專利名稱：毛脈酸模提取物及其有效部位在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。具體涉及毛脈酸模提取物及其有效部位在制備抗腫瘤 藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是危害人類健康的主要疾病，據(jù)WHO統(tǒng)計，在全世界50多億人口中平均 每年死于惡性腫瘤者達(dá)690萬人，新發(fā)病例為870萬例，且數(shù)字還在逐年增加，已成為繼心 血管疾病之后居各類疾病死亡率的第二致死病因。惡性腫瘤的治療雖然取得了很大進(jìn)展， 但是目前還是缺乏理想的治療藥物，無法滿足臨床需要，為此惡性腫瘤被視為難治疾病，科 學(xué)工作者仍在不斷尋找安全有效的抗腫瘤藥物。毛脈酸模Rumex gmelini Turcz. ex Ledeb.為蓼科酸模屬多年生草本植物，民間 以根入藥。該植物廣泛分布于黑龍江省大小興安嶺及張廣才嶺東部山區(qū)，資源十分豐富。臨 床上對淋病、上呼吸道感染、癬和瘡毒有確切療效。經(jīng)發(fā)明人研究，毛脈酸模中含有白藜蘆 醇及白藜蘆醇苷等二苯乙烯類成分，大黃酚、大黃酚苷、酸模素、大黃素、大黃素甲醚等蒽醌 類成分及黃銅類化合物，通過藥效學(xué)研究表明毛脈酸模提取物和毛脈酸模有效部位對治療 惡性腫瘤非常有效。但在文獻(xiàn)中未見關(guān)于毛脈酸模提取物和其有效部位與惡性腫瘤有關(guān)的 治療活性的藥理學(xué)研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是研究毛脈酸模提取物的藥效，設(shè)計毛脈酸模提取物在 制藥中的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一、本發(fā)明提供了毛脈酸模提取物及其有效部位，該有效部位包括二苯乙烯類和 多糖類成分。1、毛脈酸模50%乙醇提取物的制備工藝將干燥的毛脈酸模根粉碎成最粗粉，稱取一定的重量加入到索氏提取器中；用 70ml50%的乙醇在保持液體微沸的溫度下連續(xù)回流提取4小時；待提取液冷卻后過濾，在 常壓下50 60°C蒸干；將得 的干膏按常規(guī)方法將其粉碎成粉狀，得到毛脈酸模50%乙醇 提取物。2、毛脈酸模水提取物的制備工藝取毛脈酸模藥材干燥根50g，粉碎后加入8倍量的水，熱回流提取2次，每次lh，趁 熱過濾，合并濾液。在60°C水浴上蒸干，得到毛脈酸模水提取物。3、毛脈酸模中二苯乙烯類成分的制備工藝取毛脈酸模干燥根粗粉，加70%乙醇加熱回流提取3次，分別為3h、2h、lh，抽濾， 合并濾液，60°C水浴上蒸干，得到粗提物。將所得粗提物利用hpd450大孔吸附樹脂富集二苯乙烯類成分上樣濃度0. 4g/ml，樹脂柱徑高比為1 10，上清以2BV/h通過樹脂。收集30%乙醇洗脫物，減壓回收溶劑
至干，得二苯乙烯類粗品。以80 100目的聚酰胺柱層析純化所得粗品，工藝條件為上樣濃度0. 2g/ml，最 佳上樣量為藥材與干樹脂重量比為1 1，用30%乙醇以2BV/h流速洗脫，收集2BV 7BV 的洗脫液減壓回收溶劑至干，得毛脈酸模二苯乙烯類成分提取物。所制備樣品中二苯乙烯 類成分的含量達(dá)50%以上。4、毛脈酸模中多糖類成分的制備工藝取毛脈酸模干燥根粗粉500g，加入8倍量的75%的乙醇，加熱回流提取3次，分別 為？！！二！^讓，趁熱抽濾，合并濾液。在60°C水浴上蒸干，通過AB-8大孔樹脂，收集水洗脫部 位減壓干燥得毛脈酸模多糖，通過含量計算多糖含量為60%以上。二、本發(fā)明涉及的毛脈酸模提取物及其有效部位的藥效學(xué)實驗結(jié)果如下(一 )毛脈酸模提取物體內(nèi)抑制S180腫瘤藥效學(xué)實驗實驗材料1、動物和瘤株昆明種小鼠，體重(20士2)g，雄性，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物 中心提供；S180細(xì)胞株由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)腫瘤防治研究所提供。2、實驗用藥毛脈酸模50%乙醇提取物(按實施例一方法制備)和毛脈酸模水提 取物(按實施例二方法制備)，用時以0. 9%的生理鹽水配制為所需濃度。3、陽性對照藥環(huán)磷酰胺(CTX)山西普德藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，200mg/支，批號國 藥準(zhǔn)字H14023686。用時以0. 9%生理鹽水溶解，配成3mg/ml的溶液。方法與結(jié)果小鼠80只，于接種腫瘤細(xì)胞后次日分為生理鹽水組，陽性對照組，毛脈酸模50% 乙醇提取物高(25%)、中(12. 5%)、低(6. 25%)劑量組，毛脈酸模水提取物高(30%)、中 (15%)、低(7. 25% )劑量組，每組10只，連續(xù)灌胃給藥10天，于停藥次日處死小鼠，解剖 皮下瘤塊并稱重，分別計算各組的平均瘤重，并記錄結(jié)果，計算毛脈酸模乙醇提取物的抑瘤 率。結(jié)果見表1。
