專利名稱：含有山楂(葉)總黃酮和葉酸類化合物的復(fù)方藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有山楂(葉)總黃酮和葉酸類化合物的復(fù)方藥，尤指一種防治動脈粥 樣硬化及其相關(guān)疾病的復(fù)方藥，以及該復(fù)方藥在制備藥物中的用途。屬于藥學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
動脈硬化是動脈管壁增厚、變硬、管腔縮小等各種退行性和增生性病變。動脈粥樣硬化 是動脈硬化的最常見類型，是心肌梗死和腦梗死的主要病因。動脈粥樣硬化相關(guān)疾病包括冠 心病、心絞痛、心肌梗死、猝死、腦動脈供血不足引起的眩暈、頭痛、昏厥、腦卒中、腦溢 血、腎動脈粥樣硬化引起的頑固性高血壓、肢體動脈供血不足。
本病的致病原因很多，如高血脂、高血壓、吸煙、糖尿病、超重、飲食和遺傳等， 一般 認(rèn)為本病的發(fā)生與脂質(zhì)代謝失常密切相關(guān)，其本質(zhì)是動脈壁對從血漿侵入的脂質(zhì)的反應(yīng)。實(shí) 驗中發(fā)現(xiàn)長期采用高脂飲食在造成動物高血脂的基礎(chǔ)上能夠形成動脈粥樣硬化。
心血管疾病在我國居于死亡原因的首位，其中冠心病(CHD)的發(fā)病與死亡率呈上升趨勢， 高脂血癥、高血壓、吸煙和糖尿病等若干危險因素在冠心病的發(fā)病中起重要作用。高膽固醇 (TC)以及高甘油三酯(TG)血癥可引起和加速動脈粥樣硬化，作為冠心病的主要危險因素， 早已引起廣泛重視。流行病學(xué)研究證實(shí)，總膽固醇水平的升高和冠心病死亡的危險度成正相 關(guān)TC〈5.2mmol/L患者冠心病患病率為4.8%，而〉5. 2誦ol/L患者為10. 7%，較前者高一倍。 而越來越多的研究資料提示高甘油三酯血癥和冠心病之間存在相關(guān)性，特別是循環(huán)中富含甘 油三酯的脂蛋白的量和質(zhì)的異?？赡苁枪谛牟“l(fā)展過程中的關(guān)鍵因子(陳紅，等.高血壓雜 志.2003， ll(s叩pl): 41-3)。我國成人血脂異?；疾÷蕿?8.6%,估計全國血脂異常現(xiàn)患人 數(shù)為1. 6億，不同類型的血脂異常患病率分別為高膽固醇血癥2. 9%，高甘油三酯血癥11. 9%， 低高密度脂蛋白血癥7. 4%，另有3. 9%的人血膽固醇邊緣升高(中國居民營養(yǎng)與健康現(xiàn)狀調(diào)查， 2004)。因此，高脂血癥的防治成為動脈粥樣硬化防治的重要環(huán)節(jié)。
合理的飲食與生活調(diào)節(jié)對防治高脂血癥極為重要，近年新發(fā)展的調(diào)脂藥物已能部分地控 制飲食治療。臨床上常用的調(diào)節(jié)血脂的藥物為HMG-CoA還原酶抑制劑(他汀類)、氯貝丁酯類 (貝特類)、膽酸螯合劑、煙酸類等。大量研究表明內(nèi)皮受損和內(nèi)皮功能減退是動脈粥樣硬化 發(fā)病的始動因素，內(nèi)皮細(xì)胞的損傷或功能變化在AS的發(fā)生、發(fā)展具有始動因子的作用。因此， 在利用調(diào)脂藥降脂的同時，有必要對血管內(nèi)皮功能進(jìn)行保護(hù)，進(jìn)一步有效的防治動脈粥樣硬 化及冠心 3多年實(shí)踐和研究表明，我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥在治療高脂血癥及其并發(fā)癥方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢， 可從調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抑制脂質(zhì)過氧化、改善血液流變學(xué)、抑制平滑肌細(xì)胞增殖等方面，多途 徑、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)對疾病產(chǎn)生影響。近年來通過對中藥單味藥防治高脂血癥進(jìn)行篩選，發(fā) 現(xiàn)許多中藥有降血脂的作用。臨床上可在辨證論治上，選擇用藥可對本病的治療大有裨益。 如選用以降TC為主的山楂、何首烏、枸杞、杜仲、銀杏葉、桑寄生、葛根、甘草等以降TG 為主的金銀花、冬青子；對降TC、 TG均有效的絞股藍(lán)、人參、女貞子、茵陳、虎杖、蒲黃、 決明子、東蟲夏草、澤瀉、花粉、黃精、綠豆等。
