專利名稱：外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明公開了一步法乳化外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的方法。
背景技術(shù)：
海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊具有良好的生物相容性和機械強度，是一優(yōu)良 的緩釋給藥系統(tǒng)，廣泛應(yīng)用于藥物控釋載體、基因運載工具、免疫隔離作用 和人工器官、細胞培養(yǎng)微反應(yīng)器、環(huán)境凈化等各個方面。目前海藻酸鈉/殼聚 糖緩釋微囊的制備方法主要有噴霧法和乳化法兩大類。噴霧法主要采用同軸 噴氣裝置和靜電滴定裝置，這種方法制備的微囊的粒徑較大、微囊球型度和 光潔度較差，緩釋微囊粒徑受注射器針頭內(nèi)徑和溶液粘度的限制，微囊是逐
滴制備的，且設(shè)備復(fù)雜，難以規(guī)模生產(chǎn)。專利號為01109449.4的中國專利公 開了一種乳化/內(nèi)部凝膠化制備海藻酸鈣凝膠珠的方法，其采用以海藻酸鈉和 難溶鈣鹽為分散相，液體石蠟為分散介質(zhì)，失水山梨醇三油酸脂為表面活性 劑，以冰醋酸為凝膠引發(fā)劑的乳化體系，進行乳化/內(nèi)部凝膠化反應(yīng)。該方法 制備過程復(fù)雜，由于鈣鹽很難分散均勻，有小部分鈣鹽顆粒未能與冰醋酸充 分反應(yīng)殘留在海藻酸鈉鈣珠中，微囊化物質(zhì)易流失，致使包封率降低。鈣珠 表面液體石蠟不易完全清除，在清洗過程中會大量流失緩釋微囊內(nèi)的包含物、 影響包含物的活性。另外，長期服用石蠟會導(dǎo)致人體骨質(zhì)疏松，20世紀20年 代，液體石蠟在醫(yī)學(xué)上作為填充劑， 一度被廣泛應(yīng)用，并持續(xù)數(shù)十年，直至 普遍報導(dǎo)該材料易引起石蠟瘤，才停止使用。所以使用石蠟作為分散介質(zhì)很不合適。采用上述方法要得到海藻酸鈉殼聚糖顆粒還需要海藻酸鈣膠珠再次
跟殼聚糖溶液反應(yīng)，使制備過程進一步復(fù)雜。因此，提高藥物包封率和制劑
穩(wěn)定性是海藻酸鈉殼聚糖緩釋制劑研究中亟待解決的問題。
此外，目前清除緩釋微囊表面殘留油液的方法大多用到有機溶劑或表面
活性劑，該方法很難完全清除緩釋微囊表面殘留油液，且會大量流失緩釋微
囊內(nèi)的包含物或影響包含物的活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提供一步 法乳化外部凝膠化快速制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的方法，以提高微囊藥 物含量和包封率，且使微囊表面基本無油液。
為此，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩 釋微囊的方法，其特征在于以海藻酸鈉溶液為分散相，食用植物油為分散介
質(zhì)，失水山梨醇單油酸脂(span 80)為表面活性劑，經(jīng)乳化成油包水的小型 液滴，用氯化鈣殼聚糖溶液引發(fā)海藻酸鈉溶液的凝膠化反應(yīng)，生成海藻酸鈉/ 殼聚糖緩釋微囊，其表面的殘留油液通過一去油裝置采用沉淀自漂流方法去 除。本發(fā)明采用新的分散體系、表面活性劑，以乳化外部凝膠化的方法，制 備出球型度好、產(chǎn)量高、表面光潔度高、粒徑分布窄的緩釋微囊；采用去油 裝置物理去油，避免了有機物質(zhì)的使用，減少了制備過程中微囊物質(zhì)的流失， 特別是所載藥物的流失，提高了微囊藥物含量及包封率。
上述的外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的方法，將質(zhì)量濃度為 0.5%-3%的海藻酸鈉溶液分散到按體積比計含有0.5%-2%的失水山梨醇單油
