專利名稱：：格爾德霉素衍生物用于制備治療化療誘發(fā)脫發(fā)癥的藥物的用途的制作方法
技術(shù)領域：
：本發(fā)明涉及格爾德霉素衍生物的新用途，尤其是格爾德霉素衍生物在化療誘發(fā)脫發(fā)癥領域的用途。
背景技術(shù)：
：頭發(fā)是由毛根，毛球(生發(fā)中心)以及毛干所組成。細胞在毛球內(nèi)增生，毛發(fā)從毛根處通過頭皮生長出來。最后的結(jié)果也就是一股緊密的角蛋白。毛發(fā)的生長分為三個階段。第一個階段是毛發(fā)生長初期，它是生長期，85-90%的人類發(fā)囊處于毛發(fā)生長初期。每個發(fā)囊包含有有絲分裂活動的母細胞球狀底部。從這些基礎上，全部毛干細胞分化并生長。細胞成排的向毛球上部移動并垂直性的延長。最后它們被迫向上用力并鉆出皮膚表面。人類的毛球細胞平均每12到24小時就會分裂。由于這種實質(zhì)性的細胞有絲分裂活動，毛球細胞對細胞毒素藥物極為敏感。人類的毛發(fā)生長初期持續(xù)2到6年。第二個階段是毛發(fā)生長中期，人類要持續(xù)幾周。在這個階段毛根同毛球相分裂并結(jié)束色素貯存，發(fā)根末端鉆出毛球。只有不到1%的人類頭發(fā)會經(jīng)歷毛發(fā)生長中期。第三個階段稱為毛發(fā)生長終期，其特性是缺少了細胞有絲分裂活動。該階段持續(xù)3到6個月。大約10%的人類毛發(fā)處于毛發(fā)生長終期。(Do".Sewf/J.Owco/.25:562-570.柳丄So威M^/.丄.S6..柳-概)化療誘發(fā)脫發(fā)癥化療常常合并有脫發(fā)或毛發(fā)損失("on:Se/m'".0"co/.25:562-570.)。許多常用的化療藥物能夠誘發(fā)毛發(fā)脫失，雖然不同的藥引起脫發(fā)的能力有差異。環(huán)磷酰胺、道諾紅菌素、多烯紫衫醇、阿霉素、足葉乙甙、異環(huán)磷酰胺、太平洋紫杉醇、替尼泊甙及托泊替康會產(chǎn)生許多嚴重的影響(Jom箏79S&ieceWCa"cer,777-"6.Pe^y)。在誘發(fā)脫發(fā)方面效果較差的藥物有放線菌素、5-氟尿嘧啶、羥基脲、甲氨蝶呤、絲裂霉素、米托蒽醌、氮芥、長春堿、長春新堿、去乙酰長春酰胺和長春花(5"/"附ore,A^.，附/"ams在附儀z'叫7"6,/^.293-555，595-606.)。但是，這些細胞毒性化療藥物常常聯(lián)合使用，這樣會能夠增加個別導致脫發(fā)的藥物的風險。有關(guān)化療誘發(fā)的脫發(fā)機制方面的進行的研究相當少。大概是由于細胞毒性劑能夠采用消滅腫瘤細胞和其它增生性細胞的方式消滅毛囊細胞，這樣的解釋似乎合理的。然而，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)阿霉素能夠啟動凋亡機制，消滅毛細胞(Cece.7嵐/匿"75,,-纖)。同樣的研究也發(fā)現(xiàn)doxorubin毒性的目標是毛囊基質(zhì)以及上毛根細胞。另一項研究也報道環(huán)磷酰胺能夠明顯的誘發(fā)毛發(fā)生長初期毛囊的細胞凋亡(Sc/u7/z'等.J./"veW.DennWo/.77/:)。現(xiàn)有治療藥物免疫療法及相關(guān)藥物治療斑禿的治療方法有局部免疫療法、系統(tǒng)免疫療法、光化學治療、光動力學治療和免疫調(diào)節(jié)劑治療等，其中局部免疫療法和免疫調(diào)節(jié)劑因其療效肯定，副作用小而被廣泛使用。局部免疫治療又稱接觸致敏療法。1976年Rosenberg等人開創(chuàng)了局部免疫治療，即將接觸致敏劑如二硝基氟苯。二苯環(huán)丙烯酮、二丁基酯角鯊烯酸等外用于禿發(fā)區(qū)，激發(fā)接觸性過敏反應。