專利名稱：用于移植治療骨缺損的復(fù)合物及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及了 一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物及其制造方法。
背景技術(shù)：
隨著生活節(jié)奏的加快，骨壞死的發(fā)生率逐年升高，如激素(包括食品與藥物激素)、外 傷、飲酒、風(fēng)濕、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)病、高血脂等均會(huì)導(dǎo)致骨缺血性壞死，目前全世界患此 病者約3000萬(wàn)人，我國(guó)每年新發(fā)骨壞死的人數(shù)在15—30萬(wàn)之間，累計(jì)需治療人數(shù)在500萬(wàn) 一750萬(wàn)之間。
人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞具有多分化潛能，表達(dá)大量的粘附分子，細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，以及細(xì)胞 因子和生長(zhǎng)因子受體。應(yīng)用基因表達(dá)序列分析和DNA微陣列等先進(jìn)的分子技術(shù)證實(shí)人羊膜 間充質(zhì)細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞的特征性抗原。人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志蛋白 Vimentin、 STR0國(guó)1等；胚胎干細(xì)胞標(biāo)志蛋白SSEA-3+、 SSEA-4+、 SSEA-1、 Nanog、 Oct-4; 神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)志蛋白Nestin、 Musashi-l等；還表達(dá)SOX2、 PAX6等干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物。 在培養(yǎng)的人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞中波形蛋白陽(yáng)性者占97.5%，說(shuō)明波形蛋白是HAMC的主要標(biāo)志 物之一，還可以表現(xiàn)為T(mén)uj 1 (+)、 NF-M ( + )、 GFAP ( + )、軟骨相關(guān)基因(如SOX-9、 SOX-5、 SOX-6)、骨形態(tài)蛋白(BMP) -2、 4和BMP受體，在體外應(yīng)用BMP-2誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)軟 骨形成后可產(chǎn)生2型膠原和蛋白聚糖；將人羊膜間充質(zhì)和BMP-2植入鼠的非軟骨組織內(nèi)或與 膠原支架一起植入骨缺損處后可見(jiàn)人羊膜間充質(zhì)發(fā)生了形態(tài)改變并伴有2型膠原沉積。應(yīng)用 再生醫(yī)學(xué)原理，我們也進(jìn)行了人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞和去細(xì)胞小牛骨復(fù)合物修復(fù)股骨頭缺損的初 步研究，組織形態(tài)學(xué)證實(shí)了股骨頭缺損區(qū)域骨組織的重建。
另外，人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞作為一種多潛能細(xì)胞，體外培養(yǎng)時(shí)，在不同的誘導(dǎo)條件下間 充質(zhì)細(xì)胞能夠向不同的組織分化，不僅可分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和肌肉細(xì)胞 等，而且還可以跨胚層分化，如可以分化為外胚層的神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及內(nèi)胚層的肝細(xì) 胞等。另外，人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源豐富、取材方便、易于分離；擴(kuò)增能力優(yōu)于成人骨髓 間充質(zhì)干細(xì)胞；無(wú)細(xì)胞污染；無(wú)供體創(chuàng)傷等，上述優(yōu)勢(shì)使人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞有望成為人類組 織工程和細(xì)胞治療的理想種子細(xì)胞，因此在組織損傷再生和修復(fù)重建中具有廣闊的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本申請(qǐng)的發(fā)明目的在于利用人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞具有分化成軟骨細(xì)胞的能力，將人羊膜間 充質(zhì)細(xì)胞接種于醫(yī)用骨材料中制成的復(fù)合物，以及制造該復(fù)合物的方法。 為了實(shí)現(xiàn)本申請(qǐng)的發(fā)明目的，本申請(qǐng)采用以下技術(shù)方案
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物，其中該復(fù)合物包括人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞 和醫(yī)用骨材料，在每立方毫米的醫(yī)用骨材料中均勻地接種有105—106個(gè)人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞；
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物，其中所述醫(yī)用骨材料是具有若干個(gè)^^的 骨醫(yī)用載體材料，它的孔徑為200 — 40(Him;
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物，其中所述醫(yī)用骨材料為羥基磷灰石或去 細(xì)胞小牛骨；
