專利名稱：：含有前列腺素E₁的穩(wěn)定的脂肪乳劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及含有前列腺素E工的穩(wěn)定的脂肪乳劑。
背景技術(shù)：
：前列腺素E工(以下，有時也簡稱為"PGE/，)一般的名稱是前列地爾(Alprostadil)具有強力的血管擴張作用和抑制血小板凝聚作用，對改善慢性動脈閉塞癥(伯格(Buerger)病、閉塞性動脈固化癥)時的四肢潰瘍以及安靜時的疼痛、改善行動性全身固化病等時的皮膚潰瘍、改善糖尿病時的皮膚潰瘍等有效，從而在臨床中使用。作為含有前列腺素^的制劑，已知的有需要在微細脂肪粒子中溶解PGE工的所謂的脂化制劑(例如，"Liple注射液"，田邊三菱制藥株式會社制造和銷售)。該制劑是利用了用作藥物載體的脂肪粒子特別容易成為障礙分布在血管中的性質(zhì)，通過考慮藥物傳輸系統(tǒng)(DDS)，在病變部位有效地聚集PGEp而且在生物體內(nèi)的有效成分難以產(chǎn)生失活的制劑，含有作為添加劑的精制大豆油、高度精制蛋黃卵磷脂、油酸、濃甘油以及氫氧化鈉，PH從4.5調(diào)節(jié)為6.0。然而，上述PGE工的脂化制劑由于作為有效成分的PGE工容易在溶液中分解，所以為了避免凍結(jié)，必須在5t:下避光保存，有效時間比普通的制劑更短，穩(wěn)定在i年期間。這種制劑導致流通階段和臨床現(xiàn)場中的藥劑管理成本增加，所以期望開發(fā)出與降低藥劑管理成本有關(guān)的有效時間長的藥劑。另外，通過脂肪乳劑抑制前列腺素E工過肺失活的方法在日本特開昭58-222014號公報(專利文獻l)中公開，通過脂肪乳劑改善化學穩(wěn)定性的方法在日本特開昭60-149524號公報(專利文獻2)中公開，作為脂肪乳劑制備的血管造影助劑在日本特開平4-66540號公報(專利文獻3)中公開。另外，pH對脂肪乳劑中的PGE工的影響已知的是在pH5.0附近最穩(wěn)定，在這之上或之下的pH下不穩(wěn)定(PharmaceuticalResearch,6，pp.210-215，1989;非專利文獻1)。專利文獻1特開昭58-222014號公報專利文獻2特開昭60-149524號公報專利文獻3特開平4-66540號公報非專利文獻1PharmaceuticalResearch,6，pp.210—215，1989
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明解決的課題本發(fā)明的課題在于提供具有更長有效時間、包含具有前列腺素E工活性的化合物的制劑。更具體地，提供延長作為含前列腺素EJ勺制劑的市售脂化制劑(例如，"Liple注射液"等)有效時間的方法。解決課題的手段本發(fā)明人為了解決上述問題，進行了認真研究，從而發(fā)現(xiàn)在制劑制造工序的最后階段中，將密封在玻璃安瓿中的制劑(填充時，將PH調(diào)節(jié)到約5.0)用高壓鍋(125°C)加熱殺菌，則從玻璃安瓿的內(nèi)部表面溶出堿性成分，使得制劑的pH比殺菌前高?；谠摪l(fā)現(xiàn)，本3發(fā)明人繼續(xù)進一步研究，從而發(fā)現(xiàn)殺菌時通過采用抑制堿性成分從玻璃安瓿溶出的手段，可以不受玻璃安瓿的性質(zhì)(材料)的影響，容易地制造、提供長時間穩(wěn)定的脂化制劑。