專利名稱：金花茶軟膠囊及其生產(chǎn)方法
技術領域：
本發(fā)明屬于從植物提取物質制成的保健產(chǎn)品，特別是從植物金花茶葉提取的物質制成的 軟膠囊及其生產(chǎn)方法。
背景技術：
金花茶[fe/se〃ia c力rys朋^ a6V^n/yaffla]是山茶科、山茶屬、金花茶組植物，20世紀 60年代初在我國廣西首次被發(fā)現(xiàn)，是一種世界珍稀的植物資源。金花茶是一種具有極高藥用 價值的天然中草藥，民間又稱金花茶為"神茶"，作為一種天然茶飲、寓療于飲，非常有益于 亞健康人群的保健，符合中國醫(yī)藥理論，符合高血壓、高血脂、糖尿病的療治方向。經(jīng)多家 權威機構檢測發(fā)現(xiàn)，金花茶葉含有茶多糖、茶多酚、茶皂甙、黃酮類等多種生理活性成分， 同時含有豐富的鍺、硒和鋅等維持人體健康有益的微量元素。動物及臨床實驗表明金花茶葉 對移植性惡性腫瘤有抑制作用，還具有降血壓、降血脂和防止動脈粥樣硬化等作用，隨著人 們對金花茶研究的不斷深入，金花茶的高活性成分和醫(yī)學藥用方面的潛力已逐漸被世人所認 識。
圍繞著金花茶在醫(yī)藥上的應用，目前人們對金花茶及其提取物進行了許多有效的研究和 探索，例如廣西師范大學的陳全斌、湛志華、張巧云、廖娜在《廣西熱帶農(nóng)業(yè)》2005(6). -10-11， 發(fā)表題名為"金花茶葉中黃酮甙元的分離提純及其表征"的文章，以金花茶葉為原料提取黃 酮，黃酮經(jīng)水解，溶劑萃取、柱層析等手段，得到高純度甙元；經(jīng)熔點、TLC、液相色譜、紅 外光譜、核磁共振法等分析手段進行結構表征，首次證實金花茶葉含有黃酮甙，其甙元為槲 皮素和山奈酚。廣東海洋大學和廣西富新科技股份有限公司的韋璐、秦小明、黃日秋、黃映 儀、劉志新在《食品科技》.2007， 32(11),100-102發(fā)表了 "超聲波提取金花茶多糖的工藝 研究"該文章通過單因素和正交實驗對超聲波提取金花茶多糖的工藝進行了研究，探討了料 液比、提取溫度、提取時間及超聲波頻率這4個影響因素，確定了金花茶多糖的最佳提取工 藝條件為料液比1 : 50、溫度8(TC、時間l.Oh、超聲波頻率為53. 2kHz，在該條件下多糖的 得率為3.1%。同時將超聲波法與傳統(tǒng)浸提法進行比較，結果表明采用超聲波提取法提高了茶 多糖的得率1.09L
在金花茶提取和制作保健食品方面，我們也檢索到以下一些公開文獻，例如1、 中國專利申請?zhí)?3149225.8，申請日2003.06.18，名稱 一種金花茶濃縮液，公 開(公告)號CN1460438,申請(專利權)人廣西富新科技股份有限公司，地址廣西壯 族自治區(qū)北海巿北海大道全景大廈東座8樓，摘要該發(fā)明公開了一種金花茶濃縮液。目前 對金花茶提取液的濃縮均采用了常規(guī)的高溫提取濃縮方法，在高溫狀態(tài)下，極易使金花茶中 的芳香類物質揮發(fā)散失，活性成分受到較大破壞。本發(fā)明采用的是納米膜分離濃縮技術，在 25-4(TC條件下對金花茶提取液進行濃縮，避免了加熱濃縮過程對活性成分的破壞，以及有效 成分的流失。本發(fā)明是進行金花茶系列產(chǎn)品開發(fā)的基礎，可以進一步開發(fā)金花茶食品、飲料、 保健品、日用品及藥品。
2、 中國專利申請?zhí)?3140885.0，名稱 一種金花茶提取液，公開(公告)號CN1476767， 申請(專利權)人廣西富新科技股份有限公司，地址廣西壯族自治區(qū)北海市北海大道全 景大廈東座8樓，摘要 一種金花茶提取液。金花茶中含有許多對人體有益的成分，但長期 以來沒有得到充分利用，現(xiàn)有的提取金花茶成分的方法是高溫提取和濃縮，這樣會破壞部分 有效成分，本發(fā)明采用醇提和水提相結合，并采用超聲波振蕩，以提高提取效率，全過程采
用了低于6(TC的低溫條件，有效保護了金花茶中的芳香類物質和具有保健功能的各種成分， 提取率達到90%以上，并可縮短提取時間，降低了成本。
題名金花茶飲料工藝的研究作者趙彥華，田呈瑞，徐長波，韋能，秦立虎。機構陜西師范大學食品工程系，西安海星現(xiàn)代飲品有限公司，防城港市金花茶有限公司，
西安市奶業(yè)科學研究所。刊名食品科學.2005， 26(9).-323-326。文摘本文研究了生產(chǎn) 條件下金花茶飲料浸提的基本工藝，及防止金花茶飲料出現(xiàn)貨架期渾濁的澄清工藝。通過多 因素正交實驗，確定了金花茶飲料的最佳生產(chǎn)工藝。
