專利名稱：廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及廣東海風(fēng)藤多糖在制藥中的應(yīng)用，具體涉及廣東海風(fēng)藤多糖在 制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
廣東海風(fēng)藤為五味子科南五味子屬植物異型南五味子/zeterac/z'to (Roxb.)Cmib的干燥藤莖，臨床用于風(fēng)濕痹痛、關(guān)節(jié)不利、筋脈拘攣等癥的治 療?；瘜W(xué)成分研究表明，廣東海風(fēng)藤含有木脂素、三萜酸、多糖、揮發(fā)油等多 種有效成分，其中對(duì)于廣東海風(fēng)藤多糖的藥物用途未見報(bào)道。
目前，全世界老年癡呆(即阿爾茨海默病)患者已達(dá)到1800萬人，預(yù)計(jì) 未來25年內(nèi)老年癡呆患者將達(dá)到3400萬人，其中66%來自發(fā)展中國家。在 我國，60歲以上人群已超過總?cè)丝诘?0。％，并且仍在繼續(xù)快速增長。流行病 學(xué)調(diào)査顯示，60歲以上增長率為3.2%， 80歲以上增長率為5.4%。為此，中 國老齡委員會(huì)將"老年期癡呆早期診斷研究"列入了 1996—2000年國家"九 五"攻關(guān)課題；2000年"九七三"課題中有"衰老"的基礎(chǔ)研究；2001年開 始的"十五"攻關(guān)課題中確立了老年期癡呆的課題。國家"九五"攻關(guān)課題 研究發(fā)現(xiàn)，中國老年期癡呆的患病率與其他國家相近，60歲組約占5.22%， 且隨年齡增高而增高，每長5歲，發(fā)病率就增l倍。據(jù)此計(jì)算，我國60歲以 上老年癡呆患者應(yīng)超過500萬，相當(dāng)于世界總老年癡呆患者的四分之一。
老年癡呆患者已給家庭和社會(huì)造成沉重負(fù)擔(dān)。由于其病程5-10年，從記 憶減退、認(rèn)知障礙，到人格改變、生活不能自理，整個(gè)過程均耗資不菲。在美 國，治療老年癡呆所需的社會(huì)費(fèi)用已達(dá)到IOOO億美元，并且隨著患者認(rèn)知功 能的下降，看護(hù)費(fèi)用還在不斷增長。在我國，據(jù)北京市老齡協(xié)會(huì)的一份調(diào)査報(bào) 告， 一個(gè)家庭用于患重度老年癡呆癥、生活不能自理的老人的護(hù)理費(fèi)用， 一年 約為2萬元。因此，我國用于治療老年癡呆的費(fèi)用每年將不低于數(shù)百億元人民 幣。
但現(xiàn)有老年癡呆癥治療藥物的中遠(yuǎn)期效果不理想、毒副作用強(qiáng)、價(jià)格昂貴。而從中藥和天然藥物中尋找預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的有效成分制備藥物已 越來越成為精神神經(jīng)系統(tǒng)醫(yī)學(xué)家和藥物學(xué)家的共識(shí)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆 癥藥物中的應(yīng)用。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明對(duì)廣東海風(fēng)藤多糖預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥 的作用及機(jī)理方面進(jìn)行了全面而深入地研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)廣東海風(fēng)藤多糖具有神
經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用、對(duì)抗P-淀粉樣蛋白作用、膽堿酯酶抑制作用；即廣東海風(fēng)藤
多糖可在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中應(yīng)用。
上述應(yīng)用具體可以是提供一種具有預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥的藥物，
該藥物的活性成分包括廣東海風(fēng)藤多糖。
上述藥物的活性成分中還可包括治療和/或預(yù)防老年癡呆癥的公知藥物。 上述藥物可包括藥學(xué)上可接受的載體，如淀粉、糊精、氯化鈉、微晶纖
維素、山梨酸和/或甘露醇等。還可以按需選擇可藥用的輔劑、助劑等。
上述任何一種藥物的劑型可以是適合臨床使用的任何一種劑型，例如可 以是口服給藥的劑型，如片劑、膠囊、顆粒劑、口服液等；也可以是非口服給 藥的劑型，如注射劑、粉針劑等；還可以是局部給藥的劑型，如軟膏劑、栓劑等。
