專利名稱：N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物、其藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物、其藥物組合物及其制備方法和用途。這些化合物可抑制病毒表面神經(jīng)氨酸酶，因而可應(yīng)用于相關(guān)疾病的治療。

背景技術(shù)：
神經(jīng)氨酸酶存在于許多流感病毒、副流感病毒、流行性腮腺炎病毒等病毒粒子的表面。
由于其能催化末端神經(jīng)氨酸與相鄰糖基間的α-酮苷鍵裂解，使受體破壞，病毒體得以游離，從而加重感染癥狀。因此，通過(guò)抑制神經(jīng)氨酸酶的活性，能阻滯子代病毒脫離感染細(xì)胞的表面，從而防止繼發(fā)性感染。所以，一般認(rèn)為具有抑制神經(jīng)氨酸酶活性的物質(zhì)可用于治療或預(yù)防流感。
大多數(shù)已知的神經(jīng)氨酸酶抑制劑是神經(jīng)氨酸的類似物，如2-脫氧-2，3-二脫氫-N-乙酰神經(jīng)氨酸(DANA)和它的衍生物。國(guó)際專利申請(qǐng)WO91/16320中描述了一系列DANA的衍生物，它們?cè)隗w內(nèi)和體外都對(duì)神經(jīng)氨酸酶具有一定的抑制活性。其它DANA衍生物公開(kāi)于WO98/06712、WO97/06157、WO01/81331等國(guó)際專利中請(qǐng)中。扎那米韋就是第一個(gè)上市的神經(jīng)氨酸酶抑制劑，然而，由于該化合物極性很大，其口服生物利用度很低(2-3％)，不能口服給藥，需要制成噴霧劑，通過(guò)鼻腔吸入式給藥，給患者用藥帶來(lái)極大不便，也增加了制劑的生產(chǎn)成本。另一方面，流感病毒對(duì)已上市藥物例如扎那米韋、奧司它韋等易產(chǎn)生耐藥性。
因此，尋找新的活性化合物進(jìn)而開(kāi)發(fā)出新的抗流感病毒藥物已迫在眉睫。在尋找新的對(duì)流感病毒有抑制作用的活性化合物的過(guò)程中，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一類結(jié)構(gòu)新穎的具有明顯的抗流感病毒活性的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物。


發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的主要目的是提供一類新型的抑制病毒、特別是抑制流感病毒的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物。
本發(fā)明的再一目的是提供該N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物的制備方法。
本發(fā)明的還一目的是提供一種有效抑制神經(jīng)氨酸酶的抗病毒藥物組合物。
本發(fā)明的又一目的是提供上述N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物和藥物組合物的用途，所述N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物和其藥物組合物能有效地抑制神經(jīng)氨酸酶，因而是神經(jīng)氨酸酶抑制劑，可應(yīng)用于相關(guān)的病毒性疾病及其感染的治療。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明提供如下通式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物
其中 R1代表OR5、SR5、NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6； R2代表H、C1-20烷基、C1-5烷氧基取代的C1-5烷基、COR5或CONR5R6； R3代表N3、NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10、N＝PPh3或
R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6； R5代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、五氟苯基、芳基、CONR14R15、COOR14、COR14或被一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)取代的C1-10烷基NR14R15、NR14COR15、CO2R14、OR14、C3-8環(huán)烷基和芳基； R6代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、芳基、COR14或被一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)取代的C1-10烷基NR14R14、COR14、C3-8環(huán)烷基、CN、N3、OR14和芳基； 或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以是飽和或非飽和的，并可以含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)還可以非必需地被鹵素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、CF3、CN或NO2取代； R7和R8各自獨(dú)立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烴鏈，該烴鏈中非必需地含有一個(gè)NR11基團(tuán)，該烴鏈非必需地被1～4個(gè)選自氧代基(羰基)和C1-6烷基的基團(tuán)所取代，而該C1-6烷基非必需地被羥基或芳基取代； R9和R10各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、NR14R15、OR14、CN或NO2； R11和R12各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷氧基、COOR5、CONR14R15或芳基；或者非必需地被羥基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基； R14和R15各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基或芳基； 其中，所述芳基是指芳香族的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，且非必需地被取代。當(dāng)所述芳基被取代時(shí)，合適的取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵素、硝基、三氟甲基、氨基、C1-4烷基取代的氨基、苯基和苯甲基。合適的是，所述芳基被1～3個(gè)上述取代基取代。
本文中，烷基包括直鏈或支鏈的飽和的烴基。
本文中，烯基是指直鏈或支鏈的、含有一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵的烴基。
本文中，炔基是指直鏈或支鏈的、含有一個(gè)或多個(gè)碳-碳三鍵的烴基。
在上述定義中，通式(I)的化合物可含有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可存在立體異構(gòu)體，即對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體，或其混合物。本發(fā)明的化合物可以為通式(I)化合物的單個(gè)立體異構(gòu)體或各立體異構(gòu)體的混合物?？赏ㄟ^(guò)常規(guī)技術(shù)將非對(duì)映異構(gòu)體分離，例如，將通式(I)化合物或其適宜的鹽或其衍生物的非對(duì)映異構(gòu)體混合物通過(guò)分步結(jié)晶或色譜(包括HPLC)進(jìn)行分離。也可由相應(yīng)的光學(xué)純的中間體制備或通過(guò)拆分制備通式(I)的單一對(duì)映體，拆分時(shí)可用手性柱分離，或者通過(guò)與光學(xué)活性的酸或堿反應(yīng)形成的非對(duì)映異構(gòu)體鹽分步結(jié)晶。
本發(fā)明通式(I)所示化合物的藥學(xué)上可接受的鹽是指，按照化學(xué)上常規(guī)成鹽的方法，通式(I)所示化合物與合適的酸或堿形成的鹽，例如合適的酸的例子包括氫氯酸、氫溴酸、硫酸、高氯酸、富馬酸、馬來(lái)酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、對(duì)甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸和苯磺酸，其它的酸如草酸，雖然本身不是藥物上可接受的，但可用于制備作為中間體的鹽，所述中間體用于制備本發(fā)明化合物及其藥物上可接受的酸加成鹽；與堿形成的鹽，例如通式(I)所示化合物的堿金屬(如鈉)、堿土金屬(如鎂)、銨或NR4+(其中R為C1-4烷基)的鹽。
優(yōu)選地，式(I)化合物中 R1代表OR5、NR5R6或N(OR5)R6； R2代表H、COR5或CONR5R6； R3代表NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10或

其為α構(gòu)型； R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6； R5和R6各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基或芳基；或者被OR14、C3-8環(huán)烷基或芳基取代的C1-10烷基； 或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以是飽和或非飽和的，并可以含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)還可以非必需地被鹵素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代； R7和R8各自獨(dú)立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烴鏈，該烴鏈中非必需地含有一個(gè)NR11基團(tuán)，該烴鏈非必需地被1～4個(gè)選自氧代基(羰基)和C1-6烷基的基團(tuán)所取代，而該C1-6烷基非必需地被羥基或芳基取代； R9和R10各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、NR14R15、OR14、CN或NO2； R11和R12各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、COOR5或芳基；或者非必需地被羥基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基； R14和R15各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基或芳基； 其中，所述芳基的定義同上。
更優(yōu)選地，式(I)化合物中 R1代表NR5R6或N(OR5)R6； R2代表H或COR5； R3為α構(gòu)型； R3代表NR7R8或NHC(＝NR9)NR5R10； R4代表COOR5或CON(OR5)R6； R5和R6各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以是飽和或非飽和的，并可以含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)還可以非必需地被C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代； R7和R8各自獨(dú)立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烴鏈，該烴鏈中非必需地含有一個(gè)NR11基團(tuán)，該烴鏈非必需地被1或2個(gè)選自氧代基(羰基)和C1-6烷基的基團(tuán)所取代，而該C1-6烷基非必需地被羥基或芳基取代，所述芳基包括苯基、萘基、吡啶基、咪唑基和噻吩基，且非必需地被取代；當(dāng)所述芳基被取代時(shí)，所述取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、苯基和苯甲基；并且所述被取代的芳基帶有1～3個(gè)上述取代基； R9和R10各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、NH2、OH、CN或NO2； R11和R12各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基或COOR5。