題名金花茶口服液加工工藝研究作者寧恩創(chuàng)，秦小明，楊宏。機構廣西大 學輕工與食品工程學院，湛江海洋大學食品科技學院，廣西富新科技股份有限公司。刊名
食品工業(yè)科技.2006， 27(1).-121-122， 125。文摘探討了金花茶口服液的加工工藝和最佳 配方，以金花茶為原料，采用酶解處理，結合超聲波振蕩處理提取金花茶葉藥用保健成分， 通過正交實驗篩選出了口服液的最佳配方，研制出一種具有金花茶獨特風味，入口微苦，回 味悠長，降血脂功能明顯的保健產(chǎn)品。
題名金花茶葉藥用保健成分提取新工藝研究作者秦小明，寧恩創(chuàng)，楊宏。機 構湛江海洋大學食品科技學院，廣西大學輕工與食品工程學院，廣西富新科技股份有限公 司。刊名食品工業(yè)科技.2005， 26(10).-122-12文摘目的探討采用酶解處理結合超 聲波振蕩處理對金花茶葉藥用保健成分浸出率的作用效果。方法以茶多酚和總皂甙作為浸 出指標，通過正交實驗，確定從金花茶葉中提取藥用保健成分的最佳提取工藝條件。結果最佳組合為超聲波頻率為25kHz，提取溫度85t;，提取時間卯min;中試生產(chǎn)的實際效果表 明。新工藝與現(xiàn)行的生產(chǎn)工藝相比，茶多酚、總黃酮和總皂甙的浸提率分別提高了 17.3%、 13. 2%和9. 3%，抽提工序時間縮短了 2h。
題名金花茶濃縮飲液加工工藝研究作者楊宏，秦小明，寧恩創(chuàng)。機構廣西 富新科技股份有限公司，湛江海洋大學，廣西大學。刊名廣西熱帶農(nóng)業(yè).2005(3). -38-39文 摘采用酶解處理結合超聲波振蕩處理提取金花茶葉藥用保健成分，通過正交試驗篩選出濃 縮飲液的最佳配方，研制具有金花茶獨特風味的保健產(chǎn)品。
題名金花茶葉酶法提取工藝條件的研究作者王元鳳、王登良等。機構江南 大學食品學院，華南農(nóng)業(yè)大學。刊名無錫輕工大學學報食品與生物技術.2001， 20(6).-582-587， 59文摘添加外源酶把金花茶葉中的有效成分提取出來，其最佳提取條 件為加水量為金花茶葉干樣的100倍，添加的木瓜蛋白酶的質量分數(shù)為0.4%， pH值為 5.0-5.5，溫度為50-55。C，恒溫120min。在此條件下，金花茶葉水浸出率、可溶性糖和氨基 酸含量分別比對照增加39.47%、 7.39%和1.84%，粗蛋白氨基酸的總浸出率為25. 5%左右，金 花茶葉中礦質元素Fe、 Zn、 Se、 Mn、 Co、 Mo、 Ge、 V的浸出率都在95%以上。
從上述公開文獻了解到，目前金花茶的成分研究和提取，生產(chǎn)的保健產(chǎn)品較多，但是因 為用普通方法提取金花茶葉的有效成分有幾方面缺點， 一是金花茶葉片蠟質層極厚，活性成 分很難轉移到提取液中，二是產(chǎn)品容易氧化變色。雖然上述文獻公開了超聲波提取金花茶活 性成分的工藝，但是過去對金花茶活性成分的濃縮一般采用真空濃縮，加熱時間長，因此金 花茶活性成分的回收率和活性較低，做成產(chǎn)品的功效也隨之降低。
在抗氧化、提高人體免疫力類保健品方面，目前市場上所見多以單種或多種中藥植物為 原材料提取制作而成，產(chǎn)品形式主要有保健酒、口服液、膠囊和沖劑，很多產(chǎn)品來源于參類 中藥?？梢哉f，材料來源比較單一。另外值得注意的是，目前絕大部分保健品僅停留在動物 功效試驗上，對于功效因子尚沒有深入研究，產(chǎn)品檔次比較低，因此難以達到第三代保健食 品的要求并與世界保健品市場接軌，嚴重的制約了中國保健品的深入發(fā)展。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種從植物金花茶葉提取的皂甙類物質，并將其制成軟膠囊，及其 該軟膠囊的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的金花茶軟膠囊包括以下成分和質量份數(shù)的原料
金花茶皂甙(皂甙粉)40-60份； 植物油 40—60份； 蜂蠟 0.2—1.0份。
6以上所述的金花茶皂甙(皂甙粉)是從金花茶新鮮葉片提取的有效物質。 以上所述的植物油包括茶籽油、菜籽油、花生油、棕櫚油或橄欖油的其中一種或多種的 混合。
以上所述的蜂蠟是從蜜蜂巢經(jīng)過加工得到物質。 所述的金花茶皂甙是用以下提取方法得到的物質-
