專利名稱：：一種用于養(yǎng)血益氣、調(diào)經(jīng)溫寒的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于養(yǎng)血益氣、調(diào)經(jīng)溫寒的中藥組合物及其制備方法，屬于中藥制藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：由腎虛，氣血兩虧，經(jīng)血不調(diào)，經(jīng)期腹痛引起的功能性子宮出血、內(nèi)分泌性不孕及痛經(jīng)等婦科疾病，是嚴(yán)重危害婦女健康的常見病和多發(fā)病，該病有多種致病病因，病程長，身復(fù)發(fā)，目前尚無很好的根治性藥物。部頒標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》第11冊WS3-B-2076-96項(xiàng)下"八珍鹿胎膏"是一種純中藥制劑，該藥經(jīng)多年臨床應(yīng)用，在治療腎虛，氣血兩虧，經(jīng)血不調(diào)，經(jīng)期腹痛引起的功能性子宮出血、內(nèi)分泌性不孕及痛經(jīng)等婦科疾病方面有一定效果，但是由于膏劑的分計(jì)量不準(zhǔn)確，其不良嗅味患者難以接受，且易受污染，療效不穩(wěn)定，此制劑己經(jīng)被淘汰；八珍鹿胎顆?！兜貥?biāo)升國標(biāo)》婦科WS-11089(ZD-1089)-2002提供的工藝比較粗，有效成分的提取率低，得到的產(chǎn)品療效尚不夠理想，藥物穩(wěn)定性差，且其不良嗅味患者難以接受。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種工藝合理，生物利用度高，服用方便，療效更好的治療腎虛，氣血兩虧，經(jīng)血不調(diào)，經(jīng)期腹痛引起的功能性子宮出血、內(nèi)分泌性不孕及痛經(jīng)等婦科疾病的中藥組合物及其制備方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的按照重量組分計(jì)算，本發(fā)明中藥組合物主要是由如下重量配比的原料加工制成的膠囊劑，其中鹿胎450份、鹿角膠150份、熟地黃303份、人參38份、當(dāng)歸38份、川芎38份、白芍38份、白術(shù)38份、茯苓114份、甘草38份；鹿胎洗凈；切成小塊，加水煎煮3次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各加7倍量水煎lh，趁熱過濾，合并濾液，濃縮成清膏，減壓干燥，冷凍粉碎，過成80目細(xì)粉，備用。鹿角膠冷凍.粉碎，過80目細(xì)粉，取處方量細(xì)粉備用。將茯苓粉碎，過成100目篩，取l/3處方量細(xì)粉，6()0>輻照，備用。取人參粗粉、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)用70%乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍、4倍，回流時(shí)間依次為1.5h，1.5h。合并兩次濾液(藥渣另器保存)，減壓回收乙醇，溶液濃縮成清膏。取熟地黃、白芍、2/3茯苓、甘草與上渣混合，加水煎煮3次，加水量分別為9倍、9倍、8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h、1.5h、lh。合并三次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮，放涼，加入乙醇，使含醇量達(dá)60%，冷藏24h,過濾，濾液回收乙醇，所得溶液減壓濃縮，再與茯苓細(xì)粉、醇提清膏混勻，減壓干燥(6(TC)，粉碎并過成100目細(xì)粉，與鹿胎粉、鹿角膠粉混勻后用乙醇制軟材，20目篩制粒，5(TC以下干燥，14目整粒，裝膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。本發(fā)明膠囊劑最佳的制備方法為取原料鹿胎450份、鹿角膠150份、熟地黃303份、人參38份、當(dāng)歸38份、川芎38份、白芍38份、白術(shù)38份、茯苓114份、甘草38份；鹿胎洗凈，切成小塊，加水煎煮3次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各加7倍量水煎lh，趁熱過濾，合并濾液，濃縮至相對密度為1.321.35(60°C)的清膏，減壓干燥，冷凍粉碎，過成80目細(xì)粉，備用。鹿角膠冷凍粉碎，過80目細(xì)粉，取處方量細(xì)粉備用。將茯苓粉碎，過成100目篩，取l/3處方量細(xì)粉，6aCo輻照，備用。取人參粗粉、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)用70%乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍、4倍，回流時(shí)間依次為1.5h，1.5h。合并兩次濾液(藥渣另器保存)，減壓回收乙醇，溶液濃縮至相對密度為1.321.35(6(TC)的清膏。取熟地黃、白芍、2/3茯苓、甘草與上渣混合，加水煎煮3次，加水量分別為9倍、9倍、8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h、1.5h、lh。合并三次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對密度1.15(60'C)，放涼，加入乙醇，使含醇量達(dá)60%,冷藏24h，過濾，濾液回收乙醇，所得溶液減壓濃縮至相對密度1.321.35(60°C),再與茯苓細(xì)粉、醇提清膏混勻，減壓干燥(6(TC),粉碎并過成IOO目細(xì)粉，與鹿胎粉、鹿角膠粉混勻后用乙醇制軟材，20目篩制粒，5(TC以下干燥，14目整粒，裝膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。本發(fā)明膠囊劑為中藥復(fù)方制劑，本方系以四君子湯(人參、白術(shù)、茯苓、甘草)四物湯(當(dāng)歸、川芎、白芍、熟地黃)合為八珍湯又加鹿胎、鹿角膠二味藥材而成，以人參、白術(shù)、茯苓、甘草益氣健脾，當(dāng)歸、白芍、川芎、熟地黃補(bǔ)血養(yǎng)血，而為氣血雙補(bǔ)之良方。鹿胎甘咸、性溫，能益腎壯陽、補(bǔ)虛生精，治虛損勞瘀、精血不足、婦女虛寒，崩漏帶下。鹿角膠亦擅溫腎填精，合而用之，共奏氣血雙補(bǔ)、溫養(yǎng)肝腎、養(yǎng)血益氣，調(diào)經(jīng)濕寒之功；用于腎虛，氣血兩虧，經(jīng)血不調(diào)，經(jīng)期腹痛。有文獻(xiàn)報(bào)道用其治療不孕癥及再生障礙性貧血均有較好療效，其毒副作用小，適于長期用藥。人參、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)中的人參皂苷、內(nèi)酯、生物堿等成分醇溶性好，用70%乙醇回流提取，其渣與其余藥材共煎，使水溶性成分被提出，這些成分具有調(diào)節(jié)免疫、鎮(zhèn)痛、調(diào)經(jīng)、強(qiáng)壯機(jī)體等作用，使其藥物有效成分得到充分發(fā)揮。