專利名稱：：美白劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及皮膚的美白效果優(yōu)異、對褐斑、雀斑等的預(yù)防及治療有效、且苦味少、穩(wěn)定性及安全性優(yōu)異的美白劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及含有該美白劑的美白用化妝品、美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料或美白用醫(yī)藥品。
背景技術(shù)：
：皮膚的顏色主要由黑素、血紅蛋白、類胡蘿卜素等著色成分在表皮及真皮內(nèi)的種類、量決定。而且這些成分不是固定不變的，而是受各種外在.內(nèi)在因素所控制。黑素色素在皮膚內(nèi)主要由黑素細(xì)胞合成，因紫外線刺激、激素分泌、周圍的角化細(xì)胞所釋放的刺激因子而被活化。黑素色素的主要作用在于緩和由紫外線造成的皮膚病。但是，因?yàn)楹谒睾铣蛇^于亢進(jìn)、進(jìn)而因其代謝異常引起局部的色素沉積即所謂的褐斑及雀斑等，成為美容上的大問題。作為改善色素在皮膚上沉積的作用機(jī)理，可考慮為抑制黑素細(xì)胞內(nèi)的黑素生成、使已形成的黑素還原、促進(jìn)表皮內(nèi)黑素的排出、對于黑素細(xì)胞的選擇毒性。其中，作為美白作用物質(zhì)，廣泛使用具有還原作用的L一抗壞血酸及其衍生物，但未得到充分的美白效果。此外，黑素合成酶中的作為酪氨酸酶抑制物質(zhì)的氫醌、熊果苷、曲酸、甘草提取物或胎盤提取物等被作為美白劑使用，但這些物質(zhì)在穩(wěn)定性、安全性等上存在問題，所以希望開發(fā)出新型的美白劑。另外，已在專利文獻(xiàn)1中報(bào)道了乳蛋白水解物具有酪氨酸酶活性抑制作用，但在該專利中，因水解物的水溶液為白色混濁，所以在制品中實(shí)際應(yīng)用時有局限性，具有不能在需要透明性的制品中使用的缺點(diǎn)。還因?yàn)榫哂须奶赜械目辔叮蕴貏e是在制造口服攝取的食品、伺料、醫(yī)藥品等時，具有風(fēng)味方面的限制。另一方面，為防止牛乳、乳制品的食物過敏，將乳蛋白水解物用于各種制品中。特別是考慮到牛乳的乳清蛋白與母乳的蛋白不同，會成為變應(yīng)原，且己知為防止這一點(diǎn)而將乳清蛋白用酶水解，已報(bào)到的有專利文獻(xiàn)2、專利文獻(xiàn)3等中的制造方法，這些方法中，例如在制造乳清蛋白水解物時，在酶處理后對酶進(jìn)行加熱滅活，進(jìn)而再進(jìn)行酶處理的方法，存在許多問題點(diǎn)1)對加熱滅活后生成的乳清蛋白的沉淀物、凝集物很難進(jìn)行酶處理，不會使抗原性降低及合格率提高；2)在酶處理之前預(yù)先將乳清蛋白加熱處理(9(TC、IO分鐘以上)時合格率降低等。為解決上述問題點(diǎn)，發(fā)明者已開發(fā)出如下制造方法可在特定條件下，加入耐熱蛋白水解酶使乳清蛋白熱變性，同時進(jìn)行酶解，得到乳清蛋白水解物，并已作為專利成立(專利文獻(xiàn)4)。但是，雖已確認(rèn)了用該制造方法得到的乳清蛋白水解物自身發(fā)揮低變應(yīng)原性的效果，但完全未考慮到作為美白劑的功能。此外，還發(fā)現(xiàn)通過超濾(UF)膜、微濾(MF)膜處理，進(jìn)一步提高美白作用。專利文獻(xiàn)1日本特開平4一69315號公報(bào)專利文獻(xiàn)2日本特開平2—2319號公報(bào)專利文獻(xiàn)3日本特開平2—138991號公報(bào)專利文獻(xiàn)4日本特開平4—112753號公報(bào)
