專利名稱：：Dnapk抑制劑的制作方法DNAPK抑制齊iJ本發(fā)明涉及起DNA-PK抑制劑作用的化合物、它們的用途和合成。DNA依賴的蛋白激酶(DNA-PK)是與DNA結(jié)合而活化的核絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。生物化學和基因資料顯示該激酶由稱作DNA-PKcs的大催化亞單位和稱作Ku的調(diào)節(jié)成分組成。已經(jīng)表明DNA-PK是DNA雙鏈斷裂(DSB)修復機構(gòu)和V(D)J重組機構(gòu)的關(guān)鍵成分。此外，近期工作已經(jīng)將DNA-PK成分納入到多種其他過程中，包括調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和端粒維持(Smith,G.C.M.和Jackson,S.P.，GenesandDev.，13，916-934(1999))。DNADSB被認為是細胞可能遇到的最致命的損傷。為了防止DNADSB導致的嚴重威脅，真核細胞演化了若干機理來介導它們的修復。在高級真核細胞中，這些機理中占主導地位的是DNA非同源末端連接(NHEJ)，也稱作非常規(guī)重組。DNA-PK在該途徑中起重要作用。已經(jīng)證實體外和體內(nèi)都具有增強的DNA-PK活性，并且與腫瘤細胞對IR和雙官能烷化劑的抵抗性聯(lián)系起來(MullerC.等，Blood，92，2213-2219(1998)，SirzenF.等，Eur.J.Cancer,35，111-116(1999))。因此，增強的DNA-PK活性被認為是細胞和腫瘤抵抗機理。因此，用小分子抑制劑抑制DNA-PK可以證實在過表達被認為是抵抗機理的腫瘤中是有效的。之前還曾發(fā)現(xiàn)PI3-激酶抑制劑LY294002:能夠在體夕卜抑制DNA-PK功能(Izzard，R.A.等，CancerRes.，59，2581-2586(1999))。LY294002對DNA-PK的IC5。(50%的酶活性損失時的濃度)是liiM，與PI3-激酶相同。此外，還表明LY294002也能夠微弱地使細胞對IR的作用敏化(Rosenzweig，K.E.等，Clin.CancerRes.，3，1149-1156(1999))。WO03/024949描述了多類用作DNA-PK抑制劑的化合物，包括具有如下通式結(jié)構(gòu)的2-氨基-色烯-4-酮其中是一個實例。該化合物表現(xiàn)出10-12nM的IC5。和1.3的SER(方法如下所示)。WO2006/032869描述了用作DNA-PK抑制劑的化合物，包括具有如下通式的2-氨基_色烯_4-酮其中Q表示-NH-C(=0)-或-0-，Y是任選取代的C卜5烯基，X選自H或硫醚或氨基。如果將DNA-PK介入到DNA修復過程中，并且小分子抑制劑已經(jīng)表明在培養(yǎng)液中放射性敏化和化學敏化哺乳動物細胞，特異性的DNA-PK抑制性藥物的應(yīng)用將作為增強癌癥化學治療和放射性治療的功效的藥劑。DNA-PK抑制劑還可以用于治療逆轉(zhuǎn)錄病毒介導的疾病。例如，已經(jīng)表明DNA-PK活性的損失嚴重抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒整合過程(DanielR等，Science,284，644-7(1999))。本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有類似的或者改進的DNA-PK抑制水平同時具有用作活性藥物的其他有用性質(zhì)的其他化合物，特別是改進的溶解度和細胞功效。本發(fā)明的一些化合物還表現(xiàn)出在含水介質(zhì)中和在磷酸鹽緩沖溶液中的良好的溶解度-提高的溶解度在配制用于兒科的通過IV途徑施用或者用于口服制劑(例如液體和小片劑形式)的化合物中是有用的?？梢栽鰪姳景l(fā)明的化合物的口服生物利用度。因此，本發(fā)明的第一方面提供式I的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R1和R2各自獨立地選自氫、任選取代的C卜7烷基丄3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，或者可以與它們連接的氮原子一起形成具有48個環(huán)原子的任選取代的雜環(huán)；X是CH或N;n是1或2;Ra和Re2各自獨立地選自H和甲基；當X是N時，RX選自H和任選取代的C卜7烷基丄3—2。雜環(huán)基丄5—2。芳基、?；?、酯基、酰氨基和磺?；?；以及當X是CH時，RX選自H和任選取代的C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基、C5—2。芳基、?；Ⅴセ?、酰氨基、磺?；被兔鸦?。本發(fā)明的第二方面提供包含第一方面的化合物和藥學上可接受的載體或稀釋劑的組合物。本發(fā)明的第三方面提供第一方面的化合物在治療方法中的用途。本發(fā)明的第四方面提供第一方面的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療通過抑制DNA-PK而緩解的疾病。本發(fā)明的第四方面還提供第一方面的化合物在治療通過抑制DNA-PK而緩解的疾病的治療方法中的用途。優(yōu)選的是，在第四方面中，與PI3-激酶和/或ATM相比，第一方面的化合物選擇性抑制DNA-PK的活性。選擇性是一個重要問題，因為其他PI3-激酶家族成員的抑制可能導致與這些酶的功能損失相關(guān)的不希望的副作用。具體地，在本發(fā)明的第四個方面中，所述化合物可以(a)用作癌癥治療輔助劑的藥物或者用于制備用作癌癥治療輔助劑的藥物，或者用于增強電離輻射或化學治療劑治療腫瘤細胞的功效；或(b)用來治療逆轉(zhuǎn)錄病毒介導的疾病，或者用來制備治療逆轉(zhuǎn)錄病毒介導的疾病的藥物。本發(fā)明的另一方面提供如這里所述的活性化合物在人體或動物體的治療方法中的用途，優(yōu)選為藥物組合物形式。本發(fā)明的再一方面提供一種在體外或在體內(nèi)抑制DNA-PK的方法，包括使細胞與有效量的本文所述的活性化合物接觸。定義d—7烷基本文所用的術(shù)語"C卜7烷基"是指通過從具有17個碳原子的(V7烴化合物中去除氫原子所獲得的一價基團，其可以是脂肪族的或脂環(huán)族的或其組合，并且其可以是飽和的、部分不飽和的或者完全不飽和的。飽和直鏈C卜7烷基的實例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基和正戊基。飽和支鏈C卜7烷基的實例包括但不限于異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基和新戊基。飽和脂環(huán)族(V7烷基(也稱為"(V7環(huán)烷基")的實例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基，以及取代的基團(例如包含這些基團的基團)，如甲基環(huán)丙基、二甲基環(huán)丙基、甲基環(huán)丁基、二甲基環(huán)丁基、甲基環(huán)戊基、二甲基環(huán)戊基、甲基環(huán)己基、二甲基環(huán)己基、環(huán)丙基甲基和環(huán)己基甲基。具有一個或多個碳-碳雙鍵的不飽和(V7烷基(也稱為"C^7烯基")的實例包括但不限于乙烯基(乙烯基，-CH=CH2)、2-丙烯基(烯丙基，-CH-CH=CH2)、異丙烯基(_C(CH3)=CH2)、丁烯基、戊烯基和己烯基。具有一個或多個碳_碳三鍵的不飽和(V7烷基(也稱為"C2—7炔基")的實例包括但不限于乙炔基和2-丙炔基(炔丙基)。具有一個或多個碳_碳雙鍵的不飽和脂環(huán)族(碳環(huán))(V7烷基(也稱為"C3—7環(huán)烯基)的實例包括但不限于諸如環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基的未取代基團以及諸如環(huán)丙烯基甲基和環(huán)己烯基甲基的取代基團(例如含有這些基團的基團)。C3—2。雜環(huán)基本文所用的術(shù)語"(V2。雜環(huán)基"是指從C3—2。雜環(huán)化合物的環(huán)原子上除去氫原子而獲得的一價基團，所述化合物具有一個環(huán)、或兩個或多個環(huán)(例如螺環(huán)、稠環(huán)、橋環(huán))，并且具有320個環(huán)原子，其中110個是環(huán)雜原子，并且其中所述一個或多個環(huán)的至少一個是雜環(huán)。優(yōu)選地，每個環(huán)具有37個環(huán)原子，其中14個是環(huán)雜原子。環(huán)雜原子可以優(yōu)選地選自0、N、S和P。"C3—2。"表示環(huán)原子，無論是碳原子還是雜原子。具有一個氮環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團氮雜環(huán)丙烷、氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷(四氫吡咯)、吡咯啉(例如3-吡咯啉、2，5-二氫吡咯)、2H-妣咯或3H-妣咯(異妣咯、異噁唑)、哌啶、二氫妣啶、四氫妣啶和氮雜革。具有一個氧環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團環(huán)氧乙烷、環(huán)氧丙烷、氧雜環(huán)戊烷(四氫呋喃)、氧雜環(huán)戊二烯(二氫呋喃)、噁烷(四氫吡喃)、二氫吡喃、妣卩南(C6)和氧雜萆。取代的C3—2。雜環(huán)基的實例包括環(huán)形的糖，例如呋喃糖和吡喃糖，例如包括核糖、來蘇糖、木糖、半乳糖、蔗糖、果糖和阿拉伯糖。具有一個硫環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團硫雜環(huán)丙烷、硫雜環(huán)丁烷、硫雜環(huán)戊烷(四氫噻吩)、硫雜環(huán)己烷(四氫噻喃)和硫雜環(huán)庚烷。具有兩個氧環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團二氧雜環(huán)戊烷、二氧雜環(huán)己烷和二氧雜環(huán)庚烷。具有兩個氮環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團咪唑烷、妣唑烷(重氮烷)、咪唑啉、妣唑啉(二氫吡唑)和哌嗪。具有一個氮環(huán)原子和一個氧環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團四氫噁唑、二氫噁唑、四氫異噁唑、二氫異噁唑、嗎啉、四氫噁嗪、二氫噁嗪和噁嗪。具有一個氧環(huán)原子和一個硫環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團氧硫雜環(huán)戊烷和氧硫雜環(huán)己烷(噻噁烷)。具有一個氮環(huán)原子和一個硫環(huán)原子的C3—2。雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團噻唑啉、噻唑烷和硫代嗎啉。