熟地黃、白芍、茯苳、甘草中的梓醇、多糖、氨基酸、苷類、有機(jī)酸等水溶性好，采用水煎煮法提取，但一些水溶性非活性成分，如粗蛋白、淀粉、粘液質(zhì)等被煎出，為減少服用量用醇沉法除去；藥物的粘度降低，所得制劑不易吸潮，穩(wěn)定性好。本發(fā)明將現(xiàn)有技術(shù)通過提取有效成分，除去其中大量非活性成分，其臨床效果顯著提高，藥物穩(wěn)定性更高，安全性更好，由于鹿胎和鹿角膠藥材存在腥味大，口感差問題，特別是鹿胎經(jīng)煎煮后，其不良嗅味患者難以接受。本發(fā)明采用膠囊劑，掩蓋了藥物的不良嗅味，患者易于接受；膠囊劑的內(nèi)容物為干燥粉粒，不但增加了藥物的穩(wěn)定性，同時(shí)在制備過程中不受粘合劑與壓力影響，崩解釋藥迅速，生物利用度高，膠囊劑服用、攜帶方便，可為臨床用藥增添一個(gè)新劑型、新品種。在本發(fā)明中，我們對原有工藝進(jìn)行了較大改進(jìn)，最大限度的保留了其有效成份，我們對工藝做了大量的實(shí)驗(yàn)研究一、鹿胎提取與粉碎①取鹿胎洗凈，剃除膜與脂肪，切成小塊，分成兩份。方法l:釆用原八珍鹿胎膏制法(加水煎煮三次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各7倍量水煎lh);方法2:加水煎煮二次，每次8倍量水煎2h。各次煎煮液趁熱過濾，合并濾液，濃縮成稠膏，減壓干燥，測定，結(jié)果見表l。表l鹿胎提取結(jié)果比較<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>結(jié)果表明，鹿胎水煎3次的干膏量及氨基酸含量均高于水煎2次，因此可以采用原制法提取鹿胎。②出粉率考察稱取干膏100g,共3份，分別粉碎并過成80目細(xì)粉，稱重，計(jì)算出粉率，結(jié)果見表2。表2鹿胎干膏出粉結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>鹿胎干膏平均出粉率為92.7%，制劑中以凈粉投料。二、乙醇回流提取人參等藥材按處方比例稱取人參12.5g、當(dāng)歸12.5g、川芎12.5g、白術(shù)12.5g(共50g)，9份，以加溶劑倍數(shù)、乙醇濃度、回流時(shí)間、回流次數(shù)的不同，設(shè)計(jì)為4因素3水平，并以干膏量及人參皂甙Rgi+Re為指標(biāo)，采用L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果見表3，表4，表5。表3因素水平表水平因素溶劑倍數(shù)(倍)乙醇濃度(％)回流時(shí)間(h)回流次數(shù)13600.5i24701.023801.53表4正交試驗(yàn)結(jié)果[U(34)]《撒溶劑倍數(shù)(倍)乙醇濃度回流時(shí)間(%)(h)回流次數(shù)干膏量(g)人參皂苷含量(mg/100g藥材)試驗(yàn)號\ABCD1231(3)1(3)1(3)1(60)2(70)3(80)1(0.5)2(1.0)3(1.5)1(1)2(2)3(3)6.513.014.592.08166.05170.95462(4)2(4)2(4)1(60)2(70)3(80)2(1.0)3(1.5)1(0.5)3(3)1(1)2(2)13.513.012.7173.04168.43196.567893(5)3(5)3(5)1(60)2(70)3(80)3(1.5)1(0.5)2(1.0)2(2)3(3)1(1)13.714.59.5202.93191.75147.96干K！K2K334.039,237.733.740.536.733.736.041.229.039.442.5同量KjK2K311.313.112.611.213.512.211.236.041.29.713.114.2產(chǎn)110.9R1.82.32.54.5人參&K2K3429.08538.03542.64468.05526.23515.47480.39487.05542.31408.47565.54535.74皂苷含K2K3143.03179.34180.88156.02175.41171.82160.13162.35180.77136.16188.51178.58Ki+K2+K3=:1509.75曰.里R37.8519.3920.6452.35表5方差分析表(SAS)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結(jié)果分析由表4，表5看出，影響干膏量多少的主次因素排序?yàn)榛亓鞔螖?shù)>回流時(shí)間〉乙醇濃度〉溶劑倍數(shù)，搭配為A2B2C3D3;影響人參皂苷含量高低的主次因素排序?yàn)榛亓鞔螖?shù)>溶劑倍數(shù)>回流時(shí)間>乙醇濃度，搭配為A3B2C3D2,二者BC一致，考慮含量的重要性，并結(jié)合試驗(yàn)號4及生產(chǎn)實(shí)際，選擇最佳搭配為A3B2C3D2，即藥材用70%乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍，4倍，回流時(shí)間依次為1.5h,1.5h。驗(yàn)證試驗(yàn)在正交試驗(yàn)結(jié)果中，干膏量與人參皂苷搭配組合不完全一致，經(jīng)參照試驗(yàn)號4并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際確定了以上最佳搭配，此搭配究竟是否為最優(yōu)提取條件，需要進(jìn)一步驗(yàn)證，方法按處方量比例稱取人參12.5g、當(dāng)歸12.5g、川芎12.5g、白術(shù)12.5g，共3份，用上述最優(yōu)條件進(jìn)行提取，濾液經(jīng)濃縮，干燥，測定，結(jié)果見表6。表6驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果干膏中人參皂苷含量人參皂苷含量編號藥材量(g)干膏量(g)，(mg'g")(mg/100g藥材)15013.41.8756201.042，5013.81.8353202.6235014.01.8423206.34人參皂苷含量測定方法照高效液相色譜法(中華人民共和國藥典2000年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.05%磷酸溶液(99:400)為流動(dòng)相，檢測波長為203nm。理論板數(shù)按人參皂苷Re峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rgl對照品12.5mg、人參皂苷Re對照品10mg，加甲醇分別制成每lml含人參皂苷Rgi0.4mg、人參皂苷Re0.25mg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品粉末(過四號篩)2g,精密稱定，置索氏提取器中，加氯仿40ml,加熱回流3小時(shí)，棄去氯仿液，藥渣揮去氯仿，連同濾紙筒移入具塞錐形瓶中，精密加入水飽和的正丁醇50ml，密塞，放置過夜，超聲處理(功率250w，頻率50KHz)30分鐘，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。