專利名稱：一種含有7,9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19,6-內(nèi)酯的注射劑、其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，尤其涉及到一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑及其制備方法和用途。

背景技術(shù)：
中藥半邊旗(Pteris semipinnata L.)始載于《嶺南采藥錄》，又名甘草蕨(《廣州植物志》)、甘草鳳尾蕨(《中國(guó)主要植物圖說·蕨類》)、半邊蓮、半邊蕨(《廣西藥植圖志》)、半鳳尾草(《南寧市藥物志》)、半邊風(fēng)藥(《貴州民間藥物》)、鳳凰尾巴草(《浙江天目山藥植志》)、單邊旗、半邊梳(廣州部隊(duì)《常用中草藥手冊(cè)》)等。藥用部位為風(fēng)尾蕨科植物半邊旗的帶根全草，洗凈，曬干而得，全年可采；性味辛、涼(《陸川本草》)。該藥具有清熱、消腫、解毒、止血、生肌、止痢等作用(《南寧市藥物志》)；民間用于治吐血、外傷出血、發(fā)背、疔瘡、跌打損傷、目赤腫痛(《浙江天目山藥植志》)、蛇咬傷(《嶺南采藥錄》)等。
近年來(lái)，半邊旗的抗腫瘤作用逐漸受到重視。篇名為《半邊旗5種成分體外細(xì)胞毒活性比較及構(gòu)效關(guān)系分析》的研究結(jié)果表明由半邊旗提取的化合物A(7，11-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯)、5F(11-α-羥基-15-氧-16-貝殼杉烯-19-酸)、6F(7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯)具有顯著的抗腫瘤作用?，F(xiàn)已有專利號(hào)為95119380.5發(fā)明專利授權(quán)，對(duì)含有化合物5F以及A的提取物進(jìn)行了保護(hù)；專利號(hào)為02149680.3的發(fā)明專利公開了一種從鳳尾蕨科植物中提取5F及A成分的新方法。并已有篇名為《ent-11-α-羥基-15-氧代-16-貝殼杉烯-19-酸滴眼劑含量的UV測(cè)定》和《紫外分光光度法測(cè)定半邊旗二萜類化合物5F滴眼液的含量》、《半邊旗5F注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究》公開了將5F制成滴眼液和注射液的制劑?；衔?，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯具有顯著的抗腫瘤活性，但仍未見任何將其制成臨床適用劑型的公開資料。通過詳細(xì)研究，本專利將7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯制成注射劑，為臨床醫(yī)生和患者提供了一種新的抗腫瘤治療藥物，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控、安全有效、經(jīng)濟(jì)實(shí)用，產(chǎn)品外觀好，抗腫瘤作用顯著，在臨床治療中具有較高的使用價(jià)值。
所述的7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，該注射劑具有良好的溶解性和穩(wěn)定性，原材料來(lái)源豐富，易于工業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量易于控制，安全有效，經(jīng)濟(jì)實(shí)用。
本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑的制備方法，該制備方法工藝簡(jiǎn)單。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用的技術(shù)方案 一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，以7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯為活性成分，其余成分為輔料，其原料質(zhì)量份配比范圍7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯1—100份，輔料1—10000份； 所述的注射劑，包括溶液型注射劑、注射用凍干粉針、混懸型注射劑、乳濁型注射劑、注射用滅菌粉劑或片劑中的任何一種； 所述的輔料選自注射溶媒、等滲調(diào)節(jié)劑、PH調(diào)節(jié)劑、助溶劑、抗氧化劑、金屬絡(luò)合劑、抑菌劑或殺菌劑、止痛劑、賦形劑中的一種或者幾種的組合。
所述的注射溶媒選自注射用水、注射用油、乙醇、丙醇、異丙醇、丙二醇、乙酸乙酯、二甲基亞砜中的一種或者幾種的組合； 所述的等滲調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖、乳糖、碳酸氫鈉、山梨醇、甘露醇、右旋糖酐、氨基酸中的一種或者幾種的組合； 所述的PH調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸及其緩沖液、草酸、乳酸、檸檬酸、碳酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、蘋果酸、酒石酸、糠酸、沒食子酸、甲酸、乙酸、丁二酸、乙酸酐、戊二酸酐、戊二酸、苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)氨基苯甲酸、水楊酸、氫氧化鈉中的一種或者幾種的組合； 所述的助溶劑選用司盤類、聚山梨酯類、普流羅尼克、聚乙二醇、聚乙烯醇、丙二醇、乙醇、甘油、有機(jī)酸及其鹽、酰胺及胺類、聚維酮、葡甲胺、蜂膠、β—環(huán)糊精、羥丙基—β—環(huán)糊精、羥乙基β—環(huán)糊精、三甲基β—環(huán)糊精、磺烷基醚β—環(huán)糊精、十二烷基硫酸鈉、泊洛沙姆、溴化十六烷三甲胺、月桂醇硫酸鈉、硬脂醇硫酸鈉、聚氧乙烯衍生物、蔗糖酯、山梨醇脂肪酯、大豆磷脂、碳酸氫鈉、碳酸鈉、亞硫酸氫鈉、依地酸二鈉、硼酸鈉中的一種或者幾種的組合； 所述的抗氧化劑選自亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、維生素C、二丁甲苯酚、維生素E中的一種或者幾種的組合； 所述的金屬絡(luò)合劑選自EDTA2Na； 所述的抑菌或殺菌劑選自苯甲醇、羥苯丁酯、苯酚、三氯叔丁醇中的一種或者幾種的組合； 所述的止痛劑選自利多卡因、普魯卡因、丁卡因、曲馬多及其鹽、可待因及其鹽、嗎啡及其鹽中的一種或者幾種的組合； 所述的賦形劑選用氯化鈉、甘露醇、右旋糖酐中的一種或者幾種的組合。
