專利名稱：：一種對抗肝損傷有效的藥物組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種組合物及其應(yīng)用，具體來說是一種對抗肝損傷有效的藥物組合物以及該藥物組合物在保護(hù)和預(yù)防以及治療肝損傷的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：肝損傷是各種肝臟疾病的病變結(jié)果，許多因素，如病毒、生物、藥物、理化、酒精等，都可以導(dǎo)致肝損傷，肝臟的病變可認(rèn)為是肝臟受到不同程度損傷的結(jié)果?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝損傷的研究比較深入，已從多方面探討了肝損傷的發(fā)生機(jī)制，并研制開發(fā)出了膜保護(hù)劑，抗脂質(zhì)過氧化劑，抗免疫反應(yīng)劑等保肝藥物，但療效尚難盡人意，且因其毒副作用，限制了臨床應(yīng)用。中藥因其毒副作用小，有著多成分、多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)綜合作用且標(biāo)本兼顧的特點(diǎn)，在治療肝損傷方面有其自身獨(dú)特的優(yōu)勢。但由于中藥多為復(fù)方制劑，服用量較大，臨床效果不顯著。因此，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，借助現(xiàn)代科學(xué)方法，研制一種療效顯著、服用方便、毒副作用小的治療肝損傷的藥物是眾多患者和廣大醫(yī)藥工作者的迫切希望；以實(shí)事求是的態(tài)度，積極開拓中草藥這一豐富的資源，有其廣闊的前景和深遠(yuǎn)的意義。中藥復(fù)方是祖國醫(yī)藥寶庫的重要組成部分，是中國醫(yī)藥學(xué)寶庫中的精華內(nèi)容之一，是中醫(yī)扶正祛邪、辨證論治的集中體現(xiàn)和中醫(yī)治法治則在組方用藥上的具體應(yīng)用，其君臣佐使等配伍的獨(dú)特規(guī)律及效用的優(yōu)越性已為數(shù)千年的臨床實(shí)踐所證明。利用現(xiàn)代科學(xué)方法和先進(jìn)的技術(shù)手段充分利用中藥復(fù)方的治療作用不僅對闡明中醫(yī)藥理論、將中藥復(fù)方推向國際社會具有特別重要的意義，而且可以結(jié)合我國國情，發(fā)揮傳統(tǒng)醫(yī)藥資源優(yōu)勢，為創(chuàng)新新藥開拓一條重要且有效的途徑。中藥復(fù)方表達(dá)藥效的成分基礎(chǔ)不能簡單地理解為各個單味中藥有效成分的堆積，中國歷年的行醫(yī)實(shí)踐總結(jié)出一條經(jīng)驗(yàn)稱為"方無成藥"，從現(xiàn)代成分結(jié)構(gòu)的角度可以理解為中藥經(jīng)過組方后各中藥的成分因配伍出現(xiàn)物理和化學(xué)性的變化，產(chǎn)生了成分重組，其中有些成分甚至可能是單味中藥的有效成分因沉淀的生成或揮發(fā)物的沉聲在復(fù)方中急劇減少或消失，有些成分因化學(xué)變化轉(zhuǎn)變成新的成分，成分的重組使復(fù)方產(chǎn)生了一種新的區(qū)別于單味中藥有效成分堆加的功能結(jié)構(gòu)，使復(fù)方有可能達(dá)到高于有效成分堆加的療效，如產(chǎn)生協(xié)同作用。中藥有效成分的提取、分離是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的重要步驟。當(dāng)藥為龍膽科獐牙菜屬植物瘤毛獐牙菜SweW/flp"w^c/u'"e/w"Hara的干燥全草。是治療肝炎的傳統(tǒng)藥物?！吨袊幍洹?977年版一部收載。當(dāng)藥為河北、內(nèi)蒙古一帶使用的民間草藥，其味苦，性寒。歸肝、胃、大腸經(jīng)。用于瀉火解毒、利濕、健脾。主治濕熱黃疸、痢疾、胃炎、消化不良、火眼、牙痛、口瘡和瘡毒腫痛等癥。當(dāng)藥中化學(xué)成分較為復(fù)雜，主要包括裂環(huán)環(huán)烯醚萜類(如獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、當(dāng)藥苷等)、三萜類(齊墩果酸、齊墩果垸、熊果酸等)、黃酮類(當(dāng)藥黃素、芒果苷等口山酮類)等。水飛薊為菊科植物水飛薊(Silybummarianum(L.)Gaertn.)的種子和花頭，原產(chǎn)地中海地區(qū)，廣泛分布于歐洲，我國于1972年從德國引種成功。春季采收葉，夏季采收種子。