測定法分別精密吸取上述兩種對照品溶液各10ul與供試品溶液1020ul，注入液相色譜儀，測定，即得。驗(yàn)證結(jié)果表明，3批樣品中人參皂苷含量相當(dāng)于或略高于正交表中最高含量，可以認(rèn)為由試驗(yàn)所確定的最佳提取條件可行。三、熟地黃、白芍等藥材水煎醇沉試驗(yàn)(1)水煎藥材按處方比例稱取熟地黃20g，白芍15g，茯苓5g，甘草2.5g與醇提藥渣(人參2.5g，當(dāng)歸2.5g，川芎2.5g，白術(shù)2.5g)混合，共40g，9份。以加水倍數(shù)、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)的不同，設(shè)計(jì)為3因素3水平，采用L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)，以干膏量和芍藥苷含量為指標(biāo)，結(jié)果見表7，表8，表9。表7因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表8正交試驗(yàn)結(jié)果[L9(34)]是素、列數(shù)加水倍數(shù)(倍)煎煮時(shí)間(h)回流次數(shù)干膏量(g)芍藥苷含量試驗(yàn)號\EFG(%藥材)1231(8)1(8)1(8)1(1.0)2(1.5)3(2.0)1(1)2(2)3(3)8.013.015.00.3240.5110.486462(9)2(9)2(9)1(1.0)2(1.5)3(2.0)2(2)3(3)1(1)10.514.59.50.5580.6300.396893(10)3(10)3(10)1(1.0)2(1.5)3(2.0)3(3)1(1)2(2)14.28.514.00.5850.3780.603干K！K2K336.034.536.732.736.038.526.037.543.7膏量&K2K312.011.512.210.912.012.88.712.514.6IQ+K2+K3=107.2R0.71.95.9芍藥苷含且里K2K31.3211.5841.5661.4671.5191.485l扁1.6721.701K2K30.4400.5280.5220.4890.5060.4950.3660.5570.567K!+K2+K3=4.471R0.0880.0170.201表9差分析表(SAS)項(xiàng)目SoureDFAnovaSSMeanSquareFValuePr〉F干E20.84220.42110.560.6418罔F25.64222.82113.740.2110量G253.775526.887835.640.0273芍藥E20.01440.00724.740.1744苷含F(xiàn)20.00050細(xì)20.150.8673旦里G20.07710扁525.370.0379結(jié)果分析由表8表9出，影響干膏量多少的主次因素排序?yàn)榧逯蟠螖?shù)>煎煮時(shí)間〉加水倍數(shù)，搭配為E3F3G3;影響芍藥苷含量的主次因素排序?yàn)榧逯蟠螖?shù)>加水倍數(shù)〉煎煮時(shí)間，搭配為E2F2G3?？紤]到含量的重要性，并結(jié)合5號結(jié)果，確定最佳搭配為E2F2G3，即藥材加水煎煮3次，加水量分別為9倍，9倍，8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h，L5h，lh。驗(yàn)證試驗(yàn)稱取人參2.5g，當(dāng)歸2.5g，川芎2.5g，白術(shù)2.5g，2份，按2.3.4最優(yōu)條件提取后，藥渣備用；另取熟地黃20g，白芍2,5g，茯苓5g，甘草2.5g，分別與上渣混合，按三(1)最優(yōu)條件提取，濃縮，干燥，檢測，結(jié)果見表IO<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>結(jié)果分析按所確定的最佳水煎條件制備三批樣品，其中芍藥苷含量比正交表中最高含量略高或相當(dāng)，表明此最佳條件可行。(2)醇沉試驗(yàn)藥材水煎過程中，除可以浸出其中活性水溶性成分外，同時(shí)也使大量非活性成分，如粗蛋白、淀粉、粘液質(zhì)等浸出，必然增大服用劑量。因此，在保證有效成分提取的前提下，應(yīng)對水煎溶液進(jìn)行醇沉。方法按處方比例稱取人參22.5g，當(dāng)歸22.5g，川芎22.5g，白術(shù)22.5g，按2.3.4最優(yōu)條件提取后，藥渣備用。另取熟地黃180g，白芍22.5g，茯苳45g，甘草22.5g，與上渣混合(藥材為360g)，以三(1)最優(yōu)條件提取，合并濾液，濃縮約360ml，等分為3份。第1份濃縮至相對密度1.15(60'C),第2份濃縮至相對密度1.20(60°C)，第3份濃縮至相對密度1.25(60°C)，再分別等分后(每份藥材為40g),各加入乙醇使含醇量達(dá)一定濃度，冷藏，濾過，回收乙醇，濃縮，干燥，測定。因素水平表及結(jié)果見表ll,表12,表13。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>芍藥苷含量測定法照高效液相色譜法(中華人民共和國藥典2000年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.05md/L，磷酸二氫甲-36%醋酸-異丙醇(67:173:4:4)為流動(dòng)相；檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時(shí)的芍藥苷對照品5mg，置25ml容量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，精密吸取2ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得(每ml中含芍藥苷0.04mg)。供試品溶液的制備取供試品，研細(xì)，混勻，取1.0g，精密稱定，加入甲醇50ml，超聲處理30分鐘，放冷，濾過，藥渣加甲醇洗滌3次，每次3ml，合并洗滌液，水浴蒸干，殘?jiān)?0n/。甲醇溶解并移入50ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5ul，分別注入液相色譜儀，測定，即得。結(jié)果分析有表12，表13看出，影響出膏量的主次因素為相對密度>醇沉濃度>冷藏時(shí)間，搭配為H3l3J3(以干膏量少為好)，影響芍藥苷含量的主次因素為醇沉濃度>相對密度>冷藏時(shí)間，搭配為H山J2。干膏量與含量之間無一致之處，參照試驗(yàn)號5,4，并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，選擇最優(yōu)搭配為H山J2，即藥液濃縮至相對密度為1.15(60°C),含醇達(dá)60%，冷藏24h。