(1) 原料處理
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質，清洗、破碎成lcm左右的條 狀碎葉片。
(2) 浸提金花茶新鮮葉碎片加入清水，采用超聲波浸提法或者超聲波浸提法結合酶解 處理，其中超聲波浸提法是在金花茶新鮮葉碎片與清水質量比l: 10，浸提溫度60-8(TC，浸 提時間60-70分鐘，頻率25-80kHz條件下提取；
所述的超聲波浸提法結合酶解是將金乾茶葉片移入超聲波提取罐，加5倍的純凈水進行 攪拌，加熱到40'C，然后加入料液量0.05%的復合果漿酶，恒溫保持2小時，并不斷攪拌。 酶解處理結束后迅速加熱至IO(TC滅酶10分鐘。再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度達 到60-7CTC左右時，通過超聲波中藥提取機組(TCD-1000)對金花茶鮮葉中的皂甙活性成分 進行振蕩提取。第一次超聲波振蕩結束后過濾，殘渣再加入10倍的純凈水進行第二次超聲波 振蕩提取(提取條件同第一次)。
(3) 過濾將浸提液經(jīng)120目的雙效過濾機過濾后合并至不銹鋼儲罐待用；
(4) 納濾膜分離濃縮將上述溶液過濾后在40-60'C的條件下濃縮，采用加壓納濾法濃 縮生產(chǎn)金花茶濃縮液，納濾膜組件為美國GE公司、OSMONIC或KOCH公司的產(chǎn)品，型號 是DK系列，有效面積2,5m2,材質聚酰胺，也可以使用醋酸纖維膜；整套實驗裝置由預處理、 納濾，清洗三部分組成，物料由原料桶經(jīng)加壓泵加壓，運行壓力1.5Mpa，送入納濾膜組件， 調節(jié)納濾膜出口閥門，使過濾壓力達到預定值，物料經(jīng)納濾膜過濾后分成濾過液和濃縮液。 濾過液進入清液罐，濃縮液從組件流出后回到濃縮罐，如此不斷循環(huán)實現(xiàn)料液的濃縮和分離， 最終濃度指標以固形物含量8—10%為標準。
(5) 金花茶皂甙純化
采用Diaion HP-10 (日本三菱合成工業(yè)公司)等大孔吸附樹脂作分離純化金花茶皂甙對 比試驗，選出最佳的吸附劑樹脂和工藝技術參數(shù)。將大孔吸附樹脂裝填到玻璃圓柱體內，并 以蒸餾水充分沖洗層析柱，把納濾膜分離濃縮的溶液按每小時50-100升的速度經(jīng)過樹脂柱， 然后用質量濃度20—80%乙醇溶液洗脫，得到純化的金花茶皂甙(樹脂的再生用乙醇95%浸 泡5—10小時)，并進行乙醇回收。
7(6)噴霧干燥
將上述濃縮液采用噴霧干燥的工藝進行干燥，進口風溫度為170 — 180。C;出口風溫度為 90—95'C。噴霧干燥所得的金花茶皂甙粉末為淺黃色均勻粉狀顆粒，含水率為3.1%。 本發(fā)明的金花茶軟膠囊的生產(chǎn)方法-
取噴霧干燥的金花茶皂甙細粉、植物油、蜂蠟按l: 1: 0.02制成混懸物，以明膠甘油
水為l: 0.35: 0.9的比例制備膠皮，然后將混懸物灌裝壓制成軟膠囊，25t以下定型，用乙 醇洗去軟膠囊外表油層，于25'C以下干燥，取出，即得。
本發(fā)明的優(yōu)點-
1、 金花茶皂甙的成分主要是槲皮素和山奈酚。大量醫(yī)學臨床試驗結果表明，金花茶具有 降血糖、降血壓、降血清中膽固醇、抑制腫瘤生長、防止動脈粥樣硬化、激活人體多種酶、 提高機體免疫能力、抗氧化、延緩衰老等作用。根據(jù)金花茶的成分分析結果，許多專家推測 金花茶的這些功效與皂甙類化學成分有密切相關。
2、 采用低溫超聲波提取金花茶葉，與以前的金花茶葉浸提工藝相比，由于所公開的金花 茶葉浸提工藝是沿用傳統(tǒng)的作坊式中草藥熬制方法即采用夾層鍋高溫提取，常壓高溫濃縮工 藝。采用這種工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品，保健功能的生理活性物質的部分或者完全喪失，特有的芳香 物質已大部分揮發(fā)損失；藥用保健成份的提取率低，造成單位產(chǎn)品原料(鮮葉)消耗量大， 所加工的產(chǎn)品檔次低(風味差，帶有刺激性異味)，質量很不穩(wěn)定。而本發(fā)明采用低溫超聲波 提取技術對金花茶中的皂甙成分進行提取分離，可以降低能量消耗，縮短提取時間，減少提 取過程中可能的破壞，有效提高金花茶活性成分的回收率和活性保持，皂甙粉純度達到90% 以上。
3、 采用大孔吸附樹脂高效吸附劑分離純化金花茶皂甙，具有專一性好，分離效率高的特 點，有效提高了金花茶皂甙成分的回收率，活性能夠較好的保持，比乙醇沉淀法高30%以上。
