專利名稱：：糖基化乳及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及包含特定形式的經(jīng)鑒定的蛋白或其片段的乳基產(chǎn)品和飲料，以及這種乳基產(chǎn)品和飲料在促進(jìn)睡眠中的用途。定義本文所用術(shù)語"催眠劑"是具有引發(fā)睡眠作用的物質(zhì)。既定術(shù)語如"鎮(zhèn)靜劑"和"安眠劑"被用于表示相對更強(qiáng)類型的物質(zhì)，如藥物。"AGE"是高級糖基化終產(chǎn)物(AdvancedGlycationEnd-product)的縮寫。例如，多肽或蛋白糖基化中的第一步是形成希夫堿，即葡萄糖分子(或類似物)的醛基與肽鏈上的賴氨酸分子的氨基結(jié)合形成在葡萄糖的碳原子和賴氨酸的氮原子之間具有雙鍵的亞胺或希夫堿。"阿馬多爾(Amadori)產(chǎn)物"是本方案中形成AGE的第二階段，通過重排完成，其中鄰近碳氮雙鍵的羥基的氫原子轉(zhuǎn)移與氮結(jié)合，留下酮。最后一步(不可逆步驟)是阿馬多爾產(chǎn)物的氧化。糖基化更為普遍地定義為糖分子如葡萄糖或果糖與蛋白或脂質(zhì)分子結(jié)合且無酶促作用的結(jié)果。本說明書中是指發(fā)生在體外的外部糖基化。蛋白的糖基化趨于使其具有酶切抗性并明顯增加它們在體內(nèi)的半衰期。"美拉德反應(yīng)"或排序是指在氨基酸和還原性糖之間的化學(xué)反應(yīng)，通常涉及加熱，并導(dǎo)致一定程度上的非酶褐變以及風(fēng)味的形成，某些范圍的"美拉德產(chǎn)物"是一類AGE。"UHT"是超高溫處理(Ultra-HighTemperaturetreatment)的縮寫，一種通常在約14(TC僅幾秒的巴氏殺菌，已知用于延長密封容器中由常規(guī)巴氏殺菌獲得的乳的保存質(zhì)解決的技術(shù)問題人們有時或在某些情況下常需要催眠劑，但人們對于攝入任何相對強(qiáng)安眠藥片都比較謹(jǐn)慎，特別是在常規(guī)基礎(chǔ)上可形成依賴性，或飲酒其副作用可撤消任何的瞬即效應(yīng)。然而，2005年在新西蘭，僅4百萬人中就開出了551426份安眠藥片處方。顯然需要一種"天然的"催眠劑或至少一種可選方案。
背景技術(shù)：
：幾個世紀(jì)之前就已知飲用約100-250ml量的熱牛奶可引發(fā)睡意或睡眠。就2008年4月在〃Google"中搜索(睡眠"熱牛奶")獲得的結(jié)果來看許多網(wǎng)站簡單地否定了該作用。更多網(wǎng)站接受"無稽之談"。某些試圖以多種方式對其進(jìn)行解釋，包括心理學(xué)，色氨酸的作用等等。然而這種作用的生理學(xué)或藥理學(xué)機(jī)制，即使有，也還未直接建立。什么(如果有的話)可能是牛奶中的活性成分呢？對于人，提出L-色氨酸作為催眠成分，但為此作用所需要的量(約lg)將需要飲用約2.5升的牛奶。對于某些人3-5mg的褪黑素可具有催眠作用，但為此作用所需要的量將需要飲用約25升。鈣可以是鎮(zhèn)靜劑，但在片劑中觀察不到該作用。沒有證據(jù)證明乳糖具有催眠作用。本發(fā)明的理論基礎(chǔ)如下。應(yīng)注意的是該理論僅作為指導(dǎo)，在實踐中可發(fā)現(xiàn)本發(fā)明是有效的，盡管作為不是要描述的內(nèi)容的機(jī)制或有效原理之后表現(xiàn)出是正確的。GuesdonetalinP印tides(2006)vol27，pp1476-82報道的實驗顯示了飼喂牛a-SI酪蛋白的胰蛋白酶水解產(chǎn)物對大鼠有催眠作用。本發(fā)明人的理論假定(至少在開始)在以合理量如100-250ml熱牛奶消費時，在熱處理的Al牛乳中發(fā)現(xiàn)的酪蛋白糖基化體類型是有效的催眠物質(zhì)或變成有效的催眠物質(zhì)，然后被腸道酶水解成肽類，再以糖基化肽被消費者身體所吸收。