專利名稱：保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物(以下也簡稱為“抗病毒組合物”)。詳細地說，涉及如下的抗病毒組合物，其是含有溶存二氧化氯的藥劑，在保存期間中二氧化氯的藥理活性沒有變動，而且即使因長期保存而使溶存二氧化氯一點一點作為二氧化氯氣體散逸，二氧化氯的濃度也不降低，可靠性高地長期保有抗病毒活性。

背景技術(shù)：
眾所周知，二氧化氯氣體是強效的氧化劑，因此已知利用其氧化作用進行滅菌，或者使惡臭成分分解，被用于殺菌劑·除臭劑等中。所述的二氧化氯氣體以水容積的20倍量溶解于水中，形成褐色的水溶液。從其操作性的觀點出發(fā)，希望以水溶液的形態(tài)使用。
二氧化氯水溶液與空氣接觸時會急劇產(chǎn)生二氧化氯氣體。因此，提出了如下方案，即，通過使二氧化氯氣體溶解于過氧化碳酸鈉水溶液中，形成以亞氯酸鈉為主要成分的保持在堿性(pH9)的水溶液、所謂的穩(wěn)定化二氧化氯水溶液，由此在維持穩(wěn)定性的同時使二氧化氯氣體持續(xù)地產(chǎn)生(參照專利文獻1)。
然而，由于在將穩(wěn)定化二氧化氯水溶液保持在堿性的狀態(tài)下，使殺菌·消臭等作用呈現(xiàn)的游離二氧化氯氣體的產(chǎn)生量極少，因此藥理活性低，難以達成足夠的殺菌·消臭等效果。
于是，為了將穩(wěn)定化二氧化氯水溶液的藥理活性提高，在即將使用前添加酸，將其pH調(diào)整到7以下，從而使二氧化氯氣體產(chǎn)生。
然而，在即將使用前添加酸的方法中，為了提高該穩(wěn)定化二氧化氯水溶液的藥理活性，需要花費工夫、用于此目的的器具或設(shè)備等，因此存在導致經(jīng)濟上不利的問題。此外，二氧化氯氣體在添加酸后急劇地產(chǎn)生，因此不僅無法期待穩(wěn)定化二氧化氯水溶液的藥理活性的持續(xù)性，而且該藥理活性并不恒定，有時也有達到極高水平的情況。因此，對動物、特別是對人的影響、安全性令人擔心。
為了解決這些問題，提出了如下方案，即，將在亞氯酸鹽中加有檸檬酸等有機酸而成的物質(zhì)混合到溶存二氧化氯液體制劑中，由此，使二氧化氯濃度長期、大體恒定地維持(參照專利文獻2)。在該方法中，由于二氧化氯氣體不會急劇地產(chǎn)生，因此可以將二氧化氯濃度長期保持恒定，使所需的藥理活性持續(xù)。而且即使是溶存二氧化氯一點一點作為二氧化氯氣體持續(xù)放出的情況，也能夠?qū)⒍趸葷舛缺３衷诖篌w恒定的范圍內(nèi)。
專利文獻1特開昭61-181532號公報 專利文獻2專利第3110724號公報

發(fā)明內(nèi)容
為了探尋正是因為如上所述地改善保存穩(wěn)定性、能夠控制濃度，因此對人體也能夠安全使用的二氧化氯液體制劑的新臨床用途·應(yīng)用，本發(fā)明人進行了精心研究，結(jié)果驚奇地發(fā)現(xiàn)該二氧化氯液體制劑對皮膚粘膜感染病毒等寬范圍的病毒具有滅活效果，并且發(fā)現(xiàn)即使是長期保存(例如在容器中保存1年)后的液體制劑也持續(xù)維持優(yōu)異的效力(病毒滅活力)，于是完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明提供一種使用了保存穩(wěn)定性優(yōu)異的二氧化氯液體制劑的廣譜抗病毒藥劑組合物。
為了達成上述目的的本發(fā)明的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物的第一特征構(gòu)成為，含有純二氧化氯液體制劑，所述純二氧化氯液體制劑作為構(gòu)成成分含有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及pH調(diào)整劑。
