專(zhuān)利名稱(chēng)：一種羅布麻葉提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種羅布麻葉提取物的制備方法。
背景技術(shù)：
中藥羅布麻葉是金絲桃科植物羅布麻Apocynumvenetum的干燥葉。夏、秋二季
采收，曬干。中藥羅布麻葉具有平肝止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗的功能，常用于頭痛眩 暈、脅痛、腹痛、四肢痙攣、血虛萎黃、月經(jīng)不調(diào)、自汗、盜汗等癥。黃酮是羅布麻葉 中一類(lèi)重要的活性成分，由于用一般提取方法提取羅布麻葉所得到的黃酮類(lèi)成分中異槲 皮素、槲皮素、山奈素等成分含量很低，所以如何找到一種方便快捷的提取方法得到異 槲皮素、槲皮素、山奈素含量較高的總黃酮具有重要的研究?jī)r(jià)值和廣泛的應(yīng)用前景。
目前常采用的制備羅布麻葉總黃酮的方法均為直接提取羅布麻葉，再經(jīng)純化制 得羅布麻葉總黃酮。王先榮等在中國(guó)專(zhuān)利(申請(qǐng)?zhí)?00510123187)提出的羅布麻屬植物羅 布麻葉總黃酮提取物、其制備及應(yīng)用；李青山等在中國(guó)專(zhuān)利(申請(qǐng)?zhí)?2110431)提出的羅 布麻有效部位的提取分離方法；楊新波等在中國(guó)專(zhuān)利(申請(qǐng)?zhí)?00610083809)提出的一種 羅布麻提取物的制備方法及其藥物制劑與肝病用途。所述的幾種方法均用一般試劑對(duì)原 材料的固有成分進(jìn)行提取，并不能增加提取物中異槲皮素、槲皮素、山奈素的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了 一種羅布麻葉提取物的制備方法。 本發(fā)明提供了一種羅布麻葉提取物的制備方法，其步驟和條件如下將羅布麻 藥材置于提取容器中，加體積比為30 80%乙醇水溶液提取，用硫酸、硝酸、鹽酸或醋 酸調(diào)節(jié)pH為3 6，乙醇水溶液的加入量ml:羅布麻藥材的質(zhì)量g為5 20，提取溫 度為95t: 30(TC，每次提取時(shí)間為0.5 2小時(shí)，重復(fù)提取1 4次，合并提取液，回 收乙醇后將合并后的提取溶液濃縮至原來(lái)體積的1/4 1/10，濃縮液靜止3 24小時(shí)， 上清液上大孔樹(shù)脂柱，大孔樹(shù)脂的型號(hào)為DIOI、 D130、 AB8或NKA，所述的干燥的大
孔樹(shù)脂質(zhì)量g :羅布麻藥材的質(zhì)量g為i : o.5 i : 2，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂
柱的流出液無(wú)色澄清透明，pH值為7，再用體積比為40% 60%的乙醇水溶液洗脫，洗 脫至乙醇洗脫液無(wú)色澄清透明，收集乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸 膏狀的羅布麻藥材提取物；所述的布麻藥材為羅布麻葉或者羅布麻葉粉末；該羅布麻藥 材含有羅布麻總黃酮，并且該總黃酮中含有異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素和山奈素。
本發(fā)明提供的制備方法得了干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物，用比色法測(cè)定該 提取物的羅布麻總黃酮的含量及該總黃酮中含有異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素和山奈素 的含量。 本發(fā)明提供的制備方法得了干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物為藥用有效成分， 以此有效成分制成藥物制劑的前體，主要用于各種原因?qū)е碌母鞣N程度的抑郁癥。
利用紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)，以不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁為外標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，
3以510nm作為吸收波長(zhǎng)，通過(guò)吸收值來(lái)測(cè)定所得到的粉末中黃酮含量。并且利用高效 液相色譜，通過(guò)色譜峰面積來(lái)比較一般提取方法與本發(fā)明的提取方法所得到的總黃酮中 異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素、山奈素的含量。高效液相色譜儀為Waters(Milford， MA， USA)2690并配備二極管陣列監(jiān)測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為360nm.高效液相色譜條件為色 譜柱為Agilent C18， 250X4.6mm， 5 y m ;流動(dòng)相組成為0.2%冰醋酸水溶液(A)和乙 腈(B).