專利名稱：：環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種環(huán)烯醚萜苷類化合物在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用，尤其涉及環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：環(huán)烯醚萜苷是含有糖配基的單萜類化合物，分子中含有10個c的環(huán)戊垸稠合吡喃環(huán)基本結(jié)構(gòu)。近年來,先后從不同植物中分離報道了幾千種單體成分，該類成分具有抗癌、心血管、抗病毒以及免疫調(diào)節(jié)等活性，引起越來越多的關(guān)注。獨一味等植物富含環(huán)烯醚萜及其苷類化合物，其中主要類型是Q位被1分子葡萄糖取代、C4位羧基甲酯化、雙鍵位于C3和C4之間環(huán)戊垸型的環(huán)烯醚萜苷類化合物。以藏藥獨一味水提取物為主要成分研制開發(fā)的藥物——獨一味膠囊(收載于2000版《中國藥典》)，并實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，臨床廣泛應(yīng)用于各種外科手術(shù)后的鎮(zhèn)痛止血及牙科、婦科、關(guān)節(jié)炎等方面。中國專利ZL200410010679.0"從藏藥獨一味中提取總環(huán)烯醚萜苷的方法及其用途"指出一種從獨一味水提取物中得到的獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物具有良好的止血活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過對獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物的分離得到大量具有相似結(jié)構(gòu)的環(huán)烯醚萜苷單體化合物，同樣的藥理學(xué)實驗結(jié)果表明具有良好的鎮(zhèn)痛、止血活性，且藥效更強(qiáng)。本發(fā)明的環(huán)烯醚萜苷類化合物的基本結(jié)構(gòu)如下結(jié)構(gòu)I:Rj為OH或糖配基；R2、R3為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種;結(jié)構(gòu)in:&為OH或糖配基；R2、R3為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>結(jié)構(gòu)IV:上述結(jié)構(gòu)化合物的任一光學(xué)或立體對映體。所述糖配基為葡萄糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、芹菜糖、橙皮糖的單糖配基或所述糖任意組合成的雙糖或三糖配基。所述環(huán)烯醚萜苷類化合物特別指S-O-乙?；綏d子苷甲酯(8-O-Acetylshanzhisidemethylester,barlerin)、6國0-乙?；綏d子苷甲酯(6-0陽acetylshanzhisidemethylester)、玄參苦苷(Penstemoside)、山梔子苷甲酉旨(Shanzhisidemethyleste。、番木鱉苷CLoganii0、5-羥基-7_氯-山樺子昔甲酯(PhloyosideID和8-去羥基-山梔子苷(8-dehydroxyshanzhiside)。所述環(huán)烯醚萜苷類化合物與醫(yī)藥學(xué)上常用的敷料結(jié)合，按照常規(guī)方法制成任何一種口服或非口服劑型。本發(fā)明所指環(huán)烯醚萜苷類化合物可以從獨一味中分離得到，還可以從其他植物如唇形科糙蘇屬植物中分離得到，更可以通過化學(xué)方法合成；也可以是在某個環(huán)烯醚萜苷類化合物的基礎(chǔ)上進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾或生物轉(zhuǎn)化而成。下面通過具體實驗對環(huán)烯醚萜苷類化合物作為止血、鎮(zhèn)痛效果進(jìn)行進(jìn)一步說明1、環(huán)烯醚萜苷類化合物的制備獨一味LL"w/o;Wow&ratoto(Benth.)Kudo]地上部分2kg，力口20倍量水煎煮3次，每次1小時，冷卻后過濾，濾液上大孔吸附樹脂柱，大量水洗后乙醇梯度洗脫，將含有獨一味環(huán)烯醚萜苷類化合物部分進(jìn)行高效液相色譜制備(正相Si02填料或反相ODS填料色譜柱)得到8-0-乙?；綏d子苷甲酯(8.2g)、PhloyosideII(3.2g)、芝麻糖苷(0.6g)和8-去羥基-山梔子苷(2.6g)。2、藥效學(xué)實驗2.1實驗條件三級動物實驗室，室溫2025。C，調(diào)恒溫。2.2實驗對象動物BalB/C小鼠，體重20±2g，由蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院動物實驗科提供，合格證號甘肅省醫(yī)動字第1402-0201號。2.3藥材與儀器8-0-乙?；綏d子苷甲酯、山梔子苷甲酯、PhloyosideII和8-去羥基-山梔子苷，HPLC分別測定含量大于95X;獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物根據(jù)國家發(fā)明專利"從藏藥獨一味中提取總環(huán)烯醚蔽苷的方法及其用途"(ZL200410010679.0)制備，臨用前制成水溶液。