專利名稱：：用于改進(jìn)釋放活性成分的自沉淀藥物制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新型的藥物制劑，其用于活性成分(AP),尤其是蛋白質(zhì)和肽活性成分的持續(xù)釋放。本專利申請(qǐng)還涉及這些藥物制劑的應(yīng)用或使用，尤其是治療性的應(yīng)用或使用。這些活性藥物制劑同時(shí)涉及人用治療和獸用治療。本文件全文中所使用的術(shù)語AP指至少一種活性成分。
背景技術(shù)：
：在藥物AP，尤其是治療性的肽/蛋白質(zhì)的持續(xù)釋放領(lǐng)域，其目的經(jīng)常在于盡可能地在病人體內(nèi)再現(xiàn)接近于健康個(gè)體中所觀察的肽或蛋白質(zhì)的血漿濃度。由于血漿中的蛋白質(zhì)壽命較短，這個(gè)目的難以實(shí)現(xiàn)，從而導(dǎo)致治療用蛋白質(zhì)的反復(fù)注射。結(jié)果造成治療性蛋白質(zhì)的血漿濃度曲線以高濃度的峰值和極低濃度的最小值為特征。這些濃度峰值遠(yuǎn)高于健康個(gè)體中所發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)濃度，由于治療性蛋白質(zhì)(例如特定的細(xì)胞因子類)的高毒性，這些濃度峰值會(huì)有顯著的有害效應(yīng)。此外，由于濃度最小值低于產(chǎn)生治療效果所需的濃度，將導(dǎo)致病人的治療有效性較差，并且?guī)韲?yán)重的長(zhǎng)期副作用。度，重要的是藥物制劑應(yīng)當(dāng)能夠使治療性蛋白質(zhì)在一段時(shí)間內(nèi)持續(xù)釋放，從而限制血漿濃度隨著時(shí)間的變化。而且，這種活性制劑應(yīng)當(dāng)優(yōu)選滿足本領(lǐng)域技術(shù)人員已經(jīng)知曉的以下要求1-活性并且非變性的治療性蛋白質(zhì)(例如人或合成蛋白質(zhì))的持續(xù)釋放，從而使血漿濃度維持在治療水平；2-注射時(shí)的粘度足夠低，以便于容易地注射；3-表現(xiàn)出優(yōu)異的毒性和耐受性特征的生物相容性和生物可降解性形式。為了實(shí)現(xiàn)這些目的，現(xiàn)有技術(shù)中所提供的最佳方法之一是開發(fā)治療性蛋白質(zhì)的持續(xù)釋放劑型，其由加載有治療性蛋白質(zhì)的納米顆粒的相對(duì)無粘性的液體懸浮液構(gòu)成。這些懸浮液能夠使天然的治療性蛋白質(zhì)容易地給藥。因此，弗拉梅技術(shù)已經(jīng)提供了一種途徑，其中治療性蛋白質(zhì)和含有疏水基團(tuán)和親水基團(tuán)的共聚氨基酸的納米顆粒相結(jié)合。專利申請(qǐng)US2006/0099264公開了一種兩性分子聚氨基酸，其含有天冬氨酸殘基和/或谷氨酸殘基，其中這些殘基的至少一部分帶有含有至少一種oc-生育酚殘基的接枝(例如接枝了合成或天然來源的a-生育酚的聚谷氨酸酯或聚天冬氨酸酯)。這些"疏水改性的"均聚氨基酸在水中自發(fā)形成一種納米顆粒的膠體懸浮液，這些納米顆粒在pH7.4的水性懸浮液中能夠容易地和至少一種活性蛋白質(zhì)(胰島素)相結(jié)合。由描述于US2006/0099264的懸浮液"矢量化"的活性蛋白質(zhì)(例如胰島素)的體內(nèi)釋放持續(xù)時(shí)間會(huì)因?yàn)檠娱L(zhǎng)而獲得受益。使用描述于PCT申請(qǐng)WO-A-05/051416的藥物劑型可以部分實(shí)現(xiàn)釋放持續(xù)時(shí)間的延長(zhǎng)。本申請(qǐng)公開了一種疏水改性的聚(L-谷氨酸鈉)的納米顆粒(0.001-0.5pm)的膠體懸浮液，其在一濃度下注射，從而使皮下注射后，和內(nèi)源性的白蛋白接觸以在病人體內(nèi)就地形成凝膠。然后這種蛋白質(zhì)緩慢釋放，通常持續(xù)一周的時(shí)間。然而，當(dāng)待給藥的治療性蛋白質(zhì)的濃度相對(duì)較高時(shí)，在這種情形下，例如對(duì)人生長(zhǎng)激素而言，其釋放的持續(xù)時(shí)間僅限于幾天。這些劑型的釋放持續(xù)時(shí)間會(huì)因?yàn)檠娱L(zhǎng)更多而獲得受益。建議用于延長(zhǎng)皮下注射后AP在體內(nèi)釋放的持續(xù)時(shí)間的另一種途徑是使用一種制劑，其在注射溫度時(shí)是液體，但在溫度升到37。C時(shí)形成凝膠。PCT申請(qǐng)WO-A-99/18142和WO-A-00/18821涉及AP的水性溶液，其含有溶解或膠體形式的聚合物，其能夠給藥予溫血?jiǎng)游?，尤其是通過注射的方式，并且能夠在體內(nèi)形成凝膠沉積物，因?yàn)樯頊囟雀哂谒鼈兡z化的溫度。由此形成的凝膠以持續(xù)的方式釋放AP。這些特別的生物可降解聚合物是ABA或BAB三嵌段，其中A=聚乳酸-共-乙醇酸(PLAGA)或聚乳酸(PLA)，以及B=聚乙二醇。這些三嵌段聚合物的液體3凝膠轉(zhuǎn)變溫度為，例如36、34、30和26。C。US-B-6143314中描述的類似的聚合物(A),這些ABA或BAB三嵌^:聚合物在體內(nèi)的水解會(huì)生成酸，其在局部的耐受可能不好。本申請(qǐng)人的專利申請(qǐng)PCT/FR2006/002443描述了組氨酸衍生物和疏水基團(tuán)改性的聚谷氨酸酯及其應(yīng)用。特別地，該申請(qǐng)公開了這些聚合物在酸性pH下是可溶的，并且在中性pH下沉淀。它們可以用于制備釋放活性成分，例如治療性蛋白質(zhì)的制劑。在使用這些聚合物開發(fā)用于持續(xù)釋放的自沉淀的水性液體制劑的過程中，出乎意料地發(fā)現(xiàn)只有在某些特定的條件下才能獲得滿足要求的制劑。例如，描述在專利申請(qǐng)PCT/FR2006/002443中的聚合物pGluHisOEta-生育酚，在pH5.5時(shí)配制并且含有45mg/ml聚合物，并不會(huì)帶來預(yù)期的效果。申請(qǐng)人進(jìn)行的長(zhǎng)期的研究已經(jīng)鑒定出i)滿足自沉淀系統(tǒng)要求的含有陽離子聚合物(PO)的制劑，以及ii)選擇這些制劑的特定條件。這些聚合物(PO)既可以選自專利申請(qǐng)PCT/FR2006/002443中描述的聚合物，也可以選自新的一類聚合物，其含有陽離子基團(tuán)并且?guī)в惺杷鶊F(tuán)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個(gè)目的是提供新型的制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，該制劑加載有活性成分(AP)，并且在幾天，或者甚至幾周的時(shí)間，持續(xù)釋放活性成分(AP)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供新型的液體制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，該制劑加載有活性成分(AP),其中該制劑的組成和濃度能夠優(yōu)化活性成分皮下給藥的釋放持續(xù)時(shí)間。本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供新型的液體制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，該制劑加載有活性成分，其中該制劑的組成使其能夠在聚合物可能的最低濃度下，釋放活性成分(AP)長(zhǎng)達(dá)幾天，或者甚至幾周。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供新型的液體制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，該制劑加載有活性成分(AP),其中該制劑的組成和濃度使其能夠通過小號(hào)針頭容易地注射。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供新型的液體制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，其在水性溶液中是穩(wěn)定的。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供新型的制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，其能夠以凍干形式儲(chǔ)存。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供新型的制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，其能夠在凍干后容易地再分散。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供新型的制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，該制劑加載有活性成分(AP)，其中該制劑的凍干形式是穩(wěn)定的。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供新型的制劑，其基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物，其中該制劑釋放蛋白質(zhì)而不影響其生物活性。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種固體藥物制劑，用于活性成分(AP)的持續(xù)釋放，該固體藥物制劑尤其是干燥粉末劑型，例如用于吸入和肺部給藥。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種新方法，用于制備持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)的制劑，該制劑尤其是前面描述的制劑之一。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種新方法，用于制備使用這些藥物制劑的藥品。經(jīng)過長(zhǎng)期和廣泛的研究，本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)基于由帶有疏水側(cè)基的陽離子氨基酸衍生物改性的聚谷氨酸酯聚合物的制劑優(yōu)化治療性蛋白質(zhì)和肽的持續(xù)釋放。