再進(jìn)一步優(yōu)選的化合物如下式(I)所示 R1代表NR5R6； R2代表H； R3代表NH2或NHC(＝NH)NH2，其為α構(gòu)型； R4代表COOR5； R5和R6各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以是飽和或非飽和的，并可以含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)還可以非必需地被C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代。
本發(fā)明特別優(yōu)選的具體化合物包括 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例22化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例23化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例24化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例25化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯(實(shí)施例27化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例28化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例30化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例31化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯(實(shí)施例32化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯(實(shí)施例34化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例35化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例36化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例37化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例42化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-異丙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例43化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-羥胺基-2’-氧乙基}-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例44化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)己胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例45化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)己基胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例47化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例48化合物)、和 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-異丙胺胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(實(shí)施例49化合物)。
本發(fā)明進(jìn)一步特別優(yōu)選的具體化合物包括 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、 (2R，3R，4s)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、和 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供通式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物的制備方法，該方法包括下述方法的任何一種 (1)當(dāng)通式(I)化合物中R1為OH，R2不為H，R3為N3，R4為COOR5，且R5不為H時(shí)，即通式(Ia)化合物，可以通過(guò)通式(II)化合物(Carbohydrate Research，2008，343，14，2459-2462.)氧化裂解來(lái)制備，如果需要，隨后進(jìn)行脫保護(hù)，通式(II)化合物的R2和R4取代基定義同通式(I)化合物
氧化裂解適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)兩步完成。適當(dāng)?shù)氖堑谝徊讲捎酶叩馑猁}完成，如用高碘酸鈉，適當(dāng)?shù)厥窃诤线m溶劑中完成，如含水有機(jī)溶劑，例如含水甲醇。用于氧化裂解第二步的合適試劑可以是亞氯酸鹽，如亞氯酸鈉，適當(dāng)?shù)厥谴嬖谟芯彌_劑，如堿金屬或堿土金屬磷酸鹽，如磷酸二氫鉀，并且在含水有機(jī)溶劑中，如醇和烴的含水混合物，例如叔丁醇和環(huán)己烯的含水混合物。
(2)當(dāng)通式(I)化合物中R1為OR5或SR5時(shí)，即通式(Ic)化合物，可以通過(guò)相應(yīng)的通式(Ib)化合物(通式(I)化合物中的R1代表OH)與被R5取代的含氧或含硫化合物通過(guò)縮合反應(yīng)來(lái)制備
(3)當(dāng)通式(I)化合物中R1為NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6時(shí)，即通式(Id)化合物，可以通過(guò)相應(yīng)的通式(Ib)化合物(通式(I)化合物中的R1代表OH)與-R5R6、-(OR5)R6或-(NR5R6)R6取代的含氮化合物反應(yīng)來(lái)制備。合適的是，羧基在與胺反應(yīng)之前被活化。適當(dāng)?shù)幕罨椒▽?duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是清楚的，并包括例如轉(zhuǎn)化成五氟苯氧基。胺化反應(yīng)可以方便地在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中完成，如在醚中，例如在THF中。

(4)當(dāng)通式(I)化合物中R3為

時(shí)，即通式(If)化合物，可以通過(guò)相應(yīng)的通式(Ie)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3)與被R11和R12取代的炔類化合物反應(yīng)來(lái)制備。合適的是，制備需要在催化劑催化下進(jìn)行。適當(dāng)?shù)拇呋椒▽?duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是清楚的，如亞銅離子催化。

(5)當(dāng)通式(I)化合物中R3為NH2時(shí)，即通式(Ig)化合物，可以通過(guò)相應(yīng)的通式(Ie)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3)通過(guò)疊氮基的還原反應(yīng)來(lái)制備
可以采用任何已知的將疊氮化合物轉(zhuǎn)變成胺的方法完成還原反應(yīng)。適當(dāng)?shù)姆椒枋鲈谝韵聦?shí)施例中，以及例如國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)WO93/12105和WO95/00503中均有描述。合適的是，使用Lindlar催化劑催化，氫氣或甲酸等可以提供活性氫的化合物還原完成反應(yīng)。
(6)當(dāng)通式(I)化合物中R3為NR7R8時(shí)，即通式(Ih)化合物，可以從通式(Ig)化合物(通式(I)化合物中的R3為NH2)通過(guò)與被R7和R8取代的化合物反應(yīng)來(lái)制備，例如用含R7和R8取代基的鹵化物、酸酐、酰鹵衍生物等經(jīng)常規(guī)的N官能團(tuán)化反應(yīng)來(lái)制備，但不限于此。適當(dāng)?shù)闹苽浞椒▽?duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是清楚的。

(7)當(dāng)通式(I)化合物中R3為NHC(＝NR14)NR15R16時(shí)，即通式(Ii)化合物，可以從通式(Ih)化合物(通式(I)化合物中的R3為NR7R8)通過(guò)胍基化反應(yīng)來(lái)制備。適當(dāng)?shù)囊腚一捌溲苌锏姆椒▽?duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是清楚的。尤其是當(dāng)通式(I)化合物中R3為NHC(＝NH)NH2時(shí)，即通式(Ik)化合物，例如通過(guò)通式(Ig)化合物(通式(I)化合物中的R3為NH2)與脒基吡唑或其鹽或衍生物(優(yōu)選脒基吡唑)反應(yīng)或經(jīng)過(guò)中間體式(Ij)化合物(通式(I)化合物中的R3為NHCN)來(lái)制備。
(8)當(dāng)通式(I)化合物中R3代表N3，R4為CONR5R6時(shí)，即通式(Im)化合物，可以通過(guò)相應(yīng)的通式(Il)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3，R4為COOR5，且R5不為H)與羥胺或其衍生物的堿式鹽反應(yīng)得到。適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)化方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是清楚的，并包括例如用NH2OH/KOH。

(9)通式(Ih)化合物(其中R3為NR7R8)或通式(Ii)化合物(其中R3為NHC(＝NR14)NR15R16)還可以從通式(Im)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3，R4為CONR5R6)通過(guò)與上述方法(5)類似的疊氮基還原方法還原，然后進(jìn)一步反應(yīng)來(lái)制備。適當(dāng)?shù)闹苽浞椒▽?duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是清楚的。
(10)通過(guò)通式(I)的不同化合物之間的官能團(tuán)相互轉(zhuǎn)化可以制備通式(I)的其它化合物。例如，其中R2為H的化合物可以通過(guò)不為H的化合物來(lái)制備；R7和R8不為H的化合物可以通過(guò)相應(yīng)的R7和/或R8為H的化合物來(lái)制備；R4為COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6的化合物可以與R4為COOH的化合物相互轉(zhuǎn)化。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，為了防止副反應(yīng)，在上述方法的任何階段可能需要保護(hù)分子中的一個(gè)或多個(gè)敏感基團(tuán)；在反應(yīng)序列的任一適當(dāng)?shù)暮罄^階段可以將保護(hù)性基團(tuán)除去。