在單味藥中，山楂最為常用。山楂始載于《本草衍義補(bǔ)遺》，為薔薇科植物山里紅 (Crataegus pinnatifida Bge. Var.major N. E. Br)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.) 的干燥成熟果實(shí)。其味酸甘，性微溫，歸脾、胃、肝經(jīng)，祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為山植有消積化滯、補(bǔ) 脾健胃、活血化瘀等功用。而現(xiàn)代國內(nèi)外研究資料證明山楂含的有機(jī)酸及黃酮類化合物，具 有更多方面的藥理作用，尤其對于消化系統(tǒng)、脂質(zhì)代謝和心血管系統(tǒng)的作用較為顯著。實(shí)驗 研究表明，山楂不同提取部位對不同動物造成的各種高血脂模型均有肯定的降脂作用。
動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病等都是由多種危險因素造成的，單味藥山楂及其提取物常常 難以達(dá)到理想的防治效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種在血管內(nèi)皮保護(hù)方面和抗動脈粥樣硬化方面優(yōu)于山楂 (葉)總黃酮，而毒性不增加的復(fù)方藥。
本發(fā)明的目的之二是提供上述復(fù)方藥在制備預(yù)防、治療、延緩動脈粥樣硬化及其相關(guān) 疾病的藥物中的應(yīng)用。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種復(fù)方藥，含有山楂(葉)總黃酮、葉酸類化合物及藥學(xué)上可接受的載體。
所述山楂(葉)總黃酮為從山楂果實(shí)中提取的總黃酮或從山楂葉中提取的總黃酮，含量
為30 120mg，優(yōu)選30 60mg。所述藥用劑量的葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉
酸鈣，劑量為0.05 1.6mg，優(yōu)選O. 1 1.0mg。
本發(fā)明提供該組合物中的山楂(葉)總黃酮包括從山楂果實(shí)中提取的總黃酮或從山楂葉
中提取的總黃酮，具體地包括金絲桃苷(hyperoside)，牡荊素鼠李糖苷(vitexin rhamnoside)(即
5， 7， 4'-三羥基黃酮-8-C-a-L-吡喃鼠李糖基-(1—2)-P-D-吡喃葡萄糖苷)，枸櫞酸(citric acid)，
牡荊素(vitexin)，槲皮素(quercetin)，熊果酸(ursolic acid)等。
本發(fā)明所述的山楂(葉)總黃酮按《中藥成方制劑》第九冊"山楂精降脂片"項下的"山楂提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)"項下的工藝制備，即得。
含量測定按"山楂提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)"項下的含量測定方法，以干燥品計，含總黃酮以 無水槲皮素(Cl5Hl0O7)計算，不得少于8.0%。
本發(fā)明所述的山楂葉總黃酮按《中國藥典》2005年版一部"益心酮片"項下的"山楂
葉提取物"項下的工藝制備，即得。
含量測定按"山楂葉提取物"項下的含量測定方法，以干燥品計，含總黃酮以無水蘆 丁 (C27H30O16)計，不得少于80.0%;含金絲桃苷(C21H20Ol2)，不得少于0.40%。
本組合物制劑的制備方法包括以下步驟
A. 取山楂(葉)總黃酮、葉酸與適量藥劑學(xué)上可接受的載體粉碎過篩，混合均勻；
B. 用適宜的溶劑制成軟材，制粒、干燥，至含水量為3%左右；
c.取出，整粒，與適量潤滑劑混合均勻，按常規(guī)方法壓成或填充成制劑。
該復(fù)方藥中藥劑學(xué)可接受的載體，包括有助于將活性化合物配制成藥用制劑的賦形劑和 輔藥，如淀粉、微晶纖維素、無機(jī)鹽類、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖、氯化鈉、半胱 氨酸、檸檬酸和亞硫酸鈉等的一種或幾種物質(zhì)的組合物，屬于本領(lǐng)域常識。該復(fù)方藥可制成 普通片、口腔速崩片、分散片、雙層片、多層片、緩釋片、單室控釋片、雙室控釋片、微孔 型控釋片、舌下含片、腸溶片、顆粒劑、丸劑、腸溶膠囊、延遲釋放片、定時/位釋放片、普 通膠囊、軟膠囊、緩釋膠囊、控釋膠囊、緩釋微球，含有微丸或小片的膠囊、含有微丸或小
片的pH依賴型膠囊、顆粒劑、口服液、膜劑或貼劑等劑型。
本發(fā)明制劑根據(jù)病人實(shí)際情況確定用法用量，可以每天服用2 3次，或者以緩釋或控釋 方式每天服用l次。
本發(fā)明的有益效果-
