，制成脂質(zhì)薄膜；(3)脂質(zhì)薄膜水溶液水合，震蕩，或?qū)?2)中的脂質(zhì)溶液直接與水溶液震蕩混合，制成脂質(zhì)分散水溶液；(4)將脂質(zhì)分散水溶液經(jīng)超聲、乳化、過濾；(5)調(diào)節(jié)脂質(zhì)分散水溶液pH值至6.8，與aFGF及蛋白保護劑孵育，濾膜過濾，得aFGF脂質(zhì)體溶液。本發(fā)明還涉及aFGF脂質(zhì)體在制備用于治療急慢性創(chuàng)面修復，燒傷等開放性創(chuàng)傷、潰瘍、褥拖、糖尿病或感染等原因常會造成創(chuàng)面愈合藥物制劑中的應用。按照本發(fā)明，所述的藥物制劑優(yōu)選為透皮藥物制劑。本發(fā)明還涉及上述的aFGF脂質(zhì)體在美容中的應用。實例一aFGF脂質(zhì)體的制備(一)稱取一定量的大豆卵磷脂和膽固醇，溶于無水乙醇中，于5(TC恒溫水浴減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，抽至無水乙醇揮盡，形成均勻薄膜，加入一定濃度的檸檬酸溶液適量，50'C恒溫水浴溫育2h，間歇超聲分散，過0.22Pm微孔濾膜整粒，適量aFGF原液與保護劑混合后加入，溶液調(diào)pH為6.8，37。C孵育20min，即得。實施例二aFGF脂質(zhì)體的制備(二)將脂質(zhì)體成膜劑(磷脂和膽固醇按照重量比4:1)加入燒杯中，加入2-6倍量的氯仿溶解，將溶液加入茄形瓶中，在35-45'C水浴中加熱減壓旋轉(zhuǎn)干燥，揮盡有機溶劑，加入含有aFGF、右旋糖苷和PEG4000的緩沖鹽溶液(pH6.8)，4'C水化12h，冰浴下間斷超聲10min，0.22nm微孔濾膜超濾，分裝，加入甘露醇凍干，即得。實例三aFGF脂質(zhì)體的穩(wěn)定性研究分別將上述3批aFGF脂質(zhì)體、aFGF水溶液于溫度40°C、相對濕度75%條件下密閉放置。于放置后0、1、2、3月。分別用ELISA法測定脂質(zhì)體和水溶液中aFGF的含量，以O月時脂質(zhì)體和水溶液中aFGF含量為100%,其它各時間藥物含量與之作比較，得出藥物含量隨時間變化百分率，結(jié)果表明，經(jīng)溫度40°C、相對濕度75%條件下，放置3個月，aFGF在脂質(zhì)體中藥物含量變化不大，而aFGF在水溶液中藥物含量降低，證實aFGF用脂質(zhì)體包封后，能明顯提高藥物的穩(wěn)定性。表l.不同條件下aFGF脂質(zhì)體的包封率(％)考察O(Day)135103060904'C82.1579.2569.1576.3578.3274.4768.3165.0725'C82.1583.2376.4169.7675.1662.9451.9640.9830'C82.1581.3680.卯75.1277.3854.9923.52—40'C82.1578.6972.2062.1354.1929.89——Light(4脆L)82.1583.3370.2275.9268.3372.6574.56—表2.不同條件下aFGF脂質(zhì)體的物理穩(wěn)定性考察(％)O(Day)135103060卯4'C1.021.641.552.182.223.562.973.2525'C1.021.131.091.331.651.094.194.2530'C1.021.551.963.364.126.6738.53—40'C1.021.332.995.5815.5930.64——1.021.993.069.289.4626.528.9—表3.