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中
(a) .將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞擴(kuò)增到擴(kuò)增到所需的數(shù)目；
(b) .在室溫下，將上述人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞均勻地接種到醫(yī)用骨材料上，每立方毫米的
醫(yī)用骨材料中接種有105 — 106個(gè)人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞；
(c) .在室溫下，將上述接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的醫(yī)用骨材料放置在培養(yǎng)液內(nèi)平衡4
個(gè)小時(shí)以上后，即得到用于移植治療骨缺損的復(fù)合物。
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中所述的步驟(a)是將人 羊膜間充質(zhì)細(xì)胞放置在培養(yǎng)液中，在溫度為36.5-37.5°C、飽和濕度、體積分?jǐn)?shù)為5%的。02 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2—3天更換全部培養(yǎng)液，并棄去未貼壁的細(xì)胞，培養(yǎng)7 — 12天，待人羊 膜間充質(zhì)細(xì)胞達(dá)到80%-90%融合時(shí)，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞從培養(yǎng)液中取出，用25g/L的胰酶 消化。在消化過(guò)程中，用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞消化情況，待65%以上的人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的 胞體回縮并變圓，即終止消化。然后重復(fù)上述操作，將上述細(xì)胞分為若干份進(jìn)行傳代接種培 養(yǎng)，直至達(dá)到所需細(xì)胞的數(shù)量；
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中將步驟(b)中的接種有 人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的醫(yī)用骨材料放置在培養(yǎng)液內(nèi)平衡4個(gè)至8個(gè)小時(shí)后，即得到用于移植治
療骨缺損的復(fù)合物；
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中所述培養(yǎng)液為VDMEM: VF12
為1: 1的DMEM /F12培養(yǎng)液，上述每升培養(yǎng)液中還包括20 ug的堿性成纖維生長(zhǎng)因子和 20 ug的表皮生長(zhǎng)因子；
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中所述醫(yī)用骨材料是具有若干個(gè)孔的骨醫(yī)用載體材料，它的孔徑為200—400pm，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的單個(gè)細(xì)胞t直入 上述骨醫(yī)用載體材料的孔徑內(nèi)；.
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中所述醫(yī)用骨材料為夢(mèng)5基
磷灰石或去細(xì)胞小牛骨；
本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其中所述的室溫為15 —28°C。
本發(fā)明是利用人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞具有分化成軟骨細(xì)胞的能力，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞接種 于醫(yī)用骨材料中制成的復(fù)合物。由于人羊膜組織是人類分娩廢棄物，并且是人羊膜間充質(zhì)細(xì) 胞的主要來(lái)源，用人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞來(lái)制成移植治療骨缺損的復(fù)合物能夠規(guī)避和解決臨床應(yīng) 用的安全性問(wèn)題，以及相關(guān)的倫理和社會(huì)學(xué)問(wèn)題，并且用人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞制成的用于移植 治療骨缺損的復(fù)合物與現(xiàn)有的用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞制成的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物豐目比 具有來(lái)源豐富、成活率高、取材方便、易于分離、低免疫原性和無(wú)細(xì)胞污染等優(yōu)點(diǎn)，其J廣增 能力優(yōu)于成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞比現(xiàn)有的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在移植治療骨缺損中的優(yōu)勢(shì)