因此，本發(fā)明首先涉及一種水性藥物制劑，用于持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)，其能夠容易地注射，例如通過非腸道途徑，并且其含有至少一種活性成分(AP)和一種水性懸浮液，所述水性懸浮液基于聚合物(PO)或者其藥學(xué)上可接受鹽的膠體顆粒，其中所述制劑滿足以下四個(gè)條件(a)聚合物(PO)是聚氨基酸，含有谷氨酸殘基，其中-一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛陽離子基團(tuán)(CG),所述陽離子基團(tuán)各自相同或者不同，-另一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛疏水基團(tuán)(GH),所述疏水基團(tuán)(GH)各自相同或者不同，-可選地，又一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛中性基團(tuán)(NG)，所述中性基團(tuán)(NG)各自相同或者不同，以及-可選地，再一部分谷氨酸殘基未經(jīng)改性；(b)所述制劑的pH值(pHf)為3.0-6.5;(c)在pHf下，該聚合物(PO)形成膠體溶液，其自發(fā)并非共價(jià)地和活性成分(AP)結(jié)合；(d)1ml所述制劑在和1ml體積的試^r緩沖溶液Tp混合期間沉淀。優(yōu)選地，這種制劑的沉淀因子PF大于200，優(yōu)選大于400，優(yōu)選大于800,更優(yōu)選大于1500。本發(fā)明還涉及一種水性液體藥物制劑，用于持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)，其能夠容易地注射，例如通過非腸道途徑，并且其含有至少一種活性成分(AP)和水性懸浮液，所述水性懸浮液基于聚合物(PO)或者其藥學(xué)上可接受鹽的月交體顆粒，其中所述制劑滿足以下四個(gè)條件(a)聚合物(PO)是聚氨基酸，含有谷氨酸殘基，其中-一部分谷氛酸殘基每個(gè)都帶有垂掛陽離子基團(tuán)(CG)，所述陽離子基團(tuán)各自相同或者不同，-另一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛疏水基團(tuán)(GH)，所述疏水基團(tuán)(GH)各自相同或者不同，-可選地，又一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛中性基團(tuán)(NG)，所述中性基團(tuán)(NG)各自相同或者不同，以及-可選地，再一部分谷氨酸殘基未經(jīng)改性；(b)所述制劑的pH值(pHf)為3.0-6.5;(c)在pHf下，該聚合物(PO)形成力交體溶液，其自發(fā)并非共價(jià)地和活性成分(AP)結(jié)合；(d)這種制劑的沉淀因子PF大于200，優(yōu)選大于400,優(yōu)選大于800,更優(yōu)選大于1500。此外，這種制劑的保留因子RQ優(yōu)選大于5，優(yōu)選大于10,優(yōu)選大于15,更優(yōu)選大于20。已經(jīng)顯示，對(duì)于給定的聚合物濃度，活性成分(AP)的釋放動(dòng)力學(xué)很大程度取決于聚合物的組成，即取決于陽離子基團(tuán)、疏水側(cè)面接枝和可選的中性基團(tuán)和谷氨酸酯基團(tuán)各自的摩爾份數(shù)。本發(fā)明還涉及一種方法，用于制備持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)的制劑，這些制劑尤其是前面所描述的制劑，所述方法包括以下步驟1)在pH值3-6.5時(shí)制備聚氨基酸聚合物(PO)的水性膠體溶液，所述聚合物含有谷氨酸殘基，其中-一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛陽離子基團(tuán)(CG),所述陽離子基團(tuán)各自相同或者不同，-另一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛疏水基團(tuán)(GH),所述疏水基團(tuán)(GH)各自相同或者不同，-可選地，又一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛中性基團(tuán)(NG),所述中性基團(tuán)(NG)各自相同或者不同，以及-可選地，再一部分谷氨酸殘基未經(jīng)改性；陽離子基團(tuán)(CG)、疏水基團(tuán)(GH)、可選的中性基團(tuán)(NG)和可選的谷氨酸酯各自的摩爾份數(shù)使得1ml所述制劑在和1ml體積的試驗(yàn)緩沖溶液Tp混合期間沉淀；和2)將至少一種活性成分(AP)加入到步驟1獲得的聚合物(PO)中，其中所述活性成分非共價(jià)地和所述聚合物的膠體溶液的顆粒結(jié)合，并且其中加入活性成分的步驟可以在該制劑最后的治療性使用前才進(jìn)行(例如30分鐘前)。本發(fā)明還涉及一種方法，用于制備藥品，尤其是用于非腸道、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)、經(jīng)皮、腹腔內(nèi)或腦內(nèi)給藥或者肺瘤內(nèi)給藥，或者甚至是通過口腔、鼻腔、肺部、陰道或者眼部途徑給藥的藥品，所述方法主要包括使用至少一種本文描述的制劑。發(fā)明詳述定義在本說明書中，術(shù)語"陽離子基團(tuán)"指共價(jià)連接到谷氨酸殘基的基團(tuán)，其含有一個(gè)或多個(gè)氨基或一個(gè)或多個(gè)季銨。當(dāng)其為氨基官能團(tuán)時(shí)，該基團(tuán)主要在低于其pKa的任何pH下離子化，當(dāng)其為季銨時(shí)，該基團(tuán)在任何pH下離子化。除非另行說明，烷基具有1-10個(gè)碳原子。在本說明書中，術(shù)語"中性基團(tuán)"指在3-10之間的任何pH下都不帶有電荷，并且包括，例如谷氨酸殘基的羧基和乙醇胺、亞烷基二醇或聚亞烷基二醇縮合獲得的基團(tuán)。根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語聚合物的"藥學(xué)上可接受的鹽"理解為涵蓋帶有和該聚合物的離子化功能相關(guān)的抗衡離子的所有聚合物。在本說明書中，術(shù)語"溶液"指溶劑和多個(gè)單獨(dú)的鏈形式的聚合物的均勻的溶液。在本說明書中，術(shù)語"膠體溶液"指顆粒的懸浮液，其通過T試驗(yàn)測(cè)定的平均直徑低于或等于0.5pm。在本說明書中，術(shù)語"容易注射的制劑"(例如通過非腸道途徑)指一種制劑，其20。C時(shí)的動(dòng)力學(xué)粘度低于或等于1000mPa.s。優(yōu)選地，該制劑在20°C、剪切梯度為1000s"時(shí)測(cè)得的動(dòng)力學(xué)粘度，優(yōu)選^氐于或等于500mPa.s,優(yōu)選為2-200mPa.s，例如1.0-100mPa.s,實(shí)際上甚至為1.0-50mPa.s。在本說明書中，術(shù)語"小分子"指分子量低于lkDa的分子，尤其是非蛋白質(zhì)分子。在本說明書中，術(shù)語"pHf，指根據(jù)本發(fā)明的制劑的pH值。在本說明書中，術(shù)語"pH^，指使用P試驗(yàn)測(cè)定的基于聚合物PO的制劑沉淀時(shí)的pH。通過檢測(cè)500nm的吸收來檢測(cè)沉淀時(shí)pHP的pH的P試驗(yàn)l或2mg/ml的含有0.15M氯化鈉的聚合物PO的濃縮溶液通過加入乙酸或者lM氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)到pH4，然后攪拌24h。該溶液然后用0.8-0.2pm的濾器過濾。該溶液然后用O.lM氫氧化鈉溶液滴定，使用Perkin-ElmerLambda35UV光譜儀型的儀器記錄聚合物PO的溶液在500nm的吸收的變化以作為所述溶液pH值的函數(shù)。沉淀時(shí)的pH值(pH"對(duì)應(yīng)于吸收突然增大到大于l的值時(shí)的pH。在本說明書中，術(shù)語"試驗(yàn)緩沖溶液Tp"指一種水性介質(zhì)，其含有30mg/g牛白蛋白組分V(Aldrich)、0.01M磷酸鹽緩沖液、0.0027M氯化鉀、0.137M氯化鈉(Aldrich的PBS)和0.015M乙酸銨(Aldrich)。在本說明書中，術(shù)語"△n，，指將0.5ml含有1mg聚合物PO的膠體溶液從pHf調(diào)至pH+所需要的氫氧化鈉的摩爾數(shù)目，其中所述數(shù)目通過傳統(tǒng)的酸/堿滴定方法TM獲得含有0.15M氯化鈉的2mg/ml的濃縮聚電解質(zhì)溶液通過加入乙酸或者lM氬氧化鈉溶液調(diào)節(jié)到pH4。該溶液然后用0.05M氫氧化鈉溶液滴定，然后記錄pH的變化，以作為所加氫氧化鈉體積的函數(shù)。An的測(cè)定通過簡(jiǎn)單地讀出將pH從pHf改變至pH承所需要的氫氧化鈉的體積進(jìn)行。在本說明書中，生理pH值定義為例如等于7,2士0.4。在本說明書中，術(shù)語"聚電解質(zhì)"指一種聚合物，其帶有能夠在水中離子化的基團(tuán)，從而在聚合物上生成電荷。檢測(cè)保留因子RO的O試驗(yàn)準(zhǔn)備用于給藥的體積V的根據(jù)本發(fā)明的制劑于25。C時(shí)加入到200pl大鼠血清池中。納米顆粒沉淀后，上清液中的游離蛋白質(zhì)濃度通過ELISA試驗(yàn)測(cè)定。通過增加體積V值來重復(fù)相同的試驗(yàn)，可以測(cè)定上清液中的游離蛋白質(zhì)的摩爾分?jǐn)?shù)大于IOQ/。時(shí)的制劑體積的VM直。保留因子RQ的值為V傘體積和200pl大鼠血清的比值。例如，V氺-lml時(shí)，RQ=5。為了評(píng)估聚合物PO的膠體溶液的顆粒的粒徑，優(yōu)選使用T'試驗(yàn)。T'試驗(yàn)的結(jié)果是平均水動(dòng)力學(xué)直徑。通過準(zhǔn)彈性光散射檢測(cè)納米顆粒粒徑的T'試驗(yàn)根據(jù)本發(fā)明的聚合物顆粒的平均水動(dòng)力學(xué)直徑根據(jù)下面定義的方法Md檢測(cè)制備0.15MNaCl介質(zhì)中的濃度為1或2mg/ml的聚合物溶液并且攪拌24h。這些溶液然后通過用0.8-0.2pm的濾器過濾，然后用MalvernCompactGoniometerSystem型的儀器分析其動(dòng)力學(xué)光散射，用波長(zhǎng)為632.8nm的垂直極化的He-Ne激光束操作。