S卩，根據(jù)本發(fā)明提供一種包含具有前列腺素Ej舌性的化合物的脂肪乳劑，該乳劑密封在玻璃制容器中后，加熱殺菌，在5t:下保存16個月后，前列腺素Ej舌性的殘留量是開始保存時的65%以上，100%以下。根據(jù)上述發(fā)明的優(yōu)選的方案，提供在開始保存時，含有5iig以上的具有前列腺素E工活性的化合物，在5t:下保存16個月后，具有前列腺素E工活性的化合物的殘留量為4iig以上的上述脂肪乳劑；在開始保存時，含有10iig以上具有前列腺素E工活性的化合物，在5t:下保存16個月后，具有前列腺素E工活性的化合物的殘留量為8iig以上的上述脂肪乳劑。另外，提供加熱殺菌后、開始保存時的pH為4.9到5.3的范圍的上述脂肪乳劑。根據(jù)更優(yōu)選的方案，提供上述的脂肪乳劑，其中玻璃制容器是內(nèi)部表面進行涂敷保護膜的容器；提供上述脂肪乳劑，其中玻璃制容器是在內(nèi)部表面涂敷保護膜的玻璃安瓿；提供上述脂肪乳劑，其中涂敷保護膜是氧化硅保護膜；提供上述脂肪乳劑，其中玻璃制容器是通過化學處理除去玻璃表面的堿成分的容器；提供上述脂肪乳劑，其中玻璃制容器是通過化學處理除去玻璃表面的堿成分的玻璃安瓿。另外，提供相對于脂肪乳劑的全部量，含有550w/v^的植物油的上述脂肪乳劑。從另一觀點出發(fā)，根據(jù)本發(fā)明提供一種制造含有具有前列腺素Ej舌性的化合物的脂肪乳劑的方法，該方法包含加熱滅菌的工序，該工序是將含有具有前列腺素E工活性的化合物，pH調(diào)節(jié)到4.8到5.2的范圍的脂肪乳劑密封到玻璃制容器中，加熱滅菌；優(yōu)選的是該容器具有抑制加熱滅菌后的該脂肪乳劑的PH上升的手段。根據(jù)上述發(fā)明的優(yōu)選的方案，提供上述的方法，其中該玻璃制容器是玻璃安瓿，抑制PH上升的上述手段是玻璃安瓿內(nèi)部表面的保護膜，優(yōu)選為氧化硅保護膜；以及提供上述的方法，其中該玻璃制容器是玻璃安瓿，抑制pH上升的上述手段通過化學處理除去玻璃表面的堿成分。另外，提供的上述方法，加熱殺菌后的脂肪乳劑的PH為4.9到5.3的范圍；以及提供的上述方法，其中加熱殺菌后，各玻璃安瓿中的該脂肪乳劑中殘留的具有PGEj舌性的化合物的量的相對標準偏差為1.0%以下。另外，其中所述的具有PGEj舌性的化合物的量在含有"PGE/'作為有效成分的脂肪乳劑中，是指作為有效成分的"PGE/'的量；含有"PGE工以外的具有PEGj舌性的化合物"作為有效成分的脂肪乳劑中，是指作為有效成分的"PE^以外的具有PGE工活性的化合物"的量。發(fā)明的效果本發(fā)明的脂肪乳劑的特征是與現(xiàn)有的脂肪乳劑相比，具有前列腺素^活性的化合物的穩(wěn)定性更高，即使長時間保存，有效成分也不會降低。另外，本發(fā)明的制造方法的特征在于可以提供殺菌后的PG^量不受到(難以受到)玻璃制容器的性質(zhì)(材料)的影響的產(chǎn)品。具體實施例方式本發(fā)明的脂肪乳劑是包含具有前列腺素Ej舌性的化合物的脂肪乳劑，特征為密封在容器中后，加熱殺菌，在5t:保存16個月后，PGEj舌性的殘留量是開始保存時的65%以上，100%以下。作為具有PGE工活性的化合物，可以使用具有PG^活性，適合作4為藥物的有效成分的任意化合物。例如，適合使用特開昭59-206349號公報以及特開昭59-216820號公報等中公開的PGEi衍生物。它們之中，特別優(yōu)選例如7-{(1R，2R，3R)-3-羥基-2-[(lE，3S)-3-羥基辛-l-烯-l-基]-5-氧代環(huán)戊基l庚酸(通常稱作"前列地爾(Alprostadil)，，)。