C3—2。雜環(huán)基的其他實例包括但不限于噁二嗪和噁噻嗪。另外帶有一個或多個氧(=0)基的雜環(huán)基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團C5雜環(huán)，例如呋喃酮、吡喃酮、吡咯烷酮、吡唑啉酮、咪唑烷酮、噻唑酮和異噻唑酮；C6雜環(huán)，例如哌啶酮、哌啶二酮、哌嗪酮、哌嗪二酮、噠嗪酮和嘧啶酮(例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)以及巴比妥酸；稠合雜環(huán)，例如羥吲哚、羥基嘌呤(例如鳥嘌呤)、苯并噁噻唑啉酮、苯并吡喃酮(例如香豆素)；環(huán)酐(-c(二o)-o-c(二o)-在環(huán)中)，包括但不限于馬來酸酐、琥珀酸酐和戊二酸酐；環(huán)碳酸酯(-0-C(=O)-O-在環(huán)中)，例如乙二醇碳酸酯和1，2-丙二醇碳酸酯；酰亞胺(-C(=0)-NR-C(=O)-在環(huán)中)，包括但不限于琥珀酰亞胺、馬來酰亞胺、苯二酰亞胺和戊二酰亞胺；內(nèi)酯(環(huán)酯，-0-C(二0)-在環(huán)中)，包括但不限于P-丙內(nèi)酉旨、Y-丁內(nèi)酉旨、S-戊內(nèi)酯(2-哌啶酮)禾Pe-己內(nèi)酯；內(nèi)酰胺(環(huán)酰胺，-NR-C(二O)-在環(huán)中)，包括但不限于e-丙內(nèi)酰胺、Y-丁內(nèi)酰胺(2-吡咯烷酮)、S-戊內(nèi)酰胺和e-己內(nèi)酰胺；環(huán)氨基甲酸酯(-0-C(=0)-NR-在環(huán)中)例如2-噁唑烷酮；環(huán)脲(-NR-C(=0)-NR-在環(huán)中)，例如2_咪唑烷酮和嘧啶_2，4_二酮(例如胸腺嘧啶、尿嘧啶)。C5—2。芳基本文所用的術(shù)語"(V2。芳基"是指從C5—2。芳族化合物的芳環(huán)原子上除去氫原子而獲得的一價基團，所述化合物具有一個環(huán)、或兩個或多個環(huán)(例如，稠合的)，并且具有520個環(huán)原子，以及其中所述一個或多個環(huán)的至少一個是芳環(huán)。優(yōu)選地，每個環(huán)具有57個環(huán)原子。環(huán)原子可以都是碳原子，例如在"碳芳基"中，在這種情況下，所述基團可以方便地稱作"Q—2。碳芳基"基團。不含有環(huán)雜原子的C5—2。芳基(即C5—2。碳芳基)的實例包括但不限于衍生自以下化合物的基團苯(即苯基)(C6)、萘(C10)、蒽(C14)、菲(C14)、并四苯(C18)和芘(C16)。包含稠環(huán)(其中一個不是芳環(huán))的芳基的實例包括但不限于衍生自茚和芴的基團。作為替代方案，環(huán)原子可以包括一個或多個雜原子，包括但不限于氧、氮和硫，如在"雜芳基"中。在這種情況下，所述基團可以方便地稱作"C5—2。雜芳基"基團，其中"C5—2。"指環(huán)原子，無論是碳原子還是雜原子。優(yōu)選地，每個環(huán)含有57個環(huán)原子，其中04個環(huán)原子是環(huán)雜原子。C5—2。雜芳基的實例包括但不限于衍生自以下化合物的C5雜芳基呋喃(氧雜環(huán)戊二烯)、噻吩(硫雜環(huán)戊二烯)、吡咯(氮雜環(huán)戊二烯)、咪唑(1，3-二唑)、吡唑(1，2-二唑、異噻唑、噁二唑和噁三唑；和衍生自以下化合物的C6雜芳基異噁嗪、吡啶(吖嗪)、噠嗪(1，2-二嗪)、嘧啶(1，3-二嗪；例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、吡嗪(1，4_二嗪)、三嗪、四唑和噁二唑(呋咱)。包含稠環(huán)的C5—2。雜環(huán)基(其中有一些是C5—2。雜芳基)的實例包括但不限于衍生自以下化合物的C9雜環(huán)基苯并呋喃、異苯并呋喃、吲哚、異吲哚、嘌呤(例如腺嘌呤、鳥嘌呤)、苯并噻吩、苯并咪唑；衍生自以下化合物的d。雜環(huán)基喹啉、異喹啉、苯并二嗪、吡啶并吡啶、喹喔啉；衍生自以下化合物的C^雜環(huán)基咔唑、二苯并噻吩、二苯并呋喃；衍生自以下化合物的C14雜環(huán)基吖啶、咕噸、吩噁噻(phenoxathiin)、吩嗪、吩噁嗪、吩噻嗪。上述C卜7烷基丄3—2。雜環(huán)基和C5—2。芳基(無論是單獨的還是其他取代基的一部分)自身可以任選被一個或多個選自它們自己和下面所列的其他取代基的基團取代。卣基-F、-Cl、-Br和-1。羥基-0H。醚基-OR，其中R是醚取代基，例如(V7烷基(也稱作C卜7烷氧基，如下所述)丄3—2。雜環(huán)基(也稱作C3—2。雜環(huán)氧基)或C5—2。芳基(也稱作C5—2。芳氧基)，優(yōu)選C卜7烷基。d—7烷氧基-0R，其中R是C卜7烷基。C卜7烷氧基的實例包括但不限于_0CH3(甲氧基)、-0CH2CH3(乙氧基)和-0C(CH3)3(叔丁氧基)。氧基(酮、_酮)=0。含有作為取代基的氧基(=0)的環(huán)狀化合物和/或基團的實例包括但不限于碳環(huán)，例如環(huán)戊酮和環(huán)己酮；雜環(huán)，例如吡喃酮、吡咯烷酮、吡唑酮(pyrazolone)、吡唑啉酮(pyrazolinone)、哌啶酮、哌啶二酮、哌嗪二酮和咪唑烷酮；環(huán)酐，包括但不限于馬來酸酐和琥珀酸酐；環(huán)碳酸酯，例如丙二醇碳酸酯；酰亞胺，包括但不限于琥珀酰亞胺和馬來酰亞胺；內(nèi)酯(環(huán)酯，-O-C(二O)-在環(huán)中)，包括但不限于e-丙內(nèi)酯、Y-丁內(nèi)酯、S-戊內(nèi)酯和e-己內(nèi)酯；和內(nèi)酰胺(環(huán)酰胺，-NH-C(二O)-在環(huán)中)，包括但不限于e-丙內(nèi)酰胺、Y-丁內(nèi)酰胺(2-吡咯烷酮)、S-戊內(nèi)酰胺和e-己內(nèi)酰胺。亞氨基(亞胺)=NR，其中R是亞氨基取代基，例如氫、(V7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選氫或C卜7烷基。酯基的實例包括但不限于=NH、=NMe、=NEt和=NPh。甲?；?醛、甲醛)-C(=0)H。酰基(酮)-C(=0)R，其中R是酰基取代基，例如C卜7烷基(也稱作C卜7烷基?；駽卜7烷?；?、C3—2。雜環(huán)基(也稱作C3—2。雜環(huán)基?；?或C5—2。芳基(也稱作C5—2。芳基?；?，優(yōu)選C卜7烷基。?；膶嵗ǖ幌抻?C(=0)CH3(乙?；?、-C(=0)CH2CH3(丙?；?、-C(=0)C(CH3)3(丁?；?和-C(=0)Ph(苯甲?；酵?。羧基(羧酸)-C00H。酉旨(羧酯，羧酸酯，氧羰基)-C(二0)0R，其中R是酯取代基，例如(V7烷基、C3—2。雜環(huán)基或(V2。芳基，優(yōu)選C卜7烷基。酯基的實例包括但不限于-C(=0)0CH3、-C(=0)0CH2CH3、-C(=0)0C(CH3)3禾P_C(=0)0Ph。?；趸?反向酯(reverseester)):-OC(=0)R，其中R是酰基氧基取代基，例如C卜7烷基丄3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選(V7烷基。?；趸膶嵗ǖ幌抻?oc(=0)CH3(乙酰氧基)、-0C(=0)CH2CH3、-0C(=0)C(CH3)3、_0C(=0)Ph和_0C(=0)CH2Ph。酰氨基(氨基甲酰基，氨甲酰基、氨基羰基、甲酰胺)-C(=0)服力2，其中R1和R2各自獨立地是對氨基所定義的氨基取代基。氨?；膶嵗ǖ幌抻?C(=0)9C(=0)NHCH3、-C(=0)N(CH3)2、-C(=0)NHCH2CH3和-C(=0)N(CH2CH3)2，以及其中R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成雜環(huán)結(jié)構(gòu)的氨?；缭谶哙驶?、嗎啉代羰基、硫嗎啉代羰基和哌嗪羰基中那樣。?；０被?酰氨基)-NRt(=0)R、其中R1是酰胺取代基，例如氫、7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選氫或C卜7烷基，R2是?；〈?V7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選氫或(V7烷基。酰氨基的實例包括但不限于-NHC(=0)CH3、-NHC(=0)CH2CH3和-NHC(=O)Ph。R1和R2可以一起形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，例如在琥珀酰亞氨基、馬來酰亞氨基和鄰苯二甲酰亞氨基中那樣琥珀酰亞氨基馬來酰亞氨基鄰苯二甲酰亞氨基?；寤?N(R0C(O)N砍(O)R其中R1和R2獨立地是脲基取代基，例如氫、7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選氫或C卜7烷基。R3是對?；鶊F所定義的酰基。酰基脲基的實例包括但不限于-NHCONHC(0)H、-NHCONMeC(0)H、-NHCONEtC(0)H、-NHCONMeC(O)Me、-NHCONEtC(0)Et、-NMeCONHC(0)Et、-NMeCONHC(0)Me、-NMeCONHC(0)Et、-NMeCONMeC(0)Me、-NMeCONEtC(0)Et和-NMeCONHC(0)Ph。氨酯基-NI^-C(0)-OR2，其中R1是如對氨基基團所定義的氨基取代基，R2是如對酯基基團所定義的酯基。氨酯基的實例包括但不限于-NH-C(0)-O-Me、-NMe-C(0)-0_Me、-NH-C(0)-O-Et、-NMe-C(0)-0-叔丁基和-NH-C(0)-O-Ph。硫代酰氨基(硫代氨基甲?；?-C(=S)NR力2，其中R1和R2獨立地是氨基取代基，如對氨基基團所定義的。酰氨基的實例包括但不限于-C(=S)NH2、_C(=S)NHCH3、-C(=S)N(CH3)2禾口-C(=S)NHCH2CH3。四唑基含有四個氮原子和一個碳原子的五元芳環(huán)，氨基-NRW，其中R1和R2獨立地是氨基取代基，例如氫、(V7烷基(也稱作C卜7烷基氨基或二-C卜7烷基氨基)、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選H或C卜7烷基，或者，在"環(huán)狀"氨基的情況下，R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成含有48個環(huán)原子的雜環(huán)。氨基的實例包括但不限于_NH2、-NHCH3、-NHC(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2和-NHPh。環(huán)氨基的實例包括但不限于氮丙啶基、氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉代和硫嗎啉代。亞氨基=NR，其中R是亞氨基取代基，例如氫、(V7烷基丄3—2。雜環(huán)基或(:5—2。芳基，優(yōu)選H或C卜7烷基。脒基-C(=NR)NR2，其中每個R是脒基取代基，例如氫、C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選H或C卜7烷基。