本發(fā)明的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物的第二特征構(gòu)成在于，上述亞氯酸鹽是亞氯酸鈉，上述pH調(diào)整劑是具有緩沖性的無機酸或其鹽。
本發(fā)明的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物的第三特征構(gòu)成在于，上述亞氯酸鹽是亞氯酸鈉，上述pH調(diào)整劑是磷酸或其鹽。
本發(fā)明的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物的第四特征構(gòu)成在于，上述亞氯酸鹽是亞氯酸鈉，上述pH調(diào)整劑是磷酸二氫鈉、或者是磷酸二氫鈉與磷酸一氫鈉的混合物。
本發(fā)明的抗病毒組合物對寬范圍的病毒具有滅活效果，而且在含有二氧化氯的同時保存穩(wěn)定性優(yōu)異，因此即使在長期保存后其病毒滅活效果仍持續(xù)。



[圖1]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的流感病毒滅活效果的曲線圖的圖； [圖2]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的諾如病毒(norovirus)(代替貓杯狀病毒)滅活效果的曲線圖的圖； [圖3]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的柯薩奇病毒(coxsackievirus)B5滅活效果的曲線圖((a)將致敏時間設(shè)為1分鐘的情況、(b)將濃度設(shè)為10ppm的情況)的圖； [圖4]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的愛滋病毒滅活效果的曲線圖的圖； [圖5]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的B型肝炎病毒滅活效果的曲線圖的圖； [圖6]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的犬細小病毒滅活效果的曲線圖的圖； [圖7]是給出表示關(guān)于本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物的輪狀病毒(rotavirus)滅活效果的曲線圖的圖。

具體實施例方式 以下，說明本發(fā)明的一個實施例，但本發(fā)明并不受其限定。
本發(fā)明的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物含有在構(gòu)成成分中具有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及pH調(diào)整劑的純二氧化氯液體制劑。
(作為對象的病毒) 作為能夠利用本發(fā)明的抗病毒組合物進行滅活的病毒，可以廣泛地舉出例如流感病毒(A型、B型、C型)、禽流感病毒、諾如病毒(貓杯狀病毒)、人乳頭瘤病毒(作為尖銳濕疣的病原體的人乳頭種病毒、HPV)、柯薩奇病毒(手足口病、無菌性髓膜炎、夏季感冒、熱性疾病、麻痹或氣道性疾病的病原體)、愛滋病毒(HIV)、B型肝炎病毒、犬細小病毒、輪狀病毒、HHV-1(單純皰疹病毒1型(HSV-1))、HHV-2(單純皰疹病毒2型(HSV-2))、HHV-3(水痘·帶狀皰疹病毒(VZV))、HHV-5(巨細胞病毒(CMV))、眼科領(lǐng)域的病毒(咽結(jié)膜熱(泳池熱)、流行性角結(jié)膜炎(紅眼病)腺病毒、急性出血性結(jié)膜炎腸病毒)等。