作為本發(fā)明的具有前列腺素E工活性的化合物特別優(yōu)選的是如前所述的7-{(lR，2R，3R)-3-羥基-2-[(1E，3S)-3-羥基辛-1-烯-1-基]-5-氧代環(huán)戊基}庚酸(前列地爾)，該化合物容易通過脫水反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)?-{(1R，2S)-2-[(S，E)-3-羥基辛-1-烯基]-5-氧代環(huán)戊-3_烯基}庚酸(前列腺素A1)?？梢哉J為通過轉(zhuǎn)變?yōu)榍傲邢偎谹1，本發(fā)明的脂肪乳劑的藥理活性降低。在本發(fā)明中，5t:下保存16個月后的lml本發(fā)明的脂肪乳劑中的前列腺素Al的量希望是3.0iig以下。特別希望是0iig以上，1.5iig以下。包含具有PGE工活性的化合物的脂肪乳劑例如在特開昭58-222014號公報、特開昭60-149524號公報以及特開平4-66540號公報等中記載，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地調(diào)配脂肪乳劑。例如可以調(diào)配為包含植物油、磷脂、水以及具有PG^活性的化合物的脂肪乳劑。此外，根據(jù)需要，還可以制備添加乳化助劑、穩(wěn)定劑、高分子物質(zhì)、等滲劑等的脂肪乳劑。脂肪乳劑可以通過各種方法調(diào)配，例如可以通過下述方法制造。將規(guī)定量的植物油(優(yōu)選為大豆油)、磷脂、具有PG^活性的化合物以及其它前述的添加劑等混合，根據(jù)需要加熱后，使用常用的均化器(例如，加壓噴射型均化器、超聲波均化器等)，進行均質(zhì)處理，調(diào)配油包水型分散液，接著，在該分散液中加入必要量的水，通過均化器，均化，改變?yōu)樗托腿閯?，可以制造脂肪乳齊U。可以調(diào)配脂肪乳劑后，再加入穩(wěn)定劑以及等滲劑等添加劑。脂肪乳劑在加熱殺菌前，將PH調(diào)節(jié)為4.8到5.2的范圍。調(diào)節(jié)pH可以適量使用氫氧化鈉等堿性物質(zhì)。滲透壓比可以調(diào)節(jié)為相對于生理鹽水的比約為1。本發(fā)明的脂肪乳劑的平均粒徑使用以動態(tài)光散射法為原理的粒徑測定裝置進行測定。本發(fā)明的脂肪乳劑的優(yōu)選的平均粒徑為0.lym以上，0.4ym以下。本發(fā)明的脂肪乳劑例如可以將上述調(diào)配的脂肪乳劑密封在玻璃容器中后，通過加熱殺菌處理制造。作為玻璃制容器，只要是適合密封，而且在加熱殺菌處理中，填充到內(nèi)部的脂肪乳劑中，不會溶出堿性成分，可以使用具有這種性質(zhì)的任意玻璃制容器，例如優(yōu)選為具有抑制加熱殺菌后的該脂肪乳劑的pH上升手段的玻璃制容器，特別優(yōu)選具有上述手段的玻璃安瓿。抑制加熱殺菌后的該脂肪乳劑的pH上升的手段沒有特別的限定，可以采用例如在加熱殺菌時，防止脂肪乳劑中溶出堿性成分的手段，或者在加熱殺菌時，使脂肪乳劑中的酸性成分溶出的手段等，優(yōu)選在加熱殺菌時，防止脂肪乳劑中溶出堿性成分的手段。作為在加熱殺菌時，防止脂肪乳劑中溶出堿性成分的手段，可以列舉出例如在容器內(nèi)部表面施以保護膜的手段。優(yōu)選采用在玻璃安瓿的內(nèi)部表面形成氧化硅保護膜的手段?；蛘?，作為抑制pH上升的手段，還可以采用通過化學處理除去玻璃表面的堿成分的手段。