專利名稱：：治療全身性紅斑狼瘡的肽和治療全身性紅斑狼瘡的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及層粘連蛋白肽和層粘連蛋白衍生物，包括R38肽和相關(guān)類似物在治療和檢測(cè)全身性紅斑狼瘡中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供治療全身性紅斑狼瘡的方法。本發(fā)明還提供降低患者血漿中抗-R38抗體水平的方法。
背景技術(shù)：
：全身性紅斑狼瘡(SLE)是涉及多器官的自身免疫疾病。由于腎臟參與該自身免疫炎性過(guò)程，狼瘡腎小球腎炎是該疾病發(fā)病率和死亡率的主要原因(Alarcon-SegoviaD.刊于《風(fēng)濕病入門(mén)》(PrimerontheRheumaticDiseases.)，Schumascher，H.R編，關(guān)節(jié)炎基金會(huì)(ArthritisFoundation)，亞特蘭大，佐治亞州，(1988)，第96-100頁(yè))。在血清學(xué)上，該疾病的特征在于血清中產(chǎn)生各種自身抗體，其中最主要的是抗-DNA自身抗體(N即arstekY.等，Ann.Rev.Immunol.(1993)，U，79-104)。雖然在各禾中炎性和自身免疫疾病中可能產(chǎn)生低滴度的抗-DNA抗體，但高水平的抗-DNA抗體主要發(fā)生在SLE中，實(shí)際上，高抗-DNA抗體水平與低補(bǔ)體水平相組合是SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)(Wallace,D.J.等，刊于《杜氏紅斑狼疫》(Dubois'LupusErythematosus)，Lea和Febiger，費(fèi)城，(1993))。通過(guò)染色狼瘡患者的腎臟或小鼠的狼瘡染色顯示有免疫球蛋白與腎小球基底膜(GBM)結(jié)合(Wallace,D.J.等，同上)。從狼瘡患者腎臟以及MRL/lpr/lpr小鼠腎臟洗脫的抗-DNA抗體顯示與硫酸化氨基葡聚糖交叉反應(yīng)，而血清抗-DNA抗體未顯示該交叉反應(yīng)性(N即arstek，Y.等，ArthritisRheum.(1990)，皿，1554-1559)。這些結(jié)果提示胞外基質(zhì)(ECM)作為致腎炎自身抗體的靶位而在狼瘡的發(fā)病機(jī)理中起作用。TermmatR.M.等公開(kāi)了ECM諸組分，例如層粘連蛋白和肝素與鼠單克隆抗-DNA抗體交叉反應(yīng)(J.Autoimmun.(1990)，2,531-545)。歐洲專利申請(qǐng)670，495公開(kāi)了活性狼瘡患者的尿液中存在抗-ECM抗體。此外，EP670，495公開(kāi)了這些抗體與ECM的200kDa層粘連蛋白組分的交叉反應(yīng)，以及基于檢測(cè)尿液中這些抗-ECM/層粘連蛋白抗體的SLE試驗(yàn)。R38是從鼠層粘連蛋白k鏈的C-末端區(qū)域分離的肽序列(殘基2890-2910，根據(jù)Skubitz等，J.Cell.Biol.(1991)，H^，1137-1148;或殘基2851_2871，根據(jù)Sasaki，M.等，J.Biol.Chem.(1998)，2M，16，536-16，544)。其位于球狀結(jié)構(gòu)域的第四和第五環(huán)的接合處(肽GD-2，Skubitz等，同上)，由以下氨基酸序列構(gòu)成:KEGYKVRLDLNITLEFRTTSK(SEQ.ID.NO.1)。目前的SLE療法局限于抑制過(guò)度反應(yīng)免疫系統(tǒng)的皮質(zhì)類固醇。該療法沒(méi)有特異性，其不可避免的副作用本身可能致命。此外，免疫抑制療法很復(fù)雜，要結(jié)合臨床癥狀、血液血清學(xué)檢驗(yàn)和腎臟活檢決定開(kāi)始該療法。因此，需要沒(méi)有免疫抑制劑副作用的特異性較高的SLE療法，以及特異性較高而介入性較低的試驗(yàn)來(lái)評(píng)估疾病活性。實(shí)際上，最近的綜述(TheLancet(1995)，310，1257-1261)表明雖然驗(yàn)血可用于證實(shí)SLE診斷，但"在監(jiān)測(cè)疾病活性中用處不大"。上述參考文獻(xiàn)無(wú)一公開(kāi)了通過(guò)給予R38肽或其類似物來(lái)治療SLE。此外，上述參考4文獻(xiàn)無(wú)一公開(kāi)了R38肽在SLE的診斷檢驗(yàn)或監(jiān)測(cè)SLE疾病活性中的應(yīng)用。上述所有這些專利或所有參考文獻(xiàn)的內(nèi)容通過(guò)引用全文納入本文。發(fā)明概述因此，本發(fā)明的目的是提供治療全身性紅斑狼瘡的方法，該方法包括給予層粘連蛋白肽。本發(fā)明的另一目的是提供治療SLE的方法，該方法包括體外除去對(duì)象血漿中的抗-R38(及其衍生物)抗體并將該血漿輸回該對(duì)象。本發(fā)明還有另一目的是公開(kāi)R38'和R38肽的其它類似物及衍生物，給予這些物質(zhì)構(gòu)成了治療SLE的方法。本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供SLE的診斷測(cè)試，所述測(cè)試?yán)肦38肽、R38'肽以及它們的其它結(jié)構(gòu)相關(guān)類似物和衍生物。本發(fā)明還涉及包含R38肽、R38'肽以及R38肽的其它新型類似物和衍生物或它們?cè)谒帉W(xué)上可接受的鹽的用于治療SLE的藥物組合物。本文所用的術(shù)語(yǔ)"R38肽"包括R38肽本身及其保留完整肽的活性的類似物、衍生物和片段。術(shù)語(yǔ)"類似物"應(yīng)包括通過(guò)，例如同源取代單個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基產(chǎn)生的肽的變體。術(shù)語(yǔ)"衍生物"包括可對(duì)R38本身作出的次要化學(xué)改變或保留R38本身生物學(xué)活性的其類似物，類似地，術(shù)語(yǔ)"片段"包括R38的截短分子。