(亞氯酸鹽) 作為能夠在本發(fā)明中使用的亞氯酸鹽，可以舉出例如亞氯酸堿金屬鹽、亞氯酸堿土類金屬鹽。作為亞氯酸堿金屬鹽，可以舉出例如亞氯酸鈉、亞氯酸鉀、亞氯酸鋰。作為亞氯酸堿土類金屬鹽，可以舉出亞氯酸鈣、亞氯酸鎂、亞氯酸鋇。特別是不僅從獲得容易的理由出發(fā)，而且從二氧化氯藥理活性的持續(xù)性的觀點出發(fā)，優(yōu)選亞氯酸鈉、亞氯酸鉀，最優(yōu)選亞氯酸鈉。
(pH調(diào)整劑) 作為能夠在本發(fā)明中使用的pH調(diào)整劑，可以舉出有機酸或其鹽、無機酸或其鹽。作為有機酸或其鹽，可以舉出甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、丙酮酸、檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、葡糖酸、乙醇酸、富馬酸、丙二酸、馬來酸、草酸、琥珀酸、丙烯酸、巴豆酸、草酸、戊二酸及它們的鹽。
作為無機酸，可以舉出磷酸、硼酸、偏磷酸、焦磷酸、氨基磺酸等。作為無機酸的鹽，可以舉出例如磷酸二氫鈉、磷酸二氫鈉與磷酸一氫鈉的混合物等。
特別是從由于保存穩(wěn)定性優(yōu)異、因此長期保存后的抗病毒滅活力也優(yōu)異的觀點出發(fā)，作為無機酸，優(yōu)選使用磷酸或其鹽，進一步優(yōu)選使用磷酸二氫鈉。
要說明的是，pH調(diào)整劑可以單獨使用1種，也可以將2種以上并用。優(yōu)選使用10％溶液的pH達到4.5～6.5的酸，進一步優(yōu)選使用達到5.5～6.0的酸。
(二氧化氯液體制劑的制備例) 純二氧化氯液體制劑例如如下地制造。即，(a)將亞氯酸鹽溶解于水中制備2000～180000ppm的亞氯酸鹽水溶液，(b)將二氧化氯氣體在水中鼓泡來進行溶解，由此制備100～2900ppm的二氧化氯水溶液，接著，(c)將亞氯酸鹽溶解于水中制備2000～180000ppm的亞氯酸鹽水溶液后，向該溶液每1000ml中溶解pH調(diào)整劑0.5～100g，制備含有pH調(diào)整劑的亞氯酸鹽水溶液。
接著，將上述(a)的亞氯酸水溶液5.0～990ml、優(yōu)選50～300ml，上述(b)的二氧化氯水溶液5.0～990ml、優(yōu)選50～800ml及上述(c)的含有pH調(diào)整劑的亞氯酸水溶液5.0～990ml、優(yōu)選50～400ml混合，在室溫下充分攪拌，制成純二氧化氯液體制劑。
要說明的是，本說明書中的“純二氧化氯”是指二氧化氯作為二氧化氯氣體而存在的意思。純二氧化氯液體制劑最終的pH優(yōu)選為4.5～6.5。超出該范圍外時保存穩(wěn)定性降低，在保存中藥理活性會發(fā)生變動，例如2年后這樣的長期保存后藥理活性有可能會變?nèi)?。在本發(fā)明中，純二氧化氯液體制劑進一步優(yōu)選的pH范圍是5.5～6.0。
[其他實施方式1] 在上述的實施方式中，不使用pH調(diào)整劑時，可以使用顯示酸性的表面活性劑。
此時，保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物含有在構(gòu)成成分中具有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及顯示酸性的表面活性劑的純二氧化氯液體制劑。
此時能夠使用的亞氯酸鹽與上述實施方式同樣，但從二氧化氯藥理活性的持續(xù)性的觀點出發(fā)，優(yōu)選亞氯酸鈉、亞氯酸鉀，最優(yōu)選亞氯酸鈉。
表面活性劑優(yōu)選使純二氧化氯液體制劑的pH為4.5～6.5，進一步優(yōu)選為5.5～6.0。