這種技術(shù)例如在特開平2-175630號公報等中記載，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地采用。本發(fā)明的脂肪乳劑可以通過將pH調(diào)節(jié)為4.8到5.2的范圍的上述脂肪乳劑密封在容器中，加熱殺菌來制備。加熱殺菌例如在高壓鍋中，在125t:下進行幾分鐘到IO分鐘，溫度和時間沒有特別的限定，只要是能充分殺菌的處理，就可以采用任意的處理。加熱殺菌后的脂肪乳劑的PH優(yōu)選為4.9到5.3。加熱殺菌前后的pH上升優(yōu)選小于0.3，更優(yōu)選為小于0.2，特別優(yōu)選小于0.1。另外，對于殺菌后的PGE工量來說，各安瓿的偏差希望是PGE工量g)的相對標準偏差為1.0%以下，更希望是0.5%以下。本發(fā)明提供包含具有前列腺素El活性的化合物的脂肪乳劑，例如形成含有5g或10Pg具有前列腺素El活性的化合物的制劑，填充到安瓿中。在本發(fā)明中，在填充了5i!g的安瓿中，希望填充其量的80%125%重量的該化合物。即，是指在安瓿中該化合物填充4g以上，6.25g以下?；蛘撸诒景l(fā)明中，填充了10g的安瓿中，希望填充其量的80%125%重量的該化合物。即，是指安瓿中該化合物填充8iig以上，12.5iig以下。另外，本發(fā)明的脂肪乳劑的適用疾病以及使用方法等例如在"Liple注射液5yg"的附帶文件(田邊三菱制藥株式會社，2008年4月修訂，第16版)中具體且詳細地記載。實施例以下，通過實施例對本發(fā)明進行更具體地說明，但是本發(fā)明的范圍并不受到下述實施例的限定。例1在精制大豆油中溶解前列地爾(PGE》、油酸以及除去磷脂酰乙醇胺(PE)的蛋黃卵磷脂，添加另外準備的甘油和注射用蒸餾水的混合物，用均化器攪拌，調(diào)配懸濁液。所得的懸濁液通過Manton-Gaulin型乳化器(Manton-Gaulin制造)乳化，使用氫氧化鈉和鹽酸，將pH調(diào)節(jié)為4.90。調(diào)配的乳化物填充到Silicoat安瓿(不二硝子制造，安瓿內(nèi)部施以厚度70IOOA的氧化硅保護膜的玻璃制安瓿)中，安瓿的空隙部分用氮取代，通過熔封密封。所得的安瓿使用高壓蒸汽殺菌器，在125t:下殺菌2.2分鐘，得到本發(fā)明的脂肪乳劑。例2通過和例1同樣的方法調(diào)配乳化物，使用氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)為5.01后，和例1同樣地，填充和密封到Silicoat安瓿中，殺菌，得到本發(fā)明的脂肪乳劑。例3通過和例1同樣的方法調(diào)配乳化物，使用氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)為5.15后，和例1同樣地，填充和密封到Silicoat安瓿中，殺菌，得到本發(fā)明的脂肪乳劑。例4(比較例)例1調(diào)配的乳化物填充到普通的玻璃安瓿(不進行氧化硅保護膜的玻璃制安瓿)中，氮氣置換安瓿的空隙部分，熔封密封。所得的安瓿使用高壓蒸汽殺菌器，在125t:殺菌2.2分鐘，得到脂肪乳劑。例5通過和例1同樣的方法調(diào)配乳化物，使用氫氧化鈉將pH從5.09調(diào)節(jié)為5.15后，和例1同樣地，填充和密封到Silicoat安瓿中，制造9例樣品，殺菌，得到本發(fā)明的脂肪乳劑。例6(比較例)通過和例5相同的方法，填充到普通的玻璃安瓿中，制造10例樣品，通過和例5相同的方法殺菌，得到脂肪乳劑。