附圖簡(jiǎn)述圖1顯示C72鼠抗-DNA抗體直接結(jié)合層粘連蛋白肽；圖2顯示利用R38、5200、DNA、DNA酶和肝素抑制C72與R38類似物5200(本文中有時(shí)稱為R38')結(jié)合；圖3和4顯示人狼瘡單克隆抗-DNA抗體(DIL6和B3)結(jié)合層粘連蛋白肽及其衍生物；圖5、6和7顯示3位狼瘡患者中狼瘡活性評(píng)分與尿液抗-R38水平之間的相關(guān)性；圖8顯示5200(R38')治療對(duì)延長(zhǎng)狼瘡小鼠存活時(shí)間的作用；圖9顯示R38(在本文也稱為5100)治療對(duì)延長(zhǎng)狼瘡小鼠存活時(shí)間的作用；圖10顯示通過(guò)DNA和R38類似物抑制C72結(jié)合R38(5100);圖11顯示血清抗體濃度與OD檢測(cè)值的關(guān)系；圖12顯示治療前后患者血清抗-R38抗體水平的變化；圖13-22顯示采用本發(fā)明方法和裝置治療前后，血清抗-R38抗體的各患者數(shù)據(jù)；圖23是本發(fā)明實(shí)施方式的示意圖，顯示了利用本發(fā)明的免疫吸附柱，其中箭頭"A"指向該柱；圖24是本發(fā)明吸附柱的照片；禾口圖25顯示C72抗-R38抗體結(jié)合到本發(fā)明吸附柱上。優(yōu)選實(shí)施方式描述除非另有明確指出，本文在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)，包括實(shí)施例中使用的所有數(shù)值就好像前面有詞語(yǔ)"約"，即使該術(shù)語(yǔ)未明確出現(xiàn)。本文述及的任何數(shù)值范圍應(yīng)包括包含于其內(nèi)的小范圍。本申請(qǐng)通過(guò)引用明確納入本文附件中的所有材料，該附件是日期為2006年7月255日，001版的名為"研究者手冊(cè)(Investigator'sBrochure)"的文件。因此，本發(fā)明涉及層粘連蛋白在治療全身性紅斑狼瘡(SLE)中的應(yīng)用。本發(fā)明依據(jù)以下觀察病原性狼瘡抗體可識(shí)別R38肽，即衍生自鼠層粘連蛋白k鏈的C-末端區(qū)域的肽，因此，該肽通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合狼瘡抗體而有治療SLE的潛力。此外，本發(fā)明涉及至少兩種或更多種衍生自層粘連蛋白的肽的混合物在治療全身性紅斑狼瘡中的應(yīng)用。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，至少一種所述肽是R38或其類似物。本發(fā)明還提供通過(guò)體外除去對(duì)象血漿中的狼瘡抗體(抗-R38及其衍生物)并將該血漿輸回該對(duì)象來(lái)治療具有SLE的對(duì)象的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)柱層析除去這些抗體，其中至少一類肽吸附到該柱上。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，所述柱吸附了兩類或更多類肽。在另一實(shí)施方式中，所述肽選自SEQIDNO.1-22構(gòu)成的組。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，所述肽具有SEQIDNO.1。在還有另一實(shí)施方式中，所述肽具有SEQIDNO.10。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述柱是NHS-活化的S印harose"1高性能柱。本發(fā)明還涉及監(jiān)測(cè)SLE患者的疾病活性的方法，包括檢測(cè)尿液中的抗體結(jié)合層粘連蛋白的R38組分的能力。通過(guò)聯(lián)合各種實(shí)驗(yàn)室參數(shù)評(píng)估這種結(jié)合與疾病活性有直接相關(guān)性。結(jié)合R38的抗體量增加表明SLE接近活躍期，抗體水平降低表明接近消退。因此，該方法提供檢測(cè)層粘連蛋白特異性抗體水平改變的試驗(yàn)，從而能在該疾病的活躍期發(fā)作前開(kāi)始治療。該方法還提供患者本身可以采用的便捷試驗(yàn)，該試驗(yàn)可利用尿液進(jìn)行而無(wú)需靜脈穿剌。其可用作評(píng)估SLE疾病活性、早期鑒定疾病惡化和早期治療干預(yù)狼瘡腎炎的診斷試驗(yàn)，即常規(guī)試驗(yàn)?？刹捎肊P670，495所述的方法將R38肽或其類似物、片段或衍生物用于這種試驗(yàn)。因此，可將R38肽結(jié)合于固相并與患者的尿液溫育。如果懷疑患者患有SLE、正患有SLE或接近該疾病的活躍期，尿液中R-38結(jié)合抗體的水平會(huì)升高?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法檢測(cè)R-38結(jié)合抗體。這些檢測(cè)方法的例子包括ELISA和它們的改進(jìn)形式、化學(xué)發(fā)光技術(shù)等等。實(shí)際檢測(cè)方法對(duì)于該試驗(yàn)的成功無(wú)關(guān)緊要。然后可將觀察到的R-38結(jié)合抗體的水平與對(duì)照組的觀察值作比較。對(duì)照組可由健康志愿者構(gòu)成，或者患者可作為內(nèi)部對(duì)照，即，將觀察值與同一患者早期的數(shù)值作比較。以此方式，可遵照患者的疾病階段分布并用作該疾病的進(jìn)一步活躍期或消退階段的指標(biāo)。R38肽的藥學(xué)上可接受的鹽包括該肽分子的羧基鹽或氨基的酸加成鹽?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的方法形成羧基鹽，包括無(wú)機(jī)鹽，例如鈉鹽、f丐鹽、銨鹽、鐵或鋅鹽等，以及與有機(jī)堿形成的鹽，例如與胺，如三乙醇胺、精氨酸或賴氨酸、哌啶、普魯卡因等形成的那些鹽。酸加成鹽包括與礦物酸，例如鹽酸和硫酸形成的鹽，以及有機(jī)酸，例如乙酸和草酸形成的鹽。