發(fā)明內(nèi)容因此，本發(fā)明的課題為提供如下美白劑，其含有安全性優(yōu)異、水溶液顯示高度透明性、苦味少且沒有風(fēng)味方面的限制、在制品中使用時沒有限制、對皮膚具有美白作用的乳清蛋白水解物。而且，本發(fā)明的課題還為提供具有美白功能、安全性優(yōu)異的美白用化妝品，安全性優(yōu)異、沒有風(fēng)味方面的問題的口服攝取的美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料或美白用醫(yī)藥品。為解決上述課題，發(fā)明者對如上所述的可在特定的條件下，加入耐熱蛋白水解酶使乳清蛋白熱變性的同時進(jìn)行酶解而得到的乳清蛋白水解物的物性進(jìn)行銳意研究時，發(fā)現(xiàn)了本發(fā)明專利的權(quán)利要求書中所述的乳清蛋白水解物具有滿足上述課題的美白效果，該乳清蛋白水解物的分子量分布為10kDa以下且主峰為200Da3kDa、APL(平均肽鏈長)為28、相對于全部組成成分的游離氨基酸含量為20%以下、抗原性為P—乳球蛋白抗原性的1/10,000以下。因此，本發(fā)明是由以下所構(gòu)成的發(fā)明(1)美白劑，其特征在于，含有作為有效成分的具有以下特征的乳清蛋白水解物(A)分子量分布為10kDa以下且主峰為200Da3kDa(B)APL(平均肽鏈長)為28(C)游離氨基酸含量為20%以下(D)抗原性為卩一乳球蛋白抗原性的1/10,000以下。(2)根據(jù)(1)中所述的美白劑，其特征在于，作為有效成分含有的乳清蛋白水解物是在pH610、507(TC下，使用耐熱蛋白水解酶使乳清蛋白熱變性同時進(jìn)行酶解，再將其加熱使酶失活后得到的產(chǎn)物。(3)根據(jù)(1)中所述的美白劑，其特征在于，作為有效成分含有的乳清蛋白水解物是在pH610、2055'C下，使用蛋白水解酶將乳清蛋白酶解，使其升溫至5070'C，在pH610、5070'C下使用耐熱蛋白水解酶使未水解的乳清蛋白熱變性同時進(jìn)行酶解，再將其加熱使酶失活后得到的產(chǎn)物。(4)美白用化妝品、美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料或美白用醫(yī)藥品，其特征在于，含有(1)(3)中任一項(xiàng)所述的美白劑。本發(fā)明的美白劑的酪氨酸酶活性抑制作用、抑制黑素生成效果及色素沉積的預(yù)防.改善效果顯著，該美白劑的皮膚美白效果優(yōu)異，對褐斑、雀斑等的預(yù)防及治療有效。作為此美白劑的有效成分而使用的乳清蛋白水解物如后所述，可確認(rèn)抗原性與卩一乳球蛋白相比為1/10,000以下、與乳清蛋白相比為1/10,000以下，所以極為安全。且因其水溶液透明、苦味度為2左右，所以作為美白劑使用時無限制,特別是可在要求透明性的美白劑中大量配合。而且，可提供含有以上述美白劑為有效成分的、具有美白功能、安全性優(yōu)異的美白用化妝品，安全性優(yōu)異、沒有風(fēng)味方面的問題的口服攝取的美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料、美白用醫(yī)藥品。而且還因?yàn)楸景l(fā)明的美白劑以乳清蛋白為原料，所以可簡便、經(jīng)濟(jì)、容易地制造。具體實(shí)施例方式本發(fā)明的美白劑中含有的乳清蛋白水解物是通過使乳清蛋白在pH610、507(TC下，在其中加入耐熱蛋白水解酶使其熱變性同時進(jìn)行酶解，再將其加熱使酶失活從而具有美白作用的乳清蛋白水解物，而且，在進(jìn)行上述酶解之前，使乳清蛋白在pH610、2055'C下使用蛋白水解酶進(jìn)行酶解，不需將其冷卻、立刻在上述條件下進(jìn)行酶解時可更加提高收率。