脒基的實例是-C(=NH)NH2。肼基甲酰基(肼基羰基)-C(0)-NN-R、其中R1是氨基取代基，如對氨基基團所定義的。連氮基的實例包括但不限于-C(0)-NN-H、-C(0)-NN-Me、_C(0)-NN-Et、_C(0)-NN-Ph和-C(O)-NN-CH2-Ph。硝基-N02。亞硝基-NO。疊氮基_N3。氰基(腈):-CN。異氰基-NC。氰氧基-OCN。異氰氧基-NCO。氰硫基(硫氰酸基)-SCN。異氰硫基(異硫氰酸基)-NCS。巰基(硫羥基、氫硫基)-SH。硫醚基(硫化物)-SR，其中R是硫醚取代基，例如C卜7烷基(也稱作C卜7烷硫基)、C3—20雜環(huán)基或C5—20芳基，優(yōu)選C卜7烷基。(V7烷硫基的實例包括但不限于_SCH3和-SCH2CH3。二硫醚基-SS-R，其中R是二硫醚取代基，例如C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選(V7烷基(此處也稱作C卜7烷基二硫醚基)。C卜7烷基二硫醚基的實例包括但不限于-SSCH3和-SSCH2CH3。砜基(磺?；?-S(=0)2R，其中R是砜取代基，例如C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—^芳基，優(yōu)選C卜7烷基。砜基的實例包括但不限于-S(=0)2CH3(甲烷磺?；⒓谆酋；?、-S(=0)2CF3(三氟甲磺?；?、-S(=0)2CH2CH3、-S(=0)2C4F9(九氟丁磺酰基)、_S(=0)2CH2CF3(三氟乙磺?；?、-S(=0)2Ph(苯磺?；?、4-甲基苯基磺?；?對甲苯磺?；?、4-溴苯基磺?；?對溴苯磺?；?和4-硝基苯基(對硝基苯磺?；?。硫肟基(sulfine)(亞磺?；?、亞砜基)-S(=0)R，其中R是硫肟取代基，例如(V7烷基丄3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選C卜7烷基。硫肟基的實例包括但不限于-S(=0)CH3和-S(=0)CH2CH3?；酋；趸?OS(=0)2R，其中R是磺?；趸〈?，例如(V7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選C卜7烷基?；酋；趸膶嵗ǖ幌抻?OS(=0)2CH3和-OS(=0)2CH2CH3。亞磺酰基氧基-OS(=0)R，其中R是亞磺酰基氧基取代基，例如(V7烷基丄3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選(V7烷基。亞磺?；趸膶嵗ǖ幌抻?OS(=0)CH3和-OS(=0)CH2CH3。磺酸氨基-NI^S(=0)20H，其中R1是氨基取代基，如對氨基基團所定義的。磺酸氨基的實例包括但不限于-NHS(=0)20H和-N(CH3)S(=0)20H。亞磺酰氨基-NI^S(=O)R，其中R1是氨基取代基，如對氨基基團所定義的，R是亞磺酰氨基取代基，例如C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選C卜7烷基。亞磺酰氨基的實例包括但不限于-NHS(=0)CH3和-N(CH3)S(=0)C6H5。氨磺?；?S(二0)NR力、其中W和I^獨立地是氨基取代基，如對氨基基團所定義11的。氨磺?；膶嵗ǖ幌抻?S(=0)NH2、-S(=0)NH(CH3)、-S(=0)N(CH3)2、_S(=0)NH(CH2CH3)、-S(=0)N(CH2CH3)2禾P_S(=0)NHPh?；酋０被?NI^S(=0hR，其中R1是如對氨基基團所定義的氨基取代基，R是磺酰氨基取代基，例如C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選(V7烷基。磺酰氨基的實例包括但不限于-NHS(=0)2CHJP-N(CH3)S(=0)2C6H5。一種特殊類型的磺酰氨基基團是衍生自磺內(nèi)酰胺的那些，在這些基團中，R1和R中的一個是C5—2。芳基，優(yōu)選苯基，而R1和R中的另一個是連接于(V2。芳基的二齒基團，例如衍生自C卜7烷基的二齒基團。這類基團的實例包括但不限于2，3-二氫-苯并[d]異噻唑-l，l-二氧化物-2-基-N。401，3-二氫-苯并[c]異噻唑-2，2-二氧化物-l-基3，4-二氫-2H-苯并[e][1，2]噻嗪_1，1_二氧化物_2_基亞磷酰胺基(phosphoramidite):-0P(OR1)_NR22，其中R1和R2是亞磷酰胺取代基，例如_H、(任選取代的)(V7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選-H、C卜7烷基或C5—2。芳基。亞磷酰胺基的實例包括但不限于-OP(0CH2CH3)-N(CH3)2、-OP(0CH2CH3)-N(i-Pr)2和-OP(0CH2CH2CN)-N(i-Pr)2。氨基磷酸酯基(Phosphoramidate)廣OP(=0)(OR1)_NR22，其中R1和R2是氨基磷酸酯取代基，例如_H、(任選取代的)C卜7烷基、C3—2。雜環(huán)基或C5—2。芳基，優(yōu)選-H、(V7烷基或C5—2。芳基。氨基磷酸酯基的實例包括但不限于-OP(=0)(0CH2CH3)-N(CH3)2、-OP(=0)(0CH2CH3)-N(i-Pr)2和-OP(=0)(0CH2CH2CN)-N(i_Pr)2。在許多情況下，取代基本身可以是被取代的。例如7烷氧基可以被下列基團取代例如C卜7烷基(也稱作(V7烷基-(V7烷氧基)，例如環(huán)己基甲氧基；C3—2。雜環(huán)基(也稱作C5—2。芳基-C卜7烷氧基)，例如鄰苯二甲酰亞氨基乙氧基；或C5—2。芳基(也稱作C5—2。芳基-cv7烷氧基)，例如，芐基氧基。包括其他形式上述定義中還包括眾所周知的離子、鹽、溶劑化物和這些取代基的保護形式。例如，當提及羧酸(-C00H)時，也包括其陰離子(羧酸根)形式(-C00—)、鹽或溶劑化物以及常規(guī)保護形式。類似地，當提及氨基時，包括氨基的質(zhì)子化形式(-N+HRf)、鹽或溶劑化物，例如鹽酸鹽，以及氨基的常規(guī)保護形式。類似地，當提及羥基時，也包括其陰離子形式(-0—)、鹽或溶劑化物以及羥基的常規(guī)保護形式。異構(gòu)體、鹽、溶劑化物、保護形式和前藥某些化合物可能以一種或多種特定的幾何、光學、對映、非對映、差向異構(gòu)、立體異構(gòu)、互變異構(gòu)、構(gòu)象異構(gòu)或端基異構(gòu)形式存在，包括但不限于順式(cis)-和反式(trans)-型；E-禾PZ-型；c-、t-和r-型；內(nèi)-和外-型；R-、S-和內(nèi)消旋-型；D-禾PL-型；d-和l-型；(+)和(_)型；酮-、烯醇和烯醇化物-形式；順(syn)-和反(anti)-型；順錯_和反錯_型；a_和P_型；軸向和平伏型；船式_、椅式_、扭曲式_、包繞式_和半椅式_型；及其組合，以下統(tǒng)稱為"異構(gòu)體"(或"異構(gòu)體型")。注意，除了下文關(guān)于互變異構(gòu)形式的討論外，特別要從本文所用的術(shù)語"異構(gòu)體"中排除的是結(jié)構(gòu)(或構(gòu)成)異構(gòu)體(即在原子之間的連接不同而非僅僅是原子的空間位置有差別的異構(gòu)體)。例如，當提及甲氧基_0CH3時，不應(yīng)理解為是指其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，即羥甲基-CH^H。類似地，當提及鄰-氯苯基時，不應(yīng)理解為是指其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，即間-氯苯基。然而，當提及一類結(jié)構(gòu)時，應(yīng)當也包括屬于該類別的結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式(例如，C卜7烷基包括正丙基和異丙基；丁基包括正_、異_、仲_和叔_丁基；甲氧基苯基包括鄰_、間_和對_甲氧基苯基)。上述排除不涉及互變異構(gòu)形式，例如酮-、烯醇-和烯醇化物-形式，例如在下列互變異構(gòu)對中酮/烯醇(如下所示)、亞胺/烯胺、酰胺/亞氨基醇、脒/脒、亞硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亞硝基/羥基偶氮和硝基/酸式硝基。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>酮烯醇烯醇化物注意，在術(shù)語"異構(gòu)體"中特別包括具有一個或多個同位素取代的化合物。例如，H可以以任何同位素形式包括^H(D)和3H(T)存在；C可以以任何同位素形式包括"C、"C和14C存在；0可以以任何同位素形式包括160和180存在；等等。除非另外說明，當提及具體化合物時，包括全部這些異構(gòu)形式，包括(全部或部分)其外消旋形式以及其他混合物。這些異構(gòu)形式的制備(例如不對稱合成)和分離(例如分步結(jié)晶和色譜手段)方法在本領(lǐng)域中是已知的，或者通過采用本文所述方法或已知方法用已知方式容易地獲得。除非另外說明，當提及具體化合物時，也包括其離子、鹽、溶劑化物和保護形式，例如下文所討論的那些。制備、純化和/或處理活性化合物的相應(yīng)鹽例如藥學上可接受的鹽可能是方便的或所希望的。藥學上可接受的鹽的實例在Berge等，J.Pharm.Sci.，66,1-19(1977)中進行了討論。例如，如果化合物是陰離子性的或者具有可以是陰離子的官能團(例如，-C00H可以是-COO—)，則可以與適當?shù)年栯x子生成鹽。適當?shù)臒o機陽離子的實例包括但不限于堿金屬離子，如Na+和K+;堿土金屬陽離子，例如Ca2+和Mg2+;和其他陽離子，例如Al3+。適當?shù)挠袡C陽離子的實例包括但不限于銨離子(即NH/)和取代的銨離子WMnNH3R+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)。一些適當?shù)娜〈@離子的實例是衍生自以下化合物的那些乙胺、二乙胺、二環(huán)己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、芐胺、苯基芐胺、膽堿、葡甲胺和氨基丁三醇以及氨基酸如賴氨酸和精氨酸。常見季銨離子的實例是N(CH3)/。如果化合物是陽離子性的或者具有可以是陽離子的官能團(例如，-NK可以是-朋3+)，則可以與適當?shù)年庪x子生成鹽。適當?shù)臒o機陰離子的實例包括但不限于衍生自下列無機酸的那些鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、亞硫酸、硝酸、亞硝酸、磷酸和亞磷酸。適當?shù)挠袡C陰離子的實例包括但不限于衍生自下列有機酸的那些乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、棕櫚酸、乳酸、蘋果酸、撲酸、酒石酸、檸檬酸、葡糖酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、天冬氨酸、苯甲酸、肉桂酸、丙酮酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、苯基磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、乙二磺酸、草酸、泛酸、羥乙磺酸、戊酸、乳糖酸和葡糖酸。