專利名稱：一種藥物的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到一種藥物的質(zhì)量控制方法，特別地，涉及一種藥物高效毛細(xì)管電泳 指紋圖譜法的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
第ZL200410048292. 2號(hào)專利申請(qǐng)中公開了一種中藥組合物，該中藥組合物由如 下重量份的原料藥制成人參3-10份、水蛭3-11份、土鱉蟲5-10份、乳香(制)1-5份、赤 芍3-9份、降香1-5份、檀香1-5份、全蝎3-9份、蟬蛻3_12份、蜈蚣1_3份、冰片1_7份、炒 酸棗仁3-10份。有益氣養(yǎng)陰，搜風(fēng)解痙的功效，可以有效改善心肌缺血程度，通絡(luò)止痛。為 控制該藥物的質(zhì)量穩(wěn)定性，需要建立該藥物的質(zhì)量控制方法。高效毛細(xì)管電泳(HPCE)是近年來迅速發(fā)展起來的一種重要分析技術(shù)，在中藥鑒 別、中藥分析與質(zhì)量控制等方面顯示出越來越廣闊的應(yīng)用前景。在指紋圖譜方面，HPCE-UV 在藥材鑒別等各方面展示了極其重要的應(yīng)用前景。HPCE技術(shù)的研究和應(yīng)用，給藥物分析領(lǐng) 域和藥品檢驗(yàn)工作帶來了生機(jī)與活力，無疑將對(duì)該專業(yè)技術(shù)的發(fā)展及提高起著重要的推動(dòng)
和促進(jìn)作用。尤其以對(duì)基因工程藥物、中成藥復(fù)方制劑的分析和中藥材種屬的鑒定，令人矚目。目前的HPLC等分析手段在動(dòng)物藥分析測(cè)定上應(yīng)用具有局限性，HPCE卻在分離分 析蛋白多肽方面展現(xiàn)出很好的應(yīng)用前景，在含有多種動(dòng)物藥中藥制劑的分析測(cè)定上，HPCE 作為藥物的質(zhì)量控制方法比傳統(tǒng)的薄層法和高效液相色譜法更為快速準(zhǔn)確。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種藥物的質(zhì)量控制方法，所述方法采用高效毛細(xì)管電泳指紋 圖譜法，測(cè)定條件如下電解緩沖液為20mmol/l硼酸鹽溶液，pH為8. 5，電壓為20kv，溫度25°C，紫外檢測(cè) 波長(zhǎng)為254nm，壓力進(jìn)樣，時(shí)間10秒；供試品溶液的制備方法為稱取所述藥物藥粉0. 2g，置5mL容量瓶中，加入堿性提取液4mL，超聲提取20min 后定容，充分振搖后取適量溶液于1.5mL離心管中，以12000r/min離心lOmin，取上清液 0. 22 μ m膜濾過備用。最后，將測(cè)得的指紋圖譜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件， 設(shè)定參照?qǐng)D譜，將色譜峰自動(dòng)匹配，然后生成對(duì)照?qǐng)D譜，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，相似度均應(yīng)大于 0. 9。所述藥物由如下重量份的原料藥制成人參3-10份、水蛭3-11份、土鱉蟲5-10 份、乳香(制)1-5份、赤芍3-9份、降香1-5份、檀香1-5份、全蝎3-9份、蟬蛻3_12份、蜈 蚣1-3份、冰片1-7份、酸棗仁(炒)3-10份。優(yōu)選地，所述藥物由如下重量份的原料藥制成人參6 檀香2 或者 人參10 檀香2 或者 人參6 檀香2
水蛭10土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2
全蝎7蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
水蛭8土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2
全蝎9蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
水蛭11土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2
全蝎3蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
本發(fā)明的藥物質(zhì)量控制方法，適用于該中藥組合物的任何口服或非口服的固體制
劑，優(yōu)選為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑。本發(fā)明的藥物質(zhì)量控制方法，適用于使用任何方法制備成的上述劑型固體制劑。優(yōu)選為由如下方法制成的膠囊劑a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蝎、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經(jīng)凈選、水洗處理后和凈選炮制后的 制乳香按處方配料，由粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，藥粉細(xì)度達(dá)到80目以上；粗粉后的藥粉經(jīng)各種超 微粉碎技術(shù)進(jìn)行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小于100 μ m ；待粉碎的藥材經(jīng)清洗烘干滅菌 后，配料；c)提取濃縮和干燥工藝降香和檀香先加水提取揮發(fā)油后再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過 濾后，待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，濃縮成醇提浸 膏，水提液過濾與所有的水提液混勻后濃縮成水提浸膏；d)制劑工藝在沸騰制粒干燥機(jī)中加入超微粉碎粉，再將步驟C)所得提取浸膏噴入制粒；將制 成的顆粒經(jīng)整粒，加入冰片細(xì)粉，噴入由降香和檀香提取的揮發(fā)油，混勻后由膠囊充填機(jī)充 填，制成膠囊。