且將如上所述制備的乳清蛋白水解物進(jìn)一步通過選自截留分子量為lkDa20kDa、優(yōu)選為210kDa的超濾(UF)膜及/或截留分子量為100Da500Da、優(yōu)選為150Da300Da的微濾(MF)膜的方法進(jìn)行濃縮，可更加提高美白效果。還可進(jìn)一步減輕苦味、提高透明性。本發(fā)明中的乳清蛋白是指牛乳、水牛、山羊、人等的哺乳動物的乳清，其凝集物、粉末或精制蛋白，使其進(jìn)行酶反應(yīng)時以水溶液的狀態(tài)使用。將該溶液調(diào)整到pH610，因通常情況下乳清蛋白的pH在此范圍內(nèi)，所以不需進(jìn)行特殊的pH調(diào)整，但需要時，使用鹽酸、檸檬酸及乳酸等的酸溶液或氫氧化鈉、氫氧化鈣及磷酸鈉等的堿溶液，調(diào)整pH到610。加熱在507(TC下進(jìn)行，從收率方面來看，與在此溫度下添加耐熱蛋白水解酶相比，更優(yōu)選在加熱前添加進(jìn)行酶解。一般的Protease(蛋白酶)的最適溫度為4(TC以下，但耐熱蛋白水解酶為45'C以上，作為耐熱蛋白水解酶，只要是以往作為具有此種最適溫度的耐熱蛋白水解酶而已知的酶，均可無特別限制地使用。作為此種耐熱蛋白水解酶，可例舉木瓜蛋白酶、蛋白酶S(商品名)、Proleather(商品名)、Thermoase(商品名)、Alcarase(商品名)、蛋白A(商品名)等。所期望的耐熱蛋白水解酶是在8(TC下加熱30分鐘后的殘留活性為約10%或其以上的酶。此外，與單獨(dú)使用相比，通過并用多種酶更有效。優(yōu)選反應(yīng)進(jìn)行30分鐘10小時左右。最后，加熱反應(yīng)液而使酶失活。酶的失活可通過將反應(yīng)液在IO(TC以上加熱10秒以上來進(jìn)行。而后，將反應(yīng)液離心分離以回收上清，干燥上清制成粉末制品。且離心分離時產(chǎn)生的沉淀物與上清相比，低變應(yīng)原化的程度小，所以優(yōu)選將其除去，當(dāng)然即使將反應(yīng)液直接干燥后使用也沒影響。通過此方法得到的乳清蛋白水解物用InhibitionELISA法《日本兒童過敏學(xué)會志、1,36(1987)》測定，可確認(rèn)抗原性與p—乳球蛋白相比為1/10,000以下、與乳清蛋白相比為1/10,000以下，所以極為安全。此外，因其水溶液透明且苦味度為2左右，所以在制品中使用時沒有限制。且透明性及苦味的評價通過以下方法評價。透明性評價法制備1%乳清蛋白水解物溶液，測定650nm處的吸光度?？辔对u價法制備10%乳清蛋白水解物溶液，添加作為苦味物質(zhì)的鹽酸奎寧，評價苦味。如表l所示，只要苦味分?jǐn)?shù)為2分以下，即可作為飲食品等利用。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>本發(fā)明的乳清蛋白水解物可直接作為美白劑使用，但也可根據(jù)通常方法，制成粉末劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、飲料劑等的制劑來使用。此外，對于進(jìn)一步通過超濾(UF)膜、微濾(MF)膜處理得到的乳清蛋白水解物，也可直接作為美白劑使用，也可直接干燥后使用。另外，也可根據(jù)通常方法，制成制劑后使用。而且，將這些制成制劑后，也可將其配合在營養(yǎng)劑、酸奶、乳飲料、威化餅干(wafers)等的飲食品、營養(yǎng)組合物、飼料及醫(yī)藥品中。本發(fā)明的美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料及美白用醫(yī)藥品除只含有該乳清蛋白水解物以外，還可含有穩(wěn)定劑、糖類、脂質(zhì)、香味劑、維生素、礦物質(zhì)、類黃酮、多酚等其他的飲食品、飼料及醫(yī)藥中通常含有的原材料等。