適當?shù)木酆衔镪庪x子的實例包括但不限于衍生自下列聚合物酸的那些鞣酸、羧甲基纖維素。制備、純化和/或處理活性化合物的相應(yīng)溶劑化物可能是方便的或者所希望的。術(shù)語"溶劑化物"在本文中以常規(guī)意義使用，指溶質(zhì)(例如活性化合物、活性化合物的鹽)與溶劑的復合物。如果溶劑是水，則溶劑合物可以方便地稱為水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。制備、純化和/或處理化學保護形式的活性化合物可能是方便的或者所希望的。本文所用的術(shù)語"化學保護形式"是指其中一個或多個反應(yīng)性官能團被保護起來以免發(fā)生不希望的化學反應(yīng)(即以被保護或保護基團的形式，也稱作被掩蔽或掩蔽基團或者被阻隔或阻隔基團)的化合物。通過保護反應(yīng)性官能團，可以進行涉及其他未保護反應(yīng)性官能團的反應(yīng)，而不影響被保護基團；可以除去保護基團，通常在隨后的步驟中，而不會顯著影響分子的剩余部分。參見例如ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis(T.Green和P.Wuts，Wiley，1999)。例如，羥基可以作為醚(-0R)或酯(-0C(=O)R)進行保護，例如叔丁基醚；節(jié)基、二苯甲基(二苯基甲基)或三苯甲基(三苯基甲基)醚；三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基醚；或乙?；?-OC(=0)CH3，-OAc)。例如，醛或酮基團可以分別作為縮醛或縮酮進行保護，其中羰基(>C=0)通過例如與伯醇的反應(yīng)被轉(zhuǎn)化成二醚(>C(0R)2)。醛或酮基團容易地在酸的存在下利用大量過量的水通過水解再生。例如，胺基可以例如作為酰胺或氨酯進行保護，例如作為甲基酰胺(_NHC0-CH3);芐氧基酰胺(_NHC0-0CH2C6H5，-NH-Cbz);作為叔丁氧基酰胺(-NHC0-0C(CH3)3，-NH-Boc);2-聯(lián)苯基-2-丙氧基酰胺(_NHC0-0C(CH3)2C6H4C6H5，-NH-Bpoc)，作為9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)，作為6-硝基藜戸氧基酰胺(-NH-Nvoc)，作為2-三甲基甲硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc)，作為2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)，作為烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)，作為2(-苯基磺?；?乙氧基酰胺(-NH-Psec);或者，在適當情況下，作為N-氧化物(>N0$)。例如，羧酸基團可以作為酯進行保護，例如作為C卜7烷基酯(例如甲酯、叔丁酯)；(V7鹵代烷基酯(例如(V7三鹵代烷基酯)；三C卜7烷基甲硅烷基-C卜7烷基酯；或C5—2。芳基-C卜7烷基酯(例如芐基酯、硝基芐基酯)；或作為酰胺，例如，作為甲酰胺。14例如，硫羥基可以作為硫醚(-SR)進行保護，例如作為節(jié)基硫醚；乙酰氨基甲基醚(_S-CH2NHC(=0)CH3)。制備、純化和/或處理前藥形式的活性化合物可能是方便的或者所希望的。本文所用的術(shù)語"前藥"是指新陳代謝(例如在體內(nèi))時產(chǎn)生所希望的活性化合物的化合物。通常，前藥是不活潑的，或者不如活性化合物活潑，但是可以提供有利的處理、施用或代謝性質(zhì)。例如，有些前藥是活性化合物的酯(例如生理學上可接受的代謝不穩(wěn)定酯)。在代謝過程中，酯基(-C(=O)OR)分裂得到活性藥物。這種酯可以通過酯化形成，例如酯化母體化合物中的任何一個羧酸基團(-C(=O)OH)，如果合適的話，預先保護母體化合物中存在的任何其他反應(yīng)性基團，隨后根據(jù)需要進行去保護。這種代謝不穩(wěn)定酯的實例包括其中R是(V7烷基(例如-Me、-Et)、C卜7氨基烷基(例如氨基乙基、2-(N，N-二乙基氨基)乙基、2-(4-嗎啉代)乙基)和酰氧基-C卜7烷基(例如酰氧基甲基、酰氧基乙基，如新戊酰氧基甲基、乙酰氧基甲基、1-乙酰氧基乙基、1-(1_甲氧基-l-甲基)乙基-羰氧基乙基、l-(苯甲酰氧基)乙基、異丙氧基-羰氧基甲基u-異丙氧基_羰氧基乙基、環(huán)己基_羰氧基甲基、1-環(huán)己基-羰氧基乙基、環(huán)己基氧基_羰氧基甲基、1-環(huán)己基氧基_羰氧基乙基、(4-四氫吡喃基氧基)羰氧基甲基、l-(4-四氫吡喃基氧基)羰氧基乙基、(4-四氫吡喃基)羰氧基甲基和1-(4-四氫吡喃基)羰氧基乙基)的酯。此外，有些前藥被酶促活化以產(chǎn)生活性化合物或者在進一步的化學反應(yīng)時產(chǎn)生活性化合物的化合物。例如，前藥可以是糖衍生物或其他糖苷偶聯(lián)物，或者可以是氨基酸酯衍生物。選擇性抑制"選擇性抑制"是指對一種酶的抑制程度大于對一種或多種其他酶的抑制程度。該選擇性可以通過將抑制一種酶的50%活性(IC5。)所需要的化合物濃度與抑制其他酶的50%活性(IC5。)所需要的相同化合物的濃度比較來測得(參見如下)。該結(jié)果以比例表示。如果該比例大于l，那么所測試的化合物在其抑制作用方面表現(xiàn)出某些選擇性。與PI3-激酶相比，本發(fā)明的化合物優(yōu)選對DNA-PK表現(xiàn)出大于3、10、20或50的選擇性。與ATM相比，本發(fā)明的化合物優(yōu)選對DNA-PK表現(xiàn)出大于5、10、50或100的選擇性。優(yōu)選的是，用于評估選擇性的IC5。值利用WO03/024949中描述的方法進行測定，該文獻通過引用并入本文。其他實施方案n在一些實施方案中，n是l。在其他實施方案中，n是2。X在一些實施方案中，X是N。在其他實施方案中，X是CH。Rd禾口RC2如果f和f都是甲基，那么RX可以選自C卜4烷基和H。在這些實施方案的一些中，rx可以是h。在一些實施方案中，Rei和Re2都是H。Rx<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>在一些實施方案中，當X是N時，Rx選自H和任選取代的C卜7烷基、C5—2。芳基、酰基、酯基、酰氨基和磺?；?。在這些實施方案的一些中，Rx選自H和任選取代的(V7烷基和磺?；?。在一些實施方案中，(V7烷基可以是(V4烷基，并且可以例如選自甲基、乙基和丙基。7烷基的任選取代基可以包括但不限于C5—2。芳基(例如苯基)、C3—2。雜環(huán)基(例如嗎啉代、四氫呋喃基)、鹵基(例如氟、氯)、羥基、醚基(例如C卜7烷氧基)、?；?例如7烷基羰基)、羧基、酯基(例如(V7烷基酯)、酰氧基、酰氨基、?；０被?、氨基、氰基和c3—7環(huán)烷基(例如環(huán)丙基)。在這些實施方案的一些中，(V7烷基上的任選取代基可以選自醚基(例如(V7烷氧基)、酰基(例如C卜7烷基羰基)、氰基和C3—7環(huán)烷基(例如環(huán)丙基)。在一些實施方案中，C5—2。芳基可以是C5—7芳基，并且可以例如選自苯基和吡啶基。c5—2。芳基的任選取代基可以包括但不限于c卜7烷基(例如甲基、乙基)、c3—2。雜環(huán)基(例如嗎啉代)、鹵基(例如氟、氯)、羥基、醚基(例如C卜7烷氧基)、?；?例如7烷基羰基)、羧基、酯基(例如(V7烷基酯)、酰氧基、酰氨基、?；０被?、氨基、氰基和c3—7環(huán)烷基(例如環(huán)丙基)。在一些實施方案中，?；梢跃哂蠧卜7烷基(例如甲基)或(V2。雜環(huán)基(例如四氫呋喃基)作為?；〈Ｔ谝恍嵤┓桨钢?，酯基可以具有C卜7烷基或(V4烷基(例如叔丁基)作為酯基取代基。在一些實施方案中，磺?；梢跃哂蠧卜7烷基或C卜4烷基(例如甲基、乙基)作為磺酰基取代基。在一些實施方案中，當X是CH時，RX是(V2。雜環(huán)基。Rx也可以是酰基、醚基或氨基。在這些實施方案的一些中，C3—2。雜環(huán)基是C5—7雜環(huán)基(例如嗎啉代)。在這些實施方案的一些中，酰基可以具有C卜7烷基或C卜4烷基(例如甲基、乙基)作為酰基取代基。在這些實施方案的一些中，醚基可以是(V4烷氧基(例如乙氧基、甲氧基)。在這些實施方案的一些中，氨基可以是二-(V4烷基氨基(例如二甲基氨基)。取代基本身可以被如上所述的取代基取代。例如，如果所述基團中的一個被醚基(例如(V7烷氧基)取代，那么該基團本身可以被羥基、C卜7烷基或醚基(例如(V7烷氧基)取代。R1和R2在式I化合物中，當R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有48個原子的雜環(huán)時，這可以形成如上所定義的C4—2。雜環(huán)基的一部分(除了具有最少的4個環(huán)原子之外)，其必須包含至少一個氮環(huán)原子。優(yōu)選的是，R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有5、6或7個原子、更優(yōu)選6個環(huán)原子的雜環(huán)。具有一個氮原子的單環(huán)包括氮雜環(huán)丙烷、氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷(四氫吡咯)、吡咯啉(例如3-吡咯啉、2，5-二氫吡咯)、2H-吡咯或3H-吡咯(異吡咯、異噁唑)、哌啶、二氫吡啶、四氫吡啶和氮雜革;具有兩個氮原子的單環(huán)包括咪唑烷、吡唑烷(重氮烷)、咪唑啉、吡唑啉(二氫吡唑)和哌嗪；具有一個氮和一個氧的單環(huán)包括四氫噁唑、二氫噁唑、四氫異噁唑、二氫異噁唑、嗎啉、四氫噁嗪、二氫噁秦和噁嗪；具有一個氮和一個硫的單環(huán)包括噻唑啉、噻唑烷和硫代嗎啉。優(yōu)選的環(huán)是除了氮還含有一個雜原子的那些，具體而言，優(yōu)選的雜原子是氧和硫。因此，優(yōu)選的基團包括嗎啉代、硫代嗎啉代、噻唑啉基。優(yōu)選的不含有其他雜原子的基團包括吡咯烷基。最優(yōu)選的基團是嗎啉代和硫代嗎啉代。如上所述，這些雜環(huán)基團本身可以被取代；優(yōu)選的取代基種類是(V7烷基。當雜環(huán)基是嗎啉代時，所述一個或多個取代基優(yōu)選甲基或乙基，更優(yōu)選甲基。單獨的甲基取代基最優(yōu)選處于2位上。除了上文所列的單環(huán)基團，還設(shè)想具有橋基或交聯(lián)基的環(huán)。這些類型的基團中含有氮和氧原子的環(huán)的實例有它們分別稱作8-氧雜-3-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基、6_氧雜_3_氮雜_雙環(huán)[3.1.0]己-3-基、2-氧雜-5-氮雜-雙環(huán)[2.2.1]庚-5-基和7-氧雜-3-氮雜-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基。