主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^對本發(fā)明膠囊劑、八珍鹿胎膏及八珍鹿胎顆粒的補(bǔ)血作用，對子宮平滑肌收縮作用，鎮(zhèn)痛作用以及活血化瘀作用等藥理實(shí)驗(yàn)研究，將本發(fā)明膠囊劑、八珍鹿胎膏及八珍鹿胎顆粒進(jìn)行對比，觀察其藥理作用的強(qiáng)弱，為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。試驗(yàn)方法本發(fā)明膠囊劑、八珍鹿胎膏(按部頒標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》第11冊WS3-B-2076-96項(xiàng)下"八珍鹿胎膏"處方工藝制備)及八珍鹿胎顆粒(市場購買)對失血性血虛小鼠的補(bǔ)血作用；對大鼠正常子宮以及使用催產(chǎn)素后子宮平滑肌收縮功能的影響；對冰醋酸致小鼠扭體的鎮(zhèn)痛作用；對血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明膠囊劑、八珍鹿胎膏及八珍鹿胎顆粒能明顯增加失血小鼠血中紅細(xì)胞(RBC)數(shù)目和血紅蛋白(Hb)含量；能抑制大鼠正常子宮收縮頻率、幅度和活動(dòng)力；亦能明顯降低催產(chǎn)素對子宮的興奮作用；對冰醋酸致小鼠疼痛有明顯的對抗作用；能明顯改善血瘀證大鼠血液流變性，有活血化瘀作用。結(jié)論本發(fā)明膠囊劑與八珍鹿胎膏及八珍鹿胎顆粒相比，在相同生藥劑量(3.0g原生藥/kg)下的補(bǔ)血作用，對子宮平滑肌收縮作用，鎮(zhèn)痛作用以及活血化瘀作用等藥理實(shí)驗(yàn)顯示出較強(qiáng)的趨勢。一、對失血性血虛小鼠的補(bǔ)血作用實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼有，體重1822g。2、藥物八珍鹿胎膏l(xiāng)g藥膏相當(dāng)于0.74g原生藥；八珍鹿胎顆粒lg藥粉相當(dāng)于0.295g原生藥；本發(fā)明膠囊劑大、中、小三個(gè)劑量組lg藥粉相當(dāng)于原生藥3.11g。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法昆明小鼠72只，雌雄各半，體重1822g，隨機(jī)分成6組，每組12只。實(shí)驗(yàn)第ld，各組小鼠眼眶取血0.5ml，并檢測紅細(xì)胞(RBC)和血紅蛋白(Hb)。失血24h后再取血測RBC和Hb，并隨即灌胃給藥，對照組灌胃同體積的生理鹽水;本發(fā)明膠囊劑組分別灌胃給藥3.0、1.5、0.75g生藥/kg;八珍鹿胎膏組灌胃給藥3.Og生藥/kg;八珍鹿胎顆粒組灌胃給藥3.Og生藥/kg。連續(xù)給藥5d，每天一次，末次給藥后lh采血測定RBC和Hb。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表l、2'表1本發(fā)明膠囊劑對失血性血虛小鼠RBC的影響(X±s)動(dòng)物數(shù)劑量rbc(xio'7l)組別--(n)(g原生藥/kg)失血前給藥前給藥后對照組12'-7.34±0.714.62±0.77**5.02±0.68八珍鹿胎膏組123.07.20±0.844.37±0.54**6.18±0.48;八珍鹿胎顆粒組123.07.25±0.624.54±0.72**6.20士0.37'抑++本發(fā)明膠囊劑組123.0121.5120.75與失血前比較**代0.01，與給藥前比較抑代O.Ol，*代0.05與對照組比較++風(fēng)01，+線05;與八珍鹿胎膏劑、顆粒劑比較，0.057.33±0.737.31±0.637.42±0.854.65±0.79—4.31±0.82神4.56±0.66"6.59±0.39**'6.38±0.45"5.78±0.85**表2本發(fā)明膠囊劑對失血性血虛小鼠Hb的影響(X±s)組別動(dòng)物數(shù)劑量Hb(X10'7L)(n)(g原生藥/kg)失血前給藥前給藥后對照組12-116.3±7.4264,5±12.02"75.4±10.11"八珍鹿胎膏組123.0114.3±6.6760.1±7.17"102.2±6.60**—八珍鹿胎顆粒組123.0115.0±8.1465.0±9.91神102.8±5.38抑—本發(fā)明膠囊劑組123.0115.4±6.9065.l士ll.25神107.4±5.02抑—△121.5114.7±8.7060.4±13.71**104.1±7.01冊+'120.75117.6±8.9166.4±12.62"98.3±9.52助—與失血前比較**代0.01;與給藥前比較'*代0.01，8代0.05與對照組比較++代0.01;與八珍鹿胎膏劑、顆粒劑比較A/<0.05結(jié)果表明小鼠失血后RBC和Hb均顯著降低，同失血前比較均P〈0.01，說明模型制造成功。給藥5d后，各組RBC和Hb均明顯增加，但給藥各組的增加顯著高于對照組(代0.05或代O.Ol)。給藥各組在相同生藥劑量下，本發(fā)明膠囊劑組對RBC和Hb有較大的增強(qiáng)，統(tǒng)汁學(xué)上有顯著性意義(代0.05)。說明本發(fā)明膠囊劑有明顯的抗小鼠血虛作用，其作用較膏劑和顆粒劑強(qiáng)(代0.05)。二、本發(fā)明膠囊劑對離體子宮平滑肌的作用實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物SD雌性未孕大白鼠，體重250300g。2、藥物八珍鹿胎膏l(xiāng)g藥膏相當(dāng)于0.74g原生藥；八珍鹿胎顆粒lg藥粉相當(dāng)于0.295g原生藥；本發(fā)明膠囊劑大、小兩個(gè)劑量組lg藥粉相當(dāng)于原生藥3.11g。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法SD雌性未孕大白鼠40只，體重250300g，隨機(jī)分成5組，每組8只。即對照組；本發(fā)明膠囊劑大、小劑量組；八珍鹿胎膏組和八珍鹿胎顆粒組。動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)前48h灌胃給于0.4mg/100g己烯雌酚。實(shí)驗(yàn)時(shí)頸椎脫臼處死動(dòng)物，剖腹，取出子宮，放入盛有樂氏液的玻璃皿中修理，小心清除殘留的脂肪組織，剪取2cm長，用針線結(jié)扎兩端，一端固定于麥?zhǔn)瞎茉〔鄣耐夤艿男°^上，另一端固定和換能器相連，用平衡記錄儀記錄子宮收縮曲線。恒溫水浴保持溫度37土0.5'C，麥?zhǔn)瞎軆?nèi)盛50ml樂氏液，充氧(7090個(gè)氣泡/min)。調(diào)節(jié)儀器，定標(biāo)(負(fù)荷lg)。標(biāo)本穩(wěn)定30rain后，記錄正常收縮曲線并將不同濃度受試藥物(15%、7.5%本發(fā)明膠囊劑組；15%八珍鹿胎膏組和15VV珍鹿胎顆粒組)水溶液(靜置12h)的上清液調(diào)pH值后，取0.5ml滴入麥?zhǔn)瞎軆?nèi)，觀察給藥前后子宮收縮的頻率、幅度和子宮活動(dòng)力(頻率X幅度)的變化。.1.