藥物組合物可含有層粘連蛋白肽，例如R38肽作為唯一的肽，或是連接于大分子運(yùn)載體或聚合物的聚合或偶聯(lián)形式。組合物可任選含有藥學(xué)上可接受的賦形劑。在備選實(shí)施方式中，組合物可只含R38肽。給藥途徑可包括口服、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、動(dòng)脈內(nèi)、鼻內(nèi)、鞘內(nèi)、真皮內(nèi)、透皮或通過(guò)吸入。用于治療SLE的R38肽或其衍生物的有效劑量可以是每次給藥每公斤體重約1微克-100毫克，本領(lǐng)域技術(shù)人員不難決定。劑量取決于受者的年齡、性別、健康狀況和體重、目前療法(如果有的話)的種類和治療頻率。在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明提供降低患者血漿中抗-R38抗體水平的方法，該方法包括以下步驟1)取出患者的血漿并使該血漿流過(guò)親和吸附柱，該柱包含具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列的肽，和2)將該血漿輸回患者體內(nèi)?；颊哐獫{中的抗-R38抗體水平比治療前水平降低約60%以上，在一些情況中，降低約80%以上，在其它情況中，降低約90%以上，在一些情況中，降低約95%以上或者甚至99%。在本發(fā)明的方法中，將通過(guò)該柱的所有血槳輸回患者，無(wú)需血槳替換。本發(fā)明的這些實(shí)施方式的優(yōu)點(diǎn)包括參首次提供狼瘡特異性治療-靶向狼瘡自身抗體結(jié)合的特異性抗原。參這些方法高度有效-只除去血漿中導(dǎo)致狼瘡的抗原，從而患者可保留所有其它至關(guān)重要的血漿組分。參副作用低_與所有現(xiàn)用的治療，即，免疫抑制性藥物、非特異性血漿去除術(shù)和全血漿置換相比。參吸附柱的操作簡(jiǎn)便。參治療成本劃算_因?yàn)橹委煹男屎托ЯΓ瑖?yán)重疾病患者的總醫(yī)療成本降低。如實(shí)施例13和圖12所示，通過(guò)0D(405nm的光密度)測(cè)得，患者的抗-R38(VRT101)抗體的治療前水平是約0.8，治療后的即刻水平是約0.6。0D檢測(cè)值反映出，治療后約兩周時(shí)，抗-R38抗體甚至進(jìn)一步降低為約0.2。采用圖11所提供的信息(0D檢測(cè)值與VRT101血清濃度的關(guān)系)，0D檢測(cè)值降低約70%(0.6到0.2)對(duì)應(yīng)于血漿抗體濃度降低97%。在約1-5周的時(shí)期，抗-R38抗體的水平維持低于治療后的即刻水平，在7-8周期間緩慢回復(fù)到治療前水平。因此，在還要進(jìn)一步的實(shí)施方式中，本發(fā)明提供通過(guò)用親和吸附柱體外處理患者的血漿來(lái)降低患者血漿中抗-R38抗體水平的方法，所述吸附柱包含具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列的肽，其中抗體水平在約1-約5周期間降低到治療后即刻水平以下，然后逐漸升高至治療前水平?？贵w水平從治療后的即刻水平至治療后兩周的變化百分比大于80%，在一些情況中大于90%，在一些情況中大于95%或97%。此外，抗體水平在至少3周、4周，或者在一些情況中，至少5或6周期間不回復(fù)到治療前水平。在另一方面，本發(fā)明提供用于本發(fā)明體外治療方法的抗原特異性免疫吸附柱。該柱包含1)具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列的配體肽，或其變體或衍生物，和2)含有共價(jià)結(jié)合了所述配體肽的基質(zhì)的柱。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的免疫吸附柱是LupusorbTM柱。LupusorbTM柱包括塑料外套管，該塑料外套管含有共價(jià)結(jié)合了配體肽，R38的S印haroseTM珠基質(zhì)，從而形成DV2吸附型單次使用醫(yī)學(xué)裝置，其用于在血漿去除術(shù)期間可逆地結(jié)合人血漿中的抗-R38抗體。Lupusorb柱設(shè)計(jì)成在標(biāo)準(zhǔn)血槳去除術(shù)期間使用。Lupusorb柱的上端和下端出口是可裝配血漿去除器的相應(yīng)入口或出口管線的標(biāo)準(zhǔn)接頭。常規(guī)血漿去除術(shù)包括取出血液、分離血漿與血細(xì)胞，用新鮮血漿或替代品稀釋，將這些血細(xì)胞輸回身體的循環(huán)系統(tǒng)。用其除去血流中的抗體，從而防止它們攻擊它們的靶標(biāo)。本發(fā)明首次提供狼瘡自身抗體特異性的血漿去除術(shù)。在該方法中，狼瘡患者的血漿流過(guò)VRT101(R38)-免疫吸附柱(圖24)。在本發(fā)明方法中，可將患者的血漿輸回該患者，7而無(wú)需用新鮮血漿或血漿替代品稀釋。病原性狼瘡自身抗體因與該柱結(jié)合而除去，然后重新輸注其余的患者血漿，而不會(huì)喪失任何至關(guān)重要的血漿組分。將R38偶聯(lián)于CNBr活化的瓊脂糖以形成Lupusorb柱，該柱包括塑料外套管，該塑料外套管含有共價(jià)結(jié)合了VRT101配體的瓊脂糖珠基質(zhì)，從而形成52ml吸附型單次使用醫(yī)學(xué)裝置，其用于在常規(guī)血漿去除術(shù)期間可逆地結(jié)合人血漿中的各病原體。該外套管由規(guī)定的聚碳酸酯制成，含有PTFE和PET膜。所有外套管材料需要參滿足USP關(guān)于VI級(jí)塑料的要求參滿足ENISO10993關(guān)于所需用途的要求參適于用環(huán)氧乙烷滅菌參耐受再生期間采用的pH值。該柱外套管由3個(gè)分別制造的部件構(gòu)成(圖25):頂件、中件和底件。所有三部件最終采用某種技術(shù)而不用粘合劑組合。