聚合物納米顆粒的水動(dòng)力學(xué)直徑通過累積量方法計(jì)算電場(chǎng)的自相關(guān)函數(shù)獲得，該方法描述在著作"SurfactantScienceSeries",volume22，SurfactantSolutions，編者是R.Zana,Chap.3,M.Dekker,1984。在本說明書中，術(shù)語"納米顆粒"指根據(jù)T'試驗(yàn)平均直徑在2-500nm的顆粒o檢測(cè)活性成分釋放的L試驗(yàn)50lul制劑注射到邊長(zhǎng)為1.5cm的聚氨酉旨/聚醚(PU-PE)泡沫立方體中，用流速為2.83ml/h的水性介質(zhì)水浴，所述水性介質(zhì)含有30mg/g的牛白蛋白組分V(Aldrich)、0.01M磷酸鹽緩沖液、0.0027M氯化鉀、0.137M氯化鈉(Aldrich的PBSAldrich)。樣品周期性地從連續(xù)相中取出，通過ELISA分析這些樣品的蛋白質(zhì)含量。然后就可能通過用施加的流速除以測(cè)得的濃度來描繪蛋白質(zhì)的流動(dòng)，以及通過相加每個(gè)取出的樣品所測(cè)得的數(shù)值來描繪所釋放的蛋白質(zhì)的總重量。在本發(fā)明的含義中，術(shù)語"蛋白質(zhì)，，指蛋白質(zhì)或肽，無論其為寡肽或多肽。該蛋白質(zhì)或肽可以是改性的或未經(jīng)改性，所述改性例如通過接枝一個(gè)或多個(gè)聚乙二醇基團(tuán)。在本發(fā)明的含義中，表述"帶有"是指帶有的基團(tuán)為垂掛的(或懸掛的)，即所述基團(tuán)相對(duì)于谷氨酸殘基為側(cè)基，為帶有它的谷氨酸殘基rf立的羰基官能團(tuán)的取代基。本發(fā)明的聚谷氨酸酯還帶有陽離子基團(tuán)。這些基團(tuán)優(yōu)選地通過酰胺鍵或酯鍵與谷氨酸基團(tuán)相連。優(yōu)選地，聚合物(PO)的結(jié)構(gòu)為pGlu(x)GH(y)CG(z)NG(1.x.y.z)，其聚合度(DP)為50-300,優(yōu)選100-250，更優(yōu)選150-250。根據(jù)本發(fā)明的其它形式，陽離子基團(tuán)(CG)可以選自弱堿，其半-中性pH值低于7.0。這些陽離子基團(tuán)(CG)例如從選自下組的組胺酸衍生物獲得組氨酸酯(優(yōu)選甲酯和乙酯)、組胺醇、組胺、組胺酰胺、組胺酰胺的N-單曱基衍生物以及組胺酰胺的N,N，-二曱基衍生物。在這種情形下，數(shù)值x、y和z可以是x為0-45%,y為2-30°/。，z為40-98%并且l-x-y-z為0-50%。數(shù)值x、y和z也可以是x為0-45%,y為2-30%,z為40-60%并且1-x-y-z為0-58%。數(shù)值x、y和z也可以是x為0-45%，y為15-30%,z為40-60%并且l-x-y-z為0-45%。如果聚合物PO不含有中性基團(tuán)(NG),數(shù)值x、y和z可以是x為0-45%,y為2-30%并且z為40-98%。根據(jù)本發(fā)明的其它形式，陽離子基團(tuán)(CG)可以選自那些含有至少一個(gè)季銨或至少一種強(qiáng)堿的基團(tuán)，其半中性pH大于8.0。這些陽離子基團(tuán)(CG)可以從以下前體化合物獲得-含有2-6個(gè)碳原子的線性二胺，優(yōu)選腐胺，-精胺，-通過氧鍵合的乙醇胺，誦通過氧4建合的膽石咸，-氨基酸的酯或者酰胺衍生物，其側(cè)鏈在中性pH下帶有正電荷，即通過a位的胺官能團(tuán)鍵合的賴氨酸、精氨酸或鳥氨酸。在這種情形下，數(shù)值x、y和z可以是國(guó)x為10-55%,-y為2-30%,-z大于或等于10%并且為(x-10)°/。-(x+15)%,-對(duì)應(yīng)于其它百分?jǐn)?shù)的中性基團(tuán)的數(shù)目使總數(shù)達(dá)到100%并且可選地等于o。凄K直x、y和z也可以是-x為20-55%，-y為2-7.5%,，-z大于或等于20。/。并且為(x-10)%-(x+15)%，-對(duì)應(yīng)于其它百分?jǐn)?shù)的中性基團(tuán)的數(shù)目使總數(shù)達(dá)到100%并且可選地等于0。也可以選擇數(shù)值x、y和z^f吏x為10-55%，y為2-300/0，z為10-55%,并且l-x-y-z為0-60%。也可以選擇數(shù)值x、y和z使x為10-20°/。，y為2-30%,z為10-30%,并且l-x-y畫z為20-78%。也可以選擇數(shù)值x、y和z使x為10-20%，y為15-30%，z為10-30%，并且l畫x-y畫z為20-65%。如果聚合物PO不含有中性基團(tuán)(NG)，數(shù)值x、y和z可以是x為10-55%,y為2-30%并且z為40-60%。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的聚氨基酸是例如a-L-谷氨酸酯或a-L-谷氨酸均聚物?？捎糜诠δ芑景l(fā)明的谷氨酸殘基的陽離子基團(tuán)可以各自相同或不同，并且對(duì)應(yīng)于*選自下組的組胺酸衍生物組氨酸酯(優(yōu)選曱酯和乙酯)、組胺醇、組胺、組胺酰胺、組胺酰胺的N-單曱基衍生物以及組胺酰胺的N，N，-二曱基衍生物。參或者具有以下通式——x,\n<v,ci-其中X-O或NH,Y-獨(dú)立地為H或CH3，L二直鏈(C2-C6)亞烴基，可選被官能性的羧基或其衍生物取代。因此，可用于本發(fā)明的陽離子基團(tuán)可以具有下式--NH-(CH2)w-NH3+，Z-，其中w為2-6，優(yōu)選w為4，--NH-(CH2)4-NH-C(=NH)-NH3+，Z-，--0-(CH2)2-NH3+,Z-,-下式的氨基酸殘基或氨基酸衍生物—NIh其中畫W是烷氧基，優(yōu)選-OMe或-OEt，或者-R!是-NH2、烷基氨基，優(yōu)選-NH畫CH3或-N(CH3)2;-R"是—(CH2)4-NH3+，Z-、-(CH2)3-NH-C(=NH)-NH3+，Z-、-(CH2)3-NH3+，其中，z-是氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽或醋酸鹽，優(yōu)選氯化物。例如，這些陽離子基團(tuán)可以具有下式其中-Ri是烷氧基或烷氨基，優(yōu)選-OMe、-OEt、-NH2、-NHCH3或陽N(CH3)2，并且-R2是氫或-CH20H或-C(-O)-R1。根據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，創(chuàng)造性的聚氨基酸每個(gè)聚合物鏈平均含有至少3個(gè)疏水基團(tuán)(GH)。優(yōu)選地，每個(gè)疏水接枝包括至少一個(gè)疏水基團(tuán)GH，所述接枝含有至少一個(gè)間隔節(jié)點(diǎn)(或殘基)(間隔子)，其能夠?qū)⑹杷鶊F(tuán)GH連接到聚谷氨酸酯鏈(如聚谷氨酸酯骨架主鏈)上。例如，該節(jié)點(diǎn)可以含有至少一個(gè)直接的共價(jià)鍵和/或至少一個(gè)酰胺鍵和/或至少一個(gè)酯鍵。例如，節(jié)點(diǎn)可以特別的為下組除聚谷氨酸酯組成部分的單節(jié)殘基外的"氨基酸"殘基、氨基醇衍生物、聚胺(如二胺)衍生物、多元醇(如二醇)衍生物和羥基酸衍生物。GH接枝到聚谷氨酸酯鏈上可以涉及使用GH前體，所述前體可以連接到聚谷氨酸酯鏈上。實(shí)際上，GH的前體可以是但不限于，選自醇和胺，其可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地官能化。—根據(jù)一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，疏水接牧的疏水基團(tuán)GH含有8-30個(gè)碳原子。這些疏水基團(tuán)GH優(yōu)選而謹(jǐn)慎地選自以下組,直鏈或支鏈的CVC30的烷基，可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子，C8-C3Q的烷基芳基或芳基烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子，以及C8-C3。的(聚)環(huán)化合物，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子。與GH共同形成疏水接枝的節(jié)點(diǎn)可以是二、三或四價(jià)節(jié)點(diǎn)(實(shí)際上可以是五價(jià)或更高)。對(duì)于二價(jià)節(jié)點(diǎn)，疏水接枝含有一個(gè)單個(gè)的GH基團(tuán)，而三價(jià)節(jié)點(diǎn)給予疏水接枝分叉性，即接枝表現(xiàn)出兩個(gè)GH"臂"。三價(jià)節(jié)點(diǎn)的例子包括"氨基酸"殘基如"谷氨酸"，或多元醇?xì)埢绫肌Ｒ虼?，具有分叉GH的疏水接枝的非限制性優(yōu)選實(shí)例為二烷基丙三醇和二烷基谷氨酸酯。例如，疏水基團(tuán)GH可以衍生自下組物質(zhì)辛醇、十二烷醇、十四烷醇、十六烷醇、十八烷醇、油醇、生育酚和膽固醇。如前面所定義的，中性基團(tuán)(NG)可以選自以下組羥基乙基胺-基、羥基烷基氧-基或聚氧亞烷基。根據(jù)另一個(gè)可選的實(shí)施方式，本發(fā)明中使用的聚谷氨酸酯還帶有至少一個(gè)與谷氨酸酯殘基相連的聚亞烷基(優(yōu)選為聚乙烯)二醇型的接枝。優(yōu)選地，本發(fā)明的聚谷氨酸酯骨架含有a-L-谷氨酸酯和/或oc-L-谷氨酸殘基。更優(yōu)選地，本發(fā)明的聚谷氨酸酯具有下列通式(I):其中-A獨(dú)立地是-NHR基團(tuán)，其中R為H、直鏈C2-do或支鏈Crdo烷基或苯曱基，-具有下式的末端氨基酸殘基或末端氨基酸衍生物—NH—C——COR7I其中，R為OH,-OR9或-NHR1、并且R8，119和R"獨(dú)立地是H、直鏈C2-do或支鏈Cs和Cn)的烷基或苯曱基；■B為直接鍵或二價(jià)、三價(jià)或四價(jià)鍵基團(tuán)，優(yōu)選自下組-O-、-NH-、-N(d-C5烷基)-、氨基酸(優(yōu)選天然氨基酸)殘基、二醇?xì)埢?、三醇?xì)埢⒍窔埢?、三胺殘基、含?-6個(gè)碳原子的氨基醇或羥基酸殘基；■D為H、直鏈C2-Cu)或支鏈Q(jìng)rCH)的?