專利名稱：：含有抗體的雞卵蛋白對豬疫(疾)病的防治暨注射液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：在生豬的疫(疾)病發(fā)生發(fā)展過程中，存在著傳染和自身免疫的兩個(gè)過程。目前病原微生物的種類在不斷增加；致病能力在不斷增強(qiáng)，這是不可回避的事實(shí)；如何提高機(jī)體的自身免疫力，設(shè)法解決少用藥乃至不用藥(杜絕肉食食品中的藥殘，合乎環(huán)保要求)，是當(dāng)務(wù)之機(jī)。為此，我自1966年開始對含有生豬疫病抗體的雞卵蛋白，通過特殊的工藝制成雞卵蛋白(抗原)注射液。在仔豬出生5日齡(120小時(shí))和22日齡時(shí)兩次深肌注射，會產(chǎn)生高滴度的抗體，對提高豬只自身的抗病能力(自身免疫力)具有顯著作用；如果加入相應(yīng)的藥物可形成蛋白復(fù)合物，可以使小劑量的藥物而發(fā)揮巨大的治療作用。從而解決了豬疫病多，死淘率高，飼養(yǎng)成本高，難飼養(yǎng)這一
技術(shù)領(lǐng)域：
的難題，降低了養(yǎng)豬成本。二、立項(xiàng)背景我國是世界上第一養(yǎng)豬大國，也是第一豬肉消費(fèi)大國，隨著人民生活水平的不斷提高，截至目前，人均豬肉消費(fèi)已超過世界平均水平，民眾對提高豬肉及其產(chǎn)品的數(shù)量和質(zhì)量的要求越來越強(qiáng)烈。然而，自2007年以來，我國的養(yǎng)豬業(yè)卻從南向北發(fā)生了輪番式的生豬高致熱傳染病，給我國正在蓬勃發(fā)展的養(yǎng)豬業(yè)帶來了滅頂之災(zāi)，受生豬高致熱傳染病影響，僅2007年一年，生豬存欄量與上年同比已減少50%，一度造成豬肉供求緊張。豬傳染病呈混合感染趨勢，給防治工作帶來巨大困難，雖然經(jīng)過廣大畜牧工作者的艱苦努力，使豬高熱病得到了基本控制，但是，仍沒有找到一個(gè)能徹底解決的方案，以高熱病等為主的豬傳染病對養(yǎng)豬業(yè)的危害依然存在，隨時(shí)都有可能給我們的養(yǎng)豬業(yè)再次帶來巨大損失。同時(shí)，由于疾病發(fā)病率增加，使用大量藥物預(yù)防和治療，豬肉及其產(chǎn)品的藥物殘留問題日趨嚴(yán)重，危害著廣大人民的身體健康。當(dāng)前，建立有效的動(dòng)物疾病防控體系，切實(shí)控制動(dòng)物疾病的發(fā)生與發(fā)展，減少人畜共患疾病的發(fā)生，保護(hù)人們的身體健康是我們廣大畜牧工作者的緊迫任務(wù)，同時(shí)也是世界性的難題。為此，我們開展了雞卵蛋白免疫技術(shù)在豬病防治領(lǐng)域的研究與應(yīng)用課題。雞卵蛋白免疫技術(shù)，通過試驗(yàn)研究制定出最合理的綜合免疫程序和常見疾病的最佳治療方案，該項(xiàng)研究開辟了免疫學(xué)應(yīng)用的新領(lǐng)域。雞卵蛋白免疫技術(shù)的應(yīng)用改變了傳統(tǒng)的疾病治療方案，改善了傳統(tǒng)免疫程序，提高了疾病預(yù)防治療的效果，克服了傳統(tǒng)疾病治療的藥物殘留問題，提高了豬肉肉食食品的品質(zhì)，解決了傳統(tǒng)免疫的免疫應(yīng)激反應(yīng)和部分疾病保護(hù)率偏低問題(例如傳統(tǒng)疫苗預(yù)防豬藍(lán)耳病的保護(hù)率不足70%，應(yīng)用雞卵蛋白免疫技術(shù)保護(hù)率可達(dá)90%以上)，具有科學(xué)性、經(jīng)濟(jì)性、實(shí)用性、可行性的特點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容用有機(jī)雞卵蛋白(含f丐176.65mg/kg、鐵16.47mg/kg、鋅10.44mg/kg、石西0.25mg/kg、卵磷脂2210.5mg/kg、蛋白質(zhì)52%、干物質(zhì)25%、膽固醇342mg/g)對出生5日齡和22日齡兩次深肌注射后所產(chǎn)生的非特異性免疫對增強(qiáng)豬只自身抗病能力有顯著作用，可杜絕在仔豬出生3日(72小時(shí))，必須補(bǔ)鐵和補(bǔ)硒的環(huán)節(jié)。