一般合成方法式I化合物(I)0可以利用Buchwald反應(yīng)通過偶聯(lián)式1和2的化合物來合成17<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>所述Buchwald反應(yīng)需要存在堿(例如叔丁醇鈉)和活性催化劑(例如通過(1，1-雙(二苯基膦基)二茂鐵和三(二亞芐基丙酮)二鈀)的反應(yīng)原位形成的那種)。作為替代方案，X是N時的式I化合物可以通過使式3化合物與Hal-Rx偶聯(lián)來由式3化合物獲得0其中Hal表示鹵素，例如溴，RX是任選取代的C卜7烷基。這可以在堿例如N，N，-二異丙基乙基胺的存在下進行。X是N且Rx是磺酰基時的式I化合物可以通過使式3化合物與合適的磺酰氯在堿(例如N，N-二異丙基乙基胺)的存在下反應(yīng)而獲得。式3化合物可以通過使式4化合物去保護來獲得18<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>本發(fā)明化合物的用途本發(fā)明提供了一種活性化合物，尤其是活性取代二苯并硫代苯基氨基-色烯-4-酮。本文所用的術(shù)語"活性"是指能夠抑制DNA-PK活性的化合物，尤其包括具有固有活性的化合物(藥物)以及這些化合物的前藥，所述前藥本身可以表現(xiàn)出極少的或沒有固有活性?？梢杂脕碓u估具體化合物所提供的DNA-PK抑制作用的一種測試方法在下面的實施例中進行描述。本發(fā)明還提供一種抑制DNA-PK在細胞中的抑制作用的方法，所述方法包括使所述細胞與有效量的活性化合物接觸，所述活性化合物優(yōu)選為藥學上可接受的組合物的形式。該方法可以在體外或體內(nèi)實施。例如，細胞樣品(例如取自腫瘤)可以在體外生長，使活性化合物與所述細胞接觸，并結(jié)合具有已知療效的試劑，觀察到所述化合物在這些細胞上的療效增強。本發(fā)明還提供抑制DNA-PK活性的活性化合物，以及抑制DNA-PK活性的方法，所述方法包括使細胞與有效量的活性化合物接觸，無論是體外還是體內(nèi)?；钚曰衔镞€可以用作抑制DNA-PK的細胞培養(yǎng)添加劑，例如，為了使細胞對已知的化學治療劑或體外電離輻射治療敏感?；钚曰衔镞€可以用作體外測試的一部分，例如，為了確定候選宿主是否可能得益于使用所討論的化合物進行的治療。本發(fā)明還提供用于人體或動物體治療方法的活性化合物。這種方法可以包括向這類對象施用治療有效量的活性化合物，優(yōu)選為藥物組合物形式的活性化合物。本文在治療疾病的情況下所用的術(shù)語"治療"一般是指治療和療法，無論是人體還是動物體(例如在獸醫(yī)應(yīng)用中)，其中獲得一些所希望的療效，例如抑制病癥的進展，并且包括進展速率的降低、進展速率的停止、病癥改善和病癥治愈。作為預防措施的處理(即預防法)也包括在內(nèi)。本文所用的術(shù)語"治療有效量"是指活性化合物或者包含活性化合物的物質(zhì)、組合物或劑型有效地產(chǎn)生某些希望的治療效果并具有合理的受益/風險比的量。本文所用的術(shù)語"輔助劑(adjunct)"涉及與已知的治療手段一起使用活性化合物。這種手段包括藥物的治療不同類型癌時所使用的細胞毒素方案和/或電離輻射?？梢耘c本發(fā)明的化合物組合的輔助抗癌劑的實例包括但不限于以下藥劑烷化劑氮芥、二氯甲基二乙胺、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、亞硝基脲、卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀(甲基-CCNU)、亞乙基亞胺/甲基三聚氰胺、三亞乙基三聚氰胺(TEM)、三亞乙基硫代磷酰胺(噻替派)、六甲基三聚氰胺(HMM，六甲蜜胺)；烷基磺酸酯甲磺酸丁二醇二酯；三嗪、達卡巴嗪(DTIC);抗代謝藥物葉酸類似物、甲氨蝶呤，三甲曲沙、嘧啶類似物、5-氟脲嘧啶、氟脫氧脲嘧啶、吉西他濱、胞嘧啶阿拉伯糖苷(AraC，阿糖胞苷)、5_氮胞苷、2，2'-雙氟去氧胞苷；嘌呤類似物；6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、硫唑嘌呤、2'-脫氧助間型霉素(噴司他丁)、赤羥基壬基腺嘌呤(EHNA)、磷酸氟達拉濱、2-氯脫氧腺苷(克拉屈濱，2-CdA);拓撲異構(gòu)酶I抑制劑；喜樹堿、托泊替康、依立替康、盧比替康；天然產(chǎn)物；抗有絲分裂藥物、紫杉醇、長春花生物堿、長春花堿(VLB)、長春新堿、長春瑞濱、TaXOtere(多西他奇)、雌莫司汀、雌莫司汀磷酸鹽；印ipodophylotoxins、依托泊苷、替尼泊苷；抗生素放線菌素D、道諾霉素(紅比霉素)、阿霉素(亞德里亞霉素)、米托蒽醌、伊達比星、博萊霉素、普卡霉素(光神霉素)、絲裂霉素C、更生霉素；酶L-天冬酰胺酶，核糖核酸酶A;生物響應(yīng)修飾劑干擾素-a、IL-2、G-CSF、GM-CSF;分化劑視黃酸衍生物；放射增敏劑；滅滴靈、醚醇硝唑、去甲基醚醇硝唑、哌莫硝唑、依他硝唑、尼莫拉唑、RSU1069、E09、RB6145、SR4233、煙酰胺、5-溴脫氧尿苷、5-碘脫氧尿苷、溴脫氧胞嘧啶；鉑配位配合物順鉬、卡鉑；蒽二酮米托蒽醌、AQ4N取代的脲、羥基脲；甲基肼衍生物J-甲基肼(MIH)、丙卡巴肼；腎上腺皮質(zhì)抑制劑、米托坦(0.p'-DDD)、氨魯米特；細胞因子；干擾素(a，13，Y)、白介素；激素和拮抗劑；腎上腺皮質(zhì)類固醇/拮抗劑、潑尼松和等同物、地塞米松，氨魯米特；孕激素、己酸羥孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮；雌激素、己烯雌酚、乙炔基雌二醇/等同物；抗雌激素、三苯氧胺；雄激素、丙酸睪酮、氟羚甲基睪丸素/等同物；抗雄性激素、氟他胺、促性腺激素-釋放激素類似物、亮丙立得；非類固醇類的抗雄性激素、氟他胺；EGFR抑制劑、VEGF抑制劑；蛋白酶體抑制劑。癌癥本發(fā)明提供作為抗癌劑或治療癌癥的輔助劑的活性化合物。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠容易地確定候選化合物是否治療任何特定細胞類型的癌癥癥狀，單獨使用或者組合使用。癌癥的實例包括但不限于肺癌、小細胞肺癌、胃腸癌、腸癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、卵巢惡性腫瘤、前列腺癌、睪丸癌、肝癌、腎癌、膀胱癌、胰腺癌、腦癌、惡性毒瘤、骨肉瘤、卡波西肉瘤、黑色素瘤和血癌。可以治療任何類型的細胞，包括但不限于肺、胃腸(包括腸、結(jié)腸)、乳腺(乳房的)、卵巢、前列腺、肝(肝的)、腎(腎臟的)、膀胱、胰腺、腦和皮膚。上文所定義的抗癌治療可以用作單獨的治療，或者除了本發(fā)明的化合物以外，還涉及傳統(tǒng)的外科或放射性治療或者化學治療。這樣的化學治療可以包括以下類別的抗腫瘤劑中的一種或多種(i)在內(nèi)科腫瘤學中所用的其他抗細胞增生/抗腫瘤藥物及其組合，例如烷化劑(例如順鉑、奧沙利鉑、卡鉑、環(huán)磷酰胺、氮芥、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、白消安、替莫唑胺、亞硝基脲)；抗代謝藥物(例如吉西他濱和葉酸拮抗物如氟嘧啶類，5氟尿嘧啶和替加氟、雷替曲塞、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、和羥基脲)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環(huán)類，阿霉素、博萊霉素、多柔比星、道諾霉素、表柔比星、伊達比星、絲裂霉素-L更生霉素和光神霉素)；抗有絲分裂的藥物(例如長春花生物堿類，長春新堿、長春花堿、長春地辛和長春瑞濱，以及紫杉烷類，如紫杉醇和紫杉特爾，和polokinase抑制劑)；和拓撲異構(gòu)酶抑制劑(例如鬼臼素類，如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康和喜樹堿)；(ii)細胞抑制劑如抗雌激素(例如他莫昔芬、氟維司群、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和iodoxyfene)、抗雄激素(例如比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特和醋酸環(huán)丙孕酮)、LHRH拮抗劑或LHRH激動劑(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕激素(例如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制劑(例如阿那曲唑、來曲唑、伏氯唑(vorazole)和依西美坦)和5^-還原酶抑制劑例如非那雄胺；(iii)抗侵襲劑(anti-invasionagents)(例如，c-Src激酶家族抑制劑，如4-(6-氯-2，3-亞甲基二氧苯胺)-7-[2-(4-甲基哌嗪_1_基)乙氧基]_5_四氫吡喃-4-基氧喹唑啉(AZD0530，國際專利申請W001/94341)和N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-{6-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]_2-甲基嘧啶-4-基氨基}噻唑-5-甲酰胺(達沙替尼，BMS-354825;J.Med.Chem.，2004，47，6658-6661)，以及金屬蛋白酶抑制劑，如馬立馬司他、尿激酶型纖溶酶原激活物受體功能抑制劑或乙酰肝素酶抗體)；(iv)生長因子功能抑制劑例如這種抑制劑包括生長因子抗體和生長因子受體抗體(例如抗erbB2的抗體曲妥珠單抗[Herc印tinT]、抗EGFR抗體帕尼單抗(panitumumab)、抗erbBl抗體西妥昔單抗[Erbitux，C225]禾口Stern等，Criticalreviewsinoncology/haematology，2005，Vol.54，第11-29頁公開的任何生長因子或生長因子受體抗體)；這種抑制劑還包括酪氨酸激酶抑制劑，例如表皮生長因子家族的抑制劑(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制劑，如N-(3-氯-4-氟苯基)-7_甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，ZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃羅替尼，0SI774)和6-丙烯酰氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-嗎啉代丙氧基)-喹唑啉-4-胺(CI1033);erbB2酪氨酸激酶抑制劑，如拉帕替尼、肝細胞生長因子家族的抑制劑、血小板衍生的生長因子家族的抑制劑(如伊馬替尼)、絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑(例如Ras/Raf信號傳遞(signalling)抑制劑，如法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，例如索拉非尼(BAY43-9006))、通過MEK和/或AKT激