在本發(fā)明提供的應(yīng)用中，所述的廣東海風(fēng)藤多糖應(yīng)該是通過任何可行方法 從廣東海風(fēng)藤中獲得的一類多糖類物質(zhì)。其形式可以是一種水提取物或其他形 式的提取物；也可以是將廣東海風(fēng)藤多糖提取物經(jīng)任何方法降解制得的不同分 子量的產(chǎn)物。
優(yōu)選地，上述廣東海風(fēng)藤多糖提取物的分子組成中包括D-葡萄糖、D-阿 拉伯糖和D-半乳糖中的任一種或任意幾種。 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)
1、 安全性高，可長期服用。本發(fā)明經(jīng)過急性毒性和長期毒性試驗(yàn)，結(jié)果 表明廣東海風(fēng)藤多糖毒性低、有效劑量低，用量小，可長期服用。適用于老年 性癡呆癥患者的臨床用藥特點(diǎn)和要求。
2、 針對(duì)病因發(fā)揮作用。目前老年癡呆癥治療藥物效果不理想，其主要原 因?yàn)闆]有針對(duì)發(fā)病的根本原因發(fā)揮作用。研究表明與老年性癡呆發(fā)病有關(guān)的毒性蛋白——P-淀粉樣蛋白(amyloid-P protein, A|3)引起突觸、突起潰變，甚 至神經(jīng)元死亡，使神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)遭到破壞，導(dǎo)致大腦整合機(jī)能異常，其中包括多種 神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的改變，是引發(fā)老年癡呆癥的"源頭"，本發(fā)明將廣東海風(fēng)藤多 糖用于制備預(yù)防和/或治療老年癡呆癥的藥物，可以在"源頭"上阻止Ap的過 度產(chǎn)生，達(dá)到"治本效果"。同時(shí)還具有神經(jīng)營養(yǎng)作用，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞不受損 傷，從而達(dá)到預(yù)防老年癡呆癥發(fā)病的效果。


圖1是PBS對(duì)照組、ApL42組和A(3^+實(shí)施例1廣東海風(fēng)藤多糖組(終濃
度0.3125、 0.625、 1.25ng'mL'1)中存活細(xì)胞數(shù)量的變化； 與PBS組相比，*: P < 0.05, **:P< 0.01;
圖2是PBS對(duì)照組、ApL42組和APM2+實(shí)施例2廣東海風(fēng)藤多糖組(終濃
度0.3125、 0.625、 L25(ig'mL'1)中存活細(xì)胞數(shù)量的變化； 與PBS組相比，*: P < 0.05, **:P< 0.01;
圖3是PBS對(duì)照組、A卩M2+實(shí)施例2廣東海風(fēng)藤多糖組(終濃度0.3125、 0.625、 L25iig'mL"中)A卩M2的濃度變化； 與PBS組相比，*: P < 0.05， **:P< 0.01;
圖4是假手術(shù)組、AD模型組+蒸餾水、AD模型+石杉?jí)A甲組、^模型+ 低劑量廣東海風(fēng)藤多糖組、AD模型+中劑量廣東海風(fēng)藤多糖組、AD模型+高 劑量廣東海風(fēng)藤多糖組中小鼠在定位航行實(shí)驗(yàn)中的逃避潛伏期； 與模型組相比，*:P<0.05;
圖5是如圖4所述各實(shí)驗(yàn)組中小鼠在空間探索實(shí)驗(yàn)中在平臺(tái)所在象限的停 留時(shí)間；
與模型組相比，*:P<0.05;
圖6是如圖4所述各實(shí)驗(yàn)組中小鼠在空間探索實(shí)驗(yàn)中跨越原平臺(tái)位置的次
數(shù)；
與模型組相比，*:P<0.05;
圖7是如圖4所述各實(shí)驗(yàn)組中小鼠的皮質(zhì)AchE活性； 與模型組相比，*:P<0.05;
圖8是是如圖4所述各實(shí)驗(yàn)組中小鼠的皮質(zhì)ChAT活性；與模型組相比，*:P<0.05。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述，本發(fā)明的實(shí)施方式并不限于此。 實(shí)施例l
廣東海風(fēng)藤總多糖的制備取海風(fēng)藤藥材干燥，粉碎成細(xì)粉，95%乙醇回
流脫脂。脫脂后藥渣揮干溶劑，加水回流提取二次，合并提取液，濃縮。濃縮
液加入95%乙醇至終濃度為40%除淀粉，離心，上清液回收乙醇，濃縮液80% 醇沉，抽濾，沉淀以無水乙醇、丙酮、石油醚分次洗滌，低溫干燥得海風(fēng)藤粗 多糖。
實(shí)施例2
廣東海風(fēng)藤多糖P1的制備:將廣東海風(fēng)藤總多糖加蒸餾水溶解后以Sevag 法除蛋白，80°/。醇沉二次，沉淀用Sephadex G-IOO、 Sephadex G-80和S印hadex G-25凝膠柱分別洗脫，按峰收集流分，合并，凍干。得到廣東海風(fēng)藤多糖P1。