作為顯示酸性的表面活性劑，沒有特別限定，可以舉出例如磷酸酯鹽系表面活性劑(聚氧乙烯磷酸酯、烷基磷酸酯鹽等)、磺酸鹽系表面活性劑(月桂基磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉等烷基或烷基苯磺酸鹽、異丙基萘磺酸鈉等烷基萘磺酸鹽、烷基二苯基醚磺酸鹽等)、硫酸酯鹽系表面活性劑(烷基或烷基苯硫酸鹽、氧化乙烯烷基苯基醚硫酸鹽、聚氧乙烯烷基苯基醚硫酸鹽等)、羧酸鹽系表面活性劑(烷基磺基琥珀酸鹽等)。
此外，還可以使用市售的由蔗糖脂肪酸酯、檸檬酸鈉、丙二醇及乙醇形成的混合表面活性劑[シヨクセンSE(三菱化學食品社制)]。
在上述表面活性劑中，從二氧化氯藥理活性的持續(xù)性的觀點出發(fā)，優(yōu)選由蔗糖脂肪酸酯、檸檬酸鈉、丙二醇及乙醇形成的混合表面活性劑。
[其他實施方式2] 在上述的實施方式中，含有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及pH調(diào)整劑的純二氧化氯液體制劑可以與高吸水性樹脂混合而制成凝膠狀組合物。
能夠在這種情況下使用的亞氯酸鹽與上述實施方式同樣，但從二氧化氯藥理活性的持續(xù)性的觀點出發(fā)，優(yōu)選亞氯酸鈉、亞氯酸鉀，最優(yōu)選亞氯酸鈉。pH調(diào)整劑也與上述實施方式同樣，優(yōu)選磷酸二氫鈉、磷酸二氫鈉與磷酸一氫鈉的混合物。
作為高吸水性樹脂，可以舉出淀粉系吸水性樹脂(淀粉-丙烯腈接枝共聚物、淀粉-丙烯酸接枝共聚物、淀粉-苯乙烯磺酸接枝共聚物、淀粉-乙烯基磺酸接枝共聚物等接枝化淀粉系高吸水性樹脂等)、纖維素系吸水性樹脂(纖維素-丙烯腈接枝共聚物、纖維素-苯乙烯磺酸接枝共聚物、交聯(lián)羧甲基纖維素等纖維素系高吸水性樹脂、將紙或布進行磷酸酯化而成的高吸水性樹脂、將布進行羧甲基化而成的高吸水性樹脂等)、以及合成聚合物系吸水性樹脂(交聯(lián)聚乙烯醇等聚乙烯醇系高吸水性樹脂、交聯(lián)聚丙烯酸鹽、聚丙烯腈系聚合物皂化物、聚乙二醇二(甲基)丙烯酸酯交聯(lián)物等丙烯酸系高吸水性樹脂、交聯(lián)聚氧化乙烯系高吸水性樹脂等)。
作為市售的高吸水性樹脂，有例如淀粉/聚丙烯酸系樹脂[Aqualic(日本觸媒社制、粉末)、Sanwet(三洋化成社制、粉末)]、交聯(lián)聚丙烯酸系樹脂[Arasorb(荒川化學社制、粉末)、Wonder Gel(花王社制、粉末)、AQUA KEEP(住友精化社制、粉末)、DIAWET(三菱油化社制、粉末)]、異丁烯/馬來酸系樹脂[KI凝膠(KURARAY社制、粉末)]、以及聚乙烯醇/聚丙烯酸鹽系樹脂[SUMIKA GEL(住友化學社制、粉末)]等，它們的使用也不會妨礙本發(fā)明。
與高吸水性樹脂混合而制成凝膠狀組合物時，例如，可以如下制備，即，將如上所述地制備的純二氧化氯液體制劑50～99重量％添加到高吸收性樹脂(粉末)1.0～50重量％中，在室溫下將它們充分攪拌而制造。這樣的“凝膠狀組合物”例如可以填充到至少一方具有開口部的容器(特開昭61-40803號公報)中供于一般用途，但也可以填充到如下容器中供于一般用途，該容器是由以合成纖維為構(gòu)成纖維的紙或無紡布形成的容器，且該容器的邊緣利用合成纖維的熱熔合或者合成樹脂粘合劑進行密封。上述合成纖維例如是聚丙烯纖維、聚酯纖維、聚酰胺纖維等以往公知的熱塑性合成纖維。由以這種合成纖維為構(gòu)成纖維的紙或無紡布形成的容器，可以防止因“凝膠狀組合物”的附著而導致的堵塞，并且可以使來自“凝膠狀組合物”的二氧化氯持續(xù)地氣化。
[其他實施方式3] 在上述的實施方式中，不使用pH調(diào)整劑時，可以使用顯示酸性的高吸水性樹脂，使該樹脂中含有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽來形成凝膠狀組合物。
