專利名稱：一種鈦材料表面涂層的方法及其涂層復(fù)合材料的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)用材料領(lǐng)域，特別涉及一種通過重組膠原蛋白調(diào)控鈦表 面仿生礦化而形成對(duì)成骨細(xì)胞具有良好細(xì)胞相容性的新型涂層的制備方法。該 方法制備的復(fù)合材料可作為骨修復(fù)或替代材料而應(yīng)用于骨組織工程。
背景技術(shù)：
骨骼組織非常復(fù)雜，其主要組成部分是有機(jī)質(zhì)骨膠原和無機(jī)質(zhì)羥基磷灰 石。另外，還有少量的其他有機(jī)物，如蛋白質(zhì)、多糖和脂類等。從材料科學(xué)的 角度出發(fā)，天然骨可被看作是一種彈性高分子聚合物增韌的羥基磷灰石基復(fù)合 材料。正是因?yàn)楣墙M織具有如此精微復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，到目前為止臨床上對(duì)大塊骨 缺損的醫(yī)治仍是一個(gè)研究的難點(diǎn)，多年來臨床應(yīng)用的骨修復(fù)技術(shù)主要采取自體 骨移植和異體骨移植，然而自體骨移植受自身供體有限性的限制且給患者增加 痛苦，異體骨移植存在抗原性的問題。
隨著科技的進(jìn)步，骨修復(fù)材料的開發(fā)和應(yīng)用為骨移植提供新的骨源，其中 傳統(tǒng)的骨修復(fù)材料(如各種以金屬、陶瓷或高分子制造的人工骨替代材料等) 也已應(yīng)用于臨床，但多數(shù)是作為永久植入體使用，它們不能參與人體的新陳代 謝，因而長(zhǎng)期效果往往不盡人意。具有生物相容性、骨誘導(dǎo)性等生物學(xué)特性的 骨替代材料研究和制備已成為當(dāng)今世界生物材料科學(xué)研究中的前沿課題，而膠 原蛋白、羥基磷灰石和金屬鈦是目前備受關(guān)注的三種骨修復(fù)材料。
膠原蛋白由多糖蛋白分子組成，是結(jié)締組織的主要蛋白成分。膠原蛋白具 有良好的生物相容性、生物降解性和細(xì)胞黏附性能等諸多功能，在生物醫(yī)用材 料和組織工程等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。但是天然膠原蛋白來源有限，且具
有高感染性和免疫排斥反應(yīng)的潛在危險(xiǎn)(DuCL， WangMQ， Liu JY, Pan ML， Cai YR， Yao JM. Improvement of thermostability of recombinant collagen-like protein by incorporating a foldon sequence. Appl Microbiol Biotechnol 2008; 79:195-202)。羥基磷灰石是骨基質(zhì)中無機(jī)鹽的主要化學(xué)成分，化學(xué)式為CalO(P04)6卿2，簡(jiǎn)稱HA，密度為3. 16g/cm，折射率是1. 64 1. 65， Ca/P 原子比為1.67。由于羥基磷灰石具有良好的生物相容性、生物活性、骨傳導(dǎo) 性及其與人體骨礦物相組分的相似性，而被廣泛用于生物醫(yī)用材料領(lǐng)域。然而 單一組分的羥基磷灰石燒結(jié)性能差，作為種植材料其硬度較低、韌性較差、力 學(xué)性能不足，致使其難以承受負(fù)荷或沖擊，因而限制了其在臨床上的應(yīng)用。為 了提高羥基磷灰石陶瓷材料的力學(xué)性能，許多學(xué)者采用與其他材料復(fù)合的方法 來提高羥基磷灰石的性能。而鈦及合金表面會(huì)自發(fā)形成均勻致密的二氧化鈦氧 化膜，其介電常數(shù)與水相當(dāng)，因此具有較好的生物性能，且具有較高的強(qiáng)度和 斷裂韌性，是臨床應(yīng)用的金屬植入體中綜合性能最為優(yōu)異的生物醫(yī)用材料。但 它們?nèi)匀痪哂猩锒栊?，與骨的結(jié)合屬于機(jī)械鎖合。且釋放出的金屬元素會(huì)引 起細(xì)胞出現(xiàn)炎癥反應(yīng)或壞死，導(dǎo)致植入失敗(Xiong JY， Li YC， Wang XJ， Hodgson P， Wen CE. Mechanical properties and bioactive surface modification via alkali—heat treatment of a porous Ti-18Nb-4Sn alloy for biomedical applications. Acta Biomaterialia 2008; 4:1963—8)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)鈦材料作為骨修復(fù)材料的缺陷，采用重組類人膠原 蛋白來調(diào)控鈦基體上羥基磷灰石的生成，從而制備出一種新型的對(duì)成骨細(xì)胞具
有良好細(xì)胞相容性的鈦表面生物活性涂層材料，包括以下步驟
(1) 將鈦片依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲清洗各30min;
(2) 將清洗后的鈦片放入5mol/L的Na0H溶液中，80。C處理24h;取出 鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于40。C下干燥；
(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以10°C/min，升溫至60(TC，保溫?zé)崽幚?lh，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片；