酶的細胞信號傳遞抑制劑、肝細胞生長因子家族的抑制劑、c-kit抑制劑、abl激酶抑制劑、IGF受體(胰島素樣生長因子)激酶抑制劑；極光激酶(aurorakinase)抑制劑(例如AZD1152、PH739358、VX_680、MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528和AX39459)和細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(例如CDK2和/或CDK4抑制劑)；(v)抗血管生成劑，例如抑制血管內(nèi)皮生長因子的作用的那些[例如抗血管內(nèi)皮細胞生長因子抗體貝伐單抗(AvastinT)和VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑(例如4-(4-溴-2-氟苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(ZD6474;W001/32651中的實施例2)、4-(4-氟-2-甲基卩引哚_5_基氧基)-6-甲氧基-7-(3-妣咯烷-l-基丙氧基)喹唑啉(AZD2171;W000/47212中的實施例240)、瓦他拉尼(PTK787;W098/35985)和SU11248(舒尼替尼；W001/60814)，諸如國際專利申請W097/22596、W097/30035、W097/32856和W098/13354中公開的那些化合物，以及通過其他機理起作用的化合物(例如利諾胺、整合素avb3功能的抑制劑和血管抑制素))];(vi)血管破壞劑，例如考布他汀A4和國際專利申請W099/02166、W000/40529、WO00/41669、W001/92224、W002/04434和WO02/08213中公開的化合物；(vii)反義療法，例如涉及上文所列目標的那些，例如ISIS2503(—種anti-ras反義藥物)。(viii)基因治療方法，包括例如替代異?；?例如異常p53或者異常BRCA1或BRCA2)的方法、GDEPT(基因?qū)蛐悦盖八幹委?方法(例如使用胞嘧啶脫氨酶、胸苷激酶或細菌酶硝基還原酶的那些)和提高患者對于化學治療或放射性治療的耐受性的方法(例如多藥耐藥基因療法)；以及(ix)免疫療法，包括例如提高患者腫瘤細胞免疫原性的體外和體內(nèi)方法(例如使用諸如白細胞介素2、白細胞介素4或粒細胞巨噬細胞集落剌激因子的細胞因子轉(zhuǎn)染)、減少T細胞無能的方法、使用諸如細胞因子轉(zhuǎn)染樹突狀細胞的轉(zhuǎn)染免疫細胞的方法、使用細胞因子轉(zhuǎn)染腫瘤細胞系的方法和使用抗獨特型抗體的方法。給藥活性化合物或者包含活性化合物的藥物組合物可以通過任意方便的施用途徑施用給對象，無論是全身地/外圍地還是在所希望作用的部位，包括但不限于口服(例如通過攝食)；局部(包括例如透皮、鼻內(nèi)、眼睛、經(jīng)頰和舌下)；肺部(例如通過吸入或吹氣療法，使用例如氣溶膠，例如通過口或鼻)；直腸；陰道；腸胃外，例如通過注射，包括皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、心臟內(nèi)、鞘內(nèi)、椎管內(nèi)、囊內(nèi)、囊下、眶內(nèi)、腹膜內(nèi)、氣管內(nèi)、表皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、蛛網(wǎng)膜下和胸骨內(nèi)注射；通過植入貯庫，例如皮下或肌內(nèi)植入。所述對象可以是真核細胞、動物、脊椎動物、哺乳動物、嚙齒動物(例如豚鼠、倉鼠、大鼠、小鼠)、鼠科動物(例如小鼠)、犬科動物(例如狗)、貓科動物(例如貓)、馬科動物(例如馬)、靈長類動物、猿科動物(例如猴或猿)、猴(例如狨猴、狒狒)、猿(例如大猩猩、黑猩猩、紅毛猩猩、長臂猿)或人。制劑雖然活性化合物可以單獨施用，但是優(yōu)選將其作為包含至少一種如上所定義的活性化合物以及一種或多種藥學可接受的載體、佐劑、賦形劑、稀釋劑、填料、緩沖劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、潤滑劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他物質(zhì)和任選的其他治療或預防劑的藥物組合物(例如制劑)提供。因此，本發(fā)明還提供如上所定義的藥物組合物和制備藥物組合物的方法，所述方法包括將至少一種如上所定義的活性化合物以及本文所描述的一種或多種藥學可接受的載體、賦形劑、緩沖劑、佐劑、穩(wěn)定劑或其他物質(zhì)混合。本文所使用的術(shù)語"藥學可接受的"是指在明智的醫(yī)學判斷范圍內(nèi)適合用于與對象(例如人)的組織接觸而不具有過度的毒性、剌激性、過敏反應(yīng)或者其他問題或并發(fā)癥的化合物、物質(zhì)、組合物和/或劑型，同時具有合理的受益/風險比。每種載體、賦形劑等還必須在與所述制劑的其他成分相容的意義上是"可接受的"。合適的載體、賦形劑等可以在標準的藥學教科書中找到，例如Remington'sPharmaceuticalSciences,第18版，MackPublishingCompany,Easton，Pa.，1990。所述制劑可以方便地以單位劑型存在，并且可以通過藥學領(lǐng)域眾所周知的任意方法制備。這種方法包括以下步驟使活性化合物與構(gòu)成一種或多種附屬成分的載體組合。通常，所述制劑通過均勻地、緊密地使活性化合物與液體載體或細分散的固體載體或二者混合、然后根據(jù)需要將產(chǎn)品成型來制備。制劑可以為液體、溶液、懸液、乳液、酏劑、糖漿劑、片劑、錠劑、顆粒、粉末、膠囊、扁囊齊U、丸齊U、安瓿、栓劑、陰道栓齊U、軟膏、凝膠、膏齊U、乳膏齊iJ、噴齊iJ、霧齊iJ、泡沫、洗齊iJ、油、大丸劑、糖餌劑或氣溶膠的形式。適合于口服施用(例如通過攝食)的制劑可以作為離散的單位提供，例如膠囊、扁囊劑或片劑，每個單位都含有預定量的活性化合物；作為粉末或顆粒提供；作為在含水或不含水液體中的溶液或懸液提供；或者作為水包油液體乳液或油包水液體乳液提供；作為大丸劑提供；作為糖餌劑提供；或作為膏劑提供。片劑可以通過傳統(tǒng)方法制備，例如壓縮或模塑，任選地包含一種或多種附屬成分。壓縮片劑可以通過在合適的機器中壓縮自由流動形式(例如粉末或顆粒)的活性化合物來制備，任選地含有一種或多種粘合劑(例如聚維酮、明膠、阿拉伯樹膠、山梨糖醇、黃蓍膠、羥丙基甲基纖維素)、填料或稀釋劑(例如乳糖、微晶纖維素、磷酸氫鈣)、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石、二氧化硅)、崩解劑(例如乙醇淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑或潤濕劑(例如十二烷基硫酸鈉)和防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、山梨酸)。模塑片劑可以通過在合適的機器中模塑用惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀化合物的混合物來制備。片劑可以任選地包衣或刻痕，并且可以配制來提供其中活性化合物的緩釋或控釋，例如使用不同比例的羥丙基甲基纖維素以提供期望的釋放性質(zhì)。片劑可以任選地具有腸溶包衣，以提供在腸道部分而不是胃部的釋放。適合于局部給藥的制劑(例如透皮、鼻內(nèi)、眼內(nèi)、口腔和舌下)可以制備為軟膏劑、乳膏劑、混懸劑、洗劑、散劑、溶液劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣溶膠或油劑?；蛘撸苿┛梢院匈N片或敷料例如浸有活性化合物和任選一種或多種賦形劑或稀釋劑的繃帶或粘性硬膏劑。適合于口內(nèi)局部給藥的制劑包括錠劑，其在矯味的基質(zhì)通常為蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠中包含活性化合物；軟錠劑，其在惰性基質(zhì)例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中包含活性化合物；和漱口劑，在適合的液體載體中包含活性化合物。適合用于眼部局部給藥的制劑還包括滴眼液，其中活性化合物溶于或混懸于合適的載體中，特別是用于活性化合物的水性溶劑中。其中的載體是固體的適用于經(jīng)鼻給藥的制劑包含顆粒尺寸為例如約20-約500微米的粗粉末，其以經(jīng)鼻吸入方式給藥，即將裝有粉末的容器靠近鼻子通過鼻道快速吸入。其中載體是液體的用于例如鼻腔噴霧、滴鼻劑給藥或通過噴霧器以氣霧劑給藥的合適的制劑包含活性化合物的水性或油性溶液劑。適合于通過吸入給藥的制劑包括從加壓包裝中產(chǎn)生氣溶膠噴霧劑的制劑，使用合適的氣霧噴射劑如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適的氣體。適合于經(jīng)皮膚局部給藥的制劑包括軟膏劑、乳膏劑和乳劑。當配制在軟膏劑中時，活性化合物任選與石蠟或與水混溶的軟膏基質(zhì)一起使用?；蛘?，活性化合物可以用水包油23型乳膏基質(zhì)配制成乳膏劑。如果需要的話，乳膏基質(zhì)的水相可以包含例如至少約30%w/w的多元醇，即具有兩個或多個羥基的醇如丙二醇、丁_1，3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇及其混合物。局部制劑可以期望地包含增強活性化合物通過皮膚或其他病患區(qū)域的吸收或滲透的化合物。這樣的皮膚滲透促進劑的實例包括二甲基亞砜和相關(guān)類似物。當制備為局部乳劑時，油相可以任選僅包含乳化劑(另外稱作利泄劑)，或者其可以包含至少一種乳化劑與脂肪或油或脂肪和油的混合物。優(yōu)選地，包含親水性乳化劑以及用作穩(wěn)定劑的親脂性乳化劑。還優(yōu)選包含油和脂肪?？傮w而言，含有穩(wěn)定劑或不含有穩(wěn)定劑的乳化劑組成所謂的乳化蠟，該蠟與油和/或脂肪一起組成所謂的乳化軟膏基質(zhì)，其構(gòu)成了乳膏劑的油分散相。合適的利泄劑和乳劑穩(wěn)定劑包括吐溫60、司盤80、鯨蠟硬脂醇、肉豆蔻醇、單硬脂酸甘油酯和月桂基硫酸鈉。適合于制劑的油或脂肪的選擇基于實現(xiàn)所需的美容性質(zhì)，因為活性化合物在大多數(shù)可能用在藥物乳劑的油中的溶解度可能非常低。因此乳膏劑應(yīng)該優(yōu)選是非油膩、不染色和可以洗掉的產(chǎn)品，其具有適當?shù)恼吵矶纫员苊鈴墓芑蚱渌萜髦袧B漏。可以使用直鏈或支鏈一元或二元烷基酯例如二異己二酸酯、異鯨蠟醇硬脂酸酯、椰子脂肪酸丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己基酯或稱作CrodamolCAP的支鏈酯的混合物，最后三個是優(yōu)選的酯。這些可以根據(jù)所需性質(zhì)單獨使用或組合使用。或者，可以使用高熔點脂質(zhì)如白軟石蠟和/或液體石蠟或其他礦物油。適用于直腸給藥的制劑可以是具有合適基質(zhì)的栓劑的形式，合適的基質(zhì)含有例如可可脂或水楊酸酯。