能夠在這種情況下使用的亞氯酸鹽與上述實施方式同樣，但從二氧化氯藥理活性的持續(xù)性的觀點出發(fā)，優(yōu)選亞氯酸鈉、亞氯酸鉀，最優(yōu)選亞氯酸鈉。
高吸水性樹脂優(yōu)選使純二氧化氯液體制劑的pH為4.5～6.5，進一步優(yōu)選為5.5～6.0。
作為這種顯示酸性的高吸水性樹脂，使用市售的部分鈉鹽交聯(lián)聚丙烯酸系樹脂[Aqualic(日本觸媒社制)]，但并不限于此。
[其他實施方式4] 在上述的實施方式中，可以將含有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及pH調(diào)整劑的純二氧化氯液體制劑與發(fā)泡劑混合，制成發(fā)泡性組合物。
能夠在這種情況下使用的亞氯酸鹽與上述實施方式同樣，但從二氧化氯藥理活性的持續(xù)性的觀點出發(fā)，優(yōu)選亞氯酸鈉、亞氯酸鉀，最優(yōu)選亞氯酸鈉。pH調(diào)整劑也與上述實施方式同樣，優(yōu)選磷酸二氫鈉、磷酸二氫鈉與磷酸一氫鈉的混合物。
上述發(fā)泡劑由表面活性劑和發(fā)泡穩(wěn)定劑構(gòu)成，或者由表面活性劑、發(fā)泡穩(wěn)定劑及氣溶膠噴射劑構(gòu)成。
上述表面活性劑可以舉出例如(1)選自聚氧乙烯烷基醚羧酸等羧酸鹽、烷基苯磺酸鹽、烷基萘磺酸鹽等磺酸鹽、高級醇硫酸酯等硫酸酯鹽、聚氧乙烯烷基醚磷酸鹽等磷酸酯鹽中的至少1種陰離子系表面活性劑、(2)脂肪酸季銨鹽等陽離子系表面活性劑、(3)羧基甜菜堿型兩性表面活性劑、(4)聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯甘油脂肪酸酯聚乙二醇脂肪酸酯、脂肪酸烷醇酰胺等非離子系表面活性劑、(5)氟系表面活性劑、或者(6)皂苷等，但并限于這些。
上述發(fā)泡穩(wěn)定劑可以舉出例如(7)在上述陰離子系表面活性劑中添加了單或二乙醇胺而得的物質(zhì)、(8)在上述非離子系表面活性劑中添加了長鏈醇或烷基亞砜而得的物質(zhì)、或者(9)液體石蠟等，但并不限于這些。
上述氣溶膠噴射劑可以舉出例如液化天然氣(LPG)、液化丁烷、二甲基醚等低毒性的高壓氣體等，但并不限于這些。
使含有發(fā)泡劑而制成發(fā)泡性組合物時，例如可以如下制造，在密閉容器內(nèi)，在如上所述地制備的純二氧化氯液體制劑1.0～20重量％中添加發(fā)泡劑5.0～20重量％和表面活性劑60～95重量％，在室溫下將它們充分攪拌來制造。這樣的“發(fā)泡性組合物”封入到例如觸發(fā)式泡形成容器、泵式泡形成容器等而供給。
[實施例] 實施例1(藥劑A的制備) 如下所述地制備二氧化氯液體制劑。即，在二氧化氯氣體2000ppm溶存水250ml中加入水680ml和亞氯酸鈉25％溶液80ml后進行攪拌，接著加入使得該溶液的pH達到5.5～6.0的量的磷酸二氫鈉后進行攪拌，得到含有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鈉及磷酸二氫鈉的二氧化氯液體制劑1000ml。
實施例2(藥劑B的制備) 除了使用作為有機酸的檸檬酸代替磷酸二氫鈉(具有緩沖性的無機酸鹽)以外，與實施例1同樣地制備比較對照用的二氧化氯液體制劑。
抗病毒試驗(保存8個月后的抗病毒滅活試驗) 供于抗病毒試驗的二氧化氯液體制劑(藥劑A、藥劑B)制備成各濃度后，使用在合成樹脂制的容器中放置8個月后的制劑。即，將在實施例1和實施例2中得到的二氧化氯液體制劑裝入到具有直徑為2cm的開口部的容器中，在關(guān)閉螺旋蓋的狀態(tài)下在室溫放置8個月。接著，研究與該液體制劑相關(guān)的抗病毒活性效果。作為比較對照用，使用次氯酸鈉(藥劑C)、穩(wěn)定化二氧化氯(亞氯酸鈉)(藥劑D)、以及聚維酮碘(藥劑E)。應(yīng)說明的是，這些藥劑C～E不保存8個月，購入后直接供于試驗。將這些使用的藥劑歸納于表1。