4、 本發(fā)明生產(chǎn)得到的金花茶軟膠囊保存時間長，活性成分含量高。過去我們曾經(jīng)開發(fā)的 金花茶口服液、金花茶速溶茶、金花茶飲料等產(chǎn)品由于功效因子沒有被解明，這些產(chǎn)品還僅 僅停留在初級產(chǎn)品階段，產(chǎn)品檔次也難以提升，已經(jīng)跟不上"第三代保健品"保健品的要求。 所以本發(fā)明以金花茶軟膠囊為突破口開發(fā)功效因子明確的新型產(chǎn)品，提高產(chǎn)品的技術含量和 檔次，提升企業(yè)發(fā)展的潛力優(yōu)勢，并在激烈的市場競爭中求得發(fā)展壯大。
5、 本發(fā)明還考慮藥物溶解性好并不一定生物利用度高，因此在金花茶軟膠囊中加入植物 油、蜂蠟，以改善在細胞膜間粘膜粘液層的擴散，使金花茶皂甙快速溶出并透過生物膜，快 速釋藥，增加吸收。
6、 通過對金花茶的深加工，采用高新技術，實施三高一低(高科技、高品質、高質服務、低成本)的戰(zhàn)略，以低值的農(nóng)副產(chǎn)品生產(chǎn)高附加值的產(chǎn)品，使農(nóng)產(chǎn)品增值，達到農(nóng)民增收， 企業(yè)獲利，增加國家財政，同時還能提高人們對金花茶的保健作用的認識，加強對金花茶這 一珍稀植物資源的有效保護，解決一部分剩余勞動力的就業(yè)問題，體現(xiàn)良好的社會效益。本 發(fā)明也能將金花茶的經(jīng)濟價值開發(fā)出來并形成產(chǎn)業(yè)，提升金花茶產(chǎn)品的附加值，使金花茶原 料得到合理利用。
7、 本發(fā)明的經(jīng)濟效益，生產(chǎn)成本平均每生產(chǎn)l噸的金花茶軟膠囊產(chǎn)品，需要金花茶 鮮葉原料5噸，價值20萬元，純凈水1噸，價值0.02萬元，另需的輔助原料費8萬元，包 裝材料費14萬元，加工費6萬元，管理費6萬元，其他0.98萬元，合計55萬元。
8、 產(chǎn)品銷售價格參照目前市場同類產(chǎn)品的批發(fā)價格，項目產(chǎn)品軟膠囊的售價以0.35元/ 粒每瓶計算，具有很強的市場競爭力。項目正常年銷售額收入為543萬元，年利稅156. 5萬 元。
具體實施例方式
實施例1
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質，清洗、破碎成lcm左右的條 狀碎葉片，然后采用超聲波浸提法，金花茶新鮮葉碎片與清水質量比l: 10，浸提溫度60-80 °C,浸提時間l-2h，頻率25-80kHz下提取有效成分。然后將超聲波浸提得到的溶液過濾后 在40-60'C的條件下濃縮，采用納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶濃縮液；運行壓力L5Mpa，濾過液流 量1.75LPM，濃縮液流量43LPM，最終濃度指標以固形物8—10% 。采用Diaion HP-10 (日本 三菱合成工業(yè)公司)等大孔吸附樹脂作分離純化金花茶皂甙對比試驗，選出最佳的吸附劑樹 脂和工藝技術參數(shù)。將大孔吸附樹脂裝填到玻璃圓柱體內，并以蒸餾水充分沖洗層析柱，把 納濾膜分離濃縮的溶液按每小時50—100升的速度經(jīng)過樹脂柱，然后用20-80%的乙醇溶液進 行洗脫，得到純化的金花茶皂甙(樹脂的再生用乙醇95%浸泡5—10小時)，并進行乙醇回 收。濃縮液進行噴霧干燥，噴霧干燥進口風溫度為170—180'C，出口風溫度為90—95'C。噴 霧干燥所得的金花茶皂甙粉末為淺黃色均勻粉狀顆粒，含水率為3.1%。取噴霧干燥的金花茶
皂甙細粉、植物油、蜂蠟按l: 1: 0.02制成混懸物，以明膠甘油水為1: 0.35: 0. 9的
比例制備膠皮，然后將混懸物灌裝壓制成軟膠囊，25'C以下定型，用乙醇洗去軟膠囊外表油 層，于25'C以下干燥，取出，抽樣檢驗，得到金花茶軟膠囊成品。 實施例2
