專利名稱：一種用于治療脂肪肝病的姜黃清脂丸的制備及醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有活血化瘀之功效姜黃清脂丸的中藥丸劑的制備，特別涉及將姜黃 清脂丸用于脂肪肝病的預(yù)防和治療的新用途。
背景技術(shù)：
姜黃素(Curcumin，Cur)是從姜科姜黃屬植物姜黃(Curcumalonga L.)的根莖中 提取的一種酚類色素，目前已知的主要藥理作用包括抗炎、抗氧化、降血脂、抗動脈粥樣硬 化、抗腫瘤、抗HIV病毒等，且毒性很低。脂肪肝是最常見的彌漫性肝病之一，又稱肝內(nèi)脂肪變性，是各種原因引起的肝細(xì) 胞內(nèi)脂肪堆積的一種代謝性疾病。當(dāng)肝內(nèi)脂肪含量超過肝臟濕重的5%，或顯微鏡下肝組織 病理切片每單位面積見30%以上肝細(xì)胞內(nèi)有脂滴存在時，稱為脂肪肝。脂肪肝會阻礙肝臟 發(fā)揮正常的消化功能，增加肝臟的負(fù)擔(dān)。研究發(fā)現(xiàn)，肝炎、酒精以及藥物對肝臟造成的損傷， 胰島素分泌異常等內(nèi)分泌疾病都可能導(dǎo)致脂肪肝。脂肪肝病(fatty liver disease, FLD)包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎和脂肪性 肝硬化3種類型，在肥胖者中的患病率為50%，其中約30%的患者可逐漸演變?yōu)橹拘愿?纖維化和肝硬化。隨著生活水平的提高和生活方式的改變，F(xiàn)LD已成為嚴(yán)重威脅人們身心 健康的常見疾病。近年來，我國脂肪肝發(fā)病率呈上升趨勢，但由于國內(nèi)尚無治療脂肪肝的理 想藥物，因此，積極尋找高效、安全、廉價的脂肪肝治療藥物越來越受到關(guān)注。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明人經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)姜黃素在制備成姜黃清脂丸可用于預(yù)防及治療脂肪肝。發(fā)明人采用最新工藝將姜黃素制成丸劑，以保證其療效；同時丸劑具有粒徑小， 受消化道輸送食物節(jié)律影響小(如幽門關(guān)閉等)，流動性好，易于分劑量；在胃腸道分布面 積大，生物利用度高，刺激性小，性質(zhì)穩(wěn)定等特點，便于患者長期服用，也利于貯存、攜帶、運 輸；研制姜黃清脂丸用于臨床可更好得為廣大患者提供更好的服務(wù)。發(fā)明人根據(jù)姜黃素本身的物理化學(xué)性質(zhì)，確定并優(yōu)化了姜黃清脂丸的工藝路線及 工藝取姜黃，粉碎成粗粉，照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法(中國藥典2000年版一部 附錄10)，用9倍量85 %乙醇作溶劑，浸漬24小時后進(jìn)行滲漉，滲漉速度為每分鐘3ml (以 1000克藥材計算)。收集相當(dāng)于藥材8倍量的滲漉液，減壓回收乙醇(溫度60°C，真空度 0. 08Mpa)至清膏相對密度為1. 05 1. 10 (60°C測)，加入與藥材等量的lmol/L氫氧化鈉溶 液，靜置8小時以上，分取水層，加3倍量水，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至1 2，濾過，沉淀用蒸 餾水清洗，加入磷酸氫鈣細(xì)粉，混勻，加入淀粉、糊精的混合物，混勻，低溫(50°C )干燥，粉 碎成細(xì)粉(100目篩)，用30%乙醇泛丸成型、滾圓，60°C干燥，選丸，檢查，分裝，即得。對實驗研究優(yōu)選的工藝條件放大生產(chǎn)十批，經(jīng)工藝穩(wěn)定性考察和質(zhì)量穩(wěn)定性研 究，結(jié)果表明所定工藝穩(wěn)定、可行。