；蚪构劝彼狨ィ弧雒總€(gè)疏水基團(tuán)(GH)各自獨(dú)立，為選自下組的基團(tuán)直鏈或支鏈Cs-C30的烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選為0和/或N和/或S),或者C8-C3Q的烷基芳基或芳基烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選為0和/或N和/或S)，或者CrC3o的(聚)環(huán)化合物，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選為0和/或N和/或S);和優(yōu)選地至少一個(gè)疏水基團(tuán)(GH)，該基團(tuán)通過接枝前體獲得，所述前體選自下組辛醇、十二烷醇、十四烷醇、十六烷醇、十八烷醇、油醇、生育酚和膽固醇，B為直接4建；■R7o是選自下組的基團(tuán)--NH-(CH2)w-NH3+，其中w為2-6，并且優(yōu)選w為4，--NH-(CH2)4-NH-C(=NH)-NH3+,--0-(CH2)2-NH3+，--0-(CH2)rN+(CH3)3，-下式的基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中-RU代表-H、-C02H、烷基酯(優(yōu)選-COOMe和-COOEt)、-C(=0)-NH2、-C(=0)-NH-CH3或~C(=0)-N(CH3)2;-下式的氨基酸殘基或氨基酸衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>其中:X為-O-或-NH-，R"為H、直鏈Crdo或支鏈CrCH)烷基或苯曱基，-1113為-((:1^)4-腿3+、-(CH2)3NH-C(=NH)-NH3+、-(CH2)3NH3+;R7。的抗衡陰離子為有利的基團(tuán)，尤其選自氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽或醋酸鹽，優(yōu)選為氯化物；■R卯是羥基乙基氨基-、羥基烷基氧基-或聚氧亞烷基；-p、q、r和s是正整數(shù)；■(p)/(p+q+r+s)為疏水基團(tuán)GH的摩爾接枝率，若每個(gè)共聚物鏈平均具有至少3個(gè)疏水接枝，則所述接枝率為2-30mol%;■(q)/(P+q+r+s)為陽離子基團(tuán)的摩爾接枝率，為10-98mol%;(p+q+r+s)為50-300，優(yōu)選為100-250;■(r)/(p+q+r+s)為0-78mol%;■(s)/(p+q+r+s)為0-55mol%;并且包括其藥學(xué)上可接受的鹽。衍生自組氨酸的式(I)的聚氨基酸的制備與合成的更多細(xì)節(jié)見專利申請(qǐng)F(tuán)R0553302。不是衍生自組氨酸的式(I)的聚氨基酸的制備與合成的更多細(xì)節(jié)見專利申請(qǐng)F(tuán)R0703185.優(yōu)選地，疏水基團(tuán)GH和陽離子基團(tuán)隨機(jī)地定位為垂掛(或懸掛)基團(tuán)。通常，上述通式(I)不應(yīng)理解為僅代表嵌段共聚物，還代表無規(guī)共聚物或多嵌段共聚物。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明制劑中的聚合物(PO)的濃度為4-50mg/ml，尤其當(dāng)活性成分(AP)是治療性蛋白質(zhì)時(shí)。在這個(gè)濃度范圍內(nèi)，制劑可以通過小直徑的針頭容易地注射，例如27和甚至29規(guī)格的針頭。實(shí)施例2、3和4詳細(xì)描述了這種制劑。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的制劑中的聚合物(PO)的濃度為5-30mg/ml，更優(yōu)選為5-15mg/ml。優(yōu)選地，活性成分(AP)的濃度和聚合物(PO)濃度的比值R為0.0001-1.5。該比值R也可以為0.01-1.2。根據(jù)其它的形式，本發(fā)明的制劑可以含有211++二價(jià)離子，相對(duì)于陽離子基團(tuán)(CG)的摩爾濃度，其比例為0.05-2摩爾當(dāng)量。特別地，本發(fā)明的制劑可以含有添加的211++二價(jià)離子，相對(duì)于陽離子基團(tuán)(CG)的摩爾濃度，尤其是當(dāng)陽離子基團(tuán)(CG)通過組氨酸衍生物獲得時(shí)，其比例為0.25-0.75摩爾當(dāng)量，并優(yōu)選等于0.5eq，所述組氨酸衍生物選自組氨酸酯(優(yōu)選曱酯和乙酯)、組胺醇、組胺、組胺酰胺、組胺酰胺的N-單曱基衍生物以及組胺酰胺的N,N，-二曱基衍生物。根據(jù)其它的可選實(shí)施方式，本發(fā)明的制劑不含有添加的二價(jià)離子。本發(fā)明中所使用的聚合物的摩爾質(zhì)量在2000-200000g/mo1,并且優(yōu)選在5000-100000g/mol。根據(jù)本發(fā)明一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式，當(dāng)陽離子基團(tuán)(CG)選自半-中性pH低于7.0的弱堿時(shí)，本發(fā)明所使用的聚合物(PO)具有pGlu(x)GH(y)CG(z)NG(Lx于z)結(jié)構(gòu)，其中x為0-20%,y為2-30%,z為60-95%并且l-x-y-z為0-15%。數(shù)值x、y和z也可以是x為0-20%，y為2-10%，z為75-95%并且1-x-y-z為0-15%。數(shù)值x、y和z也可以是x為0-20%，y為15-25。/。，z為60-80%并且l畫x-y-z為0-15%。如果聚合物PO不含有中性基團(tuán)(NG)，數(shù)值x、y和z可以是x為0-20%，y為2-30%并且z為60-95%。根據(jù)本發(fā)明另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式，當(dāng)陽離子基團(tuán)(CG)選自半-中性pH大于8.0的季銨或至少一種強(qiáng)堿時(shí)，數(shù)值x、y和z可以是x為15-50%,y為2-30°/。并且z為10-50%并且l-x-y-z為10-55%。數(shù)值x、y和z也可以是x為15-30%，y為2-30%，z為15-25%并且l-x-y-z為40-55%。數(shù)值x、y和z也可以是x為25-50%,y為2-30%，z為25-50%并且l-x-y陽z為10-30%。如果聚合物PO不含有中性基團(tuán)(NG)，數(shù)值x、y和z可以是x為10-55%，y為2-30%并且z為40-60%。由于陽離子電荷過量，本發(fā)明中所用的聚合物PO在制劑的pHf值時(shí)是中和，從而使聚合物沉淀。不被理論束縛，可以假設(shè)由pH值增加引起的沉淀現(xiàn)象是由制劑pH和生理pH間聚合物總電荷的降低和疏水性側(cè)基的存在引起的。應(yīng)該理解的是，根據(jù)pH和組成，改性的聚谷氨酸酯的殘留官能羧基為中性(COOH型)或離子化的(COO-陰離子)。因此，術(shù)語i)谷氨酸酯殘基或谷氨酸殘基、ii)聚谷氨酸或聚谷氨酸酯，可以互換。類似地，氨基可以主要在低于其pKa的任何pH值離子化，以及季銨可在任何pH下離子化。在水溶液中，抗衡陽離子可以是金屬陽離子，如鈉、釣或鎂，或有機(jī)陽離子，如三乙醇胺、三(羥基曱基)氨基曱烷或聚氨，如聚乙烯亞胺。若其是二價(jià)的，抗衡陽離子可以使兩個(gè)封閉的單價(jià)陰離子基團(tuán)成鹽。陽離子基團(tuán)的抗衡陰離子優(yōu)選氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽或乙酸鹽。若其是二價(jià)的，抗衡陰離子可以使兩個(gè)封閉的單價(jià)陽離子基團(tuán)成鹽。在本說明書中，術(shù)語聚合物的"藥學(xué)上可接受的鹽"包括所有具有與聚合物離子化功能相關(guān)的抗衡離子的聚合物。例如，適合用于本發(fā)明的聚氨基酸可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法得到。首先，得到a型聚氨基酸的廣泛采用的方法是基于N-羧基氨基酸酐(NCA)的聚合，例如，在文獻(xiàn)"所opo(vmew，1976，15,1869"和H.R.Kricheldorf的著4乍"a^/fl"v4mz>70acz'(i7V"-car6o:^^4"/z_y<irz'<iere/ated//e^rocyc/es",SpringerVerlag(1987)中有記載。NCA的衍生物優(yōu)選為NCA-Glu-O-&(113=曱基、乙基或芐基)。然后聚合物在合適的條件下水解得到聚合物的酸性形式。這些方法在本申請(qǐng)人的專利FR-A-2801226中有詳述。根據(jù)本發(fā)明可使用的聚合物例如不同質(zhì)量的聚(a-L-谷氨酸)、聚(a-D-谷氨酸)、聚(a-D,L-谷氨酸酯)和聚(Y-L-谷氨酸)型的聚合物，其可以通過商業(yè)途徑得到。GH接枝與聚合物的酸性基團(tuán)的結(jié)合通過聚氨基酸在碳二酰亞胺作為結(jié)合劑以及可選的催化劑存在下的反應(yīng)容易地進(jìn)行，所述催化劑如4-二曱基氨基吡咬。所述反應(yīng)在合適的溶劑中進(jìn)行，如二曱基曱酰胺(DMF)、N-曱基吡咯啉(NMP)或二曱基亞砜(DMSO)。所述碳二酰亞胺例如二環(huán)己基碳二酰亞胺或二異丙基碳二間化學(xué)控制。"間隔子"對(duì)疏水接枝的功能化通過傳統(tǒng)的肽偶聯(lián)或通過酸催化的直4妄縮合實(shí)現(xiàn)。陽離子和可選的中性基團(tuán)與聚合物的酸性官能團(tuán)的偶聯(lián)在作為偶聯(lián)劑的氯曱酸酯存在下于合適的溶劑中在第二階段同時(shí)進(jìn)行，所述溶劑例如二曱基曱酰胺(DMF)、N-曱基吡咯啉(NMP)或二甲基亞砜(DMSO)。當(dāng)陽離子基團(tuán)含有兩個(gè)氨基官能基團(tuán)且化學(xué)上無法區(qū)分時(shí)(如線性二胺)，可以以兩個(gè)官能團(tuán)中的之一受保護(hù)的形式引入該陽離子基團(tuán)。在上述過程中則還應(yīng)增加除去保護(hù)基團(tuán)的最終步驟。結(jié)合基團(tuán)的聚合化學(xué)和反應(yīng)為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的傳統(tǒng)方法(例如，參見上述本申請(qǐng)人的專利、專利申請(qǐng))。根據(jù)本發(fā)明的制劑的制備的例子在實(shí)施例中詳細(xì)描述，可以參考。前述的根據(jù)本發(fā)明的制劑的特性使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠在所有基于聚合物PO的制劑中選擇同時(shí)滿足條件(a)、(b)、(c)和(d)的那些制劑，并且由此，那些制劑最能夠滿足前面所定義的要求。條件(c)和(d)尤其是選擇性的。