用于制備通式(I)化合物的保護(hù)性基團(tuán)可以使用傳統(tǒng)方法。例如參見(jiàn)“Greene’s protectivegroups in organic synthesis”，Peter G M.Wuts和Theodora W.Greene(A John Wiley & Sons，Inc.，2007)。
傳統(tǒng)的氨基保護(hù)基團(tuán)可以包括例如芳烷基，如芐基、二苯基甲基或三苯基甲基；和?；?，如N-芐氧基羰基或叔丁氧基羰基。
羥基可以被以下基團(tuán)保護(hù)如芳烷基，如芐基、二苯基甲基或三苯基甲基；?；缫阴；?；硅保護(hù)性基團(tuán)，如三甲基甲硅烷基，或者作為四氫呋喃衍生物。
羧酸基可以適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)成為甲酯或二苯基甲酯。
可用傳統(tǒng)方法除去存在的任何保護(hù)性基團(tuán)。
當(dāng)需要以鹽，例如酸加成鹽的形式分離出本發(fā)明化合物時(shí)，這可以通過(guò)用適當(dāng)?shù)乃?優(yōu)選使用等當(dāng)量的酸)處理通式(I)的游離堿來(lái)完成。
根據(jù)本發(fā)明的又一方面，本發(fā)明的藥物組合物含有治療有效量的一種或多種上述通式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物，以及一種或多種可藥用載體或稀釋劑。
根據(jù)本發(fā)明的再一方面，通式(I)化合物可以作為前藥形式應(yīng)用，從而提高生物利用度或改善該類化合物的理化性質(zhì)。例如通式(I)化合物中R4代表COOR5(R5不為H)的化合物也可以作為R4代表COOH的化合物的前藥形式?；衔锏臉O性降低，有利于患者口服給藥。
本發(fā)明的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物和其藥物組合物能有效地抑制神經(jīng)氨酸酶，因而可應(yīng)用于相關(guān)疾病的治療。

具體實(shí)施例方式 下列實(shí)施例進(jìn)一步解釋了本發(fā)明的化合物及其中間體的合成，但并不限制本發(fā)明的范圍。
1H NMR在Mercury-400核磁共振波譜儀(Varian公司)上完成，1H NMR的觀測(cè)頻率為300MHz或400MHz。常規(guī)縮寫如下s，單峰；d，雙峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰。質(zhì)譜測(cè)定在MAT-95型質(zhì)譜儀(Thermo Finnigan公司)上完成，電離方式EI 70V，源溫200℃，LR分辨率1000。高分辨質(zhì)譜由Finnigan MAT，Bruker Daltonics FTMS-7型儀器測(cè)定。
實(shí)施例1 (S)-[(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-4-疊氮基-6-(甲氧羰基-3，4-二氫吡喃-2’]-2-乙酰氧基乙酸
7-O-乙?；?N-乙酰基-2，4-二脫氧-2，3-脫氫-4α-疊氮基-D-神經(jīng)氨酸甲酯(1.6g，4.3mmol)(Carbohydrate Research，2008，343，12，2459-2462.)溶于CH3OH和H2O(48mL和16mL)的混合溶液中，加入NaIO4(1.84g，8.6mmol，2.0eq.)，室溫?cái)嚢?0min后，過(guò)濾，減壓濃縮得白色固體。將白色固體溶于t-BuOH(27mL)中，加入環(huán)己烯(2.7mL，)，然后再向體系中加入NaClO2(2.87g，)、KH2PO4(2.87g，)的水(18.5mL)溶液。溶液由無(wú)色變?yōu)槊髁恋某赛S色，室溫?cái)嚢?h后，停止反應(yīng)。向反應(yīng)溶液中加入乙酸乙酯(50mL)和H2O(100mL)，分液，棄去乙酸乙酯層，水層用6M HCl溶液調(diào)節(jié)pH＝1～2后，用乙酸乙酯提取(75mL×5)，合并有機(jī)相，無(wú)水MgSO4干燥后，過(guò)濾，減壓濃縮得白色固體的標(biāo)題化合物1.765g，產(chǎn)率100％。
1H NMR(300MHz，DMSO)δ8.19(1H，d，J＝9.3Hz，NH)，5.89(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，5.22(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.56(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.9Hz，6-H)，4.43(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝9.4Hz，4-H)，4.07(1H，d，J＝10.5Hz，5-H)，3.71(3H，s，CH3)，2.05(3H，s，OAc)，1.79(3H，s，NAc)；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C13H16N4O8[M+H]+357.1.測(cè)定值356.3。
實(shí)施例2 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-五氟苯氧基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例1 化合物(855mg，2.4mmol)溶于DMF(8mL)中，再加入吡啶(0.2mL，2.5mmol，1.1eq.)和CF3COOC6F5(1.11mL，0.63g/mL，2.5mmol，1.1eq.)，室溫?cái)嚢?h后，停止反應(yīng)。向反應(yīng)液中加入乙酸乙酯(32mL)，依次用1M HCl(30mL×3)、飽和NaHCO3(30mL×3)、飽和NaCl溶液(30mL×1)洗，無(wú)水MgSO4干燥后，過(guò)濾，減壓濃縮至恰好有固體析出，滴加石油醚使結(jié)晶得標(biāo)題化合物523mg，產(chǎn)率42％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.05(1H，d，J＝2.6Hz，3-H)，5.78(1H，d，J＝2.7Hz，7-H)，5.61(1H，d，J＝8.7Hz，NH)，4.99(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝10.4Hz，6-H)，4.47(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.2Hz，4-H)，4.09(1H，dd，J＝9.1Hz，J＝19.0Hz，5-H)，3.81(3H，s，CH3)，2.27(3H，s，OAc)，2.06(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝544.9。
實(shí)施例3 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1，-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例1 化合物(35mg，0.1mmol)和1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亞胺(EDCI)(21mg，0.11mmol)溶解于THF(0.5mL)中，冰水冷卻條件下加入1-羥基苯并三唑(HOBt)(15mg，0.11mmol)，室溫?cái)嚢?0min后，加入甲胺的水溶液(12μL，0.11mmol)，2.5h后TLC顯示反應(yīng)完全，停止反應(yīng)。減壓濃縮至干，柱層析分離(CH2Cl2∶CH3OH＝60∶1(v/v))得白色固體的標(biāo)題化合物27mg，產(chǎn)率75％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.26(1H，d，J＝8.9Hz，NHCO)，6.49(1H，d，J＝4.7Hz，NH)，5.91(1H，d，J＝2.2Hz，3-H)，5.40(1H，d，J＝1.7Hz，7-H)，4.49(1H，dd，J＝1.8Hz，J＝8.7Hz，6-H)，4.35(1H，dd，J＝9.4Hz，J＝9.8Hz，5-H)，4.26(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.7Hz，4-H)，3.77(3H，s，CH3)，2.87(1H，d，NHCH3)，2.22(3H，s，OAc)，1.97(3H，s，NAc)；13C NMR(400MHz，CDCl3)20.82(OCOCH3)，23.00(NHCOCH3)，26.26(NHCH3)，48.45(C-5)，52.53(OCH3)，58.80(C-4)，70.59(C-7)，77.32(C-6)，108.34(C-3)，144.70(C-2)，161.47(COO)，168.90(C＝O)，169.84(C＝O)，170.61(C＝O)。
實(shí)施例4 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例3相同的方法，采用乙胺代替甲胺來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率67％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.53(1H，d，J＝9.4Hz，NH)，6.32(1H，m，NH)，5.95(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，5.42(1H，d，J＝1.9Hz，7-H)，4.53(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.4Hz，6-H)，4.33(1H，dd，J＝9.4Hz，J＝19.1Hz，5-H)，4.25(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.9Hz，4-H)，3.78(3H，s，CH3)，3.49(1H，m，CH)，3.22(1H，m，CH)，2.24(3H，s，OAc)，1.98(3H，s，NAc)，1.20(3H，t，J＝7.1Hz，CH3)；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C15H22N5O7[M+H]+384.1519，測(cè)定值384.1535。
實(shí)施例5 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例2 化合物(369mg，0.73mmol)溶于THF(15mL)中，慢慢加入氨甲醇(0.2mL，0.87mmol，1.2eq.)，室溫?cái)嚢?0min后，停止反應(yīng)。減壓濃縮后，柱層析分離(EtOAc∶石油醚＝1∶1(v/v))得標(biāo)題化合物206mg，產(chǎn)率80％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.59(1H，s，NH)，6.49(1H，s，NH)，6.06(1H，d，J＝6.6Hz，NH)，5.96(1H，s，3-H)，5.44(1H，s，7-H)，4.56(1H，d，J＝5.1Hz，6-H)，4.28(1H，s，4-H and5-H)，3.79(3H，s，CH3)，2.23(3H，s，OAc)，1.98(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝378.0。