大多數(shù)研究認(rèn)為FLD是胰島素抵抗綜合征的一部分，胰島素抵抗(IR)是其發(fā)生的主要機制。IR是FLD的一種普遍現(xiàn)象，IR通過增加自由脂肪酸的運輸并影響高胰島素血癥 而刺激組織代謝過程，導(dǎo)致增加肝脂肪的積累；IR是能夠進(jìn)展到脂肪性肝炎的FLD —個主 要特征。降低IR的治療已經(jīng)獲得了一些成功，但為了確定這些干預(yù)治療的效果，還需要大 量安慰劑對照研究，以減少肝脂肪積累的有害作用。大量重復(fù)研究表明，F(xiàn)LD的進(jìn)展與遺傳 因素?zé)o關(guān)，而飲食中的飽和脂肪酸、抗氧化劑的攝入和小腸細(xì)菌的過分生長以及障礙性睡 眠呼吸暫停綜合征可能在其中起了作用。大多數(shù)FLD患者在慢性過程將出現(xiàn)糖尿病或糖耐 量異常，顯著的胰島素抵抗和體重增加與肝纖維化的進(jìn)展相聯(lián)系。蛋白激在介導(dǎo)脂 肪誘導(dǎo)的肝胰島素抵抗中起了一個關(guān)鍵作用，并為2型糖尿病提供了新的治療靶分子。因 此，改善IR是治療FLD的重要因素。許多研究表明，F(xiàn)LD患者血清TNF-a顯著升高，肝組織 中TNF- a表達(dá)顯著增強，并通過TNF-R1和MAPK信號通路而激活JNK激酶；而激活的JNK 激酶使胰島素受體底物-l(IRS-l)上絲氨酸磷酸化，并導(dǎo)致胰島素抵抗的發(fā)生。IR可以直 接通過促進(jìn)脂肪細(xì)胞降解增加，和高胰島素血癥引起肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積；以及改變肝內(nèi)細(xì) 胞因子的表達(dá)，在肝炎、肝硬化等發(fā)生發(fā)展中起重要作用。多數(shù)認(rèn)為IR是多基因細(xì)微變化 疊加效應(yīng)的結(jié)果，胰島素信號傳遞受阻或者減弱時導(dǎo)致胰島素抵抗發(fā)生的根本原因；當(dāng)胰 島素信號與細(xì)胞表面的IR結(jié)合一直到最后靶分子的傳遞過程，任何一個環(huán)節(jié)受損，都有可 能出現(xiàn)胰島素抵抗。肥胖時脂肪組織產(chǎn)生的某些細(xì)胞因子可引起全身性胰島素抵抗以及0細(xì)胞分泌 胰島素功能障礙，如TNF- a可以改變多種蛋白激酶PKC、PKA、MAPK、MAPKK等的活性，直接影 響胰島素信號傳導(dǎo)，使胰島素受體底物蛋白表達(dá)以及與胰島素受體結(jié)合能力均顯著降低， TNF-a可刺激脂肪組織產(chǎn)生PPA，通過PPA的作用間接產(chǎn)生胰島素抵抗；TNF-a還可以刺 激脂肪細(xì)胞分泌瘦素而引起胰島素抵抗。另外，代謝異常導(dǎo)致的高胰島素血癥、高血糖、脂 肪酸等所介導(dǎo)的胰島素作用減弱，可在胰島素信號傳導(dǎo)通路的多個環(huán)節(jié)中發(fā)生。因此，改善 IR對治療FLD提供了一種新的治療方法。許多研究表明，激活的JNK激酶使胰島素受體底 物-l(IRS-l)上絲氨酸磷酸化，并導(dǎo)致胰島素抵抗的發(fā)生。姜黃素是JNK激酶的有效抑制 劑，可以抑制JNK激酶的活性。
具體實施例方式實施例1姜黃清脂丸的制備1、配方姜黃7143g磷酸氫鈣50g糊精60g淀粉 適量姜黃藥材經(jīng)滲漉后收集滲漉液制成清膏作為原料，其原輔料共1000g。2、制備工藝根據(jù)姜黃素本身的物理化學(xué)性質(zhì)，確定并優(yōu)化了姜黃清脂丸的工藝路線及工藝 稱取配方量的姜黃藥材，粉碎成粗粉，照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法(中國藥典2000 年版一部附錄10)，用9倍量85%乙醇作溶劑，浸漬24小時后進(jìn)行滲漉，滲漉速度為每分鐘 3ml (以1000克藥材計算)。收集相當(dāng)于藥材8倍量的滲漉液，減壓回收乙醇(溫度60°C，真空度0. 