尤其是，目前據(jù)信主要由糖基化肽P酪啡肽-7負(fù)責(zé)催眠活動，盡管其他糖基化肽或其他物質(zhì)直接或間接參與。而且，該理論提出糖基化能較未糖基化肽增強(qiáng)催眠作用，假設(shè)通過延遲活性肽從體內(nèi)排除，而糖基化不直接掩飾催眠作用。明顯地，該理論的一個試驗是進(jìn)行類似處理以比較Al型乳和A2型乳(在人腸道消化期間其不會被轉(zhuǎn)化成13酪啡肽-7)的效力。試驗顯示出其他糖基化肽參與了。在文獻(xiàn)〃Enzymaticdigestionandmassspectrometryinthestudyofadvancedglycationendproducts/peptides〃inJAmSocMassSpectrom.2004Apr;15(4):496-509，LapollaA，F(xiàn)edeleD，ReitanoR，AricoNC，SeragliaR，TraldiP，MarottaE，andTonaniR.ofDipartimentodiScienzeMedicheeChirurgiche，CattedradiMalattiedelMetabolismo，UniversitadegliStudidiPadova，Padova，Italy.中可得到糖基化賦予肽對肽酶的抗性(通常)的證據(jù)。該文獻(xiàn)報導(dǎo)了為鑒別源自糖基化HSA酶促消化的特定糖基化肽的目的，以胰蛋白酶和內(nèi)蛋白酶Lys-C的酶促消化對人血清白蛋白(HSA)和非酶促糖基化HSA所進(jìn)行的廣泛研究。這些肽可被認(rèn)為是高級糖基化終產(chǎn)物/肽的一級近似物。通過體內(nèi)糖基化蛋白的酶促消化制備這些對糖尿病和腎病受試者的全身水平很重要的化合物。它們與患者病理狀態(tài)相關(guān)并被調(diào)用以負(fù)責(zé)組織修飾。通過蛋白組學(xué)技術(shù)MALDI/MS((基質(zhì)輔助激光解吸附/電離/飛行時間)質(zhì)譜))和LC/ESI/MSn(液相色譜電噴射電離質(zhì)譜聯(lián)用)分析由兩種酶獲得的消化混合物，并發(fā)現(xiàn)了明顯的區(qū)別。首先，糖基化HSA的消化產(chǎn)物通常不如從非糖基化HSA所觀察的豐富，說明前者對酶促消化具有更低的傾向性。雙重帶電離子的MS/MS實驗、與蛋白數(shù)據(jù)庫的比對以及用于鑒別最易被糖基化的賴氨酸NH2基的分子模型鑒別了由兩種酶促消化獲得的消化混合物中的某些糖基化肽。殘基233K、276K、378K、545K和525K似乎是優(yōu)先的糖基化位點，與通過分子模型計算的部分溶劑可及表面值相符。通過Medline(PUBMED)鏈接可從上述文獻(xiàn)(PMED:15047055)中獲得相關(guān)文章作為弓l用文獻(xiàn)，如〃Advancedglycationendproducts/p印tides:aninvivoinvestigation.〃[AnnNYAcadSci.2005]PMID:16037247(相同作者)，禾口〃Theroleofmassspectrometryinthestudyofnon_enzymaticproteinglycationindiabetes:Anupdate"[MassSpectromRev.2006]PMTD:16625652。發(fā)明人不知道有利用肽尤其是嗎啡的糖基化以增強(qiáng)其對受體的作用或延遲其降解的現(xiàn)有文獻(xiàn)。