在成年機(jī)體中，間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)存在于多種組織中，如骨髓、脂肪組織，f旦提 取相當(dāng)困難。目前MS^的主要來(lái)源為成人骨髓，但成人骨髓MSCs (bonemarrow-MSCs， BM-MSCs)鄰胞數(shù)量極少，Pittenger等發(fā)現(xiàn)僅0.001%~0.01%的經(jīng)過(guò)密度梯度分離的單核細(xì) 胞產(chǎn)生可塑性的貼壁細(xì)胞克隆，并且增殖分化潛能隨年齡的增大而下降，病毒感染率較高， 供者M(jìn)SCs的采集須行骨髓穿刺術(shù)，使來(lái)源受到限制。而人類羊膜作為胚胎發(fā)育的早期產(chǎn)物， 無(wú)論從解剖結(jié)構(gòu)還是在發(fā)育行為上，都包含有較為幼稚的胚胎干細(xì)胞及趨于成熟的成體干細(xì) 胞成分；羊膜組織在胎兒娩出后即完成使命，對(duì)其研究不會(huì)涉及倫理道德問(wèn)題；由于羊膜MSC 是來(lái)源于胎兒的產(chǎn)物，暴露于母體免疫系統(tǒng)監(jiān)視下，MSCs表面人類白細(xì)胞抗原(human leucocyte antigen, HLA) -A、 B、 C低表達(dá)，不表達(dá)HLA-DR，從羊膜分離出MSCs樣細(xì) 胞，經(jīng)體外擴(kuò)增后成功植入新生大鼠和豬體內(nèi)。上述優(yōu)勢(shì)使人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(hAMCs)有 望成為人類組織工程和細(xì)胞治療的理想種子細(xì)胞。


圖1為本發(fā)明的一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法的示意圖2為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到羊的骨缺損區(qū)域后，用抗人線粒體抗
體免疫組織化學(xué)染色后得到的圖片，圖中深色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞群，提示羊股骨頭缺損區(qū)域內(nèi)
存在人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞；
圖3為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到羊的骨缺損區(qū)域后，用蘇木素-伊紅染色由人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞移植治療羊股骨頭缺損的區(qū)域；圖中深色染色為載體材料，淺色為新
生軟骨組織；
圖4為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到羊的骨缺損區(qū)域后，用甲苯胺蘭染色
由人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞移植治療羊股骨頭缺損的區(qū)域；圖中深色為新生軟骨細(xì)胞；
圖5為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到骨缺損組織后，用骨橋素染色對(duì)該組織 進(jìn)行染色，在400倍視野顯微鏡下所得到的圖像，圖中顯示了移植區(qū)沿新生骨組織排歹lf的抗 骨橋素抗體染色陽(yáng)性細(xì)胞，說(shuō)明成骨細(xì)胞分化成熟活躍
圖6為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到骨缺損組織后，用骨鈣素染色》t該組 織進(jìn)行染色，在400倍視野顯微鏡下所得到的圖像，圖中顯示了移植區(qū)大量骨鈣素染色陽(yáng)性 細(xì)胞，說(shuō)明移植區(qū)有大量成熟成骨細(xì)胞，新骨形成活躍；
圖7為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到骨缺損組織后，用抗VIII因子對(duì)該組織 進(jìn)行染色，在400倍視野顯微鏡下所得到的圖像，圖中顯示了移植區(qū)內(nèi)沿新生血管壁可見(jiàn)大 量抗VIII因子抗原染色陽(yáng)性的血管內(nèi)皮細(xì)胞，提示血管生成活躍。
具體實(shí)施例方式
如圖1所示，本發(fā)明制造用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的方法，包括以下步驟-
(a) 將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1放置在培養(yǎng)液3中，在溫度為36.5-37.5°C、飽和濕度、體 積分?jǐn)?shù)為5%的。02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2—3天更換全部培養(yǎng)液3，并棄去未貼壁的細(xì)胞，培 養(yǎng)7—12天，待人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1達(dá)到80%-90%融合時(shí)，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1從培養(yǎng) 液3中取出。用25g/L的胰酶消化，在消化過(guò)程中，用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞消化情況，待65 %以上的人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1的胞體回縮并變圓，即終止消化。然后重復(fù)上述操作，將上述 細(xì)胞分為若干份進(jìn)行傳代接種培養(yǎng)，直至達(dá)到所需細(xì)胞數(shù)量；
(b) .在室溫下，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1均勻地接種到羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨2上， 每立方毫米的羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨2中接種有105—106個(gè)人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1;
(c) .在室溫下，將上述接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1的羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨2放 置的培養(yǎng)液3內(nèi)平衡4個(gè)小時(shí)以上后，最好為4至8個(gè)小時(shí)，即得到用于移植治療骨缺損的 復(fù)合物。