所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑為溶液型注射劑，處方如下 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 1～100份 助溶劑 0.2～90份 賦形劑 0.2～200份 PH調(diào)節(jié)劑 0.1～10份 注射溶媒 0.5～9700份。
優(yōu)選處方如下 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 1～10份 助溶劑 1～5份 賦形劑 1～10份 PH調(diào)節(jié)劑 0.1～0.2份 注射溶媒 10～5000份。
所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑為注射用滅菌粉劑，處方如下 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 1～100份 助溶劑 0.4～100份 賦形劑 0.5～200份 PH調(diào)節(jié)劑0.1～10份 優(yōu)選處方如下 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 5～10份 助溶劑 1～10份 賦形劑 1～10份 PH調(diào)節(jié)劑0.1～0.2份 所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑為注射用凍干粉針，處方如下 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 1～100份 助溶劑 0.2～100份 賦形劑 0.7～200份 PH調(diào)節(jié)劑0.1～10份 優(yōu)選處方如下 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 2～10份 助溶劑 0.2～5份 賦形劑 1～10份 PH調(diào)節(jié)劑0.1～1.0份 本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑的制備工藝是 本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射液的制備工藝包括如下步驟 (1)、稱取權(quán)利要求1所述質(zhì)量份配比的原料，置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體； (2)、加入助溶劑、賦形劑，用注射用水溶解至澄清； (3)、加入PH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)PH至4～8.5； (4)、加入活性炭，攪拌、煮沸20分鐘，脫炭、過濾、分裝、滅菌，即制成含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射液。
本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用滅菌粉劑的制備工藝包括如下步驟 (1)、稱取權(quán)利要求1所述質(zhì)量份配比的7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯，置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體； (2)、稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體，加入助溶劑、賦形劑，注射用水溶解，反應(yīng)溫度在30—90℃，待全部溶解后，加PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH至4—8.5；加活性炭脫色，過濾，將濾液加水調(diào)節(jié)調(diào)至濃度10—40％之間的噴干液，過無(wú)菌板框后，進(jìn)噴塔噴干；將噴塔進(jìn)風(fēng)溫度調(diào)至130—140℃，出風(fēng)溫度調(diào)至90—105℃，冷風(fēng)吹送控溫低于40℃，塔壓力穩(wěn)定在30±5mm水柱，料液進(jìn)入噴塔約30分鐘出粉，將無(wú)菌粉末分裝，壓蓋，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用滅菌粉劑。
本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用凍干粉針的制備工藝包括如下步驟 (1)、稱取權(quán)利要求1所述質(zhì)量份配比的7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體，置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體； (2)、稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體，加入助溶劑、賦形劑，注射用水溶解，攪拌至全部溶解后，冷藏、過濾，加PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH至4—8.5；加活性炭煮沸20—25分鐘脫色，趁熱脫炭，放冷，過濾至澄明，得溶液，裝瓶，送入凍干箱，關(guān)閉箱門，開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，使樣品凍結(jié)；溫度達(dá)到—30℃后，保持恒溫2.5小時(shí)；開啟冷凝器，冷凝器溫度達(dá)到—40℃后，開啟真空泵，開始升溫升華干燥，溫度達(dá)到—35℃后，保持恒溫3小時(shí)，停機(jī)，密塞，開去真空，出箱，直接壓蓋，包裝，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用凍干粉針。