(4) 配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液；
(5) 將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的 1.5倍的仿生液，并于37。C下靜置2 14天，每12h換一次1.5xCSBF液；
(6) 將步驟(5)中浸泡于1.5xCSBF中的鈦片取出，用去離子水清洗， 自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層，該涂層為重組膠原蛋白-羥基磷灰 石復(fù)合涂層。所述步驟(1)中的鈦片為10x10x1腿3的鈦片。
所述鈦片包括純鈦金屬、鎳鈦合金、鈦絡(luò)合金或其它鈦合金。
所述步驟(4)配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液按下表1L仿生 液中包含的成分，PH值為7.4，由去離子水定容，得到含有重組膠原蛋白的 1.5倍的仿生液(簡(jiǎn)稱:1.5xCSBF溶液);
成分用量
NaCl12, 0540克
NaHC030. 5280克
KC10. 3375克
K2HP04 3H200. 3450克
MgCl2 6H200. 4665克
1 M HC115
CaCl20. 4440克
Na2S040. 1080克
C4HuN03 (Tris)9. 0945克
1 M HC150 mL
重組膠原蛋白0.5克
所述步驟(4)用1M鹽酸調(diào)pH至7.4。 更進(jìn)一步-
(1) 將10x10x1 mm3的鈦片依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲 清洗各30min;
(2) 將清洗后的鈦片放入5mol/L的NaOH溶液中，80。C處理24h;取出 鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于4(TC下干燥；
(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以1(TC/min，升溫至60(TC，保溫?zé)崽幚?lh，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片；
(4) 配制含有重組膠原蛋白的1.5倍的仿生液按下表依次稱量相應(yīng)的 成分，并按表中的順序逐一溶解在去離子水中，用1M鹽酸調(diào)pH至7.4，定容 至1L，為1.5xCSBF溶液;_
成分 用量NaCl12. 0540克
NaHC030. 5280克
KC10. 3375克
K2HP04 3H200. 3450克
MgCl2 6H200. 4665克
1 M HC115 mL
0. 4440克
Na2S040. 1080克
C4HuN03 (Tris)9. 0945克
1 M HC150
重組膠原蛋白0. 5克
(5) 將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的 1.5xCSBF溶液，并于37。C下靜置2 14天，每12h換一次1. 5xCSBF液；
(6) 將步驟(5)中浸泡于1.5xCSBF中的鈦片取出，用去離子水小心清 洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層，該涂層為重組膠原蛋白-羥基 磷灰石復(fù)合涂層。
本發(fā)明的方法制備的具有重組膠原蛋白-羥基磷灰石復(fù)合涂層的鈦復(fù)合材料。
本發(fā)明的鈦復(fù)合材料作為骨修復(fù)或替代材料而應(yīng)用于骨組織工程。
本發(fā)明所形成的涂層是納米羥基磷灰石晶體與重組膠原蛋白的復(fù)合物，具 有天然骨中的兩個(gè)主要的組成成分，具有促進(jìn)細(xì)胞黏附、增殖和分化的功能。 制備的鈦復(fù)合材料可作為骨修復(fù)或替代材料而應(yīng)用于骨組織工程。


圖1為本發(fā)明中鈦材料在1. 5xCSBF液中浸泡14天后的表面涂層形貌； 圖2為本發(fā)明中對(duì)照例，即在不含重組膠原蛋白的1. 5倍仿生液(1. 5xSBF) 中浸泡14天后的表面涂層形貌；
圖3比較了 MG-63細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同時(shí)間后的密度；圖4比較了 MG-63細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同時(shí)間后堿性磷酸酶(ALP) 活性；
圖5比較了 MG-63細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同時(shí)間后骨鈣素(OC)表達(dá)水平。
具體實(shí)施例方式
1.5倍的仿生液(1.5xCSBF)配方如下
成分用量
NaCl12. 0540克
NaHC030. 5280克
KC10. 3375克
K2,4 3H200. 3450克
MgCl2 6H200. 4665克
1 M HC115
0. 4440克
Na2S040. 1080克
C4HuN03 (Tris)(國藥集團(tuán))9. 0945克
1 M HC150 mL
重組膠原蛋白0. 5克
(ZL200610048946. 0)1. 5倍的仿生液(1. 5xSBF)配方如下(Lin， F. ; Li， Y. C. ; Jin， J. ; Cai， Y. R. ; Wei， K. M. ; Yao， J". M. Deposition behavior and properties of silk fibroin scaffolds soaked in simulated body fluid. Mater. Chem. Phys.，
2008， 111， 92-97. ):_
