專利名稱：從棉花花瓣中制備金絲桃苷和異槲皮素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物活性成分的制備技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及金絲桃苷和異槲 皮素藥用活性成分的制備方法。
背景技術(shù)：
近年研究表明金絲桃苷(Hyerin)與異槲皮素(isoquercetrin)， 屬于黃酮苷類化合物，廣泛存在于各種植物體內(nèi)。目前研究最多也較為突 出的生理活性和藥理作用是良好的鎮(zhèn)痛作用及對心腦血管的保護作用，其 具有抗心肌缺血損傷，抗心肌脂質(zhì)過氧化等作用。金絲桃苷具有明顯的局 部鎮(zhèn)痛作用，外用于臨床，能抑制多種致痛因子誘發(fā)末梢神經(jīng)的放電；對 小鼠腦缺血模型金絲桃苷對腦缺血再灌傷有顯著保護作用，金絲桃苷還具 有對抗缺氧-再給氧導(dǎo)致心肌細(xì)胞損傷的作用，其對抗腫瘤有特殊的作用， 能抑制腦腫瘤細(xì)胞中葡萄糖的氧化作用。由于金絲桃苷的突出的藥理作用， 現(xiàn)在己經(jīng)受到越來越多的關(guān)注。棉花花中的金絲桃苷含量O. 2-0. 5%，異槲皮素的含量為O. 9-2. 1%， 是提取金絲桃苷和異槲皮素的主要原料。我國是世界棉花種植大國，棉花 花主要產(chǎn)于新疆、山東、河南等地，分布廣泛、資源非常豐富。現(xiàn)有制備金絲桃苷的方法，如申請的公開號為CN1880328的中國專利， 涉及金絲桃苷和金絲桃素藥用活性成分的制備；公開號為CN1493578的中 國專利，以干燥的黃蜀葵花粉為原料，經(jīng)親水溶劑提取、柱層析、真空干 燥等工藝制成；公開號為CN123032的中國專利，以吳茱萸藥材為原料，經(jīng) 繁雜的工藝制成?，F(xiàn)有采用制備異槲皮素的方法有公開號CN1483825的中國專利采用的 是酶法水解蘆丁制備異槲皮素和槲皮素的方法，是用能水解蘆丁的鼠李糖或葡萄糖基的酶，水解蘆丁糖基，制備異槲皮素和槲皮素；公開號CN 1355797的中國專利采用從生物類黃酮漿即從回收類黃酮的母液殘余物中回收高純度異槲皮素的方法，該方法通過用含有乙酸甲酯和水的混合溶劑 進行提取。以上制備金絲桃苷和異槲皮素的專利，均未能充分利用我國豐富的棉 花花資源。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于，提供一種低成本、工藝簡單的從棉花花瓣中制備 金絲桃苷和異槲皮素的方法，該方法是以棉花花瓣為原料，用有機溶劑提 取，將提取液減壓濃縮至浸膏，加入適量水溶液溶解，上大孔樹脂為載體 的柱層析，用水沖洗柱床至無色，然后用乙醇溶液洗聰柱床，收集洗脫液， 濃縮，得到金絲桃苷與異槲皮素的粗品，將此粗品用硅膠或C18硅膠層析 得到金絲桃苷與異槲皮素的的純品。本發(fā)明所述的從棉花花瓣中制備金絲桃苷和異槲皮素的方法，按下列步驟進行a、 將干燥的棉花花粉碎成粗粉，用8 — 25倍量的有機溶劑提取，提取 2—3次，每次1—3小時；b、 然后將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，水溶液上大孔樹脂或 聚酰胺為載體的柱層析，用水沖洗柱床至無色；c、 然后用乙醇溶液洗脫柱床，收集洗脫液，濃縮；得到金絲桃苷與異 槲皮素的粗品；d、 將此粗品用硅膠或C18硅膠層析得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。 步驟a中棉花花為棉屬植物的花瓣。 步驟a中有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯。步驟a提取方法為浸泡、滲漉、加熱回流、超聲波提取或微波輔助提取。步驟b中大孔樹脂為非極性或中等極性。步驟c中乙醇溶液范圍為體積比20-80%。本發(fā)明所述的從棉花花瓣中制備金絲桃苷和異槲皮素的方法分三步進行提取物制備將采集到的棉花花瓣，加入適當(dāng)比例的有機溶劑進行提 取，合并濾液，提取方法可以是浸泡，滲漉，加熱，超聲波提取或者微波 輔助提??；粗制將提取物分散到水溶液，然后此溶液上大孔樹脂或聚酰胺柱， 先用水沖洗至無色，然后用乙醇沖洗若干柱體積，收集，濃縮；精制將粗制品用適當(dāng)溶劑溶解后，用硅膠，反相硅膠進一步分離精制。
具體實施方式
實施例1a、 以棉花花瓣為原料，將干燥的棉花花瓣粉碎成粗粉，加入8倍70 %乙醇加熱回流提取2次，每次2小時，合并提取液，濃縮得到提取物；b、 將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，然后將水溶液上AB-8大 孔樹脂柱，先用水沖洗柱床至無色；c、 然后用30%乙醇沖洗5個柱體積，收集洗脫液，濃縮，得到金絲桃 苷與異槲皮素的粗品；d、 將粗制品用乙酸乙酯溶解后，上硅膠柱層析，用石油醚一乙酸乙酯 _甲醇一乙酸溶液洗脫得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。