專利名稱：：穩(wěn)定等滲的去氨普酶α1或其突變體制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種以重組吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑去氨普酶a1或其突變體為活性成分的凍干制劑，屬于生物醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
：去氨普酶(DSPA)是南美一種吸血蝙蝠唾液中分離的纖溶酶原激活劑，主要包括四種蛋白質(zhì)DSPAa1、DSPAa2、DSPAP和DSPAY。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，其中去氨普酶a1具有最好的生物化學(xué)和藥理學(xué)性質(zhì)，所以被進(jìn)一步研究。研究表明在纖維蛋白剌激下，去氨普酶a1活性增加10500倍，而組織纖溶酶原激活劑(tPA)僅為550倍；在纖維蛋白與纖維蛋白原存在的條件下，去氨普酶a1活性的比率為12900倍，而tPA僅為72倍，去氨普酶a1具有更高的纖維蛋白選擇性。藥理學(xué)研究表明，在肺栓塞的模型中，與tPA相比，去氨普酶a1具有更好的纖維蛋白凝塊專一性；在鼠的人工模型中，去氨普酶a1也表現(xiàn)出比tPA更好的纖維蛋白專一性和更長(zhǎng)的半衰期；在狗急性心肌梗塞的冠狀血栓形成模型中，去氨普酶a1具有更快的再灌注和更低的再閉塞率；在鼠腸系膜靜脈模型中，相比較與tPA，去氨普酶a1表現(xiàn)出較低的出血率；另外在鼠和獼猴藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)中，去氨普酶a1也表現(xiàn)出比tPA更低的清除率。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，未發(fā)現(xiàn)去氨普酶al直接的毒性作用，僅在大劑量時(shí)表現(xiàn)出副作用。目前DSPAa1已完成了II期臨床實(shí)驗(yàn)DIAS試驗(yàn)及DEDAS試驗(yàn)，其中DIAS試驗(yàn)結(jié)果表明安慰劑對(duì)照和給藥兩組血流再灌注率分別達(dá)到46.7%和71.4%，患者腦部栓塞血流獲顯著改善，有效的阻止了腦部損傷。90天時(shí)，兩組分別有46.7%和60%的患者達(dá)到主要臨床終點(diǎn)，顱內(nèi)出血發(fā)生率兩組均為3.3%(tPA在大型試驗(yàn)中，出血發(fā)生率為6^左右)；DEDAS試驗(yàn)是一個(gè)多中心、劑量遞增的II期臨床試驗(yàn)研究，目的為評(píng)價(jià)急性腦缺血癥狀發(fā)作39小時(shí)內(nèi)，DSPAal隨劑量遞增(具體試驗(yàn)劑量未見(jiàn)報(bào)道)的療效和安全性，結(jié)果表明共有38例病人在卒中癥狀發(fā)作39小時(shí)內(nèi)接受了安慰劑治療、90mcg/kg的去氨普酶a1治療或125mcg/kg的DSPAa1治療，受試者的入選標(biāo)準(zhǔn)是MRI證實(shí)彌散灌注缺失面積達(dá)20%以上和皮層組織低灌注區(qū)域超過(guò)2cm，在第90天時(shí)，安慰劑組有25%的病人臨床結(jié)果有所改善，90mcg/kg組有28.6%的病人結(jié)果有所改善，而125mcg/kg組的比例為60%。重要的是，在接受治療的病人中，無(wú)人出現(xiàn)腦出血。相對(duì)于野生型去氨普酶a1而言，去氨普酶a1突變體比活性提高、表達(dá)量提高、半衰期延長(zhǎng)、溶栓活性提高，因此，申請(qǐng)人此前申請(qǐng)的專利涉及的去氨普酶a1突變體(專利申請(qǐng)?zhí)朇N200810237709.8)更具有開(kāi)發(fā)成新型有效的溶栓藥物的潛在應(yīng)用價(jià)值。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，多肽作為藥物在臨床上的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，相應(yīng)的制劑學(xué)研究也日益受到重視。然而，與傳統(tǒng)的小分子有機(jī)藥物相比，多肽存在穩(wěn)定性差的問(wèn)題。引起多肽不穩(wěn)定的原因研究發(fā)現(xiàn)包括以下幾個(gè)方面(1)脫酰胺反應(yīng)在脫酰反應(yīng)中，天冬酰胺/谷胺酰胺殘基水解形成天冬氨酸/谷氨酸。非酶催化的脫酰胺反應(yīng)的進(jìn)行，在天冬酰胺-甘氨酸-結(jié)構(gòu)中的酰胺基團(tuán)更易水解，位3于分子表面的酰胺基團(tuán)也比分子內(nèi)部的酰胺基團(tuán)易水解。(2)氧化多肽溶液易氧化的主要原因有兩種，一是溶液中有過(guò)氧化物的污染，二是多肽的自發(fā)氧化。在所有的氨基酸殘基中，蛋氨酸、半胱氨酸和組氨酸、色氨酸、酪氨酸等最易氧化。氧分壓、溫度和緩沖溶液對(duì)氧化也都有影響。(3)水解多肽中的肽鍵易水解斷裂。由天冬氨酸參與形成的肽鍵比其它肽鍵更易斷裂，尤其是天冬氨酸_脯氨酸和天冬氨酸_甘氨酸肽鍵。