2、用豬病活疫苗、蘭耳病活疫苗、偽狂犬活疫苗、園環(huán)病毒活疫苗，以及埃希氏大腸桿菌疫苗對有機(jī)雞進(jìn)行超劑量(致死量)進(jìn)行免疫接種，使之產(chǎn)生對以上疫病的抗體，(合乎所需抗體滴度)再于仔豬5日齡和22日齡時(shí)分別深肌注射。很快形成特異性免疫和非特異性免疫，對于防控以上傳染病具有明顯的作用。3、對于已發(fā)生呼吸道和消化道細(xì)菌性疾病和病毒性傳染病的豬只，采取應(yīng)用帶有疫病抗體的雞卵蛋白加入適當(dāng)?shù)闹委熕幬?因病而異)制成蛋白復(fù)合物，可以實(shí)現(xiàn)小劑量發(fā)揮大作用。四、附圖1.雞卵蛋白(卵黃素)作用途徑及原理五、具體實(shí)施方案根據(jù)研究內(nèi)容需要—、用有機(jī)雞(特培)的雞卵蛋白對豬只自身免疫力的能力提高方面的研究——為基礎(chǔ)研究。二、對傳染病(蘭耳病)防控作用的研究——為應(yīng)用研究。三、用有機(jī)雞卵蛋白加相應(yīng)的藥物備制成蛋白復(fù)合物對防治豬病的研究——為特異性研究。5、實(shí)驗(yàn)過程1組雞卵蛋白(抗原)能提高豬只自身免疫能力試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>試驗(yàn)方法對照組按常規(guī)飼養(yǎng)管理、防疫、消毒。試驗(yàn)組在常規(guī)飼養(yǎng)管理、防疫、消毒的基礎(chǔ)上，對每頭試驗(yàn)豬只于5日齡時(shí)，肌肉注射1.lml，雞卵蛋白，又于22日齡時(shí)再次深肌注射1.3ml，雞卵蛋白。試驗(yàn)結(jié)果從上表結(jié)果看差異顯著。2組蘭耳病試驗(yàn)組(1)藍(lán)耳病陰性豬用提前接種豬藍(lán)耳病疫苗的母雞40天后所產(chǎn)雞卵蛋白試驗(yàn)組。<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>試驗(yàn)方法及結(jié)果①選擇沒有出現(xiàn)疫病癥狀，相對比較活潑、健壯的兩窩豬，藍(lán)耳病檢驗(yàn)陰性，隨機(jī)分成兩組進(jìn)行試驗(yàn)。②對照組進(jìn)行正常的常規(guī)飼養(yǎng)管理。③試驗(yàn)組每頭頸部肌肉注射經(jīng)接種豬藍(lán)耳病疫苗的母雞40天后所產(chǎn)雞蛋的蛋白1.2ml/頭注射。試驗(yàn)結(jié)果通過數(shù)據(jù)顯示差異顯著。(2)藍(lán)耳病陽性豬用提前接種豬藍(lán)耳病疫苗的母雞40天后所產(chǎn)雞卵蛋白試驗(yàn)組<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>試驗(yàn)方法及結(jié)果①選擇具有明顯藍(lán)耳病癥狀(喜臥扎堆、呼吸急促等)，藍(lán)耳病檢驗(yàn)陽性的兩窩豬，隨機(jī)分成兩組進(jìn)行試驗(yàn)。②對照組采取常規(guī)的對癥治療，以鎮(zhèn)痛、消炎、補(bǔ)液為治療原則。③試驗(yàn)組每頭頸部肌肉注射1.3ml接種豬藍(lán)耳病疫苗的母雞40天后所產(chǎn)雞蛋的蛋白和5ml安乃近注射液5ml柴胡注射液。注射后5頭豬仍然有明顯癥狀，采取消炎、補(bǔ)液等常規(guī)治療。