專利名稱：益母草堿類似物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種新的益母草堿類似物及其制備方法。
背景技術(shù)：
益母草為唇形科益母草屬植物L(fēng)eonurus japonicus Houtt.的新鮮或干燥地上部 分，原名茺蔚，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，別名益母艾、苦草、坤草等，其味辛、微苦，性微寒，入心 包、肝經(jīng)，具有活血調(diào)瘀、利尿消腫之功效。在臨床上用于月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后瘀痛、心腦血管疾 病、血液病等疾病的治療，素有“血家圣藥”、“經(jīng)產(chǎn)良藥”之稱。現(xiàn)有技術(shù)公開了益母草中含有以下五類化學(xué)成分1、生物堿益母草堿、水蘇堿、 益母草啶及益母草寧；2、二萜類前西班牙夏羅草酮、西班牙夏羅草酮、前益母草乙素；3、 黃酮類衍生物洋芹素、芫花素及其苷、槲皮素、山柰素及其苷、蘆丁 ；4、脂肪酸類主要有 亞麻酸、亞油酸，延胡索酸、月桂酸等；5、揮發(fā)油類。還有多種微量元素、維生素以及胡蘿卜 苷、益母草酰胺、豆留醇、4-胍基丁醇、4-胍基丁酸等其他化合物。益母草中的活性成分主 要是生物堿，益母草全草含生物堿0. 11 % 2. 09 %，其中益母草堿為0. 02 % 0. 12 %。益母草堿(Leonurine)是丁香酸的胍基丁醇酯，在體外和體內(nèi)均具有對(duì)心肌缺血 保護(hù)作用(YZ Zhu,Life Sci.，2005，76 (26) :3043_56)。H2S 是繼 CO 和 NO 后被發(fā)現(xiàn)的第三 種氣體信號(hào)分子，近年的研究表明內(nèi)源性硫化氫對(duì)心肌具有保護(hù)作用。直接吸入硫化氫氣 體的最大局限在于攝入劑量的不可控性，硫化氫在體內(nèi)劑量的安全上限是200mM，因此發(fā)展 和研究通過體內(nèi)酶(例如，CSE和CSB)調(diào)控的釋放H2S的藥物，對(duì)于開辟安全有效的針對(duì)心 腦血管疾病的新療法具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。(YZ Zhu, J Applied Physiology, 2007,102(1) 261-268)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類新的益母草堿類似物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供該益母草堿類似物的制備方法。本發(fā)明以益母草堿為先導(dǎo)化合物，利用計(jì)算機(jī)模擬輔助設(shè)計(jì)使中藥單體和活性氣 體分子結(jié)合，即在益母草堿的胍基上引入一系列信號(hào)分子硫化氫釋放基團(tuán)。本發(fā)明提供的益母草堿類似物具有如下式(1)所示的結(jié)構(gòu) 式中，m為1 6，η為2 3C
本發(fā)明提供的式(1)所示益母草堿類似物采用但不限于下述方法制備。本發(fā)明制備方法的流程例示如下 步驟I 化合物2和氨基醇發(fā)生開環(huán)反應(yīng)得到化合物3 ；步驟II 化合物3用保護(hù)基保護(hù)胺基得到化合物4 ；步驟III 化合物5用保護(hù)基保護(hù)羥基得到化合物6 ；步驟IV:化合物4在縮合劑和催化劑的存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與 化合物6反應(yīng)得到化合物7 ；步驟V 化合物7與脫保護(hù)劑反應(yīng)得到式⑴所示的益母草堿類似物。步驟I中，化合物2先與酸生成鹽，然后在沒有溶劑條件下或在溶劑中與氨基醇反 應(yīng)得到化合物3。該制備方法中所使用的酸包括鹽酸、氫溴酸、磷酸、醋酸、硫酸等。在該制 備方法中所使用的溶劑可以是任何一種溶劑，只要該溶劑本身在反應(yīng)中是惰性的，且不會(huì) 抑制反應(yīng)。所述的溶劑包括丙酮、乙腈，N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基 亞砜、環(huán)丁砜、環(huán)丁亞砜、六亞甲基磷酰三胺、和水等，或這些溶劑的混合物。反應(yīng)溫度可在 80°C至150°C之間，優(yōu)選采用100°C至140°C。步驟II中，化合物3在有堿存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與二碳酸二叔 丁酯反應(yīng)得到化合物4。所述的堿可以是有機(jī)堿，如三乙胺、吡啶、N，N-二異丙基乙胺、4-二 甲氨基吡啶>1,8- 二氮雜雙環(huán)[5. 4. 0] -7- -i^一碳烯和1,2,2,6,6-五甲基哌啶等，也可以是 無機(jī)堿，如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等。