(1) 本發(fā)明提供的復(fù)方藥對動脈粥樣硬化家兔、高血脂癥大鼠具有顯著的協(xié)同降脂作用；
(2) 本發(fā)明提供的復(fù)方藥對高脂詞料詞喂引起動脈粥樣硬化家兔具有顯著的協(xié)同抗動脈 粥樣硬化作用；
(3) 本發(fā)明提供的復(fù)方藥可以協(xié)同保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、抗脂質(zhì)過氧化、延緩靶器官損害，降 低動脈粥樣硬化斑塊形成，全面控制心血管疾病危險因素。
(4)本發(fā)明提供的復(fù)方藥無需煎煮、服用方便、無苦澀感，副作用小，費(fèi)用低，患者依 從性好。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，并非對本發(fā)明的限定，凡依照本發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行的任何本領(lǐng)域的等同替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。 實(shí)施例1山楂提取物(總黃酮)60mg+葉酸0.4mg制劑
(1) 片劑取山楂提取物60g、葉酸0.4g、微晶纖維素40g、淀粉40g，混合均勻，加 乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜衣， 即得。本品含總黃酮以無水槲皮素(C15H1()07)計算，每片不得少于4.5mg。
(2) 膠囊劑取山楂提取物60g、葉酸0.4g、微晶纖維素40g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，裝入膠囊，制成1000粒，即得。本 品含總黃酮以無水槲皮素(C15Hlfl07)計算，每粒不得少于4.5mg。
(3) 顆粒劑取山楂提取物30g、葉酸0.2g、糊精300g、蔗糖粉640g，混合均勻，加 70%乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。本品含總黃酮以無水槲皮素
(C15H1Q07)計算，每袋不得少于4.5mg。
(4) 軟膠囊劑取山楂提取物60g、葉酸0.4g、大豆色拉油280g、蜂蠟3g，將大豆色 拉油加熱至85'C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35'C時，將微粉 化的山楂提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋 轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得。本品含總黃酮以無水槲皮素(C15H1()07)計算，每粒不得少 于4.5mg。
實(shí)施例2山楂提取物(總黃酮)30mg+葉酸0.1mg制劑
(1) 片劑取山楂提取物30g、葉酸0.1g、微晶纖維素55g、淀粉55g，混合均勻，加 乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜衣， 即得。
(2) 膠囊劑取山楂提取物30g、葉酸0.1g、微晶纖維素55g、淀粉55g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
(3) 顆粒劑取山楂提取物15g、葉酸0.05g、糊精300g、蔗糖655g，混合均勻，加70% 乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。
(4) 軟膠囊劑取山楂提取物30g、葉酸O.lg、大豆色拉油210g、蜂蠟3g，將大豆色 拉油加熱至85。C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35'C時，將微粉 化的山楂提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋 轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得。
實(shí)施例3山楂提取物(總黃酮)60mg+葉酸0.8mg制劑
6(1) 片劑取山楂提取物60g、葉酸0.8g、微晶纖維素55g、淀粉55g，混合均勻，加 乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜衣， 即得。
(2) 膠囊劑取山楂提取物60g、葉酸0.8g、微晶纖維素55g、淀粉55g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