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質，清洗、破碎成lcm左右的條 狀碎葉片，然后將金花茶葉片移入超聲波提取罐，加5倍的純凈水進行攪拌，加熱到40'C， 然后加入料液量0.05%的復合果漿酶，恒溫保持2小時，并不斷攪拌。酶解處理結束后迅速加熱至IO(TC滅酶10分鐘。再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度達到60-70'C左右時， 通過超聲波中藥提取機組(TCD-1000)對金花茶鮮葉中的皂甙活性成分進行振蕩提取。第一 次超聲波振蕩結束后過濾，殘渣再加入10倍的純凈水進行第二次超聲波振蕩提取(提取條件 同第一次)。然后將浸提得到的溶液過濾后在40-60'C的條件下濃縮，采用納濾法濃縮生產(chǎn)金 花茶濃縮液，運行壓力1.5Mpa，濾過液流量1. 75LPM，濃縮液流量43LPM，最終濃度指標以 固形物8 — 10%為標準。采用DiakmHP-lO (日本三菱合成工業(yè)公司)等大孔吸附樹脂作分離 純化金花茶皂甙對比試驗，選出最佳的吸附劑樹脂和工藝技術參數(shù)。將大孔吸附樹脂裝填到 玻璃圓柱體內，并以蒸餾水充分沖洗層析柱，把納濾膜分離濃縮的溶液按每小時50—100升 的速度經(jīng)過樹脂柱，然后用20-80%的乙醇溶液進行洗脫，得到純化的金花茶皂甙(樹脂的 再生用乙醇95%浸泡5—10小時)，并進行乙醇回收。濃縮液進行噴霧干燥，噴霧干燥進口 風溫度為170 — 180'C，出口風溫度為90—95'C。噴霧干燥所得的金花茶皂甙粉末為淺黃色均 勻粉狀顆粒，將上述噴霧干燥所得的金花茶皂甙粉60公斤，加入茶籽油或菜籽油40—60公 斤、蜂蠟0.5份。按l: 1: 0.02制成混懸物，在90-102'C下干燥、包裝、殺菌、抽樣檢驗， 再以明膠甘油水為l: 0.35: 0.9的比例制備膠皮，然后將混懸物灌裝壓制成軟膠囊，25 。C以下定型，用乙醇洗去軟膠囊外表油層，于25'C以下干燥，取出，抽樣檢驗，得到軟膠囊 成品。
實施例3
將上述噴霧干燥所得的金花茶皂甙粉60公斤，加入花生油或菜籽油40—60公斤、蜂蠟 0.5份。按l: 1: 0.02制成混懸物，在90-102"C下干燥、包裝、殺菌、抽樣檢驗，再以明膠 甘油水為h 0.35: 0.9的比例制備膠皮，然后將混懸物灌裝壓制成軟膠囊，25。C以下定型， 用乙醇洗去軟膠囊外表油層，于25'C以下干燥，取出，抽樣檢驗，得到軟膠囊成品。


圖1是本發(fā)明金花茶軟膠囊有效成分對羥基自由基(OH)的清除實驗圖。 圖2是本發(fā)明金花茶欽膠囊有效成分對超氧陰離子(02')清除試驗實驗圖。 圖3是本發(fā)明金花茶軟膠囊有效成分對亞硝酸根離子(N02—)的清除實驗圖。 圖4是本發(fā)明金花茶軟膠囊有效成分對H202的清除實驗圖。 具體的解釋見以下的試驗研究。
本發(fā)明金花茶軟膠囊有效成分清除多種自由基的天然抗氧化物質試驗研究
本發(fā)明人為了證實金花茶軟膠囊有效成分(皂甙)具有能夠清除自由基的作用；對'OH、 02—、 NO"和H202進行了清除試驗。
101材料與方法 1.1材料 l丄l原料
本發(fā)明實施例1的噴霧干燥的金花茶皂甙細粉，由廣東海洋大學生物技術實驗室提供。 1.1.2主要試劑.-
無水乙醇、鹽酸萘乙二胺、對氨基苯磺酸、亞硝酸鈉、檸檬酸、硫酸亞鐵、鄰苯三酚、 雙氧水、鄰二氮菲、鹽酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、3 —羥甲基氨基甲烷、抗壞血酸、香蘭 素，人參皂甙標準品均為分析純。 1.1.3主要儀器與設備
UV-9100紫外可見分光光度計，HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋，BP210S電子分析天平，SHB-3 循環(huán)水式多用真空泵，RE-52AA旋轉蒸發(fā)器，雷磁pHSJ-4A酸度計。
1.2實驗方法
1.2.1金花茶皂甙的制備
采用DiaionHP-10大孔吸附樹脂對金花茶粗皂甙S進行分離純化，依次使用蒸餾水、30 %、 60%的乙醇溶液進行洗脫，獲得Si 、 S2兩個主要組分，它們分別是由30%、 60%的乙 醇溶液洗脫而來，將S 、 S！ 、 S2分別配制成皂甙濃度依次為1、 2、 3、 4、 5mg/mL的溶液， 對它們的抗氧化活性進行研究，并與同濃度的Vc做對比，皂甙含量采用香草醛一硫酸比色法 進行測定。
1.2.2羥基自由基('OH)清除實驗
