專利名稱：金花茶精制顆粒及其生產(chǎn)方法
技術領域：
本發(fā)明屬于從植物提取物質(zhì)制成的保健產(chǎn)品，特別是從植物金花茶葉提取的物質(zhì)制成 的保健產(chǎn)品及其生產(chǎn)方法。
背景技術：
金花茶[C柳e7h'a c力rysa/7t力aft^rw/a/B3]是山茶科、山茶屬、金花茶組植物，20世紀 60年代初在我國廣西首次被發(fā)現(xiàn)，是一種世界珍稀的植物資源。作為壯族民間的一種傳統(tǒng) 中草藥，金花茶主要用于咽喉炎、痢疾、高血壓、預防腫瘤，花用于便血、月經(jīng)不調(diào)。
世界上80%以上的金花茶資源分布在廣西壯族自治區(qū)防城港市，二十世紀80年代廣西 中醫(yī)學院的研究人員曾對金花茶葉進行提取分析和藥理實驗，發(fā)現(xiàn)金花茶葉含有茶多糖、茶 多酚、茶皂甙、黃酮類等多種生理活性成分，同時含有豐富的鍺、硒和鋅等維持人體健康有 益的微量元素。動物及臨床實驗表明，金花茶具有抗氧化、降血糖、降血壓、降血脂、抑制 腫瘤生長、防止動脈粥樣硬化、激活人體多種酶、提高機體免疫能力延緩衰老(1994年南 寧金花茶國際學術研討會論文集)等多種生理功能。由于金花茶資源分布的局限性，國外在 該方面的研究尚未見報道。隨著人們對金花茶研究的不斷深入，金花茶的有效活性成分和醫(yī) 學藥用方面的潛力已逐漸被世人所認識。
圍繞著金花茶在醫(yī)藥上的應用，目前人們對金花茶及其提取物進行了許多有效的研究和 探索，例如廣西師范大學的陳全斌、湛志華、張巧云、廖娜在《廣西熱帶農(nóng)業(yè)》2005 (6). -10-11 發(fā)表題名為"金花茶葉中黃酮甙元的分離提純及其表征"的文章，以金花茶葉為原料提取黃 酮，黃酮經(jīng)水解，溶劑萃取、柱層析等手段，得到高純度甙元；經(jīng)熔點、TLC、液相色譜、 紅外光譜、核磁共振法等分析手段進行結構表征，首次證實金花茶葉含有黃酮甙，其甙元為 槲皮素和山奈酚。在金花茶提取和制作保健食品方面，我們也檢索到以下一些公開文獻，例 如
1、中國專利申請?zhí)?3149225.8，申請日2003.06.18，名稱 一種金花茶濃縮液， 公開(公告)號CN1460438，申請(專利權)人廣西富新科技股份有限公司，地址廣
西壯族自治區(qū)北海市北海大道全景大廈東座8樓，摘要該發(fā)明公開了一種金花茶濃縮液。
4目前對金花茶提取液的濃縮均采用了常規(guī)的高溫提取濃縮方法，在高溫狀態(tài)下，極易使金花 茶中的芳香類物質(zhì)揮發(fā)散失，活性成分受到較大破壞。本發(fā)明采用的是納米膜分離濃縮技術， 在25-4(TC條件下對金花茶提取液進行濃縮，避免了加熱濃縮過程對活性成分的破壞，以及 有效成分的流失。本發(fā)明是進行金花茶系列產(chǎn)品開發(fā)的基礎，可以進一步開發(fā)金花茶食品、 飲料、保健品、日用品及藥品。
2、 中國專利申請?zhí)?3140885.0，名稱 一種金花茶提取液，公開(公告)號CN1476767， 申請(專利權)人廣西富新科技股份有限公司，地址廣西壯族自治區(qū)北海市北海大道全景 大廈東座8樓，摘要 一種金花茶提取液。金花茶中含有許多對人體有益的成分，但長期以 來沒有得到充分利用，現(xiàn)有的提取金花茶成分的方法是高溫提取和濃縮，這樣會破壞部分有 效成分，本發(fā)明采用醇提和水提相結合，并采用超聲波振蕩，以提高提取效率，全過程采用 了低于60'C的低溫條件，有效保護了金花茶中的芳香類物質(zhì)和具有保健功能的各種成分， 提取率達到90%以上，并可縮短提取時間，降低了成本。
題名金花茶飲料工藝的研究作者趙彥華，田呈瑞，徐長波，韋能，秦立虎機構[l]陜西師范大學食品工程系，[2]西安海星現(xiàn)代飲品有限公司，[3]防城港市金花
茶有限公司，[4]西安市奶業(yè)科學研究所。刊名食品科學.2005， 26(9),323-32文摘
本文研究了生產(chǎn)條件下金花茶飲料浸提的基本工藝，及防止金花茶飲料出現(xiàn)貨架期渾濁的澄 清工藝。通過多因素正交實驗，確定了金花茶飲料的最佳生產(chǎn)工藝。
題名金花茶口服液加工工藝研究作者寧恩創(chuàng)[1]秦小明[2]楊宏[3]機構
[l]廣西大學輕工與食品工程學院，[2]湛江海洋大學食品科技學院，[3]廣西富新科技股份 有限公司。刊名食品工業(yè)科技.2006， 27(1).-121-122， 12文摘探討了金花茶口服 液的加工工藝和最佳配方，以金花茶為原料，采用酶解處理，結合超聲波振蕩處理提取金花 茶葉藥用保健成分，通過正交實驗篩選出了口服液的最佳配方，研制出一種具有金花茶獨特 風味，入口微苦，回味悠長，降血脂功能明顯的保健產(chǎn)品。
