專利名稱：：雪松醇的醫(yī)藥新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及雪松醇(CE)的醫(yī)藥新用途，具體涉及其在鎮(zhèn)痛和治療關(guān)節(jié)炎藥物中的新用途。
背景技術(shù)：
：關(guān)節(jié)炎是一種常見的慢性疾病，是指由炎癥、感染、創(chuàng)傷或其他因素引起的關(guān)節(jié)炎性病變，屬風(fēng)濕學(xué)科疾病。它的主要特征是關(guān)節(jié)紅腫、熱、痛和功能障礙。我國目前關(guān)節(jié)炎患者估計有1億以上，且人數(shù)還在不斷增加，最常見的是骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎兩種。另據(jù)統(tǒng)計，我國50歲以上人群中半數(shù)患骨關(guān)節(jié)炎；65歲以上人群中90%的女性和80%的男性患骨關(guān)節(jié)炎。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎在我國的患病率為0.34%~0.36%，據(jù)介紹，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情嚴重者壽命約縮短10~15年。關(guān)節(jié)炎根據(jù)病因可分為風(fēng)濕性、類風(fēng)濕性、外傷性、骨性關(guān)節(jié)炎及化膿性關(guān)節(jié)炎等。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎屬變態(tài)反應(yīng)性疾病，是風(fēng)濕熱的主要表現(xiàn)之一。多以急性發(fā)熱及關(guān)節(jié)疼痛起病，典型表現(xiàn)是輕度或中度發(fā)熱，游走性多關(guān)節(jié)炎，受累關(guān)節(jié)多為膝、踝、肩、肘、腕等大關(guān)節(jié)，常見由一個關(guān)節(jié)轉(zhuǎn)移至另一個關(guān)節(jié)，病變局部呈現(xiàn)紅、腫、灼熱、劇痛，部分病人也有幾個關(guān)節(jié)同時發(fā)病，不典型的病人僅有關(guān)節(jié)疼痛而無其他炎癥表現(xiàn)，急性炎癥一般于2-4周消退，不留后遺癥，但常反復(fù)發(fā)作。若風(fēng)濕活動影響心臟，則可發(fā)生心肌炎，甚至遺留心臟瓣膜病變。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis)是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性自身免疫性疾病。滑膜炎持久反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨和骨的破壞，關(guān)節(jié)功能障礙，甚至殘廢。血管炎病變累及全身各個器官，故本病又稱為類風(fēng)濕病。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎又稱類風(fēng)濕(RA),是一種病因尚未明了的慢性全身性炎癥性疾病，以慢性、對稱性、多滑膜關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)外病變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)，屬于自身免疫炎性疾病。該病好發(fā)于手、腕、足等小關(guān)節(jié)，反復(fù)發(fā)作，呈對稱分布。早期有關(guān)節(jié)紅腫熱痛和功能障礙，晚期關(guān)節(jié)可出現(xiàn)不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎縮，極易致殘。從病理改變的角度來看，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種主要累及關(guān)節(jié)滑膜(以后可波及到關(guān)節(jié)軟骨、骨組織、關(guān)節(jié)韌帶和肌鍵)，其次為漿膜、心、肺及眼等結(jié)締組織的廣泛性炎癥性疾病。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的全身性表現(xiàn)除關(guān)節(jié)病變外，還有發(fā)熱、疲乏無力、心包炎、皮下結(jié)節(jié)、胸膜炎、動脈炎、周圍神經(jīng)病變等。