專利名稱：治療缺血性腦卒中的系列制劑及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明系分別采用源于丹參、牡丹皮中提取的高純度丹參酮IIA和丹皮酚為原料，并按照制劑學(xué)方法制備成治療腦卒中的系列制劑；其技術(shù)屬于藥物制劑及其臨床應(yīng)用領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腦卒中又稱腦中風(fēng)學(xué)名，是一種突然起病的腦血管或血液循環(huán)障礙性疾病。臨床表現(xiàn)以猝然昏倒、不省人事或突然發(fā)生口眼歪斜、半身不遂、舌強言蹇、智力障礙為主要特征。腦卒中包括缺血性腦卒中(短暫性腦缺血發(fā)作、動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死、腔隙性腦梗死、腦栓塞)和出血性腦卒中(腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血)，其中缺血性腦卒中占80-95%。腦卒中起病急、病死率高，是中老年人的常見病、多發(fā)病，給社會和家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)。
據(jù)流行病學(xué)統(tǒng)計，腦卒中的發(fā)病人數(shù)日漸上升，且呈年輕化趨勢明顯。我國是腦卒中的高發(fā)國家，每年發(fā)生腦卒中病人達200萬之多，發(fā)病率高達200/10萬；現(xiàn)幸存腦卒中病人約700萬，其中450萬病人不同程度喪失勞動力和生活不能自理。致殘率高達75%;我國每年腦卒中死亡約120萬，此病死亡人數(shù)占各種病因死亡的第2位，每12秒就新發(fā)1例腦卒中患者，每21秒就死亡1例腦卒中患者。腦中風(fēng)是嚴(yán)重危害人類健康和生命安全的常見的難治性疾病，存在著明顯三高(發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高)現(xiàn)象。治療棘手且大多數(shù)都留有后遺癥，給人類健康和生命造成極大的威脅，給患者帶來極大痛苦，使家庭和社會負(fù)擔(dān)沉重。因此，防治腦卒中非常重要，特別是創(chuàng)制對該病具有高效低毒的治療藥物備受政府和人們關(guān)注。腦卒中病因，祖國醫(yī)學(xué)將其列為"風(fēng)、癆、臌、膈"四大疑難病之首，自古以"積損正衰、勞倦內(nèi)傷、脾失健運、痰濁內(nèi)生、五志所傷、情至過極"而起。近代病因病機為素體失養(yǎng)、氣血兩虛、臟腑功能失調(diào)，若遇煩勞過度或憂思惱怒，膏粱厚貽或酒食無節(jié)等誘因，可進而產(chǎn)生瘀血阻滯、痰熱內(nèi)蘊，或陽化風(fēng)動、血隨氣逆，終成腦脈痹阻或血溢腦內(nèi)，引起半身不遂，發(fā)為中風(fēng)。其病位現(xiàn)認(rèn)為在腦，與心、腎、肝、脾關(guān)系密切，病機有虛(陰虛、氣虛)、火(肝火、心火)、風(fēng)(肝風(fēng)、外風(fēng))、痰(風(fēng)痰、濕痰)、氣(氣逆)、血(血瘀)六端，之間相互作用，互為影響，使中風(fēng)癥候異常復(fù)雜、善行多變。
丹參(Salvia miltorrhiza Bge)為唇形科多年生草本植物，是我國傳統(tǒng)具有活血化瘀作用的中藥，己廣泛地用于心腦血管疾病。丹參酮(Tanshinone)是丹參的有效活性組分，共含有50多種成分，其中丹參酮IIA為丹參酮中含量最高的活性成分。文獻報道[7， 8]，丹參酮對腦缺血損傷有明顯的保護作用。近年來，人們對丹參保護腦缺血/再灌注損傷方面作用機制的研究較多，如報道丹參具有抗炎、抗自由基，保護微循環(huán)的作用。
丹參酮IIA (tanshinoneIIA)是中藥丹參根部的脂溶性成分之一，具有抗菌
消炎，擴張血管，抗動脈粥樣硬化，抗血小板聚集，抗自由基等作用。胡霞敏等[中國藥理學(xué)通報，2006; 22(4): 436-40]研究表明，丹參酮IIA能明顯降低腦缺血/再灌注后血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達ICAM-l和E-selectin，減少中性粒細(xì)胞
在缺血區(qū)腦組織浸潤，減少炎性介質(zhì)的釋放，降低血腦屏障通透性，減輕腦水腫。丹參酮IIA減輕腦缺血組織的炎癥反應(yīng)是其治療腦血管疾病的機制之一。