題名金花茶葉藥用保健成分提取新工藝研究作者秦小明[l]寧恩創(chuàng)[2]楊 宏[3]機構[l]湛江海洋大學食品科技學院，[2]廣西大學輕工與食品工程學院，[3]廣西 富新科技股份有限公司。刊名食品工業(yè)科技.2005， 26(10).-122-12文摘目的探 討采用酶解處理結合超聲波振蕩處理對金花茶葉藥用保健成分浸出率的作用效果。方法以 茶多酚和總皂甙作為浸出指標，通過正交實驗，確定從金花茶葉中提取藥用保健成分的最佳 提取工藝條件。結果最佳組合為超聲波頻率為25kHz，提取溫度85'C，提取時間90min; 中試生產(chǎn)的實際效果表明新工藝與現(xiàn)行的生產(chǎn)工藝相比，茶多酚、總黃酮和總皂甙的浸提率分別提高了 17. 3%、 13. 2%和9. 3%，抽提工序時間縮短了 2h。
題名金花茶濃縮飲液加工工藝研究作者楊宏[l]秦小明[2]寧恩創(chuàng)[3]機 構[l]廣西富新科技股份有限公司，[2]湛江海洋大學，[3]廣西大學。刊名廣西熱帶 農(nóng)業(yè).2005(3).-38-39文摘采用酶解處理結合超聲波振蕩處理提取金花茶葉藥用保健成 分，通過正交試驗篩選出濃縮飲液的最佳配方，研制具有金花茶獨特風味的保健產(chǎn)品。
題名金花茶葉酶法提取工藝條件的研究作者王元鳳、王登良等機構江 南大學食品學院，華南農(nóng)業(yè)大學。刊名無錫輕工大學學報食品與生物技術.2001， 20(6),582-587， 59文摘添加外源酶把金花茶葉中的有效成分提取出來，其最佳提取 條件為加水量為金花茶葉干樣的100倍，添加的木瓜蛋白酶的質(zhì)量分數(shù)為0. 4%， pH值為 5.0-5.5，溫度為50-55'C，恒溫120min。在此條件下，金花茶葉水浸出率、可溶性糖和氨 基酸含量分別比對照增加39. 47%、 7. 39%和1. 84%,粗蛋白氨基酸的總浸出率為25. 5%左右， 金花茶葉中礦質(zhì)元素Fe、 Zn、 Se、 Mn、 Co、 Mo、 Ge、 V的浸出率都在95%以上。
從上述公開文獻了解到，目前對金花茶的成分研究和提取，生產(chǎn)的產(chǎn)品較多，但是由于 用普通方法提取金花茶葉的活性成分的回收率和活性較低，做成產(chǎn)品的功效也隨之降低。主 要原因是金花茶葉片角質(zhì)層極厚，含有豐富的纖維素、原果膠和葉綠素，表面又分布有大量 的蠟質(zhì)層，對活性成分的提取十分不利。目前金花茶加工產(chǎn)品只限于袋泡茶、飲料、金花茶 速溶茶、金花茶口服液等，所公開的金花茶葉浸提工藝是沿用傳統(tǒng)的作坊式中草藥熬制方法 即采用夾層鍋高溫提取，常壓高溫濃縮工藝。在高溫提取和高溫濃縮過程中，具有保健功能 的生理活性物質(zhì)的部分或者完全喪失，金花茶特有的芳香物質(zhì)已大部分揮發(fā)損失，而且藥用 保健成分的提取率低，造成單位產(chǎn)品原料(鮮葉)消耗量大，所加工的產(chǎn)品檔次低(風味差， 帶有刺激性異味)，質(zhì)量很不穩(wěn)定。因此，在金花茶藥用活性成分的提取、濃縮和深加工利 用方面迫切需要進行科技攻關。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種與現(xiàn)有技術不同的，從植物金花茶葉提取皂甙類物質(zhì)，并將其 精制成金花茶顆粒及其生產(chǎn)方法。
其生產(chǎn)方法包括如下的工藝步驟
(1) 原料處理
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質(zhì)，清洗，破碎成lctn左右的條 狀碎葉片。
(2) 浸提金花茶新鮮葉碎片加入清水，采用超聲波浸提法或者超聲波浸提法結合酶解處理，其中 超聲波浸提法是在金花茶新鮮碎葉片與清水質(zhì)量比1: 10，浸提溫度60-80°C，浸提時間60-70 分鐘，頻率25-80kHz的條件下提?。?br> 所述的超聲波浸提法結合酶解是將金花茶葉片移入超聲波提取罐，加5倍的純凈水進行 攪拌，加熱到40'C,然后加入料液量0.05%的復合果漿酶，恒溫保持2小時，并不斷攪拌。 酶解處理結束后迅速加熱至IO(TC滅酶10分鐘。再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度 達到60-7(TC左右時，通過超聲波中藥提取機組(TCD-1000)對金花茶鮮葉中的皂甙活性成 分進行振蕩提取。第一次超聲波振蕩結束后過濾，殘渣再加入10倍的純凈水進行第二次超 聲波振蕩提取(提取條件同第一次)。
(3) 過濾
兩次提取所得的浸提液經(jīng)雙效過濾機(120目)過濾后合并至不銹鋼儲罐(2m2)待用。
(4) 納米膜分離濃縮