夕卜魏時(shí)鵬:<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>頂件裝有中心陰螺旋接頭(centralfemaleluerconnector)，用相應(yīng)的螺旋蓋(luercap)封閉，外部有含通氣孔的環(huán)形區(qū)域，所述通氣孔用可撕下的標(biāo)簽封閉，內(nèi)部具有疏水性膜作為無(wú)菌屏障，單膜層(PET，llym)覆蓋頂件的整個(gè)內(nèi)徑。對(duì)于用于血漿輸送(流入管線)的具有陽(yáng)螺旋鎖扣(maleluerlock)的管道體系，中心陰螺旋接頭確保血漿分離置換期間與吸附柱安全而可拆分地裝配。利用這種形式的標(biāo)準(zhǔn)接頭可減少誤連接、血漿喪失和污染的危險(xiǎn)。用螺旋蓋將其封閉直至使用。為避免處理和再生期間基質(zhì)中的壓力累積和隨后出現(xiàn)氣囊，外套管本身可通過(guò)蓋子中環(huán)形分布的孔而通氣。填充了吸附劑后用標(biāo)簽封閉該環(huán)形區(qū)域以防止鹽水溶液蒸發(fā)和隨后瓊脂糖懸液變質(zhì)。為防止處理和儲(chǔ)存期間吸附劑內(nèi)含物的污染，用疏水性無(wú)菌屏障在內(nèi)部封閉通氣孔。穿過(guò)吸附柱整個(gè)內(nèi)徑的膜層能阻止儲(chǔ)存、運(yùn)輸和處理期間瓊脂糖進(jìn)入吸附器的流入接頭。此外，其使得輸入的血漿在瓊脂糖表面均勻分布。中件構(gòu)成吸附柱的實(shí)際容量，其是單聚碳酸酯圓柱體，在側(cè)面具有用于在制造期間填充瓊脂糖的陰螺旋接頭。該接頭用相應(yīng)的蓋封閉。流出管道不與該接頭相連，從而不會(huì)有瓊脂糖進(jìn)入輸回管線或進(jìn)入患者身內(nèi)的危險(xiǎn)。底件裝有中心陽(yáng)螺旋接頭和多層孔徑為11iim的PET膜。標(biāo)準(zhǔn)中心陽(yáng)螺旋接頭只專門(mén)連接于管道設(shè)施的流出管線上的相應(yīng)部分以防止流入和流出管線錯(cuò)配。也用蓋子將其封閉直至使用?？讖綖?1i！m的膜足夠小從而能保留選擇的瓊脂糖凝膠基質(zhì)，例如S印haroseTM的珠，其尺寸分布為45-165m。此外，作為第二且獨(dú)立的安全系統(tǒng)，必須在流出接頭和流出管道之間使用孔徑為5m無(wú)菌顆粒過(guò)濾器。按照醫(yī)學(xué)上安全和技術(shù)上可實(shí)現(xiàn)的血漿流速，層析基質(zhì)指定為適合于偶聯(lián)充足量的肽或抗體、高物理和化學(xué)穩(wěn)定性、低吸附和流動(dòng)速度的成珠瓊脂糖基凝膠過(guò)濾基質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方式中，選擇商品化S印haroseTM4FF用于Lupusorb吸附柱。據(jù)稱4FFS印haroseTM適于滅菌、生物負(fù)載(bioburden)低、耐受人血漿和再生溶液的pH范圍、耐受用于偶聯(lián)配體的化學(xué)品、能提供足夠用于偶聯(lián)的結(jié)合位點(diǎn)、只顯示少量吸附、能提供足以分離人血漿的流速、能保持珠尺寸和儲(chǔ)存期長(zhǎng)。4FFS印harose據(jù)稱在活化、偶聯(lián)配體和封閉后用作親和層析的基礎(chǔ)基質(zhì)。S印haroseTM4FF包含含有交聯(lián)瓊脂糖(4%)的球狀珠，95%以上的珠尺寸為45-165ym，平均為90iim。對(duì)于血漿去除術(shù)，該瓊脂糖凝膠獲得的流速符合技術(shù)上可實(shí)現(xiàn)、醫(yī)學(xué)上安全的流速，例如15-25ml/分鐘之間的任何流速。珠能在pH2-12和最高2.0巴的壓力下保持其性質(zhì)。4FFS印haroseTM對(duì)各種物質(zhì)，包括制造和使用吸附柱期間所用的有機(jī)溶劑和水性溶液顯示高度化學(xué)穩(wěn)定性。由于瓊脂糖凝膠上缺乏荷電基團(tuán)，實(shí)際上也沒(méi)有降解產(chǎn)物(來(lái)自瓊脂糖的碳水化合物)滲漏和非特異性結(jié)合。4FFS印haroseTM因高度交聯(lián)而易通過(guò)高壓蒸氣法滅菌，從而開(kāi)始時(shí)的生物負(fù)載(放行規(guī)格的一部分)極低。此外，瓊脂糖凝膠在20%乙醇中提供以進(jìn)一步減少微生物污染。在這些條件下，S印haroseTM的儲(chǔ)存期有5年。實(shí)施例It測(cè)試了衍生自小鼠層粘連蛋白k鏈C末端的肽R26、R28、R30、R31、R35、R37和R38(下文也稱為"5100"和"TV5100")和衍生自小鼠層粘連蛋白k鏈N末端的R18肽。所述肽是17-22-聚體的合成肽，采用F-moc技術(shù)制備(Carpino，L.A.和Han，G.Y.(1972)，J.Org.Chem.，37，3404)。還可通過(guò)生物
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員已知的方法制備這些肽。例如，利用選自下組的核酸，在活細(xì)胞培養(yǎng)物中制備和收集所需肽DNA、RNA、cDNA、基因組DNA、合成DNA、mRNA、總RNA、hnRNA、合成RNA。這些肽的序列見(jiàn)表1。表l:層粘連g白衍牛的肽肽殘基(*)序列R1842-63RPVRHAQCRVCDGNSTNPRERH(SEQIDN0.2)R262443-2463KNLEISRSTFDLLRNSYGVRK(SEQIDN0.3)R352547-2565TSLRKALLHAPTGSYSDGQ(SEQIDN0.4)R372615-2631KATPMLKMRTSFHGCIK(SEQIDN0.5)9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>(*)按照Skubitz(同上)的殘基指定實(shí)施例中用于比較目的的其它層粘連蛋白肽包括AS31(包含殘基YIGSR)、AC15和F9(其它層粘連蛋白肽)及R27，其是來(lái)自層粘連蛋白k鏈球狀區(qū)域的第4環(huán)的肽。構(gòu)建了其它肽，這些肽是R38的片段或緊密衍生自R38的類似物，見(jiàn)下表2。采用與上表l所示肽相同的方式制備表2公開(kāi)的肽5200和5101-5111。