專利名稱：中藥參附強心丸的鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，尤其是一種中藥參附強心丸的鑒別方法。
背景技術(shù)：
參附強心丸由《婦人良方》的參附湯和《金匱要略》的己椒藶黃丸化裁而來， 經(jīng)衛(wèi)生部1989年批準(zhǔn)生產(chǎn)，現(xiàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載在衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第六冊中。 參附強心丸由人參、附子(制)、桑白皮、豬苓、葶藶子、大黃以上六味中藥經(jīng)過粉碎成 細(xì)粉，過篩，混勻，每100g粉末加煉蜜130 150g，制成大蜜丸，即得；本品為棕褐色 的大蜜丸，味甜、微苦；現(xiàn)有技術(shù)參附強心丸的鑒別方法為"(l)取本品，置顯微鏡下 觀察菌絲粘結(jié)成團或散在，大多無色；草酸鈣方晶正八面體形，直徑32 60ym;纖 維無色，多碎斷，直徑13 31iim，壁厚，胞腔線形，石細(xì)胞黃色或黃棕色，類圓形、 長圓形或類多角形，直徑24 52ym;種皮下皮細(xì)胞黃色，多角形或長多角形，壁稍 厚；草酸鈣簇晶大，直徑60 140iim; (2)取本品4丸，加硅藻土 10g，研勻，加氯仿 50ml，置水浴上加熱回流l小時，濾過，棄去濾液，殘渣加甲醇80ml，置水浴上加熱回 流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，加入一預(yù)先裝填好的中性氧化鋁柱 (100 120目，15g，內(nèi)徑10 15mm)頂部，用甲醇溶液(4 — 10)150ml洗脫，收集洗脫 液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇溶液提取2次，每次25ml，合并提 取液，用2X氫氧化鈉溶液25ml洗滌一次，再用水洗至中性；取正丁醇層，蒸干，殘渣 加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂甙RblReRgl，加甲醇制成每lml各 含lmg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典1990年版一部附錄57頁) 試驗，吸取上述兩種溶液各1 2iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以氯仿-醋
酸乙酯-甲酸-水(15 : 40 : 21 : io)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶
液(1 — 10)，在105t:烘3 5分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同的熒光斑點；(3)取本品lg，加甲 醇20ml，浸泡10分鐘，研散，超聲提取15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶 解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30分鐘，放冷，加乙醚提取兩次，每次10ml，合并乙醚 液，蒸干，殘渣加氯仿lml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.1g，同法制 成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典1990年版一部附錄57頁)試驗，吸取上述兩 種溶液各2iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(10 : 1 : 0.1) 為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照 藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同的橙黃色熒光斑點；置氨氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色。"上 述鑒別方法中，鑒別所需時間較長，鑒別效率較低，例如l.桑白皮的纖維組織特征較 明顯可以不用其石細(xì)胞特征補充；2.步驟(2)中水浴上加熱回流1小時，時間過長，影響 了鑒別的效率；3.步驟(3)中的展開劑效果較差，鑒別所需時間較長；另外，在鑒別過程 中烏頭堿也是鑒別的重要指標(biāo)之一，在現(xiàn)有技術(shù)中沒有記載。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種中藥參附強心丸的鑒別方 法，該鑒別方法縮短了鑒別的時間，提高了鑒別的效率，操作簡單，能夠快速、準(zhǔn)確地 鑒別中藥參附強心丸。 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的
本發(fā)明的優(yōu)點及有益效果是 1.本鑒別方法中桑白皮的纖維組織特征較明顯，刪除了現(xiàn)有技術(shù)中石細(xì)胞特征 補充，便于觀察鑒別，提高鑒別效率。 2.本鑒別方法對人參鑒別步驟中水浴上加熱回流的時間由1小時縮短為30分 鐘，在保證鑒別質(zhì)量的同時提高了實驗速度，縮短了鑒別的時間。 3.本鑒別方法對參附強心丸中的大黃鑒別步驟中的展開劑由現(xiàn)有技術(shù)中的苯-醋 酸乙酯-甲酸替換為石油醚-甲酸乙酯-甲酸，展開效果較好，提高了鑒別效率。
4.本鑒別方法中增加了桑白皮鑒別步驟，保障了鑒別結(jié)果的準(zhǔn)確性，提高了使 用中的安全性。 5.本鑒別方法中增加了烏頭堿檢查步驟，保證了本品使用的安全性。 6.本發(fā)明操作簡單，縮短了鑒別的時間，提高了鑒別的效率，能夠快速、準(zhǔn)確
地鑒別中藥參附強心丸。


圖1為中藥參附強心丸中豬苓菌絲的顯微鏡下觀察圖； 圖2為中藥參附強心丸中草酸鈣方晶的顯微鏡下觀察圖； 圖3為中藥參附強心丸中桑白皮纖維的顯微鏡下觀察圖； 圖4為中藥參附強心丸中桑白石細(xì)胞的顯微鏡下觀察圖； 圖5為中藥參附強心丸中葶藶子種皮內(nèi)表皮細(xì)胞的顯微鏡下觀察圖； 圖6為中藥參附強心丸中大黃草酸鈣簇晶的顯微鏡下觀察圖； 圖7及圖8，該兩份附圖從左至右均為樣品(批號2008001)、樣品(批號