本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑是以7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯為活性成分與藥用輔料經(jīng)適宜的制劑工藝制成的注射劑，包括溶液型注射劑、注射用凍干粉針、混懸型注射劑、乳濁型注射劑、注射用滅菌粉劑或注射用滅菌片劑等。該注射劑對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞具有殺傷作用，可以用于肺癌、胃癌、肝癌、結(jié)腸癌、黑色素瘤、白血病、食管癌、卵巢癌、乳癌、頭頸癌等疾病的臨床治療，具有抗癌活性強(qiáng)，抗瘤譜廣，毒性低等優(yōu)點(diǎn)，使用安全、方便、有效，特別適合癌癥患者的臨床治療。
本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑質(zhì)量穩(wěn)定、可控，安全有效。
本發(fā)明注射劑的藥效成分為7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯，酸堿度適中，注射后無(wú)明顯刺激性，長(zhǎng)期使用不良反應(yīng)不明顯，療效顯著，耐受性良好，給藥方便，為患者的抗腫瘤治療提供了高效、低毒的治療藥物，在臨床治療中有一定的優(yōu)勢(shì)。
通過實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明的有益效果 實(shí)驗(yàn)例1. 本發(fā)明對(duì)小鼠同種移植性腫瘤的抗腫瘤作用 1.實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)用藥 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液，20mg/支； 氟尿嘧啶注射液(5-FU)，0.25g/支，江蘇南通制藥總廠，批號(hào)031203 受試動(dòng)物 昆明種小白鼠，體重18～22g，雌雄兼用，實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。置于SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)，室溫25±2℃，所有實(shí)驗(yàn)用品均經(jīng)高壓蒸汽消毒處理。
腫瘤細(xì)胞株 荷S-180、H22、艾氏腹水瘤小鼠購(gòu)自南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，接種細(xì)胞后7～8天用無(wú)菌注射器抽取腹水用于實(shí)驗(yàn)。
2.實(shí)驗(yàn)方法 給藥途徑7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液尾靜脈注射給予受試小鼠，每日1次。5-FU尾靜脈注射給藥，每日1次。給藥方法如下。
給藥周期按照陳奇主編《中藥藥理研究方法學(xué)》(第2版)1006-1027頁(yè)所載方法，抽取荷S-180、H22、艾氏腹水瘤小鼠的腹水，用注射用生理鹽水進(jìn)行1∶1稀釋，渦旋振蕩混勻，用無(wú)菌注射器接種于受試動(dòng)物腹腔，每只0.2mL，制備荷腹水瘤小鼠模型，隨機(jī)分組；用無(wú)菌注射器接種于受試動(dòng)物后肢腋窩皮下，每只0.2mL，制備荷實(shí)體瘤小鼠模型，隨機(jī)分組。荷實(shí)體瘤小鼠接種腫瘤細(xì)胞后次日開始注射給藥，連續(xù)給藥10天，20天后處死動(dòng)物稱取瘤重。荷腹水瘤小鼠接種腫瘤細(xì)胞后次日開始注射給藥，連續(xù)給藥7天，計(jì)算小鼠存活時(shí)間，至整個(gè)實(shí)驗(yàn)(30天)結(jié)束仍未死亡的，以30天計(jì)。
3.數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Microcal Origin 6.0 Professional統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，方差分析比較組間差異，t-檢驗(yàn)比較兩組間差異，以P<0.05為差異有顯著性水平。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液對(duì)荷S-180腹水瘤及實(shí)體瘤小鼠的抗腫瘤作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1.；7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液對(duì)荷H22腹水瘤及實(shí)體瘤小鼠的抗腫瘤作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2.；7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液對(duì)艾氏腹水癌的抑制作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3.。
表1.7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液對(duì)荷S-180腹水瘤及實(shí)體瘤小鼠的抗腫瘤作用(x±s)(n＝12)
與0.9％NaCl組比較，*表示p<0.05；**表示p<0.01 與5-FU組比較，△表示p<0.05；△△表示p<0.01 表2.7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液對(duì)荷H22腹水瘤及實(shí)體瘤的抗腫瘤作用(x±s)(n＝12)
與0.9％NaCl組比較，*表示p<0.05；**表示p<0.01 與5-FU組比較，△表示p<0.05；△△表示p<0.01 表3.7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液對(duì)艾氏腹水癌的抑制作用(x±s)(n＝10)