丹皮酚(Paeonol， Pae)又稱牡丹酚，是中藥牡丹皮[芍藥科植物牡丹(Paeonia suffruticosa)的根皮]和徐長卿[蘿摩科植物徐長卿(CynanchumpemiculatiM)的全草]的主要活性成分。其化學(xué)式為2-羥基-4-甲氧基苯乙酮，分子式為C晶。0:,，相對分子質(zhì)量為166. 18，具有熔點低[mp(51+l)t:]、易揮發(fā)及
水溶性差的特性。丹皮酚藥理活性廣泛，臨床多用于心腦血管、腫瘤、炎癥、變態(tài)反應(yīng)及免疫系統(tǒng)等疾病。
丹皮酚可減輕腦缺血再灌注后遲發(fā)性腦損害的嚴(yán)重程度，降低腦缺血再灌注后增加的周圍血白細(xì)胞數(shù)，亦能使腦實質(zhì)中的小膠質(zhì)細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)明顯減少。通過觀察丹皮酚對大鼠腦缺血再灌注后中性粒細(xì)胞浸潤和壞死神經(jīng)元數(shù)目
的變化以及對細(xì)胞間黏附分子蛋白工CAM-1表達的影響，推測丹皮酚可能通過抑制大鼠腦缺血再灌注后ICAM-l蛋白表達而減輕了神經(jīng)元損傷。此外，丹皮酚可抑制反復(fù)腦缺血再灌注而引起的細(xì)胞Ca"內(nèi)流，保護C-ATPase活性及抗自由基的氧化作用，從而抑制Ca2+超負(fù)荷對腦細(xì)胞的損傷及超氧自由基對神經(jīng)細(xì)胞的損傷作用。為缺血后腦組織的恢復(fù)提供了有利條件，從而減輕遲發(fā)性腦損害的嚴(yán)重程度。
我們的研究證實，丹參酮IIA和丹皮酚按一定比例配伍，具有顯著改善大鼠腦缺血再灌注后腦組織炎癥反應(yīng)，減少缺血再灌注后血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達ICAM-1和E-selectin，抑制反復(fù)腦缺血再灌注引起的細(xì)胞Ca2+內(nèi)流，保護Ca"-ATPase活性及抗自由基的氧化作用，從而抑制(^2+超負(fù)荷對腦細(xì)胞的損傷及超氧自由基對神經(jīng)細(xì)胞的損傷作用。其作用明顯較強于丹參酮IIA、丹皮酚單用時的療效。
缺血性腦卒中以現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的腦血栓病為最常見，其主癥為精神呆滯、舌體發(fā)硬、言語遲澀、發(fā)音不清、口眼歪斜、肢體麻木、半身不遂及動脈硬化癥，中醫(yī)治療原則當(dāng)以活血化瘀為治本大法。故采用丹參酮IIA和丹皮酚原料藥配伍，制備成以活血化瘀為功效的系列制劑，治療缺血性腦卒中，對于提高腦血管疾病的治愈率和保障人們的健康具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于將丹參酮IIA、丹皮酚分別制備成乳劑、片劑，和將丹參酮IIA與丹皮酚制備成脂質(zhì)體注射劑。
為實現(xiàn)上述目的，采用的技術(shù)方案如下
1、 片劑丹參酮IIA、丹皮酚分別采用超聲-勻漿-冷凍干燥法制備丹參酮IIA和丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉，按照1:3重量比稱取，加適量淀粉，混勻，制軟材，壓片，包薄膜衣，即得。
2、 膠囊劑丹參酮IIA、丹皮酚分別采用超聲-勻漿-冷凍干燥法制備丹參酮IIA和丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉，按照1 : 3重量比稱取，加適量淀粉，混勻，制粒，整粒，裝膠囊，即得。
3、 注射劑丹參酮IIA與丹皮酚混合，采用超聲-勻漿-冷凍干燥法制備丹參酮IIA-丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉針劑。
具體實施例方式
1、 原料藥、輔料和試劑
丹參酮IIA和丹皮酚原料藥，淀粉等輔料，卵磷脂、膽固醇、聚乙二醇2。。。-二硬脂酰磷脂乙醇胺、磷酸和乙醚等試劑均市購。
2、 片劑的制備
(1)丹參酮IIA凍干粉稱取一份丹參酮IIA，加2份PH7. 2-0. 05mol/L磷酸鹽緩沖液超聲溶解；稱取卵磷脂、膽固醇和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂乙醇胺(9:1:0. 1)混合物1份溶于2份無水乙醚中，將丹參酮IIA磷酸鹽緩沖液與磷脂乙醚液混合，20000轉(zhuǎn)/分高速勻漿2-5分鐘，室溫下攪拌揮盡乙醚，加入8%甘露醇，超聲至乳液，采用微孔濾膜(小0.8ym)過濾，濾液 凍干機凍干，即得。(2) 丹皮酚凍干粉稱取一份丹皮酚，加2份P朋.8-0. 05mol/L磷酸鹽緩沖液超聲溶解；稱取卵磷脂、膽固醇和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂乙醇胺(9:1:0. 1)混合物1份溶于2份無水乙醚中，將丹皮酚磷酸鹽緩沖液與磷脂乙醚液混合，20000轉(zhuǎn)/分高速勻漿2-5分鐘，室溫下攪拌揮盡乙醚，加入6%甘露醇，超聲至乳液，采用微孔濾膜(4>0.8 um)過濾，濾液于凍干機凍干，即得。