采用芬頓(Fenton)體系鄰二氮菲-F^+氧化法進行測定，取1.5mL lmM的鄰二氮菲分別 放入試管中，加入4.5mL100mMpH-7.4的磷酸鹽緩沖溶液，混勻后加入lmL lmM FeS04溶 液，立即混勻，分別加入lmL—定濃度的試樣液，然后加入lmL 0.1% H202啟動反應，于 37'C保溫60min， 536nm處測定吸光度值。同時設置損傷管(加入1 mL蒸餾水代替樣品液， lmL0.1。/。H2O2啟動反應)和未損傷管(加入2mL蒸餾水代替樣品液和雙氧水)，以相同濃度 的Vc作對比試驗，其中損傷管和未損管以磷酸鹽緩沖溶液調零，加藥管以同濃度不加11202 的加藥管調零。按下式計算羥基自由基的清除率
.OH的清除率(％) = (A加藥一A損傷/A未損一A損傷)xl00% 1.2.3超氧陰離子((V)清除試驗
采用鄰苯三酚自氧化體系法迸行測定，取4.5mLpH=8.2 Tris-HCI緩沖溶液，分別加入lmL 一定濃度的試樣液，25°C保溫20min后加入0.3ml lmM的鄰苯三酚啟動反應，5min后測定 325nm處的吸光度值A，同時設置對照(加入4.2 mL的蒸餾水代替樣品液)，對照管以緩沖溶液調零，加藥管分別以相同濃度樣品液調零。按下式計算超氧陰離子的清除率
02—的清除率(％) = (A對照一A加藥/A湖)xl00% 1.2.4亞硝酸根離子(N02')的清除實驗
采用亞硝基體系磺胺比色法進行測定，取lmL試樣液于10mL比色管中，加入5pg/mL 的NaN02標準溶液0.5mL，在37。C恒溫水浴中反應30min。取出后立即加入lmL0.4。/。對氨基 苯磺酸溶液，混勻，靜置5min后加入0.5mL0.2。/。的鹽酸萘乙二胺溶液，加水至10mL刻度， 混勻，靜置15min，以不加NaN02和樣品溶液的試劑為空白，于538nm處測定吸光值。通過 NaN02標準曲線得到相應的NaNCh含量。按下式計算N02—的清除率
NO -的清除率=加入標準NaNO浙量一NaNC^的殘留量x!Q0% 2 加入標準NaN02量
1.2.5清除過氧化氫(11202)實驗
取PH=7.4的磷酸鹽緩沖液4.5mL,加入0.05% H2022mL后，取lmL試樣液，混合均勻 后在248nm處測得其吸光度為A!，實驗中以不加試樣液的H202吸光度為AG,以不加H202 的試樣溶液吸光度為A2，按下式計算其平均值。
ao2的清除率(％) =Ao—(Al-A2)xioo
Ao
2結果與分析
2.1羥基自由基OOH)清除實驗
OH是造成脂質過氧化、核酸斷裂、蛋白質和多糖分解的重要活性氧自由基，是體內最 活潑的活性氧。采利用Fenton體系檢測金花茶皂甙、Vc對OH的清除效果，實驗結果見說明 書附l。從圖1可知，金花茶皂甙和Vc對'OH均有消除作用，且呈劑量效應關系，其中 S!的清除效果與Vc相當，在濃度為4 5mg/mL之間達到半數(shù)清除率；當濃度大于lmg/mL 后，S、 S2的清除效果要明顯優(yōu)于Vc ，兩者在2 3mg/mL之間達到半數(shù)清除率。當樣液濃 度達到5mg/mL時，S、 Si、 Vc的清除率達到了 85%以上，而S2的清除率則達到97.44% 。 筆者在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，在同樣的體系下僅加入濃度為lmg生藥/ml的金花茶水提物，'OH 的清除率即達到98.21%，這說明了金花茶葉中除了皂甙外還含有其他的抗氧化活性更強的物 質。
2.2超氧陰離子((V)的清除試驗
鄰苯三酚在堿性條件下迅速自氧化，自氧化過程中產(chǎn)生or， or加速鄰苯三酚自氧化速
率，同時生成有色中間產(chǎn)物，在325nm有強烈的光吸收，由于自氧化速率依賴于02—的濃度， 清除02、則抑制自氧化反應，阻止中間產(chǎn)物的積累，從而評價受試物清除02'的能力。金花茶 皂甙和Vc對Of的清除效果如說明書附2，如圖2所示，在實驗所給定的范圍內，S、 SbS2和Vc對02—均具有一定的清除作用，但S、 S,、 S2的清除效果明顯低于Vc，雖然三者在濃
度為3 4mg/mL之間達到半數(shù)清除率，但在實驗所給定的最大濃度5mg/mL時的清除率僅為 60%作用，其中S、 Si在濃度為lmg/mL時出現(xiàn)了清除率的負數(shù)，可能是由于它們含有連羥 基結構，02—在加速體系中鄰苯三酚自氧化的同時，也加速它們的自氧化，從而產(chǎn)生更多的 02',檢測呈負清除作用。但隨著濃度的增大，S、 S!抑制02—作用要大于體系中O 的生成 速度，清除率呈現(xiàn)正值。通過與前期研究的對比發(fā)現(xiàn)，在相同的體系下加入濃度僅為lmg生 藥/ml的金花茶水提物，02—的清除率即達到了 76.92%，這再次表明金花茶的抗氧化作用是由 多種成分所協(xié)同產(chǎn)生的。