表2的肽包括R38(5100)、人R38(5300)、R38的片段、衍生自5300的片段5111或R38的類似物，其中按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的技術(shù)作出一個(gè)或多個(gè)點(diǎn)取代。構(gòu)建這些肽來(lái)研究改變R38肽的凈電荷對(duì)抗-DNA抗體結(jié)合活性的影響，等等。表2:類似于小鼠R38肽的合成肽<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>單克降抗體C72鼠抗-DNA抗體通過(guò)EilatD.等，.T.Immunol.(1991)147361-368所述的雜交瘤技術(shù)衍生自(NZBxNZW)Fl狼瘡小鼠。單克隆抗-DNA抗體DIL6和B3通過(guò)EhrensteinM.R.等，J.ClinInvest.(1994)931787-1799和EhrensteinM.R.等，KidneyInter.(1995)堅(jiān)705-711所述的雜交瘤技術(shù)衍生自狼瘡患者。應(yīng)該知道以下說(shuō)明書(shū)考慮使用層粘連蛋白和本文公開(kāi)的肽的特異性抗體。產(chǎn)生層粘連蛋白肽和R38及其類似物和衍生物的特異性肽的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。就此而言，可具體參考《抗體實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》(Antibodies，ALaboratoryManual)，Harlow禾口DavidLane編，冷泉港出版社，1988，其內(nèi)容通過(guò)引用全文納入本文。該參考文獻(xiàn)公開(kāi)了可用于獲得單特異性抗體，即直接針對(duì)層粘連蛋白肽的單克隆抗體和多克隆抗體的方法。杭_肽(官接結(jié)合)ELISA用lOiig/ml肽包被各孔，用PBS(pH7.4)配制的1%BSA(牛血清白蛋白)封閉，與適當(dāng)稀釋的血漿或單克隆抗體反應(yīng)，與偶聯(lián)于堿性磷酸酶的抗_人或抗_小鼠免疫球蛋白溫育，通過(guò)加入底物(Sigma100磷酸酶底物片劑)檢測(cè)并利用0TM系統(tǒng)公司(0rganonTeknikaMicrowellSystem)的分光光度計(jì)在405nm波長(zhǎng)顯色。竟?fàn)幖种圃囼?yàn)在競(jìng)爭(zhēng)性抑制試驗(yàn)中，將抗體與各種濃度的抑制劑(例如，肽、DNA、肝素)或DNA酶在室溫下溫育45分鐘，通過(guò)以前所述的ELISA評(píng)估剩余的結(jié)合能力。如下所示計(jì)算抑11制％:[(無(wú)抑制劑結(jié)合的0.D.-有抑制劑結(jié)合的0.D.)/(無(wú)抑制劑結(jié)合的0.D.)]X100=抑制％實(shí)施例1:層粘連蛋白與SLE杭體結(jié)合A:鼠SLE杭體與層粘連蛋白k鏈的C末端肽結(jié)合通過(guò)上述ELISA分析C72鼠抗-DNA抗體與層粘連蛋白肽的相互作用。用PBS將C72條件培養(yǎng)基稀釋成各種稀釋度。結(jié)果總結(jié)于圖1，其顯示C72鼠抗-DNA抗體與5200、R37和R30肽結(jié)合，但不與層粘連蛋白k鏈的R28或R18肽結(jié)合。對(duì)照鼠抗體，即抗-HELHy5不結(jié)合5200肽(數(shù)據(jù)未顯示)。B:DNA和肝素抑制C72與5200結(jié)合測(cè)試與5200、R38、R18、肝素、DNA和DNA酶溫育前后C72與5200的結(jié)合情況。結(jié)果總結(jié)于圖2，其顯示本發(fā)明的R38或5200肽、DNA和肝素能抑制C72與5200結(jié)合，但對(duì)照肽或用DNA酶處理不抑制。抑制百分比是與抑制劑溫育后O.D.降低的百分比。實(shí)施例2:多克降鼠杭體結(jié)合5200肽通過(guò)揭示特異性結(jié)合的直接結(jié)合ELISA分析MRL/lpr/lpr鼠抗體與5200肽的相互作用。因此，如上所述，將至少5只小鼠(MRL/lpr/lpr或?qū)φ招∈?，例如BALB/c)的合并尿液加入R38'(5200)、R18或DNA包被的各孔，通過(guò)ELISA檢驗(yàn)結(jié)合的5200。鼠尿液免疫球蛋白結(jié)合5200各組由合并的尿液構(gòu)成小鼠抗原DNA5200R18BALB/cU.D.U.D.U.D.MRL/lpr/lprU,D.0.26("U.D.U.D.-未檢測(cè)(*)405nm的0.D.實(shí)施例3:人單克隆狼瘡抗體結(jié)合5200肽人單克隆抗-DNA抗體DIL6和B3通過(guò)雜交瘤技術(shù)衍生自狼瘡患者。如圖3和4所示，發(fā)現(xiàn)這些抗體結(jié)合5200肽，但不結(jié)合測(cè)試的其它層粘連蛋白肽。在圖3和4中，如上或如下所示，這些肽稱為AS30是R27、AS19是R35、AS35是R26、AS17是R28和AS6是R18。實(shí)施例4:為檢驗(yàn)R38肽是否影響SLE的進(jìn)程，我們測(cè)試了它們對(duì)MRL/lpr/lpr小鼠疾病的作用。將0.lmlPBS配制的60iig5200(單用R38'或是肽組合，各30yg)腹膜內(nèi)注射給6周齡雌性MRL/lpr/lpr小鼠，每周一次，16周，并評(píng)估小鼠的存活情況(圖8)以及腎臟組織學(xué)。將O.lmlPBS配制的50iig5100(R38)或5300(人R38)腹膜內(nèi)注射給6周齡MRL/lpr/lpr小鼠，每周三次，并評(píng)估小鼠的存活情況(圖9)以及腎臟組織學(xué)。對(duì)照小鼠接受0.lml磷酸緩沖液。各測(cè)試和對(duì)照組包含12-15只小鼠。比較5100、5200或5300治療MRL/lpr/lpr小鼠的存活情況與PBS治療小鼠的存活情況。如圖8和9所示，5100或5200治療小鼠的存活率明顯高于對(duì)照小鼠的。