(3) 顆粒劑取山楂提取物30g、葉酸0.4g、糊精300g、蔗糖655g，混合均勻，加70% 乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g,即得。
(4) 軟膠囊劑取山楂提取物60g、葉酸0.8g、大豆色拉油210g、蜂蠟3g，將大豆色 拉油加熱至85-C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35t:時，將微粉 化的山楂提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋 轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得。
實(shí)施例4山楂提取物(總黃酮)30mg+葉酸0.4mg制劑
(1) 片劑取山楂提取物30g、葉酸0.4g、微晶纖維素70g、淀粉70g，混合均勻，加 乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜衣'， 即得。
(2) 膠囊劑取山楂提取物30g、葉酸0.4g、微晶纖維素70g、淀粉70g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
(3) 顆粒劑取山楂提取物15g、葉酸0.2g、糊精300g、蔗糖670g，混合均勻，加70% 乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。
(4) 軟膠囊劑取山楂提取物30g、葉酸0.4g、大豆色拉油240g、蜂蠟3g，將大豆色 拉油加熱至85t:左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35'C時，將微粉 化的山楂提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋 轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得。
實(shí)施例5山楂葉總黃酮30mg+葉酸0.8 mg制劑 '
(1) 片劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.8g、微晶纖維素70g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜 衣，即得。本品每片含金絲桃苷(C21H20O12)，不得少于0.12mg。
(2) 膠囊劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.8g、微晶纖維素70g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，裝入膠囊，制成1000粒即得。本品每粒含金絲桃苷(C21H2C)012)，不得少于0.12mg。
(3) 顆粒劑取山楂葉總黃酮15g、葉酸0.4g、糊精400g、蔗糖555g，混合均勻，加 700/。乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。本品每袋含金絲桃苷(C2!H2oOu)， 不得少于0.12mg。
(4) 軟膠囊劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.8g、大豆色拉油207g、蜂蠟3g，將大豆 色拉油加熱至85'C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35"時，將微 粉化的山楂葉提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣， 旋轉(zhuǎn)模壓法壓制成IOOO粒，即得；或山楂葉總黃酮30g、葉酸0.8g、液態(tài)聚乙二醇180g、 10g 聚乙二醇4000、甘油20g，將液態(tài)聚乙二醇加熱至90'C左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待溫度降至40'C時加入甘油，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35。C時，將微粉化的山楂葉 提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋轉(zhuǎn)模壓法 壓制成1000粒，即得。本品每粒含金絲桃苷(C21H20O12)，不得少于0.12mg。