實(shí)施例6 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例5相同的方法，采用二甲基胺代替氨甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率86％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.24(1H，d，J＝6.8Hz，NH)，6.05(1H，d，J＝3.6Hz，7-H)，5.87(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，4.74(1H，t，J＝6.5Hz，4-H)，4.58(1H，dd，J＝3.7Hz，J＝6.3Hz，6-H)，4.12(1H，dd，J＝7.1Hz，J＝14.4Hz，5-H)，3.81(3H，s，CH3)，3.13(3H，s，CH3)，2.99(3H，s，CH3)，2.15(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C15H22N5O7[M+H]+384.1519；測(cè)定值384.1527。
實(shí)施例7 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例5相同的方法，采用二乙基胺代替氨甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率90％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.29(1H，d，J＝7.5Hz，NH)，6.05(1H，d，J＝3.6Hz，3-H)，5.87(1H，d，J＝6.3Hz，7-H)，4.75(1H，t，J＝6.3Hz，6-H)，4.56(1H，dd，J＝3.6Hz，J＝6.3Hz，4-H)，4.03(1H，dt，J＝6.9Hz，J＝13.8Hz，5-H)，3.80(3H，s，CH3)，3.37(4H，m，2CH2)，2.15(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)，1.15(6H，m，2CH3)；LRMS(EI)m/z[M+H]+＝412.0。
實(shí)施例8 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-羥胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例2 化合物(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-五氟苯氧基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯(200mg，0.04mmol)溶于THF(5mL)中，加入鹽酸羥胺(30mg，0.043mmol，1.1eq.)和二異丙基乙胺(DIPEA)(7.5μL，0.043mmol，1.1eq.)，室溫?cái)嚢?0min后，停止反應(yīng)。減壓濃縮后，柱層析分離(EtOAc)得標(biāo)題化合物131mg，產(chǎn)率92％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ6.20(1H，d，J＝2.8Hz，3-H)，5.57(1H，d，J＝2.2Hz，7-H)，4.66(1H，t，J＝2.1Hz，J＝10.5Hz，6-H)，4.51(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.6Hz，4-H)，4.29(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，3.89(3H，s，CH3)，2.28(3H，s，OAc)，2.09(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝478.1。
實(shí)施例9 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例5相同的方法，采用環(huán)戊胺代替氨甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率98％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.78(1H，d，J＝8.3Hz，NH)，5.99(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，5.56(1H，d，J＝4.4Hz，7-H)，4.66(1H，dd，J＝4.8Hz，J＝9.1Hz，6-H)，4.56(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.8Hz，4-H)，4.11(1H，dt，J＝8.5Hz，J＝16.5Hz，5-H)，3.69(4H，m，2CH2)，3.79(3H，s，CH3)，2.16(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)，1.92(4H，m，2CH2)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝410.0。
實(shí)施例10 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-疊氮基-N-羥基-3，4-二氫吡喃-6-甲酰胺
將實(shí)施例6 化合物(100mg，0.26mmol)溶解于CH3OH(5mL)中，加入NH2OH/KOH/CH3OH溶液(1.0mL，0.72mmol)，室溫?cái)嚢?0min后，TLC顯示反應(yīng)完全，加入冰醋酸調(diào)節(jié)體系pH＝6.5。得標(biāo)題化合物反應(yīng)液，可不經(jīng)處理，直接用于下步反應(yīng)。
HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C12H18N6O6Na[M+Na]+365.1186，測(cè)定值365.1181。
實(shí)施例11 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-N-羥基-3，4-二氫吡喃-6-甲酰胺
向?qū)嵤├?0的反應(yīng)溶液中加入Lindlar(10mg)催化劑，室溫常壓氫化反應(yīng)48h后，TLC顯示反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，向反應(yīng)體系加入冰醋酸調(diào)節(jié)體系pH＝6.5。用硅藻土過(guò)濾后，反相硅膠柱層析分離得標(biāo)題化合物16mg，產(chǎn)率20％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.76(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，4.56(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝9.8Hz，6-H)，4.37(1H，t，J＝9.5Hz，5-H)，4.31(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝9.6Hz，4-H)，3.14(3H，s，CH3)，3.05(3H，s，CH3)，2.15(3H，s，NAc)；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C12H20N4O6Na[M+Na]+339.1281，測(cè)定值339.1266。
實(shí)施例12 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羥甲基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例3 化合物(60mg，0.16mmol)溶于乙醇水溶液(0.5mL)，加入丙炔醇(11μL，0.16mmol)，再加入新配制的抗壞血酸鈉鹽(0.38mL，30％mmol，25mg/mL)、五水硫酸銅水溶液(0.21mL，5％mmol，0.4mg/mL)，避光條件下，室溫?cái)嚢?8h，減壓蒸除溶劑。以乙酸乙酯甲醇＝25∶1(v/v)為洗脫劑，柱層析分離得標(biāo)題化合物(48mg，70％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(1H，s，CH)，7.44(1H，d，J＝9.2Hz，NH)，6.42(1H，d，J＝4.1Hz，NH)，6.03(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，5.71(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝10.6Hz，4-H)，5.61(1H，s，7-H)，4.85(1H，d，J＝1.3Hz，J＝10.7Hz，6-H)，4.77(2H，s，CH2)，4.56(1H，dt，J＝10.5Hz，J＝20.1Hz，5-H)，3.79(3H，s，CH3)，2.91(3H，d，J＝4.8Hz，CH3)，2.18(3H，s，OAc)，1.80(3H，s，NHAc)；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C17H23N5O8[M]+425.1547，測(cè)定值425.1512。
實(shí)施例13 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羥甲基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例12 化合物(20mg，0.04mmol)溶于甲醇(0.4mL)中，然后加入NaOH的甲醇溶液(0.17mL，0.16mmol，24mg/mL)。室溫?cái)嚢?h后，TLC顯示反應(yīng)完全，然后加入Dowex50W×8(H+)，調(diào)節(jié)體系pH為7。過(guò)濾后，減壓濃縮得標(biāo)題化合物(16mg，92％)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.27(1H，d，J＝8.8Hz，NH)，7.90(1H，s，CH)，7.79(1H，d，J＝4.8Hz，NH)，5.81(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，5.57(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝9.7Hz，4-H)，4.51(2H，m，6-H and 7-H)，4.47(2H，s，CH2)，4.29(1H，dt，J＝10.2Hz，J＝18.1Hz，5-H)，2.62(2H，d，J＝3.7Hz，CH3)，1.75(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M+H]+＝369.9；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C14H21N5O7Na[M+Na]+392.1182，測(cè)定值392.1170。
實(shí)施例14 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-甲氧羰基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例12相同的方法，采用丙炔酸甲酯代替丙炔醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率72％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.26(1H，s，CH)，7.30(1H，t，J＝9.6Hz，NH)，6.43(1H，d，J＝4.9Hz，NH)，6.04(1H，d，J＝2.2Hz，3-H)，5.80(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝10.0Hz，4-H)，5.57(1H，d，J＝1.6Hz，7-H)，4.90(1H，dd，J＝1.7Hz，J＝10.8Hz，6-H)，4.57(1H，dt，J＝9.7Hz，J＝19.8Hz，5-H)，3.93(3H，s，CH3)，3.80(3H，s，CH3)，2.92(3H，d，J＝4.8Hz，CH3)，2.19(3H，s，OAc)，1.83(3H，s，NHAc)；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C18H24N5O9[M+H]+454.0574，測(cè)定值454.1603。