結(jié)果顯示，對(duì)于S-180腫瘤細(xì)胞株所致實(shí)體瘤和腹水瘤，給予7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液可抑制其增殖，療效確切，在實(shí)驗(yàn)劑量，其對(duì)S-180實(shí)體瘤的抑瘤效果明顯優(yōu)于10mg.kg-15-FU(p<0.05)的治療效果；對(duì)S-180腹水瘤的抑瘤效果與10mg.kg-15-FU相當(dāng)(p>0.05)。對(duì)荷H22肝癌細(xì)胞株所致實(shí)體瘤和腹水瘤，7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液有顯著的抗腫瘤作用，療效確切，在實(shí)驗(yàn)劑量其對(duì)H22腹水瘤的抑瘤作用優(yōu)于10mg.kg-15-FU(p<0.05)對(duì)H22實(shí)體瘤的抑瘤作用，與10mg.kg-15-FU相當(dāng)于(p>0.05)。對(duì)艾氏腹水癌小鼠的抗腫瘤作用研究顯示，7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液逐日連續(xù)給藥效果優(yōu)于間隔給藥，且10mg.kg-1以下劑量時(shí)，抗腫瘤作用與給藥劑量有明顯依賴關(guān)系，最高可使受試小鼠存活時(shí)間延長(zhǎng)179.6％，因?yàn)閷?shí)驗(yàn)時(shí)間有限，10.0mg/kg/d×7給藥組至實(shí)驗(yàn)結(jié)束仍有8只存活，如果延長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)周期，有可能獲得更好的治療效果。隔日給藥效果不及逐日給藥，隨給藥間隔時(shí)間延長(zhǎng)，療效下降。而單次大劑量給藥對(duì)存活時(shí)間影響不夠理想。
實(shí)驗(yàn)例2. 本發(fā)明對(duì)小鼠異種移植性腫瘤的抗腫瘤作用 1.實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)用藥 注射用7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉針，20mg/支； 維甲酸，購(gòu)自Sigma公司。
受試動(dòng)物，BALB/C小鼠，4～5周齡，體重16～18g，雄性，置于SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)，室溫25±2℃，所有實(shí)驗(yàn)用品均經(jīng)高壓蒸汽消毒處理。
細(xì)胞株，人肺癌A549細(xì)胞、人胃癌SGC7901細(xì)胞購(gòu)自中科院上海細(xì)胞所。
2.實(shí)驗(yàn)方法 細(xì)胞培養(yǎng) 人肺癌A549細(xì)胞、人胃癌SGC7901細(xì)胞復(fù)蘇后置于3℃、5％CO2孵育箱中，飽和濕度條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)基為含10％小牛血清的高糖型DMEM培養(yǎng)液。實(shí)驗(yàn)時(shí)取處于指數(shù)生長(zhǎng)期的體外培養(yǎng)細(xì)胞，用0.25％胰蛋白酶消化，離心收集細(xì)胞，用生理鹽水調(diào)整為1×107細(xì)胞/mL。
瘤組織接種 取上述細(xì)胞懸液，渦旋振蕩混勻，在SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用1mL注射器將細(xì)胞懸液注入BALB/C小鼠背部皮下，2×106個(gè)細(xì)胞/只。
給藥途徑、方法 注射給藥接種腫瘤細(xì)胞后受試動(dòng)物隨機(jī)分組，每組12只，次日給藥，每日尾靜脈注射給藥一次，連續(xù)給藥10天，末次給藥后24小時(shí)，拉頸處死動(dòng)物，剝離腫瘤組織稱重。
腫瘤抑制率＝(C—T)/C×100％(C對(duì)照組平均瘤重；T給藥組平均瘤重)。
給藥途徑注射用7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉用注射用水溶解，尾靜脈注射給予受試小鼠，每日1次。
3.數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Microcal Origin 6.0 Professional統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，方差分析比較組間差異，t-檢驗(yàn)比較兩組間差異，以P<0.05為差異有顯著性水平。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果 注射用7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉對(duì)荷人肺癌A549細(xì)胞、人胃癌SGC7901細(xì)胞實(shí)體瘤小鼠的抗腫瘤作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4.表5. 表4.注射用7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉對(duì)荷人肺癌A549細(xì)胞實(shí)體瘤小鼠的抗腫瘤作用(x±s)(n＝12)

表5.注射用7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉對(duì)荷人胃癌SGC7901細(xì)胞實(shí)體瘤小鼠的抗腫瘤作用(x±s)(n＝12)
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明注射用7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉針對(duì)荷人腫瘤細(xì)胞的小鼠具有顯著的抗腫瘤作用，其治療效果與臨床常用抗腫瘤治療藥物維甲酸的療效基本相同。
實(shí)驗(yàn)例3 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液連續(xù)30天尾靜脈注射給藥對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響 1.實(shí)驗(yàn)材料 受試動(dòng)物SD大鼠160只，體重80～100克，♀♂各半，年齡5～6周齡，購(gòu)回后飼養(yǎng)觀察2周，作藥前體重、采食量記錄。按性別分組，動(dòng)物每籠5只。全價(jià)飼料及飲水自由采食，每周消毒一次籠具。室溫空調(diào)保持18～24℃，相對(duì)濕度60～70％。