在該制備方法中所使用的溶劑可以是任 何一種溶劑，只要該溶劑本身在反應(yīng)中是惰性的，且不會(huì)抑制反應(yīng)。所述的溶劑包括丙酮、 乙腈，N, N- 二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基亞砜、環(huán)丁砜、環(huán)丁亞砜、六亞甲基 磷酰三胺、四氫呋喃、乙醚、1，4_ 二噁烷和水等；或這些溶劑的混合物。該反應(yīng)在-20°C至 100°C溫度范圍進(jìn)行，優(yōu)選使用室溫。 步驟III中，化合物5在有堿存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與鹵化芐反應(yīng)得到化合物6。所述的堿可以是有機(jī)堿，如三乙胺、吡啶、N，N-二異丙基乙胺、4-二甲氨基吡 啶、1，8_ 二氮雜雙環(huán)[5. 4. 0]-7-i^一碳烯和1，2，2，6，6_五甲基哌啶等，也可以是無機(jī)堿， 如氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等。在該制備方法中所使用的 溶劑可以是任何一種溶劑，只要該溶劑本身在反應(yīng)中是惰性的，且不會(huì)抑制反應(yīng)。所述的溶 劑包括鹵代烴溶劑，如二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷等；芳族烴類溶劑，如苯和甲苯等；非 質(zhì)子傳遞性溶劑，如丙酮、乙腈，N, N- 二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二甲基亞砜、環(huán) 丁砜、環(huán)丁亞砜和六亞甲基磷酰三胺等；酯類溶劑，如乙酸乙酯和乙酸甲酯等；醚類溶劑， 如四氫呋喃、乙醚和1，4_ 二噁烷等；有機(jī)堿溶劑，如吡啶、甲基吡啶等；甲醇、乙醇等或這些 溶劑的混合物。該反應(yīng)在_20°C至100°C溫度范圍進(jìn)行，優(yōu)選使用50°C至100°C。步驟IV中，化合物4在縮合劑和催化劑的存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中 與化合物6反應(yīng)得到化合物7?？s合劑可以是EDC HC1或DCC等；催化劑可以是DMAP等。 所述的溶劑包括鹵代烴溶劑，如二氯甲烷，氯仿，1，2_ 二氯乙烷等；芳族烴類溶劑，如苯和 甲苯等；非質(zhì)子傳遞性溶劑，如丙酮、乙腈，N, N-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、二 甲基亞砜、環(huán)丁砜、環(huán)丁亞砜和六亞甲基磷酰三胺等；酯類溶劑，如乙酸乙酯和乙酸甲酯等； 醚類溶劑，如四氫呋喃、乙醚和1，4_ 二噁烷等；有機(jī)堿溶劑，如吡啶、甲基吡啶等。該反應(yīng) 在-20°C至100°C溫度范圍進(jìn)行，優(yōu)選使用0°C至室溫。步驟V中，化合物7在沒有溶劑條件下或在溶劑中與脫保護(hù)劑反應(yīng)得到式(1)所 示新的益母草堿類似物。該制備方法中所使用的脫保護(hù)劑包括甲酸、三氟乙酸等。在該制 備方法中所使用的溶劑可以是任何一種溶劑，只要該溶劑本身在反應(yīng)中是惰性的，且不會(huì) 抑制反應(yīng)。所述的溶劑包括鹵代烴溶劑，如二氯甲烷，氯仿，1，2_ 二氯乙烷等；芳族烴類溶 劑，如苯和甲苯等；非質(zhì)子傳遞性溶劑，如丙酮、乙腈，N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基-2-吡咯 烷酮、二甲基亞砜、環(huán)丁砜、環(huán)丁亞砜和六亞甲基磷酰三胺等；酯類溶劑，如乙酸乙酯和乙酸 甲酯等；醚類溶劑，如四氫呋喃、乙醚和1，4_ 二噁烷等；有機(jī)堿溶劑，如吡啶、甲基吡啶等； 或這些溶劑的混合物。本發(fā)明以益母草堿為先導(dǎo)化合物，利用計(jì)算機(jī)模擬輔助設(shè)計(jì)使中藥單體和活性氣 體分子結(jié)合，在益母草堿的胍基上引入一系列信號(hào)分子硫化氫釋放基團(tuán)，使在體內(nèi)達(dá)到可 控性釋放，發(fā)揮傳統(tǒng)中藥單體和活性氣體分子的獨(dú)特的雙重保護(hù)作用。本發(fā)明制得的益母 草堿，經(jīng)初步試驗(yàn)顯示，其在體外和體內(nèi)均具有對(duì)心肌缺血保護(hù)作用，可進(jìn)一步制備對(duì)心腦 血管疾病有治療作用藥物。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但這些實(shí)施例絕不是對(duì)本發(fā)明的任何限 制。實(shí)施例1
f^N1) MeCN, H20
M +HBr+ 0Hh。^^nAn sh