酚磺乙胺，山東方明藥業(yè)股份有限公司，批號0804151。一次性定量取血管(20ul，長度為12cm)，天津薊縣四平玻璃儀器廠。2.4對出血時間的影響取小鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分成7組生理鹽水組、酚磺乙胺(0.1g/kg)、8-0-乙?；綏d子苷甲酯、PhloyosideII和8-去羥基-山梔子苷組(0.1g/kg);獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物(0.4g/kg)，每組10只。生理鹽水組尾靜脈給予生理鹽水，其余各組尾靜脈給予受試藥物(給藥體積0.2ml/20g)，給藥后15min，固定小鼠，以利剪將小鼠尾尖1/3處橫斷，待血液自行溢出開始計時，每隔30s用濾紙片吸去血滴一次，直至出血自然停止(濾紙吸時無血)為止，計算出血時間和縮短率(與生理鹽水組比較)。.結(jié)果見表1。表l獨一味提取物對小鼠出血時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注*<0.05，**<0.01，與生理鹽水組比較;結(jié)果由表1結(jié)果可知獨一味環(huán)烯醚萜苷類化合物8-0-乙?；綏d子苷甲酯、山梔子苷甲酯、PhloyosideII和8-去羥基-山梔子苷(0.1g/kg)均能顯著縮短小鼠斷尾出血時間，縮短率分別為67.95°/。、40.10%、58.78%和44.79%。藥效與酚磺乙胺相當(dāng)。獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚砲苷提取物(0.4g/kg)對于小鼠斷尾出血時間的縮短率分別為20.64%和42.27%。獨一味環(huán)烯醚萜苷類單體化合物的劑量只有獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物的1/4，比較而言，獨一味環(huán)烯醚萜苷類單體化合物的止血活性更高。2.5對小鼠凝血時間的影響取小鼠70只，分組及給藥同1.4，給藥后15min,用一次性定量取血管插入小鼠眥球后靜脈叢取血，至玻璃毛細(xì)管內(nèi)充滿，放平，每隔30s交替從兩端折斷玻璃毛細(xì)管一小段，檢査有無血凝絲出現(xiàn)。一旦出現(xiàn)血凝絲，從另一端折斷進(jìn)行驗證，平均兩端出現(xiàn)血凝絲的時間，即為凝血時間。與生理鹽水組比較，計算縮短率。結(jié)果見表2。表2獨一味提取物對小鼠凝血時間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注傘pO.05，"pO.01,與生理鹽水組比較表2結(jié)果表明獨一味環(huán)烯醚萜苷類化合物8-0-乙?；綏d子苷甲酯、山梔子苷甲酯、PhloyosideII和8-去羥基-山梔子苷(0.1g/kg)均能顯著縮短小鼠凝血時間，縮短率分別為38.63°/。、23.90%、30.37°/。和25.17%。促凝血作用與酚磺乙胺相當(dāng)。獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物(0.4g/kg)對于小鼠凝血時間的縮短率分別為17.94%和23,00%。獨一味環(huán)烯醚砲苷類單體化合物的劑量只有獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物的1/4,比較而言，獨一味環(huán)烯醚萜苷類單體化合物的促凝血活性更高。2.6對醋酸引起小鼠扭體次數(shù)的影響取小鼠70只，雌雄各半，隨機(jī)分成7組生理鹽水組、撲熱息痛組(0.2g/kg)、8-0-乙酰基山梔子苷甲酯、山梔子苷甲酯、PhloyosideII和8-去羥基-山梔子苷組(0.1g/kg);獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物(0.2g/kg),每組10只。生理鹽水組尾靜脈給予生理鹽水，其余各組尾靜脈給予受試藥物(給藥體積0.2ml/20g),給藥后15min，腹腔注射0.6%醋酸0.21111/只，觀察20分鐘內(nèi)各組動物由醋酸引起的扭體次數(shù)。結(jié)果如表3:表3結(jié)果表明獨一味環(huán)烯醚萜苷類化合物.8-0-乙?；綏d子苷甲酯、山梔子苷甲酯、PhloyosideII和8-去羥基-山梔子苷(0.1g/kg)均能顯著減少腹腔注射醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)，減少率分別為80.86%、45.31%、68.98%和71.95%。獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物(0.2g/kg)對于腹腔注射醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)，減少率分別為26.40%和53.14%。獨一味環(huán)烯醚萜苷類單體化合物的劑量只有獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物的1/2，比較而言，獨一味環(huán)烯醚萜苷類單體化合物的鎮(zhèn)痛效果更佳。