受試藥物 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液，20mg/支，臨用前用0.9％氯化鈉注射液稀釋成所需濃度。對(duì)照組用0.9％氯化鈉注射液(NS)。
主要儀器 電子天平5003型，上海天平儀器廠，全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀(M-4000，德國(guó))，BASIC半自動(dòng)生化分析儀(法國(guó)SECOMAM公司)，切片機(jī)徠 卡-2015(德國(guó))，顯微鏡等。
主要試劑 血球稀釋液，溶血素(220402050501)，由四川美生科技有限公司提供。血液生化檢測(cè)試劑AST(020710)，ALT(020708020826)，ALP(020206020808)，TP(020220)，Alb(020123020702)，Crea(020515021009)，Bun(020712021022)，T-Bil(020601300011)，TC(020416021014)，Glu(020527020924)。AST、ALT、ALP三種血清檢測(cè)試劑為柏定生物工程(北京)有限公司產(chǎn)品，T-Bil北京中生公司產(chǎn)品，其余6種血清檢測(cè)試劑均為四川邁克科技有限公司產(chǎn)品。甲醛(分析純)、乙醇(95％分析純)、二甲苯(分析純)等均為市購(gòu)。
2.實(shí)驗(yàn)方法 劑量與分組見表6。
表6.給藥劑量與實(shí)驗(yàn)分組
給藥方法尾靜脈注射給藥。每天上午8～10點(diǎn)進(jìn)行，每天給藥一次，連續(xù)30天。每周日稱一次體重，并根據(jù)體重調(diào)整給藥劑量。
檢測(cè)指標(biāo) 血液學(xué)指標(biāo)給藥30天，活殺動(dòng)物取血，Medicon-4000儀器測(cè)定WBC(白細(xì)胞)、LYM(淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù))、MID(中間細(xì)胞計(jì)數(shù))、GRAN(粒細(xì)胞計(jì)數(shù))、LYM(淋巴細(xì)胞百分率)，MID(中間細(xì)胞百分率)、GRAN(粒細(xì)胞百分率)、RBC(紅細(xì)胞)、HGB(血紅蛋白)、HCT(紅細(xì)胞壓積)、MCV(平均紅細(xì)胞體積)、MCH(平均紅細(xì)胞血紅蛋白量)、MCHC(紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度)、RDW-CV(紅細(xì)胞分布寬度變異數(shù))、RDW-SD(紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差)、PLT(血小板計(jì)數(shù))、MPV(平均血小板體積)、PCT(血小板壓積容量)、LCDW(血小板趨向電極噪聲端的控制限)、RCDW(紅細(xì)胞與血小板之間的分布控制區(qū)間)、PDW(血小板體積分布寬度)、普通光鏡方法計(jì)數(shù)RC(網(wǎng)織紅細(xì)胞)，玻片法測(cè)CT(凝血時(shí)間)。
血液生化檢測(cè)給藥30天，股動(dòng)脈、靜脈切斷取血分離血清，用半自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)AST(天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)酶法、ALT(丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)酶法、ALP(堿性磷酸酶)速率法、TP(總蛋白)雙縮脲法、Alb(白蛋白)BCG法、TBIL(總膽紅素)重氮法BUN(尿素氮)脲酶-波氏比色法、Glu(葡萄糖)F0D-POD法、TC(總膽固醇)CE-COD-POD法、Crea(肌肝)苦味酸兩點(diǎn)法。
3.數(shù)據(jù)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Microcal Origin 6.0 Professional統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，方差分析比較組間差異，t-檢驗(yàn)比較兩組間差異，以P<0.05為差異有顯著性水平。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液連續(xù)30天尾靜脈注射給藥對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響見表7. 表7.7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液連續(xù)30天尾靜脈注射給藥對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響(x±s，n＝30)

注與對(duì)照組相比*P<0.05，**P<0.01； 由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液連續(xù)30天尾靜脈注射給藥對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)基本無(wú)明顯影響，受試的各劑量組相關(guān)血液學(xué)指標(biāo)與對(duì)照組無(wú)顯著差異，提示在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射給藥對(duì)大鼠基本是安全的。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明的詳細(xì)組分由下列實(shí)施例給出，但不以任何方式限制本發(fā)明。