NH22) CS2，H20H H先用氮?dú)獗Ｗo(hù)封管，后稱取306mg(3.00mmol)2-氨基-2-噻唑啉放入封管中。加 入5. OmL 60 %的乙腈溶液使其溶解，然后加0. 6mL 40 %的氫溴酸溶液劇烈攪拌。5分鐘后，加入1. lmL 3-氨基-1-丙醇，密閉封管。升溫至110°C，反應(yīng)2小時(shí)后，自然降溫至室溫。 后冰浴冷卻到0°C，打開封管，加入水5. OmL, 二硫化碳0. 5mL。0°C攪拌3小時(shí)后溶液渾濁。 過濾后得固體用乙醇及石油醚洗滌。最后得到黃色有臭味固體245mg，氮?dú)獗Ｗo(hù)，避光儲(chǔ)藏， 產(chǎn)率為 48%。iH-WI^CDsOD，400MHz) 8 :3. 64 (2H，t，J = 5. 87Hz)，3. 48 (1H，m)，3. 3 (5H，被 CD30D 覆蓋)，1. 78(2H，m)。13C-NMR(CD30D，75MHz) 8 :59. 778，39. 736，32. 438。ESIMS (m/z) 178. 1[M+1]+。IR(KBr) vmax :3216. 13,3167. 86，1665. 95，1625. 63，1600. 64。實(shí)施例2 取50mL單頸瓶，抽真空，通氮?dú)猓磸?fù)三次后加入94mg 3-(3_(2_巰乙基)胍基) 丙醇和150mg無水碳酸鈉，8. 5mL 60%的二氧六環(huán)的水溶液使原料溶解，室溫?cái)嚢琛?分鐘 后，加入294mg(l. 35mmoL) 二碳酸二叔丁酯。室溫?cái)嚢?天后，加少量水，使用乙酸乙酯萃取 三次后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥過夜。濃縮溶劑，柱層析(CH2C12 CH30H=100 1)得到 黃色粘稠狀產(chǎn)物 134mg，產(chǎn)率為 79%。'H-NMR^DC^, 400MHz) 8 :3. 83 (2H，t，J = 6. 65Hz)， 3. 74 (2H, t，J = 5. 87，5. 47Hz)，3. 44 (2H, t，J = 5. 87，6. 26Hz)，3. 01 (2H, t, J = 6. 65Hz)， 1. 82 (2H, q, J = 5. 87Hz), 1. 47 (27H, s)。13C_NMR (CDC13，75MHz) 8 :168. 633，168. 377， 152.911，151.784,85.231,85.584,79.365,59.378,47. 370,31. 732,28. 164。ESIMSm/z 478. 3[M+1]+。IR(KBr)vmax :2980，1719. 5，1621. 3，1369. 4，1131. 2。實(shí)施例3 在lOOmL兩頸瓶中加入15g(75. 76mmoL) 丁香酸，加入35. OmL甲醇使之溶解。然 后再加入15g氯化芐(118. 57mmoL)，20.0mL甲醇、7.4g氫氧化鉀攪拌。加熱回流2小時(shí) 后，將反應(yīng)液濃縮，再加入25. OmLlO %的氫氧化鈉溶液回流1小時(shí)，然后加水溶解，用乙酸 乙酯萃取，將水相酸化，過濾洗滌至中性，加水再次用乙酸乙酯萃取，后將有機(jī)相用無水硫 酸鈉干燥過夜，用乙酸乙酯重結(jié)晶得到白色粉末狀產(chǎn)物12g，產(chǎn)率為55%。t-NMR(⑶Cl3， 400MHz) 8 7. 48 (2H, d, J = 7. 05Hz)，7. 38 (1H, s)，7. 36 (2H, d, J = 7. (MHz)，7. 29 (2H, m)， 5. 12(2H，s)，3. 89(6H，s)。13C_WR(CDC13，75MHz) 8 :171. 861，153. 282，141. 736，137. 260， 128. 436，128. 192，128. 032，124. 233，107. 358,74. 980,56. 198。ESIMS m/z :311. 0[M+Na]+， 289. 1[M+1]+。IR(KBr) vmax :1682. 36,733. 67,722. 68,697. 15。實(shí)施例4 取50mL單頸瓶，抽真空，通氮?dú)?，反?fù)三次后加入96mg (0. 21mmoL) 3- (1，2，3-三叔 丁氧羰基-3-(2-巰乙基)胍基)丙醇，加入二氯甲烷5. 5mL使之溶解。用冰浴冷卻至0°C 后，分別加入 73mg(0. 25mmoL) 4-節(jié)氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸、52mg (0. 27mmoL) EDC .HC1、 llmg(0.09mmoL)DMAP。0°C反應(yīng)3小時(shí)后，自然升溫至室溫反應(yīng)3天，濃縮溶劑后柱層析 (CH2C12 CH30H = 75 1)，得到 124mg 黃色黏稠狀物，產(chǎn)率為 81%。iH-NMlUCDCly^OMHz) 8 7. 46 (2H, d, J = 6. 66Hz)，7. 27 (5H, m)，5. 08 (2H, s)，4. 40 (2H, t, J = 6. 26Hz)，3. 85 (6H, s)，3. 84 (2H, m)，3. 44 (2H, m)，3. 02 (2H, m)，2. 