在表l中表示改變加熱殺菌前的pH得到的脂肪乳劑在25t:保存時，PGEj勺穩(wěn)定性實驗的結(jié)果。PGEJ勺殘留率利用柱后反應(yīng)通過高效液相色譜測定(根據(jù)日本藥監(jiān)局論壇(JPFo進)，15(3)，pp.233-235，2006中記載的方法測定)。表2中表示3Q。C禾口40。C下保存時的PGE工穩(wěn)定性實驗的結(jié)果。如該結(jié)果表明，在3(TC和4(TC下保存時，密封填充到Silicoat安瓿中的本發(fā)明的脂肪乳劑的PGE工的穩(wěn)定性比密封到普通的玻璃安瓿中的例5的脂肪乳劑更優(yōu)異。使用上述結(jié)果，使用阿倫尼烏斯圖計算使用調(diào)配為PH5.0附近的脂肪乳劑時的5t:的PGEj急定性。如表3所示，密封填充到Silicoat安瓿中的本發(fā)明的脂肪乳劑在第16個月，相對于開始時，可以維持65%以上的含量。表4中表示殺菌后的各安瓿中殘留的PGE工量和它們的平均值、標準偏差值以及相對標準偏差值。密封填充到Silicoat安瓿中的本發(fā)明的脂肪乳劑的剩余量比密封填充到普通的玻璃安瓿中的例7的脂肪乳劑量的相對標準偏差值更小，表示是各安瓿的偏差小的均勻的產(chǎn)品。[表1]<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>[表4]<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>例7采集1ml和例2同樣的方法調(diào)配的乳化物，加入1ml的內(nèi)標準溶液(50mg的1_萘酚溶解到20ml的99.5%乙醇中，在3ml該溶解液中加入移動相，調(diào)節(jié)為100ml的物質(zhì))混合，作為試樣溶液。另外，用干燥器干燥前列地爾標準溶液，準確稱取lOmg，用99.5%乙醇中溶解至100ml，作為標準原液(El)。另外，前列腺素Al標準溶液使用干燥器干燥，稱取10mg，用99.5%乙醇溶解至100ml，形成標準原液(Al)。El和Al各采集2.5ml，加入移動相至50ml，取1ml該混合液，與1ml內(nèi)標溶液混合，形成標準溶液。分別對40y1試樣溶液和標準溶液，進行液相色譜分析。求得前列腺素A1的峰面積相對于內(nèi)標準物質(zhì)的峰面積的比值。以試樣溶液中的前列腺素Al的面積比為QT，以標準溶液中的前列腺素Al的面積比為QS。使用這些面積比，通過下式求得換算為前列地爾中前列腺素A1的量。前列腺素Al的量(iig)=(前列腺素Al的準確稱取量(mg))XQT/QSXO.5X1.054對于和例2同樣的方法制備的乳化劑來說，前列腺素Al的準確稱量10.05mg，前列腺素A1的峰面積相對于試樣溶液的內(nèi)標準物質(zhì)的比(QT)為O.180931，前列腺素A1的峰面積相對于標準溶液的內(nèi)標準物質(zhì)的峰面積比(QT)為0.778099。將其應(yīng)用于上式計算時，該乳化物中的前列腺素A1的量為1.23iig。工業(yè)實用性本發(fā)明的脂肪乳劑與現(xiàn)有的脂肪乳劑相比，具有前列腺素Ej舌性的化合物的穩(wěn)定性更高，即使長時間保存，有效成分的含量一不會降低，所以作為含有前列腺素EJ勺制劑極為有用。8權(quán)利要求一種包含具有前列腺素E1活性的化合物的脂肪乳劑，該脂肪乳劑是密封在玻璃制容器中后，加熱殺菌，在5℃下保存16個月后，前列腺素E1活性的殘留量是開始保存時的65％以上，100％以下。