實(shí)施例15 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羧基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例13相同的方法，以實(shí)施例14化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率92％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.63(1H，s，CH)，7.82(1H，m，NH)，5.91(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，5.60(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝9.8Hz，4-H)，4.58(1H，d，J＝11.3Hz，6-H)，4.33(1H，m，5-H)，4.09(1H，s，7-H)，2.64(5H，d，J＝3.6Hz，CH3)，1.74(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C14H17N5O8Na[M+Na]+406.0975，測(cè)定值406.0991。
實(shí)施例16 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例12相同的方法，采用苯乙炔代替丙炔醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率61％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(1H，s，CH)，7.82(2H，d，J＝7.3Hz，PhH)，7.43(2H，t，J＝7.3Hz，PhH)，7.34(1H，t，J＝7.3Hz，PhH)，6.98(1H，d，J＝9.7Hz，NH)，6.37(1H，d，J＝5.5Hz，NH)，6.09(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，5.79(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝10.1Hz，4-H)，5.61(1H，d，J＝1.5Hz，7-H)，4.88(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝10.6Hz，6-H)，4.66(1H，dt，J＝9.9Hz，J＝20.0Hz，5-H)，3.81(3H，s，CH3)，2.93(3H，d，J＝5.1Hz，CH3)，2.22(3H，s，OAc)，1.82(3H，s，NHAc)；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C22H26N5O7[M+H]+472.1832，測(cè)定值472.1809。
實(shí)施例17 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例13相同的方法，以實(shí)施例16化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率90％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.59(1H，s，CH)，8.25(1H，d，J＝8.7Hz，NH)，7.85(2H，d，J＝7.8Hz，PhH)，7.80(1H，d，J＝4.8Hz，NH)，7.42(2H，t，J＝7.5Hz，PhH)，7.31(1H，t，J＝7.5Hz，PhH)，5.90(1H，d，J＝2.0Hz，3-H)，5.61(1H，d，J＝10.0Hz，4-H)，4.59(1H，d，J＝11.1Hz，6-H)，4.31(1H，dt，J＝10.0Hz，J＝20.5Hz，5-H)，4.08(1H，s，7-H)，2.64(3H，d，J＝3.7Hz，CH3)，1.74(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M+H]+＝415.9；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C19H21N5O6Na[M+Na]+438.1390，測(cè)定值438.1367。
實(shí)施例18 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-甲氧羰基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例12相同的方法，以實(shí)施例9化合物為原料，采用丙炔酸甲酯代替丙炔醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率55％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.86(1H，s，CH)，6.08(1H，d，J＝2.7Hz，3-H)，5.61(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝9.6Hz，6-H)，5.31(1H，d，J＝2.4Hz，7-H)，4.74(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝10.3Hz，4-H)，4.39(1H，t，J＝10.0Hz，5-H)，3.87(1H，m，CH)，3.83(3H，m，CH3)，3.74(3H，m，CH3)，3.31(3H，m，CH2+CH)，2.04(3H，s，OAc)，1.87(4H，m，2CH2)，1.66(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M]+＝494.0，516.1；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C21H27N5O9Na[M-H]+516.1706，測(cè)定值516.1714。
實(shí)施例19 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羧基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例13相同的方法，以實(shí)施例18化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率76％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.62(1H，s，CH)，5.87(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，5.60(1H，d，J＝2.2Hz，J＝9.5Hz，6-H)，4.56(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝10.3Hz，4-H)，4.33(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.24(1H，t，J＝9.8Hz，5-H)，3.74(1H，m，CH)，3.30(3H，m，CH2+CH)，1.80(4H，m，2CH2)，1.71(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M+H]+＝424.0，445.9；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C17H21N5O8Na[M+Na]+446.1288，測(cè)定值446.1266。
實(shí)施例20 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
按照與實(shí)施例12相同的方法，以實(shí)施例9化合物為原料，采用環(huán)丙基乙炔代替丙炔醇來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率38％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ7.83(1H，s，CH)，5.97(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，5.47(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.5Hz，6-H)，5.25(1H，d，J＝2.8Hz，7-H)，4.68(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.9Hz，4-H)，4.27(1H，t，J＝10.0Hz，5-H)，3.82(1H，m，CH)，3.71(3H，m，CH3)，3.27(3H，m，CH2+CH)，2.03(3H，s，OAc)，1.85(4H，m，2CH2)，1.68(3H，s，NHAc)，0.86(2H，m，CH2)，0.67(2H，m，CH2)；HRMS(ESI)[M]+＝498.2，510.1。
實(shí)施例21 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例13相同的方法，以實(shí)施例20化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率90％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.79(1H，s，CH)，5.83(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，5.51(1H，d，J＝2.3Hz，J＝9.3Hz，6-H)，4.55(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝10.2Hz，4-H)，4.29(1H，d，J＝2.5Hz，7-H)，4.13(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，3.75(1H，m，CH)，3.25(3H，m，CH2+CH)，1.83(4H，m，2CH2)，1.73(3H，s，NHAc)，0.86(2H，m，CH2)，0.67(2H，m，CH2)；HRMS(ESI)[M+H]+＝420.0，442.1；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C19H25N5O6Na[M]+ 442.1703，測(cè)定值442.1705。
實(shí)施例22 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例3 化合物(78mg，0.21mmol)溶于0.3mL H2O中，加入1，8-二氮雜環(huán)[5，4，0]十一烯-7(DBU)(0.22mL，1.47mmol，7.0eq.)，室溫?cái)嚢?h后，TLC顯示反應(yīng)完全。向反應(yīng)體系加入Lindlar催化劑(8mg)后，通入H2反應(yīng)24h后，TLC顯示反應(yīng)完全，停止反應(yīng)。過(guò)濾除去不溶物，用離子交換樹(shù)脂分離得標(biāo)題化合物42mg，產(chǎn)率70％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.71(1H，d，J＝2.6Hz，3-H)，4.53(1H，d，J＝10.9Hz，6-H)，4.42(1H，s，7-H)，4.34(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，4.15(1H，dd，J＝1.4Hz，J＝9.2Hz，4-H)，2.87(3H，s，CH3)，2.12(3H，s，NAc)；MS(ESI)m/z(％)＝287.1(100)[M+H+].LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝288.0。