(4)形成錯(cuò)誤的二硫鍵二硫鍵之間或二硫鍵與巰基之間發(fā)生交換可形成錯(cuò)誤的二硫鍵，導(dǎo)致三級(jí)結(jié)構(gòu)改變和活性喪失。(5)消旋除甘氨酸外，所有氨基酸殘基的a碳原子都是手性的，易在堿催化下發(fā)生消旋反應(yīng)。其中天冬氨酸殘基最易發(fā)生消旋反應(yīng)。(6)|3-消除P-消除是指氨基酸殘基中13碳原子上基團(tuán)的消除。半胱氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等殘基都可通過(guò)P-消除降解。在堿性pH下易發(fā)生|3-消除，溫度和金屬離子對(duì)其也有影響。(7)變性、吸附、聚集或沉淀變性一般都與三級(jí)結(jié)構(gòu)以及二級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞有關(guān)。在變性狀態(tài)，多肽往往更易發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，活性難以恢復(fù)。在多肽變性過(guò)程中，首先形成中間體。通常中間體的溶解度低，易于聚集，形成聚集體，進(jìn)而形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。提高多肽穩(wěn)定性的途徑包括以下幾個(gè)方面(1)定點(diǎn)突變通過(guò)基因工程手段替換引起多肽不穩(wěn)定的殘基或引入能增加多肽穩(wěn)定性的殘基，可提高多肽的穩(wěn)定性。(2)化學(xué)修飾多肽的化學(xué)修飾方法很多，研究最多的是PEG(聚乙二醇)修飾。PEG是一種水溶性高分子化合物，在體內(nèi)可降解，無(wú)毒。PEG與多肽結(jié)合后能提高熱穩(wěn)定性，抵抗蛋白酶的降解，降低抗原性，延長(zhǎng)體內(nèi)半衰期。選擇合適的修飾方法和控制修飾程度可提高原生物活性。(3)添加劑通過(guò)加入添加劑，如糖類、多元醇、明膠、氨基酸和某些鹽類，可以提高多肽的穩(wěn)定性。糖和多元醇在低濃度下迫使更多的水分子圍繞在蛋白質(zhì)周圍，因而提高了多肽的穩(wěn)定性。在凍干過(guò)程中，上述物質(zhì)還可以取代水而與多肽形成氫鍵來(lái)穩(wěn)定多肽的天然構(gòu)象，而且還可以提高凍干制品的玻璃化溫度。此外表面活性劑如SDS(十二烷基硫酸鈉)、Tween(吐溫)、Pluronic(普流尼克)，能防止多肽表面吸附、聚集和沉淀。(4)凍干多肽發(fā)生的一系列化學(xué)反應(yīng)如脫酰胺、P-消除、水解等都需要水參與，水還可以作為其它反應(yīng)劑的流動(dòng)相。另外，水含量降低可使多肽的變性溫度升高。因此，凍干可提高多肽的穩(wěn)定性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種在貯存和運(yùn)輸中穩(wěn)定的去氨普酶al(DSPAa1)或其突變體的凍干制劑，并結(jié)合本品的臨床應(yīng)用，使重建后的產(chǎn)品維持等滲。本發(fā)明所述的以重組吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑去氨普酶a1或其突變體為活性成分的穩(wěn)定等滲凍干制劑，包括去氨普酶a1或其突變體及凍干保護(hù)劑；其特征在于，所述去氨普酶a1突變體是指將野生型去氨普酶a1肽鏈中195位的苯丙氨酸替換成纈氨酸的肽鏈，命名為DSMa，或在DSMa基礎(chǔ)上繼續(xù)改變其210213位的氨基酸，將所述肽鏈中4210213位的四個(gè)氨基酸谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸、精氨酸(QNRR)替換成四個(gè)丙氨酸(AAAA)的肽鏈，命名為DSMb;所述凍干保護(hù)劑包括氨基酸、糖/多元醇、等滲調(diào)節(jié)劑和pH值為5.57.0的緩沖體系，其中氨基酸為甘氨酸、L-精氨酸或L-組氨酸，糖/多元醇為蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇或山梨醇，等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉，緩沖體系為磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液；所述凍干制劑中，去氨普酶a1或其突變體的單位劑量范圍為310mg，且每毫克去氨普酶a1或其突變體適配的凍干保護(hù)劑甘氨酸用量為0.0110mg、或L-精氨酸的用量為0.1100mg、或L-組氨酸的用量為0.150mg，蔗糖的用量為0.1100mg、或乳糖的用量為0.1100mg、或葡萄糖的用量為1200mg、或甘露醇的用量為1200mg、或山梨醇的用量為1200mg;緩沖體系為0.01M0.2M的磷酸鹽緩沖液、或0.05M0.5M枸櫞酸鹽緩沖液、或0.01M0.2M醋酸鹽緩沖液。上述凍干保護(hù)劑中還可加入表面活性劑吐溫20或吐溫80，其中每毫克去氨普酶a1或其突變體適配吐溫20的用量為0.001lmg、或適配吐溫80的用量為0.015mg。優(yōu)選的方式為所述每毫克去氨普酶a1或其突變體適配吐溫20的用量為0.010.5mg、或適配吐溫80的用量為0.01lmg。