另一方面，LongobardoL，etal;BioorgMedChemLett.2000J皿5;10(11):1185-8檢測牛13酪啡肽-7和含有13同型苯丙氨酸取代3位上的苯丙氨酸的13酪啡肽5兩種類似物對它們的mu阿片類受體的親和力。與天然肽相比，對修飾的P-CM-7修飾可將mu受體親和力增強(qiáng)5倍，對修飾的P-CM-5可增強(qiáng)2倍。KreilGetal，LifeSci.1983;33Suppl1:137-40認(rèn)為參與P酪啡肽降解的內(nèi)源酶與二肽基肽酶IV相同或相似。他們發(fā)現(xiàn)2位上的脯氨酸殘基被D-丙氨酸所取代的13酪啡肽(P-CM)類似物似乎可完全抵抗血漿中的酶攻擊。因此修飾的肽變得持久。發(fā)明目的本發(fā)明的目的是提供一種安全且方便的催眠劑，或至少為公眾提供一種可用的選擇。
發(fā)明內(nèi)容在第一大方面，本發(fā)明提供了人和其他哺乳動物消費的催眠劑組合物，該組合物含有糖基化乳，該糖基化乳優(yōu)選是牛源的；所述乳的乳蛋白事先經(jīng)過糖基化，該糖基化至少部分地是制備工藝的加工結(jié)果。優(yōu)選地，產(chǎn)品包含至少一種糖基化催眠肽或其前體；該肽被吸收時的催眠作用與非糖基化形式的催眠肽或其前體相比被充分地延長。(發(fā)明人以"充分地延長"表示源于某些類型的經(jīng)熱處理并因此而被相對廣泛地糖基化的乳的修飾(糖基化)13酪啡肽-7在循環(huán)中具有數(shù)小時而不是數(shù)分鐘的半衰期。)在另一方面，本發(fā)明提供了制備的可食用的催眠飲料或食物產(chǎn)品，其中，該飲料或產(chǎn)品包含至少一種糖基化蛋白，該至少一種糖基化蛋白在被人攝入后且被腸道酶水解后能釋放至少一種可被吸收到人循環(huán)中的糖基化的催眠肽。優(yōu)選地，所述催眠組合物實質(zhì)包含糖基化的13酪蛋白Al。優(yōu)選地，成人口服100-250ml劑量的乳基催眠組合物即有效。優(yōu)選地，組合物在溫?zé)岷箫嬘?。?yōu)選地，所選的糖基化蛋白包含糖基化的牛A1/A113酪蛋白。優(yōu)選地，所述糖基化的催眠肽是糖基化的牛13酪啡肽-7。在相關(guān)方面，所述產(chǎn)品含有取自包括至少一頭奶牛的奶牛群的乳，事先對所述至少一頭奶牛進(jìn)行選擇以使該至少一頭奶?；旧鲜茿l|3_酪蛋白基因純合的；所述乳在制備期間被加工使得組合物內(nèi)的蛋白至少部分地糖基化，以便在被哺乳動物或人消費時，釋放有效量的糖基化催眠肽并吸收至循環(huán)中。可選地，如本節(jié)之前所描述的產(chǎn)品衍生自取自包括至少一頭奶牛的奶牛群的乳，事先對所述至少一頭奶牛進(jìn)行選擇以使該至少一頭奶牛基本上是Al|3_酪蛋白基因純合的；所述乳衍生物含有糖基化的牛Al/Al|3_酪蛋白或其部分且能夠在消化后釋放有效量的糖基化催眠肽至循環(huán)中。在第二大方面，本發(fā)明提供了一種制備本節(jié)之前所述的催眠產(chǎn)品的方法，其中，該方法包括(a)獲取Al型牛乳，(b)加入促糖基化的碳水化合物物質(zhì)，(c)在高溫滅菌處理期間或之后進(jìn)行糖基化，和(d)包裝產(chǎn)品。優(yōu)選地，所述方法進(jìn)一步包括步驟(e)檢測產(chǎn)品以測定糖基化的量和(f)根據(jù)所預(yù)期的催眠作用標(biāo)識產(chǎn)品?？蛇x地，檢測后的產(chǎn)品包含已知量的糖基化P-酪蛋白。在另一方面，通過在室溫或更高溫度下將由"UHT"形式的巴氏殺菌制備得乳長期儲存約1-6個月，可簡單地促進(jìn)糖基化。