酸脂的食用植物油中，水油相體積比在l: 3-1: 8之間；油包水的小型液滴是通過電機攪拌體系來實現(xiàn)的，電機的轉(zhuǎn)速為100r/min-1500r/min，乳化時間為 10-30分鐘。
上述的去油裝置包括由內(nèi)到外設(shè)置的去油池、沉淀池和集油池，所述的 去油池內(nèi)設(shè)有一軸接在去油池內(nèi)壁上的轉(zhuǎn)動柱和一杠桿式搖晃組件，轉(zhuǎn)動柱 外包覆一去油刷，轉(zhuǎn)動柱由輕質(zhì)材料(如POM聚甲醛塑鋼)制成，杠桿式搖 晃組件包括一搖晃聚油板和一連桿，搖晃聚油板的一端為動力端，另一端為 非動力端，搖晃聚油板的中部軸接在去油池內(nèi)壁上，所述的非動力端連接一 重力可調(diào)漂浮球，搖晃聚油板的中部軸接在去油池內(nèi)壁上， 一進液管的出口 位于搖晃聚油板動力端的上方，連桿的外端連接在轉(zhuǎn)動柱上，集油池上裝有 一廢液排出管。去油刷由軟質(zhì)粗?；牧?如經(jīng)過酸基磺酸基、磷酸基等和 鹽類等處理過的聚酰胺、聚乙烯醇、維尼綸等纖維)制成，不會損壞微囊。
上述的去油裝置，進液管的出口處裝有角度可調(diào)的并排噴嘴，通過調(diào)整 噴嘴的角度來控制水流的方向。
上述的去油裝置，搖晃聚油板的動力端為一半圓形輕質(zhì)材料板(如耐酸 堿耐腐蝕耐沖擊高強度鋁合金板)，其余部分呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，用粗?；牧?如 經(jīng)過酸基磺酸基、磷酸基等和鹽類等處理過的聚酰胺、聚乙烯醇、維尼綸等 纖維)編織而成，以減輕水對聚油板的阻力。
上述的去油裝置，去油池、沉淀池和集油池高度逐級降低，沉淀池上部 的外邊緣裝有過濾篩網(wǎng)，液體可以順利通過，固體則不能通過，用于阻擋微 囊并使其沉淀，根據(jù)實際的需要來更換過濾篩網(wǎng)。
上述的去油裝置，去油池的底部裝有一次收集閥，沉淀池的底部裝有一 主收集閥；去油池上裝有一進料斗，該進料斗的下方位于轉(zhuǎn)動柱的外側(cè)壁處。上述的去油裝置，轉(zhuǎn)動柱位于去油池的一側(cè)，重力可調(diào)漂浮球位于去油 池的另一側(cè)；去油池內(nèi)裝有超聲探頭，其位于轉(zhuǎn)動柱的上方，使微囊表面的 油液去除的更徹底。轉(zhuǎn)動柱為中空結(jié)構(gòu)，可以減小摩擦力更加靈活的轉(zhuǎn)動， 在必要時還可以使用外接動力源驅(qū)動。
本發(fā)明通過改良現(xiàn)有乳化方法，簡化制備過程，制備出球型度好、產(chǎn)量 高、表面光潔度高、粒徑分布窄的海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊，易于工業(yè)化生 產(chǎn)；去油過程中避免了有機物質(zhì)的使用，減少了制備過程中微囊化物質(zhì)的流 失，特別是所載藥物的流失，提高了微囊藥物含量及包封率；徹底去除了緩 釋微囊表面的殘留油液，去油簡便；此外，還可以通過調(diào)節(jié)電機轉(zhuǎn)速來控制 微囊粒徑的大小，制備出不同粒徑的海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊，滿足實際需 要。
下面結(jié)合說明書附圖和具體實施方式
對本發(fā)明作進一步的說明。


圖l-2為本發(fā)明去油裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。 圖3為圖1-2中搖晃聚油板的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖中，1~去油池，2 沉淀池，3 集油池，4~轉(zhuǎn)動柱，5~去油刷，6~搖晃 聚油板，7~連桿，8~轉(zhuǎn)動軸，9 非動力端，10 重力可調(diào)漂浮球，11~進液管， 12 多排噴嘴，13~動力端，14 廢液排出管，15 過濾篩網(wǎng)，16 次收集閥，17~ 主收集閥，18 進料斗，19 超聲探頭。