將上述溶液過濾后在40-60'C的條件下濃縮，采用加壓納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶濃縮液， 納濾膜組件為美國GE公司、OSMONIC或KOCH公司的產(chǎn)品，型號是DK系列，有效面積 2.5m2，材質(zhì)聚酰胺，也可以使用醋酸纖維膜；整套實驗裝置由預處理、納濾，清洗三部分 組成，物料由原料桶經(jīng)加壓泵加壓，運行壓力1.5Mpa，送入納濾膜組件，調(diào)節(jié)納濾膜出口 閥門，使過濾壓力達到預定值，物料經(jīng)納濾膜過濾后分成濾過液和濃縮液。濾過液進入清液 罐，濃縮液從組件流出后回到濃縮罐，如此不斷循環(huán)實3L料液的^fe縮和分離，最終濃度指標 以固形物含量濃度的8 — 10%為標準。
(5) 金花茶皂甙純化
采用DiaionHP-lO (日本三菱合成工業(yè)公司)等大孔吸附樹脂作分離純化金花茶皂甙對 比試驗，選出最佳的吸附劑樹脂和工藝技術參數(shù)。將大孔吸附樹脂裝填到玻璃圓柱體內(nèi)，并 以蒸餾水充分沖洗層析柱，把納濾膜分離濃縮的溶液按每小時50—100升的速度經(jīng)過樹脂 柱，然后用質(zhì)量濃度20—80%乙醇溶液洗脫，得到純化的金花茶皂甙(樹脂的再生用乙醇 95%浸泡5—10小時)，并進行乙醇回收。
(6) 混合干燥
把木糖醇和糊精于6(TC左右干燥2 3h后，粉碎過40 60目篩。將純化的金花茶皂甙 加入木糖醇和糊精，金花茶皂甙與木糖醇的質(zhì)量比例一般為1: 2.5 6，糊精加入量為顆粒 劑總質(zhì)量的3-10%，另外，還加入羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)，質(zhì)量含量為0. 02—0. 05%; 如果不加木糖醇，糊精加入量為顆粒劑總質(zhì)量的2-5倍，混合均勻，加入70%左右的乙醇調(diào)節(jié)濕度，熱風烘干，溫度為4(TC 80'C。干燥所得的金花茶顆粒為淺黃色均勻顆粒，含 水率為3. 1%。加入質(zhì)量含量0.02—0. 05%羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)的作用是將金花茶的 苦澀味包埋。
也可以采用噴霧干燥的工藝進行干燥，噴霧干燥的進口風溫度為90 — 110'C;出口風溫 度為70—80。C。 本發(fā)明的優(yōu)點-
1、 本發(fā)明采用低溫超聲波提取金花茶葉活性成分，與傳統(tǒng)的金花茶葉浸提工藝相比， 由于所公開的金花茶葉浸提工藝是沿用傳統(tǒng)的作坊式中草藥熬制方法即采用夾層鍋高溫提 取，常壓高溫濃縮工藝，致使具有保健功能的生理活性物質(zhì)的部分或者完全喪失，特有的芳 香物質(zhì)也大部分揮發(fā)損失；藥用保健成分的提取率低，造成單位產(chǎn)品原料(鮮葉)消耗量大， 所加工的產(chǎn)品檔次低(風味差，帶有刺激性異味)，質(zhì)量很不穩(wěn)定。而本發(fā)明采用低溫超聲 波提取技術對金花茶中的活性成分進行提取分離，可以降低能量消耗，縮短提取時間，減少 提取過程中可能的破壞，有效提高金花茶活性成分的回收率和活性保持。
2、 我國中藥的傳統(tǒng)濃縮方法一般采用常溫高壓濃縮或者多效真空濃縮，這些濃縮方法 都有著很多的弊端，能耗高、有機溶劑損耗大、污染嚴重、產(chǎn)品的固有風味損失大、香氣差、 活性成分損失大等缺點。金花茶鮮葉中含有豐富的總皂甙，但用傳統(tǒng)工藝的濃縮過程中泡沫 極多，溢出部分損失大，經(jīng)常需要打破真空，造成濃縮效率很低，能源消耗大，最終成品的 質(zhì)量不穩(wěn)定。本發(fā)明采用的納濾膜分離濃縮技術與常規(guī)真空濃縮相比，簡化生產(chǎn)工藝，縮短 加熱時間，大大降低能耗，有效地提高了浸提液中金花茶皂甙的回收率和活性成分保持。
3、 采用大孔吸附樹脂髙效吸附劑分離純化金花茶皂甙，與常規(guī)分離純化方法相比，具 有提取時間短、產(chǎn)率高、低溫高效等優(yōu)點。
4、 大量醫(yī)學臨床試驗結果表明，金花茶具有抗氧化、降血糖、降血壓、抑制腫瘤生長、 防止動脈粥樣硬化、提高機體免疫能力、延緩衰老等作用。根據(jù)金花茶的成分分析結果，許 多專家推測金花茶的這些功效與皂甙類化學成分有密切相關。
5、 本發(fā)明生產(chǎn)得到的金花茶顆粒劑保存時間長，活性成分含量高，過去我們曾經(jīng)開發(fā) 的金花茶口服液、金花茶速溶茶、金花茶飲料等產(chǎn)品由于功效因子沒有被解明，這些產(chǎn)品還 僅僅停留在初級產(chǎn)品階段，產(chǎn)品檔次也難以提升，已經(jīng)跟不上"第三代保健品"保健品的要 求。所以本發(fā)明是以金花茶皂甙為突破口開發(fā)功效因子明確的新型產(chǎn)品，提高產(chǎn)品的技術含 量和檔次，提升企業(yè)發(fā)展的潛力優(yōu)勢，并在激烈的市場競爭中求得發(fā)展壯大。