在相關(guān)方面，所述方法包括以下步驟檢測產(chǎn)品以確定實時的糖基化程度，然后按糖基化檢測結(jié)果所示，用等價產(chǎn)品(equivalentproduct)來稀釋產(chǎn)品以達(dá)到統(tǒng)一的催眠作用，所述等價產(chǎn)品以相同方式使用A2/A2乳制得，由此除了根據(jù)檢測結(jié)果改變產(chǎn)品中的AIP酪蛋白比例之外，每個產(chǎn)品包裝具有統(tǒng)一量的糖基化且在產(chǎn)品所有成分的方面是統(tǒng)一的。優(yōu)選地，促糖基化的物質(zhì)選自能誘導(dǎo)糖基化反應(yīng)的物質(zhì)；碳水化合物包括果糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖和抗壞血酸的范圍。在第三大方面，本發(fā)明提供了基于如本節(jié)之前所述的糖基化A1/A1乳的藥物組合物，其中，肽13酪啡肽-7的糖基化形式是從糖基化Al/Al乳中提取的并與適宜的防腐劑、賦形劑等一起包裝作為適宜口服、口腔內(nèi)給藥或腸胃外給藥的肽；產(chǎn)品提供了具有催眠作用的糖基化肽。優(yōu)選的從糖基化13_酪蛋白Al中提取催眠糖基化肽的方法包括選自以下范圍的酶促水解外肽酶促水解，內(nèi)肽酶促水解(包括胃蛋白酶促水解，胰蛋白酶促水解，和胰凝乳蛋白酶促水解)，或其組合。在第四大方面，本發(fā)明提供了制備特定的與在哺乳動物(包括人)消化道中從Al|3_酪蛋白類中釋放的肽類似的促進(jìn)睡眠或引發(fā)睡眠的肽的明確方向。具體實施例方式通過實施例的方式具體地闡述本發(fā)明，但其不以任何方式限制發(fā)明的范圍或程度。整篇說明書中，除非原文另有要求，詞語"含有"和變體應(yīng)理解成表示包含所列整數(shù)或步驟或整數(shù)或步驟的組但不排除任何其他的整數(shù)或步驟或整數(shù)或步驟的組。實施例1本發(fā)明尤其涉及一種基于特定種類的乳的催眠劑，其含有糖基化終產(chǎn)物，該糖基化終產(chǎn)物攝入后優(yōu)選地通過內(nèi)源腸道酶可轉(zhuǎn)化成催眠糖基化肽。還涉及含有從特定種類的乳中獲取的糖基化肽的相對長效的催眠劑。至今已知，為此目的有效種類的牛乳僅是來自于A1基因純合(homozygous)的母牛，所述A1基因用于控制乳蛋白P-酪蛋白序列。這種母牛廣布于大多數(shù)乳畜群中；例如荷斯坦(Holstein)或弗里斯蘭(Friesian)品種主要產(chǎn)A1/A1型乳而澤西(Jersey)品種主要產(chǎn)A1/A2或A2/A2。(Al和A2基因的其他等位基因是已知的，但認(rèn)為其或者不重要或者在牛中很少出現(xiàn))。根據(jù)本專利，Al和A2型乳的混合物可有效地使用，但催眠作用被稀釋并比較難以預(yù)測。有公知的基于DNA(基因型)的顯型技術(shù)用于根據(jù)與A2基因和其他的區(qū)別來選擇Al基因純合的母牛，當(dāng)對這種母牛使用A/A1公牛時會忠實地繁殖。牛乳含有約3.4-4.5%蛋白，其中約80%是酪蛋白。約31%的酪蛋白(每100ml約lg)是P_酪蛋白且主要是Al或A2變體。在腸道消化期間Al型13-酪蛋白水解但A2型P-酪蛋白不水解之后，每摩爾A1(或B)型酪蛋白產(chǎn)生約l摩爾的肽P-酪啡肽-7，在67位具有組氨酸殘基。該肽可作為人催眠劑。P-酪啡肽-7被歸類為"阿片類(opioid)",已知對大鼠、雞和蟑螂具有鎮(zhèn)定和抗焦慮作用。繼續(xù)考慮在背景部分討論的可能的催眠成分，一杯乳中存在足夠的13_酪啡肽_7前體以對人消費者具有催眠作用。正常P-酪啡肽-7在循環(huán)中的半衰期大約是幾分鐘。被身體轉(zhuǎn)化成其他化學(xué)物質(zhì)(大概是由于血漿、肝或腎的酶切)。假定|3-酪啡肽-7是活性成分，發(fā)明人構(gòu)想出售Al酪蛋白含量高的各種乳從而實現(xiàn)以"天然方式"引發(fā)睡意或睡眠。