廣義的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎除關(guān)節(jié)部位的炎癥病變外，還包括全身的廣泛性病變。外傷性關(guān)節(jié)炎多因外傷或持續(xù)慢性勞損引起關(guān)節(jié)軟骨發(fā)生退行性變或形成骨刺，表現(xiàn)為患病關(guān)節(jié)腫、痛及運動障礙，易發(fā)生在持重關(guān)節(jié)、如肩、膝、踝等關(guān)節(jié)，運動員及青壯年中多見。骨性關(guān)節(jié)炎是一種最常見的關(guān)節(jié)病變，骨關(guān)節(jié)炎的名稱極多，如肥大性骨關(guān)節(jié)炎、退行性關(guān)節(jié)炎、變性性關(guān)節(jié)炎、增生性骨關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)病，均指一種病，國內(nèi)統(tǒng)一使用骨關(guān)節(jié)炎。其患病率隨著年齡而增加，女性比男性多發(fā)。骨關(guān)節(jié)炎以手的遠端和近端指間關(guān)節(jié)，膝、肘和肩關(guān)節(jié)以及脊柱關(guān)節(jié)容易受累，而腕、踝關(guān)節(jié)則較少發(fā)病。骨性關(guān)節(jié)炎由組織變性及積累性勞損引起，多見于肥胖超重的中老年人，最常發(fā)病的部位是膝、手指、頸、腰推等處，癥狀主要為關(guān)節(jié)疼痛、僵硬(經(jīng)輕微活動后會覺疼痛減輕)，重者可出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、肌肉萎縮等。化膿性關(guān)節(jié)炎往往由細菌侵入關(guān)節(jié)腔引起，多見于少年兒童，常發(fā)生于髖關(guān)節(jié)，主要癥狀為局部紅、腫、痛、熱和功能障礙，以及高熱等全身中毒癥狀。無論何種原因引起的關(guān)節(jié)炎或何種類型的關(guān)節(jié)炎，均應(yīng)及早診治，以免導(dǎo)致永久性關(guān)節(jié)功能障礙甚至致殘。用于治療各類關(guān)節(jié)炎有多種藥物，西藥有青霉胺、水楊酸制劑、消炎痛、丙酸鹽生物、免疫抑制劑、左旋咪唑等。但西藥的副作用日益被國際所關(guān)注和評價，同時患者的疾病治療自我保護意識在不斷增強，使得許多制藥企業(yè)加大投資力度和速度研發(fā)有效安全的天然藥物。綜上所述，本發(fā)明實現(xiàn)了天然植物中提取分離所得化學(xué)成分的醫(yī)療用途新穎化，滿足了關(guān)節(jié)炎患者需求量大、巿場前景好的需求。CE是一種倍半萜醇，可從多種天然植物中提取得到?，F(xiàn)在的用途是一種天然香料，廣泛用于木香、辛香和東方型香精中，也大量用作消毒劑和衛(wèi)生用品的增香劑。有時也少量應(yīng)用與醫(yī)藥行業(yè)作為一種藥物。有實驗表明，吸入雪松醇對大鼠和小鼠有鎮(zhèn)靜作用；有抗人肺癌細胞NCI-H460作用。其結(jié)構(gòu)式如下所示。CE的結(jié)構(gòu)式
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供CE的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。本發(fā)明涉及CE作為制備治療關(guān)節(jié)炎藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及CE作為制備治療鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及CE用于制備關(guān)節(jié)炎和鎮(zhèn)痛藥物時以常規(guī)藥用制劑的形式來使用；所述的常規(guī)藥用制劑含在制劑中與藥學(xué)上可以接受的載體如適宜于胃腸內(nèi)和胃腸外給藥的有機或無機的固體或液體賦形劑混合，該藥用制劑科技是固體形式如片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑，也可以是液體形式如注射劑、乳劑等。上述制劑中可含有輔助物質(zhì)、穩(wěn)定劑、濕潤劑和其他常用的添加劑，如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可脂、抗壞血酸、甘露醇等。本發(fā)明還涉及以CE作為活性成分的藥物組合在抗炎和鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。