不同條件下aFGF脂質(zhì)體的生物學活性考察(X105IU/mL)O(Day)135103060904'C5.9715.7555.6975.7825.5195.3765.6645.55925'C5.9716.1565.5935.7155.6114.8824.6144.25930'C5.9715.3185.0024.2514.1153.1712.515—40'C5.9714.9554.3754.5043.9722.987——Light(4100xL)5.9715.6555.9755.4365.5314.4133.0562.756實施例4:aFGF脂質(zhì)體對糖尿病大鼠深二度燙傷創(chuàng)面愈合的作用實驗方法1、實驗動物及分組SPF級SD大鼠78只，雌雄各半(廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格號SCXK(粵)2003—0001粵監(jiān)證字2006A014,八周齡，體重220—270g,所有動物隨機分成7組，每組12只aFGF脂質(zhì)體(實施例l)高、中、低三個劑量組；空白脂質(zhì)體組(空白基質(zhì)組)aFGF原液組(陽性對照組)；生理鹽水組(陰性對照組)正常組。大鼠于暨南大學動物飼養(yǎng)室適應性飼養(yǎng)一周，自由飲水、飲食。實驗前禁食12小時，自由飲水。2、糖尿病大鼠燙傷模型的制備大鼠予65mg/kg體重STZ(以無菌枸櫞酸-枸櫞酸鈉鎂液配成2%溶液，pH4.5),腹腔內(nèi)一次注射誘導糖尿病，注射一周后尾靜脈采血，檢測隨機血糖水平和體重變化；若誘導劑注射前基礎血糖〈8.9mol/L,誘導后血糖水平〉11.2mol/L，大鼠體重明顯下降，隨機抽樣的胰腺組織學觀察證實胰島細胞被破壞即可視為糖尿病模型成功。誘導成功二月后，實驗大鼠經(jīng)3%的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(劑量1.5mL/Kg體重)，用脫毛劑(8%Na2S)大鼠背部凈毛，面積為6cmX5cm。用自制大鼠燙傷器(銅制，直徑1.8cm圓形烙鐵)于IO(TC開水中煮沸10min后迅速在距大鼠背中部脊柱兩側(cè)1.5cm處，各燙一個圓形創(chuàng)面，每只大鼠兩個創(chuàng)面，直徑1.8cm，面積2.540^,燙傷時間30s。損傷程度為深II度。3、給藥3.1給藥方法:①取配制好的高劑量組、中劑量組、低劑量組aFGF脂質(zhì)體混懸液(120嗎/ml,25ng/ml,5ng/mi)，aFGF原液(25嗎/ml)和空白脂質(zhì)體混懸液lOOpL,用微量移液器均勻滴加于燙傷創(chuàng)面，涂抹均勻。模型組以生理鹽水代替藥物涂抹于創(chuàng)面。②上藥5min后，創(chuàng)面用滅菌凡士林紗布包扎，各組燙傷后當天即開始給藥，以后隔天換藥一次，至第24天創(chuàng)面完全愈合。③各組動物分籠飼養(yǎng)，自由攝食，飲水。4、藥效學評價方法4.1創(chuàng)面觀察4.1.1創(chuàng)面形態(tài)觀察于燙傷后第3天、7天、14天、21天、24天肉眼觀察燙傷創(chuàng)面炎癥狀況。4丄2創(chuàng)面愈合時間從燙傷后即開始計時，記錄各組創(chuàng)面愈合時間。4丄2創(chuàng)面動態(tài)愈合率于燙傷后第3天、7天、14天、21天、24天，采用透明膜描記稱量法，計算創(chuàng)面愈合百分率。4.2組織病理形態(tài)學評價于燙傷后第7天、14天、21天處死動物，取燙傷創(chuàng)面全層皮膚及周圍lcn^正常皮膚用10。/。甲醛固定，HE染色觀察組織病理變化。5、統(tǒng)計學分析方法采用SPSS13.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理。結(jié)果以；土SD表示，兩因素橋因設計資料采用其方差分析進行統(tǒng)計分析，組間均數(shù)差異顯著性以q檢驗判別；成組設計資料采用t檢驗進行統(tǒng)計分析。PO.05為差異顯著；戶O.01為差異非常顯著。結(jié)果1.創(chuàng)面觀察1.1創(chuàng)面形態(tài)觀察l丄l創(chuàng)面愈合基本情況大鼠經(jīng)燙傷后日?；顒蛹帮嬍澄匆姰惓?。ld內(nèi)可見燙傷部位形成水泡，創(chuàng)面整體發(fā)白,組織略有淤血，但燙傷面無明顯界限。第3天見燙傷面顏色加深,界限明顯,并逐漸形成深色硬痂。35天開始痂皮邊緣翹起、上翻。第79天開始有痂皮脫落。隨著治療的進行,燙傷面逐漸縮小至完全愈合，新生表皮組織逐漸形成。