其性寒，味苦。水飛薊主要化學(xué)成分為黃酮和揮發(fā)油類化合物。其黃酮類成分主要有水飛薊賓(Silybin)、異水飛薊賓、脫氫水飛薊賓、水飛薊寧(Silydianin)、水飛薊亭(Silychristin)、水飛薊賓聚合物等，水飛薊素是水飛薊總黃酮木脂素類混合物的統(tǒng)稱。其揮發(fā)油類成分主要有亞油酸、亞麻酸、肉桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚烯酸、花生酸等。中藥經(jīng)過提取分離純化后得到的有效部位的組合亦可以稱為中藥復(fù)方，其中，對于當(dāng)藥中環(huán)烯醚萜類成分的研究中，國內(nèi)外相關(guān)的報道較多。環(huán)烯醚萜類成分中具有代表性的化合物如獐牙菜苦苷(Swertiamarin)和龍膽苦苷(Gentionpicroside)，此類化學(xué)成分除具有上述對胃炎、痢疾等有效以外，喬衛(wèi)等在發(fā)表在國外醫(yī)藥植物分冊2001，16(2):65~67中天然環(huán)烯醚萜類化合物的生物活性報道了此類化學(xué)成分中獐牙菜苦苷對小鼠可產(chǎn)生與嗎啡或延胡索乙素相當(dāng)?shù)逆?zhèn)痛作用，宮川辰治，大島俊幸等發(fā)表在藥物分析雜志1997，17(4):241中龍膽科生藥中2種苦甙的含量測定報道了此類化學(xué)成分對子宮平滑肌也有較明顯的解痙作用，同時有鎮(zhèn)靜作用。本發(fā)明所述的水飛薊有效部位提取物是指將水飛薊中的黃酮木質(zhì)素類成分經(jīng)過提取分離、純化達(dá)到藥品注冊管理辦法中藥、天然藥物5類新藥(即有效部位)的要求，即飛薊中的黃酮木質(zhì)素類成分水飛薊素的含量占提取物的重量比為50%以上，目前，水飛薊有效部位提取物即水飛薊素，在市場上己有銷售；所述的當(dāng)藥有效部位提取物是指將當(dāng)藥中的環(huán)烯醚萜類成分經(jīng)過提取分離、純化達(dá)到藥品注冊管理辦法中藥、天然藥物5類新藥(即有效部位)的要求，即當(dāng)藥中環(huán)烯醚萜類成分的含量占提取物的重量比為50%以上。當(dāng)藥有效部位提取物可通過多種制備方法獲得，也可通過以下技術(shù)方案得到取當(dāng)藥藥材10Kg，剪碎2~5厘米，加水120L，浸泡1小時，回流提取1小時，過濾；藥渣再加水100L，回流提取1小時，過濾，藥渣再用同樣方法提取1次，合并濾液，濃縮至藥液體積與藥材質(zhì)量比為2:1，4000rpm離心10min。取上清液，加到已處理好的HPD300(滄州寶恩化工有限公司)型大孔吸附樹脂柱(樹脂床體積約30L，相當(dāng)于干樹脂與藥材的重量比為0.75:1，徑高比為1:7)上，先用3倍于樹脂床體積(3BV)的水洗脫至幾乎無色，棄去洗脫液，再用25%乙醇水溶液洗脫，每7500ml收集l份，收集至約16份(相當(dāng)于4BV),檢測，根據(jù)檢測結(jié)果決定合并第414份洗脫液，60'C減壓回收乙醇至相對密度為1.15(熱測)，噴霧干燥(進(jìn)風(fēng)口溫度140~150°C，出風(fēng)口溫度80~86°C)，即得當(dāng)藥有效部位提取物。此提取物中環(huán)烯醚萜類化合物含量即達(dá)到50%以上。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供對抗肝損傷有效的藥物組合物和提供這種藥物組合物在制備對抗肝損傷有效的藥物制劑上的應(yīng)用。為達(dá)到以上目的，本發(fā)明涉及的藥物組合物含有當(dāng)藥有效部位提取物。當(dāng)其與水飛薊有效部位提取物組合應(yīng)用時，藥效結(jié)果更加顯著，所以，本發(fā)明提供的藥物組合物還可以是含有當(dāng)藥有效部位提取物和水飛薊有效部位提取物和/或藥學(xué)上可以接受的輔料。本發(fā)明藥物組合物所包含的藥學(xué)上可以接受的輔料可以是常規(guī)制劑所用的藥用載體、賦形劑及其他添加劑，或者一些有助于制劑成型、穩(wěn)定、增溶、助溶緩釋等具有不同功能和作用的各種輔料。如果需要的話，本發(fā)明藥物組合物還可以含有其他活性成分。本發(fā)明所述的組合物可以制成片劑、丸劑、滴丸劑、顆粒劑、膠囊劑、軟膠囊劑、注射劑等或者藥學(xué)上應(yīng)用的各種劑型。