實施例2a、 以棉花花瓣為原料，將干燥的棉花花瓣粉碎成粗粉，加入15倍甲 醇，超聲波提取3次，每次1小時，合并提取液；b、 將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，然后將水溶液上D101大 孔樹脂柱，先用水沖洗柱床至無色；c、 然后用50%乙醇溶液沖洗4個柱體積，收集洗脫液，濃縮，得到金 絲桃苷與異槲皮素的粗品；d、將粗制品用甲醇水溶液溶解后，上C18硅膠柱層析，用90%甲醇水 溶液洗脫得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。 實施例3a、 以棉花花瓣為原料，將干燥的棉花花瓣粉碎成粗粉，加入20倍丙 酮，加熱微波輔助提取3次，每次30分鐘，合并提取液；b、 然后將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，然后將水溶液上NKA 一9大孔樹脂柱，先用水沖洗柱床至無色；c、 然后用40%乙醇沖洗3個柱體積，收集洗脫液；濃縮，得到金絲桃 苷與異槲皮素的粗品；d、 將粗制品用乙酸乙酯溶解后，上C18硅膠柱層析，用80%甲醇水溶 液洗脫得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。實施例4a、 以棉花花瓣為原料，將干燥的棉花花瓣粉碎成粗粉，加入18倍乙 酸乙酯，滲漉提取，合并提取液；b、 將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，然后將水溶液上聚酰胺柱， 先用水沖洗柱床至無色；c、 然后用80%乙醇沖洗3個柱體積，收集洗脫液，濃縮，得到金絲桃 苷與異槲皮素的粗品；d、 將粗制品用乙酸乙酯溶解后，上C18硅膠柱層析，用70%甲醇水溶 液洗脫得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。實施例5a、 以棉花花瓣為原料，將干燥的棉花花瓣粉碎成粗粉，加入25倍甲 醇，超聲波提取2次，每次45分鐘，合并提取液；b、 然后將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，然后將水溶液上聚酰 胺柱，先用水沖洗柱床至無色； .c、 然后用20%乙醇沖洗3個柱體積，收集洗脫液，濃縮，得到金絲桃 苷與異槲皮素的粗品；d、將粗制品用甲醇溶解后，上硅膠柱，用90%甲醇水溶液洗脫得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。實施例6a、 以棉花花瓣為原料，將干燥的棉花花瓣粉碎成粗粉，加入12倍70% 乙醇，浸泡提取3次，每次1.5小時，合并提取液；b、 將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，然后將水溶液上NKA—9 大孔樹脂柱，先用水沖洗柱床至無色；c、 然后用60%乙醇沖洗4個柱體積，收集洗脫液，濃縮，得到金絲桃苷與異槲皮素的粗品；d、 將粗制品用乙酸乙酯溶解后，上C18硅膠柱，用90%甲醇水溶液洗 脫得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。
權(quán)利要求
1、一種從棉花花瓣中制備金絲桃苷和異槲皮素的方法，其特征在于按下列步驟進行a、將干燥的棉花花粉碎成粗粉，用8-25倍量的含有機溶劑的水溶液提取，提取2-3次，每次30分鐘-3小時；b、然后將提取液減壓濃縮至浸膏，加入水溶解，水溶液上大孔樹脂或聚酰胺為載體的柱層析，用水沖洗柱床至無色；c、然后用乙醇溶液洗脫柱床，收集洗脫液，濃縮，得到金絲桃苷與異槲皮素的粗品；d、將此粗品用硅膠或C18硅膠層析得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟a提取方法為浸泡、 滲漉、加熱回流、超聲波提取或微波輔助提取。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟a中棉花花為棉屬植 物的花瓣。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟a中有機溶劑為甲醇、 乙醇、丙酮或乙酸乙酯。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟b中大孔樹脂為非極 性或中等極性。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟c中乙醇溶液范圍為 體積比20-80%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種金絲桃苷和異槲皮素的制備方法，是以棉花花瓣為原料，用有機溶劑提取，然后將提取液減壓濃縮至浸膏，加入適量水溶液溶解，上大孔樹脂為載體的柱層析，用水沖洗柱床至無色，然后用乙醇溶液洗脫柱床，收集洗脫液，濃縮，得到金絲桃苷與異槲皮素的粗品，再將粗品用硅膠或C18硅膠層析得到金絲桃苷和異槲皮素的純品。該方法成本低，操作簡單，為獲得金絲桃苷和異槲皮素提供了一條新的途徑。
文檔編號A61K36/185GK101260133SQ200810072860
公開日2008年9月10日 申請日期2008年4月17日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月17日
發(fā)明者韜 吳, 熱依木古麗·阿布都拉, 趙永昕, 阿吉艾克拜爾·艾薩 申請人:中國科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所