專利名稱：狐、貉、貂同源抗血清、轉(zhuǎn)移因子的出級(jí)產(chǎn)品制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種狐、貉、貂同源抗血清、轉(zhuǎn)移因子的出級(jí)產(chǎn)品制 備方法，特別涉及一種從毛皮獸狐、貉、貂體內(nèi)同時(shí)獲取用于制備抗 傳染病血清的血液和用于制備轉(zhuǎn)移因子的脾臟的制備方法，制備低成 本同源抗血清和轉(zhuǎn)移因子的原料。
背景技術(shù)：
毛皮動(dòng)物狐、貉、貂高密度養(yǎng)殖傳染病多發(fā)，特別是犬瘟熱、細(xì) 小病毒腸炎、腺病毒病、冠狀病毒腹瀉、副流感、巴氏桿菌病等傳染 性強(qiáng)、致死率高，對(duì)毛皮獸養(yǎng)殖業(yè)危害嚴(yán)重；病毒、病菌引發(fā)機(jī)體產(chǎn) 生的抗血清是發(fā)病早期治療對(duì)應(yīng)疾病的特效藥；同種動(dòng)物抗血清過(guò)敏 反應(yīng)小，治療效果最優(yōu)，發(fā)病早期可有效控制疫情蔓延。然而一直以 來(lái)毛皮動(dòng)物應(yīng)急用抗血清以異種動(dòng)物抗血清為主(如狗、羊、驢、兔 等)，異種動(dòng)物抗血清易產(chǎn)生血清異源成分的過(guò)敏反應(yīng)，且制備抗血 清的異種動(dòng)物的飼養(yǎng)成本高；目前同種動(dòng)物用于制備抗血清極少，現(xiàn) 有的制備方法一僅通過(guò)取健康老獸少量靜脈血應(yīng)急治療，較好的近緣 狗抗血清制備成本較高。皮張、肉是毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖主要的經(jīng)濟(jì)收入， 而血液、脾臟一般無(wú)用途，毛皮動(dòng)物飼養(yǎng)量大、取皮集中，取皮時(shí)便于獲取廉價(jià)血液、脾臟原料，取皮時(shí)收集血液，制備抗血清成本極低。 經(jīng)多次免疫動(dòng)物的脾臟，可用于提取特異轉(zhuǎn)移因子，轉(zhuǎn)移因子具有明 顯的免疫增強(qiáng)效果。高免血清的免疫程序可通過(guò)試驗(yàn)確定，制備抗血 清和從脾臟提取轉(zhuǎn)移因子是成熟技術(shù)，路線簡(jiǎn)單易于實(shí)現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從毛皮獸狐、貉、貂體內(nèi)獲取用于制 備同源抗血清的血液、用于制備轉(zhuǎn)移因子的脾臟的制備方法，其充分 利用曾經(jīng)廢棄的毛皮獸狐、貉、貂血液、脾臟副產(chǎn)品，提高毛皮獸副 產(chǎn)品價(jià)值。
本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的從毛皮獸狐、貉、貂體內(nèi)獲取 用于制備同源抗血清的血液、用于制備轉(zhuǎn)移因子的脾臟的制備方法， 其特征在于具體的制備方法為1、首先對(duì)抗原即犬瘟熱病毒、腸 炎病毒、腺病毒、冠病毒腹瀉、副流感病毒、巴氏桿菌進(jìn)行抗原純化 濃縮；
2.在夏季己免疫一次基礎(chǔ)上，取皮前加強(qiáng)免疫三次，選擇健康個(gè)體， 以取皮日期前45天起始，第O天給動(dòng)物注射特異轉(zhuǎn)移因子一次，接種 正常劑量弱毒疫苗一次，第10天再接種一次，第24天兩倍劑量疫苗或 用同源組織滅活苗接種一次；犬瘟熱弱毒苗狐一次正常接種劑量-10547TCID5Q，貉一次接種正常劑量10547 ^105()，貂一次接種正常劑量 105TCID5。；犬腸炎病毒弱毒苗狐一次正常接種劑量10647TCID5。，貉 一次正常接種劑量10647TCID5。，貂腸炎病毒滅活苗一次接種正常劑 量106TCID5Q;腺病毒弱毒苗狐一次正常接種劑量107TCID5。，貉一次正常接種劑量10饤CID5o;同源組織滅活苗制備地方性流行野毒株 導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病，取發(fā)病動(dòng)物的脾臟、肝臟組織，按生理鹽水體積/組
織重量比為10:1勻漿，充分凍融4次，2000g離心15min，取上清制備 氫氧化鋁佐劑甲醛滅活苗；
3、三次加強(qiáng)免疫期間，加強(qiáng)飼喂管理、保證飲水；40 45天期間采 血，采血前24小時(shí)停飼，保證充足飲水；擊暈、保定動(dòng)物，從心臟 無(wú)菌抗凝采血.，用抗凝血、制備血清，便于快速離心收集血漿，減少 血清成分污染，提高血清得率。使血清犬瘟熱中和抗體(SN)效價(jià)大 于512，腺病毒、腸炎細(xì)小病毒血凝抑制(HI)效價(jià)大于512，加入 萬(wàn)分之一硫柳汞抗菌，分裝-20。C凍存?zhèn)溆谩?一只成年狐、貉采血量 大約200-150mL，得血清120mL;貂的采血量在60mL左右，得血清 30mL。