具體實施例方式
實施例l
將阿霉素(質(zhì)量濃度為1.5%)海藻酸鈉(質(zhì)量濃度為1.5%)生理鹽水溶液100ml分散到含有0.5y。的span 80的食用植物油500ml中，調(diào)節(jié)電機轉(zhuǎn)速至 400r/min攪拌15分鐘。加入1%的氯化鈣0.5%的殼聚糖(脫乙酰度為95.3%)溶 液500ml引發(fā)海藻酸鈉凝膠化反應(yīng)，繼續(xù)攪拌30分鐘后，通過去油裝置采用沉 淀自漂流方法徹底去除緩釋微囊表面的油液。收集，自然千燥得到阿霉素海 藻酸鈉殼聚糖緩釋微囊。根據(jù)《中華人民共和國藥典》2005版附錄VA (附錄 28)紫外可見分光光度法，于481nm處測定阿霉素海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊 中阿霉素的載藥量，測得阿霉素海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊中阿霉素的含量為 31.2%-35.7%，包封率為66.3%-70.4%，在普通光學(xué)顯微鏡15 X IO下觀察，緩 釋微囊表面未見殘留油液。 對比實施例1采用01109449.4號中國專利所述的制備方法，將阿霉素(質(zhì)量濃度為 1.5%)海藻酸鈉(質(zhì)量濃度為1.5y。)生理鹽水溶液100ml，加入碳酸鈣顆粒1.5g 攪拌混合成均勻的懸濁液。將該懸濁液分散到含有0.5。/。的span 85的液體石蠟 500ml中，調(diào)節(jié)電機轉(zhuǎn)速至400r/min攪拌15分鐘。加入冰醋酸10ml，降低體系 PH值使碳酸鈣解離釋放出鈣離子，引發(fā)凝膠化反應(yīng)。繼續(xù)攪拌30分鐘后，加 入l。/。氯化鈣溶液500ml使膠珠沉降，用篩網(wǎng)過濾并以iy。Tween80水溶液清洗所 制得的阿霉素海藻酸鈣凝膠珠。將阿霉素海藻酸鈣凝膠珠放入0.5%的殼聚糖 (脫乙酰度為95.3%)溶液反應(yīng)5分鐘。收集，自然干燥得到阿霉素海藻酸鈉/ 殼聚糖緩釋微囊。根據(jù)《中華人民共和國藥典》2005版附錄VA (附錄28)紫 外可見分光光度法，于481nm處測定阿霉素海藻酸鈉殼聚糖緩釋微囊中阿霉素 的載藥量，測得阿霉素海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊中阿霉素的含量為 17.1%-22.4%，包封率為34.5%-39.9%，在普通光學(xué)顯微鏡15 X IO下觀察，緩釋微囊表面可見明顯殘留油液。實施例2將質(zhì)量分數(shù)為3%的海藻酸鈉生理鹽水溶液10ml分散到含有0.5%的span 80的食用植物油80ml中，調(diào)節(jié)電機轉(zhuǎn)速至1000r/min攪拌20分鐘。加入質(zhì) 量濃度分別為10%的氯化鈣、1%的殼聚糖(脫乙酰度為85.7%)溶液50ml 引發(fā)海藻酸鈉凝膠化反應(yīng)，繼續(xù)攪拌60分鐘后，收集緩釋微囊，通過去油裝 置采用沉淀自漂流方法徹底去除緩釋微囊表面的油液，收集，自然干燥得到 緩釋微囊。實施例3將質(zhì)量分數(shù)為1%的海藻酸鈉生理鹽水溶液10ml分散到含有1。/。的span 80 的食用植物油30ml中，調(diào)節(jié)電機轉(zhuǎn)速至500r/min攪拌15分鐘。加入質(zhì)量濃 度分別為3%的氯化鈣、0.5%的殼聚糖(脫乙酰度為98.2%)溶液50ml引發(fā) 海藻酸鈉凝膠化反應(yīng)，繼續(xù)攪拌20分鐘后，收集緩釋微囊，通過去油裝置采 用沉淀自漂流方法徹底去除緩釋微囊表面的油液，收集，自然干燥得到緩釋 微囊。