[表1] (1)抗病毒試驗(流感病毒) 在各藥劑(參照表1)中加入流感病毒(A/New Caledonia(H1N1))株，經(jīng)過各致敏時間后，用硫代硫酸鈉溶液中和藥劑，制作10倍稀釋列。將該10倍稀釋列液體接種到用微孔板(96孔)、在37℃、5％CO2的條件下培養(yǎng)3天的宿主細胞(MDCK細胞(狗腎上皮來源細胞株))，培養(yǎng)5天。以病毒所致的細胞病變效應(yīng)(CPE)為指標，算出TCID50(50％組織培養(yǎng)感染劑量)(log10)，評價藥劑的抗病毒活性效果。病毒對照使用用蒸餾水進行稀釋而得的物質(zhì)來代替藥劑。將結(jié)果示于圖1。
由圖1可知，本發(fā)明的抗病毒組合物即使在保存8個月后仍對流感病毒顯示出顯著的滅活效果，濃度為1ppm、致敏時間為15秒的效果是次氯酸鈉的1000倍以上。
還發(fā)現(xiàn)，雖然本發(fā)明的抗病毒組合物以pH調(diào)整劑作為構(gòu)成成分，但是該pH調(diào)整劑使用無機酸(磷酸二氫鈉)而不是使用有機酸，因此病毒滅活效果飛躍性地(顯著)提高。
(2)抗病毒試驗(諾如病毒) 在作為諾如病毒代替病毒的貓杯狀病毒FCV-F4株中加入各藥劑，使用宿主細胞的CRFK細胞(貓腎來源細胞株)，采用與抗病毒試驗(1)同樣的技術(shù)進行試驗，以病毒導致的細胞病變效應(yīng)(CPE)作為指標，算出TCID50(log10)，評價藥劑的抗病毒活性效果。將結(jié)果示于圖2。
由圖2可知，本發(fā)明的抗病毒組合物即使在保存8個月后仍對作為諾如病毒代替病毒的貓杯狀病毒顯示出顯著的滅活效果，濃度為10ppm、致敏時間為15秒的抗貓杯狀病毒活性是聚維酮碘的100萬倍。該抗貓杯狀病毒活性的差在3分鐘后也沒有變化。
(3)抗病毒試驗(柯薩奇病毒B5) 在柯薩奇病毒B5(手足口病)中加入各藥劑，使用宿主細胞的LLCMK2細胞，采用與抗病毒試驗(1)同樣的技術(shù)進行試驗，以病毒導致的細胞病變效應(yīng)(CPE)作為指標，算出TCID50(log10)，評價藥劑的抗病毒活性效果。將結(jié)果示于圖3(a)，(b)。
由圖3(a)、(b)可知，本發(fā)明的抗病毒組合物對柯薩奇病毒B5(手足口病)顯示出顯著的滅活效果，在濃度為10ppm、致敏時間為1分鐘的條件下，具有次氯酸鈉的32倍的效果，在2分鐘的條件下具有次氯酸鈉的100倍的效果。
(4)抗病毒試驗(HIV) 在HIV(LAV株)中加入各藥劑，使用宿主細胞的MT-4細胞，依照以往公知的病毒感染試驗，采用與抗病毒試驗(1)同樣的技術(shù)進行試驗，以病毒導致的細胞病變效應(yīng)(CPE)作為指標，算出TCID50(log10)，評價藥劑的抗病毒活性效果。將結(jié)果示于圖4。
由圖4可知，本發(fā)明的抗病毒組合物對HIV(LAV株)顯示出顯著的滅活效果，在濃度為10ppm、致敏時間為1分鐘的條件下，具有次氯酸鈉的100倍以上(檢測界限以下)的效果。
(5)抗病毒試驗(人B型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)) 在人B型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)中加入各藥劑，進行1、2、3、4天致敏后，用硫代硫酸鈉溶液中和藥劑，使用化學發(fā)光免疫測定法“Architect·HBsAg(DAINABOT公司制)”，測定HBsAg滴定度。評價藥劑的抗HBsAg活性。將結(jié)果示于圖5。