該藥物組合可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^經(jīng)本發(fā)明化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適用于人或動物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物在其藥物組合中的含量(重量)通常為0.195%。本發(fā)明所述的CE為ot-CE和(3-CE及它們?nèi)魏伪壤幕旌象w(外消旋體)。解決本技術(shù)問題釆用的技術(shù)方案是，從天然植物中制備分離出CE,再精制使其純度達到95%以上，用于鎮(zhèn)痛和抗炎作用，可用于制備治療關(guān)節(jié)炎和鎮(zhèn)痛類藥物。上述的制劑可按照各種制劑常規(guī)的制備工藝制成。本發(fā)明的CE具有較好的鎮(zhèn)痛和抗炎作用，總有效劑量為l-100mg/kg/d。具體實施例方式以下經(jīng)通過實施例進一步描述本發(fā)明，但這些實施例僅是說明本發(fā)明，而不應(yīng)理解為對本發(fā)明范圍的任何限制。實施例l:對角叉菜膠致大鼠足跖浮腫炎癥的影響方法SD大鼠60只，體重？140176g,dl50180g,6^各半，分6組，每組10只。模型組用P/。TW-80灌胃給藥，受試藥物a-CE分別設(shè)100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg和10mg/kg4個劑量組，每天灌胃給藥(ig)—次，共計給藥4d。陽性對照藥為阿司匹林0.5g/kg只在試驗前灌胃給藥(ig)—次。d4iglh后，大鼠右后足掌sc0.5。/。角叉菜膠0.1ml。在sc后lh、2h、4h、6h用毛細管法測量足爪體積變化。結(jié)果用微機SigmaStat軟件統(tǒng)計處理，比較阿司匹林與模型組(l%TW-80)之間的顯著性差異。結(jié)果a-CE25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg和阿司匹林0.5g/kg對角叉菜膠致炎后大鼠足跖腫脹有顯著的抑制作用，見表l,表明a-CE有很強的抗急性炎癥作用。表1.a-CE對角叉菜膠引起的大鼠足爪腫脹的抑制作用(^tSD，統(tǒng)計方法Mann-WhitneyRankSumTest:與對照組比較'P<0.05,"P<0.01,*"P<0.001)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>100100.043±0.030.096±0.060.113±0.060.091±0.07實施例2:對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的影響方法取SD大鼠60只，按體重平均分成5組(1)l°/。TW-80(溶媒)；(2)陽性對照藥地塞米松磷酸鹽注射液2.5mg/kg;(3)a-CE25mg/kg;(4)a-CE50mg/kg;(5)a-CE100mg/kg。均釆用灌胃給藥(ig)方式。以Freund，s完全佐劑O.lml(含卡介苗0.5mg)注射于右后足掌內(nèi)。注射佐劑前30min灌胃給藥一次。于注射佐劑后18h測定一次右后足跖腫脹情況，觀察CE對早期急性炎癥的預(yù)防作用，然后停藥；一周后開始灌胃給藥，每曰l次，連續(xù)7天，于d15測定一次左后足跖腫脹情況，觀察CE對繼發(fā)病變的預(yù)防作用，然后停藥；從dl9開始進行治療性給藥，每日l次，直到d28實驗結(jié)東，重點觀察CE對繼發(fā)病變的治療作用，從d21到d28，每日測定一次左后足跖腫脹情況，從d22到d28,每曰按《中藥新藥研究指南》有關(guān)佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變評分法，觀察足爪腫脹度、前肢和尾部病變的發(fā)生率、結(jié)節(jié)數(shù)或嚴重度，按5級評分法0:無紅腫；1:小趾關(guān)節(jié)稍腫；2:趾關(guān)節(jié)和足跖腫脹；3:踝關(guān)節(jié)以下足腫脹；4:包括踝關(guān)節(jié)在內(nèi)的全部足爪腫脹。實驗結(jié)束后處死大鼠，解剖取出免疫器官胸腺和脾臟稱重，計算臟器系數(shù)；并且將大鼠的左右后足齊膝關(guān)節(jié)切斷，稱重。結(jié)果oc-CE100mg/kg和地塞米松2.5mg/kg組治療后d3就起效，從d21到d28每日測定1次左后足跖腫脹結(jié)果和從d22到d28繼發(fā)性病變評分結(jié)果分析，與對照組比較均有顯著性差異(P<0.050.001),a-CE50mg/kg組在多數(shù)天數(shù)中也有明顯差異(P<0.05~0.01),見表2和表3。