08Mpa)至清膏相對密度為1. 05 1. 10 (60°C測)，加入與藥材等量的lmol/L氫 氧化鈉溶液，靜置8小時以上，分取水層，加3倍量水，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至1 2，濾過， 沉淀用蒸餾水清洗，加入磷酸氫鈣細(xì)粉，混勻，加入淀粉、糊精的混合物，混勻，低溫(50°C ) 干燥，粉碎成細(xì)粉(100目篩)，用30%乙醇泛丸成型、滾圓，60°C干燥，選丸，檢查，分裝，即得。對實驗研究優(yōu)選的工藝條件放大生產(chǎn)十批，經(jīng)工藝穩(wěn)定性考察和質(zhì)量穩(wěn)定性研 究，結(jié)果表明所定工藝穩(wěn)定、可行。實施例2姜黃清脂丸治療大鼠脂肪肝的實驗脂肪肝病(fatty liver disease, FLD)包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎和脂肪性 肝硬化3種類型，在肥胖者中的患病率為50%，其中約30%的患者可逐漸演變?yōu)橹拘愿?纖維化和肝硬化。隨著生活水平的提高和生活方式的改變，F(xiàn)LD已成為嚴(yán)重威脅人們身心 健康的常見疾病。本研究以高脂飼料飼養(yǎng)并建立FLD大鼠模型，觀察姜黃清脂丸對大鼠FLD 的治療作用。1材料與方法1. 1主要試劑膽固醇(分析純級)購自上海寧銀商務(wù)發(fā)展有限公司；豬油為市場購買；胰島素 放射免疫試劑盒購自北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司；大鼠TNF-a測定試劑盒(ELISA法)購 自上海亞培生物科技有限公司；脂聯(lián)素放射免疫試劑盒為美國Linco Research公司提供； 姜黃清脂丸采用發(fā)明人自制。高脂飼料由10%熟豬油、2%膽固醇和88%普通飼料組成。1. 2試驗動物分組雄性SD大鼠42只，體重120 140g，由成都中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供，適應(yīng) 性飼養(yǎng)1周后，隨機分為兩組(1)正常對照組14只，飼以普通飼料，每只鼠20g ； (2)FLD組 28只，飼以高脂飼料。8周末，處死FLD組大鼠8只和正常對照4只，取肝臟進(jìn)行病理學(xué)檢 查，證實造模成功后，將余下FLD大鼠20只分為兩組(l)FLD對照組10只，繼續(xù)飼以高飼 料，予以等體積生理鹽水灌胃；(2)姜黃清脂丸治療組10只，同樣繼續(xù)飼以高脂飼料，并予 姜黃清脂丸200mg kg-1 d-1灌胃給藥。12周末，禁食12h后處死所有動物，采血分離血 清和肝組織勻漿標(biāo)本；部分肝組織于液氮中速凍后保存于-80°C冰箱用于病理學(xué)檢查。1.3檢測項目和方法(1)血和肝勻漿中TG、TC、HDL-C、LDL-C、空腹血糖(FPG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草 轉(zhuǎn)氨酶(AST)等在全自動生化分析儀上測定；(2)空腹胰島素(FNS)放免法測定，計算胰島素抵抗指數(shù)(H0MA-IR)=[空腹血 糖(FPG) XFNSJ/22. 5 ；(3)血 TNF- a 采用 ELISA 法測定；(4)肝指數(shù)稱重肝重與體重，計算肝重/體重的比值，即為肝指數(shù)；(5)肝脂質(zhì)測定取適量肝組織，在液氮中研成粉末，稱重后加入氯仿-甲醇 (2 1)抽提脂質(zhì)，離心后取上清測定其TG、TC含量，結(jié)果以mg/g肝組織表示；(6)肝組織病理檢查，常規(guī)石蠟包埋、切片，蘇木精-伊紅染色。光鏡下觀察。每 張切片觀察5個視野，對肝脂肪變性程度進(jìn)行分級、評分。脂肪變性占30% 50%為輕度， 50% 75%為中度，> 75%為重度。