2008002)、樣品(批號E508003)、樣品(批號5080001)、樣品(批號5080002)、樣品(批
號5080003)、人參皂苷Rbl、 Re、 Rgl對照品(中檢所)(merk板)的色譜圖(其中圖7在
日光和圖8在365nm紫外燈下顯色)； 圖9、圖IO，該兩份附圖從左至右均為陰性樣品、樣品(批號2008001)、樣品 (批號2008002)、樣品(批號E508003)、樣品(批號5080001)、樣品(批號5080002)、樣 品(批號5080003)、大黃對照藥材(中檢所)的色譜圖(其中圖9在日光和圖10在365nm 紫外燈下顯色)； 圖ll、圖12，該兩份附圖從左至右均為陰性樣品、樣品(批號2008001)、樣品 (批號2008002)、樣品(批號E508003)、樣品(批號5080001)、樣品(批號5080002)、樣 品(批號5080003)、桑白皮對照藥材(中檢所)的色譜圖，室溫19TC、濕度22%，其中 圖ll為Merk板、圖12為煙臺板； 圖13從左至右陰性樣品、樣品(批號2008001)、樣品(批號2008002)、樣品 (批號E508003)、桑白皮對照藥材(中檢所)的色譜圖(煙臺板)，低溫9t:;
圖14從左至右陰性樣品、樣品(批號2008001)、樣品(批號2008002)、樣品 (批號E508003)、桑白皮對照藥材(中檢所)的色譜圖(煙臺板)，高濕74%;
圖15從左至右陰性樣品，樣品(批號2008001)、樣品(批號2008002)、樣品 (批號E508003)、樣品(批號5080001)、樣品(批號5080002)、樣品(批號5080003)、烏 頭堿對照品2iig、 0.2iig、 0.5iig、 liig、 2iig、 4iig、 6iig的色譜圖。
具體實施例方式
本發(fā)明通過以下實施例進一步詳述。需要說明的是下述實施例是說明性的， 不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發(fā)明的保護范圍。
實施例1 —種中藥參附強心丸的鑒別方法，包括對參附強心丸的顯微鑒別、對參附強心 丸中的人參鑒別、對參附強心丸中的大黃鑒別、對參附強心丸中的桑白皮鑒別。其中對 參附強心丸的顯微鑒別步驟如下
取參附強心丸置顯微鏡下觀察 桑白皮纖維無色，多碎斷，直徑13iim，壁厚，胞腔線形； 豬苓菌絲黏結(jié)成團，大多無色；草酸鈣方晶正八面體形，直徑32 P m ; 葶藶子種皮內(nèi)表皮細(xì)胞黃色，多角形或長多角形，壁稍厚； 大黃草酸鈣簇晶大，直徑60iim。
其中對參附強心丸中的人參鑒別步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸4丸，加硅藻土10g，研勻，加三氯甲烷 50ml，加熱回流30分鐘，濾過，棄去濾液，殘渣加甲醇80ml，加熱回流30分鐘，濾 過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，置中性氧化鋁柱100目，15g，內(nèi)徑10mm上， 用40%甲醇150ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇 提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用2X氫氧化鈉溶液25ml洗滌，棄去氫氧化鈉溶 液，正丁醇液再用水洗至中性，分取正丁醇層，蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供 試品溶液。對照品溶液的制備取人參皂苷Rbl對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷 Rgl對照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液；
采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液以及對照品溶液各2iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，
以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸-水(15 : 40 : 21 : io)為展開劑，展開，取出，晾干，噴
以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。
其中對參附強心丸中的大黃鑒別步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸2.5g，剪碎，加甲醇20ml，浸泡10分鐘，超 聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30 分鐘，放冷，用乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷lml使 溶解，作為供試品溶液。
對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材O.lg，同法制成對照藥材溶液；
6
采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取上供試品溶液以及對照藥材溶液各2iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板 上，以石油醚3(TC-甲酸乙酯-甲酸(15 : 5 : l)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾 干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同的橙黃色熒光斑點；置氨蒸氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色。
其中對參附強心丸中的桑白皮鑒別步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸3丸，剪碎，加飽和的碳酸鈉溶液30ml，超 聲處理30分鐘，濾過，取濾液或上清液加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，靜置30分鐘，用乙酸 乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為