此外，也可將此種美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用詞料或美白用醫(yī)藥品作為原材料，配合其他飲食品等中通常含有的原材料等來進(jìn)行制備。美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料及美白用醫(yī)藥品中乳清蛋白水解物的配合量無特別限制，但為使成人每人每天口服攝取乳清蛋白水解物5mg以上，根據(jù)飲食品、飼料及醫(yī)藥的形態(tài)而確定，但相對于總質(zhì)量，一般含有0.00110(重量/重量)，優(yōu)選含有0.15(重量/重量)。作為美白用化妝品，可使用乳液、面霜、化妝水、面膜等通常的化妝品形態(tài)。這些化妝品可通過通常方法制造，乳清蛋白水解物可在其制造過程中適當(dāng)配合。此外，也可將此種化妝品作為原材料來制造化妝品?；瘖y品中乳清蛋白水解物的配合量無特別限制，但相對于總質(zhì)量，一般含有0.00130(重量/重量)，優(yōu)選含有0.110(重量/重量)。本發(fā)明的美白劑可在上述有效成分中添加適當(dāng)?shù)闹鷦┮匀我庑螒B(tài)制成制劑，可制成可口服或非口服給藥的美白組合物。在進(jìn)行制劑化時，也可使用通常使用的填充劑、增量劑、粘合劑、崩解劑、表面活性劑、潤滑劑等的稀釋劑或賦形劑。此外，作為醫(yī)藥制劑，可選擇各種形態(tài)，例如可例舉膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、液劑、懸浮劑、乳劑、栓劑、注射劑、軟膏劑等。作為賦形劑，例如可添加蔗糖、乳糖、淀粉、結(jié)晶纖維素、甘露醇、輕質(zhì)無水硅酸、鋁酸鎂、合成硅酸鋁、硅酸鋁鎂、碳酸鈣、碳酸氫鈉、磷酸氫鈣、羧甲基纖維素鈣等中的1種或?qū)?種以上組合添加。實(shí)施例以下舉出實(shí)施例、比較例及試驗(yàn)例詳細(xì)說明本發(fā)明，但這些只是單純的例舉，本發(fā)明不受這些的任何限制。實(shí)施例1在乳清蛋白10%水溶液1L中，加入木瓜蛋白酶50U/g.乳清蛋白及Proleather(Proleather:日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)帝U)150U/g.乳清蛋白，調(diào)整到pH8，55"C下進(jìn)行6小時乳清蛋白變性，同時進(jìn)行酶解。將反應(yīng)液在IO(TC下加熱15秒以上使酶失活，進(jìn)行離心分離并回收上清，將其干燥后得到乳清蛋白水解物(HW)。所得到的乳清蛋白水解物(HW)的分子量分布為10kDa以下、主峰為1.3kDa、APL為7.2、相對于全部的組成成分的游離氨基酸含量為18.9%。通過InhibitionELISA法測定相對于p—乳球蛋白的抗原性降低時為1/10,000以下，收率(離心分離酶反應(yīng)液，相對于進(jìn)料量干燥重量的上清干燥重量的比率(°/。》為80.3%，苦味度為2。如此得到的乳清蛋白水解物可直接作為本發(fā)明的美白劑利用。實(shí)施例2在乳清蛋白10%水溶液1L中，加入木瓜蛋白酶50U/g.乳清蛋白及Proleather(Proleather:日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)制)150U/g乳清蛋白，在pH8、5(TC下進(jìn)行3小時酶解。將其升溫至55°C,在此溫度下保持3小時，使蛋白變性的同時進(jìn)行蛋白的酶解，IO(TC下加熱15秒以上后使酶失活。