由圖5可知，本發(fā)明的抗病毒組合物對HBsAg顯示出顯著的抗HBsAg活性。對于在未處理組中為54IU/mL的抗原效價，在濃度100ppm、致敏時間1天的條件下為1IU/mL，2天為0.2IU/mL，3天為0.1IU/mL，4天為檢測界限以下，看到抗HBsAg活性；在同一濃度(100ppm)的次氯酸鈉中，1天為50IU/mL、2天為51IU/mL、3天為51IU/mL、4天為49IU/mL，未見抗HBsAg活性。
(6)抗病毒試驗(犬細小病毒<CPV(Y-1)>) 在犬細小病毒<CPV(Y-1)>中加入各藥劑，使用宿主細胞的CRFK細胞(貓腎來源細胞株)，采用與抗病毒試驗(1)同樣的技術(shù)進行試驗，培養(yǎng)7天。對該培養(yǎng)液，使用豬紅血球凝集反應(yīng)法，將看到紅血球凝集的試驗液視作CPV感染，求出TCID50。將結(jié)果示于圖6(由于細胞病變效應(yīng)(CPE)的觀察困難，因此采用本試驗法)。
本發(fā)明的抗病毒組合物對CPV的抗病毒活性在10ppm、120秒、180秒可看到99.99％以上的降低，在100ppm時在15秒以內(nèi)就可看到99.99％以上的感染效價的降低，均在檢測界限以下。
次氯酸鈉溶液在10ppm、180秒時100TCID50的感染效價殘存，但在100ppm、120秒時看到99.99％以上的感染效價降低，達到檢測界限以下。在穩(wěn)定化二氧化氯溶液中，在100ppm、180秒也看不到感染效價降低。
本發(fā)明的抗病毒組合物顯示出相對于次氯酸鈉溶液為約10倍的抗病毒活性。
(7)抗病毒試驗(輪狀病毒) 以最終濃度為1ppm的方式制備藥劑，將其混合到人輪狀病毒(Wa株)中。15～180秒后，接種到MA＝104細胞，依照常規(guī)方法進行培養(yǎng)。接著，使用熒光抗體法，計數(shù)看到病毒增殖的細胞數(shù)、即FITC熒光陽性的細胞數(shù)，求出平均值(N＝4)，將其乘以稀釋倍數(shù)來計算。病毒增殖抑制效果的計算如下進行，以對于各個藥劑濃度及處理時間的、藥劑處理病毒的增殖細胞數(shù)相對于無處理病毒增殖細胞數(shù)的比率(％)來表示。將結(jié)果示于圖7。
本發(fā)明的抗病毒組合物通過以10.0ppm和1.0ppm對輪狀病毒進行15秒處理，病毒增殖分別降低到未處理病毒的0.3％以下和2.1％。此外，通過進行0.1ppm、30秒及0.01ppm、60秒的處理，分別降低到8.4％和16.4％以下。
(8)抗病毒試驗(人乳頭瘤病毒) 對確診感染了尖銳濕疣(Condyloma acuminatun)(原因病毒是人乳頭瘤病毒)的男性的患部，涂布適量的本發(fā)明的抗病毒組合物(濃度100ppm)1天3次。涂布1天后，患部的白色硬結(jié)變成紅色硬結(jié)，2天后縮小，3天后變成瘡痂樣，消失了。
(考察) 如上所述，可知本發(fā)明的抗病毒組合物即使在保存8個月后仍對寬范圍的病毒具有滅活效果。而且，由于以低濃度就有效，因此可以將對人體、特別是對皮膚粘膜的不良影響(刺激等)抑制到最小限度，還可以在臨床上很好地用于皮膚粘膜病毒感染癥的治療藥等。另外，由上述試驗結(jié)果還知道，作為在制備本發(fā)明的抗病毒組合物時使用的pH調(diào)整劑，使用無機酸或其鹽比使用有機酸的藥劑，病毒滅活效果高。