更優(yōu)選的方式為所述每毫克去氨普酶a1或其突變體適配吐溫20的用量為0.050.3mg、或適配吐溫80的用量為0.050.5mg。上述凍干制劑中每毫克去氨普酶a1或其突變體適配甘氨酸的用量?jī)?yōu)選0.055mg、或適配L-精氨酸的用量?jī)?yōu)選150mg、或適配L-組氨酸的用量?jī)?yōu)選120mg，蔗糖的用量?jī)?yōu)選150mg、或乳糖的用量?jī)?yōu)選150mg、或葡萄糖的用量?jī)?yōu)選5100mg、或甘露醇的用量?jī)?yōu)選5100mg、或山梨醇的用量?jī)?yōu)選5100mg。更進(jìn)一步優(yōu)選的方式為每毫克去氨普酶a1或其突變體適配甘氨酸的用量為0.1lmg、或L-精氨酸的用量為530mg、或L-組氨酸的用量為210mg，蔗糖的用量為530mg、或乳糖的用量為530mg、或葡萄糖的用量為1050mg、或甘露醇的用量為1050mg、或山梨醇的用量為1050mg。上述的凍干制劑為穩(wěn)定等滲的制劑。上述的去氨普酶al或其突變體的凍干制劑中，凍干保護(hù)劑即氨基酸、糖/多元醇、等滲調(diào)節(jié)劑和PH值為5.57.0的緩沖體系的組合方案優(yōu)選以下幾種方式方案1:氨基酸(甘氨酸或L-精氨酸或L-組氨酸)+糖(蔗糖或乳糖或葡萄糖)+等滲調(diào)節(jié)劑+緩沖體系(磷酸鹽緩沖液或枸櫞酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液)。方案2:氨基酸(甘氨酸或L-精氨酸或L-組氨酸)+糖(蔗糖或乳糖或葡萄糖)+等滲調(diào)節(jié)劑+緩沖體系(磷酸鹽緩沖液或枸櫞酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液)+表面活性劑(吐溫20或吐溫80)。方案3:氨基酸(甘氨酸或L-精氨酸或L-組氨酸)+多元醇(甘露醇或山梨醇)+等滲調(diào)節(jié)劑+緩沖體系(磷酸鹽緩沖液或枸櫞酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液)。方案4:氨基酸(甘氨酸或L-精氨酸或L-組氨酸)+多元醇(甘露醇或山梨醇)+等滲調(diào)節(jié)劑+緩沖體系(磷酸鹽緩沖液或枸櫞酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液)+表面活性劑(吐溫20或吐溫80)。本發(fā)明所述凍干制劑的制備方法是(1)按設(shè)定的試驗(yàn)方案以處方量配制所需要的緩沖體系，用此緩沖體系置換去氨普酶a1或其突變體原液緩沖液，獲得適于制劑制備的去氨普酶a1或其突變體原液；(2)準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料(凍干保護(hù)劑)，以所述緩沖體系的緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)PH值為5.57.0，得含有凍干保護(hù)劑的緩沖溶液；(3)將去氨普酶a1或其突變體原液加入含凍干保護(hù)劑的緩沖溶液中，定容；除菌過(guò)濾，分裝、凍干；得去氨普酶a1(DSPAa1)或其突變體的凍干制劑。(4)將分裝容器加塞、壓蓋，即得成品。本發(fā)明的凍干制劑臨床應(yīng)用時(shí)加入適量注射用水進(jìn)行重建即可使用。本發(fā)明有以下顯著優(yōu)點(diǎn)(l)通過(guò)凍干保護(hù)劑的合理選擇和使用，顯著改善了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，便于貯存、運(yùn)輸和應(yīng)用；(2)處方組成中所用輔料易得，價(jià)格適宜，不會(huì)明顯增加產(chǎn)品成本，易于接受；(3)制備工藝簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)，適于工業(yè)化生產(chǎn)。具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例將進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。實(shí)施例1:以pH5.8的10mM磷酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1凍干制劑處方細(xì)成組分用量DSPAa1lg甘氨酸300mg甘露醇30g氯化鈉適量緩沖液加至1000ml分裝至.200支制備方法配制處方量的pH5.8的10mM磷酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的磷酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSPAa1原液的差值。將處方量的DSPAa1原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例2:以p朋.0的20mM磷酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1突變體DSMa凍干制劑處方組成組分用量DSMalg甘氨酸150mg甘露醇40g吐溫80200mg氯化鈉適量緩沖液加至1000ml分裝至200支6制備方法配制處方量的pH6.0的20mM磷酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的磷酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSMa原液的差值。