將該反應(yīng)液進(jìn)行截留分子量10kDa的UF膜(STC公司制)及截留分子量300Da的MF膜(STC公司制)處理，回收濃縮液組分，將其干燥后得到乳清蛋白水解物(HW)。所得到的乳清蛋白水解物(HW)的分子量分布為10kDa以下、主峰為500Da、APL為3.0、相對于全部的組成成分的游離氨基酸含量為15.2%。通過InhibitionELISA法測定相對于卩一乳球蛋白的抗原性降低時為1/10,000以下，收率為65.4%，苦味度為2。如此得到的乳清蛋白水解物可直接作為本發(fā)明的美白劑利用。此外，制備日本特開平4一69315號公報(bào)中所報(bào)道的以下的乳蛋白水解物并作為比較試樣。將乳清蛋白120g溶解在純凈水1，800ml中，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)整pH到7.0。而后在6(TC下加熱10分鐘殺菌，保持在45'C添加AmanoA(日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)制)20g，反應(yīng)進(jìn)行2小時。8(TC下加熱10分鐘使酶失活，冷凍干燥，得到乳清蛋白水解物。所得到的乳清蛋白水解物的水解率為18%，收率為80.6%。將乳清蛋白120g溶解于純凈水1，800ml中，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)整pH到7.0。而后在6(TC下加熱10分鐘殺菌，保持在45'C添加AmanoA(日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)制)20g，反應(yīng)進(jìn)行8小時。8(TC下加熱10分鐘使酶失活，冷凍干燥，得到乳清蛋白水解物。所得到的乳清蛋白水解物的水解率為30%，收率為80.6%。將酪蛋白200g懸浮于純凈水2,000ml中，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)整pH到8.0且完全溶解。而后在80'C下加熱10分鐘殺菌，保持在5(TC添加胰酶F(日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)制)20g及AmanoA(日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)制)20g,反應(yīng)進(jìn)行10小時。8(TC下加熱IO分鐘使酶失活，冷凍干燥，得到酪蛋白水解物。所得到的酪蛋白水解物的水解率為38%，收率為77.8%。將酪蛋白200g懸浮于純凈水2，000ml中，用1M氫氧化鈉溶液調(diào)整pH到8.0并完全溶解。而后在80'C下加熱10分鐘殺菌，保持在4(TC添加胰酶F(日本天野酶制品株式會社(AmanoEnzymeInc.)制)15g，反應(yīng)進(jìn)行5小時。8(TC下加熱IO分鐘使酶失活，冷凍干燥，得到酪蛋白水解物。所得到的酪蛋白水解物的水解率為20%，收率為79.1%。(透明性試驗(yàn))制備實(shí)施例1、2及比較例14的各蛋白水解物的1%水溶液，測定650nm處的吸光度。其結(jié)果如表2所示。表2試樣吸光度(650nm)HW(實(shí)施例l)0扁HW(實(shí)施例2)0週(比較試樣)比較例l0遍比較例20,W8比較例3比較例4o.咖實(shí)施例1、2的乳清蛋白水解物(HW)，從吸光度低的結(jié)果可知其透明性高。另一方面，比較試樣與實(shí)施例1、2的乳清蛋白水解物相比，可知其吸光度高、透明性低。