供試品溶液。 對照藥材溶液的制備取桑白皮對照藥材2g，加飽和的碳酸鈉溶液15ml，超聲 處理30分鐘，濾過，取濾液或上清液加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至l，靜置30分鐘，用乙酸乙 酯振搖提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為對 照藥材溶液。 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄 VI B試驗，吸取上供試品溶液以及對照藥材溶液各5 10 ii 1，分別點于同一高效硅膠G 薄層板上，以石油醚6(TC-乙酸乙酯(6 : 4)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈 (365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑 點。
其中該鑒別方法還包括烏頭堿檢查步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸適量，剪碎，取14g，精密稱定，加硅藻土 適量，研勻，加氨試液10ml，小心拌勻，放置2小時，再加乙醚100ml，超聲處理5分 鐘，靜置24小時，分取乙醚液，蒸干，殘渣加無水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；
對照品溶液的制備取烏頭堿對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每lml 含lmg的溶液，作為對照品溶液； 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，精密吸取供試品溶液16iU、對照品溶液2iU，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以甲苯-乙酸乙酯-二乙胺(14 : 4 : l)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀 試液及亞硝酸鈉乙醇試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點應(yīng) 小于對照品的斑點或不出現(xiàn)斑點。
實施例2 —種中藥參附強心丸的鑒別方法，其方法包括對參附強心丸的顯微鑒別，對參 附強心丸中的人參鑒別，對參附強心丸中的大黃鑒別，對參附強心丸中的桑白皮鑒別， 其中對參附強心丸的顯微鑒別步驟如下
取參附強心丸置顯微鏡下觀察 桑白皮纖維無色，多碎斷，直徑26iim，壁厚，胞腔線形； 豬苓菌絲黏結(jié)成團，大多無色；草酸鈣方晶正八面體形，直徑60 P m ; 葶藶子種皮內(nèi)表皮細(xì)胞黃色，多角形或長多角形，壁稍厚； 大黃草酸鈣簇晶大，直徑140 ii m。
其中對參附強心丸中的人參鑒別步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸4丸，加硅藻土10g，研勻，加三氯甲烷 50ml，加熱回流30分鐘，濾過，棄去濾液，殘渣加甲醇80ml，加熱回流30分鐘，濾 過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，置中性氧化鋁柱120目，15g，內(nèi)徑15mm上， 用40%甲醇150ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇 提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用2X氫氧化鈉溶液25ml洗滌，棄去氫氧化鈉溶 液，正丁醇液再用水洗至中性，分取正丁醇層，蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供 試品溶液。對照品溶液的制備取人參皂苷Rbl對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷 Rgl對照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液。
采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取供試品溶液以及對照品溶液各2 5iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板
上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸-水(15 : 40 : 21 : io)為展開劑，展開，取出，晾干，
噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。
所述對參附強心丸中的大黃鑒別步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸2.5g，剪碎，加甲醇20ml，浸泡10分鐘，超 聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30 分鐘，放冷，用乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷lml使 溶解，作為供試品溶液。
對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材O.lg，同法制成對照藥材溶液； 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI
B試驗，吸取上供試品溶液以及對照藥材溶液各2iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板
上，以石油醚6(TC-甲酸乙酯-甲酸(15 : 5 : l)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾
干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯
相同的橙黃色熒光斑點；置氨蒸氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色。 所述的對參附強心丸中的桑白皮鑒別步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸3丸，剪碎，加飽和的碳酸鈉溶液30ml，超 聲處理30分鐘，濾過，取濾液或上清液加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，靜置30分鐘，用乙酸 乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為
供試品溶液。 對照藥材溶液的制備取桑白皮對照藥材2g，加飽和的碳酸鈉溶液15ml，超聲 處理30分鐘，濾過，取濾液或上清液加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，靜置30分鐘，用乙酸乙 酯振搖提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為對 照藥材溶液。 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取上供試品溶液以及對照藥材溶液各10iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板 上，以石油醚9(TC-乙酸乙酯(6 : 4)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm) 下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
所述的鑒別方法還包括烏頭堿檢查步驟如下 供試品溶液的制備取參附強心丸適量，剪碎，取14g，精密稱定，加硅藻土 適量，研勻，加氨試液10ml，小心拌勻，放置2小時，再加乙醚100ml，超聲處理5分 鐘，靜置24小時，分取乙醚液，蒸干，殘渣加無水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。
對照品溶液的制備取烏頭堿對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每lml 含lmg的溶液，作為對照品溶液。 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，精密吸取供試品溶液16iU、對照品溶液2iU，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以甲苯-乙酸乙酯-二乙胺(14 : 4 : l)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀 試液及亞硝酸鈉乙醇試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點應(yīng) 小于對照品的斑點或不出現(xiàn)斑點。
以下結(jié)合附圖對本發(fā)明再做進一步說明 取本中藥制劑，置顯微鏡下觀察纖維無色，多碎斷，直徑13 26iim，壁 厚，胞腔線形(桑白皮)。菌絲黏結(jié)成團，大多無色；草酸鈣方晶正八面體形，直徑32 60i!m(豬苓)。種皮內(nèi)表皮細(xì)胞黃色，多角形或長多角形，壁稍厚(葶藶子)。草酸鈣 簇晶大，直徑60 140iim(大黃)，結(jié)果見圖l、圖2、圖3、圖4、圖5、圖6。
采用薄層色譜法，以人參皂苷Rbl、 Re、 Rgl為對照品，鑒別本中藥制劑中人 參。經(jīng)檢驗，供試品色譜中，在與人參皂苷Rbl、 Re、 Rgl對照品色譜相應(yīng)的位置上， 均顯相同顏色的斑點，6批樣品均符合規(guī)定。結(jié)果見圖7、圖8。
采用薄層色譜法，以大黃為對照藥材，鑒別本中藥制劑中大黃。經(jīng)檢驗，供試 品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點，6批樣品均符合 規(guī)定。結(jié)果見圖9、圖IO。 采用薄層色譜法，以桑白皮為對照藥材，鑒別本中藥制劑中桑白皮。經(jīng)檢驗， 供試品色譜中，在與桑白皮對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品 無干擾，結(jié)果見圖ll。另對本方法進行了耐用性試驗，包括不同薄層板(Merk板和煙臺 板)，低溫及高濕環(huán)境對分離情況的影響，考察結(jié)果圖12、圖13、圖14。結(jié)果上述不同 條件對本項試驗無影響。 采用薄層色譜法，以烏頭堿為對照品，制定本中藥制劑中附子烏頭堿限量檢查 法。本制劑中附子占制成成藥總量的5.5%，制成的供試品溶液附子含量為0.76g/ml，供 試品溶液點樣量16iU，與烏頭堿對照品溶液(lmg/ml)點樣量2iU相當(dāng)。結(jié)果見圖15顯 示，烏頭堿對照品點樣量lPg，能顯示斑點，低于此量，未能檢出。
權(quán)利要求
一種中藥參附強心丸的鑒別方法，其特征在于鑒別方法的步驟是(1)對參附強心丸的顯微鑒別；(2)對參附強心丸中的人參鑒別；(3)對參附強心丸中的大黃鑒別；(4)對參附強心丸中的桑白皮鑒別。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥參附強心丸的鑒別方法，其特征在于所述對參附強 心丸的顯微鑒別步驟如下取參附強心丸置顯微鏡下觀察桑白皮纖維無色，多碎斷，直徑13 26ilm，壁厚，胞腔線形；豬苓菌絲黏結(jié)成團，大多無色；草酸鈣方晶正八面體形，直徑32 60ym;葶藶子種皮內(nèi)表皮細(xì)胞黃色，多角形或長多角形，壁稍厚；大黃草酸鈣簇晶大，直徑60 140 ii m。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥參附強心丸的鑒別方法，其特征在于所述對參附強 心丸中的人參鑒別步驟如下(1) 供試品溶液的制備取參附強心丸4丸，加硅藻土10g，研勻，加三氯甲烷50ml，加熱回流30分鐘，濾過，棄去濾液，殘渣加甲醇80ml，加熱回流30分鐘，濾過， 濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，置中性氧化鋁柱(IOO 120目，15g，內(nèi)徑10 15mm)上，用40X甲醇150ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽 和的正丁醇提取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用2X氫氧化鈉溶液25ml洗滌，棄去 