致敏劑以DPCP最常用，該方法治療斑禿的有效率通常在50%以上，但停藥后仍有復發(fā)的可能。FK506是一種強效T細胞免疫抑制劑，是從tsukubaensis鏈酶菌中產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，局部外用可直接刺激毛囊，促進頭發(fā)再生。Mcelwee等利用Dundee實驗禿毛大鼠體毛再生，毛囊炎癥浸潤明顯減輕。由于FK506局部外用，可避免環(huán)孢菌素等系統(tǒng)免疫調(diào)節(jié)劑造成的對整體免疫系統(tǒng)的抑制，因此有望成為新型治療斑禿的藥物。5-a還原酶抑制劑及相關(guān)藥物隨著人們認識到DHT是體內(nèi)一種對頭發(fā)產(chǎn)生負性作用的激素，而5-a還原酶抑制劑可阻斷睪酮轉(zhuǎn)化為DHT，因此5-a還原酶抑制劑就成為治療脂溢性脫發(fā)新的研究熱點。非那甾胺是目前唯一用于臨床的5-a還原酶的抑制劑。實驗證明非那甾癌變可通過抑制頭皮內(nèi)5-a還原酶抑制睪酮向DHT轉(zhuǎn)化，降低脫發(fā)區(qū)頭皮的DHT，促進毛發(fā)生長。臨床報道口服非那甾胺lmg/日，一年內(nèi)有48%的病人頭發(fā)再生，二年內(nèi)有66%的病人頭發(fā)再生，且治療劑量的非那甾胺副作用小，耐受性好。RU58841等人研究發(fā)現(xiàn)被移植了人類頭發(fā)的睪酮模型裸鼠局部應用RU58841可引起毛發(fā)周期重新啟動，毛發(fā)生長速率顯著升高，而RU58841可能通過抑制雄激素受體活性來發(fā)揮作用。米諾地爾擦劑是目前美國FDA唯一批準上市的治療禿發(fā)的非處方藥。實驗證明2%--5%米諾地爾均可促進雄激素性脫發(fā)患者頭發(fā)再生且能阻止脫發(fā)，其中以5%米諾地爾療效最好，長期外用該藥安全性高，不會產(chǎn)生嚴重的副作用。毛囊體外培養(yǎng)實驗表明，米諾地爾促進毛發(fā)生長是直接刺激毛囊，促進毛囊上皮生長的結(jié)果。最新研究又發(fā)現(xiàn)米諾地爾還可能通過對毛乳頭細胞中的血管內(nèi)皮生長因子的向上調(diào)節(jié)作用，而促進毛發(fā)生長。格爾德霉素的應用格爾德霉素(Geldanamycin，GA)的17位衍生物是目前研究最多的位點。利用烷基胺基取代17位的甲氧基，提高了17位基團與Asp40形成氫鍵的穩(wěn)定性。格爾德霉素17位烷基胺基衍生物目前報道的有50多種，有體外活性的衍生物有40余種，其中多種衍生物有較高體內(nèi)活性。17位甲氧基被烯丙胺基取代所得衍生物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)在體外活性檢測中對pl85erbB'2的IC50為31nmol/L，活性好于格爾德霉素(其IC50為70nmol/L)，目前17-AAG已經(jīng)進入I1期臨床。其化學分子式如下H17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-AAG)格爾德霉素的抗病毒作用中國專利申請"17-(四氫呋喃-2'-基)甲胺-17-去甲氧基格爾德霉素的抗病毒作用"(申請?zhí)?00610072996.2，申請日2006年4月10日，公開號CN1827617，公開日2006年9月6日)公開了一種17-(四氫呋喃-2'-基)甲胺-17-去甲氧基格爾德霉素在抗病毒中的應用，抗病毒活性研究結(jié)果顯示，所說化合物具有強抗病毒活性和廣抗病毒譜，為今后深入研究與開發(fā)所說化合物成為臨床有效的抗病毒藥物奠定了良好的基礎。