實(shí)施例3
廣東海風(fēng)藤多糖P2的制備將廣東海風(fēng)藤總多糖加蒸餾水溶解后用
100Kd超濾膜過濾，收集濾液，再以10Kd超濾離心管離心，收集上層液，凍 干，制得廣東海風(fēng)藤多糖P2。 實(shí)施例4
廣東海風(fēng)藤多糖膠囊的制備將廣東海風(fēng)藤多糖P2加水溶解后以糊精、 微晶纖維素為輔料制成顆粒，干燥，整粒后以膠囊填充劑填充，制成廣東海風(fēng) 藤多糖膠囊。
實(shí)施例5
廣東海風(fēng)藤多糖注射劑的制備將廣東海風(fēng)藤多糖P1加注射用水溶解后 以NaCl調(diào)節(jié)滲透壓，灌裝，溶封，滅菌，制成廣東海風(fēng)藤多糖注射劑。
通過以下試驗(yàn)實(shí)施例來說明廣東海風(fēng)藤多糖的藥理活性。 試驗(yàn)實(shí)施例1
廣東海風(fēng)藤多糖對(duì)Ap (p-amyloidp印tide,Ap)損傷嗜鉻細(xì)胞瘤株P(guān)C12 的保護(hù)作用
本實(shí)施例研究了廣東海風(fēng)藤多糖對(duì)AP損傷PC12細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用。材料PC12細(xì)胞購自中科院上海細(xì)胞庫；胎牛血清購自TBD公司； DMEM為Gibco公司產(chǎn)品；A卩l(xiāng)42購自Sigma公司，用0.0lmol'L" PBS(pH7.2) 配成溶液，濃度為lmg/ml，密封后置于37C。,孵育7天使之聚集。MTT (3-(4，5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)購自Sigma 公司，取MTT250mg溶解于O.Olmol丄-1 PBS(pH7.2)50mL中，制備成濃度為 5g-L"的MTT，用0.22(im微孔過濾器過濾除菌，4'C保存。
廣東海風(fēng)藤多糖樣品的配制:稱取廣東海風(fēng)藤多糖(如實(shí)施例1制備)0.5g， 溶于40mL的O.Olmol七-1 PBS,配成U.Smg'mL-1廣東海風(fēng)藤多糖母液。取 12.5mgTnU1的廣東海風(fēng)藤多糖100pL，加入PBS至終體積10mL，配制成高 劑量濃度0.125mg，mL/1的廣東海風(fēng)藤多糖原液。取0.125mg'mL'1的廣東海風(fēng) 藤多糖2mL，加入PBS至終體積4mL，配制成中劑量濃度0.625mg-mL—1的廣 東海風(fēng)藤多糖原液。取0.625mg，mL'1的廣東海風(fēng)藤多糖2mL，加入PBS到終 體積4mL，配制成低劑量濃度0. 3125mg，mL'1廣東海風(fēng)藤多糖原液，過濾除菌， (C保存。
細(xì)胞培養(yǎng)及給藥方法取對(duì)數(shù)生長期的PC12細(xì)胞，接種于96孔板中， 每孔細(xì)胞為8000個(gè)細(xì)胞，每孔加入含10%胎年DMEM培養(yǎng)液200)JL。分別設(shè) PBS對(duì)照組、A卩m2組和A卩m2+廣東海風(fēng)藤多糖組(終濃度0.3125、 0.625、 1.25ng.mL—1)，每組設(shè)8個(gè)復(fù)孔。
MTT領(lǐng)!l定給藥后24小時(shí)后，進(jìn)行MTT測定。每孔加入5g， L—i]V[TT溶 液20ji1。繼續(xù)培養(yǎng)4h。吸出培養(yǎng)液，加入DMSO200nL，混勻，振蕩10min， 使黑色結(jié)晶充分溶解。在酶標(biāo)儀(Biorad公司680型)上490nm波長測A490nm
值，以A49。^反映存活細(xì)胞數(shù)量及其功能狀態(tài)。
結(jié)果如圖1所示，廣東海風(fēng)藤多糖在三個(gè)濃度均能顯著對(duì)抗10^iMA(3m2 神經(jīng)毒性作用，提高PC12細(xì)胞的存活率。而且呈現(xiàn)劑量依賴性，即隨著廣東 海風(fēng)藤多糖濃度的增加，其存活率越高。PC12細(xì)胞為一種神經(jīng)源性細(xì)胞株， 與正常神經(jīng)元形態(tài)和生理功能相似，能較好的代表正常神經(jīng)元。而AP的神經(jīng) 毒性被公認(rèn)為阿爾茨海默病(Alzheimer s disease, AD)的發(fā)病原因。以上實(shí)驗(yàn)表 明廣東海風(fēng)藤多糖對(duì)AP損傷的PC12有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，廣東海風(fēng)藤多 糖可用于阿爾茨海默病(Alzheimer's disease， AD)的治療。試驗(yàn)實(shí)施例2