1.2創(chuàng)面愈合時間表4給出了不同試驗組創(chuàng)面愈合時間數(shù)據(jù)，試驗數(shù)據(jù)顯示aFGF脂質(zhì)體高、中劑量組、空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組和aFGF原液(陽性對照)組的創(chuàng)面愈合時間較陰性對照組有顯著提前(P<0.01)，創(chuàng)面愈合時間較陰性對照組分別提前4.2天、5.0天、3.3天和3.8天；aFGF脂質(zhì)體低劑量組的創(chuàng)面愈合時間與陰性對照組比較有差別(戶<0.05)創(chuàng)面愈合時間較陰性對照組提前2.1天；aFGF脂質(zhì)體高劑量組創(chuàng)面愈合時間與aFGF原液(陽性對照)組相近；aFGF脂質(zhì)體中劑量組的創(chuàng)面愈合時間較空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組有明顯提前(尸<0.05)創(chuàng)面愈合時間較空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組提前1.7天。另外，aFGF脂質(zhì)體中劑量組的創(chuàng)面愈合時間較高劑量組提前；顯示aFGF中劑量給藥創(chuàng)面愈合有明顯提早。表4.創(chuàng)傷愈合時間(d，；±SD)(n=4)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>1.3創(chuàng)面動態(tài)愈合率以燙傷后第3天時的創(chuàng)面面積為原始創(chuàng)面面積，計算其他各時相點的創(chuàng)面愈合百分率，實驗結(jié)果見表5-2。表5.創(chuàng)傷愈合率(％,S±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>與陰性對照比較*尸<0.05"尸O.01;與空白脂質(zhì)體比較分析表5中數(shù)據(jù)可以看出①燙傷后第7天組中，aFGF脂質(zhì)體中劑量組的創(chuàng)面愈合率顯著性高于陰性對照組(P<0.01)和空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組(尸<0.05)的創(chuàng)面愈合率；②燙傷后第14天時，aFGF脂質(zhì)體中劑量組、aFGF脂質(zhì)體高劑量組和aFGF原液(陽性對照)組的創(chuàng)面愈合率顯著性高于陰性對照組(/><0.01)。aFGF脂質(zhì)體中劑量組和aFGF脂質(zhì)體高劑量組的創(chuàng)面愈合率顯著性高于空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組(PO.01);③燙傷后第21犬時，aFGF脂質(zhì)體中劑量組、陽性對照組、aFGF脂質(zhì)體高劑量組、aFGF脂質(zhì)體低劑量組的創(chuàng)面愈合率顯著性高于陰性對照組(尸<0.01)。另外，空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組的創(chuàng)面愈合率也較陰性對照組有顯著性差異(尸<0.05);④燙傷后第24天時，給藥組創(chuàng)面愈合基本完全，僅有陰性對照組創(chuàng)面尚未全愈。aFGF脂質(zhì)體中劑量組、aFGF脂質(zhì)體高劑量組和aFGF原液(陽性對照)組的創(chuàng)面愈合率顯著性高于陰性對照組(尸<0.05)，aFGF脂質(zhì)體中劑量組的創(chuàng)面愈合率顯著性高于空白脂質(zhì)體(基質(zhì))組(尸<0.05)。權(quán)利要求1.一種aFGF脂質(zhì)體，包含1.2％～3.5％重量的aFGF、4.5％～6.5％重量的磷脂、2.3～3.3％重量的膽固醇、和20～25％重量的保護劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體，其中所述的aFGF選自基因工程發(fā)酵純化提取的aFGF,其宿主菌選自大腸桿菌BL21(DE3)、BL21(DE3)rosatta、BL21(DE3)plyss,優(yōu)選BL21(DE3)菌株。