通過下述實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實(shí)施例1 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液(250mL/瓶大輸液)處方 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 20g 氯化鈉 225g 丙二醇 200g 注射用水 加至25000mL 制備工藝 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯原料置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體；準(zhǔn)確稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體20g，加入丙二醇200g攪拌溶解，緩慢加入注射用水5000mL，加入處方量的氯化鈉，充分?jǐn)嚢枞芙夂?，用鹽酸調(diào)節(jié)PH至5.0-6.5，然后加入1％針用炭，煮沸20分鐘，脫炭，加注射用水至25000mL，檢驗(yàn)含量合格后，無(wú)菌環(huán)境中首先以0.45μm微孔濾膜過濾，然后再以0.22μm微孔濾膜過濾，濾液分裝于輸液瓶中，每瓶250mL，高溫蒸汽消毒，即得7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液(250mL/瓶大輸液)。
實(shí)施例2 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液(10mL/支)處方 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 10g 氯化鈉 9g 丙二醇 8g 吐溫8010g 注射用水 加至1000mL 制備工藝 準(zhǔn)確稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體10g與處方量的吐溫80混合均勻，加入丙二醇9g攪拌，緩慢加入注射用水800mL，加入處方量的氯化鈉，充分?jǐn)嚢枞芙夂螅孟←}酸調(diào)節(jié)PH至5.0-6.5，然后加入1％針用炭，煮沸20分鐘，脫炭，加注射用水至1000mL，檢驗(yàn)含量合格后，無(wú)菌環(huán)境中首先以0.45μm微孔濾膜過濾，然后再以0.22μm微孔濾膜過濾，濾液分裝于10mL玻璃安瓶中，每支10mL，高溫蒸汽消毒，即得7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射液(10mL/支)。
實(shí)施例3 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯凍干粉針(50mg/支)處方 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 5g 氯化鈉 9g 丙二醇 20g 吐溫80 10g 制備工藝 準(zhǔn)確稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體5g與處方量的吐溫80混合均勻，加入丙二醇20g攪拌，緩慢加入注射用水800mL溶解，加入處方量的氯化鈉，充分?jǐn)嚢枞芙夂?，冷藏，過濾，用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH至5.0-6.5，然后加入1％針用炭，煮沸20分鐘，脫炭，放冷，加注射用水至1000mL，過濾得澄明溶液，檢驗(yàn)含量合格后，濾液分裝于10mL青霉素瓶中，每支10mL，送入凍干箱，關(guān)閉箱門，開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，使樣品凍結(jié)；溫度達(dá)到—30℃后，保持恒溫2.5小時(shí)；開啟冷凝器，冷凝器溫度達(dá)到—40℃后，開啟真空泵，開始升溫升華干燥，溫度達(dá)到—35℃后，保持恒溫3小時(shí)，停機(jī)，密塞，開去真空，出箱，直接壓蓋，包裝，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用凍干粉針(50mg/支)。
實(shí)施例4 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射用滅菌粉劑(100mg/支)處方 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 200g 氯化鈉 180g 聚維酮 120g 制備工藝 將7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體； 稱取200g7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體與120g聚維酮、180g氯化鈉混合均勻，注射用水1000mL溶解，溫度在50±2℃，攪拌使全部溶解后，加鹽酸調(diào)節(jié)PH至5.0-6.5；加1％針用炭脫色，過濾，濾液加注射用水至1500mL，過無(wú)菌板框后，進(jìn)噴塔噴干；將噴塔進(jìn)風(fēng)溫度調(diào)至130—140℃，出風(fēng)溫度調(diào)至90—105℃，冷風(fēng)吹送控溫低于40℃，塔壓力穩(wěn)定在30±5mm水柱，料液進(jìn)入噴塔約30分鐘出粉，將無(wú)菌粉末分裝，每瓶250mg無(wú)菌粉末，壓蓋，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用滅菌粉劑(100mg/支)。
實(shí)施例5 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射用片劑(100mg/片)處方 7，9-二羥基-15羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯100g 葡萄糖 35g 氯化鈉 45g 吐溫80 20g 稱取100g7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體與20g吐溫80混合均勻，注射用水800mL溶解，溫度在50±2℃，加入處方量的葡萄糖、氯化鈉，攪拌使全部溶解后，加鹽酸調(diào)節(jié)PH至6.0-6.5加1％針用炭脫色，過濾，濾液加注射用水至1000mL，過無(wú)菌板框后，進(jìn)噴塔噴干；將噴塔進(jìn)風(fēng)溫度調(diào)至130—140℃，出風(fēng)溫度調(diào)至90—105℃，冷風(fēng)吹送控溫低于40℃，塔壓力穩(wěn)定在30±5mm水柱，料液進(jìn)入噴塔約30分鐘出粉，在無(wú)菌環(huán)境中于50℃烘干，壓片，每片200mg，分裝于已消毒青霉素瓶中，壓蓋封裝，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯注射用片劑(100mg/片)。