實(shí)施例6山楂葉總黃酮60mg+葉酸0.4mg制劑
(1) 片劑取山楂葉總黃酮60g、葉酸0.4g、微晶纖維素70g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜 衣，即得。
(2) 膠囊劑取山楂葉總黃酮60g、葉酸0.4g、微晶纖維素70g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，裝入膠囊，制成1000粒， 即得。
(3) 顆粒劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.2g、糊精300g、蔗糖655g，混合均勻，加 70%乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。
(4) 軟膠囊劑取山楂葉總黃酮60g、葉酸0.4g、大豆色拉油207g、蜂蠟3g，將大豆 色拉油加熱至85。C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35"時，將微 粉化的山楂葉提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣， 旋轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得；或山楂葉總黃酮60g、葉酸0.4g、液態(tài)聚乙二醇180g、 10g 聚乙二醇4000、甘油20g，將液態(tài)聚乙二醇加熱至9(TC左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待溫度降至4(TC時加入甘油，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35。C時，將微粉化的山楂葉 提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋轉(zhuǎn)模壓法 壓制成1000粒，即得。
8實(shí)施例7 山楂葉總黃酮60mg+葉酸0.2mg制劑
(1) 片劑取山楂葉總黃酮60g、葉酸(K2g、微晶纖維素40g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜 衣，即得。
(2) 膠囊劑取山楂葉總黃酮60g、葉酸0.2g、微晶纖維素40g、淀粉40g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，裝入膠囊，制成1000粒， 即得。
(3) 顆粒劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.1g、糊精300g、蔗糖640g，混合均勻，加 70%乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。
(4) 軟膠囊劑取山楂葉總黃酮60g、葉酸0.2g、大豆色拉油280g、蜂蠟4g，將大豆 色拉油加熱至85。C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35'C時，將微 粉化的山楂葉提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣， 旋轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得；或山楂葉總黃酮60g、葉酸0.8g、液態(tài)聚乙二醇240g、 20g 聚乙二醇4000、甘油20g，將液態(tài)聚乙二醇加熱至9(TC左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待溫度降至4(TC時加入甘油，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35t:時，將微粉化的山楂葉 提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋轉(zhuǎn)模壓法 壓制成1000粒，即得。
實(shí)施例8山楂葉總黃酮30mg+葉酸0.4mg制劑
(1) 片劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.4g、微晶纖維素70g、淀粉70g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，壓制成1000片，包薄膜 衣，即得。