6、 通過對金花茶的深加工，采用高新技術，實施三高一低(高科技、高品質(zhì)、高質(zhì)服務、低成本)的戰(zhàn)略，以低值的農(nóng)副產(chǎn)品生產(chǎn)高附加值的產(chǎn)品，使農(nóng)產(chǎn)品增值，達到農(nóng)民增 收，企業(yè)獲利，增加國家稅收，同時還能提高人們對金花茶的保健作用的認識，加強對金花 茶這一珍稀植物資源的有效保護，解決一部分剩余勞動力的就業(yè)問題，體現(xiàn)了良好的社會效 益。本發(fā)明也能將金花茶的經(jīng)濟價值開發(fā)出來并形成產(chǎn)業(yè)，提升金花茶產(chǎn)品的附加值，使金 花茶原料得到合理利用。
7、本發(fā)明的經(jīng)濟效益，金花茶顆粒劑由于具有很好的保健作用，具有很強的市場競爭力。
具體實施例方式
實施例1
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質(zhì)，清洗、破碎成lcm左右的條 狀碎葉片，然后采用超聲波浸提法，金花茶新鮮碎葉片與清水質(zhì)量比1: 10，浸提溫度60-80 °C,浸提時間1-2h，頻率25-80kHz下提取有效成分。浸提液再經(jīng)雙效過濾機(120目)過 濾后在40-60'C的條件下濃縮，采用加壓納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶濃縮液，運行壓力1.5Mpa， 濾過液流量1.75LPM,濃縮液流量43 LPM，最終濃度指標以固形物8--10%為標準。采用 DiaionHP-lO (日本三菱合成工業(yè)公司)等大孔吸附樹脂作分離純化金花茶皂武對比試驗， 選出最佳的吸附劑樹脂和工藝技術參數(shù)。將樹脂裝填到玻璃圓柱體內(nèi)，并以蒸餾水充分沖洗 層析柱。把納濾膜分離濃縮的溶液按每小時50—100升的速度經(jīng)過樹脂柱，然后用20—80 0%乙醇溶液洗脫，得到純化的金花茶皂甙(樹脂的再生用乙醇95%浸泡5—10小時)，并進 行乙醇回收。把木糖醇和糊精于60'C左右干燥2 3h后，粉碎過40 60目篩，將純化的金 花茶皂甙加入木糖醇和糊精，金花茶皂甙與木糖醇的質(zhì)量比例一般為1: 2. 5 6，糊精加 入量為顆粒劑總質(zhì)量的3-10%，另外，還加入羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)，質(zhì)量含量為0. 02 一0.05%?；旌暇鶆?，加入70%左右的乙醇調(diào)節(jié)濕度，熱風烘干，溫度為40'C 8(TC。干 燥所得的金花茶顆粒為淺黃色均勻顆粒，含水率為3.1%，包裝，得到金花茶顆粒成品。
實施例2
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質(zhì)，清洗、破碎成lcm左右的條 狀碎葉片。將金花茶葉移入超聲波提取罐，加5倍純凈水進行攪拌，加熱到40'C，然后加 入料液量0.05%的復合果漿酶進行酶解，恒溫保持2小時，并不斷攪拌，酶解處理結束后迅 速加熱到100。C滅酶10分鐘。再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度達到60-7(TC左右時， 通過超聲波中藥提取機組(TCD-1000)對金花茶鮮葉中的皂甙活性成分進行振蕩提取。第一次超聲波振蕩結束后過濾，殘渣再加入10倍的純凈水進行第二次超聲波振蕩提取(提取條 件同第一次)。浸提液再經(jīng)雙效過濾機(120目)過濾后，采用加壓納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶 濃縮液，運行壓力1.5Mpa，濾過液流量1.75LPM，濃縮液流量43 LPM，最終濃度指標以固 形物8—10%為標準。采用Diaion HP-10 (日本三菱合成工業(yè)公司)等大孔吸附樹脂作分離 純化金花茶皂甙對比試驗，選出最佳的吸附劑樹脂和工藝技術參數(shù)。將樹脂裝填到玻璃圓柱 體內(nèi)，并以蒸餾水充分沖洗層析柱。把納濾膜分離濃縮的溶液按每小時50—100升的速度經(jīng) 過樹脂柱，然后用20—80%乙醇溶液洗脫，得到純化的金花茶皂武(樹脂的再生用乙醇95 %浸泡5_10小時)，并進行乙醇回收。把糊精于60。C左右干燥2 3h后，粉碎過40 60 目篩，將純化的金花茶皂甙加入糊精，糊精加入量為顆粒劑總質(zhì)量的2-5倍，另外，還加入 羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)，質(zhì)量含量為0.02 — 0.05%?；旌暇鶆颍尤?0%左右的乙醇 調(diào)節(jié)濕度，熱風烘干，溫度為4(TC 80'C。干燥所得的金花茶顆粒為淺黃色均勻顆粒，含 水率為3.1%。包裝，得到金花茶顆粒成品。 實施例3