格爾德霉素在治療尖銳濕疣中的應用中國專利申請"格爾德霉素(C-3559)在制備治療尖銳濕疣、皰疹病毒生殖道感染藥物及制備抗脊髓灰質(zhì)炎病毒藥物中的應用"(申請?zhí)?3134665.0，申請日2003年9月25日，公開號CN1600306,公開日2005年3月30日)公開了格爾德霉素在制備治療尖銳濕疣藥物中的應用。格爾德霉素對健康犢牛股內(nèi)側(cè)皮膚無刺激作用。格爾德霉素有抑制牛乳頭狀瘤病毒DNA復制作用，可使瘤體發(fā)生萎縮，老化，體積變?。桓駹柕旅顾卦谥苽渲委煱捳畈《旧车栏腥舅幬镏械膽?。C-3559在細胞培養(yǎng)內(nèi)有廣譜抗病毒作用，對多種DNA及RNA病毒都有在微摩爾水平的抗病毒活性。經(jīng)體外傳41代，未分離出HSV-1對格爾德霉素的耐藥毒株。HSV-1GA耐藥訓練第15代與野株具有相同的阿昔洛韋敏感性。對細胞無毒濃度格爾德霉素可特異抑制HSV-1DNA合成。在小白鼠皰疹病毒2型陰道感染模型內(nèi)，可有效抑制皰疹病毒2型的復制，顯著降低病毒排出量，降低小白鼠的死亡率，延長感染小白鼠的平均生活日，效果優(yōu)于相同劑量的阿昔洛韋；所有劑量組對小白鼠體重增長無影響。格爾德霉素的抗腫瘤作用格爾德霉素作為一種新型強效的苯醌安莎類抗生素，為我國開發(fā)的一類新藥，具有較廣泛的抗菌譜，并具有抗腫瘤活性。格爾德霉素通過與HSP90特異性結(jié)合來發(fā)揮抗腫瘤作用，HSP90表達水平高的腫瘤細胞對格爾德霉素敏感。格爾德霉素特異性作用于HSP90氨基端的ATP/ADP結(jié)合位點，競爭性抑制HSP90的ATP酶活性，使HSP90處于ADP結(jié)合的構(gòu)型，阻礙"關(guān)"狀態(tài)HSP90多分子伴侶復合體形成，迅速使效應蛋白失活，失去穩(wěn)定性，通過泛素化蛋白酶體途徑降解，同時影響多條細胞信號傳導通路實現(xiàn)多點攻擊，摧毀腫瘤賴以生存的整個信號通路網(wǎng)絡，使腫瘤細胞凋亡、生長抑制。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種格爾德霉素衍生物的新用途，即17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-AAG)用于制備治療化療誘發(fā)脫發(fā)癥的藥物的用途。本發(fā)明所述的17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-AAG)為商品化產(chǎn)品，例如，可購買自SIGMA公司。將17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-AAG)制備成化療誘發(fā)脫發(fā)癥的藥物，其應用劑量約為0.1415pM/m2。在以下的實施例中，通過化療脫發(fā)發(fā)生的小鼠模型，在脫毛的小鼠背部皮內(nèi)注射50pM的格爾德霉素50ul，可以有效的治療化療誘發(fā)的突發(fā)并發(fā)癥。因而初步驗證了本發(fā)明所述的格爾德霉素衍生物可用于制備治療化療誘發(fā)脫發(fā)癥的藥物的用途。通過本發(fā)明所述的格爾德霉素衍生物17-AAG，可以開發(fā)出一種新的治療化療后脫發(fā)藥物，而且具有可靠的安全性，可以大大提高化療病人的生活質(zhì)量，減輕病人的心理壓力，從而可以更好的配合癌癥的治療。圖1為三組實驗小鼠的對比照片，圖中，A為紫杉醇化療組，B為正常對照組，C為環(huán)磷酰胺化療組；圖2為五組實驗小鼠的對比照片，圖中，A為正常對照組；B為經(jīng)環(huán)磷酰胺化療后脫毛治療組，C為經(jīng)紫杉醇化療后脫毛治療組，D為經(jīng)環(huán)磷酰胺化療后脫毛無治療組；E為經(jīng)紫杉醇化療后脫毛無治療組；圖3為用藥前后各組小鼠的體重變化圖；圖4為五組實驗小鼠的毛囊組織切片圖(IOX)，圖中，a為正常對照組，b為紫杉醇化療后治療組，c為環(huán)磷酰胺化療后治療，d為環(huán)磷酰胺化療無治療組，e為紫杉醇化療無治療組。