如果制劑在pHf不形成膠體溶液，本領(lǐng)域技術(shù)人員將選擇一種聚合物，其在這個(gè)pH值時(shí)，具有大量非離子化的單體。另一方面，如果該聚合物沉淀，建議增加在這個(gè)pH時(shí)離子化單體的數(shù)目。重要地指出，違反直覺地，有些在pHf生成膠體溶液以及在生理pH沉淀的制劑會(huì)因?yàn)椴粷M足條件(d)而被排除。因此，條件(d)是本領(lǐng)域技術(shù)人員選捧根據(jù)本發(fā)明的制劑的方便的手段。重要地指出，條件(d)意味著本發(fā)明的制劑在低于或等于生理pH的pH值下沉淀。這是因?yàn)?，在?ml的根據(jù)本發(fā)明的酸制劑和lml的緩沖溶液Tp混合后，將在小于或等于緩沖溶液pH的pH值下觀察到沉淀，也就是說pH<7.2。選擇根據(jù)本發(fā)明的制劑的第二種方法是估計(jì)其沉淀因子PF。該因子通過以下方式評(píng)估a)沉淀pH的4企測(cè)，記錄為pH*在3-6.5的酸性pHf下，加載AP的膠體溶液以含有納米顆粒的澄清液體存在，其平均水動(dòng)力學(xué)直徑(根據(jù)T，實(shí)驗(yàn)的動(dòng)力學(xué)光散射檢測(cè))為低于或等于0.5jnm，優(yōu)選在5-500nm，更優(yōu)選在10-80nm。當(dāng)pH升高時(shí)，根據(jù)本發(fā)明的溶液必須在低于或等于生理pH的pH值沉淀。溶液沉淀的pIP值根據(jù)P試-瞼檢測(cè)。b)PF的確定根據(jù)TM方法4全測(cè)使0.5ml含有1mg聚合物PO的膠體溶液從pHf到pH*所需的氫氧化鈉的摩爾數(shù)An。通過定義C為聚合物PO在制劑中的濃度(以mg/g為單位)以及y為帶有疏水側(cè)接枝的聚合物PO的單體的摩爾分?jǐn)?shù)，制劑的沉淀因子PF通過下式計(jì)算A".C沉淀因子PF的計(jì)算的例子在實(shí)施例中給出。在本發(fā)明具體的實(shí)施中，根據(jù)本發(fā)明的制劑的特征是沉淀因子PF大于200,優(yōu)選大于400，更優(yōu)選大于800并且再優(yōu)選大于1500。根據(jù)本發(fā)明的制劑的一個(gè)意外的方面是在生理pH時(shí)沉淀期間形成的聚合物的鏈網(wǎng)絡(luò)使其能夠減緩活性成分(AP)的釋放，卻不會(huì)使該相同的活性成分(AP)截留在顆粒的內(nèi)部。因此，根據(jù)本發(fā)明的制劑能夠同時(shí)實(shí)現(xiàn)活性成分(AP)的持續(xù)釋放以及良好的生物利用度。優(yōu)選地，活性成分(AP)選自下組蛋白、糖蛋白、與一個(gè)或多個(gè)聚亞烷基二醇鏈結(jié)合的蛋白(優(yōu)選聚乙二醇(PEG):"PEG化蛋白")、肽、聚糖、月旨糖、寡聚核苦酸、多聚核香酸及其混合物，以及，更優(yōu)選地，選自以下亞組紅細(xì)胞生成素，例如促紅細(xì)胞生成素(epoetin)a、促紅細(xì)胞生成素(epoetin)p、達(dá)貝泊汀(darbepoetin)、交聚血纟工蛋(hemoglobinraffimer)、它們的類似物或衍生物；催產(chǎn)素、后葉加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、表皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)、促進(jìn)造血作用(hematopoiesis)的因子及其混合物、血液因子，如鏈激酶、奈替普酶(tenecteplase)、因子VII(a)或因子VII;血色素、細(xì)胞色素、白蛋白、泌乳刺激素、促黃體素釋放素、促黃體生成激素釋放激素(LHRH)及類似物，如亮丙瑞林、戈舍瑞林(goserelin)、曲普瑞林、布舍瑞林或那法瑞林；LHRH拮抗劑、LHRH竟?fàn)幩?competitors)、人體、豬或牛生長(zhǎng)激素(GH)、生長(zhǎng)素釋》丈因子、胰島素、生長(zhǎng)激素抑制素、胰高血糖素、白細(xì)胞介素或它們的混合物(IL-2，IL-ll,IL-12)、干擾素如干擾素a、a-2b、卩、P-la或y;胃泌激素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素(urogastrone)、分泌素、降血鈣素、腦啡肽、內(nèi)嗎啡肽(endomorphins)、血管緊縮素、促曱狀腺素釋放荷爾蒙(TRH)、腫瘤壞死因子(TNF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、生長(zhǎng)因子如貝卡普勒明(beclapermin)、曲弗明(trafermin)、安西司亭(ancestim)或角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、肝素酶(heparinase)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)、hANP、胰高血糖素樣肽(GLP-1)、VEG-F、重組乙肝表面抗原(rHBsAg)、腎素、細(xì)胞因子、緩激肽、桿菌肽、多粘菌素、黏菌素(colistins)、短桿菌酪肽、短桿菌肽、依那西普(etanercept)、伊米苦酶(imiglucerase)、屈曲可凈(drotrecogin)a、環(huán)孢菌素(cyclosporins)以及合成類似物、酶、細(xì)胞因子、抗體、抗原、疫苗的藥用活性改性物及片段，以及抗體如利妥昔單抗(rituximab)、英利昔單抗(infliximab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、阿達(dá)木單抗(adalimumab)、奧馬珠單抗(omalizumab)、托西莫單抗(tositumomab)、依法珠單抗(efalizumab)和西妥昔單抗(cetuximab)。其他合適的活性成分為聚糖(如肝素)和寡聚或多聚核苷酸、DNA、RNA、iRNA、抗生素和活細(xì)胞。另一類合適的活性成分包括作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥用物質(zhì)，例如利培酮(risperidone)、珠氯瘞醇(zuclopenthixo1)、氟非那。秦(fluphenazine)、幾p底氯丙"秦(perphenazine)、氟p底p塞p屯(flupentixo1)、氟旅丁苯(haloperidol)、氟斯必靈(fluspirilene)、全硫平(quetiapine)、氯氮平、卩可米舒'義、矛J(amisulprid)、名f'義、矛J(sulpiride)、齊^立西酉同(ziprasidone)等。根據(jù)一個(gè)可選的形式，活性成分為疏水、親水或兩性的小的有機(jī)分子，其屬于蒽環(huán)類、紫杉烷類或喜樹堿類，或者屬于肽類，例如亮丙瑞林或環(huán)孢素，以及其混合物。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，活性成分優(yōu)選自至少一種下列活性物質(zhì)治療濫用酒精的藥劑、治療老年癡呆癥的藥劑、麻醉劑、治療肢端肥大癥的藥劑、止痛劑、平喘藥、治療過敏的藥劑、抗癌劑、抗炎劑、抗凝血?jiǎng)┖涂寡ㄐ纬蓜?、抗驚厥藥物、抗癲癇藥物、抗糖尿病藥物、止吐劑、抗青光眼劑、抗組胺劑、抗感染藥、抗生素、抗真菌劑、抗病毒劑、抗帕金森藥劑、抗膽石咸劑、止咳藥、碳酸酐酶抑制劑、心血管藥劑、降血脂藥、抗心律失常藥、血管擴(kuò)張劑、防心絞痛藥劑、抗高血壓藥物、血管保護(hù)劑(vasoprotectants)、膽堿脂酶抑制劑、治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂藥物、中樞神經(jīng)系統(tǒng)刺激劑、避孕藥、生育促進(jìn)劑(fertilitypromoters)、生產(chǎn)促進(jìn)劑或抑制劑、治療變性的藥物、多巴胺受體激動(dòng)劑、治療子宮內(nèi)膜異位的藥劑、治療勃起功能障礙的藥劑、治療不孕癥的藥劑、治療腸胃紊亂的藥劑、免疫調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑、治療記憶紊亂的藥劑、治療偏頭痛的藥劑、肌肉松馳劑、核苷類似物、治療骨質(zhì)疏松的藥劑、擬副交感神經(jīng)劑、前列腺素、心理治療藥劑、鎮(zhèn)靜劑、催眠劑和鎮(zhèn)定劑、安定藥、抗焦慮藥、精神興奮劑、抗抑郁藥、皮膚治療藥劑、類固醇和激素、安非他明、食^r臾抑制劑、非鎮(zhèn)痛止痛劑(nonanalgesicpainkillers),巴比妥酸鹽、苯并二氮雜卓類、瀉藥、精神藥物以及它們的任意組合。本發(fā)明的制劑可以通過口、非腸道、鼻、陰道、眼、皮下、靜脈、肌內(nèi)、皮內(nèi)、透皮、腹膜內(nèi)、腦內(nèi)或口腔給藥。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了一種方法，用于制備基于聚合物PO的用于持續(xù)釋》丈至少一種活性成分的制劑，這些制劑尤其是前面所描述的那些制劑，該方法包括以下步驟1)在pH3-6.5下制備前面定義的聚氨基酸聚合物(PO)的水性膠體溶液，其陽離子基團(tuán)(CG)、疏水基團(tuán)(GH)、可選的中性基團(tuán)(NG)和可選的谷氨酸酯各自的摩爾分?jǐn)?shù)使lml所述制劑在和lml體積的試驗(yàn)緩沖溶液Tp混合期間沉淀；以及2)將至少一種活性成分(AP)加入到步驟1獲得的聚合物(PO)中，所述活性成分和所述聚合物(PO)的膠體溶液的顆粒非共價(jià)地結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)主要特征是通過簡(jiǎn)單混合聚電解質(zhì)聚合物(PO)的顆粒的膠體溶液和活性成分(AP),在3-6.5的pHf下自發(fā)形成加載活性成分的顆粒。活性成分，例如蛋白質(zhì)、肽或小分子，可以和聚氨基酸型的聚合物(PO)自發(fā)地結(jié)合。在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，將活性成分(AP)加載到聚電解質(zhì)聚合物(PO)的納米顆粒是通過筒單混合活性成分(AP)的溶液和聚電解質(zhì)聚合物(PO)的膠體溶液完成的。這種結(jié)合完全是物理的，并且不涉及活性成分(AP)和聚合物(PO)間共價(jià)鍵的形成。不希望被理論束縛，也可以假設(shè)這種非特異性結(jié)合通過聚合物(PO)和活性成分(AP)之間的疏水和/或靜電相互作用產(chǎn)生。應(yīng)當(dāng)注意的是，通過肽特性的或抗原/抗體或者酶/底物型的特異性受體將AP結(jié)合到PO納米顆粒是不必要的，甚至經(jīng)常是不理想的。