此外，進(jìn)行了膜處理的實(shí)施例2的乳清蛋白水ii解物(HW)的吸光度比實(shí)施例1的乳清蛋白水解物(HW)低、透明性優(yōu)異。(酪氨酸酶活性抑制作用)酪氨酸酶是由酪氨酸合成黑素的酶，在合成途徑中，將酪氨酸轉(zhuǎn)變成多巴，進(jìn)而將多巴轉(zhuǎn)變成多巴醌。使用酪氨酸酶(Sigma-Aldrich公司制，來自蘑菇)，分別加入實(shí)施例1、2中得到的乳清蛋白水解物(HW)及比較試樣(比較例14)，37"C下進(jìn)行15分鐘預(yù)處理。作為底物添加多巴(Sigma-Aldrich公司制)，進(jìn)而在37'C下反應(yīng)5分鐘后，測定476nm處的吸光度。以無添加的值為100%計(jì)算出抑制率。其結(jié)果如表3所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>在C02培養(yǎng)箱(5%C02、37°C)內(nèi)培養(yǎng)。將B16細(xì)胞制成細(xì)胞濃度3x105個/ml的懸浮液，將該懸浮液lml注入含有培養(yǎng)基9ml的100mm培養(yǎng)皿中。第二天替換為分別含有0.011%的實(shí)施例1、2中得到的乳清蛋白水解物(HW)、比較試樣(比較例14)的培養(yǎng)基，培養(yǎng)4天。培養(yǎng)結(jié)束后，刮取細(xì)胞，各組的細(xì)胞數(shù)總計(jì)為5><106個，進(jìn)行離心。添加lmol/LNaOH500ml溶解后，測定其溶解液405nm處的吸光度。將無添加組作為100%，計(jì)算各組的黑素生成抑制率，結(jié)果如表4所示。表4各組的黑素生成抑制率試樣濃度(質(zhì)量％〗抑制率(％)HW(實(shí)施例l)0.0119.4cu29,81,048.4HW(實(shí)施例2)0.0128.246.91』eo(比較試樣).比較例l0.0114.3cu1.0亂0比較例2o,饑汰CJo.iL0比較例30,01動0,1ii，$L0比較例40.010.1!』認(rèn)J14由表4可知，可看出在實(shí)施例1、2的乳清蛋白水解物(HW)中，在0.01%1.0%的濃度范圍內(nèi)，黑素生成抑制效果呈濃度依賴性。此外，在比較試樣中也同樣可看出抑制效果，但本發(fā)明的乳清蛋白水解物(HW)與比較試樣相比顯示出優(yōu)異的抑制效果。而且表明通過進(jìn)行膜處理，更加提高了抑制效果。(動物實(shí)驗(yàn))將體重約400g的A-l系雌豚鼠的背部去毛，背部照射紫外線(UVA(max.360nm)30.3kJ/m2、UVB(max.312nm)4.8kJ/m2),1次/天，進(jìn)行4天。而后，分成將生理鹽水按豚鼠每lkg體重給藥5ml的組(A組)、將實(shí)施例2的乳清蛋白水解物(HW)按豚鼠每lkg體重給藥2mg/5ml的組(B組)、將HW按豚鼠每lkg體重給藥5mg/5ml的組(C組)、將HW按豚鼠每lkg體重給藥10mg/5ml的組(D組)的4個試驗(yàn)組(每組10只)，分別每天1次用探頭(sonde)口服給藥，飼養(yǎng)4星期。在試樣給藥開始時和試樣給藥結(jié)束時，用MINOLTA公司制的色素計(jì)(CHROMAMETERCR-200)測定對豚鼠背部皮膚色素沉積的影響。以照射前的亮度為100%，由紫外線照射前的亮度和照射后的亮度的差計(jì)算出恢復(fù)率。其結(jié)果如表5所示。表5豚鼠亮度恢復(fù)率組HW給藥量(腿/kg)亮度恢復(fù)率(％)020.0B組2亂7C組&51.9D組1070.5由表5可知，BD組顯示出顯著的亮度改善效果。