2.根據(jù)權(quán)利要求1記載的脂肪乳劑，其中在開始保存時，含有5iig以上具有前列腺素E工活性的化合物，在5t:下保存16個月后，具有前列腺素E工活性的化合物的殘留量為4iig以上。3.根據(jù)權(quán)利要求1記載的脂肪乳劑，其中在開始保存時，含有10iig以上具有前列腺素E工活性的化合物，在5t:下保存16個月后，具有前列腺素E工活性的化合物的殘留量為8iig以上。4.根據(jù)權(quán)利要求2或3記載的脂肪乳劑，其中在5t:下保存16個月后，殘留具有前列腺素E工活性的化合物，該具有前列腺素E工活性的化合物相當于5iig或10iig具有前列腺素Ei活性的化合物的80.0125.0%。5.根據(jù)權(quán)利要求14任一項記載的脂肪乳劑，其中加熱殺菌后，開始保存時的pH為4.9到5.3的范圍。6.根據(jù)權(quán)利要求15任一項記載的脂肪乳劑，其中玻璃制容器是內(nèi)部表面進行涂敷保護膜的容器。7.根據(jù)權(quán)利要求6記載的脂肪乳劑，其中玻璃制容器是玻璃安瓿。8.根據(jù)權(quán)利要求6或7記載的脂肪乳劑，其中保護膜是氧化硅保護膜。9.根據(jù)權(quán)利要求15任一項記載的脂肪乳劑，其中玻璃制容器是通過化學處理除去玻璃表面的堿成分的容器。10.根據(jù)權(quán)利要求9記載的脂肪乳劑，其中玻璃制容器是玻璃安瓿。11.根據(jù)權(quán)利要求1io任一項記載的脂肪乳劑，其中相對于脂肪乳劑的全部量，含有550w/v^的植物油。12.根據(jù)權(quán)利要求111任一項記載的脂肪乳劑，其中在lmL的脂肪乳劑中含有5iig具有前列腺素E工活性的化合物、100mg精制大豆油、18mg高度精制蛋黃卵磷脂、2.4mg油酸以及22.lmg濃甘油。13.根據(jù)權(quán)利要求111任一項記載的脂肪乳劑，其中在2mL的脂肪乳劑中含有10iig具有前列腺素E工活性的化合物、200mg精制大豆油、36mg高度精制蛋黃卵磷脂、4.8mg油酸以及44.2mg濃甘油。14.根據(jù)權(quán)利要求113任一項記載的脂肪乳劑，其中前列腺素E:活性的化合物是7-{(1R，2R，3R)-3-羥基-2-[(1E，3S)-3-羥基辛-1-烯-1-基]-5-氧代環(huán)戊基}庚酸。15.—種權(quán)利要求114任一項記載的脂肪乳劑的制造方法，該方法包括加熱滅菌的工序，該工序是將含有具有前列腺素E工活性的化合物的pH調(diào)節(jié)到4.8到5.2的范圍，將調(diào)節(jié)后的脂肪乳劑密封到玻璃制容器中，加熱殺菌。16.根據(jù)權(quán)利要求15記載的方法，其中該容器是具有抑制加熱殺菌后的該脂肪乳劑的pH上升的手段的容器。17.根據(jù)權(quán)利要求15記載的方法，其中加熱殺菌后，各玻璃安瓿中的該脂肪乳劑中殘留的具有前列腺素^活性的化合物的量的相對標準偏差為1.0%以下。全文摘要一種包含具有前列腺素E1活性的化合物的脂肪乳劑，該脂肪乳劑是密封在玻璃制容器中后，加熱殺菌，在5℃下保存16個月后，前列腺素E1活性的殘留量是開始保存時的65％以上，100％以下。文檔編號A61K9/10GK101743010SQ20088002411公開日2010年6月16日申請日期2008年7月11日優(yōu)先權(quán)日2007年7月13日發(fā)明者尾崎和彥,平井賢一,福山剛之申請人:田邊三菱制藥株式會社;大正制藥株式會社