結(jié)果通過試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，效果理想。(3)經(jīng)三次藍(lán)耳病加強(qiáng)免疫，30天后的健康豬給予人為自然感染的試驗(yàn)情況<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>試驗(yàn)方法和結(jié)果①在產(chǎn)房選擇同時(shí)出生的5窩健康豬，從中再選擇體重、營養(yǎng)狀況、胎次品種等各項(xiàng)指標(biāo)相近，并且具有一定代表性的兩窩豬做為試驗(yàn)用豬，以窩為單位分別為對照組和試驗(yàn)組。②對照組不做雞蛋白注射，只做常規(guī)免疫。③試驗(yàn)組在5日齡時(shí)，用普通雞蛋白1.2ml-硫酸慶大霉素2ml作為初免。在22日齡時(shí)，用經(jīng)過超量藍(lán)耳病疫苗免疫的健康母雞40天后產(chǎn)下的雞卵蛋白1.3ml+頭孢噻肟鈉0.05g肌肉注射，作為二免。在30日齡時(shí)，用帶有PRRSV的豬內(nèi)臟連續(xù)7天飼喂健康母雞50天后產(chǎn)下的雞蛋制作的雞卵蛋白1.5ml+頭孢噻肟鈉0.05g肌肉注射，作為三免。在仔豬72日齡時(shí)(由產(chǎn)房轉(zhuǎn)入育成，正值試驗(yàn)組三免后40天經(jīng)霉聯(lián)免疫吸附法檢測豬只抗體滴度最強(qiáng)時(shí))對兩組進(jìn)行PRRS自然感染，其方法是用確診PRRS豬的腎、脾、肝等內(nèi)臟放入兩組豬欄內(nèi)自然感染，對照組14天開始陸續(xù)出現(xiàn)8頭發(fā)病豬，經(jīng)過5天的對癥治療后，死5頭，1頭成為僵豬，藥費(fèi)80.00元。而試驗(yàn)組只有2頭發(fā)病1頭死亡，并且臨床表現(xiàn)癥狀相對較輕，經(jīng)2天對癥治療后痊愈，用藥金額僅為18.50元。通過試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，達(dá)到預(yù)想結(jié)果。3組用有機(jī)雞卵蛋白加入藥品，制成蛋白復(fù)合物試驗(yàn)組，試驗(yàn)結(jié)果，差異顯著。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注l.藥物費(fèi)用金額:2.合計(jì)支出=飼朱指全組非試驗(yàn)用藥的藥費(fèi)開支總額。l支出+藥物費(fèi)用+死淘成本+試驗(yàn)藥品支出。試驗(yàn)方法略試驗(yàn)結(jié)果確實(shí)體現(xiàn)了小劑量的藥物發(fā)揮了大作用。6、作用依據(jù)(1)雞卵蛋白抗原作用原理高等脊椎動(dòng)物具有巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、抗體、補(bǔ)體等組成的體液免疫系統(tǒng)和細(xì)胞免疫系統(tǒng)。當(dāng)雞卵蛋白作為抗原注入機(jī)體后，既可產(chǎn)生體液免疫又可產(chǎn)生細(xì)胞免疫，發(fā)揮保護(hù)機(jī)體的特異性反應(yīng)。①雞蛋白具備抗原要求的三大要求。②異源性，豬與雞生物種系差異很大，具有很好的抗原性(種系相差越遠(yuǎn)，抗原物質(zhì)的抗原性越強(qiáng))。③分子量大，分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜。(只有大于10000才有可能具有抗原性)分子結(jié)構(gòu)越復(fù)雜其抗原性(也叫抗原價(jià)VA-ICNCEOFANTIGEN)越強(qiáng)，雞卵蛋白分子量為42000，是結(jié)構(gòu)復(fù)雜的蛋白物質(zhì)，其表面有特殊的化學(xué)基團(tuán)——抗原決定簇，雞蛋白的抗原決定簇有10個(gè)，僅次于甲狀腺球蛋白40個(gè)和牛血清蛋白18個(gè)。④雞蛋白是高分子膠體物，經(jīng)注射后在體內(nèi)停留時(shí)間較長，有利于可持續(xù)地剌激有機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。(2)雞蛋白作用途徑雞卵蛋白經(jīng)深層肌肉注射后，可產(chǎn)生較強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫其作用途徑附圖1所示。(3)關(guān)于雞卵蛋白抗原注射后抗體產(chǎn)生的時(shí)間及最佳接種次數(shù)(略)。(4)關(guān)于雞蛋白的注射劑量(略)。(5)關(guān)于雞蛋白抗原和慶大霉素、鹽酸林可霉素聯(lián)合應(yīng)用的問題(略)。(6)頭孢噻肟鈉的作用原理(略)。(7)雞蛋白+抗生素的作用原理(略)。[OOSS](8)藍(lán)耳病發(fā)病初期的治療方案(略)。(9)關(guān)于免疫雞卵蛋白應(yīng)用問題(略)。(10)雞卵蛋白免疫技術(shù)綜合應(yīng)用方案(略)。7、各種參數(shù)雞卵蛋白對生豬防治作用的四種方案的試驗(yàn)結(jié)果匯總<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>說明以上是幾個(gè)有代表性的試驗(yàn)。還有5個(gè)不同角度的試驗(yàn)。在審批時(shí)，根據(jù)需要可調(diào)閱《試驗(yàn)論文》。權(quán)利要求用予防生豬疫病的疫苗，接種有機(jī)的產(chǎn)蛋母雞，再用該母雞產(chǎn)下的雞蛋中的雞卵白。2.利用雞卵白(適量)為不同日令的豬只進(jìn)行兩次深部肌肉注射。注射后，形成非特異免疫，對被注豬只形成高滴度的抗體，可增加豬只本身的免疫功能——抗體。為不發(fā)病和少發(fā)病創(chuàng)造條件。3.帶有豬疫病抗體的雞卵白，加入適當(dāng)?shù)牧蛩釕c大霉素、環(huán)丙沙星注射液、氟苯尼考注射液，形成的蛋白復(fù)合物，對治療消化道疾病(黃痢、白痢、增生性腸炎等)呼吸道疾病(胸膜性肺炎，喘氣病、巴氏桿菌病等)，心血管系統(tǒng)(心肌炎、副豬嗜血桿菌病)、肝臟硬化及器官變性，具有極強(qiáng)的治療作用。4.對"雞卵蛋白(抗原)注射液"產(chǎn)品的生產(chǎn)。全文摘要含有抗體的雞卵蛋白對豬疫(疾)病的防治暨注射液的研發(fā)成果能解決我國生豬疫病防治上的難題，并且能添補(bǔ)實(shí)現(xiàn)綠色肉食食品
技術(shù)領(lǐng)域：
的空白；技術(shù)問題是設(shè)法提高豬只先天和后天免疫，是防控豬病的必由之路；技術(shù)要點(diǎn)是通過多種豬病疫苗接種有機(jī)雞所產(chǎn)生多種豬病抗體，再通過雞卵蛋白(卵黃素)盲傳給豬。使豬產(chǎn)生應(yīng)對多種傳染病的抗體，可避免豬只20多次的接種帶來的應(yīng)激和不利。用途是由于雞卵蛋白刺激而形成的先天固有性免疫和盲傳的后天獲得性免疫的雙重作用就可實(shí)現(xiàn)豬只不發(fā)病、不用藥、增重快、死淘低而達(dá)到理想的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。文檔編號A61P37/04GK101708330SQ20091016257公開日2010年5月19日申請日期2009年8月4日優(yōu)先權(quán)日2009年8月4日發(fā)明者胡海玉申請人:胡海玉