在圖8和129中，x軸所示的時(shí)間(以天計(jì))與小鼠的年齡相關(guān)。5個(gè)月后處死各組中的兩只小鼠，通過(guò)光學(xué)顯微術(shù)評(píng)估它們的腎臟。對(duì)照小鼠的腎臟顯示嚴(yán)重的彌散性增殖性腎小球腎炎伴有新月體(crescent)和硬化，而5100或5200治療小鼠顯示輕微增殖性改變，沒(méi)有新月體，也沒(méi)有硬化。實(shí)施例5:分析杭-R38和疾病活件義間的相關(guān)件反復(fù)收集具有和不具有活躍和不活躍狀態(tài)腎病的狼瘡患者的尿液，并通過(guò)ELISA測(cè)試是否存在抗-R38抗體。還通過(guò)接受的臨床和血清學(xué)參數(shù)評(píng)估了疾病的活性(LockshinM.D.等，Am.J.Med(1984)II893-898)，并比較了它們與抗-R38水平的相關(guān)性。通過(guò)上述ELISA測(cè)試37位SLE患者的103份尿液樣品的抗-R38活性。其中23份樣品來(lái)自沒(méi)有腎病的患者，而80份樣品來(lái)自有腎病的患者。還包括來(lái)自具有SLE無(wú)關(guān)腎病的患者的12份樣PRo獲得了以下結(jié)果SLE存在存在不存在腎病不存在存在存在樣品數(shù)238012尿液抗-R380.D.(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差)0.035±0.0030.229±0.003*0.07±0.01*p<0.001根據(jù)包括19種臨床和實(shí)驗(yàn)室參數(shù)在內(nèi)的活性評(píng)分(LockshinM.D.等，同上)，具有腎病的患者的陽(yáng)性樣品通常與活躍疾病相關(guān)。這些參數(shù)包括評(píng)估以下臨床標(biāo)準(zhǔn)的存在/不存在/具體情況脫發(fā)、皮疹、發(fā)熱、漿膜炎、athralgia/關(guān)節(jié)炎、粘膜潰瘍、神經(jīng)學(xué)事件、不適、眼底變化、結(jié)節(jié)、脾臟和以下血液檢驗(yàn)，包括ESR(紅細(xì)胞沉降率)、抗-DNA抗體、補(bǔ)體(U/ml)、肌酸酐、血紅蛋白(g/dl)、PLT血小板(/mm2)或尿液分析。如Lockshin(同上)所述評(píng)估這些參數(shù)。給出的總百分比只反映評(píng)估的參數(shù)。在一些患者中，測(cè)試了多種情況中的尿液樣品，觀察到臨床活性與抗-R38結(jié)合之間有良好的相關(guān)性。3位不同狼瘡患者的3個(gè)代表性實(shí)例示于圖5、6和7，其中x-軸顯示醫(yī)院探視的次數(shù)，y-軸是觀察到的結(jié)合(405nm的0D)或上述活性評(píng)分的百分比。從這些附圖可以看出，利用R38肽的試驗(yàn)提供了監(jiān)測(cè)疾病活性的可靠方法。實(shí)施例6:分析抗-5200(R38')抗體和疾病活件之間的相關(guān)件在另一實(shí)驗(yàn)中，收集狼瘡患者的178份尿液樣品并通過(guò)上述直接ELISA測(cè)試是否存在抗-5200抗體，其中24位具有而22位不具有活躍和不活躍狀態(tài)的腎病。獲得以下結(jié)果13<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*p<0.001實(shí)施例7:分析抗-5100(R38)抗體和疾病活性之間的相關(guān)性收集21位狼瘡患者的45份尿液樣品并通過(guò)上述直接ELISA測(cè)試是否存在抗-5100抗體，其中一些患者具有而一些不具有活躍和不活躍狀態(tài)的腎病。獲得以下結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*p<0.03實(shí)施例8:分析抗-5200(R38')抗體和疾病活性之間的相關(guān)性收集21位狼瘡患者的52份尿液樣品并通過(guò)上述ELISA測(cè)試是否存在抗-5200抗體，其中所述患者具有和不具有活躍和不活躍狀態(tài)的腎病。獲得以下結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>實(shí)施例9:分析抗-5108、5101、5109和5110抗體和疾病活性之間的相關(guān)性收集實(shí)施例7和8的一些狼瘡患者的24份尿液樣品并通過(guò)上述ELISA測(cè)試與5108肽的結(jié)合情況，其中2位具有而22位不具有活躍和不活躍狀態(tài)的腎病。獲得以下結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>對(duì)于肽5101、5109和5110的結(jié)合情況，觀察到相似結(jié)果。實(shí)施例10:C72和B3與R38和類似物肽的肓接結(jié)合按照本文上述方法，測(cè)試本發(fā)明的肽直接結(jié)合C72鼠抗-DNA抗體和B3人抗-DNA抗體的能力。直接結(jié)合研究的結(jié)果見(jiàn)表3:表3:C72和B3與R38及類似肽的官接結(jié)合<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>*肌_未測(cè)試+-1小時(shí)后，直接結(jié)合ELISA測(cè)試中的O.D.J-2小時(shí)后，直接結(jié)合ELISA測(cè)試中的0.D.實(shí)施例11:類似肽競(jìng)爭(zhēng)件抑制C72與R38結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)性抑制研究比較了各肽如何與R38(5100)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合C72抗-DNA抗體。按照上文所述方法進(jìn)行，該項(xiàng)研究的結(jié)果見(jiàn)下表4，參考圖IO進(jìn)一步闡明這些結(jié)果。