適于陰道給藥的制劑可以是除活性化合物外還含有本領(lǐng)域已知的合適載體的陰道栓劑、棉球、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫劑或噴霧劑的形式。適用于胃腸外給藥的制劑(例如通過注射，包括皮內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和真皮內(nèi))包括水性和非水性的等滲、無熱原的無菌注射溶液劑，其可以含有抗氧化劑、緩沖劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、抑菌劑和使制劑與受試者的血液等滲的溶質(zhì)；水性和非水性無菌混懸劑，其可以包括助懸劑和增稠劑，以及脂質(zhì)體或設(shè)計用于使化合物靶向血液組分或一種或多種器官的其他微粒系統(tǒng)。用于這種制劑的合適的等滲載體的實例包括氯化鈉注射液、林格溶液、林格乳酸鹽溶液。通常，活性化合物在溶液中的濃度為約lng/ml-約10iig/ml，例如約10ng/ml-約liig/ml。制劑可以是單位劑量或多劑量密封容器的形式，例如安瓿和小瓶，并且可以儲存于冷凍干燥(凍干)條件下，只需要在使用前加入無菌液體載體例如注射用水即可?？梢詮臒o菌粉末、顆粒和片劑制備臨場的注射溶液和混懸液。制劑可以是脂質(zhì)體或設(shè)計用于使活性化合物靶向于血液組分或一種或多種器官的其他微粒系統(tǒng)的形式。齊隨應(yīng)當理解，活性化合物和含有活性化合物的組合物的合適劑量可以因患者而異。確定最佳劑量通常涉及在治療利益水平與本發(fā)明治療的任何風險或者有害副作用之間進行權(quán)衡。所選的劑量水平取決于各種因素，包括但不限于具體化合物的活性、給藥途徑、給藥時間、化合物的排泄速率、治療的持續(xù)時間、組合使用的其他藥物、化合物和/或物質(zhì)，以及患者的年齡、性別、體重、病癥、一般健康狀況和病史?；衔锏牧亢徒o藥途徑最終由醫(yī)生決定，但是通常劑量會獲得作用位點處的局部濃度以實現(xiàn)期望的效果，而不引起實質(zhì)的有害或有毒副作用。體內(nèi)施用可以以單劑量在整個療程中的連續(xù)或間歇(例如在適當?shù)拈g隔以分開的劑量)進行。確定最給藥的有效方式和劑量的方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，并且會隨著用于治療的制劑、治療目的、所治療的靶細胞、所治療的受試者而變化?？梢赃M行單劑量或多劑量給藥，劑量水平和模式由治療醫(yī)生選擇?！愣裕钚曰衔锏暮线m劑量為每kg受試者體重每日約lOOiig-約250mg。如果活性化合物是鹽、酯、前藥等，施用的量以母體化合物為基礎(chǔ)計算，因此所用的實際重量會成比例地增加。實施例以下是僅僅為了說明本發(fā)明而提供的實施例，并不限制如本文所述的本發(fā)明的范圍。IT糊艦i司為方便起見，許多化學基團用熟知的縮寫表示，包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基(nPr)、異丙基(iPr)、正丁基(nBu)、叔丁基(tBu)、正己基(nHex)、環(huán)己基(chex)、苯基(Ph)、聯(lián)苯基(biPh)、節(jié)基(Bn)、萘基(卿h)、甲氧基(MeO)、乙氧基(EtO)、苯甲?；?Bz)和乙?；?Ac)。為方便起見，許多化合物用熟知的縮寫表示，包括但不限于甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、異丙醇(i-PrOH)、甲乙酮(MEK)、乙醚或二乙基醚(E^0)、乙酸(AcOH)、二氯甲烷(二氯甲烷，DCM)、三氟乙酸(TFA)、二甲基甲酰胺(DMF)、四氫呋喃(THF)和二甲基亞砜(DMSO)。通用實驗詳情化學品購自Aldrich化學品公司、Lancaster合成有限公司和AcrosOrganics(FisherScientifcUKLtd，英國費舍爾科技有限公司)。THF由鈉/二苯甲酮新蒸餾得來。甲醇和乙醇由鎂/碘蒸餾得來。DCM用五氧化二磷蒸餾干燥。丙酮用氫化鈣蒸餾干燥。所有不立即使用的溶劑都在氮氣下用分子篩(4A,35毫米珠粒)進行儲存。無水DMF在SureSeal"瓶中，從Aldrich獲得。三乙胺用氫化f丐蒸餾干燥并在氮氣下用氫氧化鉀儲存。薄層色譜(TLC)利用預涂覆在鋁片上并隨后進行干燥的Merck硅膠60F254進行，利用短波(254nm)紫外光或通過用茚三酮或硫酸然后是香草醛進行處理來可視化。"快速"柱色譜在中等壓力下利用Davisil硅膠(4063iim)進行。熔點使用StuartScientificSMP3儀器測定并且是未校正的。^和13C核磁共振(NMR)譜使用BrukerSpectrospinAC300E波譜儀CH300MHz或13C75MHz)或BrukerSpectrospinAC500E波譜儀CH500MHz或13C125MHz)獲得?；瘜W位移以四甲基硅烷低場(downfield)ppm(S)表示，使用殘留溶劑峰作為內(nèi)標。多重性以s(單峰)、d(雙重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(寬峰)或其組合表示。LC/MS譜使用以正離子或負離子電噴霧模式運行的MicromassPlatform儀器獲得。分離通過使用C18柱(50X4.6mm;SupelcoDiscovery或WatersSymmetry)和15分鐘0.05%甲酸和甲醇的梯度洗脫(1090%)實現(xiàn)。IR光譜在Bio-RadFTS3000MX金剛石ATR上以凈樣品記錄。25化合物使用質(zhì)量導向的LC-MS系統(tǒng)或UV導向系統(tǒng)進行純化。質(zhì)量導向的LC-MS系統(tǒng)這使用WatersZQ質(zhì)譜儀、Waters600泵和Waters2700樣品管理器。流動相A-0.1X甲酸的水溶液，流動相B-0.1X甲酸的乙腈溶液，流量20ml/min，梯度經(jīng)過15分鐘從5%B到75%B，然后經(jīng)過1分鐘到100%B，保持1分鐘。柱:PhenomenexGeminiC18，5um，IIOA，Axia，2050mmX21.2mm。UV導向系統(tǒng)這使用Gilson305和306泵，帶有aGilson155uv/vis檢測器、Gilson215注射器/收集器。流動相A-O.1%甲酸的水溶液，流動相B-O.1%甲酸的乙腈溶液，流動速率6ml/min，梯度:3分鐘10%B，然后經(jīng)過16分鐘到95%B，保持5分鐘。柱:HichromACE5咖C18.250mmX10mm。微波分析反應(yīng)利用帶有機器人手臂的PersonalChemistryEmrysOptimiser微波合成裝置進行。功率范圍為在2.45GHz下0300W。壓力范圍為020巴；溫度增加為25°C/s;溫度范圍為60250°C。關(guān)鍵中間體的合成(a)1-溴-4-甲氧基_二苯并噻吩(B)用0.5小時向4-甲氧基-二苯并噻吩(A)(16.07g，75.00,1)在冰醋酸(300mL)中的懸浮液中逐滴加入溴(4.08mL，75.OOmmol)在冰醋酸(10mL)中的溶液。經(jīng)過另外0.5小時后，將反應(yīng)混合物倒入水中(1L)，并且在15分鐘后，通過過濾收集沉淀物，并用水清洗。將固體溶于二氯甲烷(200mL)中，然后用10%的碳酸氫鈉水溶液(1X50mL)清洗。然后用MgS04干燥有機層，過濾并真空濃縮，得到21.06g(95%)產(chǎn)率的1-溴-4-甲氧基-二苯并噻吩(B)，為淺黃色固體，不經(jīng)進一步純化而使用。(b)1-氯-二苯并噻吩-4-酚(C)向含有1-溴-4-甲氧基-二苯并噻吩(B)(41.045g，0.14mol)的燒瓶中一次性加入鹽酸吡啶(0.50kg，4.35mol)。將溶體回流48小時后，使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后倒入水(2L)中。通過過濾收集沉淀出來的固體，再溶解于二氯甲烷(0.50L)中，然后依次使用HC1水溶液(1M，50mL)、水(50mL)和鹽水溶液(50mL)洗滌，用MgS04干燥，過濾并真空濃縮。通過使用二氯甲烷己烷(io:i)作為洗脫劑的si(v決速色譜進行純化得到13.47g(41%)l-氯-二苯并噻吩-4-酚(4.40mins，[M-H]233.4)，為淺褐色固體。(c)三氟-甲磺酸1-氯-二苯并噻吩-4-基酯(D)向1-氯-二苯并噻吩-4-酚(0.669g，2.850mmol)在無水四氫呋喃(18mL)的溶液中加入碳酸鉀(0.394g，2.850mmol)，隨后加入N-苯基-雙(三氟甲磺酰胺)(1.02g，2.85mmo1)，一次性依次加入。然后將反應(yīng)混合物在12(TC下微波輻射6分鐘。此時，隨后再次將另外量的N-苯基-雙(三氟甲磺酰胺)(0.20g，0.56mmol)和反應(yīng)混合物在12(TC下微波輻射6分鐘。過濾粗反應(yīng)混合物，真空除去溶劑。通過使用二氯甲烷己烷(10:1)作為洗脫劑的Si02快速色譜純化所得油狀物，得到1.00g(95%)三氟-甲磺酸1-氯-二苯并噻吩-4-基酯(5.65mins)，為透明油狀物。(d)8-(1-氯-二苯并噻吩-4-基)-2-嗎啉-4-基-色烯_4_酮(F)向三氟-甲磺酸l-氯-二苯并噻吩-4-基酯(D)(0.513g，1.40mmo1)和2-嗎啉-4-基-8-(4，4，5，5-四甲基_[1，3，2]二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-色烯-4-酮(E)(0.625g，1.75,1)在無水乙月青(18mL)的溶液中一次性加入碳酸鉀(0.580g，4.20,1)。然后將反應(yīng)混合物在15(TC下微波輻射IO分鐘。過濾粗反應(yīng)混合物，真空除去溶劑。通過使用甲醇乙酸乙酯(20:1)作為洗脫劑的Si(V決速色譜純化所得油狀物，得到0.535g(84%)8-(1-氯-二苯并噻吩-4-基)-2-嗎啉+基-色烯+酮(F)(4.91mins，448.1)，為深米黃色固體。實施例1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>向8-(1-氯-二苯并噻吩-4-基)-2-嗎啉-4-基-色烯_4_酮(F)(0.032g，0.071mmo1)在無水甲苯(2mL)的溶液中一次性加入叔丁醇鈉(0.026g，0.351mmo1)，隨后依次一次性加入所需要的胺(0.286mmol)、l，l-雙(二苯基膦基)二茂鐵(0.002g，0.004mmo1)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0.006g，0.004mmol)。然后將反應(yīng)混合物在130°C下微波輻射2分鐘。使用二氯甲烷/甲醇洗劑通過SPE硅膠濾芯過濾所得溶液，然后通過HPLC進行純化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>啉-4-基-4-氧代-4H-色烯-8-基)-二苯并噻吩-l-基]-哌嗪-l-羧酸叔丁基酯(5.28mins[M+H]598.4)，為褐色固體。(b)2-嗎啉-4-基-8-(1-哌嗪-1-基-二苯并噻吩-4-基)-色烯_4_酮(la)向4-[4-(2-嗎啉-4-基_4_氧代_4H_色烯_8_基)-二苯并噻吩-1-基]-哌嗪-l-羧酸叔丁基酯(lc)(假設(shè)100%，1.00mmol)在無水二氯甲烷(100mL)的溶液中一次性加入三氟乙酸(20mL)。