將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質(zhì)，清洗、破碎成lcm左右的條 狀碎葉片，將金花茶葉移入超聲波提取罐，加5倍純凈水進行攪拌，加熱到4(TC，然后加 入料液量0.05%的復合果漿酶進行酶解，恒溫保持2小時，并不斷攪拌，酶解處理結束后迅 速加熱到IOO'C滅酶10分鐘。再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度達到60-70'C左右時， 通過超聲波中藥提取機組(TCD-1000)對金花茶鮮葉中的皂甙活性成分進行振蕩提取。第一 次超聲波振蕩結束后過濾，殘渣再加入10倍的純凈水進行第二次超聲波振蕩提取(提取條 件同第一次)。浸提液再經(jīng)雙效過濾機(120目)過濾后至不銹鋼儲罐(2m2)待用。采用加 壓納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶濃縮液，運行壓力1.5Mpa,濾過液流量1.75 LPM，濃縮液流量43 LPM，最終濃度指標為固形物8--10%為標準。采用DiaionHP-lO (日本三菱合成工業(yè)公司) 等大孔吸附樹脂作分離純化金花茶皂甙對比試驗，選出最佳的吸附劑樹脂和工藝技術參數(shù)。 將樹脂裝填到玻璃圓柱體內(nèi)，并以蒸餾水充分沖洗層析柱。把納濾膜分離濃縮的溶液按每小 時50—100升的速度經(jīng)過樹脂柱，然后用20—80%乙醇溶液洗脫，得到純化的金花茶皂甙 (樹脂的再生用乙醇95%浸泡5_10小時)，并進行乙醇回收。把木糖醇和糊精于6CTC左右 干燥2 3h后，粉碎過40 60目篩，將純化的金花茶皂甙加入木糖醇和糊精，金花茶皂武 與木糖醇的質(zhì)量比例一般為1: 2. 5 6,糊精加入量為顆粒劑總質(zhì)量的3-10%，另外，還 加入羧甲基纖維素鈉(CMC—Na)，質(zhì)量含量為0.02—0.05%?；旌暇鶆颍尤?0%左右的 乙醇調(diào)節(jié)濕度，采用噴霧干燥的工藝進行干燥，噴霧干燥的進口風溫度為90—110'C;出口
10風溫度為70—80'C。干燥所得的金花茶顆粒為淺黃色均勻顆粒，含水率為3.1%。包裝，得
到金花茶顆粒成品。


圖1是本發(fā)明金花茶顆粒有效成分對徑基自由基( OH)的清除實驗圖； 圖2是本發(fā)明金花茶顆粒有效成分對超氧陰離子((V —)清除試驗實驗圖； 圖3是本發(fā)明金花茶顆粒有效成分對亞硝酸根離子(N(V)的清除實驗圖； 圖4是本發(fā)明金花茶顆粒有效成分對HA的清除實驗圖； 具體的解釋見以下的試驗研究。
金花茶顆粒以及有效成分的活性研究
一、 本發(fā)明的金花茶顆粒降血糖、降血脂和抗氧化活性的研究
本發(fā)明人經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，金花茶在有效降低血糖、血壓的同時，可有效調(diào)節(jié)血脂，改善因 高血壓而引起的各種不適癥狀；能降低血清中膽固醇和脂蛋白，促進胰島索分泌，增強免疫 力，防止動脈粥樣硬化。
試驗過程用高脂飼料喂養(yǎng)Wistar大鼠15d，造成大鼠高血脂癥模型，然后分別灌胃(ig) 給予本發(fā)明金花茶顆粒劑每天O. 8， 0. 4， 0. 2g/kg，以臨床降血脂藥物洛伐他汀(O. Olg /kg)為陽性對照.灌胃實驗第43天后取血清測定總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)、高密度脂 蛋白(HDL—C)和低密度脂蛋白(LDL—《).結果金花茶葉水提物高、中劑量組均能降低高血 脂癥模型大鼠血清中TC、 TG和LDL"C含量，效果與陽性對照藥洛伐他汀相當，與高脂 對照組比較，經(jīng)t檢驗，差異均有顯著性意義；高劑量組和洛伐他汀還能升高高血脂癥模型 大鼠血清中HDL—C含量.表明金花茶葉顆粒劑具有明顯的降血脂作用。
二、 本發(fā)明金花茶顆粒有效成分清除多種自由基的天然抗氧化物質(zhì)試驗研究 本發(fā)明人為了證實金花茶顆粒有效成分(皂甙)具有能夠清除自由基的作用；對，OH、
02\ N(V、和11202進行了清除試驗。 1材料與方法
1.1材料
1.1.1原料
本發(fā)明實施例1的噴霧干燥的金花茶皂甙細粉，由廣東海洋大學生物技術實驗室提供。
l丄2主要試劑-
無水乙醇、鹽酸萘乙二胺、對氨基苯磺酸、亞硝酸鈉、檸檬酸、硫酸亞鐵、鄰苯三酚、雙氧水、鄰二氮菲、鹽酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、3—羥甲基氨基甲烷、抗壞血酸、香 蘭素，人參皂甙標準品均為分析純。 1.1.3主要儀器與設備