成分_用量
NaCl 12.0540克
NaHC03 0. 5280克
KC1 0.3375克
K2HP04 3H20 Q.3450克MgCl2 6H20 0. 4665克
1 M HC1 15 mL
CaCl2 0. 4440克
Na2S04 0. 1080克 C4HnN03 (Tris)(國藥集團(tuán))9. 0945克
1 M HC1 50 mL
實(shí)施例1
(1) 將鈦片(10x10x1 mm3)依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲清 洗各30min。
(2) 將清洗后的鈦片放入5mol/L的NaOH溶液中，80。C處理24h。取出 鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于4(TC下干燥。
(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以1(TC/min，升溫至60CTC，保溫?zé)崽幚?lh，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片。
(4) 配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液(1. 5xCSBF)，依次稱量相 應(yīng)的成分，并逐一溶解在去離子水中，用1M鹽酸調(diào)pH至7.4，定容至1L。
(5) 將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的 1.5xCSBF溶液，并于37。C下靜置2天，每12h換一次1. 5xCSBF液。
(6) 將步驟(5)中浸泡于1.5xCSBF中的鈦片取出，用去離子水小心清 洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層。
實(shí)施例2
(1) 將鈦片(10x10x1 mm3)依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲清 洗各30min。
(2) 將清洗后的鈦片放入5 mol/L的NaOH溶液中，80。C處理24h。取出 鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于4(TC下干燥。
(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以KTC/min，升溫至60(TC，保溫?zé)崽幚?lh，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片。
(4) 配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液(1. 5xCSBF)，依次稱量相 應(yīng)的成分，并逐一溶解在去離子水中，用1M鹽酸調(diào)pH至7.4，定容至1L。(5) 將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的1.5xCSBF溶液，并于37。C下靜置8天，每12h換一次1. 5xCSBF液。
(6) 將步驟(5)中浸泡于1.5xCSBF中的鈦片取出，用去離子水小心清洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層。
實(shí)施例3
(1) 將鈦片(10x10x1 mm3)依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲清洗各30min。
(2) 將清洗后的鈦片放入5 mol/L的NaOH溶液中，8CTC處理24h。取出鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于4(TC下干燥。
(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以1(TC/min，升溫至60(TC，保溫?zé)崽幚韑h，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片。
(4) 配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液(1. 5xCSBF)，依次稱量相應(yīng)的成分，并逐一溶解在去離子水中，用1M鹽酸調(diào)pH至7.4，定容至1L。
(5) 將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的1.5xCSBF溶液，并于37。C下靜置14天，每12h換一次1. 5xCSBF液。
(6) 將步驟(5)中浸泡于1.5xCSBF中的鈦片取出，用去離子水小心清洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層。
對(duì)照例
(1) 將鈦片(10x10x1腿3)依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲清洗各30min。
(2) 將清洗后的鈦片放入5mol/L的NaOH溶液中，80。C處理24h。取出鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于4(TC下干燥。
(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以1(TC/min，升溫至60(TC，保溫?zé)崽幚韑h，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片。