表3獨一味提取物對小鼠醋酸引起的扭體次數(shù)影響組另u劑量動物數(shù)(只)扭體次數(shù)(n)減少率(%)生理鹽水組—1030.3±5.4撲熱息痛組0.21014.5±7.6**52.158-0-乙酰基山梔子苷甲酯組0.1105.8±1.2**80.86山梔子苷甲酯組0.11016.57±5.8**45.31PhloyosideII組0.1109.4±3.1"68.988-去羥基-山梔子苷組0.1108.5士4.1"71.95獨一味水提取物0.21022.3±9.526.40獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物0.21014.2±5.4**53.14注*<0.05,**<0.01，與生理鹽水組比較2.7結(jié)論上述藥效學(xué)實驗結(jié)果表明，獨一味環(huán)烯醚萜苷類單體化合物能顯著縮短小鼠斷尾止血時間和毛細(xì)管凝血時間，其止血效果與酚磺乙胺相當(dāng)，較獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚萜苷提取物強(qiáng)；同時獨一味環(huán)烯醚蔽苷類單體化合物能顯著減少腹腔注射醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)，表現(xiàn)出良好的鎮(zhèn)痛作用，且顯著優(yōu)于獨一味水提取物和獨一味總環(huán)烯醚蔽苷提取物。具體實施方式實施例1:以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物——8-0-乙?；綏d子苷甲酯為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛粉針劑在粉狀的8-0-乙?；綏d子苷甲酯中加入其質(zhì)量0.2%的亞硫酸鈉作為穩(wěn)定劑，制成粉針劑，Go6Q輻照滅菌，潔凈條件下分包裝成0.25mg/支，臨用前加注射用水1ml溶解，靜注或肌注給藥，一次(U5mg，一日一次。實施例2:以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物——山梔子苷甲酯為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛粉針劑在粉狀的山梔子苷甲酯中加入其質(zhì)量0.2%的亞硫酸鈉作為穩(wěn)定劑，制成粉針劑，<306()輻照滅菌，潔凈條件下分包裝成0.25mg/支，臨用前加注射用水lml溶解，靜注或肌注給藥，一次0.25mg，一日一次。實施例3:以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物~~PhloyosideII為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛粉針劑在粉狀的PhloyosideII中加入其質(zhì)量0.2%的亞硫酸鈉作為穩(wěn)定劑，制成粉針劑，<306()輻照滅菌，潔凈條件下分包裝成0.25mg每支，臨用前加注射用水1ml溶解，靜注或肌注給藥，一次0.25mg，一日一次。實施例4:以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物——8-去羥基-山梔子苷為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛粉針劑在粉狀的8-去羥基-山梔子苷中加入其質(zhì)量0.2%的亞硫酸鈉作為穩(wěn)定劑，制成粉針劑，Go⑨輻照滅菌，潔凈條件下分包裝成0.25mg/支，臨用前加注射用水1ml溶解，靜注或肌注給藥，一次0.25mg，一日一次。實施例5、以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物——6-0-乙?；綏d子苷甲酯為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛外用散劑將粉狀的6-0-乙?；綏d子苷甲酯進(jìn)行超微粉碎，Gc^輻照滅菌，潔凈條件下分包裝成0.5mg每瓶(包)，密閉保存。外用撒于創(chuàng)面之上，適當(dāng)包扎。實施例6、以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物——山梔子苷甲酯為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛口服膠囊劑將粉狀的山梔子苷甲酯與微晶纖維素和淀粉以重量比0.01:(1.6~20:(0.5-1.4)混合均勻，過60~80目篩，按常規(guī)的片劑加工方式加入適量乙醇，將混合物制成軟材，過22目篩,制成顆粒，裝入膠囊，制成每粒含有上述有效藥用成分化合物為lmg的膠囊劑型口服制劑。用法與用量；口服，一次1一2粒，一日3次。實施例7、以獨一味藥物中提取的環(huán)烯醚萜苷類化合物——番木鱉苷為有效藥用成分，制備成止血、鎮(zhèn)痛口服膠囊劑將粉狀的番木鱉苷與微晶纖維素和淀粉以重量比0.01:(1.6-2.0):(0.5-1.4)混合均勻，過60~80目篩，按常規(guī)的片劑加工方式加入適量乙醇，將混合物制成軟材，過22目篩，制成顆粒，裝入膠囊，制成每粒含有上述有效藥用成分化合物為lmg的膠囊劑型口服制劑。用法與用量；口服，一次1一2粒，一日3次。權(quán)利要求1、環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血藥物中的應(yīng)用。