UV-9100紫外可見分光光度計，HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋，BP210S電子分析天平，SHB-3 循環(huán)水式多用真空泵，RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，雷磁pHSJ-4A酸度計。
1.2實驗方法
1.2.1金花茶皂甙的制備
采用DiakmHP-lO大孔吸附樹脂對金花茶粗皂甙S進行分離純化，依次使用蒸餾水、30 %、 60%的乙醇溶液進行洗脫，獲得S!、 S2兩個主要組分，它們分別是由30%、 60%的乙 醇溶液洗脫而來，將S 、 Si 、 S2分別配制成皂甙濃度依次為1、 2、 3、 4、 5mg/mL的溶液， 對它們的抗氧化活性進行研究，并與同濃度的Vc做對比，皂甙含量采用香草醛一硫酸比色 法進行測定。
1.2.2羥基自由基(-OH)清除實驗
采用芬頓(Fenton)體系鄰二氮菲-F,氧化法進行測定，取1.5mL lmM的鄰二氮菲分 別放入試管中，加入4.5mL 100mMpH=7. 4的磷酸鹽緩沖溶液，混勻后加入lmL lmM FeS04 溶液，立即混勻，分別加入lmL—定濃度的試樣液，然后加入lmLO. 1%H202啟動反應，于 37'C保溫60min， 536nm處測定吸光度值。同時設置損傷管(加入1 mL蒸餾水代替樣品液， lmL0.1。/。H2O2啟動反應)和未損傷管(加入2mL蒸餾水代替樣品液和雙氧水)，以相同濃
度的VC作對比試驗，其中損傷管和未損管以磷酸鹽緩沖溶液調(diào)零，加藥管以同濃度不加H202
的加藥管調(diào)零。按下式計算羥基自由基的清除率
'OH的清除率(％) = (A加藥一A損傷/ A未損—A報傷)xl00% 1.2.3超氧陰離子(0廣)清除試驗
采用鄰苯三酚自氧化體系法進行測定，取4.5mLpH=8.2 Tris-HCl緩沖溶液，分別加入 lmL —定濃度的試樣液，25。C保溫20min后加入0.3ml lmM的鄰苯三酚啟動反應，5min后 測定325nm處的吸光度值A，同時設置對照(加入4.2 mL的蒸餾水代替樣品液)，對照管以 緩沖溶液調(diào)零，加藥管分別以相同濃度樣品液調(diào)零。按下式計算超氧陰離子的清除率
(V的清除率(％) = (A對照一A加藥/A對照)xl00% 1.2.4亞硝酸根離子(NOO的清除實驗
采用亞硝基體系磺胺比色法進行測定，取lmL試樣液于10mL比色管中，加入5jxg/mL 的NaN02標準溶液0.5mL，在37'C恒溫水浴中反應30min。取出后立即加入lmL0.4。/。對氨基苯磺酸溶液，混勻，靜置5min后加入0.5mL0.2。/。的鹽酸萘乙二胺溶液，加水至10mL刻 度，混勻，靜置15min，以不加NaN02和樣品溶液的試劑為空白，于538nm處測定吸光值。 通過NaN02標準曲線得到相應的NaN02含量。按下式計算N02—的清除率
N。2-的清除率=加入標準，02的量-聽》的細量x畫^ 2 加入標準NaNC^量
1.2.5清除過氧化氫(11202)實驗
取PH=7.4的磷酸鹽緩沖液4.5mL，加入0.05% H202 2mL后，取lmL試樣液，混合均 勻后在248nm處測得其吸光度為實驗中以不加試樣液的H202吸光度為Ao，以不加H202 的試樣溶液吸光度為A2，按下式計算其平均值。
It02的清除率(％) =Ao-(Al-A2)xl00
Ao
2結果與分析
2.1羥基自由基(*OH)清除實驗
-OH是造成脂質(zhì)過氧化、核酸斷裂、蛋白質(zhì)和多糖分解的重要活性氧自由基，是體內(nèi)最 活潑的活性氧。采利用Fenton體系檢測金花茶皂甙、Vc對OH的清除效果，實驗結果見說 明書附1。從圖1可知，金花茶皂甙和Vc對'OH均有消除作用，且呈劑量效應關系， 其中S,的清除效果與Vc相當，在濃度為4 5mg/mL之間達到半數(shù)清除率；當濃度大于 lmg/mL后，S、 S2的清除效果要明顯優(yōu)于Vc ，兩者在2 3mg/mL之間達到半數(shù)清除率。 當樣液濃度達到5mg/mL時，S、 Si、 Vc的清除率達到了 85%以上，而S2的清除率則達到 97.44%。筆者在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，在同樣的體系下僅加入濃度為lmg生藥/ml的金花茶 水提物，'OH的清除率即達到98.21X，這說明了金花茶葉中除了皂甙外還含有其他的抗氧 化活性更強的物質(zhì)。 2.2超氧陰離子(02'—)的清除試驗
鄰苯三酚在堿性條件下迅速自氧化，自氧化過程中產(chǎn)生o廣，(v—加速鄰苯三酚自氧化