具體實施方式實施例化療后脫發(fā)的動物模型及治療1、實驗材料實驗用動物為4-6周齡SPF級Km小鼠，由中山大學實驗動物中心提供，室溫環(huán)境下伺養(yǎng)。注射用環(huán)磷酰胺、紫杉醇，購于中山大學腫瘤醫(yī)院，也可用其它市售產(chǎn)品；治療藥物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-AAG)，購自SIGMA公司。其他生理鹽水；水合氯醛；水浴鍋等加熱設備。2、實驗方法和結(jié)果將實驗小鼠隨機分為五組對照組、環(huán)磷酰胺化療實驗組(無藥物治療)、環(huán)磷酰胺化療+藥物治療組、紫杉醇化療組(無藥物治療)、紫杉醇化療+藥物治療組。將上述各組小鼠背部毛發(fā)剪掉，待新毛長出后在腹腔內(nèi)分別注射環(huán)磷酰胺120mg/kg體重、紫杉醇50mg/kg體重誘導小鼠毛發(fā)脫落(對照組除外)，每隔七天注射一次，連續(xù)注射三次。結(jié)果經(jīng)環(huán)磷酰胺和紫杉醇化療組的小鼠和對照組相比出現(xiàn)了明顯的脫毛現(xiàn)象。如圖1所示。在第三次注射后對小鼠進行治療。將小鼠背部剩余的所有毛發(fā)剪掉，在背部進行皮內(nèi)注射0.05ml50jiM藥物(格爾德霉素17-AAG)，處理面積約7-8cm2。用組織化學HE染色進行檢測毛囊變化情況。結(jié)果經(jīng)過一周后，背部經(jīng)過注射格爾德霉素17-AAG的部位及周圍長出新生毛發(fā)，其他部位不長，形成圓形斑點，效果明顯，如圖2所示。該藥物用藥前后體重的變化可用于分析該藥物對小鼠的毒副作用，經(jīng)檢測，各組小鼠平均體重數(shù)據(jù)如表1和圖3所示表l:用藥前后各組小鼠的體重變化<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>結(jié)論該藥物對小鼠無明顯的毒副作用。將各組小鼠拉尾斷頸處死，分別取背部皮膚組織用組織化學HE染色方法進行染色，觀察毛囊變化。如圖3所示，a為正常對照組，毛囊數(shù)量為正常數(shù)量；b為紫杉醇化療后治療組，其毛囊數(shù)量和正常組無異；c為環(huán)磷酰胺化療后治療，其毛囊數(shù)量和正常組無異；d為環(huán)磷酰胺化療無治療組，毛囊數(shù)量較少；e為紫杉醇化療無治療組，毛囊數(shù)量也較少。權(quán)利要求1.格爾德霉素衍生物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素用于制備治療化療誘發(fā)脫發(fā)癥的藥物的用途。全文摘要本發(fā)明涉及格爾德霉素衍生物的新用途，尤其是格爾德霉素衍生物在化療誘發(fā)脫發(fā)癥領域的用途。本發(fā)明提供了格爾德霉素衍生物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格爾德霉素(17-AAG)用于制備治療化療誘發(fā)脫發(fā)癥的藥物的用途。通過本發(fā)明所述的格爾德霉素衍生物17-AAG，可以開發(fā)出一種新的治療化療后脫發(fā)藥物，而且具有可靠的安全性，可以大大提高化療病人的生活質(zhì)量，減輕病人的心理壓力，從而可以更好的配合癌癥的治療。文檔編號A61P17/14GK101254188SQ20081002707公開日2008年9月3日申請日期2008年3月28日優(yōu)先權(quán)日2008年3月28日發(fā)明者帷周,林錦梅,坤賴,鄒江鷹,鄂順梅,陳清彬申請人:鄒江鷹