實(shí)施例6 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯乳濁型注射劑(250mg/瓶)處方 7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 50g 大豆磷脂 70g 甘油 200g 注射用水 加至4000mL 稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體50g，與70g精制大豆磷脂、200g甘油混合，加1000mL注射用水?dāng)嚢杌靹?；轉(zhuǎn)入到高速組織搗碎機(jī)中，8000轉(zhuǎn)/分?jǐn)嚢枞危谝淮?0分鐘，第二次5分鐘，第三次3分鐘，使其分散均勻成初乳劑；緩慢加入注射用水至4000mL，轉(zhuǎn)入到高壓乳勻機(jī)內(nèi)，40Mpa勻化三次，過濾得濾液，濾液分裝于輸液瓶中，每瓶200mL，壓蓋封裝，高溫蒸汽消毒，即得7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯乳濁型注射劑(250mg/瓶)。
實(shí)施例7 本發(fā)明含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑的穩(wěn)定性 依照新藥評(píng)審的相關(guān)技術(shù)要求，參照藥物指導(dǎo)原則中加速試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法，取本品的上市包裝在相對(duì)濕度75±5％、溫度40±2℃條件下，放置6個(gè)月，按0、1、2、3、6月取樣，本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4制備的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下
*實(shí)施例3、實(shí)施例4樣品的澄明度及PH檢查為每支注射劑加注射用水10mL復(fù)溶后進(jìn)行。
權(quán)利要求
1、一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，其特征在于，以7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯為活性成分，其余成分為輔料，其原料質(zhì)量份配比范圍7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯1—100份，輔料1—10000份；
所述的注射劑，包括溶液型注射劑、注射用凍干粉針、混懸型注射劑、乳濁型注射劑、注射用滅菌粉劑或片劑中的任何一種。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，其特征在于所述的輔料選自注射溶媒、等滲調(diào)節(jié)劑、PH調(diào)節(jié)劑、助溶劑、抗氧化劑、金屬絡(luò)合劑、抑菌劑或殺菌劑、止痛劑、賦形劑中的一種或者幾種的組合。
3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，其特征在于所述的注射溶媒選自注射用水、注射用油、乙醇、丙醇、異丙醇、丙二醇、乙酸乙酯、二甲基亞砜、甘油中的一種或者幾種的組合；所述的等滲調(diào)節(jié)劑選自氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖、乳糖、碳酸氫鈉、山梨醇、甘露醇、右旋糖酐、氨基酸中的一種或者幾種的組合；所述的PH調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸及其緩沖液、草酸、乳酸、檸檬酸、碳酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、蘋果酸、酒石酸、糠酸、沒食子酸、甲酸、乙酸、丁二酸、乙酸酐、戊二酸酐、戊二酸、苯甲酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)氨基苯甲酸、水楊酸、氫氧化鈉中的一種或者幾種的組合；所述的助溶劑選用司盤類、聚山梨酯類、普流羅尼克、聚乙二醇、聚乙烯醇、丙二醇、乙醇、甘油、有機(jī)酸及其鹽、酰胺及胺類、聚維酮、葡甲胺、蜂膠、β—環(huán)糊精、羥丙基—β—環(huán)糊精、羥乙基β—環(huán)糊精、三甲基β—環(huán)糊精、磺烷基醚β—環(huán)糊精、十二烷基硫酸鈉、泊洛沙姆、溴化十六烷三甲胺、月桂醇硫酸鈉、硬脂醇硫酸鈉、聚氧乙烯衍生物、蔗糖酯、山梨醇脂肪酯、大豆磷脂、碳酸氫鈉、碳酸鈉、亞硫酸氫鈉、依地酸二鈉、硼酸鈉中的一種或者幾種的組合；所述的抗氧化劑選自亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、維生素C、二丁甲苯酚、維生素E中的一種或者幾種的組合；所述的金屬絡(luò)合劑選自EDTA2Na；所述的抑菌或殺菌劑選自苯甲醇、羥苯丁酯、苯酚、三氯叔丁醇中的一種或者幾種的組合；所述的止痛劑選自利多卡因、普魯卡因、丁卡因、曲馬多及其鹽、可待因及其鹽、嗎啡及其鹽中的一種或者幾種的組合；所述的賦形劑選用氯化鈉、甘露醇、右旋糖酐中的一種或者幾種的組合。
4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，所述的注射劑為溶液型注射劑，其特征在于，所述的處方如下
7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 1～100份
助溶劑 0.2～90份
賦形劑 0.2～200份
PH調(diào)節(jié)劑 0.1～10份
注射溶媒 0.5～9700份。