速率，同時生成有色中間產(chǎn)物，在325nm有強烈的光吸收，由于自氧化速率依賴于02、的濃 度，清除02'—則抑制自氧化反應，阻止中間產(chǎn)物的積累，從而評價受試物清除CV的能力。 金花茶皂甙和Vc對02'—的清除效果見說明書附2，如圖2所示，在實驗所給定的范圍內(nèi)， S、 Si、 S2和Vc對0廣均具有一定的清除作用，但S、 S卜S2的清除效果明顯低于Vc，雖然 三者在濃度為3 4mg/mL之間達到半數(shù)清除率，但在實驗所給定的最大濃度5mg/mL時的清 除率僅為60%作用，其中S、 Si在濃度為lmg/mL時出現(xiàn)了清除率的負數(shù)，可能是由于它們 含有連羥基結構，02'—在加速體系中鄰苯三酚自氧化的同時，也加速它們的自氧化，從而產(chǎn)
13生更多的(V—，檢測呈負清除作用。但隨著濃度的增大，S、 S!抑制02'—作用要大于體系中 02'—的生成速度，清除率呈現(xiàn)正值。通過與前期研究的對比發(fā)現(xiàn)，在相同的體系下加入濃度 僅為lmg生藥/ml的金花茶水提物，02'—的清除率即達到了 76.92%,這再次表明金花茶的抗 氧化作用是由多種成分所協(xié)同產(chǎn)生的。 2.3亞硝酸根離子(N02—)的清除實驗
N-亞硝基化合物是一類具有亞硝基(N-NO)結構的有機物，大部分具有致癌性，可由其 前體亞硝酸鹽和胺類在體內(nèi)外合成，它們是前致癌物，在體內(nèi)需經(jīng)過代謝后才具有致癌性。 因此，研究能清除亞硝酸鹽、抑制亞硝胺合成的抗氧化劑是預防亞硝基化合物危害的有效途 徑。按1.2.4的方法檢測金花茶皂甙和Vc對N0,的清除作用，實驗結果見說明書附3。 由圖3可知，金花茶皂甙對亞硝酸鹽都具有一定的清除作用，但清除能力明顯不如Vc，在 實驗所設計的濃度下，S、 Sb S2對N(V的清除作用相當，且隨著濃度的增加其清除率均呈 現(xiàn)緩慢的上升趨勢，當濃度達到5mg/mL時剛達到半數(shù)清除率，而Vc的濃度為lmg/mL時， 清除率即可達到93.38%。
2.411202的清除實驗
H202添加入食品中可分解放出氧， 一方面起漂白、防腐和除臭等作用，另一方面可與 食品中的淀粉形成環(huán)氧化物而導致消化道癌癥的發(fā)生，因此研究能分解殘留在食品中的雙氧
水的抗氧化劑可有效的提高食品的安全性。采用1. 2. 5的方法研究金花茶皂甙和Vc對H202 的清除作用，結果如說明書附4，圖4所示，S、 Si、 S2對H202均具有一定的清除作用， 且在所設計的濃度范圍內(nèi)清除能力相當，清除率均在35%~52%之間，且濃度與其抑制率
并不呈明顯的線性關系，實驗未檢測出Vc對H202具有清除作用。
3結論
金花茶顆粒(金花茶皂甙)對'OH、 02—、 N02—、和H202均具有清除作用，雖然對(V、 N02— 的清除作用不及Vc，但對'OH和H202的清除效果卻明顯優(yōu)于Vc，尤其對'OH的清除作用 最為突出，實驗結果證明金花茶皂甙是一種能清除多種自由基的天然抗氧化物質(zhì)；實驗還發(fā) 現(xiàn)，不同的金花茶皂甙組分在相同的濃度及自由基體系下的清除作用亦有不同，這與它們的 結構密切有關，因此有關金花茶皂甙的進一步分離純化、結構分析還有待更深入的研究；此 外，通過與前期研究的對比發(fā)現(xiàn)，金花茶的抗氧化活性是由其皂甙類和其他活性成分協(xié)同作 用的結果。因此金花茶顆粒的抗氧化作用與其含有的皂甙類物質(zhì)密切相關，本發(fā)明的結果為 將金花茶開發(fā)成為抗癌、抗衰老以及心血管保護等方面的功能食品提供理論依據(jù)。
本發(fā)明金花茶顆粒的食用典型例證
14例l、楊XX，男，58歲，農(nóng)民，兩年前患有冠心病，出現(xiàn)心肌供血不足，頭暈、視力 模糊、肢體麻木等現(xiàn)象，渾身無力，對于一輩子辛勤勞動的他來說，無疑是喪失了勞動力， 給他的生活帶來了巨大的困難。服用本發(fā)明金花茶顆粒后，冠心病的病癥基本消失。
例2、李XX，女，72歲，退休干部?；加懈哐?，高血壓，同時經(jīng)常出現(xiàn)頭暈、麻木 等癥狀，更因重度的眩暈而無法出門，終日臥床，生活上形成障礙。其子代其購買了本發(fā)明 金花茶顆粒，服用后三個月，血脂下降到正常的指標，頭暈正在基本消失，已可以正常出門 了。
例3、林XX，男，70歲，患高血壓，上樓氣喘，易感到乏力疲勞，失眠多夢等病痛困 擾了他數(shù)年，讓林老苦不堪言。經(jīng)介紹服用本發(fā)明金花茶顆粒，僅三個月后這些癥狀都得到 了緩解，睡眠質(zhì)量特別號，老人精神煥發(fā)，紅光滿面。
例4、黃XX，男，48歲，公司經(jīng)理。常年的繁忙的業(yè)務使他身心疲憊，經(jīng)常性的胸口 發(fā)悶，呼吸困難，精神狀態(tài)差，經(jīng)醫(yī)生檢査確診為冠心病，免疫力低，伴有高血脂。在好朋 友的建議下，服用了本發(fā)明的金花茶顆粒，兩個月后，他的病情不但得到了控制，免疫能力 上升了，精神狀態(tài)也變好了。