(4) 配制不含重組膠原蛋白的1.5倍的仿生液(L5xSBF)，依次稱量相應(yīng)的成分，并逐一溶解在去離子水中，用1M鹽酸調(diào)pH至7.4，定容至1L。
(5) 將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的1.5xSBF溶液，并于37。C下靜置14天，每12h換一次1. 5xSBF液。(6)將步驟(5)中浸泡于1. 5xSBF中的鈦片取出，用去離子水小心清洗，
自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層。
細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)步驟如下
(1) 分別經(jīng)過堿熱處理(實(shí)施例l中第三步)的鈦片(PretreatedTi)、1. 5xSBF液中浸泡14天(對(duì)照例)的鈦片(SBF-14d)禾fl 1. 5xCSBF液中浸泡14天(實(shí)施例3)的鈦片(CSBF-14d)樣品用75%的酒精殺菌消毒。
(2) 將殺菌消毒過的樣品用PBS洗滌3次，再用DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液(美國GIBC0公司)預(yù)洗一次，然后放入12孔細(xì)胞培養(yǎng)板中。
(3) 每孔滴加密度為1X10s個(gè)細(xì)胞/mL的MG-63細(xì)胞懸液300uL (中科院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞庫)，然后每孔分別加lmL的DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液。將培養(yǎng)板置于37 °C、飽和濕度、體積分?jǐn)?shù)5% C02培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，次日更換培養(yǎng)液，以后隔天換液l次。設(shè)不加鈦片的孔做空白對(duì)照(Blank)。
(4) 將分別培養(yǎng)到3小時(shí)、12小時(shí)、2天和5天的鈦片樣品取出，用PBS清洗掉樣品表面的培養(yǎng)液和未黏附的細(xì)胞。然后用FITC標(biāo)記的綠色熒光染料和DAPI染料對(duì)樣品上黏附的細(xì)胞進(jìn)行雙熒光染色，并用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，并進(jìn)行計(jì)數(shù)以做統(tǒng)計(jì)分析。
(5) 細(xì)胞分化分析將分別培養(yǎng)到2天和5天的鈦片上的細(xì)胞用2 %TritonX-100破膜，并經(jīng)反復(fù)凍融，裂解細(xì)胞，離心收集細(xì)胞裂解液。然后借助試劑盒來測(cè)定細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶(ALP)和骨鈣素(0C)的含量。
(6) 細(xì)胞分化結(jié)果表明，在具有重組膠原蛋白-羥基磷灰石復(fù)合涂層的鈦片上生長(zhǎng)的細(xì)胞與不含膠原蛋白的羥基磷灰石涂層的鈦片上生長(zhǎng)的細(xì)胞相比，具有更高的堿性磷酸酶活性和更高的骨鈣素表達(dá)水平，說明該重組膠原蛋白-羥基磷灰石復(fù)合涂層具有促進(jìn)細(xì)分化的功能。
實(shí)施例結(jié)合圖1:圖1為本發(fā)明中鈦材料在1. 5xCSBF液中浸泡14天后的表面涂層形貌。鈦材料表面形成的羥基磷灰石呈現(xiàn)針狀整齊排列。
實(shí)施例結(jié)合圖2:圖2為本發(fā)明中對(duì)照例，即在不含重組膠原蛋白的1.5倍仿生液中浸泡14天后的表面涂層形貌。鈦材料表面形成的羥基磷灰石呈現(xiàn)針狀整齊排列。實(shí)施例結(jié)合圖3:圖3比較了 MG-63細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同時(shí)間后的密度。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，不同材料表面的細(xì)胞數(shù)量明顯增加；CSBF-14d與PretreatedTi和SBF-14d相比，細(xì)胞數(shù)量增加明顯要快，體現(xiàn)了 CSBF-14d具有很好的細(xì)胞粘附增殖性能。
實(shí)施例結(jié)合圖4:圖4比較了 MG-63細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同時(shí)間后堿性磷酸酶(ALP)活性。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，不同材料的ALP活性明顯增加；CSBF-14d與Pretreated Ti和SBF-14d相比，ALP活性顯著增加，體現(xiàn)了CSBF-14d具有很好的促進(jìn)細(xì)胞分化的性能。
實(shí)施例結(jié)合圖5:圖5比較了 MG-63細(xì)胞在不同材料上培養(yǎng)不同時(shí)間后骨鈣素(0C)表達(dá)水平。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，不同材料的OC含量明顯增加；CSBF-14d與Pretreated Ti、 SBF-14d和Blank相比，0C含量顯著增加，體現(xiàn)了 CSBF-14d具有很好的促進(jìn)細(xì)胞分化的性能。