(2) 膠囊劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.4g、微晶纖維素70g、淀粉70g，混合均勻， 加乙醇適量制成顆粒，加入硬脂酸鎂2g或微粉硅膠2g，混合均勻，裝入膠囊，制成1000粒， 即得。
(3) 顆粒劑取山楂葉總黃酮15g、葉酸0.2g、糊精300g、蔗糖670g，混合均勻，加 70%乙醇適量制成顆粒，制成1000g，包裝，每袋裝2g，即得。
(4) 軟膠囊劑取山楂葉總黃酮30g、葉酸0.4g、大豆色拉油237g、蜂蠟3g，將大豆 色拉油加熱至85'C左右，加入蜂蠟使熔化，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35'C時，將微 粉化的山楂葉提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣， 旋轉(zhuǎn)模壓法壓制成1000粒，即得；或山楂葉總黃酮30g、葉酸30g、液態(tài)聚乙二醇210g、 10g聚乙二醇4000、甘油20g，將液態(tài)聚乙二醇加熱至9(TC左右，加入聚乙二醇4000使熔化， 待溫度降至4(TC時加入甘油，攪拌使混合均勻；待溫度降至25 35'C時，將微粉化的山楂葉 提取物、葉酸加至混合溶液中，攪拌均勻使降至室溫，過膠體磨，放置使脫氣，旋轉(zhuǎn)模壓法 壓制成1000粒，即得。
實(shí)施例9制備山楂葉總黃酮葉酸緩釋片
稱取山楂葉總黃酮卯g、葉酸0.4g、聚乙烯基吡咯烷酮K9o35g和243g羥丙基甲基纖維素， 混合均勻，作為混合粉，用50%乙醇制粒，干燥，整粒后，加入硬脂酸鎂10g和羥丙基甲基纖 維素42g,混合均勻，壓制成1000片，即得。本品每片含金絲桃苷(C^H2()0u)，不得少于0.12mg。
實(shí)施例IO制備山楂總黃酮葉酸緩釋片
稱取山楂總黃酮180g、葉酸1.0g、聚乙烯基吡咯烷酮K9o45g和239g羥丙基甲基纖維素，混 合均勻，作為混合粉，用50%乙醇制粒，干燥，整粒后，加入硬脂酸鎂13g和羥丙基甲基纖維 素43g，混合均勻，壓制成1000片，即得。本品含總黃酮以無水槲皮素(C15H1()07)計算，每 片不得少于13.5mg。
實(shí)施例ll葉酸與山楂總黃酮合用對家兔動脈粥樣硬化的影響
健康雄性新西蘭大耳白兔，體重2 2.5kg，飼喂高脂飼料(含96%基礎(chǔ)飼料、0.5%膽 固醇、3.5%豬油、0.05%膽鹽)，另取正常家兔作為正常對照組，正常對照組家兔飼喂普通飼 料。4周后，采血測血清CHO、 TG、 HDL、 LDL。根據(jù)血脂水平(主要為CHO、 LDL)將家兔隨 機(jī)分為正常對照組、模型組、葉酸組(0.02 mg/kg)、山楂總黃酮組(18mg/kg)、葉酸+山楂 總黃酮組(0.02 + 18 mg/kg)，每組12只。灌胃給藥，每日2次，連續(xù)13周，第13周末禁 食12小時，水合氯醛麻醉，取血測定血清脂質(zhì)，血清內(nèi)皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平； 采集主動脈樣本，測定主動脈MDA、 S0D水平，用圖像分析法檢測主動脈脂質(zhì)斑塊面積，光鏡 下觀察主動脈壁的變化。
結(jié)果與正常組比較，模型組家兔血清TC、 TG、 LDL均顯著增高，而HDL顯著降低。 與模型組比較，葉酸組家兔血脂無明顯變化，山楂總黃酮組家兔血清TC、 TG、 LDL降低， HDL升高；與山楂總黃酮組比較，葉酸+山楂總黃酮組家兔血清TC、 TG、 LDL進(jìn)一步降低， 結(jié)果有顯著性差異。表明兩者合用可以進(jìn)一步改善動脈硬化家兔血脂的異常改變。見表l。表1葉酸與山楂總黃酮合用對動脈硬化家兔血清脂質(zhì)的影響(又:ts， n=9~ll)
組別劑量 (mg/kg)TC (mmol/L)TG (mmol/L)LDL (mmol/L)HDL (mmol/L)
正常組— 1.78±0. 390. 93 ±0. 290. 55 ±0. 341. 27±0. 34
模型組— 12. 91 ±3. 94"3. 52±1. 31"11. 21±3. 02"0. 81±0. 11"
葉酸0.02 11.25±3. 173. 26 ±0. 6310. 72±1. 590. 85±0. 13
總黃酮18 9.61±2.32"2.67±0. 47A8. 73±2. 12A0. 89 ±0. 26
葉酸+ 總黃酮0.02+18 7.22±2. 01A"2. 22土0. 38"《7. 04土1.44"※0. 94±0.15A
與正常組比較，"P〈0.01;與模型組比較，AP<0.05，▲▲P<0.01;
與總黃酮組比較，※P〈0.05