8、根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述膠囊劑是由以下步驟制成的a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蝎、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經(jīng)凈選、水洗處理后和凈選炮制后的 制乳香按處方配料，由粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，藥粉細(xì)度達(dá)到80目以上；粗粉后的藥粉經(jīng)各種超 微粉碎技術(shù)進(jìn)行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小于100 μ m ；待粉碎的藥材經(jīng)清洗烘干滅菌 后，配料；c)提取濃縮和干燥工藝降香和檀香先加水提取揮發(fā)油后再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過 濾后，待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，濃縮成醇提浸 膏，水提液過濾與所有的水提液混勻后濃縮成水提浸膏，將浸膏直接噴霧干燥成噴霧粉；d)制劑工藝將超微粉碎粉與步驟C)所得噴霧干燥粉一起加到沸騰制粒干燥機(jī)中，再噴溶媒制成顆粒；將制成的顆粒經(jīng)整粒，加入冰片細(xì)粉，噴入由降香和檀香提取的揮發(fā)油，混勻后 由膠囊充填機(jī)充填，制成膠囊。


圖1 本發(fā)明藥物堿性提取液的高效毛細(xì)管電泳圖譜，提取出的成分較多，而且峰 型較好；圖2 :10批本發(fā)明藥物樣品的指紋圖譜，同時(shí)生成對(duì)照指紋圖譜，共有8個(gè)共有峰。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明藥物質(zhì)量控制方法，即高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜法的具體實(shí)施方式
如下藥物的原料藥重量份比例如下人參6克、水蛭10克、土鱉蟲7克、乳香(制)2克、赤芍5克、降香2克、檀香2克、全蝎7克、蟬蛻7克、蜈蚣1克、冰片5克、酸棗仁(炒)5克。質(zhì)量控制方法1、儀器與材料毛細(xì)管電泳儀；石英毛細(xì)管(75 μ mX 50cm，河北永年光導(dǎo)纖維廠)離心機(jī)(飛 鴿TGL-16C，上海安亭科學(xué)儀器廠)；超聲波清洗器(HS10260D，天津恒奧)；電子天平 (BS2202，德國 Sartorius)。電解緩沖液為20mmol/L硼酸鹽溶液(pH 8. 5)，化學(xué)試劑均為分析純，水為去離子 水。10批次本發(fā)明藥物。2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果2.1毛細(xì)管電泳條件石英毛細(xì)管(75 μ mX 50cm，河北永年光導(dǎo)纖維廠)；電解緩沖液為20mmol/l硼酸 鹽溶液(pH 8. 5)，電壓為20kv，溫度25°C，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，壓力進(jìn)樣，時(shí)間IOs0開機(jī)后先用0. lmol/L NaOH沖洗毛細(xì)管2min，再用去離子水沖洗5min，然后用 緩沖液沖洗至基線平穩(wěn)后開始進(jìn)樣，每2次運(yùn)行之間先以25psi依次用甲醇(1. 5min)，水 (2min)沖洗毛細(xì)管，再以 20psi 依次用 0. lmol/L Na0H(2min)，水(2min),0. lmol/L 的 HCl 溶液(2min)，水(2min)，緩沖液(3min)沖洗毛細(xì)管；實(shí)驗(yàn)結(jié)束用0. lmol/L NaOH沖洗毛細(xì) 管2min，再用水沖洗5min。2. 2樣品供試液的制備稱取本發(fā)明藥物藥粉0. 2g置5mL容量瓶中，加入堿性提取液4mL，超聲提取20min 后定容，充分振搖后取適量溶液于1.5mL離心管中，以12000r/min離心lOmin，取上清液 0. 22 μ m膜濾過備用。本發(fā)明藥物堿性提取液的高效毛細(xì)管電泳圖譜見圖1，提取出的成分較多，而且峰 型較好，遂采用堿性提取液作為提取溶媒。2. 3精密度取一批次本發(fā)明藥物樣品供試液，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄電泳圖。以圖1中的5 號(hào)峰為參照物峰，計(jì)算共有峰的相對(duì)遷移時(shí)間均< 0. 26%，相對(duì)峰面積RSD均< 2. 56%，進(jìn) 樣精密度合格。
2. 4穩(wěn)定性取一批次本發(fā)明藥物樣品供試液，分別在制各樣品的0，2，4，6，8，10，12，14h進(jìn)樣 測(cè)定，共有峰的相對(duì)遷移時(shí)間均< 0. 36%，相對(duì)峰面積RSD均< 2. 60%，樣品在12h內(nèi)基本穩(wěn)定。2. 5重現(xiàn)性取一批次本發(fā)明藥物樣品，分別制備5份供試品，進(jìn)樣檢測(cè)，共有峰相對(duì)遷移時(shí)間 RSD均< 2. 60 %，相對(duì)峰面積RSD均< 3. 00 %，重現(xiàn)性較好。2. 6樣品分析在10批藥物圖譜中，得到10批藥物樣品的指紋圖譜，同時(shí)生成對(duì)照指紋圖譜，共 有8個(gè)共有峰，圖譜見圖2。其中4. 756,6. 007,6. 665,8. 487,9. 585、和16. 718min的峰為 強(qiáng)吸收峰。將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版軟件，設(shè)定參照?qǐng)D 譜，將色譜峰自動(dòng)匹配，然后生成對(duì)照?qǐng)D譜，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，由10批藥物生成指紋圖譜的 共有模式(即對(duì)照?qǐng)D譜)，各樣品與該共有模式比較，其相似度結(jié)果見表1。表1相似度計(jì)算結(jié)果
權(quán)利要求