(3) 壓片分別稱取丹參酮IIA凍干粉一份、丹皮酚凍干粉3份和淀粉0. 1份，混勻，制軟材，壓素片，使片重為0.45克，包薄膜，即得。
3、 膠囊劑的制備
(1) 制備原料藥丹參酮IIA凍干粉和丹皮酚凍干粉的制備同片劑原料藥
的制法制備。
(2) 制備膠囊劑分別稱取丹參酮IIA凍干粉一份、丹皮酚凍干粉3份和淀粉0.2份，混勻，制粒，整粒，裝膠囊，使每粒膠囊含顆粒凈重為0.4克，即得。
4、 注射劑的制備
采用超聲-勻漿-冷凍千燥法制備丹參酮IIA-丹皮酚納米脂質(zhì)體。稱取一份丹參酮IIA和3份丹皮酚，加6份1^7. 2-0. 05mol/L磷酸鹽緩沖液后超聲溶解；稱取卵磷脂、膽固醇和聚乙二醇2000 -二硬脂酰磷脂乙醇胺(9:1:0. l)混合物4份溶于6份無水乙醚中，將丹參酮IIA-丹皮酚磷酸鹽緩沖液與磷脂乙醚液混合，攪拌均勻；20000轉(zhuǎn)/分高速勻槳2-5分鐘，室溫下攪拌揮盡乙醚，加入6%甘露醇，超聲至乳液，采用微孔濾膜(小0.22um)過濾，濾液分裝于管制瓶中，每瓶4毫升，凍干機凍千，即得。
5、 制劑的臨床適應(yīng)癥及其用法
本系列制劑功能主治如下功能與主治溶栓、抗炎、止痛作用；主治缺血性腦卒中。用法與用量片劑口服； 一次2片， 一日2次。膠囊劑口服； 一次3 粒， 一日2次。注射劑靜脈滴注或介入治療， 一次2-4瓶(支)， 一日一次或 遵醫(yī)囑。
6、制劑的特點
本發(fā)明采用納米脂質(zhì)體凍干粉原料制備成的片劑、膠囊劑和注射劑，其藥 物具有明顯靶向、緩釋、穩(wěn)定性好、細(xì)胞親和與組織相容性、對于臨床缺血性 腦卒中的治療療效顯著、毒副作用低等特點。
權(quán)利要求
1、由丹參酮II和丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉制備成片劑的方法，其特征是丹參酮IIA、丹皮酚分別采用超聲-勻漿-冷凍干燥法制備丹參酮IIA和丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉，按照1∶3重量比稱取，加適量淀粉，混勻，制軟材，壓片，包薄膜衣，即得。
2、 由丹參酮n和丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉制備成膠囊劑方法，其特征是丹參酮iia、丹皮酚分別采用超聲-勻漿-冷凍干燥法制備丹參酮iia和丹皮酚納米 脂質(zhì)體凍干粉，按照1 : 3重量比稱取，加適量淀粉，混勻，制粒，整粒， 裝膠囊，即得。
3、 由丹參酮ii和丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉制備成注射劑的方法，其特征是丹 參酮iia與丹皮酚混合，采用超聲-勻漿-冷凍干燥法制備丹參酮iia-丹皮酚 納米脂質(zhì)體凍干粉針劑。
4、 采用上述方法分別制備的片劑、膠囊劑和注射劑。其臨床功能是溶栓、抗炎、 止痛；主治缺血性腦卒中。其成人用法與用量如下。片劑口服； 一次2片， 一日2次。膠囊劑口服； 一次3粒， 一日2次。注射劑靜脈滴注或介入 治療， 一次2-4瓶(支)， 一日一次或遵醫(yī)囑。
全文摘要
本發(fā)明的目的是分別采用超聲-勻漿-冷凍干燥法，分別制備丹參酮IIA、丹皮酚和丹參酮IIA-丹皮酚納米脂質(zhì)體凍干粉原料，并分別制備成片、膠囊和粉針劑。丹參酮IIA、丹皮酚和丹參酮IIA-丹皮酚依次超聲溶解、乳化、凍干機凍干、制軟材，制粒，壓片，裝膠囊等方法，分別制成每片重0.45克(素片)片劑、每粒0，4克(顆粒凈重)膠囊劑和粉針劑。本品系列制劑的功能為溶栓、抗炎、止痛；主治缺血性腦卒中。使用方法為片劑口服；一次2片，一日2次。膠囊劑口服；一次3粒，一日2次。注射劑靜脈滴注或介入治療，一次2-4瓶(支)，一日一次或遵醫(yī)囑。
文檔編號A61K31/58GK101653444SQ200910024019
公開日2010年2月24日 申請日期2009年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月22日
發(fā)明者孫紀(jì)元, 王四旺, 蔣曉帆, 舟 費, 軍 郭, 郭慶東 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)