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體，其中所述的碟脂為天然大豆磷脂、氫化磷脂、合成磷脂雙肉豆蔻磷脂酰膽堿(DMPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二肉豆蔻酰磷脂甘油(DMPG)、二棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二硬脂酸磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二棕櫚酰磷脂酸(DPPA)和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)等，優(yōu)選氫化磷脂或DSPE-PEG2000。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體，其中所述的脂質(zhì)體為混懸液的形式，進一步包含高分子材料作為助懸劑。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體，其中所述的脂質(zhì)體平均粒徑為100-300nm，優(yōu)選200nm。6.根據(jù)權(quán)利要求l所述的aFGF脂質(zhì)體，其中所述的脂質(zhì)體為凍干產(chǎn)品的形式，進一步包含甘露醇。7.—種根據(jù)權(quán)利要求l所述的aFGF脂質(zhì)體的制備方法，包含以下步驟(1)利用LB培養(yǎng)液發(fā)酵，菌體破碎液通過陽離子交換層析、肝素親和層析柱、HPLC進行分離，收集的aFGF蛋白(2)加入磷脂與膽固醇混勻后，加無水乙醇溶解得脂質(zhì)溶液，蒸發(fā)，制成脂質(zhì)薄膜(3)脂質(zhì)薄膜水溶液水合，震蕩，或?qū)?2)中的脂質(zhì)溶液直接與水溶液震蕩混合，制成脂質(zhì)分散水溶液；(4)將脂質(zhì)分散水溶液經(jīng)超聲、乳化、過濾；(5)調(diào)節(jié)脂質(zhì)分散水溶液pH值至6.8,與aFGF及蛋白保護劑孵育，濾膜過濾，得aFGF脂質(zhì)體溶液。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體在制備用于治療急慢性創(chuàng)面修復，燒傷等開放性創(chuàng)傷、潰瘍、褥瘡、糖尿病或感染等原因造成的難愈性創(chuàng)面治療的藥物制劑中的應用。9.權(quán)利要求8所述的應用，其中所述的藥物制劑為透皮藥物制劑。10.權(quán)利要求1所述的aFGF脂質(zhì)體在美容中的應用。全文摘要本發(fā)明涉及藥物制劑及化妝品領域，具體涉及一種aFGF脂質(zhì)體、制備方法及其應用。該aFGF脂質(zhì)體包括以下組分及含量(重量百分數(shù))aFGF1.2％～3.5％，保護劑20％～25％，大豆磷脂4.5％～6.5％，膽固醇2.3％～3.3％。此種aFGF脂質(zhì)體可作為半成品制備成各種藥用的劑型或添加到不同劑型的美容護膚品中，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明產(chǎn)品可明顯提高aFGF穩(wěn)定性，促進皮膚對aFGF的吸收和利用，具有與人體同源性高，安全性高，親和力強，無毒副作用，適用范圍廣的優(yōu)越特點。用于急慢性創(chuàng)面修復，燒傷等開放性創(chuàng)傷、潰瘍、褥瘡、糖尿病或感染等原因造成的難愈性創(chuàng)面的治療，同時也適用于粘膜創(chuàng)傷、燙傷及皮膚美容治療后的修復。文檔編號A61K9/127GK101491498SQ20081002600公開日2009年7月29日申請日期2008年1月25日優(yōu)先權(quán)日2008年1月25日發(fā)明者卉張,李校堃,蘇志堅,文趙,琪項,黃亞東申請人:廣州暨南大學醫(yī)藥生物技術(shù)研究開發(fā)中心