一種藥物的質(zhì)量控制方法，該藥物由如下重量份的原料藥制成人參3 10份、水蛭3 11份、土鱉蟲5 10份、乳香(制)1 5份、赤芍3 9份、降香1 5份、檀香1 5份、全蝎3 9份、蟬蛻3 12份、蜈蚣1 3份、冰片1 7份、酸棗仁(炒)3 10份，其特征在于所述方法采用高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜法，測(cè)定條件如下電解緩沖液為20mmol/l硼酸鹽溶液，pH為8.5，電壓為20kv，溫度25℃，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，壓力進(jìn)樣，時(shí)間10秒；供試品溶液的制備方法為稱取所述藥物藥粉0.2g，置5mL容量瓶中，加入堿性提取液4mL，超聲提取20min后定容，充分振搖后取適量溶液于1.5mL離心管中，以12000r/min離心10min，取上清液0.22μm膜濾過備用。最后，將測(cè)得的指紋圖譜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件，設(shè)定參照?qǐng)D譜，將色譜峰自動(dòng)匹配，然后生成對(duì)照?qǐng)D譜，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，相似度均應(yīng)大于0.9。
2.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述藥物由如下重量份的原料藥 制成人參6水蛭10 土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2檀香2全蝎7蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
3.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述藥物由如下重量份的原料藥 制成人參10水蛭8 土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2檀香2全蝎9蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
4.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述藥物由如下重量份的原料藥 制成人參6水蛭11 土鱉蟲7乳香(制)2赤芍5降香2檀香2全蝎3蟬蛻7蜈蚣1冰片5酸棗仁(炒)5。
5.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述藥物的制劑劑型 為膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液或丸劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求6所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述膠囊劑是由以下步驟制成的a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蝎、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經(jīng)凈選、水洗處理后和凈選炮制后的制乳 香按處方配料，由粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，藥粉細(xì)度達(dá)到80目以上；粗粉后的藥粉經(jīng)各種超微粉 碎技術(shù)進(jìn)行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小于100 μ m ；待粉碎的藥材經(jīng)清洗烘干滅菌后，配 料；c)提取濃縮和干燥工藝降香和檀香先加水提取揮發(fā)油后再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過濾后， 待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，濃縮成醇提浸膏，水提 液過濾與所有的水提液混勻后濃縮成水提浸膏；d)制劑工藝在沸騰制粒干燥機(jī)中加入超微粉碎粉，再將步驟c)所得提取浸膏噴入制粒；將制成的 顆粒經(jīng)整粒，加入冰片細(xì)粉，噴入由降香和檀香提取的揮發(fā)油，混勻后由膠囊充填機(jī)充填， 制成膠囊。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述膠囊劑是由以下步驟制成的a)按照重量份比例稱取各原料藥；b)藥材粉碎工藝將全蝎、水蛭、蜈蚣、土鱉蟲和蟬蛻五種蟲藥經(jīng)凈選、水洗處理后和凈選炮制后的制乳 香按處方配料，由粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，藥粉細(xì)度達(dá)到80目以上；粗粉后的藥粉經(jīng)各種超微粉 碎技術(shù)進(jìn)行超微粉碎，使藥粉平均粒徑小于100 μ m ；待粉碎的藥材經(jīng)清洗烘干滅菌后，配 料；c)提取濃縮和干燥工藝降香和檀香先加水提取揮發(fā)油后再用水提取，赤芍和酸棗仁加水煎煮，水提液過濾后， 待濃縮成浸膏；人參用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，濃縮成醇提浸膏，水提 液過濾與所有的水提液混勻后濃縮成水提浸膏，將浸膏直接噴霧干燥成噴霧粉；d)制劑工藝將超微粉碎粉與步驟c)所得噴霧干燥粉一起加到沸騰制粒干燥機(jī)中，再噴溶媒制成 顆粒；將制成的顆粒經(jīng)整粒，加入冰片細(xì)粉，噴入由降香和檀香提取的揮發(fā)油，混勻后由膠 囊充填機(jī)充填，制成膠囊。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種藥物的質(zhì)量控制方法，本發(fā)明藥物由人參、水蛭、蜈蚣、全蝎、土鱉蟲、蟬蛻、赤芍、冰片等組成，具有益氣活血、化瘀通絡(luò)的功效。本發(fā)明方法采用高效毛細(xì)管電泳法，作為質(zhì)量控制方法，具有快速準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K35/62GK101991669SQ200910075218
公開日2011年3月30日 申請(qǐng)日期2009年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月27日
發(fā)明者劉興國, 孟作環(huán), 宋劍, 賈繼明 申請(qǐng)人:河北以嶺醫(yī)藥研究院有限公司