來自精選A1-A1母牛(一頭或多頭，如一群或一組母牛)的乳可提供兩倍于普通零售乳品的P-酪啡肽-7，其中大部分保留酪蛋白是A2-酪蛋白，以及少量的其他形式酪蛋白。而且，存在P-酪啡肽-7的半衰期短的問題。發(fā)明人注意到來自于經(jīng)熱處理從而相對廣泛地被糖基化的特定類型乳的修飾(糖基化)P-酪啡肽-7具有數(shù)小時而不是數(shù)分鐘的半衰期。因此，如下所述制造和銷售一定量的糖基化的且其他方面是天然存在的|3-酪啡肽_7前體作為有效催眠乳基飲料比為相同目的而合成肽鏈上具有取代的13-酪啡肽-7更容易。本發(fā)明提供了主要具有A1型P-酪蛋白的精選乳，將所述A1型P-酪蛋白進(jìn)行處理以產(chǎn)生有效量的糖基化P-酪啡肽-7。通常，具有增加AGE含量或提高產(chǎn)品中糖基化P-酪蛋白比例的作用的對乳的處理包括1、在巴氏殺菌期間或優(yōu)選在之前，在UHT形式的巴氏殺菌期間和/或之后，長時間對乳進(jìn)行加熱，(或提高改良的巴氏殺菌或UHT加工)，2、將滅菌乳在室溫或更高溫度下長時間保存，3、銷售之前或之后，與儲存結(jié)合添加抗壞血酸，或果糖、半乳糖或葡萄糖(在其他糖中)。據(jù)說果糖(也稱之為左旋糖)和半乳糖作為糖基化劑的活性大約是葡萄糖的10倍，但葡萄糖是常見可供的。乳中可用的糖基化增強(qiáng)物質(zhì)的范圍包括抗壞血酸。4、可在加熱/巴氏殺菌步驟之前添加(3)中指定的成分。5、檢測制得的產(chǎn)品以確定其中糖基化物質(zhì)的含量。FAST指數(shù)是檢測早期的糖基化產(chǎn)品的實例檢測方法，對羧甲基賴氨酸的分析是一種適宜于AGE產(chǎn)品的檢測。制得的產(chǎn)品應(yīng)優(yōu)選包含至少統(tǒng)一量的催眠成分，盡管已知在儲存期間該量趨于上升，計算貨架期時應(yīng)考慮這種影響。在過去偶然也會發(fā)生乳或乳產(chǎn)品的致糖基化處理。根據(jù)FAST指數(shù)方法檢測時，簡單在4攝氏度儲存的巴氏殺菌全脂乳(非定義的A1/A2狀態(tài))表現(xiàn)出AGE相關(guān)化合物的上升24小時，10;48小時，10.7;72小時，17.4;1周，22.6。此外，在按照推薦條件簡單儲存一段時間的UHT乳中注意到了美拉德反應(yīng)的特征褐變。因此發(fā)明人構(gòu)想，為了制備有效的催眠或睡眠藥水，為鼓勵睡眠的目的而銷售通過在特定碳水化合物的存在下加熱并經(jīng)過"UHT"工藝而糖基化的來自于A1-A1母牛的乳，因為糖基化工藝使得隨后被吸收的P_酪啡肽_7對在人體內(nèi)被轉(zhuǎn)化成失活形式具有相對抗性。進(jìn)一步儲藏對效力的影響通常是增加糖基化的量。商業(yè)生產(chǎn)的物質(zhì)的效力可以按檢測所確定的其中含有的糖基化蛋白或糖基化P_酪蛋白的量表示。該乳可以類似于UHT乳那樣在單劑量硬紙盒中銷售，如果紙盒適合于在微波爐中或浸在熱水中(仍密封)加熱則它可以手持，以便乳飲料可以在消費前被溫?zé)?。溫?zé)岬囊嫣幙赡芗兇馐切睦砩系娜缧纬扇ニX的儀式的一部分。當(dāng)然已知糖基化食品可能有害，特別是對糖尿病，盡管糖基化物質(zhì)的總量很小。因此老人或糖尿病人或正接受透析的人應(yīng)謹(jǐn)慎使用本發(fā)明。優(yōu)選催眠產(chǎn)品以聲明的推薦劑量銷售并警示消費本產(chǎn)品后一段時間內(nèi)不能進(jìn)行危險活動如駕駛或操作機(jī)械。實施例2提供了一種非限制的示例性制備方法如下1.將取自主要或優(yōu)選都具有A1/A1|3_酪蛋白顯型的母牛的牛乳傾倒至加工罐中。2.加入1-2克/升(0.1-0.2%)的檸檬酸鈉，作為穩(wěn)定劑。3.攪拌直至檸檬酸鹽溶解。4.