由該結(jié)果可看出本發(fā)明的乳清蛋白水解物(HW)有預(yù)防，改善色素沉積的效果。[試驗(yàn)例5](動物實(shí)驗(yàn))將體重約400g的A_i系雌豚鼠的背部去毛，背部照射紫外線(UVA(max.360nm)30.3kJ/m2、UVB(max.312nm)4.8kJ/m2)，1次/天，進(jìn)行4天。其后，l天2次、對被測部位連續(xù)涂抹試樣4星期。被測試樣溶解于將水、乙醇、丙二醇以2:2:l的比率混和后的溶液中，并涂抹此物質(zhì)。分為對照組(A組)、實(shí)施例2的乳清蛋白水解物(HW)0.01。/。(B組)、0.P/。(C組)、"/。(D組)的4個試驗(yàn)組(每組10只)。在試樣涂抹開始時和試樣涂抹結(jié)束時，分別用MINOLTA公司制的色差計(jì)(CHROMAMETERCR-200)測定對豚鼠背部皮膚色素沉積的影響。以照射前的亮度為100%,由紫外線照射前的亮度和照射后的亮度的差計(jì)算出恢復(fù)率。其結(jié)果如表6所示。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>從上述表6的結(jié)果可知，BD組顯示出顯著的亮度改善效果。從該結(jié)果可知，通過涂抹本發(fā)明的乳清蛋白水解物，也可看出預(yù)防，改善色素沉積的效果。含有作為有效成分的本發(fā)明中得到的具有(A)分子量分布在10kDa以下且主峰為200Da3kDa、(B)APL(平均肽鏈長)為28、(C)游離氨基酸含量為20%以下、(4)抗原性為P—乳球蛋白抗原性的1/10,000以下的成分組成的乳清蛋白水解物的美白劑，用InhibitionELISA法《日本兒童過敏學(xué)會志、1,36(1987)》測定，可確認(rèn)抗原性與卩一乳球蛋白相比為1/10,000以下，所以極為安全。此外，因其水溶液透明、苦味度也為2左右，所以在制品中使用時無限制。酪氨酸酶活性抑制作用、黑素生成抑制效果及預(yù)防，改善色素沉積的效果顯著。實(shí)施例3(美白用化妝品(面霜)的制備)用表7所示的配比混合原材料，制備本發(fā)明的美白用化妝品(面霜)。單硬脂酸甘油酯(自乳化型)10.0精制羊毛脂s.o液體石蠟5.0荷荷巴袖5.0對羥基苯甲酸0,3實(shí)施例l中得到的HW0.3香料適量滅菌離子交換水總量為IOO.O實(shí)施例4(美白用化妝品(化妝水)的制備)用表8所示的配比混合原材料，制備本發(fā)明的美白用化妝品(化妝水)。表8山梨糖醇3.0DL-吡咯垸酺羧酸鈉2.0羧甲基纖維素0.3對羥基苯甲酸0.1實(shí)施例2中得到的HW0.1香料適量滅菌離子交換水總量為IOO.O實(shí)施例5(美白用片劑的制備)用表9所示配比混合原材料后，用通常方法，按lg成型、壓片，制造本發(fā)明的美白用片劑。17表9含水結(jié)晶葡萄糖^""""(重量％)實(shí)施例1中得到的HW10.0礦物質(zhì)混合5,0蔗糖酯l力香料0.5且在此片劑lg中含有HW100mg。實(shí)施例6(美白用液狀營養(yǎng)組合物的制備)將實(shí)施例2中得到的HW50g溶解于4，950g的去離子水中，加熱到5(TC后，用TK均質(zhì)機(jī)(TKROBOMICS;特殊機(jī)化工業(yè)公司制)，以6，000rpm攪拌30分鐘混合后，得到HW含量為50g/5kg的HW溶液。在此HW溶液5.0kg中，配合酪蛋白5.0kg、大豆蛋白質(zhì)5.0kg、魚油l.Okg、紫蘇油3.0kg、糊精18.0kg、礦物質(zhì)混合物6.0kg、維生素混合物1.95kg、乳化劑2.0kg、穩(wěn)定劑4.0kg、香料0.05kg，填充到200ml的蒸煮袋中，用高溫蒸煮殺菌機(jī)(第1種壓力容器、TYPE:RCS-4CRTGN、日阪制作所制)進(jìn)行121'C、20分鐘殺菌，制造本發(fā)明的美白用液狀營養(yǎng)組合物50kg。