2.3亞硝酸根離子(NCV)的清除實驗
N-亞硝基化合物是一類具有亞硝基(N-NO)結構的有機物，大部分具有致癌性，可由其 前體亞硝酸鹽和胺類在體內外合成，它們是前致癌物，在體內需經(jīng)過代謝后才具有致癌性。 因此，研究能清除亞硝酸鹽、抑制亞硝胺合成的抗氧化劑是預防亞硝基化合物危害的有效途 徑。按1.2.4的方法檢測金花茶皂甙和Vc對N02'的清除作用，實驗結果見說明書附3， 由圖3可知，金花茶皂甙對亞硝酸鹽都具有一定的清除作用，但清除能力明顯不如Vc，在實 驗所設計的濃度下，S、 Si、 S2對N(V的清除作用相當，且隨著濃度的增加其清除率均呈現(xiàn) 緩慢的上升趨勢，當濃度達到5mg/mL時剛達到半數(shù)清除率，而Vc的濃度為lmg/mL時， 清除率即可達到93.38%。
2.411202的清除實驗
H202添加入食品中可分解放出氧， 一方面起漂白、防腐和除臭等作用，另一方面可與食 品中的淀粉形成環(huán)氧化物而導致消化道癌癥的發(fā)生，因此研究能分解殘留在食品中的雙氧水
的抗氧化劑可有效的提高食品的安全性。采用1.2.5的方法研究金花茶皂甙和Vc對H202的清 除作用，結果如說明書附4，結果如圖4所示，S、 Si、 S2對H202均具有一定的清除作 用，且在所設計的濃度范圍內清除能力相當，清除率均在35% 52%之間，且濃度與其抑制
率并不呈明顯的線性關系，實驗未檢測出Vc對H202具有清除作用。
3結論
金花茶軟膠囊(金花茶皂甙)對OH、 02—、 N02'、和11202均具有清除作用，雖然對02—、 N(V的清除作用不及Vc，但對'OH和H202的清除效果卻明顯優(yōu)于Vc，尤其對'OH的清除作 用最為突出，實驗結果證明金花茶皂甙是一種能清除多種自由基的天然抗氧化物質；實驗還 發(fā)現(xiàn)，不同的金花茶皂甙組分在相同的濃度及自由基體系下的清除作用亦有不同，這與它們 的結構密切有關，因此有關金花茶皂甙的進一步分離純化、結構分析還有待更深入的研究； 此外，通過與前期研究的對比發(fā)現(xiàn)，金花茶的抗氧化活性是由其皂甙類和其他活性成分協(xié)同
13作用的結果。因此金花茶軟膠囊的抗氧化作用與其含有的皂甙類物質密切相關，本發(fā)明的結 果為將金花茶開發(fā)成為抗癌、抗衰老以及心血管保護等方面的功能食品提供理論依據(jù)。 本發(fā)明金花茶軟膠囊的食用典型例證
例l、李XX，男，45歲，廣西欽州市人，房地產(chǎn)老板，因暴食，患肥胖癥以及冠心病， 胸悶氣短、常感覺無力，精神不好。服用本發(fā)明金花茶軟膠囊，每天三次，每次2粒，3個 月后，體重減輕了，僅剩輕度氣短及眩暈癥狀，余癥消失，精神狀態(tài)也好了。
例2、黃XX，女，50歲，廣東湛江市人，企業(yè)職工，由于長年繁忙的工作，無暇顧及 保養(yǎng)身體，以至積勞成疾、免疫力下降，感到身體疲倦，坐下去就不想起來，工作效率低、 精力不充沛、上樓氣喘無力、易感冒、記憶力下降、精神不集中、臉色灰暗無光、滿臉皺紋、 皮膚干糙，過著低質量生活。服用本發(fā)明金花茶軟膠囊，每天三次，每次2粒，2個月后， 皮膚開始光滑富有彈性，睡眠也改善。
例3、趙XX，男，1962年生，廣西南寧市人，因患高血脂，并發(fā)高血壓、冠心病，還 經(jīng)常頭暈，上樓氣喘，精力不充沛，頭暈。2008年初在某醫(yī)院治療，服用xx藥，但癥狀有 所改善，但停藥后癥狀未見好轉，后改服用本發(fā)明金花茶軟膠囊，每天三次，每次2粒，服 用20天后有所好轉，服用一個月后癥狀己部分消失精神好轉，繼續(xù)服用半個月，全部病癥消 失，臉色紅潤，感覺良好，頭暈癥狀也好了。
例4、張XX，男，1953年生，廣西北海市人，常感到呼吸困難，易疲勞，2007年6月 10日在醫(yī)院檢査后還發(fā)現(xiàn)患冠心病，但由于資金短缺未住院，服用本發(fā)明金花茶軟膠囊，每 天3-4次，每次2粒，服用二月后覺得病情好轉，呼吸順暢，精神也好了。
1權利要求
1、一種金花茶軟膠囊，其特征在于它的主要原料包括以下質量份數(shù)的成分金花茶皂甙40-60份；植物油40-60份；蜂蠟 0.2-1.0份。