權利要求
1、一種金花茶精制顆粒的生產(chǎn)方法，包括如下的工藝步驟(1)原料處理將采摘不超過24小時的金花茶新鮮葉片去除黃葉和雜質(zhì)，清洗、破碎成1cm左右的條狀碎葉片；(2)浸提金花茶新鮮葉碎片加入清水，采用超聲波浸提法或者超聲波浸提法結合酶解處理得到浸提液；(3)過濾將浸提液經(jīng)120目過濾機過濾后合并至不銹鋼儲罐備用；(4)納濾膜分離濃縮將過濾液采用加壓納濾法濃縮生產(chǎn)金花茶濃縮液，物料由原料桶經(jīng)加壓泵加壓，運行壓力為1.5Mpa，送入納濾膜組件，調(diào)節(jié)納濾膜出口閥門，使過濾壓力達到預定值，物料經(jīng)納濾膜過濾后分成濾過液和濃縮液，濾過液進入清液罐，濃縮液從組件流出后回到濃縮罐，如此不斷循環(huán)實現(xiàn)料液的濃縮和分離，濾過液流量1.75LPM，濃縮液流量43LPM；(5)金花茶皂甙純化將大孔吸附樹脂裝填到玻璃圓柱體內(nèi)，把納濾膜分離濃縮的溶液按每小時10-50升的速度經(jīng)過樹脂柱，然后用20-80％乙醇溶液洗脫，得到純化的金花茶皂甙，樹脂的再生用95％乙醇浸泡5-10小時，并進行乙醇回收；(6)混合干燥把木糖醇和糊精于60℃左右干燥2～3h后，粉碎過40～60目篩，將純化的金花茶皂甙加入木糖醇和糊精，金花茶皂甙與木糖醇的質(zhì)量比例一般為1∶2.5～6，糊精加入量為顆粒劑總質(zhì)量的3-10％，另外，還加入羧甲基纖維素鈉，質(zhì)量含量為全部物料的0.02-0.05％，然后干燥，包裝，得到產(chǎn)品。
2、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶精制顆粒的生產(chǎn)方法，其特征在于納濾膜組件為美 國GE公司、OSMONIC或KOCH公司的產(chǎn)品，型號是DK系列，有效面積2.5m2，材質(zhì)聚 酰胺；或者使用醋酸纖維膜，整套實驗裝置由預處理、納濾，清洗三部分組成。
3、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶精制顆粒的生產(chǎn)方法，其特征在于加入木糖醇、糊 精、羧甲基纖維素鈉，糊精加入量為顆粒劑總質(zhì)量的3-10%，羧甲基纖維素鈉含量為全部 物料的O. 02—0. 05%。
4、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶精制顆粒的生產(chǎn)方法，其特征在于混合干燥的過程 是熱風烘干，溫度為40°C~80°C，干燥所得的金花茶顆粒為淺黃色均勻顆粒，含水率為 3.1%。
5、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶精制顆粒的生產(chǎn)方法，其特征在于混合干燥的過程 是采用噴霧干燥的工藝進行干燥，噴霧干燥的進口風溫度為90—110'C;出口風溫度為70 一8(TC。
6、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶精制顆粒，其特征在于所述的超聲波浸提法是在金 花茶新鮮葉碎片與清水質(zhì)量比1: 10，浸提溫度60-80'C，浸提時間60-70分鐘，頻率25-80kHz條件下提取。
7、 根據(jù)權利要求1所述的金花茶精制顆粒，其特征在于所述的超聲波浸提法結合酶 解是將金花茶葉片移入超聲波提取罐，加5倍的純凈水進行攪拌，加熱到40'C，然后加入 料液量0. 05%的復合果漿酶，恒溫保持2小時，并不斷攪拌，酶解處理結束后迅速加熱至100 'C滅酶10分鐘，再添加鮮葉重量5倍純凈水，當漿液溫度達到60-7(TC左右時，通過超聲 波中藥提取機組對金花茶鮮葉中的皂甙活性成分進行振蕩提??；第一次超聲波振蕩結束后過 濾，殘渣再加入10倍的純凈水進行第二次超聲波振蕩提取，提取條件同第一次。
8、 如權利要求1的金花茶精制顆粒的生產(chǎn)方法得到的產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明是一種用金花茶葉制成的顆粒劑，其生產(chǎn)方法是從金花茶新鮮葉片提取的有效物質(zhì)，經(jīng)提取、濃縮、分離純化、干燥，得到金花茶皂甙，加入木糖醇或助劑，干燥，包裝，得到產(chǎn)品，本發(fā)明產(chǎn)品具有明顯的抗氧化、抗衰老、美容及提高機體免疫力等功能，適合亞健康人群食用，保健效果明顯。
文檔編號A61P37/04GK101558875SQ20091011404
公開日2009年10月21日 申請日期2009年5月8日 優(yōu)先權日2009年5月8日
發(fā)明者劉志新, 寧恩創(chuàng), 楊繼往, 秦小明 申請人:廣西桂人堂金花茶產(chǎn)業(yè)集團股份有限公司