廣東海風(fēng)藤多糖轉(zhuǎn)AD癡呆基因細(xì)胞M146L分泌的Ap生成的抑制作用
本發(fā)明研究廣東海風(fēng)藤多糖轉(zhuǎn)AD癡呆基因細(xì)胞M146L分泌的Ap生成 的抑制作用。
材料M146L細(xì)胞株美國哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院張冀民教授贈(zèng)送。藥物及試 劑DMEM為Gibco公司產(chǎn)品；胎牛血清為杭州四季青生物制品公司產(chǎn)品； 0.25%胰酶購自Hydone公司。抗生素G418、 Puromycin均為Sigma公司產(chǎn)品； 人類Ap42測試試劑盒為IBL公司產(chǎn)品；MTT購自Sigma公司，取MTT250mg 溶解于O.Olmol丄'1 PBS(pH7.2)50mL中，制備成濃度為5g' U1的MTT，過濾 除菌，4"C保存。
廣東海風(fēng)藤多糖樣品的配制稱取廣東海風(fēng)藤多糖0.5g，溶于40mL的 0.01mol丄"PBS，配成12.5mg'mL"廣東海風(fēng)藤多糖母液。取12.5mg'mL"的廣 東海風(fēng)藤多糖100pL，加入PBS至終體積10mL，配制成高劑量濃度 0.125mg-mU1的廣東海風(fēng)藤多糖原液。取0.125mgTriL'1的廣東海風(fēng)藤多糖 2mL,加入PBS至終體積4mL，配制成中劑量濃度0.625mg'mL"的廣東海風(fēng) 藤多糖原液。取0.625mg，mL—1的廣東海風(fēng)藤多糖2mL，加入PBS到終體積4mL， 配制成低劑量濃度0.3125mg'mL"廣東海風(fēng)藤多糖原液，過濾除菌，4"C保存。
細(xì)胞培養(yǎng)及給藥方法取對(duì)數(shù)生長期的M146L細(xì)胞株，接種于96孔板中， 每孔細(xì)胞為8000個(gè)細(xì)胞，含15r。胎年DMEM培養(yǎng)。分別設(shè)PBS對(duì)照組、低、 中、高劑量(終濃度0.3125、 0.625、 1.25嗎'mL")廣東海風(fēng)藤多糖組，每組 設(shè)8個(gè)復(fù)孔。
MTT測定給藥后24小時(shí)后，進(jìn)行MTT測定。每孔加入L"MTT溶 液20nl。繼續(xù)培養(yǎng)4h。吸出培養(yǎng)液，加入DMSO200pL，混勻，振蕩10min， 使黑色結(jié)晶充分溶解。在酶標(biāo)儀(Biorad公司680型)上490nm波長測A490nm
值，以A49(to反映存活細(xì)胞數(shù)量及其功能狀態(tài)。
ELISA方法定量檢測A|342的含量給藥后24小時(shí)后，進(jìn)行ELISA測定。 每孔取lOOpL培養(yǎng)液，按ELISA試劑盒上所要求的方法測定A卩42含量。
結(jié)果MTT結(jié)果如圖2所示，低、中、高劑量的廣東海風(fēng)藤多糖對(duì)細(xì) 胞活性沒有影響，表明在此劑量下，廣東海風(fēng)藤多糖不具有細(xì)胞毒作用。ELISA 結(jié)果如圖3所示，低，中、高劑量的廣東海風(fēng)藤多糖可以明顯降低八|342的產(chǎn)量，特別是高劑量組抑制率超過50%,呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。AD重要的病 理標(biāo)志物為神經(jīng)元胞外的老年斑，而老年斑的核心成份為AP。現(xiàn)代研究證明 其與AD的發(fā)病有著密切關(guān)系，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為Ap的沉積是AD病理的始發(fā)因 素和中心環(huán)節(jié)。A卩的過度產(chǎn)生并聚集產(chǎn)生神經(jīng)毒性被公認(rèn)為阿爾茨海默病 (Alzheimer's disease, AD)的發(fā)病原因。本研究所用的M146L細(xì)胞株為人類阿爾 茨海默病APP及突變型PS1基因雙重轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞。以該細(xì)胞株能含有阿 爾茨海默病病人的突變型基因，在體外培養(yǎng)條件下能過度表達(dá)Ap42，因此， M146L細(xì)胞為一理想的AD治療藥細(xì)胞篩選模型。MTT結(jié)果表明低、中、高 劑量的廣東海風(fēng)藤多糖對(duì)細(xì)胞的生長代謝沒有影響，排除了廣東海風(fēng)藤多糖的 細(xì)胞毒作用。而ELISA結(jié)果則表明廣東海風(fēng)藤多糖能抑制M146L分泌的A卩， 可用于阿爾茨海默病(Alzheimer's disease, AD)的治療。