進而，如下所示，進行補充說明。即，本發(fā)明的抗病毒組合物能夠?qū)⑷艽娑趸葷舛乳L期保持恒定，即使二氧化氯從上述抗病毒組合物中一點一點作為氣體持續(xù)放出(或者即使積極地持續(xù)放出二氧化氯氣體)，也可以獲得能夠?qū)⒃摽共《窘M合物的二氧化氯濃度保持在大體恒定的范圍內(nèi)這樣的優(yōu)異保存穩(wěn)定性。這里所說的“一點一點作為氣體持續(xù)放出”的意思是指，例如在輸送中或者保存中，即使閉蓋、二氧化氯也作為氣體自然散逸的情況，“積極地持續(xù)放出二氧化氯氣體”的意思是指，為了期待抗病毒作用而向氣相中放出氣體的情況。
作為具有緩沖性的無機酸或其鹽，使用磷酸或其鹽時，與使用其他的無機酸、有機酸的情況相比，發(fā)揮保存穩(wěn)定性進一步提高(保存穩(wěn)定期間進一步得到延長)，且在保存中液性(pH)的經(jīng)時波動(變動)也變小之類的作用效果。
此外，在有限的無機酸或其鹽中，選擇磷酸二氫鈉、或者磷酸二氫鈉與磷酸氫二鈉的混合物，通過將其與亞氯酸鈉組合使用，極其難以引起亞氯酸鈉變成二氧化氯的反應(yīng)的過度進行，因此僅是自然分解、或者從容器的蓋部分或容器的壁面的擴散而損失的二氧化氯被源于亞氯酸鈉的亞氯酸離子補充，氣體平衡狀態(tài)得到保持。這樣，亞氯酸鈉不必要的消耗得到抑制，亞氯酸鈉被有效地消費，因此保存穩(wěn)定性進一步提高(延長)，且保存中的二氧化氯濃度的經(jīng)時波動(變動)進一步變小(不僅濃度的降低得到抑制，而且濃度的上升也得到抑制)，因此是合適的。此外，該抗病毒組合物中的、由亞氯酸鈉長期補給氯原子的機制在涂布、噴霧或者散布了該抗病毒組合物的空間或?qū)ο笪锷弦脖话l(fā)現(xiàn)。這也會給使用者帶來涂布、噴霧或者散布抗病毒組合物后的抗病毒效果長期持續(xù)的優(yōu)異的持續(xù)效果。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性 本發(fā)明的廣譜抗病毒藥劑組合物可以用于對各種病毒進行滅活。
權(quán)利要求
1、一種保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物，其特征在于，含有純二氧化氯液體制劑，所述純二氧化氯液體制劑作為構(gòu)成成分含有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及pH調(diào)整劑。
2、如權(quán)利要求1所述的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物，其特征在于，所述亞氯酸鹽是亞氯酸鈉，所述pH調(diào)整劑是具有緩沖性的無機酸或其鹽。
3、如權(quán)利要求1所述的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物，其特征在于，所述亞氯酸鹽是亞氯酸鈉，所述pH調(diào)整劑是磷酸或其鹽。
4、如權(quán)利要求1所述的保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物，其特征在于，所述亞氯酸鹽是亞氯酸鈉，所述pH調(diào)整劑是磷酸二氫鈉、或者是磷酸二氫鈉與磷酸一氫鈉的混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種保存穩(wěn)定性優(yōu)異的廣譜抗病毒藥劑組合物，其特征在于，含有在構(gòu)成成分中具有溶存二氧化氯氣體、亞氯酸鹽及pH調(diào)整劑的純二氧化氯液體制劑。
文檔編號A61K33/20GK101610778SQ200880004959
公開日2009年12月23日 申請日期2008年2月15日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月16日
發(fā)明者福田俊昭, 安部幸治, 柴田高 申請人:大幸藥品株式會社