加入1克/升抗壞血酸(0.1%)作為糖基化促進(jìn)劑，5.攪拌并加熱約20分鐘以達(dá)到45攝氏度6.在45攝氏度保持30分鐘7.采用標(biāo)準(zhǔn)工業(yè)均質(zhì)技術(shù)進(jìn)行均質(zhì)8.在141。C進(jìn)行UHT處理4秒9.以UHT加工液無菌罐裝包裝并將其密封。10.推薦消費者在飲用前溫?zé)?。發(fā)明人預(yù)期許多糖基化反應(yīng)都發(fā)生在上述工藝期間和隨后，尤其當(dāng)組合物還是熱的時候，盡管可以在室溫儲存期間或甚至在冷藏期間繼續(xù)糖基化。制備工藝的質(zhì)量保證/質(zhì)量控制的一方面是通過監(jiān)測PH，表1中顯示了一組可接受的pH結(jié)果。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>其他形式的質(zhì)量控制包括測量制備時期的糖基化程度。只要所有的乳獲自都具有A1/A1表型的母牛，就可能參與制得產(chǎn)品的催眠作用。在運輸至市場期間參與進(jìn)一步的糖基化可能是合適的。本發(fā)明制備的"睡眠乳"與其他形式的乳的比較如下表2，其顯示出由本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的幾個檢測所得的結(jié)果，(a)糠氨酸(furosine)mg/ml(早期糖基化產(chǎn)物的測量)；(b)FAST指數(shù)(后期糖基化/阿馬多爾產(chǎn)物的測量)，和(c)CMLng/ml(羧甲基賴氨酸檢測-AGE的代表標(biāo)記)。應(yīng)該注意的是這些檢測不能特異性鑒別13-酪啡肽-7前體。如果采用純的A1/A1乳，AGE相關(guān)檢測和催眠作用之間的相關(guān)性會更特定。根據(jù)發(fā)明人的理論，來自于A2/A2母牛的乳按上述進(jìn)行加工會具有很小的催眠作用。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>發(fā)明人知道糖基化工藝是相對復(fù)雜的，制備"睡眠乳"成本未考慮糖基化的所有方面。不過本說明書展示了原則。變體1.具有等價功能(糖基化嗎啡)要素的飲料，盡管不是乳制備的。神經(jīng)膠質(zhì)嗎啡(gliadomorphin)在催眠作用方面可能是與P-酪啡肽-7等效的。已知的具有主張催眠作用的飲料是稱為〃Horlicks〃(TM)(由GlaxoSmithKline制備)的產(chǎn)品，其通常在乳中包含發(fā)芽大麥和經(jīng)熱干燥的小麥。發(fā)芽釋放的葡萄糖可與大麥和小麥蛋白結(jié)合以產(chǎn)生糖基化的產(chǎn)品。在消化中，這些糖基化蛋白會釋放神經(jīng)膠質(zhì)嗎啡或糖基化的神經(jīng)膠質(zhì)嗎啡。這種神經(jīng)膠質(zhì)嗎啡是否具有有效的催眠作用仍待研究。2.為了優(yōu)選在檢測AGE相關(guān)成分之后將本發(fā)明所述產(chǎn)品的催眠作用降至標(biāo)準(zhǔn)量，將獲自A2/A2顯型母牛的一些乳用于產(chǎn)品制備中，以使產(chǎn)品的一般特性(如口感和營養(yǎng))保持一致且調(diào)整催眠作用。A2/A2母牛的P-酪蛋白無助于活性P-酪啡肽-7。3.方法中所提的糖基化促進(jìn)劑可選自能誘導(dǎo)糖基化反應(yīng)的碳水化合物和抗壞血酸的范圍；碳水化合物包括果糖、半乳糖和葡萄糖。4.基礎(chǔ)乳產(chǎn)品的衍生物，如來自于在加工期間通常在進(jìn)行糖基化加工之前脂肪和/或糖被去除或至少部分被去除的A1乳衍生物?？商砑语L(fēng)味劑。這些增加基于觀察到許多改良形式的"全脂乳"在銷售中具有不同量的消費者吸引力。