本發(fā)明的積極效果為制備低成本的同源抗血清，轉(zhuǎn)移因子，為 早期治療毛皮動(dòng)物傳染病，特別是病毒傳染病的早期治療、控制疫情 蔓延提供有力保障；大型毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖企業(yè)，采用這種制備同源抗血 清、轉(zhuǎn)移因子技術(shù)可形成新治療藥品，大幅提高養(yǎng)殖效益；小型養(yǎng)殖 場(chǎng)，利用此技術(shù)，可簡(jiǎn)便制備抗傳染病血清；為來(lái)年養(yǎng)殖健康發(fā)展提 供保障；用于同種屬野生動(dòng)物救治，當(dāng)詞養(yǎng)群體出現(xiàn)少量疑似病例， 經(jīng)病原確診后，重點(diǎn)對(duì)假定健康群體注射對(duì)應(yīng)病原高免抗血清、轉(zhuǎn)移 因子，治療發(fā)病初期病獸，控制疫情蔓延。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述首先對(duì)抗原即犬瘟熱病毒、腸炎細(xì)小病毒、腺病毒等進(jìn)行抗原純
化濃縮；減少注射體積，降低動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)。 實(shí)施例1:
貂，選擇健康個(gè)體，以取皮日期前45天起始，第0天給動(dòng)物注 射特異轉(zhuǎn)移因子一次，接種正常劑量弱毒疫苗一次，第10天再接種 一次，第24天兩倍劑量疫苗或同源組織滅活苗接種一次；犬瘟熱弱 毒苗貂一次正常接種劑量105 TCID5Q;貂腸炎病毒滅活苗一次正常接
種劑量106TCID5Q;同源組織滅活苗制備地方性流行野毒株導(dǎo)致動(dòng)
物發(fā)病，取發(fā)病動(dòng)物的脾臟、肝臟組織，充分凍融組織4次，按生理 鹽水體積/組織重量比為10:1勻漿，2000g離心15min，取上清制備 氫氧化鋁佐劑甲醛滅活苗；三次加強(qiáng)免疫期間，加強(qiáng)飼喂管理、保證 充足飲水；40-45天期間采血，采血前24小時(shí)停飼，保證飲水；擊 暈、保定動(dòng)物，從心臟無(wú)菌抗凝采血；用抗凝血、制備血清，便于快 速離心收集血漿，減少血清成分污染，提高血清得率；使血清犬瘟熱 中和抗體(SN)效價(jià)大于512，腸炎細(xì)小病毒血凝抑制(H I)效價(jià) 大于512，加入萬(wàn)分之一硫柳汞抗菌，分裝-2(TC凍存?zhèn)溆谩?一只成 年貂的采血量在60mL左右，得血清30mL。 實(shí)施例2:
狐，選擇健康個(gè)體，以取皮日期前45天起始，第0天給動(dòng)物注 射特異轉(zhuǎn)移因子一次，接種正常劑量弱毒疫苗一次，第10天再接種 一次，第24天兩倍劑量疫苗或用同源組織滅活苗接種一次；犬瘟熱 弱毒苗狐一次正常接種劑量10547TCID5()，犬腸炎病毒弱毒苗狐一次正常接種劑量106 47TCID5()，腺病毒弱毒苗狐一次正常接種劑量 107TCID5Q;同源組織滅活苗制備地方性流行野毒株導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病，
取發(fā)病動(dòng)物的脾臟、肝臟組織按體積/重量比為10:1,勻漿，充分凍 融4次，2000g離心15min，取上清制備氫氧化鋁佐劑甲醛滅活苗。 三次加強(qiáng)免疫期間，加強(qiáng)飼喂管理、保證飲水；40 45天期間采血， 采血前24小時(shí)停飼，保證充足飲水，擊暈、保定動(dòng)物，從心臟無(wú)菌 抗凝采血；用抗凝血、制備血清，便于快速離心收集血漿，減少血清 成分污染，提高血清得率；使血清犬瘟熱中和抗體(SN)效價(jià)大于 512，腺病毒、腸炎細(xì)小病毒血凝抑制(H I)效價(jià)大于512，加入萬(wàn) 分之一硫柳汞抗菌，分裝-20。C凍存?zhèn)溆谩?一只成年狐采血量大約 200 150mL，得血清120mL。 實(shí)施例3:
貉，選擇健康個(gè)體，以取皮日期前45天起始，第0天，給動(dòng)物 注射特異轉(zhuǎn)移因子一次接種正常劑量弱毒疫苗一次，第10天再接種 一次，第24天兩倍劑量疫苗或同源組織滅活苗接種一次；犬瘟熱弱 毒苗貉一次正常接種劑量10547TCID5Q;犬腸炎病毒弱毒苗貉一次正常 接種劑量10647TCID5Q;腺病毒弱毒苗貉一次正常接種劑量107TCID50; 同源組織滅活苗制備地方性流行野毒株導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病，取發(fā)病動(dòng)物 的脾臟、肝臟組織，充分凍融組織4次，按生理鹽水體積/組織重量 比為10:1勻漿，2000g離心15min，取上清制備氫氧化鋁佐劑甲醛 滅活苗。三次加強(qiáng)免疫期間，加強(qiáng)飼喂管理、保證飲水；40 45天 期間采血，采血前24小時(shí)停飼，保證充足飲水；擊暈、保定動(dòng)物，從心臟無(wú)菌抗凝采血；用抗凝血、制備血清，便于快速離心收集血漿， 減少血清成分污染，提高血清得率。使血清犬瘟熱中和抗體(SN)效 價(jià)大于512，腺病毒、腸炎細(xì)小病毒血凝抑制(H I)效價(jià)大于512， 加入萬(wàn)分之一硫柳汞抗菌，分裝-20。C凍存?zhèn)溆谩?一只成年貉采血量 大約200 150mL，得血清120mL。
權(quán)利要求
從毛皮獸狐、貉、貂體內(nèi)獲取用于制備同源抗血清的血液、用于制備轉(zhuǎn)移因子的脾臟的制備方法，其特征在于具體的制備方法為(1). 首先對(duì)抗原即犬瘟熱病毒、腸炎病毒、腺病毒、腹瀉冠狀病毒、副流感病毒、巴氏桿菌進(jìn)行純化濃縮，減少注射體積，降低動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)；(2). 在夏季已免疫一次基礎(chǔ)上，取皮前加強(qiáng)免疫三次；選擇健康個(gè)體，以取皮日期前45天起始，第0天給動(dòng)物注射特異轉(zhuǎn)移因子一次，接種正常劑量弱毒疫苗一次，第10天再接種一次，第24天兩倍劑量疫苗或用同源組織滅活苗接種一次；犬瘟熱弱毒苗狐一次正常接種劑量105.47TCID50，貉一次正常接種劑量105.47TCID50，貂一次正常接種劑量105TCID50；犬腸炎病毒弱毒苗狐一次正常接種劑量106.47TCID50，貉一次接種正常劑量106.47TCID50，貂腸炎病毒滅活苗一次接種正常劑量106TCID50；腺病毒弱毒苗狐一次正常接種劑量107TCID50，貉一次接種正常劑量107TCID50；同源組織滅活苗制備地方性流行野毒株導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病，取發(fā)病動(dòng)物的脾臟、肝臟或腸組織，充分凍融組織4次，按生理鹽水體積/組織重量比為10∶1勻漿，2000g離心15min，取上清制備氫氧化鋁佐劑甲醛滅活苗；(3). 三次加強(qiáng)免疫期間，加強(qiáng)飼喂管理、保證飲水；40～45天期間采血，采血前24小時(shí)停飼，保證充足飲水；擊暈、保定動(dòng)物，從心臟無(wú)菌抗凝采血；用抗凝血、制備血清，便于快速離心收集血清，減少血清成分污染，提高血清得率；使血清犬瘟熱中和抗體(SN)效價(jià)大于512，腺病毒、腸炎細(xì)小病毒血凝抑制(H I)效價(jià)大于512，加入萬(wàn)分之一硫柳汞抗菌，分裝-20℃凍存?zhèn)溆?；一只成年狐、貉采血量大約200～150mL，得血清120mL；貂的采血量在60mL左右，得血清約30mL。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從毛皮獸狐貉貂體內(nèi)獲取用于制備同源抗血清的血液、用于制備轉(zhuǎn)移因子的脾臟副產(chǎn)品的制備方法，狐、貉、貂在12月份集中取皮，根據(jù)不同地域的取皮日期確定，在預(yù)計(jì)取皮日期前45天，挑選健康個(gè)體，用犬瘟熱、細(xì)小病毒腸炎、腺病毒病、冠病毒腹瀉、副流感、巴氏桿菌病單價(jià)疫苗或多價(jià)疫苗在夏季已免疫一次基礎(chǔ)上用純化濃縮的抗原加強(qiáng)免疫3次；在取皮時(shí)心臟無(wú)菌抗凝采血，提高血清得率，同時(shí)收集動(dòng)物脾臟后用于提取特異或普通轉(zhuǎn)移因子。血液可簡(jiǎn)便制備抗傳染病血清，脾提取轉(zhuǎn)移因子；為來(lái)年養(yǎng)殖健康發(fā)展提供保障；用于同種屬野生動(dòng)物對(duì)應(yīng)傳染病救治；當(dāng)飼養(yǎng)群體出現(xiàn)少量傳染病病例時(shí)，經(jīng)病原確診后，重點(diǎn)對(duì)假定健康群體注射對(duì)應(yīng)病原高免血清、轉(zhuǎn)移因子，治療發(fā)病初期病獸，控制疫情蔓延。
文檔編號(hào)A61P31/04GK101422485SQ20081005109
公開(kāi)日2009年5月6日 申請(qǐng)日期2008年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月15日
發(fā)明者楊福合, 柴秀麗, 王鳳雪, 王長(zhǎng)鳳, 章秀婷, 邵西群, 閆喜軍 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所