實(shí)施例23 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例22 化合物(10mg，0.035mmol)溶于0.3mL H2O中，加入脒基吡唑單鹽酸鹽(7.6mg，0.042mmol，1.5eq)和咪唑(11.8mg，0.17mmol，5.0eq.)，攪拌24h后，加入4滴Et3N，繼續(xù)攪拌12h后，TLC顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)液用離子交換樹(shù)脂分離除去部分原料，再用反相硅膠柱層析分離(洗脫劑水)得標(biāo)題化合物8.4mg，產(chǎn)率74％。
1H NMR(400MHz，D2O)δ5.64(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，4.54(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝10.4Hz，6-H)，4.46(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.8Hz，4-H)，4.39(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝4.5Hz，7-H)，4.26(1H，t，J＝10.1Hz，5-H)，2.84(3H，s，CH3)，2.04(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝330.1。
實(shí)施例24 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例22相同的方法，以實(shí)施例6化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率70％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.74(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，4.90(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.54(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝9.6Hz，6-H)，4.35(1H，t，J＝9.6Hz，5-H)，4.28(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，4-H)，3.12(3H，s，CH3)，3.03(3H，s，CH3)，2.13(3H，s，NAc)；HRMS(EI)m/z計(jì)算值C12H19N3O6Na[M+Na]+324.1172，測(cè)定值324.1163。
實(shí)施例25 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例23相同的方法，以實(shí)施例24化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率74％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.72(1H，d，J＝3.2Hz，3-H)，4.55(1H，dd，J＝4.2Hz，J＝8.2Hz，6-H)，4.42(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝7.8Hz，4-H)，4.21(1H，t，J＝7.9Hz，5-H)，3.13(3H，s，CH3)，3.00(3H，s，CH3)，2.06(3H，s，NAc)；13C NMR(400MHz，D2O)δ19.03，33.14，45.23，46.40，63.49，73.83，100.57，146.05，154.19，165.96，168.50，171.87；HRMS(ESI)m/z計(jì)算值C13H21N5O6[M+H]+344.1570，測(cè)定值344.1577。
實(shí)施例26 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-三苯基膦亞胺基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例4 化合物(30mg，0.07mmol)溶于THF(2.0mL)中，加入PPh3(20mg，0.07mmol，1.05eq.)，室溫?cái)嚢?8h后，減壓濃縮得油狀物。制備板(CH2Cl2∶CH3OH＝30∶1(v/v))分離得標(biāo)題化合物15mg，產(chǎn)率30％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.20(1H，d，J＝7.8Hz，NH)，7.73(18H，m，18PhH)，6.56(1H，m，NH)，5.45(1H，d，J＝1.5Hz，7-H)，5.40(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，4.98(1H，dd，J＝1.5Hz，J＝10.2Hz，6-H)，4.82(1H，m，4-H)，4.14(1H，dt，J＝10.5Hz，J＝17.7Hz，5-H)，3.67(3H，s，CH3)，3.39(1H，m，CH)，3.18(1H，m，CH)，2.23(3H，s，OAc)，1.76(3H，s，NAc)，1.12(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝618.3。
實(shí)施例27 (2R，3R，S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例4 化合物(30mg，0.07mmol)溶于THF(2.0mL)中，加入PPh3(20mg，0.07mmol，1.05eq.)，室溫?cái)嚢?8h后，減壓濃縮得油狀物。制備板(CH2Cl2∶CH3OH＝10∶1(v/v))分離得標(biāo)題化合物24mg，產(chǎn)率50％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.87(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，5.08(1H，d，J＝1.8Hz，7-H)，4.30(1H，dd，J＝1.6Hz，J＝10.4Hz，6-H)，3.76(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，3.68(3H，s，CH3)，3.40(1H，m，4-H)，3.24(1H，m，CH)，2.99(1H，m，CH)，2.11(3H，s，OAc)，1.79(3H，s，NAc)，1.03(3H，t，J＝7.1Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝380.1。
實(shí)施例28 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例26 化合物(15mg，0.024mmol)溶于甲醇(0.75mL)和水(0.75mL)的混合溶液中，加入KOH(0.3mL)，室溫?cái)嚢?6h后，用2mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH＝6-7，減壓濃縮后得淺黃色固體的標(biāo)題化合物?？刹唤?jīng)純化，直接用于下步反應(yīng)。
LRMS(ESI)m/z[M-H]+＝300.1。
實(shí)施例29 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-[2’，3’-二叔丁氧羰基胍基]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例28 化合物溶于甲醇(0.2mL)和THF(0.2mL)的混合溶液中，然后加入N，N’-二叔丁氧羰基脒基吡唑(10.4mg，0.04mmol)，室溫?cái)嚢?4h后，減壓濃縮，制備板(CH2Cl2∶CH3OH＝6∶1(v/v))分離得標(biāo)題化合物10mg，產(chǎn)率76％。
LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝566.1。
實(shí)施例30 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例29 化合物(10mg，0.02mmol)溶解于CH2Cl2(0.2mL)中，然后加入CF3COOH(0.1mL)，室溫?cái)嚢?h后，減壓濃縮至干，離子交換樹(shù)脂分離得白色固體的標(biāo)題化合物6mg，產(chǎn)率96％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.65(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，4.55(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.5Hz，6-H)，4.48(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝12.0Hz，4-H)，4.39(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.28(1H，dt，J＝7.8Hz，J＝17.7Hz，5-H)，3.33(4H，dt，J＝7.2Hz，J＝14.4Hz，CH2)，2.07(3H，s，NAc)，1.17(6H，t，J＝7.2Hz，CH3)。
實(shí)施例31 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例22相同的方法，以實(shí)施例7的化合物為原料來(lái)制備目標(biāo)化合物；產(chǎn)率93％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.73(1H，d，J＝1.8Hz，3-H)，4.74(1H，d，J＝3.0Hz，7-H)，4.47(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.0Hz，6-H)，4.23(1H，dt，J＝9.6Hz，J＝18.6Hz，5-H)，4.20(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.5Hz，4-H)，3.43(4H，m，2CH2)，2.10(3H，s，NAc)，1.23(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)，1.15(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝330.0。
實(shí)施例32 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例7 化合物(10mg，0.02mmol)溶于THF(0.5mL)和H2O(4.4μL，0.2mmol，10eq.)中，加入PPh3(7mg，0.02mmol)，室溫?cái)嚢?8h后，停止反應(yīng)。減壓濃縮后，制備板(CH2Cl2CH3OH＝6/1(v/v))分得標(biāo)題化合物4mg，產(chǎn)率43％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.94(1H，d，J＝8.7Hz，NH)，6.05(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，5.80(1H，d，J＝4.5Hz，7-H)，4.57(1H，dd，J＝4.8Hz，J＝8.4Hz，6-H)，3.97(1H，dt，J＝8.4Hz，J＝16.5Hz，5-H)，3.78(3H，s，CH3)，3.73(2H，m，CH and 4-H)，3.35(3H，m，CH and CH2)，2.19(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)，1.13(6H，t，J＝6.9Hz，2CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝408.3。