在根據(jù)本發(fā)明的方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，該方法不包括所得顆粒的化學(xué)交聯(lián)步驟。因此，所得的顆粒不是化學(xué)交聯(lián)的但可以持續(xù)釋放活性成分(AP)達(dá)一段時(shí)間。不使用化學(xué)交聯(lián)是一個(gè)決定性的優(yōu)點(diǎn)。這是因?yàn)椴皇褂没瘜W(xué)交聯(lián)能夠避免活性成分(AP)的化學(xué)降解，其可能發(fā)生在交聯(lián)含有所述活性成分(AP)的顆粒的步驟中。這是因?yàn)檫@種化學(xué)交聯(lián)通常通過可聚合實(shí)體的活化來進(jìn)4亍，并且可能涉及變性試劑，例如UV照射或戊二醛。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的方法包括脫水步驟，例如通過凍干液體制劑來獲得干燥粉末形式的制劑。本發(fā)明還涉及持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)的固體藥物制劑，其含有干燥粉末形式，這種干燥粉末形式從前面描述的含有液體混懸物的液體制劑獲得。將根據(jù)本發(fā)明的液體制劑的pH值調(diào)到7,在體外將其沉淀，然后通過例如凍干將其脫水，可以獲得干燥粉末。優(yōu)選地，這種固體藥物制劑用于吸入和肺部給藥。根據(jù)另一方面，本發(fā)明的主題是一種制備藥品的方法，所述藥品尤其用于非腸道、粘膜、皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)、透皮、腹膜內(nèi)、腦內(nèi)給藥或者肺瘤內(nèi)給藥，通過口腔、鼻腔、肺部、陰道或眼部途徑給藥，所述方法主要是使用至少一種前面描述的制劑。圖1:實(shí)施例2.1(黑三角形)、實(shí)施例2.3(黑菱形)、實(shí)施例3(黑方塊)和實(shí)施例5(實(shí)線)描述的制劑中IFN-a的體外釋放。具體實(shí)施方式"合^a)^凝,/:夢(mèng)^"蔬水差歷的厲,子型覆右^^覆合參尸0的合試廣蕃戎7合^'襲源的Ct-^^覆各產(chǎn)^#1^合>0在8(TC加熱15ga-L-聚谷氨酸，相對(duì)于聚氧乙烯標(biāo)準(zhǔn)的分子量約為16900Da,直到其溶解在288ml二曱基曱酰胺(DMF)里。將溶液冷卻至15°C,連續(xù)加入預(yù)先溶解在8mlDMF里的2.5gD,L-a-生育酚(〉98%,購(gòu)自Fluka)、預(yù)先溶解在1mlDMF里的280mg4-二曱基氨基吡啶和預(yù)先溶解在6mlDMF里的1.6g二異丙基碳二亞胺。攪拌3小時(shí)后，將反應(yīng)介質(zhì)倒入1200ml含有15。/o的氯化鈉和鹽酸(pH-2)的水中。然后通過過濾回收沉淀的聚合物，并用O.IN鹽酸、水和二異丙醚洗滌。然后該聚合物在4(TC真空箱中干燥，得到的產(chǎn)率約為卯％。用體積排除色譜法測(cè)得的相對(duì)于聚氧乙烯標(biāo)準(zhǔn)的分子量為15500。用質(zhì)子NMR光譜法評(píng)估的生育酚的接枝比例為5.1mol%。w/^離子炎右麻{處合參P6M/的合^y凝戎:r合^^源^a-^f發(fā)和逸麼瘋屋^菜各瘋^#1^合<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>符號(hào)和基團(tuán)111=11、p=209、q=0、T二D,L-a-生育酚(T)將3g任意接合了5%的外消旋的a-生育酚的聚合度DP為220的聚(谷氨酸)在80。C下溶于38ml的NMP中。該溶液冷卻至0°C,加入2.74g氯曱酸異丁酯以及2.2mlN-曱基嗎啉。該反應(yīng)介質(zhì)在0。C攪拌10min。同時(shí)，將8.65g組胺酰胺二鹽酸鹽懸浮于108ml的NMP中，并加入10.6ml三乙胺。所得懸浮液在20。C攪拌數(shù)分鐘，然后冷卻至0。C。然后，將活化聚合物的溶液加入該組胺酰胺懸浮液，反應(yīng)介質(zhì)在0。C攪拌2小時(shí)，之后在2(TC攪拌過夜。加入0.62ml35%的HC1溶液，再加入83ml水。所得溶液隨后倒入500mlpH3-4的水中。該溶液分別經(jīng)8倍體積的水性鹽溶液(0.9。/。NaCl)和44咅體積的水過濾，聚合物溶液然后濃縮至約300ml(聚合物濃度為18mg/g)。通過D20中iHNMR測(cè)得組胺酰胺的接枝率為95%。d/^葛子,逸,者菜合參PCM2的合A廣凝戎7合^來源的a-^:f惑Vpjg展瘋展^,谷減^游^合成)符號(hào)和基團(tuán)m:44、p=154、q=22、T=D,L-a-生育酚(T)將10g任意接合了20%的外消旋的a-生育酚的聚合度DP為220的聚(谷氨酸)在80。C下溶于125ml的NMP中。該溶液冷卻至0°C，加入5.5g氯曱酸異丁酯以及4.4mlN-甲基嗎啉。該反應(yīng)介質(zhì)在0。C攪拌10min。同時(shí)，將12.9g組胺酰胺二鹽酸鹽懸浮于161ml的NMP中，并加入15.8ml三乙胺。所得懸浮液在2(TC攪拌數(shù)分鐘，然后冷卻至0。C。然后，將活化聚合物的溶液加入該組胺酰胺懸浮液，反應(yīng)介質(zhì)在0。C攪拌2小時(shí)，之后在20。C攪拌過夜。加入1.46ml35%的HC1溶液，再加入200ml水。再加入200ml水和650ml乙醇，所得溶液隨后倒入650mlpH3-4的水中。該溶液分別經(jīng)8倍體積的水性鹽溶液(0.9。/。NaCl)和4倍體積的水過濾，聚合物溶液最后濃縮至250ml(聚合物濃度為50mg/g)。通過020中NMR測(cè)得組胺酰胺的接枝率為70%。必/^庠子,^廨/^變合參POA^合4,凝農(nóng)7合A耒源的a-^:,惑、、乙莽應(yīng)希潛減教廢的炎谷瘋^游的會(huì)必<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>符號(hào)和基團(tuán)T-D，L-a畫生育酚，p=ll,q=88,r=48,s=73將任意接合了5%的外消旋的a-生育酚的10g聚合度DP為220的聚(谷氨酸)在80。C下溶于125ml的NMP中。該溶液冷卻至0°C，加入5.6ml氯曱酸異丁酯以及4.8mlN-曱基嗎啉。該反應(yīng)混合物在0。C攪拌15min。同時(shí)，將7.4g精氨酰胺二鹽酸鹽懸浮于93ml的NMP中，加入4.7ml三乙胺和1.2ml乙醇胺。在20。C攪拌該懸浮液數(shù)分鐘，冷卻至0°C。然后，將活化聚合物的乳狀懸浮液加入該懸浮液中，反應(yīng)混合物在0。C攪拌2h，然后在20。C攪拌過夜。加入2.07ml35%的HCl溶液和200ml水后，反應(yīng)混合物逐滴滴入670ml用HCl酸化至pH=3的水中，同時(shí)用INHCl溶液將pH維持在約為3。得到的溶液分別經(jīng)8倍體積的水性鹽溶液(0.9%)和4倍體積的水過濾，并濃縮至體積約250ml。通過D20中質(zhì)子NMR測(cè)得精氨酰胺和乙醇胺的接枝率分別為40%和22%。",施辦J(^較鄉(xiāng)；差于不夢(mèng)才/^葛子衍蘭參^果合參戶0#浙^^合成a)使用了根據(jù)前述合成a)獲得的聚合物PO。用2.19g水稀釋12.64gPO的溶液獲得24mg/g的聚合物PO的膠體溶液。在分別加入必須量的水性NaCl溶液和NaOH溶液后，膠體PO溶液的滲透壓及其pH調(diào)節(jié)為290mOsm和pH6.95。所得制劑的特征匯總在下表<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>基于前述聚合物PO的制劑在將lml后者加入到lml緩沖溶液Tp期間不沉淀。3_>《滋辦2:差f菜合參尸C^4/的劍浙3力PCM/的^t^爭(zhēng)于70mg/g，舍才/iW-aa)PO-A1膠體溶液的制備使用了根據(jù)前述合成b)獲得的聚合物PO-Al。PO-Al用水稀釋，調(diào)節(jié)(適量的NaOH溶液)其pH，調(diào)節(jié)(適量的NaCl溶液)其滲透壓。_<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>所得基于聚合物PO-A1的膠體溶液在將1ml后者加入到1ml緩沖溶液Tp期間沉淀，其特征在于沉淀因子PF=860。聚合物PO-Al的特4正在于pJP等于6.5。b)聚合物PO-A1和蛋白質(zhì)的結(jié)合2.18g2.4mg/g的蛋白質(zhì)IFN-a加入到8gPO-A1的月交體溶液中，通過適量的NaCl溶液(0.18g)稀釋以調(diào)節(jié)最終濃度。c)25。C結(jié)合過夜最終制劑的特征匯總在下表粒徑根據(jù)T'試-驗(yàn)4企測(cè)<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>3."《滋^/22..PCM7的求產(chǎn)爭(zhēng)于45mg/g使用了根據(jù)前述合成b)獲得的聚合物PO-Al。P0-A1用水稀釋，調(diào)節(jié)(適量的NaOH溶液)其pH，調(diào)節(jié)(適量的NaCl溶液)其滲透壓。_<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>所得基于聚合物PO-A1的膠體溶液在將1ml后者加入到1ml緩沖溶液Tp期間不沉淀，其特征在于沉淀因子PF-166。a)含有0.5叫.Zn"的聚合物PO-Al的膠體溶液的制備使用了根據(jù)前述合成b)獲得的聚合物PO-Al。PO-Al用水稀釋，調(diào)節(jié)(適量的NaOH溶液)其pH，調(diào)節(jié)(適量的NaCl溶液)其滲透壓。__<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>b)聚合物PO-Al和蛋白質(zhì)的結(jié)合2.18g2.4mg/g的蛋白質(zhì)IFN-a加入到7.96g步驟a)制備的PO-Al的膠體溶液中，通過適量的NaCl溶液(0.18g)稀釋以調(diào)節(jié)最終濃度。c)25。C結(jié)合過夜d)211++陽離子的添加需要量的204mg/g濃縮的ZnCl2溶液加入到前面的制劑中以在溶液中實(shí)現(xiàn)每陽離子衍生物0.5摩爾當(dāng)量的Zn+7曰離子。最終制劑的特征匯總在下表粒徑根據(jù)T'試驗(yàn)檢測(cè)<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>所得基于聚合物PO-A1的膠體溶液在將lml后者加入到1ml緩沖溶液Tp期間沉淀，其特征在于沉淀因子PF=860。