上述實施例1-3中所述的去油裝置如圖1-3所示，其由去油池1、沉淀池 2和集油池3組成，其高度從內(nèi)到外由高到低設(shè)置，所述的去油池l內(nèi)有一軸 接在去油池內(nèi)壁上的轉(zhuǎn)動柱4和一杠桿式搖晃組件，轉(zhuǎn)動柱4由輕質(zhì)材料制 成，呈圓柱形，密閉中空，轉(zhuǎn)動柱4外包覆去油刷5，該去油刷5由軟質(zhì)粗粒 化材料制成，不會損壞微囊；杠桿式搖晃組件由搖晃聚油板6和連桿7構(gòu)成， 搖晃聚油板6的非動力端9連接重力可調(diào)漂浮球10，搖晃聚油板6的中部軸 接在去油池內(nèi)壁上，進液管11的出口處裝有角度可調(diào)的并排噴嘴12，其位于搖晃聚油板6的動力端13的上方，連桿7的外端連接在轉(zhuǎn)動柱4上，連桿的 內(nèi)端與動力端通過轉(zhuǎn)動軸8連接，集油池3上裝有廢液排出管14。轉(zhuǎn)動柱4 位于去油池1的一側(cè)，重力可調(diào)漂浮球10位于去油池1的另一側(cè)。搖晃聚油板的動力端13為一輕質(zhì)材料板，其余部分呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，用粗粒 化材料編織而成，以減輕水對聚油板的阻力。沉淀池2上部的外邊緣裝有過 濾篩網(wǎng)15 (根據(jù)需要可以更換過濾篩網(wǎng))，用于擋住微囊并使其沉淀。去油池 1的底部裝有次收集閥16，沉淀池2的底部裝有主收集閥17;去油池1上裝 有一進料斗18，該進料斗18的下方位于轉(zhuǎn)動柱4的外側(cè)壁處，去油池1內(nèi)裝 有超聲探頭19，其位于轉(zhuǎn)動柱4的上方。上述去油裝置的工作過程如下打開進液管，調(diào)節(jié)并排噴嘴的角度，在水流沖擊力作用下使搖晃聚油板不停搖晃，從而帶動轉(zhuǎn)動柱轉(zhuǎn)動；海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊從進料斗加入后，通過轉(zhuǎn)動柱的轉(zhuǎn)動，其上的去油刷刷離表面油液，油液在搖晃聚油板及去油刷的作用下聚集上浮，使水中的含油量進一步降低，油液不斷上浮溢出，進入聚油池，通過廢液排出管排出，微囊被過濾篩網(wǎng)擋住逐漸下沉，微囊大部分在沉淀池內(nèi)，少部分在去油池內(nèi)，待微囊表面的油液去除干凈后，打開主、次收集閥收集微囊。此外，在需要時還可以打開超聲儀，進一步去除微囊表面的油液。以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明的結(jié)構(gòu)作任何 形式上的限制。凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修 改、等同變化與修飾，均落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1、外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的方法，其特征在于以海藻酸鈉溶液為分散相，食用植物油為分散介質(zhì)，失水山梨醇單油酸脂為表面活性劑，經(jīng)乳化形成油包水的小型液滴，用氯化鈣殼聚糖溶液引發(fā)海藻酸鈉溶液的凝膠化反應(yīng)，生成海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊，其表面的殘留油液通過一去油裝置采用沉淀自漂流方法去除。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的 方法，其特征在于將質(zhì)量濃度為0.5%-3%的海藻酸鈉溶液分散到按體積比計含有0.5%-2%的失水山梨醇單油酸脂的食用植物油中，水油相體積比在1:3-1:8之間。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的 方法，其特征在于油包水的小型液滴是通過電機攪拌體系來實現(xiàn)的，電機的 轉(zhuǎn)速為100r/min-1500r/min，乳化時間為10-30分鐘。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的 方法，其特征在于氯化鈣殼聚糖溶液是由質(zhì)量濃度為1%-10%的氯化,丐溶液和 質(zhì)量濃度為0.4%-1%的殼聚糖溶液組成，殼聚糖的脫乙酰度為85%以上。