洗脫方式為0-20分鐘13% B; 20-60分鐘13-40% B; 60-90分鐘40-100% B.洗脫速度為0.5ml/min，色譜柱溫度為28°C。 有益效果本發(fā)明提供了一種羅布麻提取物的制備方法，得到干浸膏狀的一種 藥材提取物。提取物的重量為提取用羅布麻重量的7.0-7.8%，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度 計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物中總黃酮含量占提取物的58-70%。經(jīng)高效液 相色譜檢測(cè)證明，該提取方法獲得的羅布麻葉總黃酮中異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素、 山奈素的含量比一般提取方法中增加了5 30倍。此方法方便、高效、易于操作，且成 本低廉，可滿(mǎn)足醫(yī)藥、食品領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)和利用，應(yīng)用、開(kāi)發(fā)價(jià)值極大。


圖1為一般提取方法所得到的羅布麻葉總黃酮的色譜圖，總黃酮的色譜圖中峰l 為蘆丁，峰2為異槲皮素，峰3為金絲桃苷，峰4為槲皮素，峰5為山奈素。色譜圖中 蘆丁含量很高，異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素、山奈素含量很低。 圖2為本發(fā)明提供的提取方法實(shí)施例2提取得到羅布麻葉總黃酮的色譜圖。色 譜圖中峰1 5的成分同圖1。從總黃酮的色譜圖可以看出蘆丁水解，從而使異槲皮素、 金絲桃苷、槲皮素、山奈素的含量顯著提高。
具體實(shí)施方式

實(shí)施例1 將羅布麻葉藥材粉碎，稱(chēng)取100g，置提取容器中，加入1000ml體積比為50X乙 醇水溶液，用硫酸調(diào)節(jié)PH至3，用10(TC的溫度提取，提取4次，每次1小時(shí)，合并提取 液，回收乙醇，濃縮至原來(lái)體積的1/4，濃縮液靜止10小時(shí)，上清液上100g干燥的大孔 樹(shù)脂柱，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂柱的流出液無(wú)色澄清透明，PH值為7，再用體積 比為50%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫至乙醇溶液無(wú)色澄清透明，約5倍柱體積，收集 乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物。提取物 的重量為提取用羅布麻重量的7.2%，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一 種羅布麻葉提取物總黃酮含量為62%
實(shí)施例2 將羅布麻葉藥材粉碎，稱(chēng)取200g，置提取容器中，加入2000ml體積比為60X乙 醇水溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)PH至4，用12(TC的溫度提取，提取3次，每次1.5小時(shí)，合并提 取液，回收乙醇，濃縮至原來(lái)體積的1/5，濃縮液靜止20小時(shí)，上清液上200g干燥的大 孔樹(shù)脂柱，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂柱的流出液無(wú)色澄清透明，PH值為7，再用體 積比為60%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫至乙醇溶液無(wú)色澄清透明，約5倍柱體積，收 集乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物。提取物的重量為提取用羅布麻重量的7.0%，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物總黃酮含量為68%。
實(shí)施例3 將羅布麻葉藥材粉碎，稱(chēng)取150g，置提取容器中，加入2000ml體積比為80%乙醇水溶液，用硫酸調(diào)節(jié)PH至6，用15(TC的溫度提取，提取4次，每次1小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至原來(lái)體積的1/4，濃縮液靜止15小時(shí)，上清液上150g干燥的大孔樹(shù)脂柱，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂柱的流出液無(wú)色澄清透明，PH值為7，再用體積比為50%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫至乙醇溶液無(wú)色澄清透明，約5倍柱體積，收集乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物。提取物的重量為提取用羅布麻重量的7.5%，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物總黃酮含量為58%。