最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的具體實(shí)施例子。顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例子，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1、一種鈦材料表面涂層的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將鈦片依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲清洗各30min；(2)將清洗后的鈦片放入5mol/L的NaOH溶液中，80℃處理24h；取出鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于40℃下干燥；(3)將干燥后的鈦片放入爐中以10℃/min，升溫至600℃，保溫?zé)崽幚?h，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片；(4)配制含有重組膠原蛋白的1.5倍的仿生液；(5)將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的1.5倍的仿生液，并于37℃下靜置2～14天，每12h換一次1.5×CSBF液；(6)將步驟(5)中浸泡于1.5×CSBF中的鈦片取出，用去離子水清洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層，該涂層為重組膠原蛋白-羥基磷灰石復(fù)合涂層。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中的鈦片 為10x10x1 ,3的鈦片。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述鈦片包括純鈦金屬、鎳鈦合金、鈦鉻合金或其它鈦合金。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(4)配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液按下表1L仿生液中包含的成分，pH值為 7.4，由去離子水定容，得到1.5xCSBF溶液；成分 用量NaCl12. 0540克NaHC030. 5280克KC10. 3375克K2HP04 3H200. 3450克MgCl2 6H200. 4665克1 M HC115 mLCa€l20. 4440克Na2S040. 1080克C4HuN03 (Tris) 9. 0945克 1 M HC1 50 mL重組膠原蛋白 0.5克
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于用1M鹽酸調(diào)pH至7.4。
6、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于(1) 將10x10x1 mra3的鈦片依次經(jīng)去離子水、無水丙酮和無水乙醇超聲 清洗各30min;(2) 將清洗后的鈦片放入5 mol/L的NaOH溶液中，80'C處理24h;取 出鈦片，用去離子水輕輕清洗，并放置烘箱中于4CTC下干燥；(3) 將干燥后的鈦片放入爐中以1(TC/min，升溫至600'C，保溫?zé)崽幚?lh，待爐內(nèi)溫度自然冷卻到室溫之后，取出鈦片；(4) 配制含有重組膠原蛋白的1. 5倍的仿生液按下表依次稱量相應(yīng)的 成分，并按表中的順序逐一溶解在去離子水中，用1M鹽酸調(diào)pH至7.4，定 容至1L，1. 5xCSBF溶液;成分用量NaCl12. 0540克Na0. 5280克KC10. 3375克K2HP04 3H200. 3450克MgCl2 6H200. 4665克1 M HC115CaCl20. 4440克Na2S040. 1080克C4HnN03 (Tris)9. 0945克1 M HC1 50重組膠原蛋白0.5克(5)將步驟(1)處理好的鈦片放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的` 1.5xCSBF溶液，并于37。C下靜置2 14天，每12h換一次1. 5xCSBF液；(6)將步驟(5)中浸泡于1.5xCSBF中的鈦片取出，用去離子水小心清 洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層，該涂層為重組膠原蛋白-羥基 磷灰石復(fù)合涂層。
7、 權(quán)利要求1至6中任一權(quán)利要求所述的方法制備的具有重組膠原蛋白 -羥基磷灰石復(fù)合涂層的鈦復(fù)合材料。
8、 權(quán)利要求7所述鈦復(fù)合材料作為骨修復(fù)或替代材料而應(yīng)用于骨組織工程。
全文摘要
本發(fā)明公開了鈦材料表面涂層的方法經(jīng)過堿熱處理的鈦片冷卻，放置于12孔板中，每孔分別添加5mL的1.5倍的仿生液，并于37℃下靜置2～14天，每12h換一次1.5×CSBF液；取出鈦片后，用去離子水清洗，自然干燥，即可得到鈦表面生物活性涂層，該涂層為重組膠原蛋白-羥基磷灰石復(fù)合涂層。本發(fā)明所形成的涂層是納米羥基磷灰石晶體與重組膠原蛋白的復(fù)合物，具有天然骨中的兩個(gè)主要的組成成分，具有促進(jìn)細(xì)胞黏附、增殖和分化的功能。制備的鈦復(fù)合材料可作為骨修復(fù)或替代材料而應(yīng)用于骨組織工程。
文檔編號(hào)A61L27/24GK101596329SQ20091010062
公開日2009年12月9日 申請(qǐng)日期2009年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月13日
發(fā)明者姚菊明, 潘明利, 蔡玉榮 申請(qǐng)人:浙江理工大學(xué)