48小時后，將反應(yīng)加熱至5(TC，并且在另外3小時后，使反應(yīng)冷卻至室溫，然后通過加入飽和碳酸氫鈉水溶液結(jié)束反應(yīng)，直至pH達到7。然后用二氯甲烷(3X15mL)萃取反應(yīng)混合物，合并的萃取液用MgS(^干燥、過濾并真空除去溶劑，得到淡褐色泡沫。通過使用二氯甲烷甲醇(io:i)作為洗脫劑的si(v決速色譜進行純化，得到0.688g產(chǎn)率(70%)的2-嗎啉-4-基-8-(l-哌嗪-l-基-二苯并噻吩-4-基)-色烯-4-酮(la)(rf0.2510%MeOH)(2.86mins[M+H]498.5)，為淺黃色固體。(c)庫合成(2a-g)向2-嗎啉-4-基-8-(1-哌嗪-1-基-二苯并噻吩-4-基)-色烯_4_酮(0.020g，0.040mmo1)在無水二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入N，N，-二異丙基乙胺(0.140mL，0.800mmo1)，隨后加入所需要的烷基溴(0.400mmo1)，均為一次性加入。如果反應(yīng)沒有進行，則將反應(yīng)溫度提高至5(TC，如果反應(yīng)仍然不進行，則一次性加入碳酸銫(0.141g，0.400mmo1)。一旦原料被消耗了，就使用二氯甲烷/甲醇洗劑通過SPE硅膠濾芯過濾反應(yīng)物質(zhì)，然后通過HPLC進行純化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>實施例3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>庫合成(3a-b)向2-嗎啉-4-基_8-(l-哌嗪-1-基-二苯并噻吩-4-基)_色烯_4_酮(la)(0.050g，0.050mmo1)在無水二氯甲烷(2mL)中的溶液中一次性加入N，N，-二異丙基乙胺(0.5mL，過量)，隨后一次性加入合適的磺酰氯(0.050mmol)。12小時后，使用二氯甲烷/甲醇洗劑通過SPE硅膠濾芯過濾反應(yīng)混合物，然后通過HPLC進行純化。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>生物學實施例DNA-PK抑制為了評估化合物對DNA-PK的體外抑制作用，使用下列測定法確定IC5。值。使用Q-瓊脂糖、S-瓊脂糖和肝素瓊脂糖通過色譜法從HeLa細胞核提取物中分離哺乳動物的DNA-PK(500ng/ml)(Gell，D.和JacksonS.P.，NucleicAcidsRes.27:3494-3502(1999))。用含有25mMH印es(pH7.4)、12.5mMMgCl2、50mMKCl、lmMDTT、10X甘油、0.1%NP-40和lmg底物GST-p53N66(稠合到谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的人類野生型p53的氨基端基66氨基酸殘基)的緩沖液在聚丙烯96孔板中在3(TC下測試DNA-PK(250ng)活性，最終體積為40iU。向測試混合物中加入不同濃度的抑制劑(在最終濃度為1X的匿S0中)。培養(yǎng)10分鐘后，加入最終濃度為50iiM的ATP以及30mer雙鏈DNA寡核苷酸(最終濃度為0.5ng/ml)以引發(fā)反應(yīng)。搖動1小時后，向反應(yīng)中加入150iU磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，然后將5ii1轉(zhuǎn)移到每孔含有45ii1PBS的96孔不透明白板中，在此處使GSTp53N66底物與所述孔結(jié)合1小時。為了檢測在DNA-PK引發(fā)的p53絲氨酸15殘基上的磷酸化情況，使用p53磷酸絲氨酸-15抗體(CellSignalingTechnology)進行基礎(chǔ)ELISA過程。然后在ELISA中采用抗兔HRP偶聯(lián)第二抗體(Pierce)，之后加入化學發(fā)光試劑(NENRenaissance)來檢測信號，通過TopCountNXT(Packard)進行化學發(fā)光計數(shù)而測得。然后使用下列等式計算每種化合物的酶活性％:抑制=f沐知的c戸-平均陰性c，)x100，1(平均陽性q^-平均陰性c^m)J。結(jié)果以ICs。值(抑制50%酶活性時的濃度)進行以下討論。這些值是在不同濃度范圍內(nèi)測定的，通常從10iiM至0.001iiM。將這些IC5。值作為比較值以鑒別增加的化合物功效。存活增加率存活增加率(SurvivalEnhancementRatio,SER)是2戈雷(Gray)輻照后DNA-PK抑制劑引發(fā)的細胞殺滅相對于未輻照對照細胞的增加率。DNA-PK抑制劑的使用濃度為25、50、100和/或500nM。輻射以每分鐘lGy的劑量率通過Faxitron43855D設(shè)備施加。2戈雷輻射的SER由下式計算在DNA-PK抑制劑存在下的細胞存活數(shù)^_IR后的細胞存活數(shù)_=對照細胞的細胞存活數(shù)X在DNA-PK抑制劑存在下的IR后的細胞存活數(shù)。細胞殺滅程度通過標準的克隆源存活測定法(clonogenicsurvivalassay)進行監(jiān)控。簡而言之，用HeLa細胞在合適的濃度下接種組織培養(yǎng)處理的6孔板以在每個孔中得到100200個集落，返回到培養(yǎng)器中以使得細胞附著。四小時后，將化合物或載體對照加入到細胞中。然后在抑制劑的存在下培養(yǎng)細胞l小時，之后使用Faxitron43855D箱式X-射線設(shè)備輻照2戈雷。然后將細胞培養(yǎng)另外16小時，之后將培養(yǎng)基更換為不存在DNA-PK抑制劑的新鮮培養(yǎng)基。8天后，將所形成的集落用Giemsa(Sigma，Poole，區(qū))固定并染色，使用自動集落計數(shù)器(OxfordOptronicsLtd,Oxford,UK)計數(shù)。如上所述計算數(shù)據(jù)。[O309]結(jié)果所有的測試化合物都表現(xiàn)出小于0.5iiM的IC5。。下列化合物表現(xiàn)出小于0.05iiM的平均IC5。la、lb、ld、le、lf、lg、ln、2a、2b、2c、2d、2e、2f、2g、2m、2n、2o、3a、3b。化合物的平均IC5。如下所示化合物IC50(yM)la0.Oillb0.008lc0.447Id0.008le0.017If0.02436<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>權(quán)利要求式I的化合物其中R1和R2獨立地選自氫、任選取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，或者可以與它們所連接的氮原子一起形成任選取代的具有4～8個環(huán)原子的雜環(huán)；X是CH或N；n是1或2；RC1和RC2獨立地選自H和甲基；當X是N時，RX選自H和任選取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基、C5-20芳基、酰基、酯基、酰氨基和磺?；灰约爱擷是CH時，RX選自H和任選取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基、C5-20芳基、?；Ⅴセ?、酰氨基、磺酰基、氨基和醚基。F2008800248495C00011.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中n是1。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中X是N。4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中Rx選自H和任選取代的C卜7烷基、C5—2。芳基、?；Ⅴセ突酋；?.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中Rx選自H和任選取代的C卜7烷基和磺?；?。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中X是CH。7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中Rx是C3—2。雜環(huán)基或?；?。8.根據(jù)權(quán)利要求17中任一項的化合物，其中Rei和Re2都是H。9.根據(jù)權(quán)利要求18中任一項的化合物，其中R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有6個環(huán)原子的雜環(huán)。10.根據(jù)權(quán)利要求9的化合物，其中R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成選自嗎啉代、硫嗎啉代和噻唑啉基的基團。11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成嗎啉代。12.—種組合物，所述組合物包含根據(jù)權(quán)利要求111中任一項的化合物和藥學可接受的載體或稀釋劑。13.根據(jù)權(quán)利要求111中任一項的化合物用于治療方法的用途。14.根據(jù)權(quán)利要求111中任一項的化合物用于制備治療通過抑制DNA-PK而改善的疾病的藥物的用途。15.根據(jù)權(quán)利要求111中任一項的化合物用于治療通過抑制DNA-PK而改善的疾病的方法的用途。16.體外或體內(nèi)抑制DNA-PK的方法，所述方法包括使細胞與有效量的根據(jù)權(quán)利要求111中任一項的化合物接觸。全文摘要式(I)的化合物，其中R1和R2獨立地選自氫、任選取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，或者可以與它們所連接的氮原子一起形成任選取代的具有4～8個環(huán)原子的雜環(huán)；X是CH或N；n是1或2；RC1和RC2獨立地選自H和甲基；當X是N時，RX選自H和任選取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基、C5-20芳基、?；?、酯基、酰氨基和磺?；灰约爱擷是CH時，RX選自H和任選取代的C1-7烷基、C3-20雜環(huán)基、C5-20芳基、?；Ⅴセ?、酰氨基、磺?；?、氨基和醚基。根據(jù)式(I)的化合物是DNA-PK抑制劑，用于治療腫瘤和逆轉(zhuǎn)錄病毒介導的疾病。文檔編號A61K31/4965GK101754964SQ200880024849公開日2010年6月23日申請日期2008年7月18日優(yōu)先權(quán)日2007年7月19日發(fā)明者克里斯丁·薩拉·貝利,基思·埃倫·米尼爾,尼爾·莫里森·巴爾·馬丁,西爾維·戈麥斯,馬克·弗里杰里奧,馬克·杰夫瑞·休默索恩,黑瑟爾·瑪麗·艾倫·杜根申請人:庫多斯藥物有限公司;癌癥研究技術(shù)有限公司