2、如權(quán)利要求l所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述環(huán)烯醚萜苷類化合物的基本結(jié)構(gòu)如下結(jié)構(gòu)I:R5Ri為OH或糖配基；R2為H或CH3;R3、R4、R5、Re為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種;結(jié)構(gòu)n:Ri為OH或糖配基；R2、R3為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種;結(jié)構(gòu)III:Ri為OH或糖配基;R2、R3為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種；結(jié)構(gòu)IV:上述結(jié)構(gòu)化合物的任一光學(xué)或立體對映體。3、如權(quán)利要求2所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述糖配基為葡萄糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、芹菜糖、橙皮糖的單糖配基或所述糖任意組合成的雙糖或三糖配基。4、如權(quán)利要求2所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述環(huán)烯醚萜苷類化合物為8-0-乙?；綏d子苷甲酯、6-0-乙?；綏d子苷甲酯、玄參苦苷、山梔子苷甲酯、番木鱉苷、5-羥基-7-氯-山梔子苷甲酯或8-去羥基-山梔子苷。5、如權(quán)利要求2所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述環(huán)烯醚萜苷類化合物與醫(yī)藥學(xué)上常用的敷料結(jié)合，按照常規(guī)方法制成任何一種口服或非口服劑型。6、環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。7、如權(quán)利要求6所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述環(huán)烯醚萜苷類化合物的基本結(jié)構(gòu)如下結(jié)構(gòu)I:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>&為OH或糖配基；R2為H或CH3;R3、R4、R5、Re為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種;結(jié)構(gòu)n:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>Ri為OH或糖配基；R2、R3為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種；結(jié)構(gòu)m:COOCH3R2'R為OH或糖配基；R2、R3為H、OH、OCOCH3、Cl、Br中的一種；結(jié)構(gòu)IV:上述結(jié)構(gòu)化合物的任一光學(xué)或立體對映體。8、如權(quán)利要求7所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述糖配基為葡萄糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖、芹菜糖、橙皮糖的單糖配基或所述糖任意組合成的雙糖或三糖配基。9、如權(quán)利要求7所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述環(huán)烯醚萜苷類化合物為8-0-乙?；綏d子苷甲酯、6-0-乙?；綏d子苷甲酯、玄參苦苷、山梔子苷甲酯、番木鱉苷、5-羥基-7-氯-山梔子苷甲酯或8-去羥基-山梔子苷。10、如權(quán)利要求7所述環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述環(huán)烯醚萜苷類化合物與醫(yī)藥學(xué)上常用的敷料結(jié)合，按照常規(guī)方法制成任何一種口服或非口服劑型。.o一R一H一llll=:-S全文摘要本發(fā)明提供了環(huán)烯醚萜苷類化合物在制備止血、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。特別涉及環(huán)烯醚萜苷類化合物8-O-乙酰基山梔子苷甲酯、6-O-乙酰基山梔子苷甲酯、Penstemoside、山梔子苷甲酯、番木鱉苷、PhloyosideII或8-去羥基-山梔子苷等在制備止血、鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。通過對小鼠斷尾出血時間、毛細(xì)管凝血時間的影響以及對小鼠腹腔注射醋酸引起扭體次數(shù)的影響，體現(xiàn)出良好的止血、促凝血和鎮(zhèn)痛作用。所述環(huán)烯醚萜苷類化合物與醫(yī)藥學(xué)上常用的敷料結(jié)合，按照常規(guī)方法制成任何一種口服或非口服劑型。文檔編號A61K31/352GK101402661SQ20081018129公開日2009年4月8日申請日期2008年11月15日優(yōu)先權(quán)日2008年11月15日發(fā)明者李茂星,賈正平申請人:賈正平