專利名稱：對乙酰氨基酚所致肝損傷保護(hù)藥物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及三七內(nèi)含物之一的以三七三醇皂苷為有
效成分的對乙酰氨基酚所致的肝損傷保護(hù)藥物，及三七三醇皂苷在保護(hù)對乙酰氨基酚所致 的肝損傷中的用途。
背景技術(shù)：
對乙酰氨基酚(acetaminophen, PAPA)又叫撲熱息痛，是常用的解熱鎮(zhèn)痛藥，在臨 床上，特別是兒科中被廣泛應(yīng)用。同時(shí)，對乙酰氨基酚又是一種肝毒性物質(zhì)，藥物過量容易 引起肝損傷。對乙酰氨基酚是經(jīng)過生物轉(zhuǎn)化后形成親電子代謝物致肝損傷，常用于制作急 性肝功能衰竭模型。 三七是五加科人參屬植物三七(Panax notoginseng F. H. chen)的塊根，主要產(chǎn) 于云南、廣西、四川等地，別名參三七、田七等，味甘、微苦、性溫，具有止血、散瘀、消腫止痛 等功效，三七總皂苷是三七的主要活性成分，藥理作用廣泛，臨床研究證實(shí)三七總皂苷具有 抗癌、抗衰老、抗?jié)?、抗心律失?？寡?、抗纖維化、抗炎鎮(zhèn)痛、降血脂、降血壓、降血糖等 多種生理活性及藥理作用。近年來對三七的進(jìn)一步研究表明，三七總皂苷中的有效成分是 三七三醇皂苷。但未見三七三醇皂苷用于保護(hù)肝損傷作用的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供以三七三醇皂苷為有效成分對乙酰氨基酚所致肝損傷的藥物，及
三七三醇皂苷在對乙酰氨基酚肝損傷中的保護(hù)應(yīng)用。 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的 對乙酰氨基酚所致肝損傷保護(hù)藥物，含有三七三醇皂苷作為有效成分，并含有常 規(guī)藥用載體。 三七三醇皂苷在制備對乙酰氨基酚所致肝損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物 組合物含有0. 1-99% ，優(yōu)選為0. 5-90%的本發(fā)明化合物，其余為藥物學(xué)上可接受的，對人 和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。


圖la為APAP對雄性小鼠的肝損傷作用，其中(*表示。<0. 05，**表示。<0. 01)。
圖lb為APAP對雌性小鼠的肝損傷作用，其中(A表示p <0. 05，林表示p <0. 01)。
圖2a為三七三醇皂苷對雄性小鼠APAP所致肝損傷的保護(hù)作用，其中(**表示p
< 0. 01)。 圖2b為三七三醇皂苷對雌性小鼠APAP所致肝損傷的保護(hù)作用，其中(**表示p
< 0. 01)。
具體實(shí)施例方式
下面描述本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，但是本發(fā)明的內(nèi)容不局限于此。 實(shí)施例1 : 三七三醇皂苷，用少量的匿SO溶解后，按常規(guī)加注射用水，精濾，灌封滅菌制成注 射液。 實(shí)施例2: 三七三醇皂苷，用少量的匿SO溶解后，將其溶于無菌注射用水中，攪拌使溶解，用
無菌抽濾漏斗過濾，再無菌精濾，分裝于安瓿中，低溫冷凍干燥后無菌熔封得粉針劑。
實(shí)施例3: 三七三醇皂苷，按其與賦形劑重量比為9 : 1的比例加入賦形劑，制成粉劑。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用本發(fā)明的試驗(yàn)例來說明本發(fā)明三七三醇 皂苷的藥理作用結(jié)果，但不以此實(shí)驗(yàn)例來限定本發(fā)明。 下面的試驗(yàn)例旨在證實(shí)三七三醇皂苷對于對乙酰氨基酚所致肝損傷的保護(hù)作用。
三七三醇皂苷從昆明制藥集團(tuán)股份有限公司獲得，對乙酰氨基酚購自國藥集團(tuán)化 學(xué)試劑有限公司，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒由上海百祥生物科技有限公司提供。