5.變體，如只含糖基化13_酪蛋白、或只含一種或多種糖基化合成肽的產(chǎn)品。上述提及的Longobardo和Kreil文獻(xiàn)中提出如果如任一文獻(xiàn)中描述的取代P_酪啡肽_7也是糖基化的，它們的作用將會增強(qiáng)。這種肽可從天然源中精制，通過常規(guī)修飾的微生物制備，或由氨基酸合成，制備環(huán)境中發(fā)現(xiàn)是方便的，然后被糖基化，然后以穩(wěn)定和可接受形式如滅菌飲料或用于口服、口腔內(nèi)給藥或腸胃外給藥的藥物產(chǎn)品進(jìn)行銷售。這種產(chǎn)品至少對牛乳過敏的人有用。如果7-氨基酸肽難以自身糖基化，制備會針對更大的肽，其序列和構(gòu)型提供了在腸道酶促水解期間被切開的位點從而釋放P_酪啡肽_7類似物。6.從上述選擇展開，本發(fā)明還提供了具有催眠作用的糖基化肽。該粉末可制備成粉末或無菌溶液，分配用作藥物產(chǎn)品而不是改良食品?；钚晕镔|(zhì)與適宜的輔料和載體一起提供，用于口服、口腔內(nèi)給藥或腸胃外給藥。在這種選擇中，適宜的糖基化肽的清單包括糖基化的P-酪啡肽-7。藥物產(chǎn)品可以由前述的A1/A1乳通過體外蛋白水解而制備(如選自以下蛋白酶范圍的酶促水解外肽酶促水解，內(nèi)肽酶促水解，(包括胃蛋白酶促水解，胰蛋白酶促水解，和胰凝乳蛋白酶促水解)，或其組合)，之后提取適宜量的肽，或其可以以提取的或合成的之后被糖基化的P_酪啡肽_7等或前體肽開始制備。產(chǎn)業(yè)應(yīng)用性和優(yōu)勢本發(fā)明提供了一種現(xiàn)存物質(zhì)的純化和增強(qiáng)形式，因為必然含有一些糖基化13_酪蛋白A1型乳的、以UHT加工形式在售的普通牛乳已經(jīng)是可以獲得的。因此給公眾銷售一種含有類似成分的"原有"產(chǎn)品不應(yīng)該存在障礙特別是如果對產(chǎn)品進(jìn)行檢測以具有確定的統(tǒng)一量的催眠作用以及具有營養(yǎng)價值。本發(fā)明相對于現(xiàn)存鎮(zhèn)靜和安眠藥物的優(yōu)勢包括成本，可能沒有任何依賴性，和依靠天然成分和普通工藝，同時為附加價值的乳產(chǎn)品提供了出路。禁忌癥可包括存在臨床或未確診糖尿病或其他綜合征尤其是易受AGEs攝入影響的消費者。采用功能性的特定物質(zhì)如概述的那些可能使人的糖基化蛋白基物質(zhì)的總攝入有非常微小的區(qū)別。糖基化蛋白或其片段的劑量在催眠劑量上是最多在每100ml乳中約3.4-4.5g，假定全部糖基化。最后，應(yīng)該理解如實施例和/或圖例所述的本發(fā)明范圍不限于特定實施方式。在之前的描述中，參照特定成分或整個發(fā)明具有已知等效物，然后將這種等效物以個別陳述包括進(jìn)來。技術(shù)人員可理解不同修改、添加、已知等效物和取代是可以的且不偏離以下權(quán)利要求闡明的范圍和實質(zhì)。權(quán)利要求一種在引入哺乳動物(包括人)身體后具有催眠作用的制備產(chǎn)品，其特征在于，該產(chǎn)品包含至少一種糖基化催眠肽或該糖基化催眠肽的前體；該糖基化肽的催眠作用與非糖基化形式的催眠肽或非糖基化形式的催眠肽的前體相比被充分地延長。2.如權(quán)利要求l所述的制備產(chǎn)品，其特征在于，所述糖基化肽是糖基化的牛13酪啡肽_7。3.如權(quán)利要求1所述的制備的可食用的催眠飲料或食物產(chǎn)品，其特征在于，該飲料或產(chǎn)品包含至少一種糖基化蛋白，該至少一種糖基化蛋白在被哺乳動物攝入后和被腸道酶水解后能夠釋放至少一種能被吸收到哺乳動物循環(huán)中的糖基化催眠肽。4.如權(quán)利要求3所述的產(chǎn)品，其特征在于，所選的糖基化蛋白包括糖基化的牛A1/A113酪蛋白。