所述培養(yǎng)液3為VDMEM: VFu為1: 1的DMEM/F12培養(yǎng)液，上述每升培養(yǎng)液中還包括 20 ug的堿性成纖維生長(zhǎng)因子和20 ug的表皮生長(zhǎng)因子；上述培養(yǎng)液要符合HG/T 3935-2007
的規(guī)定。
上述的室溫通常是指溫度為15—28'C，由于羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨2是具有若干個(gè)孔的骨醫(yī)用載體材料，它的孔徑通常為200—400pm，人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1單個(gè)細(xì)胞的直徑通 常為200pm,將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1的單個(gè)細(xì)胞接種到羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨2的孔《5 內(nèi)后，人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1的單個(gè)細(xì)胞與羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨結(jié)合后，可以分化成軟 骨細(xì)胞。接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1的羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨2在培養(yǎng)液3中平衡4至 8個(gè)小時(shí)后，人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞與羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨結(jié)合并且開(kāi)始分化。對(duì)于骨缺 損的患者來(lái)說(shuō)，首先對(duì)患者進(jìn)行手術(shù)取出病灶骨，然后，按照病灶骨的形狀，裁取上述復(fù)合 物并將其植入患者骨相應(yīng)位置、固定和縫合，接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1的輕基磷灰石或去 細(xì)胞小牛骨2在植入骨缺損患者的損壞部位后，人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞1會(huì)繼續(xù)分化成軟骨細(xì)胞， 對(duì)患者的骨缺損部位起到修復(fù)作用。
從圖2—4分別為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到羊的骨缺損區(qū)域后，再分別 用抗人線粒體抗體免疫組織化學(xué)染色、用蘇木素-伊紅染色和用甲苯胺蘭染色后，得到的圖2 一4。從圖2中可以得出羊股骨缺損區(qū)域內(nèi)存在人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞；從圖3和圖4中可以看
出移植了本發(fā)明的植有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的復(fù)合物后的羊的骨缺損區(qū)域內(nèi)有新生軟骨細(xì)胞， 可以得出植有本發(fā)明的人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的復(fù)合物可以治療羊的骨缺損。
從圖5 — 7分別為用本發(fā)明的移植治療骨缺損的復(fù)合物移植到骨缺損區(qū)域后，再分別用骨 橋素染色進(jìn)行染色、用骨鈣素染色進(jìn)行染色和用抗VIII因子進(jìn)行染色后，得到的圖5 — 8。
從圖5可以看出成骨細(xì)胞分化成熟活躍；從圖6可以看出移植區(qū)有大量成熟成骨細(xì)胞， 新骨形成活躍；從圖7可以看出血管生成活躍。由此可以得出植有本發(fā)明的人羊膜間充 質(zhì)細(xì)胞的復(fù)合物可以治療骨缺損。
利用上述方法可以制得本發(fā)明的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物。
以上方法只是對(duì)本發(fā)明的解釋，不是對(duì)發(fā)明的限定，本發(fā)明所限定的范圍參見(jiàn)權(quán)利要求， 在不違背本發(fā)明的精神的情況下，本發(fā)明可以作任何形式的修改。
權(quán)利要求
1.一種用于移植治療骨缺損的復(fù)合物，其特征在于該復(fù)合物包括人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)和醫(yī)用骨材料(2)，在每立方毫米的醫(yī)用骨材料中均勻地接種有1*105-106個(gè)人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)。
2. 如權(quán)利要求1所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物，其特征在于所述醫(yī)用骨材料(2)是具有若干個(gè)孔的骨醫(yī)用載體材料，它的孔徑為200—40(^m。
3. 如權(quán)利要求2所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物，其特征在于所述醫(yī)用骨材料(2) 為羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨。