表2葉酸與山楂總黃酮對動脈硬化家兔主動脈MDA、 SOD、血清N02—'、 ET的影響(X土s， n=9~ll)組別劑量 (mg/kg)MDA (Mmol.g,SOD (kU.g-')N(V1含量 一ol丄—')ET含量 (Pg.ml')
正常組一1.42±0.3673.5±10.286.5±11.3365.6±56.4
模型組—3.16士0.77"49.2±7.6"46.3士10.8"552.7士57.4"
葉酸0. 022.37±0.59A52.4±6.859.4±12.1AA501.6±68.6
總黃酮182.29士0.52"57.8±7.4A56.9士10.7"487.5士49.8"
葉酸+ 總黃酮0. 02+181.81±0.37"#《68.4±10.4"fl《65.2土12.7"397.5士57.4""
與正常組比較，"P〈0.01;與模型組比較，Ap〈0.05，▲▲P<0. 01;
與葉酸組比較，SP〈0.05，與總黃酮組比較，《P<0.05
與正常組比較，模型組家兔主動脈MDA水平顯著升高，SOD含量顯著降低，山楂總黃酮 組、葉酸組家兔主動脈MDA水平明顯降低，SOD含量升高，與模型組相比有顯著性差異；葉 酸與山楂總黃酮合用，其效果優(yōu)于葉酸或山楂總黃酮單用組，表明葉酸與山楂總黃酮合用可 以顯著增強(qiáng)抗脂質(zhì)過氧化作用。見表2。
與正常組比較，模型組家兔血清N02—'含量顯著降低，血漿ET含量明顯升高，葉酸組與 山楂總黃酮組均能使N02-'含量升高，ET含量降低；而葉酸與山楂總黃酮合用，其效果優(yōu)于 葉酸或山楂總黃酮單用組，表明葉酸與山楂總黃酮合用可以進(jìn)一步調(diào)節(jié)NO/ET平衡。結(jié)果見 表2。
正常組主動脈內(nèi)壁光滑，未見脂質(zhì)斑點(diǎn)、脂質(zhì)條紋及粥樣斑塊。模型組主動脈弓至腹主 動脈處具有明顯的粥樣斑塊。斑塊幾乎覆蓋整條主動脈，尤其主動脈弓處斑塊色黃且明顯隆
11起。葉酸組與山楂總黃酮組主動脈弓處有粥樣斑塊，腹主動脈粥樣斑塊少，與模型組比較斑 塊所占覆蓋面積小且斑塊較薄。葉酸+山楂總黃酮組的家兔主動脈壁斑塊面積低于葉酸組和與 山楂總黃酮組。結(jié)果見表3。
光鏡觀察正常組內(nèi)皮細(xì)胞扁平，內(nèi)膜平坦，中層平滑肌細(xì)胞與彈力板近似平行相間排 列；模型組動脈壁可見大量泡沫細(xì)胞，呈鑲嵌型排列，內(nèi)皮細(xì)胞脫落，彈力板增厚并發(fā)生斷 裂，中膜層平滑肌斷裂，排列紊亂，各給藥組均有不同程度以SMC為主的內(nèi)膜增厚，彈力板 厚薄不均，有斷裂分離現(xiàn)象，中膜淺層SMC輕度增生和排列紊亂。
模型組主動脈內(nèi)膜增生，泡沫細(xì)胞數(shù)量增加，與模型組比較，各給藥組均能降低中膜厚 度，而以葉酸+山楂總黃酮組明顯，優(yōu)于各單藥組。見表3。
表3葉酸與山楂總黃酮對動脈硬化家兔主動脈動脈粥樣硬化斑塊面積、內(nèi)膜厚度、中膜厚
度及內(nèi)膜泡沫細(xì)胞數(shù)的影響0^s， n=9~ll)
組別劑量 (mg/kg)主動脈壁斑塊面 積(％)內(nèi)膜厚度(mm)中膜厚度(mm)泡沫細(xì)胞數(shù)/mm2
正常組_0. 0±0. 00, 15±0. 070. 31±0. 063.5±2. 1
模型組—52. 6 ±7. 7**0. 37 ±0. 05"0. 44 ±0. 06"25. 3 ±4. 7"
葉酸0. 0248. 5±8. 70. 32 ±0. 04A0. 40 ±0. 0721.4±3. 6A
總黃酮1844. 9 ±5. 5"0. 30±0. 05A0. 40±0. 0621.7±3. 4A
葉酸+ 總黃酮0.02+1839. 4±4. 2""※0. 25±0. 04"共※0. 34±0. 05森"※16.6±3.7"#i"
與正常組比較，"P〈0.01;與模型組比較，AP〈0.05， "P〈0.01;
與葉酸組比較，#P<0.05，與山楂總黃酮組比較，※P〈0.05
綜上所述，葉酸與山楂總黃酮合用，可以協(xié)同調(diào)節(jié)血脂，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、抗脂質(zhì)過氧化、 延緩靶器官損害，降低動脈粥樣硬化斑塊形成，全面控制心血管疾病危險因素。
實(shí)施例9葉酸與山楂總黃酮合用對高血脂大鼠血脂的影響 雄性SD大鼠90只，適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后，詞喂高脂飼料(配方為7.5%豬油，0.8%膽固 醇，0.2%膽酸鈉，0.1%丙基硫氧嘧啶，基礎(chǔ)飼料91.4%)，同時飲用2%糖水。另取15只為 正常對照組，喂飼普通飼料，于第4周末，禁食12小時后，取血測定大鼠血清TC、 TG，血 清TC、 TG均顯著升高的大鼠為高脂血癥大鼠。