給藥組平均瘤重
抑瘤率二 (1 - - ) X100%
空白對照組平均瘤重表1毛脈酸模提取物對S180移植性腫瘤生長的影響(ris)
權(quán)利要求
一種毛脈酸模提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的毛脈酸模提取物，其特征在于該提取物包括水提取物和50%乙 醇提取物。
3.如權(quán)利要求2所述的毛脈酸模50%乙醇提取物，其特征在于該提取物通過以下方法 制備得到將干燥的毛脈酸模根粉碎成最粗粉，稱取一定的重量加入到索氏提取器中；用 70ml 50%的乙醇在保持液體微沸的溫度下連續(xù)回流提取4小時；待提取液冷卻后過濾，在 常壓下50-60°C蒸干；將得到的干膏按常規(guī)方法將其粉碎成粉狀，得到毛脈酸模50%乙醇 提取物。
4.如權(quán)利要求2所述的毛脈酸模水提取物，其特征在于該提取物通過以下方法制備得 到取毛脈酸模藥材干燥根50g，粉碎后加入8倍量的水，加熱回流提取2次，每次lh，趁熱 過濾，合并濾液。在60°C水浴上蒸干，得到毛脈酸模水提取物。
5.一種毛脈酸模有效部位在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
6.如權(quán)利要求5所述一種毛脈酸模有效部位在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于 所述的毛脈酸模有效部位，包括從毛脈酸模中提取分離得到的二苯乙烯類成分和多糖類成 分。
7.如權(quán)利要求6所述的一種毛脈酸模有效部位在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在 于二苯乙烯類成分通過以下方法制備得到以二苯乙烯類成分含量為指標(biāo)，將毛脈酸模干 燥根粗粉經(jīng)70%乙醇溶液回流提取后，用hpd450大孔吸附樹脂富集二苯乙烯類成分上 樣濃度0.4g/ml，樹脂柱徑高比為1 10，上清以2BV/h通過樹脂，收集30%乙醇洗脫物蒸 干，得二苯乙烯類粗品。將所得粗品用80-100目的聚酰胺柱層析純化，工藝條件上樣濃度 0.2g/ml，最佳上樣量為藥材與干樹脂重量比為1 1，用30%乙醇以2BV/h流速洗脫。研 究結(jié)果表明聚酰胺柱層析可用于毛脈酸模中二苯乙烯類成分的分離純化，所制備樣品中二 苯乙烯類成分的含量達(dá)50%以上。
8.如權(quán)利要求6所述的一種毛脈酸模有效部位在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在 于多糖類成分通過以下方法制備得到取毛脈酸模干燥根粗粉500g，加入8倍量的75%的 乙醇，加熱回流提取3次，分別為2h，2h，lh，趁熱抽濾，合并濾液，在60°C水浴上蒸干，通過 AB-8大孔樹脂，收集水洗脫部位減壓干燥得毛脈酸模多糖，通過含量計算多糖含量為60% 以上。
9.如權(quán)利要求2所述的毛脈酸模提取物，其特征在于該提取物包括白藜蘆醇、白藜蘆 醇苷、大黃酚、大黃酚苷、酸模素、大黃素、大黃素甲醚。
10.一種權(quán)利要求1-9任一項所述的毛脈酸模提取物及其有效部位在制備抗腫瘤藥物 中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及毛脈酸模提取物及毛脈酸模有效部位在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明確定了毛脈酸模有效部位的分離與富集工藝，應(yīng)用動物移植性腫瘤模型和人腫瘤細(xì)胞體外篩選為篩選手段，對毛脈酸模的提取物及毛脈酸模中二苯乙烯類部位、多糖類部位進(jìn)行了研究，證實它們能顯著抑制小鼠移植性腫瘤S180、H22及U14的生長，并具有抑制人腫瘤細(xì)胞HepG-2、MCF-7、A549等生長的作用。
文檔編號A61K36/70GK101953900SQ20091007255
公開日2011年1月26日 申請日期2009年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月21日
發(fā)明者侯素云, 唐先明, 王振月, 王謙博, 陳智巖, 高寧 申請人:王振月