將處方量的DSMa原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例3:以p朋.2的0.1M枸櫞酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1突變體DSMb凍干制劑處方組成__用量DSMblgL-精氨酸10g蔗糖10g氯化鈉適量緩沖液加至1000ml_分裝至_200支制備方法配制處方量的p朋.2的0.1M枸櫞酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的磷酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSMb原液的差值。將處方量的DSMb原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例4:以p朋.0的0.2M醋酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1凍干制劑處方組成組分_SiDSPAa1lgL-組氨酸5g乳糖15g吐溫20lOOmg氯化鈉適量緩沖液加至1000ml分裝至200支制備方法配制處方量的p朋.0的0.2M醋酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的枸櫞酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSPAa1原液的差值。將處方量的DSPAal原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為O.22ym的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例5:以p朋.5的50mM磷酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1突7變體DSMa凍干制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>制備方法配制處方量的pH6.5的50mM磷酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的磷酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為6.07.0，定容至體積為配液總體積與DSMa原液的差值。將處方量的DSMa原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例6:以p朋.0的50mM醋酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1突變體DSMb凍干制劑處方組成<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>制備方法配制處方量的p朋.0的50mM醋酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的磷酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSMb原液的差值。將處方量的DSMb原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例7:以pH6.0的lOmM磷酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1凍干制劑處方組成<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>制備方法配制處方量的pH6.0的lOmM磷酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的醋酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSPAa1原液的差值。將處方量的DSPAal原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為O.22ym的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例8:以p朋.2的0.1M醋酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1突變體DSMa凍干制劑處方組成<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>制備方法配制處方量的p朋.2的0.1M醋酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的枸櫞酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSMa原液的差值。將處方量的DSMa原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。