5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，所述的注射劑為注射用滅菌粉劑，其特征在于，所述的處方如下
7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯1～100份
助溶劑0.4～100份
賦形劑 0.5～200份
PH調(diào)節(jié)劑0.1～10份
6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，所述的注射劑為注射用凍干粉針，其特征在于，所述的處方如下
7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯 1～100份
助溶劑 0.2～100份
賦形劑 0.7～200份
PH調(diào)節(jié)劑0.1～10份
7、根據(jù)權(quán)利要求4所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射液的制備方法，其特征在于它包括如下步驟
(1)、稱取權(quán)利要求1所述質(zhì)量份配比的原料，置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體；
(2)、加入助溶劑、賦形劑，用注射用水溶解至澄清；
(3)、加入PH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)PH至4～8.5；
(4)、加入活性炭，攪拌、煮沸20分鐘，脫炭、過濾、分裝、滅菌，即制成含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射液。
8、根據(jù)權(quán)利要求5所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用滅菌粉劑的制備方法，其特征在于它包括如下步驟
(1)、稱取權(quán)利要求1所述質(zhì)量份配比的7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯，置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體；
(2)、稱取7，9二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體，加入助溶劑、賦形劑，注射用水溶解，反應(yīng)溫度在30—90℃，待全部溶解后，加PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH至4—8.5；加活性炭脫色，過濾，將濾液加水調(diào)節(jié)調(diào)至濃度10—40％之間的噴干液，過無(wú)菌板框后，進(jìn)噴塔噴干；將噴塔進(jìn)風(fēng)溫度調(diào)至130—140℃，出風(fēng)溫度調(diào)至90—105℃，冷風(fēng)吹送控溫低于40℃，塔壓力穩(wěn)定在30±5mm水柱，料液進(jìn)入噴塔約30分鐘出粉，將無(wú)菌粉末分裝，壓蓋，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用滅菌粉劑。
9、根據(jù)權(quán)利要求6所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用凍干粉針的制備方法，其特征在于它包括如下步驟
(1)、稱取權(quán)利要求1所述質(zhì)量份配比的7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體，置于反應(yīng)罐中；加95％乙醇適量，回流至全溶，稍冷后加入活性炭，回流10分鐘，趁熱經(jīng)板框脫炭，再經(jīng)微孔濾膜進(jìn)入潔凈室結(jié)晶罐，自然冷卻1天，攪拌晶體后冷藏1天，抽濾，無(wú)水乙醇洗滌兩次，抽干后真空干燥得成品晶體；
(2)、稱取7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯成品晶體，加入助溶劑、賦形劑，注射用水溶解，攪拌至全部溶解后，冷藏、過濾，加PH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)PH至4—8.5；加活性炭煮沸20—25分鐘脫色，趁熱脫炭，放冷，過濾至澄明，得溶液，裝瓶，送入凍干箱，關(guān)閉箱門，開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，使樣品凍結(jié)；溫度達(dá)到—30℃后，保持恒溫2.5小時(shí)；開啟冷凝器，冷凝器溫度達(dá)到—40℃后，開啟真空泵，開始升溫升華干燥，溫度達(dá)到—35℃后，保持恒溫3小時(shí)，停機(jī)，密塞，開去真空，出箱，直接壓蓋，包裝，即得含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射用凍干粉針。
10、根據(jù)權(quán)利要求1、4、5、6、7、8、9所述的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑在治療腫瘤中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑，其特征在于以7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯為活性成分，其余成分為輔料，其原料質(zhì)量份配比為7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯1～100份，輔料1～10000份；用本發(fā)明方法制備的含有7，9-二羥基-15-羰基-16-貝殼杉烯-19，6-內(nèi)酯的注射劑質(zhì)量穩(wěn)定可控，服用方便，安全有效，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，產(chǎn)品外觀好，抗腫瘤療效顯著。
文檔編號(hào)A61K9/10GK101496800SQ20091003787
公開日2009年8月5日 申請(qǐng)日期2009年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月13日
發(fā)明者趙愛國(guó) 申請(qǐng)人:趙愛國(guó)