且在此美白用液狀營養(yǎng)組合物中，每100g含有HW100mg。實(shí)施例7(美白用飲料的制備)將脫脂奶粉300g溶解在409g的去離子水中后，溶解實(shí)施例1中得到的HWlg，加熱到5(TC后，用高速分散機(jī)(ULTRA-TURRAXT-25;IKAJanpan公司制)，以9,500rpm攪拌30分鐘混合。添加麥芽糖醇lOOg、酸味料2g、還原水飴20g、香料2g、去離子水166g后，填充到100ml的玻璃瓶中，進(jìn)行9(TC、15分鐘殺菌后，封瓶，制備本發(fā)明的美白用飲料10瓶(內(nèi)含100ml)。且在該美白用飲料中，每100ml中含有HW100mg。實(shí)施例8(狗用美白飼料的制備)將實(shí)施例2中得到的HW200g溶解在99.8kg的去離子水中，加熱到50'C后，用TK均質(zhì)機(jī)(MARKII160型；特殊機(jī)化工業(yè)公司制)，以3,600rpm攪拌40分鐘混合后，得到HW含量2g/100g的HW溶液。在該HW溶液10kg中，配合大豆餅12kg、脫脂奶粉14kg、大豆油4kg、玉米油2kg、棕櫚油23.2kg、玉米淀粉14kg、小麥粉9kg、麥麩2kg、維生素混合物5kg、纖維素2.8kg、礦物質(zhì)混合物2kg，進(jìn)行12(TC、4分鐘殺菌，制造本發(fā)明的狗用美膚用飼料100kg。且在此狗用美白飼料中，每100g中含有HW20mg。權(quán)利要求1.美白劑，其特征在于，含有作為有效成分的具有以下特征的乳清蛋白水解物(A)分子量分布為10kDa以下且主峰為200Da～3kDa(B)APL(平均肽鏈長)為2～8(C)游離氨基酸含量為20％以下(D)抗原性為β-乳球蛋白抗原性的1/10,000以下。2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的美白劑，其特征在于，作為有效成分含有的乳清蛋白水解物是在pH610、507(TC下使用耐熱蛋白水解酶使乳清蛋白熱變性同時進(jìn)行酶解，再將其加熱使酶失活后得到的產(chǎn)物。3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的美白劑，其特征在于，作為有效成分含有的乳清蛋白水解物是在pH610、2055"C下使用蛋白水解酶將乳清蛋白酶解，使其升溫至5070'C，在pH610、507(TC下使用耐熱蛋白水解酶使未水解的乳清蛋白熱變性同時進(jìn)行酶解，再將其加熱使酶失活后得到的產(chǎn)物。4.美白用化妝品、美白用飲食品、美白用營養(yǎng)組合物、美白用飼料或美白用醫(yī)藥品，其特征在于，含有權(quán)利要求13中任一項(xiàng)所述的美白劑。全文摘要本發(fā)明提供含有作為有效成分的乳清蛋白水解物、且皮膚的美白效果優(yōu)異、對褐斑、雀斑等的預(yù)防及治療有效的美白劑及含有該美白劑的化妝品、飲食品、飼料、醫(yī)藥等的美白制品。具體為該乳清蛋白水解物具有如下特征分子量分布為10kDa以下、主峰為200Da～3kDa、APL(平均肽鏈長)為2～8、游離氨基酸含量為20％以下及抗原性為β-乳球蛋白抗原性的1/10,000以下。文檔編號A61K8/64GK101616657SQ20088000579公開日2009年12月30日申請日期2008年3月10日優(yōu)先權(quán)日2007年3月13日發(fā)明者上田典子,上野宏,加藤健,吉岡俊滿,春田裕子,渡邊達(dá)也申請人:雪印乳業(yè)株式會社