實(shí)施例9:以p朋.2的0.1M枸櫞酸鹽緩沖液為緩沖體系制備穩(wěn)定等滲的DSPAa1突變體DSMb凍干制劑處方組成<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>制備方法配制處方量的pH6.2的0.1M枸櫞酸鹽緩沖液，準(zhǔn)確稱取處方量的各輔料，加入適量的醋酸鹽緩沖液溶解，并調(diào)節(jié)pH值為5.56.5，定容至體積為配液總體積與DSMb原液的差值。將處方量的DSMb原液加入其中，輕搖混勻，用孔徑為0.22i！m的微孔濾膜除菌過(guò)濾，分裝、凍干、加塞、壓蓋，即得。權(quán)利要求一種以重組吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑去氨普酶α1或其突變體為活性成分的穩(wěn)定等滲凍干制劑，包括去氨普酶α1或其突變體及凍干保護(hù)劑；其特征在于，所述去氨普酶α1突變體是指將野生型去氨普酶α1肽鏈中195位的苯丙氨酸替換成纈氨酸的肽鏈，命名為DSMa，或在DSMa基礎(chǔ)上繼續(xù)改變其210～213位的氨基酸，將所述肽鏈中210～213位的四個(gè)氨基酸谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸、精氨酸替換成四個(gè)丙氨酸的肽鏈，命名為DSMb；所述凍干保護(hù)劑包括氨基酸、糖/多元醇、等滲調(diào)節(jié)劑和pH值為5.5～7.0的緩沖體系，其中氨基酸為甘氨酸、L-精氨酸或L-組氨酸，糖/多元醇為蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇或山梨醇，等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉，緩沖體系為磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液或醋酸鹽緩沖液；所述凍干制劑中，去氨普酶α1或其突變體的單位劑量范圍為3～10mg，且每毫克去氨普酶α1或其突變體適配的凍干保護(hù)劑甘氨酸用量為0.01～10mg、或L-精氨酸的用量為0.1～100mg、或L-組氨酸的用量為0.1～50mg，蔗糖的用量為0.1～100mg、或乳糖的用量為0.1～100mg、或葡萄糖的用量為1～200mg、或甘露醇的用量為1～200mg、或山梨醇的用量為1～200mg；緩沖體系為0.01M～0.2M的磷酸鹽緩沖液、或0.05M～0.5M枸櫞酸鹽緩沖液、或0.01M～0.2M醋酸鹽緩沖液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凍干制劑，其特征在于，所述凍干保護(hù)劑中還加入表面活性劑吐溫20或吐溫80，其中每毫克去氨普酶a1或其突變體適配吐溫20的用量為0.001lmg、或適配吐溫80的用量為0.015mg。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的凍干制劑，其特征在于，所述每毫克去氨普酶al或其突變體適配吐溫20的用量為0.010.5mg、或適配吐溫80的用量為0.01lmg。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的凍干制劑，其特征在于，所述每毫克去氨普酶al或其突變體適配吐溫20的用量為0.050.3mg、或適配吐溫80的用量為0.050.5mg。5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的凍干制劑，其特征在于，所述每毫克去氨普酶al或其突變體適配甘氨酸的用量為0.055mg、或適配L-精氨酸的用量為150mg、或適配L-組氨酸的用量為120mg，蔗糖的用量為150mg、或乳糖的用量為150mg、或葡萄糖的用量為5100mg、或甘露醇的用量為5100mg、或山梨醇的用量為5100mg。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的凍干制劑，其特征在于，所述每毫克去氨普酶al或其突變體適配甘氨酸的用量為0.1lmg、或L-精氨酸的用量為530mg、或L-組氨酸的用量為210mg，蔗糖的用量為530mg、或乳糖的用量為530mg、或葡萄糖的用量為1050mg、或甘露醇的用量為1050mg、或山梨醇的用量為1050mg。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種以重組吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑去氨普酶α1或其突變體為活性成分的穩(wěn)定等滲凍干制劑，包括去氨普酶α1或其突變體及凍干保護(hù)劑；本發(fā)明的凍干制劑可用合適的稀釋劑重建成溶液制劑以適于臨床應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K38/49GK101785856SQ200910013968公開(kāi)日2010年7月28日申請(qǐng)日期2009年1月22日優(yōu)先權(quán)日2009年1月22日發(fā)明者劉祿娟,張明會(huì),楊清敏,王晶翼,馬中琿申請(qǐng)人:齊魯制藥有限公司