4. 一種如權(quán)利要求1所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于(a) .將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)擴(kuò)增到所需的數(shù)目；(b) .在室溫下，將上述人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(I)均勻地接種到醫(yī)用骨材料(2)上，每 立方毫米的醫(yī)用骨材料中接種有1*105—106個(gè)人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1);(c) .在室溫下，將上述接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)的醫(yī)用骨材料(2)放置在培養(yǎng) 液(3)內(nèi)平衡4個(gè)小時(shí)以上后，即得到用于移植治療骨缺損的復(fù)合物。
5. 如權(quán)利要求4所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于所述的 步驟(a)是將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)放置在培養(yǎng)液(3)中，在溫度為36.5-37.5'C、飽和 濕度、體積分?jǐn)?shù)為5%的(:02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2—3天更換全部培養(yǎng)液(3)，并棄去未貼壁的 細(xì)胞，培養(yǎng)7 — 12天，待人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)達(dá)到80%-90%融合時(shí)，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)從培養(yǎng)液(3)中取出，用25g/L的胰酶消化。在消化過(guò)程中，用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞消 化情況，待65%以上的人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)的胞體回縮并變圓，即終止消化。然后重復(fù)上 述操作，將上述細(xì)胞分為若干份進(jìn)行傳代接種培養(yǎng)，直至達(dá)到所需細(xì)胞數(shù)量。
6. 如權(quán)利要求5所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于將步驟 (b)中的接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1)的醫(yī)用骨材料(2)放置在培養(yǎng)液(3)內(nèi)平衡4個(gè)至8個(gè)小時(shí)后，即得到用于移植治療骨缺損的復(fù)合物。
7. 如權(quán)利要求4至6任一權(quán)利要求所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于所述培養(yǎng)液(3)為V。MEM: VF,2為1: 1的DMEM /F12培養(yǎng)液，上述每升培養(yǎng)液中還包括20 ug的堿性成纖維生長(zhǎng)因子和20 ug的表皮生長(zhǎng)因子。
8. 如權(quán)利要求7所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于所述醫(yī) 用骨材料(2)是具有若干個(gè)孔的骨醫(yī)用載體材料，它的孔徑為200—400pm，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(1〉的單個(gè)細(xì)胞植入上述骨醫(yī)用載體材料的孔徑內(nèi)。
9. 如權(quán)利要求8所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于所述醫(yī) 用骨材料(2)為羥基磷灰石或去細(xì)胞小牛骨。
10. 如權(quán)利要求4所述的用于移植治療骨缺損的復(fù)合物的制造方法，其特征在于所述 的室溫為15—28°C。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于移植治療骨缺損的復(fù)合物及其制造方法，該復(fù)合物包括人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞和醫(yī)用骨材料，在每立方毫米的醫(yī)用骨材料中均勻地接種有1*10⁵-10⁶個(gè)人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞；該制造方法包括將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞擴(kuò)增到所需的數(shù)目，在室溫下，將上述細(xì)胞均勻地接種到醫(yī)用骨材料上；將上述接種有人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞的醫(yī)用骨材料放置在培養(yǎng)液內(nèi)平衡4個(gè)小時(shí)以上后，即得到上述復(fù)合物，本發(fā)明利用人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞具有分化成軟骨細(xì)胞的能力，將人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞接種于醫(yī)用骨材料中制成復(fù)合物，人羊膜間充質(zhì)細(xì)胞與現(xiàn)使用的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比具有來(lái)源豐富、成活率高、取材方便、易于分離、低免疫原性和無(wú)細(xì)胞污染等優(yōu)點(diǎn)，其擴(kuò)增能力優(yōu)于成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
文檔編號(hào)A61L27/38GK101628129SQ20091009130
公開(kāi)日2010年1月20日 申請(qǐng)日期2009年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月18日
發(fā)明者劉艷軍, 吳亦芳, 張向利, 張紅霞, 曹克富, 李榮旗, 月 王, 王瑞蘭, 靜 肖, 范育紅, 郭麗麗 申請(qǐng)人:李榮旗