試驗(yàn)實(shí)施例3
廣東海風(fēng)藤多糖對(duì)AP損傷致癡呆鼠預(yù)防保護(hù)作用
材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年昆明種小鼠，清潔級(jí)，體重18~22g，雄雌各半，
廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)2007A006。標(biāo)準(zhǔn)鼠飼料飼養(yǎng)。藥 物及試劑A(3m2胸自Sigma公司，用O.Olmol七-1 PBS(pH7.2)配成溶液，濃度 為lmg/ml，密封后置于37C。,孵育7天使之聚集。陽性對(duì)照藥石杉?jí)A甲片購自 上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司。
廣東海風(fēng)藤多糖樣品的配制稱取廣東海風(fēng)藤多糖10g，溶于100mL的 0.9%的生理鹽水，配成100mgTiiL'1高劑量濃度廣東海風(fēng)藤多糖。取100mg'mL'1 的高劑量濃度廣東海風(fēng)藤多糖50mL，加入生理鹽水至終體積100mL，配制成 中劑量濃度50mg，mL—1的廣東海風(fēng)藤多糖原液。取50mg'mL'1的廣東海風(fēng)藤多 糖50mL，加入生理鹽水至終體積100mL，配制成低劑量濃度25mg'mU1的廣 東海風(fēng)藤多糖，過濾除菌，4'C保存。
AP損傷致癡呆鼠的制備及給藥方法成年昆明種小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后， 按體重隨機(jī)分成6組，每組20只，分為假手術(shù)組、AD模型組+蒸餾水、AD 模型+石杉?jí)A甲組、AD模型+低劑量廣東海風(fēng)藤多糖組、AD模型+中劑量廣東 海風(fēng)藤多糖組、AD模型+高劑量廣東海風(fēng)藤多糖組。除對(duì)照假手術(shù)組外，其 它各組均側(cè)腦室注射ApM2以制作AD癡呆鼠模型。小鼠戊巴比妥鈉麻醉小鼠(40mg/kg)，將小鼠固定在定位儀上，剪開頭頂部皮膚，酒精棉擦拭，暴露出前囟。采用右側(cè)腦室定位，自前囟向后1.8mm，矢狀縫旁開1.5mm處，即為側(cè)腦室的體表部位。用微量注射器在此位置穿一小孔，深度為顱骨表面向下3mm處，毎只小鼠注射4^i1APl42，注射時(shí)間5min，留針5min。假手術(shù)組為注射等體積的無菌生理鹽水。所有操作均在無菌條件下進(jìn)行，拔針后用沾有75%酒精棉球消毒手術(shù)部位，縫合頭皮。造模手術(shù)完成后后1周開始給藥組小鼠分別灌胃相應(yīng)劑量的廣東海風(fēng)藤多糖或石杉?jí)A甲，連續(xù)4周。
小鼠學(xué)習(xí)記憶力檢測采用Morris水迷宮方法。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)共測試5d。前5d進(jìn)行定位航行實(shí)驗(yàn)，5d下午撤去平臺(tái)，進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)。定位航行實(shí)驗(yàn)(place navigation): Morris水迷宮為直徑100cm，高50cm的圓形黑
色水池，水深30cm，池水中加入適量墨汁染黑。水溫維持24t:士rc。池壁標(biāo)
記4個(gè)入水點(diǎn)(E、 S、 W、 N )，在ES象限中央、距池壁30cm處放置一平臺(tái)，高29cm (低于水平面lcm)，直徑8cm。小鼠分別從E、 S、 W、 N4個(gè)入水點(diǎn)面向池壁放入水中，記錄小鼠從入水至找到并爬上平臺(tái)的時(shí)間，即逃避潛伏期(escape latency)。小鼠被允許在平臺(tái)停留15s。 60s未找到平臺(tái)的動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)者將其引上平臺(tái)，潛伏期記錄為60s，在平臺(tái)上停留15s。測試過程保持室內(nèi)安靜，周圍實(shí)驗(yàn)人員及物體位置固定不變。空間探索實(shí)驗(yàn)(spatialprobe):定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后撤除平臺(tái)，選擇一入水點(diǎn)將小鼠放入水中，測定60s內(nèi)小鼠平臺(tái)所在象限停留時(shí)間和跨越原平臺(tái)位置的次數(shù)。