對正常狀態(tài)下離體子宮平滑肌的作用由表2、表3、表4可見，對照組子宮收縮頻率在30min內(nèi)變化無明顯差異，八珍鹿胎膏、八珍鹿胎顆粒均可減慢子宮收縮頻率、降低其幅度和活動(dòng)力，20rain內(nèi)作用明顯(p<0.05)。本發(fā)明膠囊劑大、小劑量組均可顯著減慢頻率、降低幅度和活動(dòng)力，同八珍鹿胎膏、八珍鹿胎顆粒組比較無明顯差異，但從其變化趨勢可見，在相同的生藥劑量下，以本發(fā)明膠囊劑對子宮收縮幅度和活動(dòng)力影響比八珍鹿胎膏、八珍鹿胎顆粒的作用強(qiáng)。表2對正常狀態(tài)下離體子宮平滑肌收縮頻率的作用(X±s,n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表3對正常狀態(tài)下離體子宮平滑肌收縮幅度的影響(X±s,n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>與對照組比較*代0.05，**代0.012.對催產(chǎn)素作用下離體子宮平滑肌的作用另取大鼠40只，按上述方法分組及制備離體子宮標(biāo)本。標(biāo)本穩(wěn)定后，記錄正常收縮曲線(為藥前)，然后加入催產(chǎn)素(浴槽濃度為2X10—2單位/ml)，作用10rain后再分別加入八珍鹿胎膏、顆粒、膠囊等受試藥的上清液，記錄給約后IO、20min子宮收縮。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5、表6、表7表5對正常狀態(tài)下離體于宮平滑肌收縮活力的影響(X土s,n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>(6a2土lR3)(6L1士2L6)八珍鹿胎81.57.4±L111.4±1,9.2±L9膏組(5d肚35^)八珍鹿胎81.57.2±'L17.8±1.0顆粒組(6a4土忍6)(19.2±17.8)w八珍鹿胎81.59.0±1.39.0±1.5膠囊組(5a9土30t2)(R7±21.1)w80.75&2士1.0ll.吐l.輛9.7±1.19.4±1.0(5&6±19.9)與藥前比較**代0.01，與催產(chǎn)素組比較助代O.Ol，"代0.05表6對催產(chǎn)素作用下離體于宮平滑肌收縮幅度的作用(X±S,n=8)組別動(dòng)物數(shù)(n〉浴漕濃度(X10—3g生藥/ml)子宮平滑肌收縮幅度(g)及變化百分率a)離催產(chǎn)素后(min)藥后(min)101020對照組80.2u/ml5^31士a546.82±0.67林6.15±0l83**(19,&1±13.46)a513土17.3G)八珍鹿胎81.56l87土1-31林5.27土L27499±a68膏組(3a54士ia33)(—231士5^5)"八珍鹿胎81.55<50±(1357.23±(195**580±L795>50±L98顆粒組(3L25土1L70)(427±^85)K八珍鹿胎81.57.86±a,膠囊組(3a35士37.40)(444±21.98)w80.755w76土0l98&44±CL63(3L02土1456)ai8±9L54)w與藥前比較*代0.05，科代0.01;與催產(chǎn)素組比較**代0.01表7對催產(chǎn)素作用下離體子宮平滑肌收縮活力的作用a±s，n=8)組別動(dòng)物數(shù)(n)浴漕濃度(X10—3g生藥/ral)子宮平滑肌收縮活力(g)及變化百分率a)催產(chǎn)素后(min)藥后(min)^則-101020對照組8(X2u/ml32_3±1&7561.81±313457.73士3SLQ9(77.44±41.SO八珍鹿胎81.5必9土1L3385.04±16l454**54.34±17.28必.89±1&59膏組(1(E86士必86〉八珍鹿胎81.552L96土9.12顆粒組(105.54±必65)(ia76±2493)tt(7.93士27.26"八珍鹿胎81.531，9±2a3737,41土2a11膠囊組a01,56士必69)(15.79士&37〉*(&83士23,85)1880.754i96士7.405a63±l&8551,33±2L78Cl(E54士3a29)(2Z45土忍32)w(la91土3ZO)w與藥前比較'*代0.01，與催產(chǎn)素組比較，<0.01結(jié)果表明催產(chǎn)素能明顯增大大鼠子宮平滑肌收縮頻率、幅度和活動(dòng)力，八珍鹿胎膏劑、顆粒劑和膠囊劑各劑量組均可對抗催產(chǎn)素對大鼠子宮平滑肌的興奮作用，且在相同生藥劑量下，膠囊劑作用有強(qiáng)于其他各劑型的趨勢。說明本發(fā)明膠囊劑比八珍鹿胎膏、八珍鹿胎顆粒對催產(chǎn)素作用下離體子宮平滑肌的作用強(qiáng)。三、止痛試驗(yàn)(扭體法)實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄兼有，體重1822g。2、藥物八珍鹿胎膏l(xiāng)g藥膏相當(dāng)于0.74g原生藥；八珍鹿胎顆粒lg藥粉相當(dāng)于0.295g原生藥；本發(fā)明膠囊劑大、中、小兩個(gè)劑量組lg藥粉相當(dāng)于原生藥3.11g。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法昆明小鼠60只，雌雄各半，體重1822g，隨機(jī)分成6組，每組10只。對照組灌胃同體積的生理鹽水；本發(fā)明膠囊劑組分別灌胃給藥3.0、1.5、0.75g生藥/kg;八珍鹿胎膏組灌胃給藥3.0g生藥/kg;八珍鹿胎顆粒組灌胃給藥3.0g生藥/kg。每天一次，連續(xù)給藥3d，給藥量0.2ml/10g，末次給藥后lh，各鼠分別腹腔注射0.6%醋酸0.2ml/只，注射后立即記錄15min內(nèi)小鼠扭體數(shù)，比較給藥組和對照組扭體數(shù)的差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表8。表8本發(fā)明膠囊劑的鎮(zhèn)痛作用(X±S,n=10)組別動(dòng)物數(shù)(n)劑量(g原生藥/kg)扭體次數(shù)(15aiiii內(nèi))對照組10—49.8土10l5八珍鹿胎膏組103.036.8士ia4"八珍鹿胎顆粒組103.0本發(fā)明膠囊劑組103.0101.5100.7547.1±142與對照組比較*風(fēng)05,**代0.01與八珍鹿胎膏組和八珍鹿胎顆粒組比較"代O.05結(jié)果表明本發(fā)明膠囊劑大、中劑量組以及八珍鹿胎膏組和八珍鹿胎顆粒組均能顯著的降低冰醋酸致小鼠扭體次數(shù)(P〈0.05或p<0.01)，在相同生藥劑量(3.0g原生藥/kg)下，以膠囊組作用為優(yōu)。本發(fā)明膠囊劑組比八珍鹿胎膏組和八珍鹿胎顆粒組的鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)。四、本發(fā)明膠囊劑對血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物SD大白鼠，雌雄兼有，體重250300g。