表4:抑制C72與R38結(jié)合<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>*-ELISA測(cè)試中，導(dǎo)致50%抑制C72抗-DNA抗體與肽5100(R38)結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑濃度NI林-無(wú)抑制實(shí)施例12:SLE杭體在樣卜.的免疫吸附本實(shí)施例證明可用柱體外除去對(duì)象血液中的抗-R38(TV-5100)(及其衍生物)病原性狼瘡抗體。將R38肽溶解于5ml偶聯(lián)緩沖液(0.2MNaHC03，0.5MNaCl，pH8.3)，濃度為lmg/ml。利用5mlN-羥基琥珀酰亞胺(NHS)-活化的S印haroseTM高性能柱(法瑪西亞(Pharmacia)17-0717-01)。用30ml冷(4°C)的ImMHC1將柱中的異丙醇洗出，然后用注射器將5ml肽溶液注射到柱上(2.5毫升/分鐘)。封閉柱，室溫下靜置30分鐘。然后用30ml緩沖液A(O.5M乙醇胺，0.5MNaCl，pH8.3)和30ml緩沖液B(0.5M乙酸鹽，0.5MNaCl，pH4)連續(xù)洗滌3次，然后用中性pH緩沖液(0.05MNa2HP04和0.1%NaN3)洗滌。抗-R38(TV-5100)抗體的親和吸附依次用15mlPBS(磷酸緩沖鹽水)、15ml洗脫緩沖液(0.1M甘氨酸HC1)和50mlPBS洗滌柱。C72抗體或患者血槳樣品經(jīng)0.45微米的濾器過(guò)濾。利用合適的注射器以2.5毫升/分鐘的速度將樣品施加于柱上。然后用5mlPBS洗滌柱，將流出液(flow-through)再施加到柱上。通過(guò)抗-R38ELISA測(cè)試檢驗(yàn)樣品(原液和流出液)與R38的結(jié)合。在本實(shí)施例中，將小鼠C72和SLE患者的血漿施加于R38柱。通過(guò)ELISA評(píng)估柱的原始樣品和流出液中它們的抗-R38結(jié)合情況。如表5所示，柱的親和吸附除去了小鼠單克隆C72的99X抗-R38活性，除去了人SLE患者血槳中30%_60%的抗體。表5:親和吸附<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>因此，通過(guò)親和吸附SLE患者的血槳并將該血槳靜脈內(nèi)輸回患者可治療SLE。實(shí)施例13在全身性紅斑狼瘡(SLE或狼瘡)患者中的L卯usorbTM免疫吸附柱I/II期臨床試在常規(guī)血漿去除術(shù)期間，用單LupusorbTM免疫吸附柱(session)治療10位SLE患者。LupusorbTM免疫吸附柱是包含R38(VRT101)肽的親和吸附柱。先在計(jì)劃進(jìn)行血槳去除術(shù)之日前3個(gè)月-最多5天篩選患者，再招募入該項(xiàng)研究。在血漿去除術(shù)之日，將患者招募入該項(xiàng)研究，并用LupusorbTM柱治療1.5-2.25小時(shí)。然后在Lupusorb柱治療后隨訪患者8周。第一位患者接受治療并完成了兩個(gè)月的隨訪。未見(jiàn)不良情況報(bào)道，對(duì)該方法耐受良好。對(duì)于初步效力，圖12描述了患者在治療前后以及隨訪期間VRT101抗體水平的變化。如圖12所示，Lupusorb血漿分離置換后抗-VRT(R-38)抗體的水平降低，5周后回復(fù)至原始水平。圖13-22顯示了按照同一方案獲得的其它患者信息。兩位患者，013號(hào)和027號(hào)顯示該治療對(duì)抗VRT101水平?jīng)]有作用。其余患者從第2或3次隨訪直至第4或5次隨訪顯示抗-VRT(R38)抗體均降低至正常水平，除了003號(hào)患者，其顯示抗VRT101水平降低，但高于正常。IO位患者中無(wú)一顯示明顯的回彈效應(yīng)。Lupusorb治療相關(guān)的嚴(yán)重不良事件未見(jiàn)報(bào)道。實(shí)施例14評(píng)估SLE患者血漿中的抗-VRT(R38)濃度將狼瘡患者(LM)的10ml血漿加載到柱上。用PBS(至少5個(gè)柱體積)清洗柱，用10m/MHC1(pH3.0)配制的0.05MNaCl洗脫，收集lml各組分。峰組分(通過(guò)ELISA由抗VRT101結(jié)合來(lái)鑒定)是7-9，通過(guò)徑向免疫擴(kuò)散(RID)或ELISA檢測(cè)IgG含量。原始血漿的免疫球蛋白含量是164mg(基于1640mg/dL的濃度)，而峰組分累積小于200iig(RID檢測(cè)到濃度小于6.9mg/dL)。這些結(jié)果證明特異性抗體占極少量的免疫球蛋白含量，S卩，總免疫球蛋白的約0.12%。實(shí)施例15Lupusorb柱容量在小規(guī)模實(shí)驗(yàn)中，如下所示，通過(guò)用C72抗體飽和Lupusorb柱來(lái)檢測(cè)Lupusorb柱的結(jié)合容量用含約12yg/ml免疫球蛋白的350mlC72上清加載5mlLupusorb柱。收集各組流出液，通過(guò)ELISA測(cè)試VRTIOI結(jié)合情況。第一組分為60ml，以下組分各自為30ml。如圖26所示，第一組分顯示非常少的VRTIOI結(jié)合；該柱去除C72抗體的能力在加載150ml上清(1.8mglgG)后飽和，表明該柱每ml樹(shù)脂可結(jié)合至少360g免疫球蛋白。實(shí)施例16為測(cè)試Lupusorb柱實(shí)施血漿分離置換的能力并明確包括血漿體積和流速在內(nèi)的技術(shù)參數(shù)，我們用3只綿羊進(jìn)行每月2-3次的血漿去除實(shí)驗(yàn)。麻醉這些綿羊，插管，對(duì)3升血漿進(jìn)行血漿分離置換。流速設(shè)置為16-20毫升/分鐘。血漿通過(guò)該柱持續(xù)而均勻地流動(dòng)沒(méi)問(wèn)題。第二次血漿去除術(shù)后，一只綿羊在插管期間因麻醉問(wèn)題死亡。其余綿羊?qū)υ摲椒ㄎ达@示任何即刻或隨后的反應(yīng)，它們的血液學(xué)和生物化學(xué)血液參數(shù)未顯示與原始結(jié)果有明顯改變。