小鼠皮質(zhì)乙酰膽堿酯酶(AchE)和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(ChAT)活性的測定學(xué)習(xí)記憶力測試結(jié)束后，小鼠斷頭取腦，于冰浴中迅速剝離海馬，分離得到皮質(zhì)，以預(yù)冷的生理鹽水制成10%的組織勻漿。按照試劑盒說明書方法，測定皮質(zhì)中乙酰膽堿酯酶和乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的活性。
結(jié)果小鼠學(xué)習(xí)記憶力檢測結(jié)果如圖4、 5、 6所示，模型組與假手術(shù)組
相比，小鼠找到平臺(tái)的潛伏期明顯延長(尸<0.05)，平臺(tái)所在象限停留時(shí)間及穿臺(tái)次數(shù)明顯減少，說明APM2側(cè)腦室注射致小鼠學(xué)習(xí)記憶力減退，癡呆模型建立成功。低、中、高劑量的廣東海風(fēng)藤多糖組與模型組相比，潛伏期縮短(尸<0.05)，平臺(tái)所在象限停留時(shí)間及穿臺(tái)次數(shù)增加(尸<0.05)，說明廣東海風(fēng)藤多糖能改善癡呆鼠的學(xué)習(xí)記憶力。小鼠皮質(zhì)AcliE和ChAT活性的測定結(jié)果如圖7、 8所示，在皮質(zhì)中，與模型組相比，低、中、高劑量的廣東海風(fēng)藤多糖組，能明顯提高癡呆鼠中乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶的活性，抑制癡呆鼠中乙酰膽堿酯酶的活性，達(dá)到減少乙酰膽堿的分解，從而提高皮質(zhì)內(nèi)乙酰膽堿的含量。乙酰膽堿酯酶及乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶分別是乙酰膽堿的分解酶和合成酶，兩者共同調(diào)節(jié)
腦內(nèi)乙酰膽堿的含量。而乙酰膽堿的濃度與學(xué)習(xí)記憶力密切相關(guān)，AD患者腦
的乙酰膽堿含量減低。這是廣東海風(fēng)藤多糖提高癡呆鼠學(xué)習(xí)記憶能力的機(jī)制之
一，表明廣東海風(fēng)藤多糖能用于AD的預(yù)防和/或治療。
上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1、廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆 癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物的活性成分包括所述廣東海風(fēng)藤多 糖。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物的活性成分還包括公知的預(yù)防和/或 治療老年性癡呆癥的藥物。
4、 根據(jù)權(quán)利要求2或3中所述的廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年 性癡呆癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的廣東海風(fēng)藤多糖是從廣東海風(fēng)藤中提取 分離得到的。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的廣東海風(fēng)藤多糖提取物的組份中包括D-葡萄糖、D-阿拉伯糖和D-半乳糖中的任一種或任意幾種。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆 癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物的劑型為注射劑、口服制劑或局部給藥制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明公開了廣東海風(fēng)藤多糖在制備預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的應(yīng)用。廣東海風(fēng)藤多糖是從植物廣東海風(fēng)藤Kadsura heteroclita(Roxb.)Craib中提取分離得到的。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于發(fā)掘了廣東海風(fēng)藤多糖在預(yù)防和/或治療老年性癡呆癥藥物中的用途，安全性高，療效顯著，可長期限服用；原料來源豐富、價(jià)廉并可制成各種劑型。
文檔編號(hào)A61K31/715GK101642465SQ20091004156
公開日2010年2月10日 申請(qǐng)日期2009年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月31日
發(fā)明者李曉光, 羅煥敏, 飛 肖 申請(qǐng)人:暨南大學(xué)