實(shí)施例33 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-[2’，3’-二叔丁氧羰基胍基]-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例32 化合物(60mg，0.16mmol)溶于無(wú)水甲醇(2mL)中，N2保護(hù)下，滴加N，N’-二叔丁氧羰基脒基吡唑(60mg，0.19mmol)的THF(2mL)溶液。室溫?cái)嚢?8h后，旋盡溶劑，直接制備板(CH2Cl2∶CH3OH＝10∶1(v/v))分離，得白色固體的標(biāo)題化合物78mg，產(chǎn)率80％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ11.40(1H，s，NH)，8.52(1H，d，J＝8.3Hz，NH)，6.66(1H，d，J＝8.5Hz，NH)，5.92(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，5.65(1H，d，J＝4.2Hz，7-H)，5.21(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝10.3Hz，4-H)，4.55(1H，dd，J＝4.3Hz，J＝10.7Hz，6-H)，4.25(1H，dt，J＝9.9Hz，J＝18.8Hz，5-H)，3.84(3H，s，CH3)，3.36(4H，m，2CH2)，2.23(3H，s，OAc)，1.91(3H，s，NAc)，1.52(9H，s，3CH3)，1.51(9H，s，3CH3)，1.16(3H，t，J＝6.9Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝628.1。
實(shí)施例34 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯
將實(shí)施例33 化合物(4mg，0.03mmol)溶于無(wú)水CH2Cl2(0.5mL)中，N2保護(hù)下，加入CF3COOH(0.2mL)溶液。室溫?cái)嚢?h后，旋盡溶劑，得標(biāo)題化合物3mg，可直接用于下步反應(yīng)。
LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝372.2。
實(shí)施例35 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
將實(shí)施例34 化合物(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯(3mg，0.01mmol)溶于H2O(0.2mL)和1M NaOH的水溶液(2μL)中，室溫?cái)嚢?5h后，停止反應(yīng)。陽(yáng)離子交換樹(shù)脂分離得標(biāo)題化合物2mg，產(chǎn)率73％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.79(1H，d，J＝3.3Hz，3-H)，4.80(1H，d，J＝5.7Hz，7-H)，4.61(1H，t，J＝6.0Hz，6-H)，4.43(1H，dd，J＝3.3Hz，J＝6.6Hz，4-H)，4.23(1H，dt，J＝9.0Hz，J＝15.9Hz，5-H)，3.49(4H，m，CH2)，2.11(3H，s，NAc)，1.29(6H，t，J＝7.2Hz，2CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝372.2。
實(shí)施例36 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例22相同的方法，以實(shí)施例9化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率90％。
1H NMR(400MHz，D2O)δ5.74(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，4.70(1H，d，J＝2.5Hz，7-H)，4.52(1H，t，J＝2.7Hz，J＝10.2Hz，6-H)，4.34(1H，t，J＝9.4Hz，5-H)，4.27(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝9.4Hz，4-H)，3.58(4H，m，2CH2)，2.12(3H，s，NAc)，1.97(4H，m，2CH2)；LR-ESI-MS[M+Na]+＝350.1。
實(shí)施例37 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸
按照與實(shí)施例23相同的方法，以實(shí)施例36化合物為原料來(lái)制備標(biāo)題化合物；產(chǎn)率80％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.73(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，4.67(1H，d，J＝4.5Hz，7-H)，4.55(1H，dd，J＝4.5Hz，J＝8.4Hz，6-H)，4.43(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝7.5Hz，5-H)，4.237(1H，t，J＝8.1Hz，5-H)，3.69(1H，m，CH)，3.51(3H，m，CH+CH2)，2.06(3H，s，NAc)，1.95(4H，m，2CH2)；HRMS(ESI)[M+H]+＝370.2。
實(shí)施例38～41 按照與實(shí)施例5相同的方法，將實(shí)施例2化合物與不同的胺反應(yīng)，分別制備實(shí)施例38～41化合物。



實(shí)施例42～47 按照與實(shí)施例31相同的方法，分別由實(shí)施例5、38、8、39～41相應(yīng)地制備實(shí)施例42～47化合物。


實(shí)施例48～52 按照與實(shí)施例23相同的方法，分別由實(shí)施例42～46相應(yīng)地制備實(shí)施例48～52化合物。


實(shí)施例53～87 按照與實(shí)施例12相同的制備方法，相應(yīng)地制備實(shí)施例53～87化合物。



實(shí)施例88～111 按照與實(shí)施例13相同的方法，相應(yīng)地制備實(shí)施例88～111化合物。



本發(fā)明化合物的神經(jīng)氨酸酶抑制活性測(cè)定 參照文獻(xiàn)(Bioorg. & Med Chem.Lett 2007，17，1655-1658)方法，測(cè)定了本發(fā)明的通式(I)化合物對(duì)流感病毒H3N2的抑制活性。測(cè)定結(jié)果如下表
由上表可見(jiàn)，本發(fā)明所述的化合物具有對(duì)流感病毒的抑制活性，而此類化合物的結(jié)構(gòu)與扎那米韋不同，可用于對(duì)扎那米韋耐藥的流感病毒的治療，且化合物極性降低，有利于口服給藥。由此，本發(fā)明提供了一類高活性的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物，該類化合物及其藥物組合物可用于抗流感病毒，特別的，可用于對(duì)扎那米韋、奧司它韋等其他抗流感藥物耐藥的流感病毒感染的治療。
權(quán)利要求
1.如下通式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物
其中
R1代表OR5、SR5、NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6；
R2代表H、C1-20烷基、C1-5烷氧基取代的C1-5烷基、COR5或CONR5R6；
R3代表N3、NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10、N＝PPh3或
R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6；
R5代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、五氟苯基、芳基、CONR14R15、COOR14、COR14或被一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)取代的C1-10烷基NR14R15、NR14COR15、CO2R14、OR14、C3-8環(huán)烷基和芳基；
R6代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、芳基、COR14或被一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)取代的C1-10烷基NR14R14、COR14、C3-8環(huán)烷基、CN、N3、OR14和芳基；
或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)是飽和或非飽和的，并含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)非必需地被鹵素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、CF3、CN或NO2取代；
R7和R8各自獨(dú)立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烴鏈，該烴鏈中非必需地含有一個(gè)NR11基團(tuán)，該烴鏈非必需地被1～4個(gè)選自氧代基和C1-6烷基的基團(tuán)所取代，而該C1-6烷基非必需地被羥基或芳基取代；
R9和R10各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、NR14R15、OR14、CN或NO2；
R11和R12各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷氧基、COOR5、CONR14R15或芳基；或者非必需地被羥基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基；
R14和R15各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基或芳基；
其中，所述芳基是指芳香族的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，且非必需地被取代；當(dāng)所述芳基被取代時(shí)，取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵素、硝基、三氟甲基、氨基、C1-4烷基取代的氨基、苯基和苯甲基；所述芳基被1～3個(gè)上述取代基取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物，其特征在于，其中，
R1代表OR5、NR5R6或N(OR5)R6；
R2代表H、COR5或CONR5R6；
R3代表NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10或
其為α構(gòu)型；
R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6；
R5和R6各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基、C2-10炔基或芳基；或者被OR14、C3-8環(huán)烷基或芳基取代的C1-10烷基；
或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)是飽和或非飽和的，并含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)非必需地被鹵素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代；