5.如權(quán)利要求4所述的產(chǎn)品，其特征在于，該產(chǎn)品包含取自包括至少一頭奶牛的奶牛群的乳，事先對所述至少一頭奶牛進(jìn)行選擇以使該至少一頭奶?；旧鲜茿l13-酪蛋白基因純合的；所述乳在制備期間被加工使得組合物內(nèi)的蛋白至少部分地被糖基化，以便在被哺乳動物消化時，釋放有效量的糖基化催眠肽并吸收至循環(huán)中。6.如權(quán)利要求4所述的產(chǎn)品，其特征在于，該產(chǎn)品衍生自取自包括至少一頭奶牛的奶牛群的乳，事先對所述至少一頭奶牛進(jìn)行選擇以使該至少一頭奶?；旧鲜茿l13-酪蛋白基因純合的；該乳衍生物含有糖基化的牛A1/A113-酪蛋白或其部分；所述乳衍生物在制備期間被加工使得該乳衍生物中的蛋白至少部分地被糖基化，以便在被哺乳動物消化時釋放有效量的糖基化催眠肽至循環(huán)中。7.如權(quán)利要求5或權(quán)利要求6所述的制備的催眠飲料或產(chǎn)品，其特征在于，該產(chǎn)品包含已知量的糖基化的P-酪蛋白。8.—種制備如權(quán)利要求5所述類型的催眠產(chǎn)品的方法，其特征在于，該方法包括(a)獲取A1型牛乳，(b)加入促糖基化的碳水化合物物質(zhì)或抗壞血酸，(c)在高溫滅菌處理期間或之后進(jìn)行糖基化，和(d)包裝產(chǎn)品。9.如權(quán)利要求8所述的制備催眠產(chǎn)品的方法，其特征在于，該方法還包括步驟(e)檢測產(chǎn)品以測定糖基化的量和(f)根據(jù)所預(yù)期的催眠作用標(biāo)識產(chǎn)品。10.如權(quán)利要求8所述的制備催眠產(chǎn)品的方法，其特征在于，該方法還包括步驟(e)檢測產(chǎn)品以確定糖基化程度，然后根據(jù)糖基化檢測結(jié)果，用等價產(chǎn)品來稀釋產(chǎn)品以達(dá)到統(tǒng)一的催眠作用，所述等價產(chǎn)品以相同方式使用A2/A2乳制得，由此除了根據(jù)檢測結(jié)果改變產(chǎn)品中的A1P酪蛋白比例之外，每個產(chǎn)品包裝具有統(tǒng)一量的糖基化且在產(chǎn)品所有成分的方面是統(tǒng)一的。11.如權(quán)利要求8所述的制備催眠產(chǎn)品的方法，其特征在于，促糖基化的物質(zhì)選自能夠誘導(dǎo)糖基化反應(yīng)的物質(zhì)；所述碳水化合物包括果糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖和抗壞血酸的范圍。12.糖基化的牛A1/A113-酪蛋白在制備治療失眠癥的藥物中的應(yīng)用。13.—種基于如權(quán)利要求1中所述的糖基化A1/A1乳的藥物產(chǎn)品，其特征在于，糖基化形式的肽13酪啡肽-7是從所述糖基化Al/Al乳中提取的并被包裝作為適宜口服、口腔內(nèi)給藥或腸胃外給藥的肽；該藥物產(chǎn)品提供具有催眠作用的糖基化肽。全文摘要一種包含對人或其他哺乳動物具有催眠作用的多肽的“睡眠乳”，使用來自于β酪蛋白A1等位基因純合的母牛的乳蛋白。對乳或蛋白進(jìn)行糖基化增強(qiáng)工藝實質(zhì)上可增加所得多肽如β酪啡肽-7在攝入、腸道內(nèi)水解和經(jīng)腸道壁吸收后的半衰期?？赏ㄟ^在碳水化合物如抗壞血酸的存在下在改良的UHT工藝中通過對A1乳進(jìn)行糖基化來制備睡眠乳。通過測量糖基化產(chǎn)品來評估所得產(chǎn)品的催眠作用。文檔編號A61K38/08GK101754688SQ200880013641公開日2010年6月23日申請日期2008年4月24日優(yōu)先權(quán)日2007年4月24日發(fā)明者R·B·埃利奧特申請人:索姆那瑟蒂克有限公司