1. 4統(tǒng)計方法統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS13. 0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以x士s表示，多組間數(shù)據(jù)比較 采用one-ANOVA法檢驗或單因素方差分析，兩兩比較采用SNK法，P < 0. 05為差異有統(tǒng)計 學(xué)意義。2 結(jié)果2.1FLD模型的建立不同飼料喂養(yǎng)至第8周時，F(xiàn)LD模型組與正常對照組相比，TG、TC和LDL-C都顯著 升高，說明已經(jīng)出現(xiàn)脂肪代謝紊亂；H0MA-IR明顯升高和脂聯(lián)素水平的顯著降低，說明已經(jīng) 存在IR。同時肝功能AST、ALT明顯升高以及肝病理學(xué)檢查表明8只模型大鼠均表現(xiàn)出輕至 中度的脂肪變性，而4只正常對照組大鼠則未見異常，說明已經(jīng)成功建立了大鼠FLD模型。2. 2血脂、肝功能及肝內(nèi)脂質(zhì)含量至12周末，F(xiàn)LD對照組體重、肝濕重、肝指數(shù)和血清TG、TC、ALT、AST以及肝組織 TG、TC、LDL-C含量均顯著高于正常對照組(表1及表2)；姜黃清脂丸治療組血清TG、TC以 及肝濕重、肝指數(shù)以及肝組織TG、TC、LDL-C含量均顯著低于FLD對照組(表1及表2)；姜 黃清脂丸治療組肝功能顯著改善。表1各組大鼠體重、濕重、肝指數(shù)以及肝功能的比較(X ± S,mmol/L)
權(quán)利要求
一種中成藥姜黃清脂丸，包含活性成分姜黃素及藥學(xué)上可接受的輔劑，其特征在于制備用于治療脂肪肝病藥物制劑中的用途。
2.如權(quán)利要求1所述的姜黃清脂丸的制備方法，其步驟如下1)稱取配方量的姜黃，粉碎成粗粉，用9倍量85%乙醇作溶劑，浸漬24小時后進(jìn)行滲 漉，滲漉速度為每分鐘3ml (以1000克藥材計算)；2)收集相當(dāng)于藥材8倍量的滲漉液，減壓回收乙醇至清膏相對密度為1.05 1. 10(60°C測)；3)加入與藥材等量的lmol/L氫氧化鈉溶液，靜置8小時以上，分取水層，加3倍量水， 用鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH值至1 2，濾過，沉淀用蒸餾水清洗；4)加入磷酸氫鈣細(xì)粉，混勻，加入淀粉、糊精的混合物，混勻，低溫50°C干燥，粉碎成細(xì) 粉(100目篩)，用30%乙醇泛丸成型、滾圓，60°C干燥，選丸，檢查，分裝，即得。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于其減壓回收乙醇時溫度為60°C，真空度 為 0. 08Mpa。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有活血化瘀之功效姜黃清脂丸的中藥丸劑的制備方法，姜黃粉碎成粗粉，85％乙醇浸漬24小時后進(jìn)行滲漉，速度為每分鐘3ml，收集滲漉液，減壓回收乙醇，加入1mol/L氫氧化鈉溶液，靜置，分取水層，加3倍量水，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至1～2，濾過，沉淀用蒸餾水清洗，加入磷酸氫鈣細(xì)粉，混勻，加入淀粉、糊精的混合物，混勻，低溫干燥，粉碎成細(xì)粉，用30％乙醇泛丸成型、滾圓，60℃干燥，選丸，檢查，分裝；還公開了將姜黃清脂丸用于脂肪肝病的預(yù)防和治療的新用途。
文檔編號A61K31/12GK101991808SQ20091006035
公開日2011年3月30日 申請日期2009年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月17日
發(fā)明者牛銳, 董凱 申請人:成都永康制藥有限公司