含有每陽離子衍生物0.5摩爾當(dāng)量211++陽離子的聚合物PO-A1的特征在于pl^等于4.8。O^滋辨3:含l/FiV-a^^于50挑g/g,合參^樹游a)PO-A2膠體溶液的制備使用了根據(jù)前述合成c)獲得的聚合物PO-A2。PO-A2用水稀釋，調(diào)節(jié)(適量的NaOH溶液)其pH,調(diào)節(jié)(適量的NaCl溶液)其滲透壓。<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>所得基于聚合物PO-A2的膠體溶液在將1ml后者加入到1ml緩沖溶液Tp期間沉淀，其特征在于沉淀因子PF=840。聚合物PO-A2的特征在于pH+等于6.5。b)聚合物PO-A2和蛋白質(zhì)的結(jié)合2.18g2.4mg/g的蛋白質(zhì)IFN-a加入到8gPO-A2的膠體溶液中，通過適量的NaCl溶液(0.18g)稀釋以調(diào)節(jié)最終濃度。c)25t:結(jié)合過夜最終制劑的特征匯總在下表粒徑一艮據(jù)T'試-驗(yàn)4企測(cè)<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>5)含才-戈不舍才7F/V-a邦差于果合參/^-5的辦浙5力豸滋辦4厶'PO-B的求產(chǎn)爭(zhēng)f70mg/g，^^^ViW-aa)PO-B月交體溶液的制備使用了根據(jù)前述合成d)獲得的聚合物PO-B。PO-B用水稀釋，調(diào)節(jié)(適量的NaOH溶液)其pH，調(diào)節(jié)(適量的NaCl溶液)其滲透壓。<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>所得基于聚合物PO-B的膠體溶液在將lml后者加入到lml緩沖溶液Tp期間沉淀，其特征在于沉淀因子PF=1150。聚合物PO-B的特征在于pH^等于5。b)聚合物PO-B和蛋白質(zhì)的結(jié)合1.8g2.7mg/g的蛋白質(zhì)IFN-oc加入到8gPO-B的月交體溶液中，通過適量的NaCl溶液(0.18g)稀釋以調(diào)節(jié)最終濃度。c)25"C結(jié)合過夜最終制劑的特征匯總在下表:粒徑纟艮據(jù)T'試驗(yàn)4企測(cè)<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>如前面制備的制劑的特征在于Q試驗(yàn)中的保留因子RQ大于5(游離IFN-a的ELISA試驗(yàn)顯示RQ=5:8%)。5.《滋辦4.2,PO-5的求i爭(zhēng)于45mg/g使用了根據(jù)前述合成d)獲得的聚合物PO-B。PO-B用水稀釋，調(diào)節(jié)(適量的NaOH溶液)其pH,調(diào)節(jié)(適量的NaCl溶液)其滲透壓。__<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>所得基于聚合物PO-B的膠體溶液在將1ml后者加入到1ml緩沖溶液Tp期間沉淀，其特征在于沉淀因子PF=256。聚合物PO-B的特征在于pH*等于5。0;^鄉(xiāng)(^談棘'^7F7V-ag于/Y^覆在W賴備使用了根據(jù)前述合成a)獲得的聚合物PO。通過將其溶解在水中獲得聚合物PO的膠體溶液，加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為7.52。該〗容液的滲透壓通過加入必要量的7K性NaCl溶液調(diào)節(jié)至108mOsm。聚合物PO的濃度調(diào)節(jié)到29.05mg/g。濃縮的2.4mg/g蛋白質(zhì)IFN-oc加入到前述的聚合物PO的膠體溶液中。在25。C結(jié)合過夜。最終制劑的特征匯總在下表:粒徑根據(jù)T'試—驗(yàn)4會(huì)測(cè)<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>為此，使用L試驗(yàn)檢測(cè)從根據(jù)本發(fā)明的制劑釋放活性成分L試驗(yàn)中的釋放如圖1所示，其形式為所釋放蛋白質(zhì)的隨著時(shí)間的百分?jǐn)?shù)。含有23mg/g的PO顆粒的比較實(shí)施例5的制劑，其釋》t曲線的特征顯示10小時(shí)內(nèi)釋放93%的蛋白質(zhì)。實(shí)施例2.1和3的制劑顯示出延遲釋放的曲線，其在48小時(shí)分別釋放所注射蛋白質(zhì)的67%和65%。關(guān)于實(shí)施例2.3的顆粒，觀察到了釋放流的產(chǎn)生，它在試-驗(yàn)結(jié)束時(shí)不為0，48小時(shí)釋放了所注射蛋白質(zhì)的59%。"豸滋辨2、3和5^謬沖,發(fā)44只大鼠分成5組，每組8或12只，平行地接受速釋IR制劑或?qū)?yīng)于比較實(shí)施例5的持續(xù)釋放制劑，或本發(fā)明的實(shí)施例2和3的制劑之一，劑量為300jug/kg。藥動(dòng)學(xué)結(jié)果匯總在下表<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>cmax代表所有動(dòng)物的平均最大血漿蛋白質(zhì)濃度。Tmax平均值代表血漿濃度達(dá)到最大值時(shí)的平均時(shí)間。AUC代表作為時(shí)間函數(shù)的血漿濃度曲線下的平均面積。T50%AUC代表曲線下面積到達(dá)其總數(shù)值50%的平均時(shí)間和IR相比，所有制劑的持續(xù)釋放曲線伴隨著Cm狄的下降。和比較實(shí)施例5相比，所有根據(jù)本發(fā)明的制劑的末端斜率更低，表示持續(xù)的殘留吸收。對(duì)于實(shí)施例2.1和實(shí)施例3的制劑(10mg/gP0-A1和30mg/gPO-A2),應(yīng)該注意其持續(xù)釋放長(zhǎng)達(dá)5天以上(和比較實(shí)施例5的大約3天相比)，RBA值分別為57%和大約100%。權(quán)利要求1.一種液體藥物制劑，用于持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)，所述藥物制劑含有至少一種活性成分(AP)和水性懸浮液，所述水性懸浮液基于聚合物(PO)或者其藥學(xué)上可接受鹽的膠體顆粒，其中所述制劑滿足以下四個(gè)條件(a)聚合物(PO)是聚氨基酸，含有谷氨酸殘基，其中-一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛陽離子基團(tuán)(CG)，所述陽離子基團(tuán)各自相同或者不同，-另一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛疏水基團(tuán)(GH)，所述疏水基團(tuán)(GH)各自相同或者不同，-可選地，又一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛中性基團(tuán)(NG)，所述中性基團(tuán)(NG)各自相同或者不同，以及-可選地，再一部分谷氨酸殘基未經(jīng)改性；(b)所述制劑的pH的pHf值為3.0-6.5；(c)在pHf值下，該聚合物(PO)形成膠體溶液，其自發(fā)并非共價(jià)地和活性成分(AP)結(jié)合；以及(d)1ml所述制劑在和1ml體積的試驗(yàn)緩沖溶液Tp混合期間沉淀。2.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑的沉淀因子PF大于200，優(yōu)選大于400，優(yōu)選大于800,更優(yōu)選大于1500。3.如權(quán)利要求2所述的制劑，其中所述制劑的保留因子RQ大于5,優(yōu)選大于10，優(yōu)選大于15,更優(yōu)選大于20。4.如權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的制劑，聚合物(PO)的結(jié)構(gòu)為pGlu(x)GH(y)CG(z)NG(1_x-y-z)，其聚合度(DP)為50-300,優(yōu)選100-250，其中(x)為0-0.45，(y)為0.02-0.3,(z)為0.4-0.98并且l-x畫y-z為0-0.5。5.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述陽離子基團(tuán)(CG)選自半-中性pH值低于7.0的弱堿。6.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述陽離子基團(tuán)(CG)選自含有半-中性pH大于8.0的至少一種季銨或至少一種強(qiáng)堿的陽離子基團(tuán)。7.如權(quán)利要求6所述的制劑，其中所述陽離子基團(tuán)(CG)選自以下基團(tuán)-NH-(CH2)W-NH3+,Z-,其中w為2-6，優(yōu)選w為4,<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>和下式的氨基酸殘基或氨基酸衍生物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中-R1是烷氧基，優(yōu)選-OMe或-OEt，或者-R1是-雨2、烷基氨基，優(yōu)選-NH-CH3或-N(CH3)2;-R13是—(CH2)4-NH3+，Z-、-(CH2)3-NH-C(=NH)-NH3+，Z國(guó)、-(CH2)3-NH3+,Z-;其中，z-是氯化物、硫酸鹽、磷酸鹽或醋酸鹽，優(yōu)選氯化物。8.如權(quán)利要求3、6和7任何一項(xiàng)所述的制劑，其中隱x為10-55%，-y為2-30%，-z大于或等于10%并且為(x-10)%-(x+15)%，對(duì)應(yīng)于其它百分?jǐn)?shù)的中性基團(tuán)的數(shù)目使總數(shù)達(dá)到100%并且可選地等于9.如權(quán)利要求3、6和7任何一項(xiàng)所述的制劑，其中隱x為20-55%,-y為2-7.5%，，-z大于或等于20。/。并且為(x-10)%-(x+15)%，對(duì)應(yīng)于其它百分?jǐn)?shù)的中性基團(tuán)的數(shù)目使總數(shù)達(dá)到100°/。并且可選地等于10.如權(quán)利要求1或4所述的制劑，其中所述疏水基團(tuán)(GH)選自以下組直鏈或支鏈的Cs-C30的烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子，C8-C3。