本發(fā)明的當(dāng)藥有效部位提取物為從龍膽科獐牙菜屬植物瘤毛獐牙菜(Sww/a戸^^c/n'"e"w、Hara)的干燥全草或其炮制品中經(jīng)提取精制等手段得到的環(huán)烯醚萜類成分含量占提取物的重量比為50%以上的中藥有效部位提取物；所述的水飛薊有效部位提取物可以為水飛薊素(Silymarin)或水飛薊賓(Silybin)、異水飛薊賓、脫氫水飛薊賓、水飛薊亭(Silychristin)和水飛薊寧(Silydianin)等水飛薊素中已知成分中的一種或多種成分的含量占提取物的重量比為50%以上的中藥有效部位提取物。雖然本發(fā)明僅將包括當(dāng)藥有效部位提取物和水飛薊有效部位提取物簡單的組合在一起，但是，在考察此提取物的藥物藥效時發(fā)現(xiàn)將二者組合后對抗肝損傷的藥效好于單一成分的藥效。申請人參考衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成方制劑)第十七冊第99頁當(dāng)飛利肝寧膠囊的處方配比，此標(biāo)準(zhǔn)中當(dāng)藥原藥材與水飛薊原藥材比為950g:900g。在研究中，申請人:將當(dāng)藥原藥材與水飛薊原藥材比950g:900g假設(shè)為1:1，考察了當(dāng)藥與水飛薊兩有效部位提取物的比例通過兩藥材實(shí)際得到有效部位提取物的得率折算成原藥材的配比分別為1:1、l:2和2:1時對抗肝損傷藥效試驗(yàn)的藥效結(jié)果。結(jié)果顯示，兩提取物在折算成藥材的配比為1:1時的效果最為顯著。以下的實(shí)施例中將詳細(xì)敘述試驗(yàn)的過程和結(jié)果。由于根據(jù)藥材的不同而使制備有效部位提取物時所得的成品率會有所不同，所以當(dāng)藥有效部位提取物與水飛薊有效部位提取物的最佳配比為3~5.5:35，而使這個最佳比例的數(shù)值是一個范圍。本發(fā)明提供了利用現(xiàn)代藥物提取精制技術(shù)制備的當(dāng)藥有效部位提取物和已有市售成品的水飛薊有效部位提取物的組合應(yīng)用，和這種藥物組合物在制備對抗肝損傷有效的藥物制劑上的用途。此藥物組合物組方簡單，可以制成各種劑型，藥效顯著，為中藥復(fù)方新藥的創(chuàng)新與開發(fā)提供了一種重要且有效的思路和方法。圖l是對抗肝損傷有效的藥物組合物的組成和應(yīng)用圖示具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說明，但并不作為本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以各種導(dǎo)致肝損傷的原因引起的肝損傷為研究對象來得出本組合物具有抗肝損傷的作用。實(shí)施例1當(dāng)藥和水飛薊提取物對小鼠肝損傷的影響1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)確定不同配比當(dāng)藥有效部位提取物和水飛薊有效部位提取物混合物與當(dāng)飛利肝寧膠囊及聯(lián)苯雙酯進(jìn)行藥效對比，為化學(xué)部的實(shí)驗(yàn)提供參考。2.實(shí)驗(yàn)材料2.1.實(shí)驗(yàn)藥品當(dāng)飛有效部位提取物和水飛薊有效部位提取物北京中研同仁堂醫(yī)藥研發(fā)有限公司藥學(xué)部提供當(dāng)飛利肝寧膠囊四川美大康藥業(yè)股份有限公司提供，批號050101;聯(lián)苯雙酯北京協(xié)和藥廠提供，批號04060109;CC14:分析純，北京化學(xué)試劑公司提供，批號010612;天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒批號070231;丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒批號070591。2.2.藥物劑量的設(shè)置以生藥數(shù)折算，按照人用最大量作為藥效學(xué)劑量2.2.1.當(dāng)飛利肝寧膠囊0.25g/粒，4粒/次，3次/日，7.4g生藥混合物/g膠囊，3.7g當(dāng)藥/g膠囊，3.7g水飛薊/g膠囊；臨床等效劑量的2倍作為藥效學(xué)劑量0.25*4*3*20/60=1§膠囊/1^=7.4§生藥混合物/kg，3.7g當(dāng)藥/kg,3.7g水飛薊/kg;聯(lián)苯雙酯15mg/次(5丸)，3次/日；以臨床等效劑量的4倍作為藥效學(xué)的劑量15*3*20/60=15mg/kg。2.2.2.當(dāng)藥與水飛薊的劑量不同配比的當(dāng)藥和水飛薊劑量與當(dāng)飛利肝寧的藥效學(xué)劑量一致組l:當(dāng)藥與水飛薊配比為1:1，即當(dāng)藥3.7g生藥/kg+水飛薊3.7g生藥/kg;組2:當(dāng)藥與水飛薊配比為1:2，即當(dāng)藥3.7g生藥/kg+水飛薊7.4g生藥/kg;組3:當(dāng)藥與水飛薊配比為2:1，即當(dāng)藥7.4g生藥/kg+水飛薊3.7g生藥/kg。