操作步驟如下 (1)選取小鼠選取4-6周齡左右的昆明種小鼠，體重在25-35g，雌雄各若干，分別 分為對照組和藥物注射組等； (2)藥物注射按設(shè)計(jì)時(shí)間點(diǎn)分別腹腔注射藥物，對照組注射生理鹽水； (3)取血藥物最后一次注射后24小時(shí)后，從小鼠尾部取血，取血用的槍頭、離心
管需要用14% EDTA液潤洗，防止血液凝結(jié)； (4) ALT (alanine aminotransferase)測試用丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒檢測 血液中的ALT ; (5)數(shù)據(jù)處理利用SPSS 13. 0軟件分析數(shù)據(jù)。
實(shí)驗(yàn)例1 : 對乙酰氨基酚300mg/kg對肝的損傷作用 選取4-6周齡的昆明種小鼠雄性13只，5只用于對照組，3只用于APAP 250mg/ kg組，5只用于APAP 300mg/kg組；雌性14只，4只用于APAP 250mg/kg組，6只用于APAP 300mg/kg組。體重范圍為25-35g。按250mg/kg及300mg/kg的量給予APAP組注射對乙 酰氨基酚，對照組注射等量生理鹽水。注射24小時(shí)后，尾部取血于14% EDTA潤洗的1. 5ml 離心管，12000rpm離心10min。取上清20 y 1，用丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒檢測血液中 ALT的變化，具體如下(單位P 1):ii 標(biāo)準(zhǔn)管 測定管
SIX作液 70 70 70
混勻后37。 C準(zhǔn)確保溫25min,再加入 終止液 100 100 100取出，冷至室溫，于酶標(biāo)儀上492nm比色，以空白孔校零，讀取各孔吸光度。
實(shí)驗(yàn)例2 : 三七三醇皂苷保護(hù)乙酰氨基酚對肝的損傷作用 選取4-6周齡昆明種小鼠雄性12只，4只用于對照組，4只用于APAP組，4只用于 APAP+PNS組；雌性12只，4只用于對照組，4只用于APAP組，4只用于APAP+PNS組。體重范 圍為25-35g。每隔24小時(shí)，按100mg/kg的量給予APAP+PNS組注射三七三醇皂苷溶液，對 照組及APAP組注射生理鹽水，連續(xù)7天后，按300mg/kg的量給予APAP組及APAP+PTS組注 射對乙酰氨基酚溶液，對照組注射等量生理鹽水。注射對乙酰氨基酚溶液24小時(shí)后，尾部 取血于14% EDTA潤洗的1.5ml離心管，12000rpm離心10min。取上清20 y l，用丙氨酸氨 基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒檢測血液中ALT的變化，具體如下(單位1): [OO37] 結(jié)果表明三七三醇皂苷對于對乙酰氨基酚所致的肝損傷具有明顯的保護(hù)作用。
空管 標(biāo)準(zhǔn)管 測定管
血清 一 ——20
校mifiL清 一 20——
SII作液 70 7070
混勻后37。 C糊保溫25min,再力flA
終止液 100 100100
權(quán)利要求
對乙酰氨基酚所致肝損傷保護(hù)藥物，含有三七三醇皂苷作為有效成分，并含有常規(guī)藥用載體。
2. 三七三醇皂苷在制備對乙酰氨基酚所致肝損傷保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及三七內(nèi)含物之一的三七三醇皂苷為有效成分的對乙酰氨基酚所致的肝損傷保護(hù)藥物，及三七三醇皂苷在保護(hù)對乙酰氨基酚所致的肝損傷中的用途。三七三醇皂苷可保護(hù)由肝毒性藥物對乙酰氨基酚所致的肝損傷，具有肝損傷的預(yù)防及保護(hù)作用。本發(fā)明拓寬了三七的藥學(xué)功能，在預(yù)防、保護(hù)肝損傷領(lǐng)域有應(yīng)用潛力。
文檔編號A61P1/00GK101695498SQ20091009509
公開日2010年4月21日 申請日期2009年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月26日
發(fā)明者王晟東, 王瀟, 白潔 申請人:昆明理工大學(xué);