2、藥物八珍鹿胎膏l(xiāng)g藥膏相當(dāng)于0.74g原生藥；八珍鹿胎顆粒lg藥粉相當(dāng)于0.295g原生藥；本發(fā)明膠囊劑大、中、小三個(gè)劑量組lg藥粉相當(dāng)于原生藥3.11g。藥物在實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置，灌胃給藥。實(shí)驗(yàn)方法SD大白鼠70只，雌雄各半，體重250300g，隨機(jī)分成7組，每組10只。對照組、血瘀模型組、八珍鹿胎膏組、八珍鹿胎顆粒組、本發(fā)明膠囊劑大、中、小劑量組。分別灌胃同體積的生理鹽水；本發(fā)明膠囊劑組分別灌胃給藥3.0、1.5、0.75g生藥/kg;八珍鹿胎膏組灌胃給藥3.0g生藥/kg;八珍鹿胎顆粒組灌胃給藥3.0g生藥/kg。每天一次，連續(xù)給藥14d,末次給藥后lh，除對照組外，其余7組均復(fù)制血瘀模型即大鼠皮下注射鹽酸腎上腺素(Ad)2次，劑量均為8ug/kg，2次間隔4h，在第1次注射Ad2h后，將大鼠放入冰水內(nèi)5min，處置后并開始禁食。上述各組動(dòng)物均于次日眼眶采血，取2ml注入肝素抗凝管(抗凝劑量為31.25單位/ml，肝素用NS配置)，搖勻備用。取l.5ml注入枸櫞酸鈉抗凝管(抗凝劑量枸櫞酸鈉用NS配成38%的溶液，取150ul加入硅化試管中)，搖勻備用。取lml肝素抗凝血加入粘度計(jì)轉(zhuǎn)筒中，樣品溫度在恒溫水浴中保持37土0.5'C轉(zhuǎn)換高、低切開關(guān)，記錄高、低切粘度標(biāo)度值(高切200/s，低切40/s)，將其輸入計(jì)算機(jī)，得出全血粘度值，結(jié)果見表9。取底端平整的毛細(xì)離心管，插入剛混勻的肝素抗凝血中，待血進(jìn)入毛細(xì)管內(nèi)2/3處，封住上端口，下端插入橡皮泥中，垂直豎立，并記時(shí)。lh后，用血沉壓積板讀出血沉值，結(jié)果見表9。將測定完血沉的毛細(xì)離心管，用3F—3型高速微量離心機(jī)離心5min,轉(zhuǎn)速12000rpm,再用血沉壓積板讀出紅細(xì)胞壓積值，結(jié)果見表10。再將測定壓積的毛細(xì)管在溫度為56±0.5'C的水浴箱中水浴5min后，用同樣離心機(jī)離心5min,轉(zhuǎn)速12000rpm，取出后用讀數(shù)顯微鏡測定毛細(xì)管內(nèi)血漿長度和纖維蛋白原長度，按下式計(jì)算纖維蛋白原含量，結(jié)果見表IO。纖維蛋白原含量(g/L)4千維蛋白原長度X100/血漿長度將做完全血粘度的血吸回抗凝管，用80-2型離心機(jī)離心血漿，轉(zhuǎn)速3000rpm，時(shí)間15min。取lml血漿，按測定全血粘度的方法測定血漿粘度，結(jié)果見表9。用加樣器吸取lml枸櫞酸鈉抗凝血加入容量為5ml的長頸圓球形玻璃瓶中，將其放在血小板粘附儀轉(zhuǎn)盤上，以5rpm的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min后取下，取30y1旋轉(zhuǎn)前和旋轉(zhuǎn)后的抗凝血放入1%的草酸銨稀釋劑中，測定旋轉(zhuǎn)前后血中的血小板數(shù)，然后按下式計(jì)算血小板粘附率，結(jié)果見表10。血小板粘附率(％)=(旋轉(zhuǎn)前血小板數(shù)-旋轉(zhuǎn)后血小板數(shù))X100/旋轉(zhuǎn)前血小板數(shù)表9本發(fā)明膠囊劑對血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響(X土s)幼則動(dòng)物數(shù)劑量("g生全血高切粘度全血低切粘度血槳粘度還原粘度血沉迅力'J(n)藥/kg)(rapa.s)(即a.s)(mpa.s)(mpEus)正常對照組10一3.04±0.237.55±1.622.36±0.154.66±0.520.94±0.26模型對照組10_5.69±1.15"13.75±2.92**4.12士0.76"11.76士2.8t"2.38±0.74*"八珍鹿胎顆微103.03.91±0.52鵬8.58±1.58b2.94土0.34"7.65±1.09*1.65±0.60"八珍鹿胎膏組103.04.47±1.11"9.30±0.94"3.31±0.74"9.02±3.271.68±0.62"本發(fā)明膠囊劑組103.03.88士0.51"8.34±1.76"2.92士0.34"7.20±1.41"1.61士0.31"101.55.14±0.529.58±1.84"3.50士0.35"9.站±1.921.64±0.50'100.755.66±0.459.87±1.88"3.92±0.339.98±1.641.66±0.55'與正常對照組比較"風(fēng)01;與模型對照組比較*代0.05，抑代O.Ol表IO本發(fā)明膠囊劑對血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響(X±s)如幼l動(dòng)物數(shù)劑量紅細(xì)fiffi積纖維蛋白原血小板數(shù)血小板粘附率(n)(g生藥/kg)(%)(mg/U(X10Vl))正常對照組1043.75±2.082.38±0.38234±5621.90±7.04模型對照組10-39.88士1.023.47±0.78"247±6537.00土5.78"八珍劇臺顆粒組103.040.15±3.162.79±0.45"232±4627.43±4.15"八珍鹿胎膏組103.039.76±2.522.81士0.51"224±5528.70±5.06*本發(fā)明，劑組103.040.22±3.482.74±0.39"240±4822.28±4.75"*101.540.00±3.022.91土0.24"249±6526.54±6.02100.7539.97±2.853.01±0.26236±6229.33±5.35*與正常對照組比較"代0.01;與模型對照組比較#代0.05,**代0.01與八珍鹿胎膏組、八珍鹿胎顆粒組比較+代0.05結(jié)果表明(1)模型組與正常對照組比較，全血高、低切粘度、血槳粘度、還原粘度、血沉、纖維蛋白原、血小板粘附率均顯著升高(P<0.01)，說明模型復(fù)制成功。(2)與模型組比較，八珍鹿胎膏組、八珍鹿胎顆粒組以及本發(fā)明膠囊劑組均可使上述指標(biāo)明顯降低(P<0.01或P<0.05)，并有一定的劑量依賴性。(3)與八珍鹿胎膏組、胎顆粒組比較，本發(fā)明膠囊劑在相同的劑量下，降低上述指標(biāo)的作用更明顯。說明本發(fā)明膠囊劑組比八珍鹿胎膏組、八珍鹿胎顆粒組的活血化瘀作用強(qiáng)。毒理實(shí)驗(yàn)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明將本發(fā)明膠囊劑最大濃度、最大容積對昆明種小白鼠灌胃給藥，在24h內(nèi)連續(xù)給藥3次，每次間隔4h，累積藥物總量達(dá)75g生藥/kg，折合233.25g生藥/kg/日，相當(dāng)于臨床擬用量的1250倍。給藥后7d內(nèi)，小鼠活動(dòng)、進(jìn)食、排泄均正常，生長良好，毛色光亮，其平均體重均隨試驗(yàn)時(shí)間的延長而增加。