實(shí)施例4 將羅布麻葉藥材粉碎，稱(chēng)取100g，置提取容器中，加入1500ml體積比為50X乙醇水溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)PH至5，用18(TC的溫度提取，提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至原來(lái)體積的1/4，濃縮液靜止20小時(shí)，上清液上150g干燥的大孔樹(shù)脂柱，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂柱的流出液無(wú)色澄清透明，PH值為7，再用體積比為55%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫至乙醇溶液無(wú)色澄清透明，約5倍柱體積，收集乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物。提取物的重量為提取用羅布麻重量的7.3%，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物總黃酮含量為68%。
實(shí)施例5 將羅布麻葉藥材粉碎，稱(chēng)取250g，置提取容器中，加入3000ml體積比為50X乙醇水溶液，用硫酸調(diào)節(jié)PH至6，用20(TC的溫度提取，提取4次，每次2小時(shí)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至原來(lái)體積的1/4，濃縮液靜止24小時(shí)，上清液上300g干燥的大孔樹(shù)脂柱，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂柱的流出液無(wú)色澄清透明，PH值為7，再用體積比為60%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫至乙醇溶液無(wú)色澄清透明，約5倍柱體積，收集乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物。提取物的重量為提取用羅布麻重量的7.8%，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物總黃酮含量為70%。
權(quán)利要求
本發(fā)明提供了一種羅布麻葉提取物的制備方法，其特征在于步驟和條件如下本發(fā)明提供了一種羅布麻葉提取物的制備方法，其步驟和條件如下將羅布麻藥材置于提取容器中，加體積比為30～80％乙醇水溶液提取，用硫酸、硝酸、鹽酸或醋酸調(diào)節(jié)pH為3～6，乙醇水溶液的加入量ml羅布麻藥材的質(zhì)量g為5～20，提取溫度為95℃～300℃，每次提取時(shí)間為0.5～2小時(shí)，重復(fù)提取1～4次，合并提取液，回收乙醇后將合并后的提取溶液濃縮至原來(lái)體積的1/4～1/10，濃縮液靜止3～24小時(shí)，上清液上大孔樹(shù)脂柱，大孔樹(shù)脂的型號(hào)為D101、D130、AB8或NKA，所述的干燥的大孔樹(shù)脂質(zhì)量g羅布麻藥材的質(zhì)量g為1∶0.5～1∶2，先用水洗脫，洗脫至大孔樹(shù)脂柱的流出液無(wú)色澄清透明，pH值為7，再用體積比為40％～60％的乙醇水溶液洗脫，洗脫至乙醇洗脫液無(wú)色澄清透明，收集乙醇水溶液的洗脫液，回收乙醇，干燥，得到干浸膏狀的羅布麻藥材提取物；所述的布麻藥材為羅布麻葉或者羅布麻葉粉末；該羅布麻藥材含有羅布麻總黃酮，并且該總黃酮中含有異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素和山奈素。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種羅布麻葉提取物的制備方法。用酸性乙醇溶液提取羅布麻葉總黃酮及其所含有效成分金絲桃苷、異槲皮素、槲皮素、山奈素。本發(fā)明提供了一種羅布麻提取物的制備方法，得到干浸膏狀的羅布麻葉提取物。提取物的產(chǎn)率為7.0-7.8％，經(jīng)過(guò)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到干浸膏狀的一種羅布麻葉提取物總黃酮含量為58-70％。經(jīng)高效液相色譜檢測(cè)證明，該提取方法獲得的羅布麻葉總黃酮中異槲皮素、金絲桃苷、槲皮素、山奈素的含量比一般提取方法中增加了5～30倍。此方法方便、高效、易于操作，且成本低廉，可滿(mǎn)足醫(yī)藥、食品領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)和利用，應(yīng)用、開(kāi)發(fā)價(jià)值極大。
文檔編號(hào)A61P17/00GK101690739SQ20091006719
公開(kāi)日2010年4月7日 申請(qǐng)日期2009年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月30日
發(fā)明者劉春明, 吳桂梅, 張語(yǔ)遲, 白云鵬, 齊艷娟 申請(qǐng)人:長(zhǎng)春師范學(xué)院