R7和R8各自獨(dú)立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烴鏈，該烴鏈中非必需地含有一個(gè)NR11基團(tuán)，該烴鏈非必需地被1～4個(gè)選自氧代基和C1-6烷基的基團(tuán)所取代，而該C1-6烷基非必需地被羥基或芳基取代；
R9和R10各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、NR14R15、OR14、CN或NO2；
R11和R12各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、COOR5或芳基；或者非必需地被羥基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基；
R14和R15各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基或芳基；
所述芳基的定義與權(quán)利要求1相同。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物，其特征在于，其中，
R1代表NR5R6或N(OR5)R6；
R2代表H或COR5；
R3為α構(gòu)型；
R3代表NR7R8或NHC(＝NR9)NR5R10；
R4代表COOR5或CON(OR5)R6；
R5和R6各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)是飽和或非飽和的，并含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)非必需地被C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代；
R7和R8各自獨(dú)立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烴鏈，該烴鏈中非必需地含有一個(gè)NR11基團(tuán)，該烴鏈非必需地被1或2個(gè)選自氧代基和C1-6烷基的基團(tuán)所取代，而該C1-6烷基非必需地被羥基或芳基取代；所述芳基包括苯基、萘基、吡啶基、咪唑基和噻吩基，且非必需地被取代；當(dāng)所述芳基被取代時(shí)，所述取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、苯基和苯甲基；并且所述被取代的芳基帶有1～3個(gè)上述取代基；
R9和R10各自獨(dú)立地代表H、C1-6烷基、NH2、OH、CN或NO2；
R11和R12各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基或COOR5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物，其特征在于，其中，
R1代表NR5R6；
R2代表H；
R3代表NH2或NHC(＝NH)NH2，其為α構(gòu)型；
R4代表COOR5；
R5和R6各自獨(dú)立地代表H、C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6與它們相連的氮原子共同構(gòu)成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)是飽和或非飽和的，并含有一個(gè)或多個(gè)選自N、O和S中的雜原子，該環(huán)狀結(jié)構(gòu)非必需地被C1-10烷基、C3-8環(huán)烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物，其特征在于，其選自
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸甲酯、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-異丙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-羥胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)己胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)己基胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、和(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-異丙胺胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物，其特征在于，其選自
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸、和(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羥基-2’-環(huán)戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氫吡喃-6-甲酸。
7.權(quán)利要求1所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物的制備方法，其特征在于，采用下述方法中的任意一種
(1)當(dāng)通式(I)化合物中R1為OH，R2不為H，R3為N3，R4為COOR5，且R5不為H時(shí)，即通式(Ia)化合物，通過(guò)通式(II)化合物氧化裂解來(lái)制備；如果需要，隨后進(jìn)行脫保護(hù)；通式(II)化合物的R2和R4取代基定義同通式(I)化合物
氧化裂解通過(guò)兩步完成第一步與高碘酸鹽反應(yīng)；第二步的試劑是亞氯酸鹽；
(2)當(dāng)通式(I)化合物中R1為OR5或SR5時(shí)，即通式(Ic)化合物，通過(guò)相應(yīng)的通式(I)化合物中的R1代表OH的通式(Ib)化合物與被R5取代的含氧或含硫化合物通過(guò)縮合反應(yīng)來(lái)制備；
(3)當(dāng)通式(I)化合物中R1為NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6時(shí)，即通式(Id)化合物，通過(guò)相應(yīng)的通式(I)化合物中的R1代表OH的通式(Ib)化合物與-R5R6、-(OR5)R6或-(NR5R6)R6取代的含氮化合物反應(yīng)來(lái)制備；羧基在與胺反應(yīng)之前被活化；胺化反應(yīng)在有機(jī)溶劑中完成；
(4)當(dāng)通式(I)化合物中R3為
時(shí)，即通式(If)化合物，通過(guò)相應(yīng)的通式(I)化合物中的R3代表N3的通式(Ie)化合物與被R11和R12取代的炔類化合物反應(yīng)來(lái)制備；制備在催化劑催化下進(jìn)行，催化方法包括亞銅離子催化；
(5)當(dāng)通式(I)化合物中R3為NH2時(shí)，即通式(Ig)化合物，通過(guò)相應(yīng)的通式(I)化合物中的R3代表N3的通式(Ie)化合物通過(guò)疊氮基的還原反應(yīng)來(lái)制備；
(6)當(dāng)通式(I)化合物中R3為NR7R8時(shí)，即通式(Ih)化合物，從通式(I)化合物中的R3為NH2的通式(Ig)化合物通過(guò)與被R7和R8取代的化合物反應(yīng)來(lái)制備；
(7)當(dāng)通式(I)化合物中R3為NHC(＝NR14)NR15R16時(shí)，即通式(Ii)化合物，從通式(I)化合物中的R3為NR7R8的通式(Ih)化合物通過(guò)胍基化反應(yīng)來(lái)制備；當(dāng)通式(I)化合物中R3為NHC(＝NH)NH2時(shí)，即通式(Ik)化合物，通過(guò)通式(I)化合物中的R3為NH2的通式(Ig)化合物與脒基吡唑或其鹽或衍生物反應(yīng)或經(jīng)過(guò)通式(I)化合物中的R3為NHCN的中間體式(Ij)化合物來(lái)制備；
(8)當(dāng)通式(I)化合物中R3代表N3，R4為CONR5R6時(shí)，即通式(Im)化合物，通過(guò)相應(yīng)的通式(I)化合物中的R3代表N3，R4為COOR5，且R5不為H的通式(Il)化合物與羥胺或其衍生物的堿式鹽反應(yīng)得到；
(9)通式(I)化合物中R3為NR7R8的通式(Ih)化合物或通式(I)化合物中R3為NHC(＝NR14)NR15R16的通式(Ii)化合物從通式(I)化合物中的R3代表N3，R4為CONR5R6的通式(Im)化合物通過(guò)與上述方法(5)類似的疊氮基還原方法還原，然后進(jìn)一步反應(yīng)來(lái)制備；或
(10)通過(guò)通式(I)的不同化合物之間的官能團(tuán)相互轉(zhuǎn)化可以制備通式(I)的其它化合物；其中R2為H的化合物通過(guò)不為H的化合物來(lái)制備；R7和R8不為H的化合物通過(guò)相應(yīng)的R7和/或R8為H的化合物來(lái)制備；R4為COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6的化合物與R4為COOH的化合物相互轉(zhuǎn)化。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物的制備方法，其特征在于，在制備通式(Ia)化合物時(shí)，氧化裂解的第一步是采用高碘酸鹽，在含水有機(jī)溶劑中完成；第二步是采用亞氯酸鹽，存在有包括堿金屬或堿土金屬磷酸鹽的緩沖劑，在含水有機(jī)溶劑中完成。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物的制備方法，其特征在于，在制備通式(Id)化合物時(shí)，羧基在與胺反應(yīng)之前進(jìn)行活化的方法包括轉(zhuǎn)化成五氟苯氧基；胺化反應(yīng)在醚中完成。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物的制備方法，其特征在于，在制備通式(Ig)化合物時(shí)，所述還原條件為L(zhǎng)indlar催化劑催化，氫氣或甲酸提供活性氫。
11.權(quán)利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物在制備神經(jīng)氨酸酶抑制劑的藥物中的用途。
12.權(quán)利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物在制備抑制病毒的藥物中的用途。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的用途，其特征在于，所述病毒包括流感病毒。
14.權(quán)利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物在制備預(yù)防和治療病毒性疾病及其感染的藥物中的用途。
15.一種用于抑制神經(jīng)氨酸酶的藥物組合物，該組合物包含治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物或它們的任何前藥形式、它們的可藥用鹽或可藥用溶劑化物和一種或多種可藥用載體或稀釋劑。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了如下通式所示的N-乙酰神經(jīng)氨酸類化合物、其藥物組合物及其制備方法和用途。這些化合物可抑制流感病毒表面神經(jīng)氨酸酶，因而可用于抗流感病毒，特別的，可用于對(duì)扎那米韋、奧司它韋等其他抗流感藥物耐藥的流感病毒感染的治療。
文檔編號(hào)A61P31/12GK101787008SQ200910045818
公開(kāi)日2010年7月28日 申請(qǐng)日期2009年1月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月23日
發(fā)明者趙慶杰, 李劍峰, 沈敬山, 朱維良, 蔣華良, 沈競(jìng)康, 盧敬泰, 金漢祚, 南基燁, 成百麟, 申宇鎮(zhèn) 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所, 韓國(guó)分子設(shè)計(jì)研究所