的烷基芳基或芳基烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子，以及c8-c3。的(聚)環(huán)化合物，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子。11.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述中性基團(tuán)(NG)選自以下組羥基乙基胺-基、羥基烷基氧-基和聚氧亞烷基。12.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述聚合物(PO)帶有至少一個(gè)與谷氨酸酯殘基相連的聚亞烷基(優(yōu)選為聚乙烯)二醇型的接枝。13.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述聚氨基酸(PO)具有下列式(I):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中■A獨(dú)立地是--NHR基團(tuán)，其中R為H、直鏈C2-do或支鏈Crdo烷基或苯曱基，-具有下式的末端氨基酸殘基或末端氨基酸衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中，R7為OH、-0119或—NHR1Q,并且R8、W和R"獨(dú)立地是H、直鏈C2-Qo或支鏈C3和do的烷基或苯曱基；■B為直接鍵或二價(jià)、三價(jià)或四價(jià)鍵基團(tuán)，優(yōu)選自以下基團(tuán)-O-、-NH-、-N(C廣Cs烷基)-、氨基酸(優(yōu)選天然氨基酸)殘基、二醇?xì)埢?、三醇?xì)埢?、二胺殘基、三胺殘基、含?-6個(gè)碳原子的氨基醇或羥基酸殘基；■D為H、直鏈C2-do或支鏈C3-do的?；蚪构劝彼狨?；■疏水基團(tuán)GH各自獨(dú)立，為選自下組的基團(tuán)直鏈或支鏈C8-C3q的烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選為0和/或N和/或S)，或者C8-C3G的烷基芳基或芳基烷基，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選為0和/或N和/或S),或者Cs-C3()的(聚)環(huán)化合物，其可選地含有至少一個(gè)不飽和度和/或至少一個(gè)雜原子(優(yōu)選為0和/或N和/或S);■R7。是選自下組的基團(tuán)-NH-(CH2)w-NH3+，其中w為2-6，并且優(yōu)選w為4，-NH-(CH2)4-NH-C(=NH)-NH3+,-0-(CH2)2-NH3+,-0-(CH2)2-N+(CH3)3，-下式的基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中—R"是-H、-C02H、烷基酉旨(優(yōu)選一COOMe和—COOEt)、-C(=0)-NH2、-C(=0)-NH-CH3或—C(=0)-N(CH3)2;-下式的氨基酸殘基或氨基酸衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中X為-O-或-NH-,R^為H、直鏈C2-CH)或支鏈C3-do烷基或苯曱基，R'3為-(CH2)4-NH3+、-(CH2)3NH-C(=NH)-NH3+、-(CH2)3NH3+;R7o的抗衡陰離子為有利的基團(tuán)，優(yōu)選為氯化物；■R9o是羥基乙基氨基-、羥基烷基氧基-或聚氧亞烷基；■p、q、r和s是正整數(shù)；■(p)/(p+q+r+s)為疏水基團(tuán)GH的摩爾接枝率，若每個(gè)共聚物鏈平均具有至少3個(gè)疏水接枝，則所述接枝率為2-30mol%;■(q)/(p+q+r+s)為陽離子基團(tuán)的摩爾接枝率'為10-98mol%;■(p+q+r+s)為50-300,優(yōu)選為100-250;■(r)/(p+q+r+s)為0-78mol0/o;■(s)/(p+q+r+s)為0-55mol%。14.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述聚合物(PO)或其藥學(xué)上可接受的鹽在制劑中的濃度為4-50mg/ml。15.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述活性成分(AP)的濃度和聚合物(PO)或其藥學(xué)上可接受的鹽的濃度的比值R為0.0001-1.5。16.如權(quán)利要求1所述的制劑，其含有2!1++二價(jià)陽離子，相對(duì)于陽離子基團(tuán)(CG)的摩爾濃度，所述211++二價(jià)陽離子的比例為0.05-2摩爾當(dāng)量。17.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑不含有添加的二價(jià)陽離子。18.如權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述活性成分(AP)選自下組蛋白、糖蛋白、與一個(gè)或多個(gè)聚亞烷基二醇鏈[優(yōu)選聚乙二醇(PEG):"PEG化蛋白"]結(jié)合的蛋白、肽、聚糖、脂糖、寡聚核苷酸、多聚核苷酸及其混合物，以及，更優(yōu)選地，選自以下亞組紅細(xì)胞生成素，例如促紅細(xì)胞生成素a、促紅細(xì)胞生成素p、達(dá)貝泊汀、交聚血紅蛋、它們的類似物或衍生物；催產(chǎn)素、后葉加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、表皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)、促進(jìn)造血作用的因子及其混合物、血液因子，如鏈激酶、奈替普酶、因子VII(a)或因子VII;血色素、細(xì)胞色素、白蛋白、泌乳刺激素、促黃體素釋放素、促黃體生成激素釋放激素(LHRH)及類似物，如亮丙瑞林、戈舍瑞林、曲普瑞林、布舍瑞林或那法瑞林；LHRH拮抗劑、LHRH竟?fàn)幩帯⑷梭w、豬或牛生長(zhǎng)激素(GH)、生長(zhǎng)素釋放因子、胰島素、生長(zhǎng)激素抑制素、胰高血糖素、白細(xì)胞介素或它們的混合物(IL-2、IL-ll、IL-12)、干擾素如干擾素a、a-2b、卩、卩-la或y;胃泌激素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素、分泌素、降血鈣素、腦啡肽、內(nèi)嗎啡肽、血管緊縮素、促曱狀腺素釋放荷爾蒙(TRH)、腫瘤壞死因子(TNF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、生長(zhǎng)因子如貝卡普勒明、曲弗明、安西司亭或角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、肝素酶、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)、hANP、胰高血糖素樣肽(GLP-1)、VEG-F、重組乙肝表面抗原(rHBsAg)、腎素、細(xì)胞因子、緩激肽、桿菌肽、多粘菌素、黏菌素、短桿菌酪肽、短桿菌肽、依那西普、伊米苷酶、屈曲可凈a、環(huán)孢菌素以及合成類似物、酶、細(xì)胞因子、抗體、抗原、疫苗的藥用活性改性物及片段，以及抗體如利妥昔單抗、英利昔單抗、曲妥珠單抗、阿達(dá)木單抗、奧馬珠單抗、托西莫單抗、依法珠單抗和西妥昔單抗。19.一種固體藥物制劑，用于持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP)，含有從如權(quán)利要求1-18任何一項(xiàng)的液體制劑所獲得的干燥粉末形式。20.—種制備如權(quán)利要求l-18任何一項(xiàng)的制劑的方法，所述制劑用于持續(xù)釋放至少一種活性成分(AP),所述方法包括步驟1)在pH3-6.5下制備聚氨基酸聚合物(PO)的水性膠體溶液，所述聚氨基酸聚合物(PO)含有谷氨酸殘基，其中-一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛陽離子基團(tuán)(CG)，所述陽離子基團(tuán)各自相同或者不同，，-另一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛疏水基團(tuán)(GH)，所述疏水基團(tuán)(GH)各自相同或者不同，-可選地，又一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛中性基團(tuán)(NG),所述中性基團(tuán)(NG)各自相同或者不同，以及-可選地，再一部分谷氨酸殘基未經(jīng)改性；其中陽離子基團(tuán)(CG)、疏水基團(tuán)(GH)、可選的中性基團(tuán)(NG)和可選的谷氨酸酯各自的摩爾分?jǐn)?shù)使1ml所述制劑在和1ml體積的試驗(yàn)緩沖溶液Tp混合期間沉淀；以及2)將至少一種活性成分(AP)加入到步驟1獲得的聚合物(PO)中，所述活性成分和所述聚合物的膠體溶液的顆粒非共價(jià)地結(jié)合。全文摘要本發(fā)明涉及新型的藥物制劑，用于在幾天，或者甚至幾周的時(shí)間，持續(xù)釋放活性成分(AP)。本發(fā)明第一方面涉及一種液體藥物制劑，其含有至少一種活性成分(AP)和水性懸浮液，所述水性懸浮液基于聚合物(PO)的膠體顆粒，其中所述制劑滿足以下四個(gè)條件(a)聚合物(PO)是聚氨基酸，含有谷氨酸殘基，其中一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛陽離子基團(tuán)(CG)，所述陽離子基團(tuán)各自相同或者不同，另一部分谷氨酸殘基每個(gè)都帶有垂掛疏水基團(tuán)(GH)，所述疏水基團(tuán)(GH)各自相同或者不同，(b)所述制劑的pH的pHf值為3.0-6.5；(c)在pHf值下，該聚合物(PO)形成膠體溶液，其自發(fā)并非共價(jià)地和活性成分(AP)結(jié)合；以及(d)1ml所述制劑在和1ml體積的試驗(yàn)緩沖溶液Tp混合期間沉淀。本發(fā)明還涉及一種制備所述制劑的方法和一種制備含有所述制劑的藥物的方法。文檔編號(hào)A61K9/00GK101674809SQ200880014417公開日2010年3月17日申請(qǐng)日期2008年5月5日優(yōu)先權(quán)日2007年5月3日發(fā)明者塞西爾·博內(nèi)-戈內(nèi),奧利維耶·布雷納,弗雷德里克·舍科特,陳幼平,雷米·梅呂?？怂股暾?qǐng)人:弗拉梅技術(shù)公司