第8d處死后解剖每只小鼠肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腦、胸腺、子宮、胃、腸等均未發(fā)現(xiàn)顏色及形態(tài)異常，未能測出LD5。。表明本膠囊無急性毒性反應(yīng)。長期毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明膠囊劑分別對SD大白鼠進(jìn)行了兩種性別三個(gè)劑量周期3個(gè)月灌胃給藥的長期毒性試驗(yàn)，最大劑量為9.0g/kg/日(折合生藥27.99g/kg/日)，約相當(dāng)于臨床人每日擬用量的150倍。給藥后逐日觀察動(dòng)物的一般狀況，每周稱體重l次，并按體重調(diào)整給藥容量。于給藥3個(gè)月后每組處死12只動(dòng)物，另8只動(dòng)物做停藥二周的恢復(fù)期試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果，在給藥3個(gè)月及二周恢復(fù)期后，本發(fā)明膠囊劑對動(dòng)物一般狀況、血液學(xué)、血液生化學(xué)、尿液常規(guī)及心電圖等均無明顯影響，系統(tǒng)解剖、臟器系數(shù)及組織病理學(xué)檢査也未發(fā)現(xiàn)異常改變。故在大白鼠3個(gè)月灌胃給藥的長期毒性試驗(yàn)中，未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)和延遲性毒性反應(yīng)?？梢?，本發(fā)明膠囊劑無毒性反應(yīng)，長期用藥安全可靠。臨床觀察及療效在本發(fā)明所述中藥組合物的研制過程中，為客觀評價(jià)該藥治療腎虛，氣血兩虧，經(jīng)血不調(diào)，經(jīng)期腹痛的臨床療效及其對人體的安全性，申請人根據(jù)2002年的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》進(jìn)行了臨床試驗(yàn)(臨床批件號為2004L04970),期間共臨床治療并觀察病例240例。一、病例的選擇納入試驗(yàn)病例者均為符合西醫(yī)月經(jīng)稀少診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)氣血兩虧、腎虛辨證標(biāo)準(zhǔn)，患者年齡在1845歲。二、服藥方式口服該中藥膠囊劑，每日3次，每次3粒，連續(xù)服用3個(gè)月，每個(gè)月服用24天，療程中停用其它治療該病癥的藥物及方法。三、觀察指標(biāo)1、安全性觀測a)可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)癥狀。b)—般體檢項(xiàng)目包括體溫、脈搏、呼吸、血壓等。C)血、尿、便常規(guī)，心電圖，肝功能(ALT、AST)、腎功能(BUN、Cr)。2、療效性觀測a)中醫(yī)癥狀、舌、脈的變化觀察。b)月經(jīng)稀少量的檢查。c)盆腔超聲波檢查。d)陰道細(xì)胞學(xué)檢査。四、療效評定標(biāo)準(zhǔn)主要是根據(jù)經(jīng)血不調(diào)、經(jīng)期腹痛、中醫(yī)證候的改善情況，參照1989年《婦產(chǎn)科疾病診斷與鑒別診斷》及2002年《全國高等中醫(yī)藥院校規(guī)劃教材中醫(yī)婦科學(xué)》制定。1、疾病(經(jīng)血不調(diào))療效判定標(biāo)準(zhǔn)(1)痊愈治療后月經(jīng)周期、經(jīng)量、經(jīng)期恢復(fù)正常。(2)顯效治療后月經(jīng)周期較前縮短或經(jīng)量較前增加(3)有效治療后月經(jīng)周期較前縮短或經(jīng)量較前增加(4)無效治療后月經(jīng)周期較前縮短或經(jīng)量較前增加2、經(jīng)期腹痛療效判定標(biāo)準(zhǔn)(1)痊愈治療后經(jīng)期腹痛消失。(2)顯效治療后經(jīng)期腹痛時(shí)間縮短，疼痛減輕，l項(xiàng)以上積分值降低兩個(gè)等級。(3)有效治療后經(jīng)期腹痛時(shí)間縮短，疼痛減輕，1項(xiàng)以上積分值降低一個(gè)等級。(4)無效治療后經(jīng)期腹痛無改善，積分值未降低。3、中醫(yī)證候療效評定標(biāo)準(zhǔn)(1)痊愈治療后各癥狀消失，證候積分值減少>95%。(2)顯效治療后各癥狀明顯減輕，證候積分值減少》70%，<95%。，l項(xiàng)以上積分值降低兩個(gè)等級。，1項(xiàng)以上積分值降低一個(gè)等級。，積分值未降低。(3)有效治療后各癥狀有所減輕，證候積分值減少》30%，<70%。(4)無效治療后各癥狀無改善或有加重，證候積分值減少<30%。4、安全性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)一級安全，無任何不良反應(yīng)。二級比較安全，如有不良反應(yīng)，不需做任何處理，可繼續(xù)給藥。三級有安全性問題，有中等程度不良反應(yīng)，做處理后可繼續(xù)給藥。四級因不良反應(yīng)中止試驗(yàn)。五、治療結(jié)果以上試驗(yàn)組(本發(fā)明組)120例，剔除7例；試驗(yàn)組113例經(jīng)臨床治療后，用于經(jīng)血不調(diào)觀察愈顯率為48.25%，總有效率為83.33%;用于經(jīng)期腹痛觀察愈顯率為61.4%，總有效率為85.96%;用于中醫(yī)證候療效觀察的愈顯率為45.62%,總有效率為90.35%,觀察過程中未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。本發(fā)明具體實(shí)施例方式實(shí)施例l、取原料鹿胎450份、鹿角膠150份、熟地黃303份、人參38份、當(dāng)歸38份、川芎38份、白芍38份、白術(shù)38份、茯苓114份、甘草38份；鹿胎洗凈，切成小塊，加水煎煮3次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各加7倍量水煎lh，趁熱過濾，合并濾液，濃縮成清膏，減壓干燥，冷凍粉碎，過成80目細(xì)粉，備用。鹿角膠冷凍粉碎，過80目細(xì)粉，取處方量細(xì)粉備用。將茯苓粉碎，過成100目篩，取l/3處方量細(xì)粉，6()0)輻照，備用。取人參粗粉、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)用70%乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍、4倍，回流時(shí)間依次為1.5h，1.5h。合并兩次濾液(藥渣另器保存)，減壓回收乙醇，溶液濃縮成清膏。取熟地黃、白芍、2/3茯苓、甘草與上渣混合，加水煎煮3次，加水量分別為9倍、9倍、8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h、1.5h、lh。