專利名稱：一種用兩步酶法制備毛竹葉標(biāo)準(zhǔn)提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
屬天然活性物質(zhì)組份提取技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是涉及毛竹葉天然活性物質(zhì) 組份的提取技術(shù)。
背景技術(shù)：
常規(guī)的植物天然活性物質(zhì)的提取方法大多采用溶劑法。用溶劑法提取時，為 了得到水溶性和脂溶性的全部組分和成分， 一般都需要使用一些易燃、易爆和具 有毒性的親脂性有機溶劑；而使用這些有機溶劑提取的活性物質(zhì)，在醫(yī)藥、獸藥、 食品和飼料產(chǎn)品內(nèi)通常是無法解決其殘留問題的；另外上述有機溶劑的使用在工 業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域內(nèi)也是很難解決的安全問題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供不用溶劑法，因而也不需要使用一些易燃、易爆、和具有毒性、 親脂性的有機溶劑；并且也避免了在制備醫(yī)藥、獸藥、食品和飼料產(chǎn)品時通常無 法解決有機溶劑殘留問題的一種用兩步酶法制備毛竹葉標(biāo)準(zhǔn)提取物。 本發(fā)明采取的技術(shù)方案
一種用兩步酶法制備毛竹葉標(biāo)準(zhǔn)提取物，其方案是竹亞科剛竹屬之毛竹竹 葉為原料，采用在酶反應(yīng)器內(nèi)的非水介質(zhì)中進(jìn)行酶反應(yīng)，非水介質(zhì)由去離子水、 食品級乙醇組成；并按以下步驟獲得提取物
1) 竹葉原料的采集，
2) 、竹原料的清洗、干燥和粉碎，
3) 、非水介質(zhì)中酶反應(yīng)前處理，
4) 、非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的一步酶反應(yīng)，
5) 、非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的二步酶反應(yīng)，
6) 、后處理1 ,7) 、后處理2，
8) 、混和第一、二次的排液，測pH值，
9) 、排渣、離心、渣液分離，并將分離出來的液體，混入第四次的排液中，
10) 、在混和第三、四次的排液時，使pH值與第一、二次的排液pH值相等，
11) 、混和第一、二次的混合液和第三、四次的混合液即得標(biāo)準(zhǔn)提取物。 實施本發(fā)明后的積極效果是
毛竹是竹亞科(Cramineae)植物之一，廣泛分布于北緯23。 33° 、東經(jīng) 104° 122° ，海拔1200 m以下地區(qū)。我國是全球的主要產(chǎn)竹國，而毛竹又是 我國竹類中的優(yōu)勢竹種，大約占竹資源39屬500余種中的80%左右。我國黃河 流域以南的海拔400 1000m的丘陵、低山山麓分布面極廣，在安徽、江蘇、江 西、浙江、福建、湖南、廣西等地有不少的"竹海"、"竹鄉(xiāng)"之稱的著名產(chǎn)區(qū)， 實際上都是毛竹的生長地。毛竹在生長過程中，因為在整枝和生產(chǎn)加工過程中都 會產(chǎn)生大量的廢棄竹葉。本發(fā)明在實際使用中，更多使用的正是這種毛竹的廢棄 竹葉，因此無論是從原料的來源保障還是從原料的價格分析和廢棄資源的利用 上，都具有更多的優(yōu)勢。
在本發(fā)明的整個工藝過程中，所使用的原材料都是無毒品，所使用的乙醇、 乙酸皆為食品級，不使用有毒、有害、易燃、易爆的有機溶劑。
用非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的兩步酶法制備毛竹葉標(biāo)準(zhǔn)提取物，在整個工藝過程 中，所使用的原材料都是無毒品，所使用的乙醇、乙酸皆為食品級，不使用有毒、 有害、易燃、易爆的有機溶劑，取得標(biāo)準(zhǔn)提取物也無毒、無害，為提取物拓展使 用展現(xiàn)廣闊前景。
圖1、工藝流程圖
具體實施方式
現(xiàn)結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步說明 一種用兩步酶法制備毛竹葉標(biāo)準(zhǔn)提取物，其制備方法是竹亞科剛竹屬之毛
竹竹葉為原料，采用在酶反應(yīng)器內(nèi)的非水介質(zhì)中進(jìn)行酶反應(yīng)，非水介質(zhì)由去離子 水、食品級乙醇組成；
并按以下步驟獲得提取物 1)、竹葉原料的采集，
竹葉取自周圍無污染，無農(nóng)藥和重金屬殘留，且農(nóng)藥砷、重金屬含量應(yīng)符合 GB-9986標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)地，無霉變的當(dāng)年鮮竹葉，經(jīng)自然或鼓風(fēng)干燥后，含水量< 5%，保存待用；
2)、竹葉原料的清洗、干燥和粉碎，
用符合GB 5749-2006的城市居民飲用水，清洗竹葉，脫水、并經(jīng)過干燥、
粗粉碎I成粒度10目；或細(xì)粉碎II成粒度80目；保存待用；
3) 、非水介質(zhì)中酶反應(yīng)前處理，
用竹粉與去離子水重量之比為1 : 8 10，溫度在20 24°C，浸泡竹粉，22h
26h;
4) 、非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的一步酶反應(yīng)，
用重量比，去離子水乙醇為2 : 1的液體中，按竹葉細(xì)粉與液體重量比為 1 : 10,混合；加上由纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶構(gòu)成的復(fù)合酶，重量活 性單位比按纖維素酶計算，依1000g固體底物加160000U纖維素酶活性單位； 溫度在46 48°C，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/ min轉(zhuǎn)停比30min : 30min，攪拌22 26 h ，
并第一次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；