將高脂血癥大鼠隨機(jī)分為模型組、山楂總黃酮組(18mg/kg)、葉酸組(0.4mg/kg)、山 楂總黃酮+葉酸組(18mg/kg+0.4mg/kg)，每組15只。繼續(xù)飼喂高脂飼料，灌胃給藥，正常對照組與模型組給予等量0.5%CMC_Na溶液，每日2次，連續(xù)8周，于第8周末測定血 清TC、 TG、 LDL、 HDL。
結(jié)果與正常組比較，模型組大鼠血清TC、 TG、 LDL水平顯著升高，HDL水平降低。山 楂總黃酮組大鼠血清TC、 TG、 LDL明顯降低，HDL水平升高，與模型組相比有顯著性差異； 葉酸單用對大鼠血脂無明顯影響，葉酸與山楂總黃酮合用，大鼠血清TC、 TG、 LDL進(jìn)一步降 低，HDL水平進(jìn)一步升高，且具有統(tǒng)計學(xué)差異。
表明飼喂高脂飼料可以成功復(fù)制大鼠高血脂模型，山楂總黃酮灌胃給藥，顯著改善高 脂血癥大鼠血脂異常，葉酸與山楂總黃酮合用對血脂調(diào)節(jié)有顯著的協(xié)同作用。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方藥，含有山楂(葉)總黃酮、葉酸類化合物及藥學(xué)上可接受的載體。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1中所述的復(fù)方藥，其特征在于所述山楂(葉)總黃酮為從山楂果實(shí)中提取的總黃酮或從山楂葉中提取的總黃酮，含量為30 120mg，優(yōu)選30 60mg。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方藥，其特征在于所述藥用劑量的葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0. 05 1. 6mg,優(yōu)選0. 1 1. Omg。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)方藥，其特征在于其制藥劑型為口服液、片劑、膠囊、軟膠囊、顆粒劑、口含片、沖劑、微丸劑、丸劑、緩釋微球劑、散劑、混懸劑、粉劑、滴劑或溶液劑。
5. 含有山楂(葉)總黃酮、葉酸類化合物及藥學(xué)上可接受的載體的復(fù)方藥在制備預(yù)防、治療、延緩動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的藥物中的用途。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于所述的動脈粥樣硬化相關(guān)疾病包括冠心病、心絞痛、心肌梗死、猝死、腦動脈供血不足引起的眩暈、頭痛、昏厥、腦卒中、腦溢血、腎動脈粥樣硬化引起的頑固性高血壓、肢體動脈供血不足。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于所述的山楂(葉)總黃酮含量為30 120mg，優(yōu)選30~60mg。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于所述藥用劑量的葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0. 05 1.6mg，優(yōu)選O. 1 1.0mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有山楂(葉)總黃酮、葉酸類化合物及藥劑學(xué)上可接受的載體的復(fù)方藥物，以及該復(fù)方藥物在制備用于防治動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病藥物中的用途。通過本發(fā)明的實(shí)施，提供給患者這種特定用途的復(fù)方藥物不但療效確切，而且還可以提高患者依從性，使患者服藥方便，降低醫(yī)療費(fèi)用，具有較好市場前景。
文檔編號A61K9/00GK101590127SQ200810114219
公開日2009年12月2日 申請日期2008年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月30日
發(fā)明者呂紅霞, 飛 孔, 聰 孫, 莉 李, 段玉光, 王媛媛, 王濱燕, 甘亞麗, 芳 程, 陳光亮 申請人:北京奧薩醫(yī)藥研究中心有限公司;安徽省現(xiàn)代中藥研究中心