10 (2H, m)，1. 52 (27H, s)。13C_NMR (CDC13, 75MHz) 8 :128.452,128. 180,106. 833,56. 243,28. 1510 ESIMSm/z :748.5[M+l]+。IR(KBr) vmax :3397. 13，2977. 04，2934. 03，1716. 60，800. 23，732. 93。實(shí)施例5 取50mL單頸瓶加入22mg(0. 03mmoL) 4-芐氧基-3，5- 二甲氧基苯甲酸_3_(1，2， 3-三叔丁氧羰基-3-(2-巰乙基)胍基)丙酯后，加入三氟乙酸l.OmL反應(yīng)12小時(shí)后，加入 二氯甲烷后減壓濃縮，反復(fù)數(shù)次至無刺激的酸性氣味為止。再加入二氯甲烷洗去溶于二氯 甲烷的雜質(zhì)，吸出二氯甲烷后將殘余液體減壓濃縮，反復(fù)數(shù)次至瓶壁出現(xiàn)白色晶體為止。將 白色晶體稱重，得到目標(biāo)8mg 4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲酸-3-(3-(2-巰乙基)胍基)丙 酯，產(chǎn)率為 77%。力-匪1 (020，400MHz) 8 :7. 00 (2H，s)，4. 11 (2H，m)，3. 62 (6H，s)，3. 10 (2H， m)，2. 91 (2H，m)，2.22 (2H，m)，1.81 (2H，m)。ESIMS m/z :358[M+1] +。
權(quán)利要求
式(1)的益母草堿類似物式中，m為1～6，n為2～3。F2009100535797C0000011.tif
2.如權(quán)利要求1所述的益母草堿類似物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 步驟I 化合物2先與酸生成鹽，然后在沒有溶劑條件下或在溶劑中與氨基醇反應(yīng)得到 化合物3 ；步驟II 化合物3用保護(hù)基保護(hù)胺基得到化合物4 ； 步驟III 化合物5用保護(hù)基保護(hù)羥基得到化合物6 ；步驟IV 化合物4在縮合劑和催化劑的存在下，在沒有溶劑條件下或在溶劑中與化合 物6反應(yīng)得到化合物7 ；步驟V 化合物7與脫保護(hù)劑反應(yīng)得到式(1)所示的益母草堿類似物。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中步驟I中所述的酸選自鹽酸、氫溴酸、磷酸、醋酸 或硫酸。
4.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中步驟II中所述的胺基保護(hù)基選自芐氧羰基或叔丁氧羰基。
5.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中步驟III中所述的羥基保護(hù)基選自氯芐或溴芐。
6.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中步驟IV中所述的縮合劑是1-乙基_(3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽或二環(huán)己基碳二亞胺。
7.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中步驟IV中所述的催化劑為4-二甲氨基吡啶。
8.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其中步驟V中所述的脫保護(hù)劑是甲酸或三氟乙酸。
全文摘要
本發(fā)明屬藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種新的益母草堿類似物及其制備方法。本發(fā)明提供的益母草堿類似物具有式(1)的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明以益母草堿為先導(dǎo)化合物，利用計(jì)算機(jī)模擬輔助設(shè)計(jì)使中藥單體和活性氣體分子結(jié)合，在益母草堿的胍基上引入信號(hào)分子硫化氫釋放基團(tuán)，使在體內(nèi)達(dá)到可控性釋放，發(fā)揮傳統(tǒng)中藥單體和活性氣體分子的獨(dú)特的雙重保護(hù)作用。制得的益母草堿，經(jīng)初步試驗(yàn)顯示，其在體外和體內(nèi)均具有對(duì)心肌缺血保護(hù)作用，可進(jìn)一步制備對(duì)心腦血管疾病有治療作用藥物。式中，m為1～6，n為2～3。
文檔編號(hào)A61P9/00GK101928240SQ200910053579
公開日2010年12月29日 申請(qǐng)日期2009年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月22日
發(fā)明者孫遜, 昌軍, 朱依諄, 鄭巍, 闕兆麟, 魏邦國(guó) 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)