在d28實驗結(jié)束后處死大鼠，將大鼠的左右后足齊膝關(guān)節(jié)切斷稱重，結(jié)果與d28測定的足跖腫脹情況相吻合，見表4。a-CE25mg/kg組和地塞米松磷酸鹽2.5mg/kg組于注射佐劑前30min灌胃給藥能明顯抑制佐劑注射后引起足跖早期急性炎癥性腫脹(PO.05);a陽CE100mg/kg、50mg/kg和地塞米松2.5mg/kg組連續(xù)7天給藥明顯預(yù)防佐劑注射后引起足跖繼發(fā)性腫脹反應(yīng)，詳見表5。取胸腺和脾臟稱重，結(jié)果顯示a-CE對免疫器官呈劑量依賴抑制作用。表明(x-CE的抗炎作用與免疫抑制作用相關(guān)，見表6。表2、a-CE對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的治療作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>50120.920.930.900.890.930.930.930.95±0.07'±0.08±0.11'±0.09"±0.08'±0.07"±0.07"±0.0610080.890.900.890.900.930.910.910.91±0.05"±0.07'±0.06"±0.07"±0.07'±0.05*'±0.06"±0.07'一表3、a-CE對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變評分的影響(hSD,統(tǒng)計方法Mann-WhitneyRankSumTest;與對照組比較*P<0.05,**P<0.01，"*P<0.001)~""iiii大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎繼發(fā)性病變評分mg/kgd22d23d24c!25d26d27d28造型對照組121.751.751.751.832.082.001.92±0.45±0.45±0.45±0.72±0.52±0.60±0.52地塞米松2.5100.300.500.300.500.300.300.33±0.48"'±0.07*"±0.483***±0.53*"±0.48"沖±0.48"*"沖±0.50a-CE2521,281.351.601.681.551.331.33±0.67±0.65±0.65±0.52±0.46'±0.58'±0.49*50121.081.331.501.581.251.171.33±0.67'±0.65±0.52±0.52±0.62**±0.72*±0.49*10080.880.880.750.880.750.881.13±0.35*'±0.35"±0.46"±0.64"±0.46*"'±0.35"±0.35"表4、a-CE治療第10天(注射佐劑后第28天)兩后足的重量比較(X±SD，統(tǒng)計方法T-test或Mann-WhitneyRankSumTest;與對照組比較*P<0.05，**P<0.01)組別劑』tCmg/kg)ii左足重量(g)右足重量(g)造型對照組121.73±0.242.20±0.29地塞米松2.591,52±0.11*1.82±0.19**a-CE25121.68±0,152.10±0.2050121.72±0.192.15±0.26廳81.52±0.19*1.88±0.19*表5、a-CE對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎早期炎癥和繼發(fā)病變的預(yù)防作用(5btSD，統(tǒng)計方法Mann-WhitneyRankSumTest:與對照組比較*P<0.05)早期炎癥的預(yù)防觀察繼發(fā)病變的預(yù)防作用劑量右后足跖腫脹值(ml)左后足跖腫脹值(ml)組別mg/kgn注射佐劑前注射后18hn注射佐劑前注射Cdl5造型對照組120.840.08i.oi土o.n12O.75±0.110.99±0.07地塞米松12O.83±0.100.83±0.07*110.72±0.070.90±0.06*a-CE2512O.88±0,100.96±0.09120.74±0,080.93±0.0850120.90±0.100.96±0.09120.72±0.100.92±0.09100120.87±0.050.90±0.04*80.70±0.080.91±0.07*表6、a-CE治療第10天(注射佐劑后第28天)對大鼠胸腺和脾臟系數(shù)的影響(^±SD，統(tǒng)計方法:Mann-WhitneyRankSumTest;與對照組比較P<0.05,**P<0.01，***P<0.001)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實施例3:對光熱刺激引起的大鼠甩尾(光熱鎮(zhèn)痛模型)的影響方法l)劑量選擇與分組以1。