2、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶軟膠囊，其特征在于所述的植物油包括茶籽油、菜籽 油、花生油、棕櫚油或橄欖油的其中一種或多種的混合。
3、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶軟膠囊，其特征在于所述的蜂蠟是從蜜蜂巢經(jīng)過加工得到物質。
4、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶軟膠囊，其特征在于所述的金花茶皂甙是用以下提取 方法得到的物質(1) 原料處理將釆摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質，清洗、破碎 成lcm左右的條狀碎葉片；(2) 浸提金花茶新鮮葉碎片加入清水，采用超聲波浸提法或者超聲波浸提法結合酶解 處理得到浸提液；(3) 過濾將浸提液經(jīng)120目雙效過濾機過濾后合并至不銹鋼儲罐備用；(4) 納濾膜分離濃縮將過濾液采用加壓納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶濃縮液，物料由原料桶經(jīng)加壓泵加壓，運行壓力為1.5Mpa，送入納濾膜組件，調節(jié)納濾膜出口閥門，使過濾壓力達 到預定值，物料經(jīng)納濾膜過濾后分成濾過液和濃縮液，濾過液進入清液罐，濃縮液從組件流 出后回到濃縮罐，如此不斷循環(huán)實現(xiàn)料液的濃縮和分離，濾過液流量1.75LPM，濃縮液流量 43LPM;(5) 金花茶皂甙純化將大孔吸附樹脂裝填到玻璃圓柱體內，把納濾膜分離濃縮的溶液 按每小時50—100升的速度經(jīng)過樹脂柱，然后用質量濃度20—80%乙醇溶液洗脫，得到純化 的金花茶皂甙，樹脂的再生用95%乙醇浸泡5 —IO小時，并進行乙醇回收；(6) 噴霧干燥將上述濃縮液采用噴霧干燥的工藝進行干燥，進口風溫度為170_180 'C;出口風溫度為90—95'C，噴霧干燥所得的金花茶皂甙粉末為淺黃色均勻粉狀顆粒，含水 率為3. 1%。
5、 根據(jù)權利要求4所述的金花茶軟膠囊，其特征在于所述的超聲波浸提法是在金花茶 新鮮葉碎片與清水質量比1: 10,浸提溫度60-80°C，浸提時間60-70分鐘，頻率25-80kHz條件下提取。
6、 根據(jù)權利要求4所述的金花茶軟膠囊，其特征在于所述的超聲波浸提法結合酶解是 將金花茶葉片移入超聲波提取罐，加5倍的純凈水進行攪拌，加熱到4(TC，然后加入料液量 0.05%的復合果漿酶，恒溫保持2小時，并不斷攪拌。酶解處理結束后迅速加熱至IO(TC滅酶 IO分鐘，再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度達到60-70'C左右時，通過超聲波中藥提 取機組對金花茶鮮葉中的皂甙活性成分進行振蕩提?。坏谝淮纬暡ㄕ袷幗Y束后過濾，殘渣 再加入10倍的純凈水進行第二次超聲波振蕩提取，提取條件同第一次。
7、 如權利要求1所述的金花茶軟膠囊的生產(chǎn)方法，其特征在于取噴霧干燥的金花茶皂 甙細粉、植物油、蜂蠟按l: 1: 0.02制成混懸物，以明膠甘油水為l: 0.35: 0.9的比 例制備膠皮，然后將混懸物灌裝壓制成軟膠囊，25'C以下定型，用乙醇洗去軟膠囊外表油層， 于25'C以下干燥，取出，即得。
全文摘要
本發(fā)明是一種用金花茶葉提取有效物質制成的軟膠囊，它的主要原料包括金花茶葉提取物、植物油、蜂蠟，其生產(chǎn)方法是從金花茶新鮮葉片提取皂甙成分，經(jīng)過分離純化，噴霧干燥，得到金花茶皂甙細粉。金花茶皂甙細粉、植物油、蜂蠟按1∶1∶0.02制成混懸物，以明膠∶甘油∶水為1∶0.35∶0.9的比例制備膠皮，然后將混懸物灌裝壓制成軟膠囊，25℃以下定型，用乙醇洗去軟膠囊外表油層，于25℃以下干燥，取出，即得。本發(fā)明產(chǎn)品具有明顯的抗氧化、抗衰老、美容及提高機體免疫力等功能，適合亞健康人群食用，保健效果明顯。
文檔編號A61P9/12GK101558808SQ200910114040
公開日2009年10月21日 申請日期2009年5月8日 優(yōu)先權日2009年5月8日
發(fā)明者劉志新, 寧恩創(chuàng), 楊繼往, 秦小明 申請人:廣西桂人堂金花茶產(chǎn)業(yè)集團股份有限公司