5) 、非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的二步酶反應(yīng)，
用去離子水乙醇為2 : 1的液體中，按竹葉原料細(xì)粉與液體重量比為1 : 3， 混合；加入含有轉(zhuǎn)糖苷酶的cx淀粉酶和糊精，以a淀粉酶計算，2000U/mga 淀粉酶1 80g糊精1000g底物，溫度在43 47。C， pH在4.95 5.5，轉(zhuǎn)速 100轉(zhuǎn)/min轉(zhuǎn)停比30min:30min，攪拌26 30h，并第二次過濾排料，儲存 在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；
6) 、后處理1 ，
配制食品級乙酸與水比例為225 : 2275，按渣液重量比1 : 3加含水乙酸，
并第三次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；
7) 、后處理2，
水中加入食品級氫氧化鈉，制成堿水比125: 2375溶液；按渣液重量比: 1 : 3加堿水，并第四次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi);
8) 、混和第一、二次的排液，測pH值；
9)、排渣、離心、渣液分離，并將分離出來的液體，混入第四次的排液中；
10) 、在混和第三、四次的排液時，使其pH值與第一、二次的排液pH值相等;
11) 、混和第一、二次的混合液和第三、四次的混合液即得標(biāo)準(zhǔn)提取物。
權(quán)利要求
1、一種用兩步酶法制備毛竹葉標(biāo)準(zhǔn)提取物，其特征是竹亞科剛竹屬之毛竹竹葉為原料，采用在酶反應(yīng)器內(nèi)的非水介質(zhì)中進(jìn)行酶反應(yīng)，非水介質(zhì)由去離子水、食品級乙醇組成；并按以下步驟獲得提取物1)竹葉原料的采集，竹葉取自周圍無污染，無農(nóng)藥和重金屬殘留，且農(nóng)藥砷、重金屬含量應(yīng)符合GB-9986標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)地，無霉變的當(dāng)年鮮竹葉，經(jīng)自然或鼓風(fēng)干燥后，含水量<5％，保存待用；2)、竹葉原料的清洗、干燥和粉碎，用符合GB5749-2006的城市居民飲用水，清洗竹葉，脫水、并經(jīng)過干燥、粗粉碎I成粒度10目；或細(xì)粉碎II成粒度80目；保存待用；3)、非水介質(zhì)中酶反應(yīng)前處理，用竹粉與去離子水重量之比為1∶8～10，溫度在20～24℃，浸泡竹粉，22h～26h；4)、非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的一步酶反應(yīng)，用重量比，去離子水∶乙醇為2∶1的液體中，按竹葉細(xì)粉與液體重量比為1∶10，混合；加上由纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶構(gòu)成的復(fù)合酶，重量活性單位比按纖維素酶計算，依1000g固體底物加160000U纖維素酶活性單位；溫度在46～48℃，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/min轉(zhuǎn)停比30min∶30min，攪拌22～26h，并第一次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；5)、非水介質(zhì)反應(yīng)體系中的二步酶反應(yīng)，用去離子水∶乙醇為2∶1的液體中，按竹葉原料細(xì)粉與液體重量比為1∶3，混合；加入含有轉(zhuǎn)糖苷酶的α淀粉酶和糊精，以α淀粉酶計算，2000U/mgα淀粉酶∶180g糊精∶1000g底物，溫度在43～47℃，pH在4.95～5.5，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/min轉(zhuǎn)停比30min∶30min，攪拌26～30h，并第二次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；6)、后處理1，配制食品級乙酸與水比例為225∶2275，按渣液重量比1∶3加含水乙酸，并第三次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；7)、后處理2，水中加入食品級氫氧化鈉，制成堿水比125∶2375溶液；按渣液重量比1∶3加堿水，并第四次過濾排料，儲存在單獨料罐內(nèi)，存留固形物在反應(yīng)器內(nèi)；8)、混和第一、二次的排液，測pH值；9)、排渣、離心、渣液分離，并將分離出來的液體，混入第四次的排液中；10)、在混和第三、四次的排液時，使其pH值與第一、二次的排液pH值相等；11)、混和第一、二次的混合液和第三、四次的混合液即得標(biāo)準(zhǔn)提取物。
全文摘要
一種用兩步酶法制備毛竹標(biāo)準(zhǔn)提取物，屬天然活性物質(zhì)組份提取技術(shù)領(lǐng)域。其特點是毛竹竹葉為原料，按以下步驟獲得標(biāo)準(zhǔn)提取物竹葉采集，清洗、干燥和粉碎，反應(yīng)前處理，一步酶反應(yīng)，二步酶反應(yīng)，后處理1、2；混和一、二次的排液；排渣、離心、渣液分離；在混和第三、四次的排液時，使pH值至第一、二次的排液pH值相等；混和第一、二次的混合液和第三、四次的混合液即得標(biāo)準(zhǔn)提取物。實施本發(fā)明后的積極效果是本發(fā)明選用的是價格低廉、資源豐富的毛竹葉，在培植、采集、加工提取的整個過程中都是無污染，無毒害，所以最后的提取物也都是無污染，無毒害的，這些特點為提取物拓展使用展現(xiàn)了廣闊的前景。
文檔編號A61K36/88GK101380427SQ200810042358
公開日2009年3月11日 申請日期2008年9月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月2日
發(fā)明者王蘭田 申請人:上海漢篁生物技術(shù)有限公司