2.2.3.四氯化碳劑量用花生油配成0.1%油溶液3.實(shí)驗(yàn)動物ICR種小鼠，雌雄各半，體重18-22g，SPF級。購自北京維通利華試驗(yàn)動物技術(shù)有限公司。動物許可證編號SCXK(京)2004-0001。4.實(shí)驗(yàn)儀器vital-300半自動生化儀。5.實(shí)驗(yàn)方法小鼠隨機(jī)分為12組，每組10只，分別為正常對照組、模型組、當(dāng)飛利肝寧膠囊組、聯(lián)苯雙酯組、當(dāng)藥與水飛薊配比為1:l大劑量組、當(dāng)藥與水飛薊配比為1:1小劑量組、當(dāng)藥與水飛薊配比為1:2大劑量組、當(dāng)藥與水飛薊配比為1:2小劑量組、當(dāng)藥與水飛薊配比為2:l大劑量組、當(dāng)藥與水飛薊配比為2:l小劑量組。各給藥組灌胃給藥，每日1次，給藥體積0.2ml/10g，對照組和模型組給與等體積蒸餾水。連續(xù)10天，于第7天上午和第9天下午，除正常對照組之外，其余各組用0.1%四氯化碳10ml/kg腹腔注射一次。末次給藥1小時后(注射16h后)各組小鼠摘眼球取血，3000轉(zhuǎn)/分離心15分鐘，分離血清，測定ALT和AST活性。結(jié)果用X士S表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。結(jié)果顯示同空白對照組比模型對照組ALT、AST顯著升高(P〈0.01)。同模型對照組比較，聯(lián)苯雙酯ALT、AST顯著降低，給藥組當(dāng)藥:水飛薊1:1大劑量組ALT、AST顯著降低(P<0.05)。其它各給藥組同對照組比較均無顯著性差異。6.實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果顯示，當(dāng)藥和水飛薊不同配比均可不同程度的降低四氯化碳造成小鼠急性肝損傷模型小鼠ALT、AST升高作用，且當(dāng)藥:水飛薊1:1作用明顯。見表l。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注各組均與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，與空白對照組比較，##p<0.01。本實(shí)施例結(jié)果可抑制肝損傷模型小鼠中ALT、AST的升高，而表現(xiàn)出具有明顯的抗損傷作用。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以其它各種原因?qū)е碌母螕p傷模型為研究對象來得出本組合物在抗肝損傷試驗(yàn)中的陽性作用。權(quán)利要求1.一種對抗肝損傷有效的藥物組合物，其特征在于該組合物含有當(dāng)藥有效部位提取物，它是含環(huán)烯醚萜類成分的重量比為50％以上的提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物含有水飛薊有效部位提取物，它是含黃酮木質(zhì)素類成分的重量比為50%以上的提取物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中當(dāng)藥有效部位提取物與水飛薊有效部位提取物的重量比為3~5.5:3~5，這是由當(dāng)藥和水飛薊兩味藥材的重量比為950g:900g時分別得到有效部位提取物的得率折算出來的。4.權(quán)利要求13中任何一項(xiàng)所述的藥物組合物所制成的藥物制劑。5.權(quán)利要求1~3中任何一項(xiàng)所述的藥物組合物在用于保護(hù)和預(yù)防以及治療肝損傷的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供了一種對抗肝損傷有效的藥物組合物和這種藥物組合物在制備對抗肝損傷有效的藥物制劑上的用途，利用當(dāng)藥有效部位提取物與水飛薊有效部位提取物的組合，在藥效試驗(yàn)中對抗肝損傷具有顯著效果。此藥物組合物組方簡單，療效顯著，可以制成口服制劑或其他劑型，為中藥復(fù)方新藥的創(chuàng)新與開發(fā)提供了一種重要且有效的思路。文檔編號A61K31/352GK101543527SQ20081010284公開日2009年9月30日申請日期2008年3月27日優(yōu)先權(quán)日2008年3月27日發(fā)明者葉祖光申請人:北京中研同仁堂醫(yī)藥研發(fā)有限公司