合并三次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮，放涼，加入乙醇，使含醇量達(dá)60%，冷藏24h,過濾，濾液回收乙醇，所得溶液減壓濃縮，再與茯苓細(xì)粉、醇提清膏混勻，減壓干燥(6(TC)，粉碎并過成100目細(xì)粉，與鹿胎粉、鹿角膠粉混勻后用乙醇制軟材，20目篩制粒，5(TC以下干燥，14目整粒，裝膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。實(shí)施例2、取原料鹿胎450份、鹿角膠150份、熟地黃303份、人參38份、當(dāng)歸38份、川芎38份、白芍38份、白術(shù)38份、茯苓114份、甘草38份；鹿胎洗凈，切成小塊，加水煎煮3次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各加7倍量水煎lh，趁熱過濾，合并濾液，濃縮至相對密度為1.321.35(60°C)的清膏，減壓干燥，冷凍粉碎，過成80目細(xì)粉，備用。鹿角膠冷凍粉碎，過80目細(xì)粉，取處方量細(xì)粉備用。將茯苓粉碎，過成IOO目篩，取l/3處方量細(xì)粉，6()0)輻照，備用。取人參粗粉、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)用70%乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍、4倍，回流時(shí)間依次為1.5h，1.5h。合并兩次濾液(藥渣另器保存)，減壓回收乙醇，溶液濃縮至相對密度為1.321.35(60°C)的清膏。取熟地黃、白芍、2/3茯苓、甘草與上渣混合，加水煎煮3次，加水量分別為9倍、9倍、8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h、1.5h、lh。合并三次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對密度1.15(60'C)，放涼，加入乙醇，使含醇量達(dá)60%，冷藏24h，過濾，濾液回收乙醇，所得溶液減壓濃縮至相對密度1.321.35(60°C)，再與茯苓細(xì)粉、醇提清膏混勻，減壓干燥(60°C)，粉碎并過成100目細(xì)粉，與鹿胎粉、鹿角膠粉混勻后用乙醇制軟材，20目篩制粒，5(TC以下干燥，14目整粒，裝膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。權(quán)利要求1、一種用于養(yǎng)血益氣、調(diào)經(jīng)溫寒的中藥組合物，其特征在于它是通過以下方法制成的膠囊劑稱取原料鹿胎450g、鹿角膠150g、熟地黃303g、人參38g、當(dāng)歸38g、川芎38g、白芍38g、白術(shù)38g、茯苓114g、甘草38g；鹿胎洗凈，切成小塊，加水煎煮3次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各加7倍量水煎1h，趁熱過濾，合并濾液，濃縮成清膏，減壓干燥，冷凍粉碎，過成80目細(xì)粉，備用。鹿角膠冷凍粉碎，過80目細(xì)粉，取處方量細(xì)粉備用。將茯苓粉碎，過成100目篩，取1/3處方量細(xì)粉，60Co輻照，備用。取人參粗粉、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)用70％乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍、4倍，回流時(shí)間依次為1.5h，1.5h。合并兩次濾液(藥渣另器保存)，減壓回收乙醇，溶液濃縮成清膏。取熟地黃、白芍、2/3茯苓、甘草與上渣混合，加水煎煮3次，加水量分別為9倍、9倍、8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h、1.5h、1h。合并三次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮，放涼，加入乙醇，使含醇量達(dá)60％，冷藏24h，過濾，濾液回收乙醇，所得溶液減壓濃縮，再與茯苓細(xì)粉、醇提清膏混勻，減壓干燥(60℃)，粉碎并過成100目細(xì)粉，與鹿胎粉、鹿角膠粉混勻后用乙醇制軟材，20目篩制粒，50℃以下干燥，14目整粒，裝膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種用于養(yǎng)血益氣、調(diào)經(jīng)溫寒的中藥組合物的制備方法,其特征在于稱取原料鹿胎450g、鹿角膠150g、熟地黃303g、人參38g、當(dāng)歸38g、川芎38g、白芍38g、白術(shù)38g、茯苓114g、甘草38g;鹿胎洗凈，切成小塊，加水煎煮3次，第一次加8倍量水煎2h，第二、三次各加7倍量水煎lh，趁熱過濾，合并濾液，濃縮至相對密度為1.321.35(60°C)的清膏，減壓干燥，冷凍粉碎，過成80目細(xì)粉，備用。鹿角膠冷凍粉碎，過80目細(xì)粉，取處方量細(xì)粉備用。將茯苓粉碎，過成100目篩，取l/3處方量細(xì)粉，6()0)輻照，備用。取人參粗粉、當(dāng)歸、川芎、白術(shù)用70%乙醇回流提取2次，加溶劑倍數(shù)分別為5倍、4倍，回流時(shí)間依次為L5h,1.5h。合并兩次濾液(藥渣另器保存)，減壓回收乙醇，溶液濃縮至相對密度為1.321.35(6(TC)的清膏。取熟地黃、白芍、2/3茯苓、甘草與上渣混合，加水煎煮3次，加水量分別為9倍、9倍、8倍，煎煮時(shí)間依次為1.5h、1.5h、lh。合并三次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對密度1.15(60°C)，放涼，加入乙醇，使含醇量達(dá)60%,冷藏24h,過濾，濾液回收乙醇，所得溶液減壓濃縮至相對密度1.321.35(6CTC)，再與茯苳細(xì)粉、醇提清膏混勻，減壓干燥(6(TC)，粉碎并過成IOO目細(xì)粉，與鹿胎粉、鹿角膠粉混勻后用乙醇制軟材，20目篩制粒，50'C以下干燥，14目整粒，裝膠囊，即得本發(fā)明膠囊劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種用于養(yǎng)血益氣、調(diào)經(jīng)溫寒的中藥組合物的制備方法，該中藥組合物是由鹿胎、鹿角膠、熟地黃、人參、當(dāng)歸、川芎、白芍、白術(shù)、茯苓、甘草制備而成的膠囊劑；該藥具有極好的養(yǎng)血益氣，調(diào)經(jīng)溫寒之功效，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明在治療方面較原有制劑有更顯著的效果，生產(chǎn)工藝精制，起效迅速，為臨床增加了新的可選擇劑型，克服了現(xiàn)有制劑的不良嗅味，提高了患者的順應(yīng)性。文檔編號A61K9/48GK101564465SQ200910147700公開日2009年10月28日申請日期2009年6月12日優(yōu)先權(quán)日2009年6月12日發(fā)明者川羅申請人:陜西東泰制藥有限公司