/。TW-80為陰性對照，吲哚美辛10mg/kg為陽性對照。a-CE和p-CE混合體設(shè)12.5mg/kg，25mg/kg,50mg/kg三個劑量組。每組10只大鼠，？c^各半，分籠飼養(yǎng)。2)給藥灌胃給藥(ig)l次，灌胃容積為lml/100g。3)觀察ig后lh,光熱刺激大鼠尾部，記錄大鼠出現(xiàn)甩尾的時間。結(jié)果用微機SigmaStat軟件統(tǒng)計處理，比較吲哚美辛、CE與1。/。TW-80組的顯著性差異。結(jié)果CE12.5mg/kg，25mg/kg，50mg/kg和吲哚美辛10mg/kg對大鼠光熱刺激尾部有顯著的鎮(zhèn)痛作用，大鼠出現(xiàn)甩尾的時間分別推遲107.8%(p<0.05)、239.2%(p<0.01)、243.1%(p<0,01)和274.5(p<0.001),見表8。表7.a-CE和p-CE混合體對光熱剌激大鼠尾部引起甩尾反應(yīng)的影響(;土SD，統(tǒng)計方法t-test，與r/oTW-80組比較六P《0.05,**P<0.01,***P<0.001)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>以上試驗結(jié)果說明本發(fā)明中的有效成分a-CE和(3-CE混合體具有抗炎和鎮(zhèn)痛作用，可于關(guān)節(jié)炎和鎮(zhèn)痛藥物中應(yīng)用。權(quán)利要求1.雪松醇在制備治療關(guān)節(jié)炎藥物中的用途。2.雪松醇在制備鎮(zhèn)痛藥物中的用途。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇為a-雪松醇、(3-CE或它們?nèi)魏伪壤耐庀w，其總有效劑量為l-100mg/kg/d。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇是從側(cè)柏、卷柏、龍柏、雪松、伸筋草、蔓荊子、定心藤、黑骨藤、姜、毛喉鞘蕊花、揚子毛茛、木棉花、紅心大白菊、土茯苓中制備得到的。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述的關(guān)節(jié)炎包括風(fēng)濕性、類風(fēng)濕性、外傷性、骨性關(guān)節(jié)炎及化膿性關(guān)節(jié)炎。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇可以和藥學(xué)上可接受的一種或多種載體或賦形劑結(jié)合制成雪松醇藥物組合物，其在組合物中的含量為0.1~95%。7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于所述的雪松醇可以制備成片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑、注射劑、乳劑、膏藥、搽劑、酊劑、油劑、熨劑、涂膜劑、膜劑、凝膠劑、巴布劑及穴位貼敷劑。全文摘要本發(fā)明涉及雪松醇(CE)的醫(yī)藥新用途，具體涉及其在制備鎮(zhèn)痛和治療關(guān)節(jié)炎藥物中的新用途。所述的雪松醇為α-雪松醇、β-CE或它們?nèi)魏伪壤耐庀w，其總有效劑量為1-100mg/kg/d。CE從來源廣泛的天然植物中提取。本發(fā)明采用大鼠足跖角叉菜致炎法和佐劑性關(guān)節(jié)炎觀察CE的抗炎作用，結(jié)果可見CE對角叉菜膠引起的非特異性炎癥反應(yīng)具有明顯抑制作用，同時也對佐劑性關(guān)節(jié)炎有顯著的治療和預(yù)防作用。本發(fā)明采用甩尾法觀察CE的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果可見CE對大鼠光熱刺激尾部有顯著的鎮(zhèn)痛作用。本發(fā)明提供了一種療效確切、安全方便、來源廣泛的抗炎和鎮(zhèn)痛藥物的原料，其可以和藥學(xué)上可接受的一種或多種載體結(jié)合制成雪松醇藥物組合物或制劑。文檔編號A61P29/00GK101518521SQ20091001090公開日2009年9月2日申請日期2009年3月27日優(yōu)先權(quán)日2009年3月27日發(fā)明者健關(guān),孫寶山,趙余慶申請人:遼寧新中現(xiàn)代醫(yī)藥有限公司