5、 一種用于權(quán)利要求1所述的去油裝置，其特征在于所述的去油裝置包 括由內(nèi)到外設(shè)置的去油池、沉淀池和集油池，所述的去油池內(nèi)設(shè)有一軸接在 去油池內(nèi)壁上的轉(zhuǎn)動柱和一杠桿式搖晃組件，轉(zhuǎn)動柱外包覆一去油刷，杠桿 式搖晃組件包括一搖晃聚油板和一連桿，搖晃聚油板的一端為動力端，另一 端為非動力端，搖晃聚油板的中部軸接在去油池內(nèi)壁上，所述的非動力端連 接一重力可調(diào)漂浮球， 一進液管的出口位于搖晃聚油板的動力端的上方，連 桿的外端連接在轉(zhuǎn)動柱上，連桿的內(nèi)端與動力端通過一轉(zhuǎn)動軸連接，集油池上裝有一廢液排出管。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的去油裝置，其特征在于進液管的出口處設(shè)置有 角度可調(diào)的并排噴嘴。
7、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的去油裝置，其特征在于搖晃聚油板的動力端為 一半圓形的輕質(zhì)材料板，其余部分呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
8、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的去油裝置，其特征在于所述的去油池、沉淀池 和集油池的高度逐級降低，沉淀池上部的外邊緣裝有過濾篩網(wǎng)。
9、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的去油裝置，其特征在于去油池的底部裝有一次 收集閥，沉淀池的底部裝有一主收集閥；去油池上裝有一進料斗，該進料斗 的下方位于去油刷的頂端。
10、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的去油裝置，其特征在于所述的轉(zhuǎn)動柱位于去 油池的一側(cè)，重力可調(diào)漂浮球位于去油池的另一側(cè)；去油池內(nèi)裝有超聲探頭， 其位于轉(zhuǎn)動柱的上方，所述的轉(zhuǎn)動柱為中空結(jié)構(gòu)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一步法乳化外部凝膠化制備海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊的方法?，F(xiàn)有內(nèi)部凝膠化制備海藻酸鈣凝膠珠的方法，由于鈣鹽很難分散均勻，有小部分鈣鹽顆粒未能與冰醋酸充分反應(yīng)殘留在海藻酸鈉鈣珠中，微囊化物質(zhì)易流失，包封率低。本發(fā)明以海藻酸鈉溶液為分散相，食用植物油為分散介質(zhì)，失水山梨醇單油酸脂為表面活性劑，經(jīng)乳化成油包水的小型液滴，用氯化鈣殼聚糖溶液引發(fā)海藻酸鈉溶液的凝膠化反應(yīng)，生成海藻酸鈉/殼聚糖緩釋微囊，其表面的殘留油液通過一去油裝置采用沉淀自漂流方法去除。本發(fā)明提高了微囊藥物含量及包封率。
文檔編號A61K47/36GK101239052SQ20081006011
公開日2008年8月13日 申請日期2008年3月6日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月6日
發(fā)明者壽旭鋒, 曲建全, 沃興德, 范春雷 申請人:浙江中醫(yī)藥大學(xué)