應(yīng)該知道以上描述和實(shí)施例只是說(shuō)明性的，本領(lǐng)域技術(shù)人員可對(duì)其作出許多改進(jìn)和改變而不脫離下文要求保護(hù)的本發(fā)明范圍和構(gòu)思。18權(quán)利要求一種治療患全身性紅斑狼瘡的對(duì)象的方法，所述方法包括體外去除該對(duì)象血漿中的狼瘡抗體再將該血漿輸回該對(duì)象，而無(wú)需額外的血漿置換。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過(guò)柱層析利用吸附有至少一類肽的柱進(jìn)行狼瘡抗體的除去。3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述肽選自下組SEQIDNO.1、SEQIDN0.2、SEQIDN0.3、SEQIDNO4、SEQIDN0.5、SEQIDN0.6、SEQIDN0.7、SEQIDNO.8、SEQIDNO.9、SEQIDNO.10、SEQIDNO.11、SEQIDNO.12、SEQIDNO.13、SEQIDNO.14、SEQIDNO.15、SEQIDNO.16、SEQIDNO.17、SEQIDNO.18、SEQIDNO.19、SEQIDNO.20、SEQIDNO.21和SEQIDNO.22。4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述柱吸附有兩類或更多類肽。5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述肽選自下組SEQIDNO.10、SEQIDNO.19、SEQIDNO.20、SEQIDNO.21。6.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述肽是SEQIDNO.1。7.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述肽是SEQIDNO.10。8.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述柱是N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)-活化的瓊脂糖凝膠柱。9.一種降低患者中抗-R38抗體水平的方法，該方法包括以下步驟1)取出該患者的血漿并使該血漿通過(guò)包含肽的親和吸附柱，所述肽具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列，禾口2)將該血漿輸回該對(duì)象的身體，其中該對(duì)象血漿中抗-R38抗體的血漿水平比治療前水平降低約95%以上。10.—種降低患者血漿中抗-R38抗體水平的方法，所述方法用親和力吸附柱體外處理該患者的血漿，所述親和吸附柱包含肽，而所述肽具有SEQIDNO.l所示的氨基酸序列，該方法包括以下步驟1)取出該患者的血漿并使該血漿通過(guò)包含肽的親和吸附柱，所述肽具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列，禾口2)將該血漿輸回該對(duì)象的身體，其中抗-R38抗體水平在約1-約5周期間降低到治療后即刻水平以下。11.一種親和吸附柱，其包含具有SEQIDNO.l所示氨基酸序列的肽或其變體或衍生物。12.如權(quán)利要求11所述的吸附柱，其特征在于，所述柱填充有基于瓊脂糖的凝膠過(guò)濾基質(zhì)。13.如權(quán)利要求12所述的吸附柱，其特征在于，所述基于瓊脂糖的凝膠的粒徑為約45—165lim。14.如權(quán)利要求12所述的吸附柱，其特征在于，所述瓊脂糖凝膠是N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)-活化的。15.—種親和吸附柱，其包含選自下組的肽SEQIDN0.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO4、SEQIDNO.5、SEQIDNO.6、SEQIDNO.7、SEQIDNO.8、SEQIDNO.9、SEQIDNO.10、SEQIDNO.11、SEQIDNO.12、SEQIDNO.13、SEQIDNO.14、SEQIDNO.15、SEQIDNO.16、SEQIDNO.17、SEQIDNO.18、SEQIDNO.19、SEQIDNO.20、SEQIDNO.21禾PSEQIDNO.22。16.如權(quán)利要求15所述的吸附柱，其特征在于，所述柱吸附有兩類或更多類肽。17.如權(quán)利要求15所述的吸附柱，其特征在于，所述肽選自下組SEQIDNO.10、SEQIDNO.19、SEQIDN0.20、SEQIDNO.21。全文摘要公開(kāi)了治療哺乳動(dòng)物對(duì)象的全身性紅斑狼瘡的方法，包括給予所述對(duì)象有效劑量的至少一種層粘連蛋白肽或其類似物或衍生物。在一示范性實(shí)施方式中，層粘連蛋白肽選自R38(SEQIDNO.1)及要求保護(hù)的R38類似物和衍生物，包括5200(SEQIDNO.10)、5104(SEQIDNO.15)、5105(SEQIDNO.16)、5106(SEQIDNO.17)、5107(SEQIDNO.18)、5108(SEQIDNO.19)、5109(SEQIDNO.20)、5110(SEQIDNO.21)?？赏ㄟ^(guò)已知的化學(xué)合成方法或生物技術(shù)方法制備本發(fā)明層粘連蛋白肽。本發(fā)明還提供用于診斷患者的紅斑狼瘡和患該病患者的隨后病理學(xué)活性進(jìn)程的試驗(yàn)。此外，本發(fā)明涉及治療對(duì)象的全身性紅斑狼瘡的方法，包括體外去除該對(duì)象血漿的狼瘡抗體并將該血漿輸回該對(duì)象。本發(fā)明另一方面提供降低對(duì)象血漿中抗-R38抗體水平的方法。文檔編號(hào)A61K39/395GK101720231SQ200880017297公開(kāi)日2010年6月2日申請(qǐng)日期2008年5月22日優(yōu)先權(quán)日2007年5月24日發(fā)明者Y·納帕斯特克申請(qǐng)人:哈德西特有限公司