氫氧化鈉溶液，正丁醇液再用水洗至中性，分取正丁醇層，蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶 解，作為供試品溶液；(2) 對照品溶液的制備取人參皂苷Rbl對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rgl 對照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作為對照品溶液；(3) 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VIB 試驗，吸取供試品溶液以及對照品溶液各2 5iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸-水(15 : 40 : 21 : io)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的斑點；置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥參附強心丸的鑒別方法，其特征在于所述對參附強 心丸中的大黃鑒別步驟如下(1) 供試品溶液的制備取參附強心丸2.5g，剪碎，加甲醇20ml，浸泡10分鐘，超 聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加鹽酸lml，置水浴上加熱30 分鐘，放冷，用乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加三氯甲烷lml使 溶解，作為供試品溶液；(2) 對照藥材溶液的制備取大黃對照藥材0.1g，同法制成對照藥材溶液；(3) 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取上供試品溶液以及對照藥材溶液各2iU，分別點于同一高效硅膠G薄層板 上，以石油醚(30 60")-甲酸乙酯-甲酸(15 : 5 : l)的上層溶液為展開劑，展開，取 出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點；置氨蒸氣中熏后，斑點變?yōu)榧t色。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥參附強心丸的鑒別方法，其特征在于所述的對參附 強心丸中的桑白皮鑒別步驟如下(1) 供試品溶液的制備取參附強心丸3丸，剪碎，加飽和的碳酸鈉溶液30ml，超聲 處理30分鐘，濾過，取濾液或上清液加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1 2，靜置30分鐘，用乙 酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作 為供試品溶液；(2) 對照藥材溶液的制備取桑白皮對照藥材2g，加飽和的碳酸鈉溶液15ml，超聲處 理30分鐘，濾過，取濾液或上清液加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1 2，靜置30分鐘，用乙酸 乙酯振搖提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為 對照藥材溶液；(3) 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，吸取上供試品溶液以及對照藥材溶液各5 10iU，分別點于同一高效硅膠G薄 層板上，以石油醚(60 9(TC)-乙酸乙酯(6 : 4)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外 光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的 熒光斑點。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥參附強心丸的鑒別方法，其特征在于所述的鑒別方 法還包括烏頭堿檢查步驟如下(1) 供試品溶液的制備取參附強心丸適量，剪碎，取14g，精密稱定，加硅藻土適量，研勻，加氨試液10ml，小心拌勻，放置2小時，再加乙醚100ml，超聲處理5分鐘， 靜置24小時，分取乙醚液，蒸干，殘渣加無水乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；(2) 對照品溶液的制備取烏頭堿對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每lml含 lmg的溶液，作為對照品溶液；(3) 采用薄層色譜法鑒別采用薄層色譜法依照《中國藥典》2005年版一部附錄VI B試驗，精密吸取供試品溶液16iU、對照品溶液2iU，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以甲苯-乙酸乙酯-二乙胺(14 : 4 : l)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀 試液及亞硝酸鈉乙醇試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的斑點應(yīng) 小于對照品的斑點或不出現(xiàn)斑點。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥參附強心丸的鑒別方法，其方法包括對參附強心丸的顯微鑒別、對參附強心丸中的人參鑒別、對參附強心丸中的大黃鑒別、對參附強心丸中的桑白皮鑒別。本鑒別方法對人參鑒別步驟中水浴上加熱回流的時間由1小時縮短為30分鐘；對參附強心丸中的大黃鑒別步驟中的展開劑由現(xiàn)有技術(shù)中的苯-醋酸乙酯-甲酸替換為石油醚-甲酸乙酯-甲酸；增加了桑白皮鑒別步驟及烏頭堿檢查步驟。本發(fā)明操作簡單，保證了使用的安全性，縮短了鑒別的時間，提高了鑒別的效率，能夠快速、準(zhǔn)確地鑒別中藥參附強心丸。
文檔編號A61P9/00GK101690748SQ200910070398
公開日2010年4月7日 申請日期2009年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月9日
發(fā)明者劉彤, 孫寶珍, 李妍, 王志強, 賀云杰 申請人:天津中新藥業(yè)集團股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